CN110585306A - 一种治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法，所述药物组合包括以下组分：桂枝、肉桂、茯苓、丹皮、桃仁、白芍、川牛膝、红花、炮山甲片、当归、水蛭、柴胡、沉香片、王不留行、甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、乳香、生黄芪、生山药和麝香，具有疗效显著、作用明确、多靶向作用、无副作用的优点。

Description

一种治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法。

背景技术

良性前列腺肥大、前列腺瘤样增生，临床上以尿频尿急和进行性排尿困难等症状为主要表现，其它症状不明显，是影响老年男性生活质量及健康状况的常见病。据报道，我国60岁以上男性良性前列腺增生症总发生率为33-65％。随着我国人口老龄化日益突出，对良性前列腺增生症治疗的相关研究已成为国家关注的重点。

现代医学对本病的发病机制尚未完全阐明，目前尚缺乏特殊的治疗方法，而中医药在治疗本病方面具有独特优势，研究中药治疗具有重大意义。

良性前列腺增生病因病机分析：

1.此病多发于中老年人群，且发病率与年龄的增长具有正相关性。《内经》指出，男子40岁之后脏腑功能由盛转衰，首先其冲者为肾。故本病发病之一个重要病机或称基本病机为肾气亏虚，气化不行。

2.肺主一身之气且为水之上源，行水而通调水道。肺气郁闭则水道不通，故肺气郁闭亦可为本病发病机制之一，况肺肾乃金水相生之关系，治本病时当顾及肺。

3.《诸病源候论》记载：小便不通，由膀胱与肾俱有热故也。肾主水，膀胱为津液之府，此二经为表里。湿热蕴结在下焦可致膀胱气化开阖失司而发病。

4.瘀阻为重要的致病因素。或败精或以槁血，阻塞水道而不通也。

由此可见良性前列腺增生症的病因病机繁多，本病的发生发展是一个动态演变的过程，涉及多脏腑，多系统。目前对前列腺增生的中医药研究多将其归属于“癃闭”范畴，但其本质为：以癃闭表现为外在特征，而本质则为内积癓。而积癓者之形成有三个因素：一个是寒气，一个是痰饮，一个是淤血，这三个因素凝固在一起形成积块。

目前由于缺乏公认的中医药防治前列腺增生的临床指南，缺乏统一的中医诊断、分型及疗效评定标准，现有中医药治疗此病还存在诸多不足之处。

现有的中医药治疗多按“癃闭”进行分型，将其分为膀胱湿热证，浊瘀阻络证，肺热壅盛证，阳虚不化证等证型辩证论治且多以湿热及血瘀、肾虚证为多，治疗有效亦有不效。核心问题是机械的把本病划分为不同证型，其实各证型之间是相互关联的，有的是互为因果关系的，没有把握核心病机，病的本质。因此提出以下治疗方案：

良性前列腺增生症的本质是肺实体增生，属于中医的“积癓”范畴，致病因素为寒(阳虚、肾虚)、痰饮、瘀血互结。外在表现为尿道阻塞，在中医属于“癃闭”范畴。治本则治“积癓”，同时治标治“癃闭”。本病主要涉及脏腑有肾、脾、肝，特别是从肝论治非常重要，一是病位在尿道属肝之所主宗筋之所在，二是肝主气机，主疏泄，主藏血。故本病治当：温阳散寒、活血祛瘀，化痰饮，除肝理气调气机，利尿。

中国专利申请CN106389991A公开了一种男科病的脐疗药物组合物及其制作方法和用途，其原料包含八十多味中草药，配方中部分草药为5～15份枸杞子、20～40份菟丝子、5～15份熟地黄、5～15份干山药、5～15份白茯苓、5～15份当归、5～15份川芎、5～15份肉苁蓉、5～15份何首乌、5～15份金银花、5～15份连翘、5～15份知母、5～15份黄柏、5～15份赤白芍、20～40份丹皮、5～15份蒲黄、20～40份荔枝核、5～15份贯众、20～40份橘核、12～28份海藻、12～28份昆布、5～15份延胡索、5～15份桃仁、20～40份厚朴、3～7份木通、20～40份枳实、12～28份沙苑子、8～22份怀牛膝、12～28份益母草、20～40份熟大黄、20～40份金毛狗脊、8～22份骨碎补、5～15份五灵脂、5～15份红花、5～15份土鳖虫、12～28份穿山龙、20～40份王不留行、12～28份藿香、20～40份巴戟天等等，这些中草药相互协同，能起到对例如前列腺炎、不育症等男科病较为明显的治疗效果，但是该专利申请的配方中组分较多，作用机理尚不明确，不利于治疗过程中的准确应用。

