CN110331186A - 一种5’-核苷酸酶质控品 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种5’‑核苷酸酶质控品，属于质控品技术领域。该质控品具体组成成分如下：缓冲液10‑100mmol/L，防腐剂0.1‑1％，保护剂1 0.1‑5％，保护剂2 0.1‑5％，表面活性剂0.1‑2mL/L，基质血清1L，5’‑核苷酸酶45～72U/L，所述的缓冲液为TAPSO缓冲液、磷酸二氢钾‑氢氧化钠缓冲液、巴比妥缓冲液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液、PIPES缓冲液、磷酸盐缓冲液中的一种或多种；所述的保护剂1和保护剂2不同，分别选自葡萄糖、乳糖、麦芽糖、麦芽糖糊精或精氨酸中的一种。本发明的5’‑核苷酸酶质控品效期能够达到24个月。
Description
技术领域
本发明属于质控品技术领域，具体涉及一种5’-核苷酸酶质控品。
背景技术
5’-核苷酸酶(5’-NT)测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。血清5’-NT升高主要见于肝胆系统疾病，如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其水平变化与碱性磷酸酶(ALP)一致。但骨骼系统疾病，如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等，通常ALP水平升高，而5’-NT正常。因此ALP和5’-NT同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。
生化用5’-核苷酸酶质控品是指在开展人血清或血浆中5’-核苷酸酶检测项目在临床生化检测使用过程中对检测系统进行把握和控制的一种质量控制物质；在临床的用中非常的广泛；目前使用的5’-核苷酸酶质控品多为冻干剂型，由于血清中5’-核苷酸酶容易发生衰减，无法长期保存，因此能够发明一种长效稳定的5’-核苷酸酶质控品，具有非常好的临床实用性，也非常利于临床的推广及发展。现有的5’-核苷酸酶质控品效期一般为12个月，时间较短。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有的5’-核苷酸酶质控品效期较短的问题，而提供一种5’-核苷酸酶质控品。
本发明提供一种5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
所述的缓冲液为TAPSO缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、巴比妥缓冲液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液、PIPES缓冲液、磷酸盐缓冲液中的一种或多种；
所述的保护剂1和保护剂2不同，分别选自葡萄糖、乳糖、麦芽糖、麦芽糖糊精或精氨酸中的一种。
优选的是，所述的防腐剂为MIT、proclin 150、proclin 200、proclin 300、proclin 950、迭氮钠中的一种或多种。
优选的是，所述的表面活性剂为EMULGEN A-60、EMULGEN A-90、EMULGEN B-66、AMPHITOL 86B、AMPHITOL 24B中的一种或多种。
优选的是，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
优选的是，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
优选的是，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
本发明的有益效果
1)本发明选用的缓冲液，适应性广，同时，通过防腐剂、稳定剂的综合作用，有效保护5’-核苷酸酶稳定性。实验结果表明：本发明的5’-核苷酸酶质控品效期能够达到24个月。
2)本发明基质血清的加入，能够有效提高5’-核苷酸酶的热稳定性，避免环境温度对质控品产生影响。
3)本发明表面活性剂的使用提高了质控品的通透性。
4)本发明的防腐剂具有光谱抗菌活性，适用PH范围广，能够避免微生物对质控品的造成破坏，使得酶失活，基质血清提高热稳定性，并与保护剂组合提高产品的稳定性。
附图说明
图1是实施例1、2、3制备得到的5’-核苷酸酶质控品在25个月内检测的稳定性跟踪图。
图2是实施例1、2、3制备得到的5’-核苷酸酶质控品在25个月内的衰减变化图。
图3是实施例1、2、3制备得到的5’-核苷酸酶质控品高温37℃加速7天、11天、15天效期加速模拟衰减变化。
图4是实施例1、2、3制备得到的5’-核苷酸酶质控品复溶后2-8℃条件下开封6天、8天效期模拟衰减变化。
图5是实施例1、2、3制备得到的5’-核苷酸酶质控品复溶分装后-20℃条件下31天开封测试结果。
具体实施方式
本发明提供一种5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
所述的缓冲液为TAPSO缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、巴比妥缓冲液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液、PIPES缓冲液、磷酸盐缓冲液中的一种或多种，优选为HEPES缓冲液、MOPS缓冲液或TAPSO缓冲液；本发明选用的缓冲液，能够有效的稳定质控品的PH值，保护5’-核苷酸酶稳定性。
所述的保护剂1和保护剂2不同，分别选自葡萄糖、乳糖、麦芽糖、麦芽糖糊精或精氨酸中的一种。
