CN110398410A - 多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法 - Google Patents

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Abstract

本发明申请属于中药制备技术领域，具体公开了一种多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，包括以下步骤：(1)将取多花黄精清洗干净，清洗干净后挑选杂质，除去坏的部分以及茎和须根；最后将处理干净的鲜多花黄精切成片，70℃烘箱干燥；(2)取一定量粗制多花黄精，加入清水淹没黄精，经过九次黄精蒸制得到粗制多花黄精；(3)取已称量粗制多花黄精提纯得到精制黄精；(4)利用金属测定方法测定多花黄精中的金属元素含量。本发明主要用于研究多花黄精中的金属元素含量，解决现有技术中对多花黄精研究不够深入给使用多花黄精造成影响的问题。

Description

多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法
技术领域
本发明属于中药制备技术领域，具体公开了一种多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法。
背景技术
黄精为百合科植物滇黄精、黄精或多花黄精的干燥根茎。按形状不同，习称“大黄精”、“鸡头黄精”、“姜形黄精”。在我国临床实践中，黄精作为一种传统而有价值的中药有着悠久的历史，具有补脾、润肺、益肾的功能。生黄精有麻舌感，刺激喉咙。蒸制后不仅增强了黄精补脾肺和对肾脏的作用，而且去除了麻舌感，避免了刺激喉咙。
黄精的炮制方法有很多。但是，列入2015年版《中国药典》的黄精炮制品规格只包括黄精和酒黄精。目前，对黄精炮制研究较多，但针对炮制对多花黄精中微量金属元素的含量变化影响研究不够深入，这样给使用多花黄精造成影响。
发明内容
本发明的目的在于提供一种多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，以解决现有技术中对多花黄精研究不够深入给使用多花黄精造成影响的问题。
为了达到上述目的，本发明的技术方案为：多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，包括以下步骤：
(1将取多花黄精清洗干净，清洗干净后挑选杂质，除去坏的部分以及茎和须根；最后将处理干净的鲜多花黄精切成片，70℃烘箱干燥；
(2)取一定量粗制多花黄精，加入清水淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，开大火浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净；二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精；第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精；
(3)取已称量粗制多花黄精于塑料筐中，加入黄精重量20％黄酒淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净；二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精；第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精；
(4)清蒸九蒸九制多花黄精，取已称量粗制多花黄精于塑料筐中，加入黄精重量20％黄酒淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净；二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精；第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精；
(5)利用金属测定方法测定多花黄精中的金属元素含量。
进一步，金属测定方法包括消解法或水煮法。
进一步，步骤(5)中水煮法包括以下步骤，使用电子天平预热一小时后，精密称取生品及一至九蒸多花黄精10g于锥形瓶中，用纯化水煎煮法回流提取2次，第一次加50mL纯化水煎煮1.5小时，第二次加20mL纯化水煎煮1.0小时，过滤，合并2次滤液，取水煎液3ml进行消解后测定，可得到水煎液中各元素的含量。
