CN110564737A - 一种来源于大麦基因型SLB的转录因子HvTTG1及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体是一种来源于“上海双棱扁大麦，SLB”的转录因子HvTTG1及其用途。本发明利用该转录因子转入后的拟南芥与受体拟南芥相比，其基座叶叶色变紫。本发明首次发现了大麦转录因子HvTTG1在植株叶片叶色改良中发挥重要的作用，为观赏农作物提供了一个很好的素材。

Description

一种来源于大麦基因型SLB的转录因子HvTTG1及其用途

技术领域

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体地说，是一种来源于大麦基因型“上海双棱扁大麦”(Shanghai ShuangLengBian，简称SLB)的转录因子HvTTG1及其在改良植物叶片叶色(由绿变紫)方面的用途。

背景技术

在观赏农作物中，水稻最先得到较好的应用。水稻是人类最主要的粮食作物。在多元化社会的今日，除了食用的需求外，更有学者研发具有观赏价值的水稻。在观赏水稻育种与功能型水稻育种方面，主要运用了诱变、杂交、细胞育种与分子育种等多种手段。大麦是最古老的禾谷类作物之一，麦籽粒种皮颜色除正常的黄色外，还有紫色、黑色、红色、蓝色和紫罗兰等，这些颜色的变化一般都是由酚类物质与花青素的互作而形成；大麦纯黑色籽粒则是由于黑色素类物质的存在(Choo T.M,Vigier B,Ho K.M,et al.2005.Comparison ofblack,purple,and yellow barleys[J].Genetic Resources and Crop Evolution,52(2):121-126.)。观赏大麦种质材料的创制与选育，目前还未见相关报道。观赏大麦的研发，将为上海农业的“提质增效”探索新的途径。

大麦是上海水稻种植的前茬作物，有悠久的种植历史，但有关观赏大麦的研究与应用还是空白，缺乏适合上海种植的观赏价值高的大麦材料。大麦(Hordeum vulgare L.)属于禾本科大麦属，是全球第四大谷类作物，用途广泛，集食用、饲用、啤酒工业和保健作用与一身。此外，大麦适应性广，耐贫瘠，尤其是对干旱、盐害和低温等具有较强的抗逆性。常常在高寒、干旱或盐碱地区，其它作物无法完成生命周期或者生存，而大麦被选作种植的唯一粮食作物。大麦的这些特点，非常适合作为上海地区观赏农作物，可替代花卉、草坪种植于城区公园、绿化带中，也可大面积种植郊区荒地形成色彩渐进带，还可在沿海滩涂盐分较高的地区种植，具有成本低廉、观赏价值较高、生产管理简单、病虫害少、生态效益好的诸多优点。大麦不仅可以与观赏水稻连作，共同形成全年候景观，而且本身也可在不用季节种植，春播、夏播较适合于赏苗，秋播、冬播赏苗、赏穗均可。大麦苗期一篇青绿，成熟期一片金黄，还可选用不同叶色、不同穗色、不同外形的高观赏价值大麦进行构图、装饰，形成赏心悦目、农趣盎然的园林或田园景观，为上海市民和外地游客提供新的休闲观光景点。

在模式植物拟南芥中的研究发现，转录调控蛋白TTG1(TRANSPARENT TESTAGLABRA-1)，TTG1作为植物调控原花青素积累的重要的调节子，是公认的调节植物类黄酮合成的关键因子之一(Debeaujon I,Nesi N,Perez P,Lepiniec L,etal.2003.Proanthocyanidin accumulating cells in Arabidopsis testa:regulationof differentiation and role in seed development[J].Plant Cell,15:2514-2531.Lepiniec L,Debeaujon I,Routaboul J.M,et al.2006.Genetics andbiochemistry of seed flavonoids[J].Annual Review of Plant Biology,57(1):405-430.Xu WJ,Grain D,Bobet S,Dubos C,et al.2014.Complexity and robustness of theflavonoid transcriptional regulatory network revealed by comprehensiveanalyses of MYBbHLH-WDR complexes and their targets in Arabidopsis seed[J].New Phytologist,202:132-144.)，类黄酮主要包括原花青素、花青素和黄酮醇，它们的存在以及不同的配比，使得花、茎和种子等组织呈现多彩的颜色(Nesi N,Jond C,DebeaujonI,Caboche M,Lepiniec L,et al.2001.The Arabidopsis TT2 gene encodes an R2R3MYB domain protein that acts as a key determinant for proanthocyanidinaccumulation in developing seed[J].Plant Cell,13:2099-2114.Lepiniec L,Debeaujon I,Routaboul J.M,et al.2006.Genetics and biochemistry of seedflavonoids[J].Annual Review of Plant Biology,57(1):405-430.)。截止目前，暗紫色或黑色大麦种子的种皮颜色遗传调控机制仍然不清楚。

