CN110248939B - 作为rho-激酶抑制剂的酪氨酸酰胺衍生物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及抑制Rho激酶的式I的化合物，其为二环二氢嘧啶‑甲酰胺衍生物，制备这样的化合物的方法，含有它们的药物组合物及其治疗用途。具体地，本发明的化合物可用于治疗许多与ROCK酶机制有关的障碍，诸如肺疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
Description
发明领域
本发明涉及抑制Rho激酶的化合物(在下文中称作ROCK抑制剂)；具体地，本发明涉及为酪氨酸酰胺衍生物的化合物、制备这样的化合物的方法、含有它们的药物组合物及其治疗用途。
更具体地，本发明的化合物是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和/或ROCK-II同种型(isoforms)的活性或功能的抑制剂。
因此，本发明的化合物可用于治疗许多与ROCK酶机制有关的障碍，诸如肺疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
发明背景
Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)属于丝氨酸-苏氨酸激酶的AGC(PKA/PKG/PKC)家族。已经描述了ROCK的两种人同种型，ROCK-I(也被称作p160ROCK或ROKβ)和ROCK-II(ROKα)是大约160kDa蛋白，其含有一个N-端Ser/Thr激酶结构域，继之以一个卷曲螺旋结构、一个普列克底物蛋白同源性结构域和在C-端处的一个富含半胱氨酸的区域(Riento,K.；Ridley,A.J.Rocks:multifunctional kinases in cellbehaviour.Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2003,4,446-456)。
ROCK-II和ROCK-I都在许多人和啮齿动物组织中表达，包括心脏、胰腺、肺、肝、骨骼肌、肾和脑(Riento和Ridley,2003)。已经将ROCK鉴别为RhoA的效应物分子，且参与多种细胞功能，包括肌动蛋白组构、细胞粘附、细胞迁移和胞质分裂(Riento和Ridley,2003；Feng Y,LoGrasso PV,Defert O,Li R.Rho Kinase(ROCK)Inhibitors and TheirTherapeutic Potential.J Med Chem.2016；59(6):2269-300)。
它还通过效应物诸如肌球蛋白轻链磷酸酶(MLC)的磷酸化参与调节平滑肌收缩。实际上，ROCK在由几种调节血管和/或气道中的平滑肌细胞收缩的药剂介导的信号转导中起重要作用，所述药剂包括血清素、血管紧张素II、内皮缩血管肽I、血小板衍生的生长因子(PDGF)和硬骨鱼紧张肽II(Li Q,Xu Y,Li X,Guo Y,Liu G.Inhibition of Rho-kinaseameliorates myocardial remodeling and fibrosis in pressure overload andmyocardial infarction:role of TGF-β1-TAK1.Toxicol Lett.2012；211(2):91-7；ShiJ,Wei L.Rho kinases in cardiovascular physiology and pathophysiology:theeffect of fasudil.J Cardiovasc Pharmacol.2013；62(4):341-54)。
迄今为止，在日本和/或在中国仅两种ROCK抑制剂被批准用于临床应用：法舒地尔(Suzuki Y,Shibuya M,Satoh S,Sugiyama H,Seto M,Takakura K.Safety and efficacyof fasudil monotherapy and fasudil-ozagrel combination therapy in patientswith subarachnoid hemorrhage:sub-analysis of the post-marketing surveillancestudy.Neurol Med Chir(Tokyo).2008；48(6):241-7)在1995年被批准用于治疗脑血管痉挛，和ripasudil(Tanihara H,Inoue T,Yamamoto T,Kuwayama Y,Abe H,Fukushima A,Suganami H,Araie M；K-115Clinical Study Group.One-year clinical evaluation of0.4％ripasudil(K-115)in patients with open-angle glaucoma and ocularhypertension.Acta Ophthalmol.2016；94(1):e26-34)在2014被批准用于治疗青光眼。
ROCK介导血管收缩和内皮功能障碍，它们是包括高血压心脏病、冠状动脉疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、雷诺现象、中风和青光眼在内的几种心血管疾病的两个关键组分(Hartmann S,Ridley AJ,Lutz S.The Function of Rho-Associated Kinases ROCK1andROCK2in the Pathogenesis of Cardiovascular Disease.Front Pharmacol.2015Nov20；6:276)。具体地，来自临床试验的药理学数据表明，ROCK抑制剂会降低眼内压并在青光眼患者中表现出有益效果(Inoue T,Tanihara H.Rho-associated kinase inhibitors:anovel glaucoma therapy.Prog Retin Eye Res.2013；37:1-12)。在具有肺性高血压(pulmonary hypertension)的患者中，在肺组织和循环的嗜中性粒细胞中的ROCK活性与对照相比显著更高(Duong-Quy S,Bei Y,Liu Z,Dinh-Xuan AT.Role of Rho-kinase andits inhibitors in pulmonary hypertension.Pharmacol Ther.2013；137(3):352-64)。在嗜中性粒细胞ROCK活性与肺性高血压的严重程度和持续时间之间建立了显著关联(Duong-Quy等人2013)。ROCK还可以促进心脏纤维化、肥大和随后心力衰竭的发展。使用ROCK抑制剂(诸如法舒地尔)的最近实验研究已经证实ROCK抑制在心脏重塑中的益处(Li等人2012)。缺乏每种ROCK同种型的小鼠也在心脏重塑的多种病理学模型中表现出减少的心肌纤维化(Shimizu T1,Liao JK.Rho Kinases and Cardiac Remodeling.Circ J.2016；80(7):1491-8)。
对于脑血管障碍的治疗，ROCK也是一种有前途的靶标。实际上，临床前研究指示，Rho激酶抑制可以减少颅内动脉瘤和大脑海绵状畸形的形成/生长/破裂(Bond LM,SellersJR,McKerracher L.Rho kinase as a target for cerebral vasculardisorders.Future Med Chem.2015；7(8):1039-53)。
