CN110507749A - 一种蒙古韭抗肿瘤提取物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物制剂领域,涉及一种蒙古韭抗肿瘤提取物及其制备方法和用途,包括如下步骤:S1、取蒙古韭叶片阴干,粉碎;S2、取蒙古韭叶粉,加入30v%‑80v%的醇溶液中进行回流提取,减压回收溶剂,得到粗提取物;S3、将粗提取物分散于水中,以大孔吸附树脂吸附,树脂柱径高比为1:6‑10,随后用水洗脱除杂,继续以10v%‑20v%的醇溶液洗脱除杂,然后依次以30v%‑40v%、70v%‑80v%的醇溶液洗脱,收集30v%‑40v%、70v%‑80v%醇溶液的洗脱液,合并洗脱液;上述制备方法使得蒙古韭中具有抗肿瘤作用的有效物质得到了富集,去除了大量的杂质,有效活性成分含量提高,具有显著的抗肿瘤作用。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂领域,具体涉及一种蒙古韭抗肿瘤提取物及其制备方法和用途。
背景技术
蒙古韭(Allium mongolicum Regel.)又名沙葱,是百合科葱属植物,生长于海拔800-2800米的荒漠、沙地或干旱山坡,主要分布于我国的新疆、青海、甘肃、宁夏、陕西、内蒙古和辽宁。蒙古韭具有极高的营养价值和药用价值,蒙古韭叶及花是一种可以食用的野生蔬菜,地上的部分可入蒙药。蒙古韭富含蛋白质、氨基酸、脂肪、矿物质、微量元素、多糖和黄酮类化合物等营养物质,食用时有降血压、开胃、提高免疫力、抗氧化、抗衰老、抗菌和抗病毒等作用。
植物黄酮类化合物是广泛存在于植物体内的复杂的酚类次生代谢物,主要分布在植物的皮、根、茎、叶及果实中。国内外研究已证实,植物中的黄酮具有清除体内自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌、抗肿瘤和免疫调节等诸多功效。
目前,对蒙古韭总黄酮的研究主要集中在其化学成分上,而对其药理研究较少。现有的研究有蒙古韭总黄酮提取物具有降血压的药理作用,例如中国专利文献CN106038944A公开的一种沙葱总黄酮的制备方法及其应用,其制备方法包括沙葱阴干、粉碎;超声波提取;聚酰胺树脂纯化,乙醇洗脱,收集洗脱液;浓缩干燥,即得沙葱总黄酮。经过动物实验,发现所得沙葱总黄酮具有良好的降血压的作用,可广泛用于制备降血压的药品中。也有研究表明,蒙古韭的总黄酮提取物具有一定的抗肿瘤活性,但该蒙古韭的总黄酮提取物对A549肿瘤细胞并无显著的抑制作用,分析原因在于可能与蒙古韭总黄酮的提取工艺有关,其提取的蒙古韭总黄酮中,有效活性成分含量低,而杂质较多,不能富集有效活性成分,致使其无显著的抑制肿瘤的作用。
发明内容
因此,本发明要解决的技术问题在于提供一种蒙古韭抗肿瘤提取物及其制备方法和用途。
为解决上述技术问题,本发明提供了如下技术方案:
本发明提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
S1、取蒙古韭叶片阴干,粉碎,得到蒙古韭叶粉,备用;
S2、取所述蒙古韭叶粉,加入体积浓度为30%-80%的醇溶液中进行回流提取,减压回收溶剂,得到粗提取物;
S3、将所述粗提取物分散于水中,然后以大孔吸附树脂进行吸附处理,树脂柱径高比为1:6-10,随后用水洗脱1-5倍树脂体积除杂,继续以体积浓度为10%-20%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积除杂,然后依次以体积浓度为30%-40%的醇溶液、体积浓度为70%-80%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积,收集体积浓度为30%-40%醇溶液的洗脱液和体积浓度为70%-80%醇溶液的洗脱液,合并洗脱液。
在所述的制备方法中,在S3步骤中,控制吸附的流速为1-3BV/h,水洗脱的流速为2-4BV/h,体积浓度为10%-20%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h,体积浓度为30%-40%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h,体积浓度为70%-80%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h。
在所述的制备方法中,在S3步骤中,以体积浓度为15%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积除杂,然后依次以体积浓度为35%的醇溶液、体积浓度为75%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积。
在所述的制备方法中,在S3步骤中,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量的5-8体积倍量。
在所述的制备方法中,在S3步骤中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:3-8。
在所述的制备方法中,在S2步骤中,所述蒙古韭叶粉的重量份与体积浓度为30%-80%的醇溶液的体积份比为(0.5-1.5):(15-25)。
在所述的制备方法中,在S2步骤中,所述醇溶液的体积浓度为75%。
在所述的制备方法中,所述的重量份与体积份的比值关系为kg/L或g/mL的关系。
本发明提供了一种由上述的制备方法制备得到的蒙古韭抗肿瘤提取物。
本发明提供了一种所述的蒙古韭抗肿瘤提取物在制备抗肿瘤药物或功能性食品中的用途。
在所述的用途中,所述抗肿瘤药物或功能性食品为抗肝癌或肺癌的药物或功能性食品。
本发明技术方案,具有如下优点:
