CN110514635A - 水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种可溶于水的物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法，包括（1）水解；（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁；（3）制备待测溶液；（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线；（5）荧光衍生；（6）检测与换算。本发明采用将待测样品中的邻苯二甲酸酯转化为能够产生荧光的单过氧邻苯二甲酸镁，从而实现了邻苯二甲酸酯类的荧光检测。除荧光分光光度计外，本发明不需要大型检测设备投入的条件下即可完成检测邻苯二甲酸酯类增塑剂的工作，操作方便且成本低廉，检测条件温和易控，适宜在小微企业推广应用。

Description

水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种应用荧光法检测水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的方法。

背景技术

邻苯二甲酸酯（PAEs）是邻苯二甲酸与 4～15 个碳的醇形成的一组酯类化合物，是各类塑化剂中最常见的主要成分，其主要用途是作为增塑剂添加至高分子聚合物中增加材料的柔韧性，被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品等数百种产品中。PAEs通常对热和化学试剂都很稳定，除少数是熔点较低的固体外，在常温下一般为高沸点低挥发性的粘稠液体，无色透明，有特殊气味，难溶于水，易溶于乙醚、甲醇和乙醇等多种有机溶剂，属脂溶性物质，所以当其混合到塑料中会与塑料基质分子有很好的相容性，不易离析。但是PAEs与塑料基质分子彼此仍然保持着独立的化学结构，仅仅是以氢键或范德华力与塑料基质分子相连而并没有以紧密的化学键(如共价键) 结合在一起，所以随着使用时间的增长，塑料制品中的邻苯二甲酸酯类物质会不断地释放出来，从而对大气、土壤和水域造成污染，更会对人类的身体健康造成潜在的危害。尤其是当用塑料制品来承装食（饮）品时，塑料中的邻苯二甲酸酯类物质便会缓慢地释放到食（饮）品中，最终被食（饮）用者摄入体内，尽管其中大部分可以通过代谢随尿液和粪便排出体外，但依然可能有少量PAEs在人体内存积。邻苯二甲酸酯有类雌激素作用，可干扰机体内分泌系统，影响生物体内激素的正常分泌，会给人体的免疫系统、生殖系统和消化系统带来危害，长期大量摄入还会诱发肝癌，可能造成染色体的数目或结构产生突变作用。因此，对邻苯二甲酸酯的检测越来越重要。

目前，欧盟、美国、日本、中国都先后将邻苯二甲酸酯类物质列入优先控制污染物的黑名单，美国列入检测的有DEHP、BBP、DBP、DOP、DEP、DMP 6种，我国有DEP、DMP、DOP 3种。检测邻苯二甲酸酯类化合物的国家标准和文献大多采用气相色谱法（GC）、气质联用法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-串联质谱法（LC-MS）、凝胶渗透色谱法（GPC）等方法。这些仪器方法虽然具有严谨、准确、灵敏的优点，但都需要用到大型仪器、投资大、方法时间长、操作繁琐、专业度高，适用于大中型企业或专门的检测机构，但不利于小微型企业的发展，因此，亟待开发一种设备投资较少，操作比较简单、作业时间较短、易学易用的检测方法。CN105866089 B公开了“一种荧光法检测邻苯二甲酸酯类增塑剂的方法”其先用四氢呋喃溶解测试样品中的邻苯二甲酸酯；加入二氧六环和强碱溶液将邻苯二甲酸酯水解成邻苯二甲酸盐，净化水解后，取上层水溶液，依次加入盐酸溶液、PBS溶液、硝酸铜溶液和过氧化氢溶液，邻苯二甲酸盐转化成可发荧光的羟基邻苯二甲酸盐，反应后加入二氧化锰和强碱溶液，静置或离心，保留上清水溶液作为待测溶液，最后用荧光法对待测溶液进行测定。该发明可在不需要大型检测设备的条件下，用于塑料、玩具、油漆涂层、食品包装材料等的邻苯二甲酸酯含量检测。但是，该发明需要的化学试剂偏多，操作步骤也较繁锁。