RhoA-ROCK信号传递在维持松弛阴茎状态中是重要的，且ROCK信号传递的药理学抑制会以独立于NO的方式增强平滑肌松弛，从而提示，ROCK是治疗勃起功能障碍的新治疗靶标(Sopko NA,Hannan JL,Bivalacqua TJ.Understanding and targeting the Rhokinase pathway in erectile dysfunction.Nat Rev Urol.2014；11(11):622-8)。
ROCK活性是白血球-血小板-内皮相互作用、白血球外渗和水肿中的重要信号传递机制。内皮细胞中Rho激酶的过度活化会造成有利于炎症细胞募集的细胞-细胞连接部的破坏所引起的泄漏。总之，该证据指向ROCK在与急性和慢性炎症有关的病理学状况以及自身免疫疾病中的作用。具体地，ROCK途径对自身免疫和自身免疫病的贡献是新出现的(Zanin-Zhorov A,Flynn R,Waksal SD,Blazar BR.Isoform-specific targeting of ROCKproteins in immune cells.Small GTPases.2016；7(3):173-177)。这得到了ROCK信号传递在T-细胞发育和功能(包括粘附、趋化性应答和抗原依赖性活化)中的作用以及ROCK抑制在类风湿性关节炎和狼疮的实验模型中的有益效果的证实的支持(LoGrasso,P.；Feng,Y.Rho kinase inhibitors and their application to inflammatory disorders.Curr.Top.Med.Chem.2009；9,704-723；Yoshimi,E.；Kumakura,F.；Hatori,C.；Hamachi,E.；Iwashita,A.；Ishii,N.；Terasawa,T.；Shimizu,Y.；Takeshita,N.Antinociceptiveeffects of AS1892802,a novel rho kinase inhibitor,in rat models ofinflammatory and noninflammatory arthritis.J.Pharmacol.Exp.Ther.2010,334,955-963；Stirzaker RA,Biswas PS,Gupta S,Song L,Bhagat G,Pernis AB.Administrationof fasudil,a ROCK inhibitor,attenuates disease in lupus-prone NZB/W F1femalemice.Lupus.2012年5月；21(6):656-61)。法舒地尔对T-细胞迁移的抑制作用可能扩大它作为多发性硬化的新疗法的临床应用(Yu JZ,Ding J,Ma CG,Sun CH,Sun YF,Lu CZ,XiaoBG.Therapeutic potential of experimental autoimmune encephalomyelitis byFasudil,a Rho kinase inhibitor.J Neurosci Res.2010；88(8):1664-72)。积累的证据也证实，ROCK在调节炎性肠病(IBD)的发病机制的3个疾病因素中起关键作用：肠屏障的破坏，肠内容物向粘膜免疫细胞的暴露，和异常的免疫应答(Huang Y,Xiao S,和JiangQ.Role of Rho kinase signal pathway in inflammatory bowel disease Int J ClinExp Med.2015；8(3):3089-3097)。也在银屑病中观察了ROCK抑制剂的临床应用(Yiu ZZ,Warren RB.Novel Oral Therapies for Psoriasis and Psoriatic Arthritis.Am JClin Dermatol.2016；17(3):191-200)。
几个系列的证据表明，ROCK在糖尿病的病理学中起作用。实际上，ROCK1KO小鼠表现出胰岛素抗性且可以具有葡萄糖诱导的胰岛素分泌的显著增加，从而导致高胰岛素血症(Lee D.H.,Shi J.,Jeoung N.H.,Kim M.S.,Zabolotny J.M.,Lee S.W.,等人.Targeteddisruption of ROCK1causes insulin resistance in vivo.J.Biol.Chem.2009；284,11776-11780)。另外，在1型和2型糖尿病的模型中的研究已经指示ROCKi在糖尿病肾脏疾病中的独立于血压的肾保护作用(Komers R.Rho kinase inhibition in diabetic kidneydisease.Br J Clin Pharmacol.2013；76(4):551-9)。
现在大量证据表明，ROCK参与许多促进与几种急性和慢性肺疾病(包括哮喘、COPD、支气管扩张和ARDS/ALI)有关的病理学的途径。鉴于ROCK的生物学效应，选择性抑制剂具有治疗呼吸系统疾病的许多病理学机制的潜力，诸如平滑肌高反应性、支气管收缩、气道炎症和气道重塑、神经调制和由呼吸道病毒感染引起的恶化(Fernandes LB,Henry PJ,Goldie RG.Rho kinase as a therapeutic target in the treatment of asthma andchronic obstructive pulmonary disease.Ther Adv Respir Dis.2007Oct；1(1):25-33)。实际上，Rho激酶抑制剂Y-27632会造成支气管扩张和减轻肺嗜酸性粒细胞增多运输和气道高反应性(Gosens,R.；Schaafsma,D.；Nelemans,S.A.；Halayko,A.J.Rhokinase as adrug target for the treatment of airway hyperresponsiveness in asthma.Mini-Rev.Med.Chem.2006,6,339-348)。已经在具有特发性肺纤维化(IPF)的人类中和在该疾病的动物模型中证实了肺的ROCK活化。ROCK抑制剂可以预防这些模型中的纤维化，且更重要的是，诱导已经建立的纤维化的消退，从而指示ROCK抑制剂作为阻止肺纤维化进展的潜在强效药理学试剂(Jiang,C.；Huang,H.；Liu,J.；Wang,Y.；Lu,Z.；Xu,Z.Fasudil,a rho-kinase inhibitor,attenuates bleomycin-induced pulmonary fibrosis inmice.Int.J.Mol.Sci.2012,13,8293-8307)。
积累的证据支持以下概念：ROCK通过调节许多与恶性肿瘤有关的关键细胞功能(包括致肿瘤性、肿瘤生长、转移、血管生成、肿瘤细胞凋亡/存活和化学抗性)而在肿瘤发育和进展中起重要作用(Wei L,Surma M,Shi S,Lambert-Cheatham N,Shi J.NovelInsights into the Roles of Rho Kinase in Cancer.Arch Immunol Ther Exp(Warsz).2016；64(4):259-78)。因而，指示ROCK抑制剂也作为癌症的潜在强效药理学试剂。
口服ROCK抑制剂的施用在移植物抗宿主病(GVHD)的实验模型中有效地改善临床表现(Biol Blood Marrow Transplant.2014；20(8):1104-11；Blood.2016；127(17):2144-54)。其它发现强调了Rho激酶作为合理治疗靶标来抵抗进行性核上性麻痹(PSP)和皮质基底变性(CBD)中的tau积累(Gentry等人,J Neurosci.2016；36(4):1316-23)。