目前在主要的四大禾谷类农作物中(水稻、小麦、玉米、大麦)中，仍然没有报道相关TTG1对叶片叶色的改良潜力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种来源于大麦基因型“SLB”的转录因子(命名为HvTTG1)及其在改良植物叶片叶色方面的用途。本发明研究发现过表达转录因子HvTTG1能改变植物叶片叶色，叶色由绿转紫，丰富了作物的观赏价值。

本发明的第一方面，提供一种来源于大麦的转录因子HvTTG1基因，其具有：

A)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；或

B)具有与SEQ ID NO.1所示序列互补的核苷酸序列；或

C)与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有90％以上序列同源性，且功能上与SEQID No.1所示的核苷酸序列等同。

本发明的第二方面，提供一种如上所述的基因编码的蛋白质。

进一步的，所述的蛋白质具有：

a)如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列；或

b)SEQ ID NO.4的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能上与SEQ ID No.4所示的氨基酸序列等同。

本发明的第三方面，提供用于扩增如上所述的转录因子HvTTG1基因的引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。

本发明的第四方面，提供一种含有如上所述的转录因子HvTTG1基因的植物表达载体。

本发明的第五方面，提供一种含有如上所述的转录因子HvTTG1基因、或含有如上所述的植物表达载体的重组菌。

本发明的第六方面，提供上述的转录因子HvTTG1基因、上述的蛋白质、上述的引物对、上述的植物表达载体、或上述的重组菌在植物育种中的用途。

进一步的，所述的植物育种为培育可供观赏的紫色叶片作物品种。

更进一步的，所述的植物育种为：促使植物基座叶叶色由绿色转变成紫色。

进一步的，所述的植物为拟南芥。

本发明的第七方面，提供一种改良作物叶片叶色的方法，包括：将如上所述的转录因子HvTTG1基因、如上所述的植物表达载体、或如上所述的重组菌导入目标植物或植物组织，并使转录因子HvTTG1过表达。

本发明的第八方面，提供一种具有观赏价值作物品种的培育方法，所述培养方法包括：将如上所述的转录因子HvTTG1基因转入拟改良植株中，获得具有观赏价值的作物；或者上调拟改良植株基因组中转录因子HvTTG1的表达，筛选得到可供观赏的植株。

进一步的，将转录因子HvTTG1基因转入拟改良植株中的方法包括：聚乙二醇法、农杆菌介导法或基因枪轰击法。

正如背景技术部分所介绍的，转录因子TTG1作物调节植物种子类黄酮类物质积累重要的调节子，但目前还没有其在植物叶片叶色方面研究的报道，本发明在转录因子HvTTG1调控叶片叶色方面进行了深入研究。

本发明利用同源比对的手段，以拟南芥的TTG1为基础，与大麦基因组(Mascher etal.,2017)Blast匹配分析后发现，TTG1在大麦基因组中只有一个同源拷贝基因HORVU0Hr1G016450。另外，我们以HvTTG1为候选基因，比较分析了10份“黄籽”与10份“紫籽”大麦的HvTTG1序列，结果发现“黄籽”与“紫籽”大麦根据HvTTG1序列的差异，可以形成两个集合。为了验证HvTTG1在大麦籽粒颜色调控中的潜在能力，我们克隆到“SLB”中HvTTG1全长基因组序列(图4A)，片段测序长度在1000bp左右。依据PCR扩增的电泳图结果，我们可以发现目的片断、内参片断均比较清晰，电泳位置符合预期的核酸片断大小，并且目的片段所在泳道无非特异扩增带以及拖尾现象。之后，我们利用潮霉素成功筛选出拟南芥的HvTTG1转基因阳性植株(图4B)。表型鉴定结果发现，HvTTG1阳性转基因植株的基座叶，叶色呈现深紫色(图4C)，而野生型拟南芥Clo-0基座叶叶片是正常的绿色(图4D)。