1.本发明提供的一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:S1、取蒙古韭叶片阴干,粉碎,得到蒙古韭叶粉,备用;S2、取所述蒙古韭叶粉,加入体积浓度为30%-80%的醇溶液中进行回流提取,减压回收溶剂,得到粗提取物;S3、将所述粗提取物分散于水中,然后以大孔吸附树脂进行吸附处理,树脂柱径高比为1:6-10,随后用水洗脱1-5倍树脂体积除杂,继续以体积浓度为10%-20%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积除杂,然后依次以体积浓度为30%-40%的醇溶液、体积浓度为70%-80%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积,收集体积浓度为30%-40%醇溶液的洗脱液和体积浓度为70%-80%醇溶液的洗脱液,合并洗脱液;通过上述制备方法中的提取和纯化,使得蒙古韭中具有抗肿瘤作用的有效物质得到了富集,去除了大量的杂质,有效活性成分含量大大提高,相对未经纯化的粗提取物,具有显著的抗肿瘤作用。
2.本发明提供的蒙古韭抗肿瘤提取物具有抗肿瘤的作用,经实验证明,本发明制备的蒙古韭抗肿瘤提取物具有显著的抑制肝癌细胞和肺癌细胞的作用,进一步证明了本发明制备的蒙古韭抗肿瘤提取物中富集了具有抗癌活性的有效物质。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明,并不局限于所述最佳实施方式,不对本发明的内容和保护范围构成限制,任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品,均落在本发明的保护范围之内。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者,按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
蒙古韭购自天绿维沙葱专业合作社。
实施例1
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过20目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉0.5kg,加入25L的体积浓度为30%的乙醇溶液中进行回流提取3次,每次1小时,回流温度为40℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:8(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的5体积倍量,树脂柱径高比为1:10,吸附流速为1BV/h,随后用水洗脱5倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为2BV/h,继续以体积浓度为20%的乙醇溶液洗脱3倍树脂体积除杂,洗脱流速为8BV/h,然后以体积浓度为30%的乙醇溶液洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为4BV/h,继续以体积浓度为80%的乙醇溶液洗脱3倍树脂体积,洗脱流速为8BV/h,收集体积浓度为30%乙醇溶液的洗脱液和体积浓度为80%乙醇溶液的洗脱液,合并洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例2
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉1.5kg,加入15L的体积浓度为80%的乙醇溶液中进行回流提取1次,每次3小时,回流温度为50℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:3(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的8体积倍量,树脂柱径高比为1:6,吸附流速为3BV/h,随后用水洗脱1倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为4BV/h,继续以体积浓度为10%的乙醇溶液洗脱6倍树脂体积除杂,洗脱流速为4BV/h,然后以体积浓度为40%的乙醇溶液洗脱3倍树脂体积,洗脱流速为8BV/h,继续以体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为4BV/h,收集体积浓度为40%乙醇溶液的洗脱液和体积浓度为70%乙醇溶液的洗脱液,合并洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例3
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉1kg,加入20L的体积浓度为75%的乙醇溶液中进行回流提取2次,每次2小时,回流温度为45℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:6(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的7体积倍量,树脂柱径高比为1:8,吸附流速为2BV/h,随后用水洗脱3倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为3BV/h,继续以体积浓度为15%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积除杂,洗脱流速为6BV/h,然后以体积浓度为35%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,继续以体积浓度为75%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,收集体积浓度为35%乙醇溶液的洗脱液和体积浓度为75%乙醇溶液的洗脱液,合并洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例4