在中枢神经系统的不同障碍中，存在Rho/ROCK途径的异常活化。ROCK在对成年脑和脊髓的损伤后被活化，且ROCK的抑制导致脊髓损伤以后加速的再生和增强的功能恢复(Kubo T,Hata K,Yamaguchi A,Yamashita T.Rho-ROCK inhibitors as emergingstrategies to promote nerve regeneration.Curr Pharm Des.2007；13(24):2493-9)。还已经证实Rho/ROCK途径的抑制在中风、炎症性疾病和脱髓鞘疾病、阿尔茨海默氏病和神经性疼痛的动物模型中是有效的(综述在Mueller,B.K.；Mack,H.；Teusch,N.Rho kinase,apromising drug target for neurological disorders.Nat.Rev.Drug Discovery 2005,4,387-398)。
多种化合物已经在文献中被描述为Rho激酶抑制剂。参见例如WO2004/039796；WO2006/009889；WO2010/032875；WO2009/079008；WO2014/118133。
在许多治疗领域(诸如心血管和呼吸系统疾病、勃起功能障碍、纤维化疾病、胰岛素抗性、肾衰竭、中枢神经系统障碍、自身免疫疾病和肿瘤学)中仍然存在开发新的和药理学上改善的ROCK抑制剂的潜力。
考虑到由ROCK酶介导的病理学应答的数目，继续需要这样的酶的抑制剂，其可用于治疗许多障碍。
本发明涉及新的化合物，它们是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和ROCK-II同种型的抑制剂，它们具有治疗上合乎需要的特征，特别对于一些肺疾病(包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH))是有前途的。
发明内容
本发明涉及作为ROCK抑制剂起作用的式(I)的化合物
其中X1、X2、R、R0、R1、R2、R3、R4、R5、R6和p如下面在发明详述中所报道，
涉及它们的制备方法、单独地或与一种或多种活性成分组合地包含它们和一种或多种药学上可接受的载体的药物组合物。
在一个方面，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途。
在另一个方面，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗以ROCK酶异常活性为特征和/或其中需要抑制活性(且具体地通过ROCK酶同种型相对于其它激酶的选择性抑制)的任何疾病。
此外，本发明提供了一种用于预防和/或治疗其中需要抑制ROCK酶的任何疾病的方法，所述方法包括给需要这种治疗的患者施用治疗有效量的本发明的化合物。
具体地，可以施用单独的或与其它活性成分组合的本发明的化合物用于预防和/或治疗肺疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
发明详述
本发明涉及作为Rho激酶(ROCK)的抑制剂起作用的一类化合物。
所述类别的化合物抑制ROCK酶的活性或功能，且更具体地，它们是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和ROCK-II同种型的抑制剂。本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物
其中
X1和X2在每次出现时独立地为CH基团或氮原子，
p为0或1至3的整数；
当存在时，每个R是卤素；
R0和R1独立地选自由以下组成的组：
-H，
卤素，
-NR7R8，
-CN，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
(C3-C10)环烷基，
(C2-C6)链烯基，
(C5-C7)环烯基，
(C2-C6)炔基，
(C2-C6)羟基炔基，
芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基
其中每一个都是芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基
其依次任选并独立地被一个或多个选自以下的基团取代：卤素，
-OH，
-CN，
-NR7R8，
-CH2NR7R8，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C2-C6)链烯基，
(C2-C6)炔基，
(C2-C6)羟基炔基；
R2和R3相同或不同，选自由以下组成的组：
-H，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，
(C3-C10)环烷基，
(C3-C8)杂环烷基，
芳基，
杂芳基，
芳基(C1-C6)烷基，
杂芳基(C1-C6)烷基，
(C3-C8)环烷基(C1-C6)烷基，
(C3-C8)杂环烷基(C1-C6)烷基，
所述芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基中的每一个进一步任选地被一个或多个独立地选自卤素、-CN、-OH、(C1-C8)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C10)烷氧基、芳基、芳基(C1-C6)烷基、氨基甲酰基、(C1-C6)氨基烷基、(C1-C6)羟基烷基的基团取代；或
或者，R2和R3与它们连接的氮原子一起形成单环或双环饱和或部分饱和的杂环基，优选4至6元单环基，在所述杂环基团中至少一个另外的环碳原子任选地被至少一个独立地选自N、S或O的另外的杂原子取代和/或可以带有-氧代(＝O)取代基，所述杂环基团还任选地包括螺二取代基团以及在两个相邻或邻位原子上的取代，形成另外的5至6元环状或杂环、饱和、部分饱和或芳香环；
所述杂环基团任选地依次进一步被一个或多个选自下组的基团取代：
卤素，
羟基，
-NR7R8，
-CH2NR7R8，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C2-C6)链烯基，
(C2-C6)炔基，
(C2-C6)羟基炔基，
(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，
(C1-C6)烷酰基，
氨基甲酰基，
(C3-C6)环烷基-羰基，
(C3-C6)杂环烷基-羰基，
芳基(C1-C6)烷基，
芳基烷酰基，
芳基磺酰基，
杂芳基(C1-C6)烷基，
杂芳基-羰基，
杂芳氧基，
(C3-C6)环烷基，
(C3-C8)环烷基(C1-C6)烷基
(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
芳基和杂芳基，
所述环烷基、芳基和杂芳基中的每一个进一步任选被卤素、(C1-C8)烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C6)氨基烷基、(C1-C6)氨基烷氧基、氨基甲酰基、(C1-C6)烷基磺酰基取代；
R4和R5在每次出现时独立地选自由以下组成的组：
H，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基
(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
(C3-C6)环烷基-羰基
(C3-C6)杂环烷基-羰基
芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
其中任何所述(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基依次任选和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
卤素，
-OH，
(C1-C6)烷基；
R6选自-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基；
R7和R8在每次出现时独立地选自以下组：
H，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