为研究HvTTG1在调控植物叶片叶色及利用方面的功能，本发明首先利用PCR技术克隆了该转录因子的基因片段，以大麦基因型“SLB”基因组为模板，利用下述引物扩增HvTTG1的基因片段：

上游引物：

5’-TCTGATCAAGAGACAggatccATGGACCAGCCCAAGCCG-3’，其核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；

下游引物：

5’-CATcggtgcactagtgtcgacTCAGACCCGGAGAAGCTGGA-3’，其核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

大麦基因组信息复杂，基因组有5.1Gb，重复基因序列较多(Mascher M,GundlachH,Himmelbach A,Beier S,Twardziok S.O,Wicker T,Radchuk V,Dockter C,Hedley P.E,Russell J et al.2017.A chromosome conformation capture ordered sequence ofthe barley genome[J].Nature,544(7651):426-+.)，这对本发明平时克隆到特定的单拷贝目的基因序列，形成了较大的障碍，而本发明设定的特异的、专一化的HvTTG1引物扩增序列，可以有效克服这一难题。

在获得上述转录因子之后本发明将其转入受体植物拟南芥中，获得HvTTG1过量表达的转基因株系。在1/2MS培养基上培养转入HvTTG1基因的拟南芥和受体拟南芥，并检测两种植物叶片叶色的变化，结果发现过表达HvTTG1基因能够改变植株的叶片颜色，叶色由绿变紫。

综上，本发明克隆出未经功能验证过的来自于大麦的转录因子HvTTG1基因，基因编号是HORVU0Hr1G016450，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该转录因子转入后的拟南芥与受体拟南芥相比，植株叶片叶色由绿变紫，丰富了作物在幼苗期叶片的观赏价值，由此提出了本发明。

由于核苷酸序列的特殊性，任何SEQ ID NO.1所示的多核苷酸的变体，只要其与该核苷酸90％以上同源性，且具有相同的功能，则均属于本发明保护范围之列。所述多核苷酸的变体是指一种具有一个或多个核苷酸改变的多核苷酸序列。此多核苷酸的变体可以是包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。

基于本发明的大麦HvTTG1的性能，可以用于改变植株叶片叶色。在本发明的一种实施方案中，给出了改变植株叶片叶色的方法，包括下列步骤：

(1)获得大麦转录因子HvTTG1基因的核苷酸序列；

(2)用PCR技术获得HvTTG1基因的片段，并将其连接至植物表达载体上；

(3)将带有目的基因质粒的农杆菌转入目标植物，获得HvTTG1过表达的植物。

本发明还分析了利用HvTTG1的序列差异性，区分大麦黄籽以及紫籽的方法。另外，我们以HvTTG1为候选基因，比较分析了10份“黄籽”与10份“紫籽”大麦的HvTTG1序列，结果发现“黄籽”与“紫籽”大麦根据HvTTG1序列的差异，可以形成两个集合。说明该转录因子HvTTG1在大麦籽粒颜色的变化中，是一个潜在的调节子，这也是对其能改变叶片叶色是一个很好的支撑。

综上所述，本发明所提供的转录因子HvTTG1，在植株体内过表达该转录因子能改变植株叶片叶色，促进植株幼苗期的观赏价值。

本发明的有益效果在于：

本发明首次发现了大麦转录因子HvTTG1在植株叶片叶色改良中发挥重要的作用，为观赏农作物提供了一个很好的素材。

附图说明

图1：上海双棱扁大麦种子籽粒。

图2：大麦HvTTG1以及拟南芥TTG1序列的同源比对分析；其中，A图为两者蛋白质功能保守结构域的比较，B图为两者全核苷酸序列的比较。

图3：20份大麦栽培种HvTTG1的进化分析。

图4：HvTTG1在“SLB”大麦基因型中的克隆以及在拟南芥中超表达后叶色变化。A)在“SLB”中克隆的HvTTG1片段；B)潮霉素筛选拟南芥转基因阳性植株；C)拟南芥转基因阳性植株表型鉴定；D)拟南芥野生型植株(Col-0)表型对比。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