因此，利用开发一种能解决上述技术问题的治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法是非常必要的。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种疗效显著、作用明确、多靶向作用、无副作用的治疗良性前列腺增生症的药物组合及其制备方法。

本发明是通过以下技术方案予以实现的：

一种药物组合，包括以下组分：桂枝、肉桂、茯苓、丹皮、桃仁、白芍、川牛膝、红花、炮山甲片、当归、水蛭、柴胡、沉香片、王不留行、甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、乳香和麝香。

优选地，所述的药物组合，包括以下重量份的组分：桂枝6-9份，肉桂3-6份，茯苓9-12份，丹皮6-9份，桃仁6-9份，白芍6-9份，川牛膝6-9份，红花3-6份，炮山甲片3-6份，当归6-9份，水蛭3-6份，柴胡6-9份，沉香片2-4份，王不留行6-9份，甘草2-4份，蝼蛄6-12份，蟋蟀6-12份，菟丝子9-12份，枸杞子9-12份，车前子9-12份，乳香6-10份，生黄芪15-30份，生山药10-15份和麝香0.1-0.3份。

本发明还涉及上述的药物组合的制备方法，包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加水煎煮，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加有机溶剂提取1-3次，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加有机溶剂，超声辅助提取，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

本发明配方中的药物可分为以下几项：

1.温阳散寒，平补肝肾：桂枝、肉桂温阳，菟丝子、枸杞子滋补肝肾。

2.活血化瘀散结：山甲片攻坚破积，活血散结；水蛭善剔精道、尿道之瘀血、败精，清散增生。牛膝引药下行，且与当归、桃仁、丹皮、红花以活血化瘀。

3.化痰饮利尿：王不留行利尿行水又活血通络，茯苓化水饮，蝼蛄、蟋蟀利尿消水且能软坚。本发明的蝼蛄已去头、足、翅，文火培干。

4.疏肝理气调气机：柴胡、白芍、沉香，柔肝疏肝且行下焦气滞。

5.甘草以调和诸药：车前子顾及湿热可导其从小便出，同时利尿，兼有补中有泻之意。

优选地，步骤S2所述有机溶剂为乙醇和丙酮的混合溶剂。

更优选地，所述乙醇和丙酮的体积比为2-5:1。

优选地，步骤S3所述有机溶剂为乙醇和石油醚的混合溶剂。

更优选地，所述乙醇和石油醚的体积比为1:0.5-2。

更优选地，所述步骤S1包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加5-8倍量的水煎煮1-3次，每次煎煮1-2h，过滤，得滤液1和滤渣2。

更优选地，所述步骤S2包括如下步骤：

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加8-10倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂提取1-3次，提取温度50-60℃，每次提取时间2-4h，过滤，得滤液3和滤渣4。

更优选地，所述步骤S3包括如下步骤：

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加3-6倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂，超声辅助提取，温度30-45℃，提取时间1-3h，过滤，得滤液5。

更优选地，步骤S4中所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎，加水浸泡，调节pH为5-6.5，加入酶，再调节pH至8.0-8.5，加入碱性蛋白酶，超声辅助酶解，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与有机溶剂混合，回流提取，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩，加入有机溶剂，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用混合溶剂洗涤，真空干燥，即得茯苓提取物。

更优选地，步骤(1)所述酶为木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的混合物。

更优选地，所述木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的质量比为1-2:1:3-6。

更优选地，所述步骤(1)包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎至20-40目，加8-10倍量的水浸泡15-30min，调节pH为5-6.5，加入0.5-1.5wt％的酶在40-50℃酶解1-1.5h，再调节pH至8.0-8.5，加入2-4wt％的碱性蛋白酶，提取0.5-1h，超声辅助酶解，加热至100℃，5-10min，使酶失活，过滤，得滤渣A和滤液B。酶的质量分数表示的是酶占茯苓水溶液的质量百分数。

更优选地，所述步骤(2)包括如下步骤：(2)将滤渣A与6-8倍量的80-90％乙醇混合，调节pH 6.5-7.5，回流提取2-3次，每次回流1-2h，过滤，得滤液C。

更优选地，所述步骤(3)包括如下步骤：将滤液C和滤液B混合，浓缩至60℃相对密度1.12-1.30，加入3-5倍量的90-95％乙醇，静置2-3h，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品。