其中任何所述芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基依次任选和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
卤素，
-OH，
(C1-C6)烷基；或
R7和R8与它们连接的氮原子一起形成4-6元杂环基，其中所述杂环基中的至少一个另外的环碳原子可以被选自N、S或O的至少一个基团替代；所述杂环基团可进一步任选被选自以下的基团取代：
H，
-CN，
卤素，
-氧代，
-NR7R8，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
烷酰基。
定义
术语“药学上可接受的盐”表示式(I)的化合物的衍生物，其中如下适当地修饰母体化合物：用常规地认为药学上可接受的任意碱或酸，将可能存在的任意游离酸性或碱性基团转化成对应的加成盐。
所述盐的合适例子因此可以包括碱性残基诸如氨基基团的无机酸或有机酸加成盐以及酸性残基诸如羧基基团的无机碱或有机碱加成盐。
可以适当地用于制备本发明中的盐的无机碱的阳离子包含碱金属或碱土金属(诸如钾、钠、钙或镁)的离子。
通过使作为碱起作用的主要化合物与无机酸或有机酸反应以形成盐而得到的那些盐包括，例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、樟脑磺酸、乙酸、草酸、马来酸、富马酸、琥珀酸和柠檬酸的盐。
本文中使用的术语“卤素”或“卤素原子”包括氟、氯、溴和碘原子，优选氯或氟，意指溴、碘、氯、氟作为取代基。
术语“(C1-C6)烷基”表示直链或支链烷基，其中组分碳原子的数目是在1-6范围内。具体的烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。
表述“(C1-C6)卤代烷基”表示上面定义的“(C1-C6)烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个卤素原子替代，所述卤素原子可以彼此相同或不同。
所述(C1-C6)卤代烷基的例子因而可以包括卤代的烷基、多卤代的烷基和其中所有氢原子都被卤素原子替代的全卤代的烷基，例如三氟甲基或二氟甲基。
通过类比，术语“(C1-C6)羟基烷基”或“(C1-C6)氨基烷基”表示上面定义的“(C1-C6)烷基”基团，其中一个或多个氢原子分别被一个或多个羟基(OH)或氨基替代。非限制性例子分别是羟基甲基和氨基甲基等。
在本说明书中，除非另外提供，否则氨基烷基的定义包括被一个或多个氨基基团(NR7R8)取代的烷基(即“(C1-C6)烷基”基团)。因而，氨基烷基的一个例子是单-氨基烷基诸如R7R8N-(C1-C6)烷基。
参考如上面和下面定义的取代基R7和R8，在这里进一步解释，当R7和R8与它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环残基时，所述杂环残基中的至少一个其它环碳原子任选地被至少一个杂原子(例如N、S或O)替代和/或可以带有-氧代(＝O)取代基。应当理解，所述杂环残基可能进一步任选地在环中的任何可利用的点上(即在碳原子上或在可用于取代的任何杂原子上)被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在2个邻近碳原子上的取代，在两种情况下因而形成额外的5-6元杂环。因而，所述杂环残基的例子是1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、哌嗪-4-基-2-酮、4-甲基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、和(3aR,6aS)-5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基、8-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基、5-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基、1,1-二氧(dioxido)硫吗啉(thiomorpholin)-4-基。
术语“(C3-C10)环烷基”如同“(C3-C6)环烷基”，表示含有标示数量的环碳原子的饱和环状烃基。例子包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基和多环环系诸如金刚烷基。
术语“(C2-C6)烯基”表示具有一个或多个共轭或非共轭的顺式或反式构型的双键的直链或支链碳链，其中原子的数目是在2-6范围内。
通过类比,术语“(C5-C7)环烯基”表示含有5-7个环碳原子和一个或两个双键的环烃基。
术语“(C2-C6)炔基”表示具有一个或多个三键的直链或支链碳链，其中原子的数目是在2-6范围内。
术语“(C2-C6)羟基炔基”表示上面定义的“(C1-C6)炔基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个羟基(OH)基团替代。
术语“(C2-C6)氨基炔基”表示上面定义的“(C1-C6)炔基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个(-NR7R8)基团替代。
表述“芳基”表示具有6-20个、优选6-15个环原子的单环、双环或三环碳环系，其中至少一个环是芳族的。表述“杂芳基”表示具有5-20个、优选5-15个环原子的单环、二环或三环环系，其中至少一个环是芳族的且其中至少一个环原子是杂原子(例如N、S或O)。
合适的芳基或杂芳基单环环系的例子包括，例如，苯基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异
唑基、
唑基、异噻唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、呋喃基残基等。
合适的芳基或杂芳基二环环系的例子包括萘基、亚联苯基、嘌呤基、喋啶基、吡唑并嘧啶基、苯并三唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并二氧杂环己烯基(benzodioxinyl)、二氢苯并二氧杂环己烯基、茚基、二氢-茚基、二氢苯并[1,4]二氧杂环己烯基、苯并噻唑-2-基、二氢苯并二氧杂环庚三烯基(dihydrobenzodioxepinyl)、苯并
嗪基残基等。
合适的芳基或杂芳基三环环系的例子包括芴基以及前述杂芳基二环环系的苯并稠合衍生物。
以类似的方式，表述“亚芳基”和“亚杂芳基”表示二价基团，诸如亚苯基、亚联苯基和亚噻吩基。这样的基团也通常命名为“芳烃二基”或“杂芳烃二基”基团。例如邻-亚苯基也称作苯-1,2-二基。亚噻吩基可替换地称作噻吩二基。
衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷基”表示饱和的或部分不饱和的单环(C3-C6)环烷基，其中至少一个环碳原子被至少一个杂原子(例如N、S或O)替代或可以带有-氧代(＝O)取代基。所述杂环烷基(即杂环残基或基团)可能进一步任选地在环的可利用点上(即在碳原子上或在可用于取代的杂原子上)被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在2个邻近碳原子上的取代，在两种情况下因而形成额外的稠合的5-6元杂环。(C3-C6)杂环烷基的例子由以下代表：吡咯烷基、咪唑烷基、噻唑烷基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、二氢-或四氢-吡啶基、四氢吡喃基、吡喃基、2H-或4H-吡喃基、二氢-或四氢呋喃基、二氢异
唑基、吡咯烷-2-酮-基、二氢吡咯基残基等。