本发明实施例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。为注明详细条件的实验方法是按照常规试验方法或按照供应商所建议的操作说明书进行的。

实施例1：来自大麦基因型“SLB”中转录因子HvTTG1的鉴定

与大麦基因组(Mascher et al.,2017)Blast匹配分析后发现，TTG1在大麦基因组中只有一个同源拷贝基因HORVU0Hr1G016450。对TTG1(拟南芥)、HvTTG1(大麦)编码序列(coding sequence,CDS)比较分析后发现，两者均没有内含子，全部是外显子编码序列(图2)。拟南芥TTG1基因的序列长1027bp，“SLB”中HvTTG1长1072bp(图2B)。拟南芥TTG1蛋白核心作用域WD40在第250～650位置的氨基酸之间，大麦HvTTG1蛋白的WD40作用区域则是在400～600位置的氨基酸之间(图2A)。对HvTTG1全长序列而言，“SLB”相较于大麦参考基因组“Morex”，在几个位点发生了突变，即第19位碱基由G突变成A；第226位碱基由A突变成G；第423位碱基由G突变成C；第861位碱基由G突变成A。其中第19位的碱基突变，导致氨基酸由脯氨酸(Proline)变成了苏氨酸(Threonine)，第226位的碱基突变，导致苏氨酸(Threonine)变成了丙氨酸(Alanine)，而其它2个位置的碱基突变均是无意突变，即没有氨基酸发生改变(图2B)。

实施例2：依据HvTTG1序列差异对黄籽与紫籽大麦种质资源的划分

本发明还分析了利用HvTTG1的序列差异性，区分大麦黄籽以及紫籽的方法。另外，我们以HvTTG1为候选基因，比较分析了10份“黄籽”与10份“紫籽”大麦的HvTTG1序列，结果发现“黄籽”与“紫籽”大麦根据HvTTG1序列的差异，可以形成两个集合(图3)。说明该转录因子HvTTG1在大麦籽粒颜色的变化中，是一个潜在的调节子，这也是对其能改变叶片叶色是一个很好的支撑。

实施例3：转录因子HvTTG1植物表达载体的构建

将大麦基因型材料“SLB”在土壤中生长7天，取全苗并提取基因组DNA。以提取的DNA为模板，利用高保真DNA聚合酶扩增HvTTG1的基因片段，PCR所用的引物序列为：

上游引物：

5’-TCTGATCAAGAGACAggatccATGGACCAGCCCAAGCCG-3’，其核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；

下游引物：

5’-CATcggtgcactagtgtcgacTCAGACCCGGAGAAGCTGGA-3’，其核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

将PCR产物在1％的琼脂糖中进行电泳，根据DNA Marker找到目的条带并将此胶块切下(图4A)。利用胶回收试剂盒(购自Omega公司)回收目的DNA，对回收的目的DNA及植物表达载体pZP211进行酶切(BamHI和SalI)，然后将酶切的DNA片段和载体用T4 DNA连接酶连接。随后利用热激法将连接产物转化至大肠杆菌Mach1感受态中，于37℃摇床，230rpm震荡培养1小时，将摇好的菌液涂布于含spe⁺抗性的LB平板上，37℃倒置培养12小时。通过菌落PCR技术筛选成功转入重组载体的阳性克隆，挑取阳性克隆的菌体于5mL LB培养液中培养并提取质粒用于测序。将测序结果与HvTTG1的序列进行比对，确认无误后将该质粒转化至农杆菌GV3101感受态中，放置于28℃摇床，230rpm震荡培养3小时，均菌液均匀地涂布于含spe⁺抗性的LB平板上，28℃倒置培养36小时。菌落PCR鉴定成功转入重组质粒的农杆菌并将菌种在-80℃中保存。

1/2MS培养基配方：

注：定容后，用KOH调PH值为5.7.