更优选地，步骤(4)所述混合溶剂为丙酮、乙醚和氯仿的混合溶剂。

更优选地，所述丙酮、乙醚和氯仿的体积比为1:1-1.5:0.5-2。

更优选地，所述步骤(4)包括如下步骤：将茯苓提取物粗品用丙酮、乙醚、氯仿的混合溶剂洗涤，去除杂质，真空干燥，即得茯苓提取物。

更优选地，所述步骤S5包括如下步骤：

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

更优选地，所述制备方法包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加5-8倍量的水煎煮1-3次，每次煎煮1-2h，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加8-10倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂(两者体积比为2-5:1)提取1-3次，提取温度50-60℃，每次提取时间2-4h，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加3-6倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂(两者体积比为1:0.5-2)，超声辅助提取，温度30-45℃，提取时间1-3h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

本发明还涉及一种制剂，包括上述的药物组合或者上述制备方法制备得到的药物组合和药学上可接受辅料。

优选地，所述制剂为丸剂、胶囊中的至少一种。

由于前列腺增生为慢性病且为长期形成的，故药剂方面可以丸剂或胶囊缓图之。

本发明还涉及上述的药物组合或者上述制备方法制备得到的药物组合或上述制剂在制备治疗良性前列腺增生症的药物中的应用。

本发明的有益效果是：

1.本组方充分考虑了前列腺增生形成的各因素，突出抓住主证，兼顾它证的影响及相互联系。

本发明认为前列腺增生既具有“积癓”的特征同时又具有“癃闭”的特征，当归属于“积癓”+“癃闭”的范畴，且“积癓”贯穿于病程始终，当为主证，而癃闭则视为积癓之结果，或为兼证。

本病性属本虚标实，病位主要在膀胱与肾，并与肺、脾、肝相关，病理因素有湿热、热毒、气滞痰瘀等，在临床上很难见到单一的证型，常是几种证型兼见，因此必须抓住主证，即主要矛盾，方可见效。

本发明从本虚标实入手，抓住主证(即瘀血阻滞)所致之“积癓”同时兼顾产生主要病理因素的它证，如肾气亏虚，膀胱湿热，郁气滞等多角度综合施治，故而本发明以治血化瘀、通络散结为主，同时使用了通络、利湿、清热、补脾肾以提高疗效。

2.本组方中有诸多药材，多靶向作用，不同组分配伍有以下作用：

桂枝、白芍可促进动脉血和静脉血循环，调和营卫；桂枝、茯苓温阳化饮；桂枝、肉桂温中修下焦；牛膝、桃仁可治血瘀，小便闭；柴胡、沉香可疏肝理气，行下焦气滞；桃仁、当归可润枯血以利逐瘀；蝼蛄、蟋蟀可清热解毒，清水肿利尿且能软坚；炮山甲、水蛭两者配伍散结、祛瘀，力量更强；本组方中用虫药，血肉有情之味。柴胡、白芍理肝之气血；当归、白芍配伍补肝血；丹皮、车前子性寒以制温热之味且能活血行水。麝香配位乳香用以提高前列腺上皮屏障的通透性，有利于治疗药物进入间质或前列腺液中。生黄芪和生山药用以补益脾气，增强开清降浊之力以化气行水。

3.本发明解决了目前已见报道的分证治疗的弊端，比如疗效不稳定，而且在临床实践中基本没有完全对应的证型，常常是几种证型共见，若按分证治疗，不但没有疗效而且会出现变证，甚至引发新病，本发明的疗效更准确。

4.本发明采取酶解联合超声辅助的方式，并通过采用不同的酶联合进行酶解，缩短了酶解时间，提升了茯苓有效成分的提取率，同时还能保持茯苓有效成分的生物活性；

酶解之后，继续用乙醇回流提取，并调节pH值，在此pH下促进了乙醇对茯苓有效成分的提取，提高了提取的效率；

采用乙醇沉降茯苓有效成分，并采用混合溶剂进行洗涤，提高了茯苓有效成分的纯度。

本发明通过限定茯苓的制备方法，将处理后的茯苓提取物用于组合物，与其他组分协同作用更明显，治疗效果更显著。

5.本发明的药物组合制备过程中，将不同的药材分别用不同溶剂进行提取，并且限定了原料的提取顺序，各原料的协同作用更显著，无副作用。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