按照本发明，所述的防腐剂优选为MIT、proclin 150、proclin 200、proclin 300、proclin 950、迭氮钠中的一种或多种，更优选为Proclin200、MIT或Proclin300。本发明的防腐剂具有光谱抗菌活性，适用PH范围广，能够避免微生物对质控品的造成破坏，使得5’-核苷酸酶失活，提高产品的稳定性，使得效期达24个月。
按照本发明，所述的表面活性剂优选为EMULGEN A-60、EMULGEN A-90、EMULGEN B-66、AMPHITOL 86B、AMPHITOL 24B中的一种或多种，更优选为EMULGEN B-66或EMULGEN A-90。本发明表面活性剂的添加，增加了质控品的通透性，避免质控品产生浑浊。
按照本发明，本发明中基质血清的加入，能够有效提高5’-核苷酸酶的热稳定性，避免环境温度对质控品产生影响。
本发明的5’-核苷酸酶质控品的制备，按照本领域常规工艺方法制备即可，没有特殊限制，优选为：
在干净的配制容器中加入基质血清，然后向其中按顺序依次加入缓冲液、防腐剂、保护剂1、保护剂2、表面活性剂，依次搅拌至完全溶解；使用0.22um滤膜过滤一次，用稀HCL溶液或0.1％的NaOH溶液调节PH值至7.5-7.6(20±0.5℃)，按浓度计算加入5’-核苷酸酶，使质控品的浓度为45～72U/L，按照1ml/瓶的规格进行分装。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述，实施例中涉及到的原料均为商购获得。
实施例1
一种长效稳定的5’-核苷酸酶质控品，组成成分如下：
该质控品的制备过程为：
在干净的配制容器中加入全批量的基质血清，然后向其中按顺序依次加入全批量的缓冲液、防腐剂、保护剂1、保护剂2、表面活性剂，依次搅拌至完全溶解；使用0.22um滤膜过滤一次。用稀HCL溶液或0.1％的NaOH溶液调节PH值至7.5-7.6(20±0.5℃)，按浓度计算加入5’-核苷酸酶，使质控品的浓度为45～72U/L。按照1ml/瓶的规格进行分装。
实施例2
一种长效稳定的5’-核苷酸酶质控品，组成成分如下：
该质控品的制备过程为：
在干净的配制容器中加入全批量的基质血清，然后向其中按顺序依次加入全批量的缓冲液、防腐剂、保护剂1、保护剂2、表面活性剂，依次搅拌至完全溶解；使用0.22um滤膜过滤一次。用稀HCL溶液或0.1％的NaOH溶液调节PH值至7.5-7.6(20±0.5℃)，按浓度计算加入5’-核苷酸酶，使质控品的浓度为45～72U/L。按照1ml/瓶的规格进行分装。
实施例3
一种长效稳定的5’-核苷酸酶质控品，组成成分如下：
该质控品的制备过程为：
在干净的配制容器中加入全批量的基质血清，然后向其中按顺序依次加入全批量的缓冲液、防腐剂、保护剂1、保护剂2、表面活性剂，依次搅拌至完全溶解；使用0.22um滤膜过滤一次。用稀HCL溶液或0.1％的NaOH溶液调节PH值至7.5-7.6(20±0.5℃)，按浓度计算加入5’-核苷酸酶，使质控品的浓度为45～72U/L。按照1ml/瓶的规格进行分装。
质控品的性能评价
将实施例1、2、3制备完的冻干质控品分别平均分成24份，储存在2-8℃的环境中，选取-5’-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法法)(选自迪瑞医疗科技股份有限公司生产的试剂盒)，CS-1200全自动生化分析仪器首先用浙江夸克5’-核苷酸酶校准品进行定标，定标成功后，每3个月分别对制备好的质控品实施检测，连续检测25个月，观察质控品的结果的变化情况，并形成质控品稳定性跟踪图(图1)，并分别在零时间通道下测试，计算衰减，并形成衰减变化图(图2)。高温37℃加速7天、11天、15天效期加速模拟(图3)，复溶后2-8℃条件下开封6、8天效期模拟(图4)，复溶分装后-20℃条件下31天效期模拟(图5)。
从图1-5可以看出，本发明的质控品在2-8℃贮存至少可稳定24个月性能不发生改变，37℃至少可稳定15天性能不发生改变，复溶后2-8℃至少可稳定7天性能不发生改变，复溶分装后-20℃条件下至少可稳定30天性能不发生改变，本发明可用于全自动生化分析仪检测设备上使用。
应当理解的是，本发明不限于上述的举例，对本领域的普通技术人员来说，可根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (6)
1.一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，该质控品具体组成成分如下：
所述的缓冲液为TAPSO缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、巴比妥缓冲液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液、PIPES缓冲液、磷酸盐缓冲液中的一种或多种；
所述的保护剂1和保护剂2不同，分别选自葡萄糖、乳糖、麦芽糖、麦芽糖糊精或精氨酸中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，所述的防腐剂为MIT、proclin 150、proclin 200、proclin 300、proclin 950、迭氮钠中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，所述的表面活性剂为EMULGEN A-60、EMULGEN A-90、EMULGEN B-66、AMPHITOL 86B、AMPHITOL 24B中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
5.根据权利要求1所述的一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
6.根据权利要求1所述的一种5’-核苷酸酶质控品，其特征在于，所述的5’-核苷酸酶质控品，该质控品具体组成成分如下：
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