发明内容

本发明提供一种水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法，旨在通过相对简单易行的荧光法检测邻苯二甲酸酯类增塑剂，解决现有技术存在的设备投资大、方法时间长、操作繁琐、专业度高等问题。

本发明是通过如下技术方案实现的。

一种水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法，包括如下步骤：

（1）水解称取100g可溶于水的待测物料样品于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，60-75℃下恒温搅拌30-60min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性。

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，60-75℃下恒温搅拌4-6h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼3~5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，准确称取质量。

（3）制备待测溶液称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用。

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中。将所有比色管在光照强度300-1000lux下照射45-120min，再将所有比色管置于恒温箱中，在45-75℃条件下保温2-6h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与单过氧邻苯二甲酸镁六水合物含量对应关系的标准曲线和方程。

（5）荧光衍生取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管在与（4）相同的光照强度300-1000lux下照射与（4）相同的45-120min，再将比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的45-75℃条件下与（4）相同的保温2-6h，然后将比色管取出冷却至室温。

（6）检测与换算把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，将检测结果代入（4）得到的标准曲线和方程算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量，再经换算得出待测样品中所含的邻苯二甲酸酯类化合物的含量。

本发明水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法的优选步骤如下：

（1）水解称取100g可溶于水的待测物料样品于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌50min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性。

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌5h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，准确称取质量。

（3）制备待测溶液称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用。

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中。将所有比色管在光照强度500lux下照射60min，再将所有比色管置于恒温箱中，在60℃条件下保温4h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与单过氧邻苯二甲酸镁六水合物含量对应关系的标准曲线和方程。

（5）荧光衍生取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管在与（4）相同的光照强度500lux下照射与（4）相同的60min，再将比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的60℃条件下与（4）相同的保温4h，然后将比色管取出冷却至室温。

（6）检测与换算把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，将检测结果代入（4）得到的标准曲线和方程算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量，再经换算得出待测样品中所含的邻苯二甲酸酯类化合物的含量。

所述的待测样品为咖啡粉、奶粉等水溶性物料。

荧光检测法前提是被测样品能够产生荧光，而被测样品能够产生荧光的前提是分子结构必须是具有较强电子云密度的共轭体系或者刚性平面。本发明要检测的对象邻苯二甲酸酯类虽然是芳香族化合物，但是它的分子结构带有两个羧基，羧基是吸电子基，会使苯环上的电子云密度降低，减弱了体系的共轭效应，因此，直接用荧光检测无明显发射光的峰出现。本发明首先采用NaOH将邻苯二甲酸酯类水解成邻苯二甲酸，其次用氧化镁在过氧化氢的作用下合成单过氧邻苯二甲酸镁，但是单过氧邻苯二甲酸镁本身的荧光很弱，需要在一定光照强度下照射一定时间，再在一定温度条件下处理一定时间，才能使单过氧邻苯二甲酸镁能够产生较强的荧光。研究表明，光照时间至少要达到45min，恒温时间至少要有2h，才能使体系发射光强度达到最大值，且不再随着光照时间和恒温时间的增长而改变。温度不宜超过75℃，因为过高的温度会破坏单过氧邻苯二甲酸镁的分子结构，且高温下溶剂容易蒸发，造成荧光检测结果不准确。

本发明的有益效果在于：（1）采用将待测样品中的邻苯二甲酸酯转化为能够产生荧光的单过氧邻苯二甲酸镁，从而实现了邻苯二甲酸酯类的荧光检测。（2）除荧光分光光度计外，本发明不需要大型检测设备投入的条件下即可完成检测邻苯二甲酸酯类增塑剂的工作，操作方便且成本低廉，检测条件温和易控，适宜在小微企业推广应用。

附图说明

图1 为实施例1单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线。

图2为实施例2单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线。

图3为实施例3单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线。

实施例1

采用本发明方法检测酸梅粉中邻苯二甲酸酯的含量的方法。

实施例1

采用本发明方法检测酸梅粉中邻苯二甲酸酯的含量的方法。

（1）水解称取某品牌酸梅粉100g至于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，60℃下恒温搅拌60 min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性。