进一步，步骤(5)中消解法包括以下步骤，将生品及九蒸九制多花黄精用70℃烘箱干燥，粉碎机粉碎过2号筛；电子天平预热一小时后，精密称取0.5g样品粉末于消解罐中，加入5mL65％硝酸，预消解后按微波消解仪消解条件进行微波消解，微波消解后的溶液用纯化水定容至25mL，混匀，待测；在原子吸收分光光度计测定条件下，采用火焰原子吸收分光光度计分别测定生品及九蒸九制黄精中铜、铁、镁和锰标准溶液吸光度值；并分别以其金属元素溶液的质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，计算各元素的标准曲线方程，然后根据线性方程计算中药样品中各金属元素的含量。
进一步，步骤(2)中鲜黄精蒸煮55-60分钟。
本技术方案的工作原理及有益效果在于：
(1)多花黄精经过清蒸及酒制后，降低了对人体有害的铜元素含量，而对人体有益的铁，镁，锰这四个微量元素含量是增加的，说明了黄精炮制的必要性；但是黄精炮制品中每一制间各金属元素含量并无明显变化规律，是一个令人深思的问题，可能其中涉及到很多因素，例如蒸煮时的火候，蒸煮时间，还有蒸煮液的多少等因素，导致炮制后的黄精金属元素含量并没有特定规律；所以需要研究。
(2)探索炮制过程中微量元素的含量变化可以更科学的说明黄精炮制的药理价值及意义，为提高和完善黄精炮制的质量控制体系提供依据。
附图说明
图1是本发明多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法实施例的消解法Cu元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图2是本发明实施例中消解法Fe元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图3是本发明实施例中消解法Mg元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图4是本发明实施例中消解法Mn元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图5是本发明实施例中水煮法Cu元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图6是本发明实施例中水煮法Fe元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图7是本发明实施例中水煮法Mg元素不同炮制阶段含量变化示意图；
图8是本发明实施例中水煮法Mn元素不同炮制阶段含量变化示意图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
本发明中，多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，包括以下步骤：
(1)将从黄精种植基地购买的鲜多花黄精进行浸泡，用铁锨搅动使泥土易于脱落，用铁锨将多花黄精捞起放于塑料筐中，并用高压水枪进行再次清洗，清洗干净后挑选杂质，除去坏的部分以及茎和须根等。最后将处理干净的鲜多花黄精切成片，70℃烘箱干燥。
(2)取一定量粗制多花黄精(鲜黄精蒸煮约60分钟)于塑料筐中，加入清水淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，开大火浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净。二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精。第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精。
(3)取已称量粗制多花黄精于塑料筐中，加入黄精重量20％黄酒淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净。二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精。第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精。
(4)利用金属测定方法测定多花黄精中的金属元素含量。
水煮法包括以下步骤，使用电子天平预热一小时后，精密称取生品及一至九蒸多花黄精10g于锥形瓶中，用纯化水煎煮法回流提取2次，第一次加50mL纯化水煎煮1.5小时，第二次加20mL纯化水煎煮1.0小时，过滤，合并2次滤液，取水煎液3ml进行消解后测定，可得到水煎液中各元素的含量。
消解法包括以下步骤，将生品及九蒸九制多花黄精用70℃烘箱干燥，粉碎机粉碎过2号筛；电子天平预热一小时后，精密称取0.5g样品粉末于消解罐中，加入5mL65％硝酸，预消解后按微波消解仪消解条件进行微波消解，微波消解后的溶液用纯化水定容至25mL，混匀，待测；在原子吸收分光光度计测定条件下，采用火焰原子吸收分光光度计分别测定生品及九蒸九制黄精中铜、铁、镁和锰标准溶液吸光度值；并分别以其金属元素溶液的质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，计算各元素的标准曲线方程，然后根据线性方程计算中药样品中各金属元素的含量。
