CN110495475A - 绿僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂 - Google Patents

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Abstract

本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域，具体涉及一种杀草地贪夜蛾的药剂。所述药剂包括绿僵菌和细菌。本发明的药剂对草地贪夜蛾的防治效果好。

Description

绿僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂
技术领域
本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域，具体涉及一种绿僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂。
背景技术
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda又名伪黏虫、秋行军虫、秋粘虫、草地夜蛾等，为昆虫纲，有翅亚纲，鳞翅目，夜蛾科，灰翅夜蛾属草地贪夜蛾种。草地贪夜蛾原产于美洲热带和亚热带地区，广泛分布于美洲大陆，为害多种作物(“警惕危险性害虫草地贪夜蛾入侵我国”，郭井菲等，植物保护，2018年第44卷第6期，第1页左栏第1段第1-5行，公开日2018年12月31日)。2019年1月13日确认，草地贪夜蛾入侵我国云南省，至5月21日，已有云南、广西、贵州、广东、湖南、海南、福建、浙江、湖北、四川、江西、重庆、河南、安徽等14省(自治区)的385个县(市、区)见虫，发生面积9.23万hm2，5月22日又在上海市的奉贤区发现为害玉米，不到5个月的时间，该虫已入侵了我国长江流域及其以南地区(“我国草地贪夜蛾的防控对策与建议”，杨普云等，植物保护，2019年第45卷第4期，第1页第1段第1-5行，公开日2019年05月29日)。
草地贪夜蛾具有以下突出特点：一是食性杂，寄主植物广泛，包括玉米、水稻、大麦、棉花、高粱等76科353种植物；二是繁殖能力强，雌虫可多次交配产卵，一生可产卵900-1000粒，最高可达2000粒；三是迁飞扩散快，每晚可迁飞150多km，随气流可迁飞1500km以外的地区；四是为害重，玉米苗期受害一般可导致减产10％-25％，严重地块可造成毁种绝收，幼虫可取食幼茎、叶片、雄穗、果穗等多个部位；五是防控难度大，草地贪夜蛾适生温度范围11-30℃，3龄以上幼虫对多种有机磷类、拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类化学农药有抗性，并且对部分转基因玉米有抗性。已确认入侵我国的草地贪夜蛾属于玉米品系，主要为害玉米、高粱和棉花。根据分析预测，草地贪夜蛾将在春季和夏季形成迁飞虫源，通过气流迁飞至我国黄淮海和西北地区，预计在夏秋季进一步迁飞至我国华北和东北玉米主产区，受威胁玉米面积1333万hm2(2亿亩)以上，防控任务非常艰巨(“我国草地贪夜蛾的防控对策与建议”，杨普云等，植物保护，2019年第45卷第4期，第1页第2段第1-10行，公开日2019年05月29日)。
虽然我国在草地贪夜蛾入侵前就已经开展了检测防控工作，但由于草地贪夜蛾为害重、难防治的特点，以及我国具有适宜其定殖扩散的寄主、气候条件，其在玉米和甘蔗主产区呈现大规模暴发态势。其一，我国有适宜草地贪夜蛾周年繁殖区，为草地贪夜蛾来年在长江及淮河流域的发生提供了大量虫源。其二，草地贪夜蛾在我国的高度适生区与稻谷种植地区高度重合，我国还是世界第二大玉米种植国家，主要玉米产区也多在其适生范围内，这都为草地贪夜蛾的种群繁殖提供了理想栖息地。第三，我国玉米等作物的种植布局随季节和纬度变化从南至北递次推移，时间和空间上互补的食物资源促使草地贪夜蛾种群区域性迁移为害，防治更为困难。其四，我国处于东亚季风区内，冬季盛行东北气流，夏季盛行西南气流，这也就形成了草地贪夜蛾在我国北扩东进的迁飞格局。其五，泰国、越南、老挝和缅甸等境外虫源的持续输入客观上也促使了草地贪夜蛾在我国境内的暴发为害(“草地贪夜蛾的生物学特性、发展趋势及防控对策”，郭井菲等，应用昆虫学报，2019年第56卷第3期，第363页右栏第2段第1行至倒数第1行，公开日2019年05月26日)。
目前，草地贪夜蛾的防治主要采用传统的邻酰胺基苯甲酰胺类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等化学农药防治，但在长期的选择压力下，草地贪夜蛾已对上述药剂产生了不同程度的抗药性，化学农药常规施药倍数已很难对草地贪夜蛾进行有效防治。
近年来，随着国家对生态安全以及食品安全问题的重视，为了降低传统化学农药抗药性增加所造成的危害，以及应对现代社会对食品安全性问题的重视，发展草地贪夜蛾绿色防治技术十分必要。细菌、真菌、病毒以及天敌等生物农药一般具有特异性强、易降解、低残留、环境友好、不易产生抗性等特点，在实际农业生产中已成为一种重要的绿色生态植保措施。
目前，活体微生物农药等新型杀虫剂已广泛应用于实际农业生产，但是现有的防治草地贪夜蛾的昆虫病原真菌杀虫剂在实际应用中，对草地贪夜蛾的防治效果不佳。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种对草地贪夜蛾的防治效果好的药剂，该药剂中的绿僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
杀草地贪夜蛾的药剂，包括绿僵菌和细菌。
所述杀草地贪夜蛾是指物质提高昆虫纲，有翅亚纲，鳞翅目，夜蛾科，灰翅夜蛾属草地贪夜蛾种昆虫的死亡率或抑制其生长率的能力。