所述杂环残基的具体例子是1-吡咯烷基、1-甲基-2-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、哌嗪-4-基-2-酮、4-甲基哌嗪-1-基、1-甲基哌啶-4-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基和(3aR,6aS)-5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基。
术语“芳基(C1-C6)烷基”表示与直链或支链烷基连接的芳基环，其中组分碳原子的数目是在1-6的范围内，例如苯基甲基(即苄基)、苯基乙基或苯基丙基。
同样，术语“杂芳基(C1-C6)烷基”是指连接到直链或支链烷基的杂芳基环，其中构成性碳原子的数量在1到6之间，例如呋喃基甲基。
术语“烷酰基”表示HC(O)-或烷基羰基(例如(C1-C6)烷基C(O)-，其中基团“烷基”具有上面定义的含义。例子包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基。
同样地，“(C1-C6)烷基磺酰基”是指(C1-C6)烷基-S(O)2基团，其中烷基具有上述定义的含义。(C1-C6)烷基磺酰基的一个例子是甲基磺酰基。
术语“氨甲酰基”表示氨基羰基衍生的基团-C(O)NR7R8，其中R7和R8如上面在氨基烷基的定义中所定义，且包括取代的(优选的氨基烷基取代的)和螺取代的衍生物。这样的氨甲酰基的例子是氨基羰基、哌嗪-1-羰基、吗啉-N-羰基、吗啉-N-羰基和N-(2-(二甲基氨基)乙基)氨基羰基、N-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-甲基氨基羰基、N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基氨基羰基、4-甲基哌嗪-1-羰基、4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基、N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)氨基羰基、(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-甲基-N-(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-(2-(哌啶-1-基)乙基)-氨基羰基、N-甲基-N-(2-(哌啶-1-基)乙基)氨基羰基、N-(1-甲基哌啶-4-基-甲基)-氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、5-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基。
术语“羟基羰基”是指末端基团HOC(O)-。
术语“(C1-C10)烷氧基(alkoxy)”或“(C1-C10)烷氧基(alkoxyl)”，如同术语“(C1-C6)烷氧基(alkoxy)”或“(C1-C6)烷氧基(alkoxyl)”等，表示通过氧桥(oxygen bridge)连接到分子的其余部分的指定数目的碳的直链或支链烃。同样，“(C1-C6)烷硫基”表示通过硫桥连接的上述烃。
衍生出的表述“(C1-C6)卤代烷氧基(haloalkoxy)”或“(C1-C6)卤代烷氧基(haloalkoxyl)”表示通过氧桥连接的上面定义的卤代烷基。“(C1-C6)卤代烷氧基”的例子是三氟甲氧基。
通过类推，衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷氧基”和“(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷氧基”分别表示通过氧桥连接的杂环烷基和成链的杂环烷基-烷氧基。这样的(C3-C6)杂环烷氧基和(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷氧基的例子分别是(哌啶-4-基)氧基、1-甲基哌啶-4-基)氧基、2-(哌啶-4-基)乙氧基、2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基和2-(4-吗啉代)乙氧基。
衍生出的表述“芳氧基”和“芳基(C1-C6)烷氧基”，如同“杂芳氧基”和“杂芳基(C1-C6)烷氧基”，表示通过氧桥连接的芳基或杂芳基基团和成链的芳基-烷氧基或杂芳基-烷氧基。它们的例子分别是苯氧基和苄氧基和吡啶氧基。
同样，衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基”和“(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基”表示经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的上面定义的杂环烷基和环烷基。例子是哌啶-4-基-甲基、环己基乙基。
衍生出的表述“(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基”表示经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。例子是甲氧基甲基。
衍生出的表述“(C1-C6)烷氧基羰基”表示经由羰基与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。例子是乙氧基羰基。
其它衍生的表述如“(C1-C6)烷氧基羰基-氨基”表示经由羰基、继之以氨基基团(-NR7-)与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。(C1-C6)烷氧基羰基-氨基的例子是叔丁氧基-羰基-氨基。
因而，“(C1-C6)烷氧基羰基(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷基”表示以所述次序成链并经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的烷氧基羰基杂环烷基取代基。例子是(叔丁基哌啶-1-甲酸酯)-4-基-甲基。
衍生出的表述“(C1-C6)氨基烷氧基”表示经由氧桥连接的如上定义的(C1-C6)氨基烷基，例如，(2-(二甲基氨基)乙氧基。
表述“(C1-C6)羟基烷氧基”表示经由氧桥与分子的其余部分连接的如上定义的羟基烷基，例如，羟基乙氧基。
衍生出的表述“(C1-C6)氨基烷基氨甲酰基”表示被(C1-C6)氨基烷基取代的如上定义的“氨甲酰基”基团(即-C(O)NR7R8，其中例如R8是(C1-C6)氨基烷基)。例子是2-(二甲氨基)乙基羰基。
术语“芳基烷酰基”表示芳基C(O)或芳基烷基羰基[例如芳基(C1-C6)烷基C(O)-]，其中芳基和烷基具有上面定义的含义。例子的代表有苯甲酰基、苯基乙酰基、苯基丙酰基或苯基丁酰基残基。同样，“芳基磺酰基”是指芳基S(O)2基团，其中芳基具有上述定义的含义。例子是苯磺酰基。
此外，同样，嵌位取代基的定义来源于组成片段，如上文提供的定义，例如“(C3-C6)环烷基羰基”。
“(C3-C6)杂环烷基-羰基”、“杂芳基-羰基”；指通过羰基与分子其余部分相连的上述定义的片段。此类基团的例子为环丙烷羰基、吡咯烷-3-羰基、(吡啶-3-基)羰基。
表述“饱和的、部分不饱和的或芳族的5或6元环烷烃-二基、亚芳基-二基或杂环-二基”表示具有5或6个元素的合适的二取代的环烷烃或杂环或芳族残基，包括1,2-、1,3-或1,4-苯-二基；2,3-、3,4-、4,5-或5,6-吡啶-二基；3,4-、4,5-或5,6-哒嗪-二基；4,5-或5,6-嘧啶-二基；2,3-吡嗪二基；2,3-、3,4-或4,5-噻吩-二基/呋喃-二基/吡咯-二基；4,5-咪唑-二基/
唑-二基/噻唑二基；3,4-或4,5-吡唑-二基/异