按表3配制系列标准溶液，在步骤(4)的试验方法下测定铜、铁、镁和锰系列标准溶液的吸光度值，并以各元素的质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
表2消解法所用清蒸和酒制不同炮制阶段黄精量(单位：g)
零制 一制 二制 三制 四制 五制 六制 七制 八制 九制
清蒸 0.5086 0.5157 0.5046 0.5035 0.5155 0.5094 0.5011 0.5041 0.5048 0.5056
酒制 0.5086 0.5062 0.5042 0.5032 0.5057 0.5134 0.5039 0.5110 0.5019 0.5049
表3水煮法所用清蒸和酒制不同炮制阶段黄精量(单位：g)
零制 一制 二制 三制 四制 五制 六制 七制 八制 九制
清蒸 10.1841 10.2339 10.0831 10.0290 10.0544 10.1275 10.2452 10.0413 10.2293 10.0572
酒制 10.1841 10.0606 10.0626 10.1806 10.0393 10.0641 10.0243 10.1175 10.2626 10.2324
表1标准溶液浓度
表4标准溶液和标准曲线线性方程
元素 标准溶液浓度(ug/mL) 线性方程 线性相关系数(R<sup>2</sup>)
Cu 0～1 y＝0.0002+0.1168x 1.0000
Fe 0～1 y＝0.0013+0.0561x 0.9979
Mg 0～1 y＝0.0459+0.5297x 0.9849
Mn 0～1 y＝0.0004+0.1558x 0.9976
本实施例中对多花黄精不同炮制阶段消解法测定金属含量变化进行测定，如下：利用消解法测定清蒸黄精不同炮制阶段金属含量变化。
表5清蒸九制黄精不同炮制阶段金属吸光度值
表6清蒸九制黄精不同炮制阶段金属含量(ug/mL)
本实施例中利用消解法测定酒蒸黄精不同炮制阶段金属含量变化，如下：
表7酒蒸九制黄精不同炮制阶段金属吸光度值
表8酒蒸九制黄精不同炮制阶段金属含量(ug/mL)
本实施例中，利用消解法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段铜元素含量变化
由图1可知，多花黄精经清蒸及酒制后，铜元素含量降低。但炮制后每一制之间铜元素含量无特定变化规律。此图中第九制后铜元素含量清蒸品比酒制品要低。
消解法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段铁元素含量变化
由图2可知，多花黄精经过九次炮制后，铁元素含量较生品低。但炮制后每一制之间铁元素含量无特定变化规律。此图中第九制后铁元素含量清蒸品比酒制品要高。
消解法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段镁元素含量变化
由图3可知，多花黄精经过九蒸九制后，镁元素含量与生品相比几乎无明显变化。且随着炮制次数的增加，镁元素含量有增加的趋势。
消解法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段锰元素含量变化
由图4可知，多花黄精经过九次炮制后，锰元素含量较生品低。但炮制后每一制之间锰元素含量无特定变化规律。此图中第九制后锰元素含量清蒸品比酒制品要低。
多花黄精不同炮制阶段水煮法测定金属含量变化
水煮法测定清蒸黄精不同炮制阶段金属含量变化
表9清蒸黄精不同炮制阶段金属含量吸光度值
表10清蒸黄精不同炮制阶段金属含量
水煮法测定酒蒸黄精不同炮制阶段金属含量变化
表11酒制黄精不同炮制阶段金属含量吸光度值
表12酒制黄精不同炮制阶段金属含量
水煮法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段铜元素含量变化；由图5可知，多花黄精经清蒸及酒制后，水煮液中铜元素含量降低。但炮制后每一制之间铜元素含量无特定变化规律。此图中第九制后铜元素含量清蒸品比酒制品要高。
水煮法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段铁元素含量变化；由图6可知，多花黄精经清蒸及酒制后，水煮液中铁元素含量增加。但炮制后每一制之间铁元素含量无特定变化规律。此图中第九制后铁元素含量清蒸品比酒制品要高。
水煮法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段镁元素含量变化；由于后期原子吸收分光光度计坏掉，多花黄精清蒸炮制品水煮液的Mg元素含量还没有检测，图7中只能看出经过酒制后的多花黄精水煮液中Mg元素含量总体上比没有炮制过的含量要高。