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉1kg,加入20L的体积浓度为75%的乙醇溶液中进行回流提取2次,每次2小时,回流温度为45℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:6(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的7体积倍量,树脂柱径高比为1:8,吸附流速为2BV/h,随后用水洗脱3倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为3BV/h,然后以体积浓度为35%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,继续以体积浓度为75%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,收集体积浓度为35%乙醇溶液的洗脱液和体积浓度为75%乙醇溶液的洗脱液,合并洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例5
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉1kg,加入20L的体积浓度为75%的乙醇溶液中进行回流提取2次,每次2小时,回流温度为45℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:6(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的7体积倍量,树脂柱径高比为1:8,吸附流速为2BV/h,随后用水洗脱3倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为3BV/h,然后以体积浓度为35%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,收集体积浓度为35%乙醇溶液的洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例6
本实施例提供了一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,备用;
(2)取所述蒙古韭叶粉1kg,加入20L的体积浓度为75%的乙醇溶液中进行回流提取2次,每次2小时,回流温度为45℃,减压回收溶剂,得到粗提取物;
(3)将所述粗提取物分散于水中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:6(kg:L),然后以AB-8型大孔吸附树脂进行吸附处理,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量(生药量)的7体积倍量,树脂柱径高比为1:8,吸附流速为2BV/h,随后用水洗脱3倍树脂体积除杂,水洗脱的流速为3BV/h,然后以体积浓度为75%的乙醇溶液洗脱4倍树脂体积,洗脱流速为6BV/h,收集体积浓度为75%乙醇溶液的洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得。
实施例7
取实施例1制备的所述蒙古韭抗肿瘤提取物,加入常规辅料,按照常规工艺,制成口服液。
实施例8
取实施例2制备的所述蒙古韭抗肿瘤提取物,加入常规辅料,按照常规工艺,制成片剂。
实施例9
取实施例3制备的所述蒙古韭抗肿瘤提取物,加入常规辅料,按照常规工艺,制成饮料。
对比例1
取蒙古韭叶片阴干,粉碎,过30目筛,得到蒙古韭叶粉,取所述蒙古韭叶粉1kg,按照料液比为1:30g/mL加入体积浓度为75%的乙醇溶液,超声波功率百分比为60%总功率,提取时间为15min,提取温度为40℃,将所得提取液,进行减压干燥,得到蒙古韭抗肿瘤粗提取物。
实验例
实验例1蒙古韭抗肿瘤提取物中总黄酮含量测定
采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量
1.1仪器
760CRT型紫外可见分光光度计;
RE-5285A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);
电子分析天平(北京塞多利斯仪器系统公司);
1.2对照品与试剂
芦丁标准品BW1681-20mg(北京万佳首化生物科技有限公司);其他试剂均为分析纯。
1.3对照品溶液的制备以及标准曲线的绘制:
对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的芦丁标准品6mg,用95%乙醇溶解并定容至10ml,得到0.6mg/ml的芦丁标准品原液,准确吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml芦丁标准品原液于2ml刻度离心管中,用95%乙醇定容至1ml,即得;
标准曲线的绘制:分别吸取300μl不同浓度的芦丁对照品溶液,加入20%的NaNO2溶液30μl,反应3min后加入20%NaOH溶液100μl,混匀反应10min,每管吸取200μl测定各溶液在510nm处的吸光度值,并绘制标准曲线。
1.4样品溶液的制备
精密称取实施例1-6制备的蒙古韭抗肿瘤提取物以及对比例1制备的蒙古韭抗癌粗提取物样品各3份,每份100mg,95%乙醇溶解并定容至25mL容量瓶刻度,即得供试品溶液。
1.5样品溶液的含量测定
吸取300μl不同的供试品溶液,加入20%的NaNO2溶液30μl,反应3min后加入20%NaOH溶液100μl,混匀反应10min,每管吸取200μl测定各溶液在510nm处的吸光度值,根据标准曲线计算黄酮含量,结果见表1
表1蒙古韭抗肿瘤提取物中总黄酮的含量
由表1可看出,本发明的制备方法可以有效去除杂质,达到富集有效活性成分总黄酮的目的,使得制备的蒙古韭抗肿瘤提取物中具有抗肿瘤作用的有效成分含量大大提高。
实验例2本发明制得的蒙古韭抗肿瘤提取物对肝癌BEL-7402细胞的抑制
2.1实验材料
肝癌BEL-7402细胞由上海一研生物科技有限公司提供,在实验时选取生长状态良好的对数生长期肝癌BEL-7402细胞进行试验。
受试药物:实施例3-6制备的蒙古韭抗肿瘤提取物以及对比例1制备的蒙古韭抗肿瘤粗提取物。
2.2药物配制