唑二基/异噻唑-二基，它们的饱和的或部分不饱和的类似物等。也包括其他非连位二取代的残基(二残基)，诸如4,6-嘧啶-二基等。
本文中使用的表述“环系”表示单-或二-环或多环环系，其可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的，诸如芳基、(C3-C10)环烷基、(C3-C6)杂环烷基或杂芳基。
本文中使用的术语“基团”、“残基”或“片段”或“取代基”是同义的，且意图指示可与键或其它片段或分子连接的官能团或分子片段。因此，作为例子，本文中的“杂环基”是指单环或双环饱和或部分饱和的杂环部分(基团)，优选4至6元单环基团，所述杂环基团中至少一个另外的环碳原子任选地被至少一个独立地选自N、S或O的另外的杂原子取代和/或可以带有-氧代(＝O)取代基，所述杂环基团进一步任选地包括螺二取代以及在两个相邻或邻位原子上的取代，形成另外的5至6元环状或杂环、饱和、部分饱和或芳香环。因此，所述杂环基团的例子是1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、哌嗪-4-基-2-酮、4-甲基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基和(3aR,6aS)-5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基等。
不是在2个字母或符号之间的破折号(“-”)意在代表取代基的连接点。当用图形表示时，环状官能团中的连接点用位于可利用的环原子中的一个中的点(“·”)指示，在该处所述官能团可连接至分子的键或其它片段。
本文中使用的氧代部分由(O)表示，作为对其它一般表示(例如(＝O))的替代。因而，以通式的方式，羰基在本文中优选地表示为-C(O)-作为其它常见表示诸如-CO-、-(CO)-或-C(＝O)-的替代。一般而言，加括号的基团是侧基，没有被包括在链中，且当认为有用时，使用括号来帮助区分直链化学式；例如磺酰基-SO2-也可能表示为-S(O)2-以消除例如关于亚磺酰基-S(O)O-的歧义。当使用数字索引时，如表述“p为零或1至3的整数”，表述(值)“p为零”表示取代基R不存在，也就是说环上没有取代基R。
每当碱性氨基或季铵基团存在于式I的化合物中时，可以存在生理学上可接受的阴离子，其选自氯离子、溴离子、碘离子、三氟乙酸根、甲酸根、硫酸根、磷酸根、甲磺酸根、硝酸根、马来酸根、乙酸根、柠檬酸根、富马酸根、酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、苯甲酸根、对甲苯磺酸根、扑酸根(pamoate)和萘二磺酸根(naphthalene disulfonate)。同样地，在有酸性基团诸如COOH基团存在下，也可以存在相应的生理学阳离子盐，例如，包括碱金属或碱土金属离子。
本领域技术人员显而易见，式(I)的化合物当含有一个或多个立体中心时可以作为光学立体异构体存在。
在根据本发明的化合物具有至少一个立体中心的情况下，它们可以相应地作为对映异构体存在。在根据本发明的化合物具有两个或更多个立体中心的情况下，它们可以另外作为非对映异构体存在。应当理解，所有这样的单一对映异构体、非对映异构体及其任意比例的混合物被包括在本发明的范围内。以基于基团的优先性的Cahn-Ingold-Prelog命名规则为基础，指定带有立体中心的碳的绝对构型(R)或(S)。
阻转异构体源自围绕单键的受阻旋转，其中旋转的空间张力障碍足够高以允许构象异构体的分离(Bringmann G等人,Angew.Chemie Int.Ed.44(34),5384-5427,2005.doi:10.1002/anie.200462661)。
Oki将阻转异构体定义为这样的构象异构体：其在给定的温度以超过1000秒的半衰期互变(Oki M,Topics in Stereochemistry 14,1-82,1983)。
阻转异构体与其它手性化合物的差别在于，在许多情况下，它们可以发生热平衡，而在手性的其它形式，异构化经常仅仅是化学上可能的。
通过手性拆分法诸如选择性结晶，阻转异构体的分离是可能的。在阻转-对映选择性的或阻转选择性的合成中，一种阻转异构体以另一种阻转异构体为代价而形成。阻转选择性的合成可以通过使用手性助剂进行，如Corey Bakshi Shibata(CBS)催化剂，即一种从脯氨酸衍生出的不对称催化剂；或在异构化反应有利于一种阻转异构体超过另一种阻转异构体时，通过基于热力学平衡的方案。
在本发明的范围内包括式(I)的化合物的外消旋形式以及单独的阻转异构体(基本上不含有其相应的对映异构体)和富含立体异构体的阻转异构体混合物。
本发明进一步涉及式(I)的化合物的对应氘化衍生物。
应当理解，在上面和在下文关于式I的化合物描述的所有优选的基团或实施方案可以彼此组合并在细节上做必要的修正后同样适用。
在一个优选的实施方案中，本发明涉及由式Ia表示的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中X1和X2中的每一个是CH：
在第二优选的实施方案中，本发明涉及如上定义的式(I)化合物，其中R2和R3与它们连接的氮原子一起形成单环饱和杂环基团，其为哌嗪环；由式Ib表示：
其中R9选自以下组成的组：
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，
(C1-C6)烷酰基，
氨基甲酰基，
(C3-C6)环烷基-羰基，
(C3-C6)杂环烷基-羰基，
芳基(C1-C6)烷基，
芳基烷酰基，
芳基磺酰基，
杂芳基(C1-C6)烷基，
杂芳基-羰基，
杂芳基氧基，
(C3-C6)环烷基，
(C3-C8)环烷基(C1-C6)烷基，
(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
芳基和杂芳基，
所述环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基中的每一个进一步任选被一个或多个卤素、(C1-C8)烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C6)氨基烷基、(C1-C6)氨基烷氧基、氨基甲酰基、(C1-C6)烷基磺酰基取代；
和其中所述哌嗪环进一步任选被一个或多个选自(C1-C6)烷基、(C1-C6)羟基烷基和芳基的取代基R10取代；
所有其他变量如上所定义。
在第三优选的实施方案中，本发明涉及如上定义的式(I)的化合物，
其中，
X1和X2都是CH基团；
p为0或1至3的整数
当存在时，每个R是卤素；
R0是-H；且
R1独立地选自由以下组成的组
-CN，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
R2是-H，
和R3选自由以下组成的组：
(C3-C10)环烷基，
(C3-C8)杂环烷基，
杂芳基(C1-C6)烷基；
所述杂芳基、环烷基、杂环烷基中的每一个进一步任选地被一个或多个(C1-C8)烷基或(C1-C6)羟基烷基取代；
R4和R5都是H，
R6是-H；
及其药学上可接受的盐和溶剂化物。
根据本发明的一组优选化合物是式(I)化合物
其中，
X1和X2在每次出现时独立地为CH基团或氮原子；
p为0或1至3的整数；
当存在时，每个R是氟；
R0为-H或(C1-C6)烷基，其为甲基，并且R1独立地选自由以下组成的组：
-H，
卤素，其为溴、氯、碘、氟，
-NR7R8，
-CN，
(C1-C6)烷基，其为甲基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，其为羟基甲基、羟基乙基，
(C1-C6)氨基烷基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，其为甲氧基甲基，
(C3-C10)环烷基，其为环丙基，
(C2-C6)链烯基，
(C5-C7)环烯基，
(C2-C6)炔基，