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，60℃下恒温搅拌6h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼3倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，称取质量为11.23mg。

（3）制备待测溶液称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用。

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中，先在光照强度1000lux下照射45min，再将所有比色管置于恒温箱中，在45℃条件下保温6h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线（如图1）和方程：

Y=105.0X-44.61，R²=0.996 。

Y代表发射光强度（单位：A.U.），X代表邻苯二甲酸酯的浓度（单位：mg/L）。

（5）荧光衍生取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管先在光照强度1000lux下照射45min，再将比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的45-75℃条件下保温2-6h，然后将比色管取出冷却至室温。

（6）检测与换算把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，结果为10.52A.U.。将检测结果代入到方程的Y，算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量X为0.5250mg/L，因为1mol邻苯二甲酸酯经反应可以生成1mol单过氧邻苯二甲酸镁，单过氧邻苯二甲酸镁与邻苯二甲酸酯的分子质量之比为1:1.4，从而换算出待测溶液中所含的邻苯二甲酸酯的含量为0.7350mg/L，即5mg滤粉中含有0.7350mg 的邻苯二甲酸酯，则11.23mg的滤饼中含有邻苯二甲酸酯1.6508mg，也就是说100g待测样品中含有邻苯二甲酸酯1.6508mg，那么待测样品中邻苯二甲酸酯类化合物的含量约为0.0165mg/g。

实施例2

采用本发明方法检测咖啡粉中邻苯二甲酸酯的含量的方法。

（1）水解量取某品牌咖啡粉100g于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，75℃下恒温搅拌30 min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性。

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，75℃下恒温搅拌4h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，称取质量为9.45mg。

（3）制备待测溶液称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用。

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中，先在光照强度300lux下照射120min，再将所有比色管置于恒温箱中，在75℃条件下保温2h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线（如图2）和方程：

Y=100.8X-40.59，R²=0.999。

Y代表发射光强度（单位：A.U.），X代表邻苯二甲酸酯的浓度（单位：mg/L）。

（5）荧光衍生取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管先光照强度300lux下照射120min，再将所有比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的75℃条件下保温2h，然后将比色管取出冷却至室温。

（6）检测与换算把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，结果为3.73A.U.。将检测结果代入到方程的Y，算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量X为0.4397mg/L，因为1mol邻苯二甲酸酯经反应可以生成1mol单过氧邻苯二甲酸镁，单过氧邻苯二甲酸镁与邻苯二甲酸酯的分子质量之比为1:1.4，从而换算出待测溶液中所含的邻苯二甲酸酯的含量为0.6156mg/L，即5mg滤粉中含有0.6156mg 的邻苯二甲酸酯，则9.45mg的滤饼中含有邻苯二甲酸酯1.1635mg，也就是说100g待测样品中含有邻苯二甲酸酯1.1635mg，那么待测样品中邻苯二甲酸酯类化合物的含量约为0.0116mg/g。

实施例3

采用本发明方法检测奶粉中邻苯二甲酸酯的含量的方法。

（1）水解称取某品牌奶粉100g至于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌50 min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性。

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌5h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，称取质量为8.05mg。

（3）制备待测溶液称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用。

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中，先在光照强度500lux下照射60min，再将所有比色管置于恒温箱中，在60℃条件下保温4h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与含量对应关系的标准曲线（如图3）和方程：

Y=95.33X-46.81，R²=0.995 。

Y代表发射光强度（单位：A.U.），X代表邻苯二甲酸酯的浓度（单位：mg/L）。

（5）荧光衍生取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，先在光照强度500lux下照射60min，再将所有比色管置于恒温箱中，在60℃条件下保温4h，然后将比色管取出冷却至室温。