实施例1

一种药物组合，包括以下组分：桂枝6g，肉桂3g，茯苓9g，丹皮6g，桃仁6g，白芍6g，川牛膝6g，红花3g，炮山甲片3g，当归6g，水蛭3g，柴胡6g，沉香片2g，王不留行6g，甘草2g，蝼蛄6g，蟋蟀6g，菟丝子9g，枸杞子9g，车前子9g，乳香6g，生黄芪15g，生山药10g和麝香0.1g。

所述组合物的制备方法包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加5倍量的水煎煮1h，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加8倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂(两者体积比为2:1)提取2h，提取温度50℃，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加3倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂(两者体积比为2:1)，超声辅助提取，温度30℃，提取时间1h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎至20目，加8倍量的水浸泡15min，调节pH为5.0，加入0.5wt％的酶(木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的质量比为1:1:3)在40℃酶解1h，再调节pH至8.0，加入2wt％的碱性蛋白酶，提取0.5h，超声辅助酶解，加热至100℃，5min，使酶失活，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与6倍量的80％乙醇混合，调节pH 6.5，回流提取2次，每次回流1h，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩至60℃相对密度1.12，加入3倍量的90％乙醇，静置2h，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用4倍量的丙酮、乙醚、氯仿的混合溶剂(三者体积比为1:1:0.5)洗涤，去除杂质，真空干燥，即得茯苓提取物。

实施例2

一种药物组合，包括以下组分：桂枝9g，肉桂6g，茯苓12g，丹皮9g，桃仁9g，白芍9g，川牛膝9g，红花6g，炮山甲片6g，当归9g，水蛭6g，柴胡9g，沉香片4g，王不留行9g，甘草4g，蝼蛄12g，蟋蟀12g，菟丝子12g，枸杞子12g，车前子12g，乳香10g，生黄芪30g，生山药15g和麝香0.3g。

所述组合物的制备方法包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加8倍量的水煎煮3次，每次煎煮2h，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加10倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂(两者体积比为5:1)提取3次，提取温度60℃，每次提取时间4h，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加6倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂(两者体积比为1:2)，超声辅助提取，温度45℃，提取时间3h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎至40目，加10倍量的水浸泡30min，调节pH为6.5，加入1.5wt％的酶(木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的质量比为2:1:6)在50℃酶解1.5h，再调节pH至8.5，加入4wt％的碱性蛋白酶，提取1h，超声辅助酶解，加热至100℃，10min，使酶失活，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与8倍量的90％乙醇混合，调节pH 7.5，回流提取3次，每次回流2h，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩至60℃相对密度1.30，加入5倍量的95％乙醇，静置3h，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用6倍量的丙酮、乙醚、氯仿的混合溶剂(三者体积比为1:1.5:2)洗涤，去除杂质，真空干燥，即得茯苓提取物。

实施例3

一种药物组合，包括以下组分：桂枝8g，肉桂5g，茯苓10g，丹皮7g，桃仁8g，白芍7g，川牛膝8g，红花4g，炮山甲片5g，当归8g，水蛭5g，柴胡7g，沉香片3g，王不留行8g，甘草3g，蝼蛄10g，蟋蟀9g，菟丝子11g，枸杞子10g，车前子12g，乳香9g，生黄芪20g，生山药13g和麝香0.2g。

所述组合物的制备方法包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加6倍量的水煎煮2次，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加9倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂(两者体积比为4:1)提取2次，提取温度55℃，每次提取时间3h，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加4倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂(两者体积比为1:1)，超声辅助提取，温度35℃，提取时间2h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎至30目，加9倍量的水浸泡25min，调节pH为6.0，加入1.0wt％的酶(木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的质量比为2:1:5)在45℃酶解1.5h，再调节pH至8.2，加入3wt％的碱性蛋白酶，提取0.75h，超声辅助酶解，加热至100℃，8min，使酶失活，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与7倍量的85％乙醇混合，调节pH 7.0，回流提取3次，每次回流1.5h，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩至60℃相对密度1.20，加入4倍量的93％乙醇，静置2.5h，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用5倍量的丙酮、乙醚、氯仿的混合溶剂(三者体积比为1:1.5:1)洗涤，去除杂质，真空干燥，即得茯苓提取物。

实施例1-3的药物组合使用方法：将实施例1-3的药物组合冷水浸泡30min，然后文水煮开30min，过滤，煎煮2次，每次煎煮200ml水，合并滤液，每天分两次饭后温服，每次200ml。