分别取受试药物样品,用含10%灭活的胎牛血清(FBS)RPMI-1640培养液配制成25、50、100、200、300、400μg/mL的受试药物溶液,用0.22微米微孔滤膜过滤除菌,备用。
2.3实验分组及方法
2.3.1实验分组
实验组1:给予实施例3制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组2:给予实施例4制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组3:给予实施例5制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组4:给予实施例6制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组5:给予对比例1制备的蒙古韭抗癌粗提取物的配制的受试药物溶液;
空白对照组:给予含有10%的灭活的胎牛血清(FBS)RPMI-1640培养液。
2.3.2实验方法
取对数生长期肝癌BEL-7402细胞,用0.25%胰蛋白酶消化后,用含10%灭活的胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养液配制成5×104个/ml单细胞悬液,接种于96孔培养板,100μl/孔,各实验组给予药物溶液的体积为100μl,后补充含有10%的灭活的胎牛血清(FBS)RPMI-1640培养液,使得最终体积均为200μl,每个浓度设4个平行孔,空白对照组给予等量的含10%灭活的胎牛血清(FBS)RPMI-1640培养液,最终体积均为200μl,37℃,5%CO2培养48h后,每孔加入MTT溶液20μL,CO2培养箱孵育4h。弃细胞培养液,加DMSO 150μL/每孔,37℃孵育15~30min,用酶标仪在570nm处测定各孔OD值;平行实验3次,计算生长抑制率IR(%)=(1-实验组/空白对照组)×100%。
3.实验结果
取实验组的药物溶液作用肝癌BEL-7402细胞48小时后,各实验组的抑制率结果见下表2,
表2蒙古韭抗肿瘤提取物对肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用率(%)
续表2
由上表2可知,各实验组的蒙古韭抗肿瘤提取物样品对肝癌BEL-7402细胞作用48h后,不同浓度的抑制率呈量效关系,其抑制作用呈较明显的剂量依赖性,说明蒙古韭抗肿瘤提取物具有抗肝癌BEL-7402细胞作用,其中实验组1对肝癌BEL-7402细胞具有更显著的抑制作用,说明本发明制备的蒙古韭抗肿瘤提取物,有效活性成分含量高,杂质低,能够富集有效活性成分。
实验例3本发明制得的蒙古韭抗肿瘤提取物对肺癌A549细胞的抑制
2.1实验材料
肺癌A549细胞:由上海沪震实业有限公司提供,在体外培养时A549细胞株为贴壁生长细胞,以适量浓度接种于培养瓶中,使用含有10%的灭活的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液在37℃、5%CO2培养箱中培养。2-3d换液一次,待有80%的细胞贴壁后,按1传4的比例进行传代。试验时选取生长状态良好的对数生长期细胞进行试验。
受试药物:实施例3-6制备的蒙古韭抗肿瘤提取物以及对比例1制备的蒙古韭抗癌粗提取物。
2.2药物配制
分别取受试药物样品,用含10%灭活的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液,配制成25、50、100、200、300、400μg/mL的受试药物溶液,用0.22微米微孔滤膜过滤除菌,备用。
2.3实验分组及方法
2.3.1实验分组
实验组1:给予实施例3制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组2:给予实施例4制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组3:给予实施例5制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组4:给予实施例6制备的蒙古韭抗肿瘤提取物的配制的受试药物溶液;
实验组5:给予对比例1制备的蒙古韭抗癌粗提取物的配制的受试药物溶液;
空白对照组:给予含有10%的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液。
2.3.2实验方法
取对数生长期肺癌A549细胞,用0.25%胰蛋白酶消化后,用含有10%的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液配制成5×104个/ml单细胞悬液,接种于96孔培养板,100μl/孔,各实验组给予药物溶液的体积为100μl,后补充含有10%的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液,使得最终体积均为200μl,每个浓度设4个平行孔,空白对照组给予等量的含有10%灭活的胎牛血清的DMEM高糖细胞完全培养液,最终体积均为200μl,37℃,5%CO2培养48h后,每孔加入MTT溶液20μL,37℃,5%CO2培养箱孵育4h。弃细胞培养液,加DMSO 150μL/每孔,37℃孵育15~30min,用酶标仪在570nm处测定各孔OD值;平行实验3次,计算生长抑制率IR(%)=(1-实验组/空白对照组)×100%。
3.实验结果
取实验组的药物溶液作用肺癌A549细胞48小时后,各实验组的抑制率结果见下表3,
表3蒙古韭抗肿瘤提取物对肺癌A549细胞的增殖抑制作用率(%)
续表3
由上表3可知,各实验组的蒙古韭抗肿瘤提取物样品对肺癌A549细胞作用48h后,不同浓度的抑制率呈量效关系,其抑制作用呈较明显的剂量依赖性,说明蒙古韭抗肿瘤提取物具有抗肺癌A549细胞作用,其中实验组1对肺癌A549细胞具有更显著的抑制作用,说明本发明制备的蒙古韭抗肿瘤提取物,有效活性成分含量高,杂质低,能够富集有效活性成分。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种蒙古韭抗肿瘤提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、取蒙古韭叶片阴干,粉碎,得到蒙古韭叶粉,备用;