（6）检测与换算把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，结果为5.67A.U.。将检测结果代入到方程的Y，算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量X为0.5505mg/L，因为1mol邻苯二甲酸酯经反应可以生成1mol单过氧邻苯二甲酸镁，单过氧邻苯二甲酸镁与邻苯二甲酸酯的分子质量之比为1:1.4，从而换算出待测溶液中所含的邻苯二甲酸酯的含量为0.7707mg/L，即5mg滤粉中含有0.7707mg 的邻苯二甲酸酯，则8.05mg的滤饼中含有邻苯二甲酸酯1.2408mg，也就是说100g待测样品中含有邻苯二甲酸酯1.2408mg，那么待测样品中邻苯二甲酸酯类化合物的含量约为0.0124mg/g。

Claims (2)

1.一种水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法，包括如下步骤：

（1）水解 称取100g可溶于水的待测物料样品于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，60-75℃下恒温搅拌30-60min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性；

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，60-75℃下恒温搅拌4-6h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼3~5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，准确称取质量；

（3）制备待测溶液 称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用；

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线 分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中，将所有比色管在光照强度300-1000lux下照射45-120min，再将所有比色管置于恒温箱中，在45-75℃条件下保温2-6h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与单过氧邻苯二甲酸镁六水合物含量对应关系的标准曲线和方程；

（5）荧光衍生 取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管在与（4）相同的光照强度300-1000lux下照射与（4）相同的45-120min，再将比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的45-75℃条件下与（4）相同的保温2-6h，然后将比色管取出冷却至室温；

（6）检测与换算 把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，将检测结果代入（4）得到的标准曲线和方程算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量，再经换算得出待测样品中所含的邻苯二甲酸酯类化合物的含量。

2.根据权利要求1所述的水溶性物料中邻苯二甲酸酯类增塑剂的荧光法检测方法的优选方法如下：

（1）水解 称取100g可溶于水的待测物料样品于容器中，向容器中加入20%的NaOH溶液1mL，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌50min，然后冷却至室温，用HCl溶液调至中性；

（2）合成单过氧邻苯二甲酸镁 在（1）制备的水解溶液中加入20mL 1%的氧化镁溶液和80mL 30%过氧化氢溶液，将容器置于水浴中，70℃下恒温搅拌5h，然后过滤取滤饼，将滤饼浸泡在滤饼5倍体积的乙酸乙酯中，静置30min后再次过滤，把滤饼平铺在平板上用冷风吹干得滤粉，准确称取质量；

（3）制备待测溶液 称取5mg（2）制备的滤粉，配置成5mg/L的水溶液为待测溶液，备用；

（4）制备单过氧邻苯二甲酸镁标准曲线 分别称取单过氧邻苯二甲酸镁六水合物标准品1mg、2mg、3mg、4mg、5mg于5个经过编号的1L容量瓶中，以去离子水定容，配置成含量呈梯度分布的一系列单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液，再从5个1L容量瓶的标准溶液中分别移取10mL装入规格相同的白色透明比色管中，将所有比色管在光照强度500lux下照射60min，再将所有比色管置于恒温箱中，在60℃条件下保温4h，然后将比色管取出冷却至室温，把所有比色管中的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度的测定，最后将单过氧邻苯二甲酸镁标准溶液对应的发射光强度值和标准溶液中的单过氧邻苯二甲酸镁的含量进行线性拟合，得到单过氧邻苯二甲酸镁发射光强度值与单过氧邻苯二甲酸镁六水合物含量对应关系的标准曲线和方程；

（5）荧光衍生 取10mL（3）制备的待测溶液，移至与（4）相同规格的白色透明比色管中，将比色管在与（4）相同的光照强度500lux下照射与（4）相同的60min，再将比色管置于恒温箱中，在与（4）相同的60℃条件下与（4）相同的保温4h，然后将比色管取出冷却至室温；

（6）检测与换算 把（5）制备的荧光衍生后的溶液用荧光分光光度计进行发射光强度测定，将检测结果代入（4）得到的标准曲线和方程算出待测溶液中单过氧邻苯二甲酸镁的含量，再经换算得出待测样品中所含的邻苯二甲酸酯类化合物的含量。