发明人在研究过程中意外发现，绿僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
进一步，所述绿僵菌为金龟子绿僵菌。
进一步，所述金龟子绿僵菌为金龟子绿僵菌CQMa421。
进一步，所述细菌为苏云金芽孢杆菌。
进一步，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。
进一步，绿僵菌和细菌的质量比为1-5:5-9。
进一步，所述药剂为可湿性粉剂。
进一步，所述药剂还包括分散剂和/或润湿剂和/或稳定剂和/或紫外光保护剂和/或载体。
进一步，所述分散剂包括木质素磺酸钠、亚甲基双萘磺酸钠(英文简称NNO)、分散剂HK-2302或甲基萘磺酸钠的甲醛缩合物(英文简称MF)。
进一步，所述润湿剂包括Morwet EFW、十二烷基苯磺酸钠、洗衣粉或拉开粉。
进一步，所述稳定剂包括梭甲基纤维素钠或黄原胶。
进一步，所述紫外光保护剂包括腐殖酸、全脂奶粉、梭甲基纤维素或维生素C。
进一步，所述载体包括硅藻土、轻质碳酸钙或白炭黑。
进一步，所述药剂，以质量份计，包括绿僵菌与细菌共计40-50份、分散剂5-10份和/或润湿剂5-10份和/或稳定剂0.5-1.0份和/或紫外光保护剂0.5-1.0份和/或载体28-49份。
本发明的目的还在于保护所述药剂的制备方法，其包括以下步骤：将原料混合均匀，即得。
本发明的有益效果在于：
本发明的药剂对草地贪夜蛾的防治效果好。
本发明的药剂中的绿僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的协同增效作用。
本发明的药剂速效性好，其致死中时为3.58-3.69d。
本发明的药剂持效性好，用药后7d草地贪夜蛾的死亡率可达89.44％-90.24％。
本发明的药剂害虫不易产生抗药性。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
以下金龟子绿僵菌CQMa421，由重庆大学基因工程实验室分离并提供，其活孢量为400亿个孢子/g；
以下苏云金芽孢杆菌原药由市售得到，其菌种类型苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种，生物效价为40000-60000IU/mg。
实施例1
绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为5:5，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例2
绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为4:6，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例3
绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为3:7，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例4
绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为2:8，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例5
绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为1:9，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例6
苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：称取苏云金芽孢杆菌原药，添加量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述苏云金芽孢杆菌的具体制备方法为：
将苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例7
绿僵菌可湿性粉剂，具体组成为：称取金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉，添加量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述绿僵菌可湿性粉剂的具体制备方法为：
将金龟子绿僵菌CQMa421孢子粉以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述绿僵菌可湿性粉剂。
室内生测复配联合毒力测定试验：
检测绿僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂(即实施例1-5)、苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂(即实施例6)和绿僵菌可湿性粉剂(即实施例7)对草地贪夜蛾的毒力，并计算共毒系数，测试结果如表1所示；
供试虫源：于2019年6月在自云南省江城宝藏乡玉米地采集草地贪夜蛾幼虫，并在实验室用玉米叶人工饲养至F1代进行试验，饲养温度为26℃±1℃、相对湿度为60％-70％、光照/黑暗(16h/8h)；
试验方法：采用喷雾处理的分别测定实施例1-6制剂对草地贪夜蛾3龄虫的联合毒力作用；每处理3个重复，每重复20条幼虫；处理后为防止其相互残杀，喷药后立即将其分装放置于上口径为4cm，下口径3cm，高3cm的养虫盒内，饲喂干净的无药玉米叶片后放置于26℃±1℃，相对湿度为65％-75％的温室饲养；每天定时更换新鲜叶片，5天后观察其死活虫数，计算出各种试验浓度下的死亡率(％)；再根据剂量对数-死亡率几率值分析法，求出毒力回归方程和LC50；