S2、取所述蒙古韭叶粉,加入体积浓度为30%-80%的醇溶液中进行回流提取,减压回收溶剂,得到粗提取物;
S3、将所述粗提取物分散于水中,然后以大孔吸附树脂进行吸附处理,树脂柱径高比为1:6-10,随后用水洗脱1-5倍树脂体积除杂,继续以体积浓度为10%-20%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积除杂,然后依次以体积浓度为30%-40%的醇溶液、体积浓度为70%-80%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积,收集体积浓度为30%-40%醇溶液的洗脱液和体积浓度为70%-80%醇溶液的洗脱液,合并洗脱液。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在S3步骤中,控制吸附的流速为1-3BV/h,水洗脱的流速为2-4BV/h,体积浓度为10%-20%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h,体积浓度为30%-40%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h,体积浓度为70%-80%的醇溶液的洗脱流速为4-8BV/h。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,在S3步骤中,以体积浓度为15%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积除杂,然后依次以体积浓度为35%的醇溶液、体积浓度为75%的醇溶液洗脱3-6倍树脂体积。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,在S3步骤中,所述大孔吸附树脂为蒙古韭叶粉重量的5-8体积倍量。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法,其特征在于,在S3步骤中,所述粗提取物的重量份与水的体积份比为1:3-8。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法,其特征在于,在S2步骤中,所述蒙古韭叶粉的重量份与体积浓度为30%-80%的醇溶液的体积份比为(0.5-1.5):(15-25)。
7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法,其特征在于,在S2步骤中,所述醇溶液的体积浓度为75%。
8.由权利要求1-7任一所述的制备方法制备得到的蒙古韭抗肿瘤提取物。
9.权利要求8所述的蒙古韭抗肿瘤提取物在制备抗肿瘤药物或功能性食品中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于,所述抗肿瘤药物或功能性食品为抗肝癌或肺癌的药物或功能性食品。
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CN201910774050.8A Active CN110507749B (zh) | 2019-08-21 | 2019-08-21 | 一种蒙古韭抗肿瘤提取物及其制备方法和用途 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN111973701A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-11-24 | 青海大学 | 大蒜沙葱组合物在制备预防和/或治疗癌症的产品中的用途 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN102274386A (zh) * | 2011-08-09 | 2011-12-14 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种从沙葱中提取总异黄酮的方法 |
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2019
- 2019-08-21 CN CN201910774050.8A patent/CN110507749B/zh active Active
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CN102274386A (zh) * | 2011-08-09 | 2011-12-14 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种从沙葱中提取总异黄酮的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
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萨茹丽等: "沙葱总黄酮体外抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性的研究", 《饲料工业》 * |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN111973701A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-11-24 | 青海大学 | 大蒜沙葱组合物在制备预防和/或治疗癌症的产品中的用途 |
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CN110507749B (zh) | 2021-10-01 |
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