(C2-C6)羟基炔基，其为羟基丙炔基，
芳基，其为苯基、羟基苯基，
杂芳基，其为异噁唑基、N-甲基咪唑基、吡啶基、噻唑基、N-乙基吡唑基、噻吩基-甲腈，和
(C3-C6)杂环烷基，其为二氢吡咯基、二氢呋喃基，
R2是-H或(C1-C6)烷基，其为甲基，R3独立地选自以下组成的组：
(C1-C6)烷基，其为甲基，
(C1-C6)卤代烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)氨基烷基，其为二甲基氨基乙基、二甲基氨基丙基，
(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，其为甲氧基丙基，
(C3-C10)环烷基，其为环己基、羟基甲基环己基、羟基乙基环己基、氰基-环己基、4-氨基羰基-环己烷-4-基、4-二甲基氨基甲基-环己烷-4-基，
(C3-C8)杂环烷基，其为N-甲基哌啶基、(羟基甲基)-N-甲基哌啶基、N-苄基哌啶基、N-甲基氮杂环丁烷-3-基、四氢吡喃基、4-羟基甲基-四氢吡喃-4-基、奎宁环基，
芳基，其为苯基、三氟甲基苯基、二氢茚基，
杂芳基，其为噻唑基、吡啶基、氯吡啶基、异喹啉基，
芳基(C1-C6)烷基，其为苄基，邻-、间-、对-羟甲基苄基，苯乙基，
杂芳基(C1-C6)烷基，其为(吡啶基)乙基、(噻吩基)甲基、(N-苯基-吡唑基)乙基，
(C3-C8)环烷基(C1-C6)烷基，其为环己基甲基，
(C3-C8)杂环烷基-(C1-C6)烷基，其为(哌啶-4-基)甲基、(N-苄基哌啶基)甲基、(N-甲基哌啶-4-基)甲基、N-甲基氮杂环丁烷-3-基-甲基、吗啉代丙基；或
或者，R2和R3与它们连接的氮原子一起形成单环基团，其为哌嗪-N-基、甲基哌嗪-N-基、苯基-N-甲基哌嗪-N-基、N-苯基-哌嗪-N-基、三甲基哌嗪-N-基、4-苄基-3,5-二甲基哌嗪-N-基、(羟基甲基)-N-甲基哌嗪-N-基、乙酰基(哌嗪-N-基)、苯乙酰基(哌嗪-N-基)、苯甲酰基(哌嗪-N-基)、4-(((二甲基氨基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基、环丙基(哌嗪-N-基)、环丙基甲基(哌嗪-N-基)、环丙烷羰基(哌嗪-N-基)、环己烷羰基(哌嗪-N-基)、N-甲基哌啶-4-羰基(哌嗪-N-基)、4-(吡啶-3-羰基)哌嗪-N-基、4-(1-甲基-1H-吡唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-(1H-噻唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-二甲基氨基羰基(哌嗪-N-基)、(苯基磺酰基)哌嗪-N-基、(吡啶基)哌嗪-N-基、(吡啶基甲基)哌嗪-N-基、(甲氧基乙基)哌嗪-N-基、(苄基)哌嗪-N-基、(甲氧基苄基)哌嗪-N-基、(3-(二甲基氨基丙氧基)苄基)哌嗪-N-基、(氟苄基)哌嗪-N-基、(甲基苄基)哌嗪-N-基、N-(((甲基氨基羰基)苯基)甲基)哌嗪-N-基、N-(((甲基氨基羰基)呋喃基)甲基)哌嗪-N-基、(苯乙基)哌嗪-N-基、(嘧啶基甲基)哌嗪-N-基、(2(甲硫基)嘧啶基甲基)哌嗪-N-基、(((甲基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-N-基、((N-甲基-咪唑-5-基)甲基)哌嗪-N-基、((1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲基)哌嗪-N-基、((甲基噻唑基)甲基)哌嗪-N-基、((吡嗪-2-基)甲基)哌嗪-N-基、((1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)哌嗪-N-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)哌嗪-N-基、(喹喔啉-2-基甲基)哌嗪-N-基、((1,2,3-噻二唑-4-基)甲基)哌嗪-N-基、(哒嗪-4-基甲基)哌嗪-N-基、吡咯烷-N-基、苯基吡咯烷-N-基、(吡啶基)吡咯烷-N-基、哌啶-N-基、(二甲基氨基)哌啶-N-基、4-((二甲基氨基)甲基)哌啶-N-基、苄基哌啶-N-基、苄基羟基哌啶-N-基、吡啶基哌啶-N-基、吡啶基氧基哌啶-N-基、(苯基磺酰基)哌啶-N-基、4-苯基-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基、苯基吗啉-N-基、3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-N-基、3-(二甲基氨基)甲基-氮杂环丁烷-N-基、3-(二甲基氨基)吡咯烷-N-基、3-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)吡咯烷-N-基、3-(二甲基氨基)哌啶-N-基，
或者双环基团，其是5,6-二氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-基、3,4-二氢-2,7-萘啶-2(1H)-基)、1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-基、六氢吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪-8(1H)-基、3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基、5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、5-苄基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)、2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-甲基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基或5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基；
R4选自H、(C1-C6)烷基(其为甲基)、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)(其为环己基甲基)和(C3-C6)环烷基-羰基(其为环己基羰基)或(吡咯烷-3-基)羰基；
R5独立地选自H，(C1-C6)烷基，其为甲基；
R6选自-H，(C1-C6)烷基，其为甲基；
及其药学上可接受的盐和溶剂化物。
本发明也提供了一种药物组合物，其包含单独的或与一种或多种另外的活性成分组合的、与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明提供了用于用作药物的式(I)的化合物。
在另一个方面，本发明提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与ROCK酶机制有关的障碍，特别是用于治疗障碍诸如肺疾病。
具体地，本发明提供了用于预防和/或治疗肺疾病的式(I)的化合物，所述肺疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病COPD、特发性肺纤维化(IPF)、肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
此外，本发明提供了用于预防和/或治疗与ROCK酶机制有关的障碍的方法，所述方法包括给需要这种治疗的患者施用治疗有效量的本发明的化合物。
具体地，本发明提供了用于预防和/或治疗与ROCK酶机制有关的障碍的方法，其中所述障碍是哮喘、慢性阻塞性肺病COPD特发性肺纤维化(IPF)、肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