联合毒力评价方法：
采用孙云沛共毒系数法：
毒力指数(TI)＝(标准药剂的LC50/供试药剂的LC50)×100
混剂实际毒力指数(ATI)＝药剂A单用的LC50/药剂A和B混用的LC50)×100
混剂理论毒力指数(TTI)＝TI(A)×a+TI(B)×b
式中，a表示药剂A在混剂中的百分含量；b表示药剂B在混剂中的百分含量。
共毒系数CTC＝(混剂实际毒力指数ATI/混剂理论毒力指数TTI)×100；
根据农业部农药检定所的规定，混剂配方增效的判断标准为：共毒系数大于120为增效作用；共毒系数80-120，为相加作用；共毒系数小于80，为拮抗作用；
以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同。
表1联合毒力测定结果
制剂 LC<sub>50</sub>(mg/ml) CTC
实施例6 3.11(0.91-6.94) --
实施例7 3.80(1.39-8.09) --
实施例1 1.76(0.45-3.73) 194.01
实施例2 1.53(0.70-3.18) 218.73
实施例3 1.41(0.83-3.11) 232.72
实施例4 1.72(0.86-4.23) 140.18
实施例5 2.19(0.91-4.21) 144.21
由表1可知，在金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌的质量比为1-5:5-9的配比范围内，两者复配，其共毒系数均大于120，均表现出协同增效作用；其中在金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌的质量比为3:7时，其共毒系数最高，达232.72。由此证明，金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金芽孢杆菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
室内毒力测定
检测实施例1-7的制剂的室内毒力，并以清水处理为空白对照；
供试虫源：于2019年6月在自云南省江城宝藏乡玉米地采集草地贪夜蛾幼虫，并在实验室用玉米叶人工饲养至F1代进行试验，饲养温度为26℃±1℃、相对湿度为60％-70％、光照/黑暗(16h/8h)；
试验方法：每处理3个重复，每重复15只幼虫；使用Potter喷雾塔，以每处理400ul药液量对幼虫进行直接喷雾；为防止其相互残杀喷药后立即将其分装放置于上口径为4cm，下口径3cm，高3cm的养虫盒内，饲喂干净的无药玉米叶片后放置于26℃±1℃，相对湿度为65％～75％的温室饲养；每天定时更换新鲜叶片，连续观察7天观察其死活虫数；供药后每天观察其死活虫数，计算出死亡率(％)；并用DPS软件统计致死中时(LT50)；
以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同；结果如表2所示。
表2室内毒力检测结果
制剂 药后3d 药后4d 药后5d 药后6d 药后7d LT<sub>50</sub>(d)
实施例1 45.54％ 68.38％ 81.05％ 85.70％ 89.78％ 3.58
实施例2 47.55％ 69.73％ 82.02％ 86.37％ 90.11％ 3.63
实施例3 47.58％ 72.13％ 85.17％ 88.37％ 90.24％ 3.67
实施例4 47.78％ 71.43％ 83.72％ 87.67％ 89.79％ 3.68
实施例5 47.48％ 67.33％ 79.07％ 86.97％ 89.44％ 3.69
实施例6 37.78％ 52.75％ 64.46％ 78.47％ 80.24％ 4.61
实施例7 16.78％ 36.49％ 46.91％ 49.84％ 58.66％ 5.58
空白对照 0 0 0 0 0 --
由表2可知，与实施例6和实施例7相比，实施例1-5的制剂的死亡率得到了显著提高，致死中时LT50缩短了1-2天。由此证明，金龟子绿僵菌CQMa421和苏云金芽孢杆菌联合使用对草地贪夜蛾的室内毒力明显高于绿僵菌CQMa421单剂和苏云金芽孢杆菌单剂的毒力，杀虫时间明显缩短。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.杀草地贪夜蛾的药剂，其特征在于，包括绿僵菌和细菌。
2.根据权利要求1所述的药剂，其特征在于，所述绿僵菌为金龟子绿僵菌。
3.根据权利要求2所述的药剂，其特征在于，所述金龟子绿僵菌为金龟子绿僵菌CQMa421。
4.根据权利要求1-3任一项所述的药剂，其特征在于，所述细菌为苏云金芽孢杆菌。
5.根据权利要求4所述的药剂，其特征在于，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。
6.根据权利要求1-5任一项所述的药剂，其特征在于，绿僵菌和细菌的质量比为1-5:5-9。
7.根据权利要求1-6任一项所述的药剂，其特征在于，所述药剂为可湿性粉剂。
8.根据权利要求7所述的药剂，其特征在于，还包括分散剂和/或润湿剂和/或稳定剂和/或紫外光保护剂和/或载体。
9.根据权利要求所述的药剂，其特征在于，以质量份计，包括绿僵菌与细菌共计40-50份、分散剂5-10份和/或润湿剂5-10份和/或稳定剂0.5-1.0份和/或紫外光保护剂0.5-1.0份和/或载体28-49份。
10.权利要求1-9任一项所述药剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将原料混合均匀，即得。
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