LB液体培养基配方：

实施例4：转基因阳性植株的鉴定以及植株的功能鉴定

挑取-80℃保存的农杆菌菌体于250mL LB培养液中，放置于28℃摇床，震荡培养16小时。利用浸花法将农杆菌侵染至拟南芥野生型植株。待植株成熟后，收取种子，并将种子铺在含K+抗性的1/2MS平皿上，筛选阳性苗即转基因株系T1代(图4B)。将筛选的T1代种子移植至蛭石中培养，收获T2代种子。将T2代种子在含K+抗性的1/2MS平皿上培养，发现其存活率为3/4，将存货的T2植株移至蛭石中培养，单株收获T3代种子。将T3代种子在含K+抗性的1/2MS平皿中培养，筛选纯合的转基因株系并移至蛭石中扩繁。利用潮霉素筛选上述实验获得的纯合转基因株系，获得阳性过表达的转基因株系。结果发现，HvTTG1过表达株系中植株叶片颜色发生改变，与野生型植株基座叶叶色比较发现(图4D)，转基因植株基座叶叶色由绿变紫(图4C)。以上这些实验结果表明HvTTG1能改变植物叶片的叶色，促进其观赏价值的提升。

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

序列表

<110> 上海市农业科学院

<120> 一种来源于大麦基因型SLB的转录因子HvTTG1及其用途

<130> /

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1071

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial)

<400> 1

atggaccagc ccaagccgac gccgtcggcg gccgcctcgc cggcgggggc ggacgcggcg 60

ccgaacccgt acgccttcac gtgcgagctc ccccactcga tctacgcgct ggccttctcc 120

ccctccgcgc ccgtcctcgc cgccgggagc ttcctcgagg acctccacaa ccgcgtctcc 180

ctcctctgct tcgactccgt ccaccccacc gccgcctcct tccgcgccgt cccctccctc 240

tccttcgacc acccgtaccc gcccaccaag ctccagttca acccgcgcgc cgcctccacg 300

cccctcctcg cctcctcctc cgacgccctc cgcctctggc acgcccccct cgacgacctc 360

tccgcctccg cccccgcccc cgagctccgc tccgtcctcg acaaccgcaa ggcctccgcc 420

tccgagttct gcgcgcccct cacctccttc gactggaacg agatcgagcc ccgccgcatc 480

gggaccgcct ccatcgacac cacctgcacc gtctgggaca tcgagcgcgg cgtcgtcgag 540

acgcagctca tcgcgcacga caaggccgtg cacgacatcg cctgggggga ggccggcgtc 600

tttgcctccg tctccgccga tggctccgtc cgcgtctttg atctccggga caaggagcac 660

tccaccatcg tctacgagag cccccgcccg gacacgccac tgctcaggct agcatggaac 720

cgctatgacc taagatacat ggccgccctg ctcatggaca gcagcgccgt cgttgtgctc 780

gacatacgtg cacccggcgt gcctgtggct gagctacatc ggcatggggg atgcgtgaac 840

gctgttgcgt gggcaccgca agctacaaga cacctctgct cggcagggga cgacgggcag 900

gcactcatct gggagctgcc tgaggcaccg gcagcagtgc ctcccgaagg gattgatcca 960

gttcttgttt atgatgcggg cgctgagata aaccagctgc agtgggtggc cggacacccg 1020

gactggatgg gcatttccat tgagaacaag gtccagcttc tccgggtctg a 1071

<210> 2

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial)

<400> 2

tctgatcaag agacaggatc catggaccag cccaagccg 39

<210> 3

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial)

<400> 3

catcggtgca ctagtgtcga ctcagacccg gagaagctgg a 41

<210> 4

<211> 356

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial)