水煮法测定清蒸和酒制黄精不同炮制阶段锰元素含量变化；由图8可知，多花黄精经清蒸及酒制后，水煮液中锰元素含量增加。但炮制后每一制之间锰元素含量无特定变化规律。此图中第九制后锰元素含量清蒸品比酒制品要低。
多花黄精经清蒸及酒制后，铜元素含量降低，且煎煮液中铜元素含量也较生品煎煮液低。多花黄精经过清蒸及酒制九次炮制后，铁元素含量较生品低；但清蒸及酒制黄精水煮液中铁元素含量高于生品水煮液所含的铁元素。多花黄精经过九蒸九制后，镁元素含量与生品相比几乎无明显变化；但酒制后水煮液中镁元素含量高于生品水煮液。多花黄精经过九次炮制后，锰元素含量较生品低；但清蒸及酒制水煮液中锰元素含量高于生品水煮液。可是黄精炮制品中每一制间各金属元素含量并无明显变化规律，是一个令人深思的问题，可能其中涉及到很多因素，例如蒸煮时的火候，蒸煮时间，还有蒸煮液的多少等因素，导致炮制后的黄精金属元素含量并没有特定规律。
铜对神经系统和造血系统等有毒害作用,是目前公认的对人体有害的金属元素,多花黄精经过清蒸及酒制后降低了铜元素含量，减轻了对人体的不良影响。锰、铁等均是机体必需的微量元素，但摄入过量也可导致神经系统等的功能障碍,锰中毒已被列为职业性中毒之一。而多花黄精经过清蒸及酒制后水煮液含量都高于生品水煮液，说明其煎煮液在一定程度上能增加人体对这些微量元素的摄入。镁是人体细胞内的主要阳离子，其含量在人体中仅次于钙、钠、钾，科研结果表明人体缺少镁会导致脑血管疾病、高血压病等，虽然多花黄精经过九蒸九制后，镁元素含量与生品相比几乎无明显变化，但酒制后水煮液中镁元素含量高于生品水煮液，煎煮液可增加人体对镁元素的摄入。
以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。

Claims (5)

1.多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将取多花黄精清洗干净，清洗干净后挑选杂质，除去坏的部分以及茎和须根；最后将处理干净的鲜多花黄精切成片，70℃烘箱干燥；
(2)取一定量粗制多花黄精，加入清水淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，开大火浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净；二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精；第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精；
(3)取已称量粗制多花黄精于塑料筐中，加入黄精重量20％黄酒淹没黄精，浸泡一晚后进行第一次蒸制，中途要翻动黄精使其闷润均匀，次日将黄精置于竹制蒸笼中开大火蒸至有蒸汽冒出转小火，第一次蒸制时间为8小时，浓缩余汁，烘干一制黄精并留样，剩余黄精加浓缩余汁闷润至辅料吸净；二至八制黄精蒸制时间为6小时，其余操作同一制黄精；第九制黄精蒸制时间为3小时，其余操作同一制黄精；
(4)利用金属测定方法测定多花黄精中的金属元素含量。
2.根据权利要求1所述的多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，其特征在于，金属测定方法包括消解法或水煮法。
3.根据权利要求2所述的多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，其特征在于，步骤(4)中水煮法包括以下步骤，使用电子天平预热一小时后，精密称取生品及一至九蒸多花黄精10g于锥形瓶中，用纯化水煎煮法回流提取2次，第一次加50mL纯化水煎煮1.5小时，第二次加20mL纯化水煎煮1.0小时，过滤，合并2次滤液，取水煎液3ml进行消解后测定，可得到水煎液中各元素的含量。
4.根据权利要求2所述的多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，其特征在于，步骤(4)中消解法包括以下步骤，将生品及九蒸九制多花黄精用70℃烘箱干燥，粉碎机粉碎过2号筛；电子天平预热一小时后，精密称取0.5g样品粉末于消解罐中，加入5mL65％硝酸，预消解后按微波消解仪消解条件进行微波消解，微波消解后的溶液用纯化水定容至25mL，混匀，待测；在原子吸收分光光度计测定条件下，采用火焰原子吸收分光光度计分别测定生品及九蒸九制黄精中铜、铁、镁和锰标准溶液吸光度值；并分别以其金属元素溶液的质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，计算各元素的标准曲线方程，然后根据线性方程计算中药样品中各金属元素的含量。
5.根据权利要求1所述的多花黄精不同炮制阶段微量元素含量变化研究方法，其特征在于，步骤(2)中鲜黄精蒸煮55-60分钟。
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