对比例1

与实施例3的区别仅在于组合物的制备过程中原料提取顺序不同，其余条件均相同。具体如下：

所述组合物的制备方法包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加6倍量的水煎煮2次，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣2加4倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂(两者体积比为1:1)，超声辅助提取，温度35℃，提取时间2h，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣4混合，加9倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂(两者体积比为4:1)提取2次，提取温度55℃，每次提取时间3h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

对比例2

与实施例3的区别仅在于组合物的制备过程中步骤S2所采用的提取溶剂不同，为乙醇和丙醇的混合溶剂(两者体积比为4:1)，其余条件均相同。

对比例3

与实施例3的区别仅在于组合物的制备过程中步骤S3原料所采用的提取溶剂不同，为乙醇和乙醚的混合溶剂(两者体积比为1:1)，其余条件均相同。

对比例4

与实施例3的区别仅在于组合物的制备过程中步骤S5所采用的萃取溶剂不同，依次用二氯甲烷、正丁醇进行萃取，其余条件均相同。

对比例5

与实施例3的区别仅在于茯苓提取物的制备过程中步骤(1)所采用的酶不同，为木聚糖酶、果胶酶和纤维素酶的混合酶，三者质量比为2:1:5，其余条件均相同。

对比例6

与实施例3的区别仅在于茯苓提取物的制备过程中步骤(4)所采用的洗涤溶剂不同，为乙醇、乙醚、二氯甲烷的混合溶剂(三者体积比为1:1.5:1)，其余条件均相同。

测试例1

实施例1-3和对比例1-6治疗效果测试

雄性SD不去势大鼠140只，体重300-350g，8周龄，适应性喂养7d后，随机抽取15只作正常组，余下125只每日皮下注射5mg/kg丙酸睾酮(溶于橄榄油)，给药体积为0.1mL/100g。连续给药4周后，从正常组与注射丙酸睾酮的大鼠中各随机抽取5只大鼠，完整摘取前列腺组织，通过观察前列腺湿重、体积、前列腺指数(PI)验证造模。

明确造模成功后，注射丙酸睾酮的大鼠中随机抽取90只作为实验组，并随机分为9组，每组10只，进行药物组合的给药，剂量4g/kg/d，给药容积为2ml/kg，9组大鼠给药时间相同，再随机抽取10只作为模型组，不进行药物组合的给药，同一时间给予等体积的生理盐水腹腔注射，正常组常规喂养。

实验组连续给药干预6周，于末次给药24h后，10％水合氯醛(3.5mg/kg)腹腔麻醉，完整摘取前列腺，小心剔除周围脂肪组织，用滤纸吸取表面液体，天平称量(前列腺湿重)，用排水法测量前列腺体积，计算前列腺指数[前列腺湿重(mg)/大鼠体重(g)]。结果如表1所示。

表1实验组、正常组、模型组大鼠测试结果

	湿重/g	体积/ml	前列腺指数
				正常组	0.63±0.10<sup>a</sup>	0.64±0.11<sup>a</sup>	2.68±0.79<sup>a</sup>
模型组	1.04±0.38<sup>d</sup>	1.15±0.26<sup>d</sup>	4.71±0.82<sup>d</sup>
				实施例1	0.73±0.35<sup>b</sup>	0.71±0.21<sup>b</sup>	2.75±0.23<sup>b</sup>
实施例2	0.69±0.27<sup>b</sup>	0.68±0.15<sup>b</sup>	2.73±0.62<sup>b</sup>
				实施例3	0.65±0.14<sup>b</sup>	0.65±0.11<sup>b</sup>	2.70±0.29<sup>b</sup>
对比例1	0.79±0.12<sup>c</sup>	0.78±0.18<sup>c</sup>	2.91±0.54<sup>c</sup>
				对比例2	0.87±0.29<sup>c</sup>	0.86±0.19<sup>c</sup>	3.07±0.37<sup>c</sup>
对比例3	0.85±0.26<sup>c</sup>	0.83±0.14<sup>c</sup>	3.03±0.44<sup>c</sup>
				对比例4	0.82±0.17<sup>c</sup>	0.80±0.27<sup>c</sup>	2.97±0.25<sup>c</sup>
对比例5	0.83±0.35<sup>c</sup>	0.82±0.29<sup>c</sup>	2.99±0.39<sup>c</sup>
				对比例6	0.80±0.36<sup>c</sup>	0.79±0.22<sup>c</sup>	2.94±0.61<sup>c</sup>

a、b、c、d不同字母表示正常组、实施例1-3、对比例1-6与模型组之间比较，p均＜0.05。

本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述技术手段所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。以上所述是本发明的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种药物组合，其特征在于，包括以下组分：桂枝、肉桂、茯苓、丹皮、桃仁、白芍、川牛膝、红花、炮山甲片、当归、水蛭、柴胡、沉香片、王不留行、甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、乳香、生黄芪、生山药和麝香。