<400> 4

Met Asp Gln Pro Lys Pro Thr Pro Ser Ala Ala Ala Ser Pro Ala Gly

1 5 10 15

Ala Asp Ala Ala Pro Asn Pro Tyr Ala Phe Thr Cys Glu Leu Pro His

20 25 30

Ser Ile Tyr Ala Leu Ala Phe Ser Pro Ser Ala Pro Val Leu Ala Ala

35 40 45

Gly Ser Phe Leu Glu Asp Leu His Asn Arg Val Ser Leu Leu Cys Phe

50 55 60

Asp Ser Val His Pro Thr Ala Ala Ser Phe Arg Ala Val Pro Ser Leu

65 70 75 80

Ser Phe Asp His Pro Tyr Pro Pro Thr Lys Leu Gln Phe Asn Pro Arg

85 90 95

Ala Ala Ser Thr Pro Leu Leu Ala Ser Ser Ser Asp Ala Leu Arg Leu

100 105 110

Trp His Ala Pro Leu Asp Asp Leu Ser Ala Ser Ala Pro Ala Pro Glu

115 120 125

Leu Arg Ser Val Leu Asp Asn Arg Lys Ala Ser Ala Ser Glu Phe Cys

130 135 140

Ala Pro Leu Thr Ser Phe Asp Trp Asn Glu Ile Glu Pro Arg Arg Ile

145 150 155 160

Gly Thr Ala Ser Ile Asp Thr Thr Cys Thr Val Trp Asp Ile Glu Arg

165 170 175

Gly Val Val Glu Thr Gln Leu Ile Ala His Asp Lys Ala Val His Asp

180 185 190

Ile Ala Trp Gly Glu Ala Gly Val Phe Ala Ser Val Ser Ala Asp Gly

195 200 205

Ser Val Arg Val Phe Asp Leu Arg Asp Lys Glu His Ser Thr Ile Val

210 215 220

Tyr Glu Ser Pro Arg Pro Asp Thr Pro Leu Leu Arg Leu Ala Trp Asn

225 230 235 240

Arg Tyr Asp Leu Arg Tyr Met Ala Ala Leu Leu Met Asp Ser Ser Ala

245 250 255

Val Val Val Leu Asp Ile Arg Ala Pro Gly Val Pro Val Ala Glu Leu

260 265 270

His Arg His Gly Gly Cys Val Asn Ala Val Ala Trp Ala Pro Gln Ala

275 280 285

Thr Arg His Leu Cys Ser Ala Gly Asp Asp Gly Gln Ala Leu Ile Trp

290 295 300

Glu Leu Pro Glu Ala Pro Ala Ala Val Pro Pro Glu Gly Ile Asp Pro

305 310 315 320

Val Leu Val Tyr Asp Ala Gly Ala Glu Ile Asn Gln Leu Gln Trp Val

325 330 335

Ala Gly His Pro Asp Trp Met Gly Ile Ser Ile Glu Asn Lys Val Gln

340 345 350

Leu Leu Arg Val

355

Claims (10)

1.一种来源于大麦的转录因子HvTTG1基因，其特征在于，具有：

A)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；或

B)具有与SEQ ID NO.1所示序列互补的核苷酸序列；或

C)与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有90％以上序列同源性，且功能上与SEQ IDNo.1所示的核苷酸序列等同。

2.一种如权利要求1所述的基因编码的蛋白质。

3.根据权利要求2所述的蛋白质，其特征在于，具有：

a)如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列；或

b)SEQ ID NO.4的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能上与SEQ ID No.4所示的氨基酸序列等同。

4.用于扩增如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因的引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。

5.一种含有如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因的植物表达载体。

6.一种含有如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因、或含有如权利要求5所述的植物表达载体的重组菌。

7.如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因、如权利要求2所述的蛋白质、如权利要求4所述的引物对、如权利要求5所述的植物表达载体、或如权利要求6所述的重组菌在植物育种中的用途。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的植物育种为培育可供观赏的紫色叶片作物品种。

9.一种改良作物叶片叶色的方法，其特征在于，包括：将如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因、如权利要求5所述的植物表达载体、或如权利要求6所述的重组菌导入目标植物或植物组织，并使转录因子HvTTG1过表达。

10.一种具有观赏价值作物品种的培育方法，其特征在于，所述培养方法包括：将如权利要求1所述的转录因子HvTTG1基因转入拟改良植株中，获得具有观赏价值的作物；或者上调拟改良植株基因组中转录因子HvTTG1的表达，筛选得到可供观赏的植株。