2.根据权利要求1所述的药物组合，其特征在于，包括以下重量份的组分：桂枝6-9份，肉桂3-6份，茯苓9-12份，丹皮6-9份，桃仁6-9份，白芍6-9份，川牛膝6-9份，红花3-6份，炮山甲片3-6份，当归6-9份，水蛭3-6份，柴胡6-9份，沉香片2-4份，王不留行6-9份，甘草2-4份，蝼蛄6-12份，蟋蟀6-12份，菟丝子9-12份，枸杞子9-12份，车前子9-12份，乳香6-10份，生黄芪15-30份，生山药10-15份和麝香0.1-0.3份。

3.一种权利要求1-2任一项所述的药物组合的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加水煎煮，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加有机溶剂提取1-3次，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加有机溶剂，超声辅助提取，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎，加水浸泡，调节pH为5-6.5，加入酶，再调节pH至8.0-8.5，加入碱性蛋白酶，超声辅助酶解，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与有机溶剂混合，回流提取，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩，加入有机溶剂，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用混合溶剂洗涤，真空干燥，即得茯苓提取物。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述酶为木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的混合物；步骤(4)所述混合溶剂为丙酮、乙醚和氯仿的混合溶剂。优选地，所述木聚糖酶、木瓜蛋白酶和纤维素酶的质量比为1-2:1:3-6；所述丙酮、乙醚和氯仿的体积比为1:1-1.5:0.5-2。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述茯苓提取物的制备方法包括如下步骤：

(1)将茯苓冷冻干燥、粉碎至20-40目，加8-10倍量的水浸泡15-30min，调节pH为5-6.5，加入0.5-1.5wt％的酶在40-50℃酶解1-1.5h，再调节pH至8.0-8.5，加入2-4wt％的碱性蛋白酶，提取0.5-1h，超声辅助酶解，加热至100℃，5-10min，使酶失活，过滤，得滤渣A和滤液B；

(2)将滤渣A与6-8倍量的80-90％乙醇混合，调节pH 6.5-7.5，回流提取2-3次，每次回流1-2h，过滤，得滤液C；

(3)将滤液C和滤液B混合，浓缩至60℃相对密度1.12-1.30，加入3-5倍量的90-95％乙醇，静置2-3h，离心，取沉淀物，为茯苓提取物粗品；

(4)将茯苓提取物粗品用丙酮、乙醚、氯仿的混合溶剂洗涤，去除杂质，真空干燥，即得茯苓提取物。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S2所述有机溶剂为乙醇和丙酮的混合溶剂，两者体积比为2-5:1；步骤S3所述有机溶剂为乙醇和石油醚的混合溶剂，两者体积比为1:0.5-2。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.将桂枝、肉桂、丹皮、桃仁、炮山甲片、生黄芪、生山药粉碎，加5-8倍量的水煎煮1-3次，每次煎煮1-2h，过滤，得滤液1和滤渣2；

S2.将白芍、川牛膝、红花、当归、水蛭、柴胡、王不留行粉碎，和滤渣2混合，加8-10倍量的乙醇和丙酮的混合溶剂提取1-3次，提取温度50-60℃，每次提取2-4h，过滤，得滤液3和滤渣4；

S3.将甘草、蝼蛄、蟋蟀、菟丝子、枸杞子、车前子、沉香片、乳香、麝香粉碎，和滤渣4加3-6倍量的乙醇和石油醚的混合溶剂，超声辅助提取，温度30-45℃，提取时间1-3h，过滤，得滤液5；

S4.对茯苓进行提取，得到茯苓提取物；

S5.将滤液1、滤液3和滤液5混合，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，将正丁醇萃取部分浓缩干燥，加入茯苓提取物，配研，即得。

9.一种制剂，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的药物组合或者权利要求3-8任一项所述制备方法制备得到的药物组合和药学上可接受辅料。

10.权利要求1-2任一项所述的药物组合或者权利要求3-8任一项所述制备方法制备得到的药物组合或权利要求9所述制剂在制备治疗良性前列腺增生症的药物中的应用。