根据具体实施方案，本发明提供了在下表中列出的化合物及其药学上可接受的盐。
本发明的化合物，包括上文列出的所有化合物，可以使用下述一般方法和操作或通过使用本领域普通技术人员容易得到的轻微修改的方法从容易得到的起始原料制备。尽管本文显示或描述了本发明的特定实施方案，但是本领域技术人员会认识到，使用本文所述的方法或通过使用其它已知方法、试剂和起始原料可以制备本发明的所有实施方案或方面。当给出典型的或优选的工艺条件(process conditions)(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压强等)时，也可以使用其它工艺条件，除非另有说明。尽管最适反应条件可以随使用的特定反应物或溶剂而改变，但是这样的条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作容易地确定。
因而，在下面描述的和在下述方案中报告的制备方法不应当视作限制可用于制备本发明的化合物的合成方法的范围。
在某些情况下，需要一个步骤以便掩蔽或保护敏感的或反应性的部分，根据一般化学原理(Protective group in organic synthesis,第3版,T.W.Greene,P.G.M.Wuts)，可以采用通常已知的保护基(PG)。
式I的化合物，包括上文列出的所有化合物，通常可以根据在下面方案中所示的操作来制备。在具体细节或步骤不同于一般方案的情况下，它已经在具体实施例中和/或在额外方案中详述。
式I的化合物含有至少一个立体中心，如下图所示，标记为星号*。
对映体纯的化合物可以利用对映体纯的起始原料和中间体根据下述反应制备。制备对映体纯的在碳上具有-NR4R5(在上图中用星号标记)的式I化合物可以通过下列方案中发现的对映体纯的中间体IV和XII完成。这些中间体可以是市售的，或者由本领域普通技术人员从商业来源容易地产生。
在另一种方法中，可以通过手性色谱法从相应的外消旋体制备对映体纯的化合物。在式I化合物中，当存在两个或更多个立体中心时，则该结构由不同的立体异构体表征。立体化学纯的化合物可以通过从非对映异构体的混合物中手性分离获得，或者通过非对映异构体的色谱分离逐步进行，然后进一步手性分离成单一立体异构体。
其中R5是H的式I化合物可以按照下文所述的方案1制备。方案1提供至少一种用于制备实施例1至151和225至229的非限制性合成路线。
用于保护双环中间体II的5元环的NH的典型保护基团(PG1)可以是2-[(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基(SEM)、4-甲苯磺酰基(Ts)和对甲氧基苄基(PMB)，并且无论如何不限制其他保护基团的使用。中间体III可以由相应的中间体II和用于引入PG1的合适试剂制备，例如Ts-Cl(甲苯磺酰氯)、SEM-Cl([2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基氯)或PMB-Br(对甲氧基苄基溴)。所述组分之间的反应可以在极性有机溶剂如DMF或DCM中、在强碱如NaH存在下、在室温或更低温度下进行。
中间体IV的羧酸可以适当地保护为与PG2的酯(例如作为甲酯)，并且氨基保护为与PG3的氨基甲酸酯(例如Boc基团)。这些转化可以通过使用从未保护的酪氨酸衍生物开始的通常熟知的方法来实现。
中间体V可以通过钯催化的O-芳基化从中间体III和IV获得。例如，反应可以通过使芳基卤化物中间体III和酚衍生物IV在合适的有机溶剂如甲苯或THF中、在无机碱如K2CO3存在下、用合适的钯催化体系如Pd2dba3/XPhos或另一种钯源/膦基配体在高温(约100℃)下持续数小时反应来进行。
在不同的方法中，可以从中间体VIII开始用两步合成获得中间体V。中间体VIII的硝基被中间体IV的酚的原位取代(ipso-substitution)得到中间体VII，可以在高沸点有机溶剂如DMSO中、在等于或高于100℃的温度下并且在无机碱如K2CO3存在下进行进行。通过在Pd/C和有机碱如TEA存在下，在氢气氛下使VII反应，通过非均相钯催化氢化除去氯原子，可以将中间体VII转化为中间体V。如上所述，中间体VIII可以类似地从相应的未保护的杂环的中间体III制备。
从中间体V除去PG2(当PG2是甲基时)得到中间体VI，同时不影响其它保护(PG1：SEM、Ts或PMB和PG3：Boc)，可以通过水解，使用无机碱如在甲醇/水的混合物中的LiOH，通常在室温下进行1小时至过夜的时间来进行。在一些情况下，为了合成方便，水解可以在等于或高于50℃的温度下进行，并且可以导致PG1同时裂解，得到中间体VIa。中间体VIa可以与中间体VI类似的方式使用。
中间体VI(或VIa)与中间体IX之间的反应得到中间体X(或Xa)可以在合适的酰胺偶联反应条件下进行。例如，中间体VI(或VIa)和IX可以在活化剂如COMU或HATU存在下与有机碱如DIPEA或TEA在合适的有机溶剂如DCM或DMF中，并在温度通常在室温下反应持续几个小时至过夜。
或者，中间体X可以由中间体XI和中间体III通过钯催化的O-芳基化以与上述制备中间体V的方式类似的方式制备。中间体XI可以通过中间体XII与中间体IX的酰胺偶联获得。以与上述制备中间体X类似的方式进行。
从中间体X(或仅带有PG3的Xa)除去PG1和PG3得到式I的化合物(其中R5是H)，可以根据所用的裂解条件(Protective group in organic syntheses(有机合成中的保护基团)，第3版，T.W.Greene，P.G.M.Wuts)逐步或同时实现。例如，使用TFA在有机溶剂(例如DCM)中的混合物的酸性裂解可以使Boc和PMB脱保护，而SEM可能需要在浓缩的甲醇氨或LiOH中进行额外处理。甲苯磺酰基(Ts)可以在无机碱如LiOH的水/甲醇溶液中在等于或高于50℃的温度下水解。
在另一个实施方案中，式I化合物(其中R5是H，并且R2和R3与它们连接的氮原子一起形成哌嗪环，任选在第二个氮上用R9取代)可以根据方案2制备，提供用于制备实施例152至177的至少一种非限制性合成路线。
中间体Xb表示式X的化合物，其中R2R3一起形成哌嗪环，其中第二个氮被合适的保护基团(表示为PG4)保护，其可以与PG1和PG3垂直。合适的PG4基团可以由羧基苄氧基(Cbz)表示。中间体Xb(PG4是Cbz)可以在Pd/C催化剂存在下、在有机溶剂如MeOH或EtOH中、和在大约室温的温度下通过催化氢化转化为中间体XIIIa。
如方案1中对中间体X的描述，式I化合物(其中R5是H，R2R3一起形成哌嗪环)可以通过除去PG3和PG1从中间体XIIIa制备。
中间体XIIIb可以通过酰胺偶联或还原胺化引入基团R9(如上所述)由中间体XIIIa制备。对于酰胺偶联，中间体XIIIa和合适的羧酸可以使用类似于方案1中已描述的用于偶联中间体VI和IX的条件进行反应。还原胺化可以通过使用还原剂如NaBH(OAc)3、NaBH3CN或NaBH4和在合适的有机溶剂如DCE、DCM、THF或MeOH中使中间体XIIIa和合适的醛反应来进行。反应在室温下平稳进行几个小时。在加入还原剂之前，使胺和醛反应以预形成亚胺可能是有用的。
采用已经在方案1中描述的与用于中间体X的裂解条件相同的裂解条件，式I化合物(其中R5是H，R2和R3一起形成如上所述的哌嗪环)可以通过除去PG1和PG3从中间体XIIIb获得。对于本领域技术人员显而易见的是，在PG1和PG3脱保护之前可以进一步精制中间体XIIIb的R9取代基，得到式I的化合物。例如，如果R9是3-(甲氧基羰基)苯基)甲基或甲氧基羰基杂芳基甲基部分(例如5-(甲氧基羰基)-2-呋喃基甲基)，它可以在两步法中容易地转化成相应的酰胺，包括甲酯水解和酰胺偶联。
方案2
在本发明的另一个实施方案中，式I化合物可根据方案3制备。方案3提供用于制备实施例178-185的至少一种非限制性合成路线。
中间体V(其中R4是H)可以通过除去PG3而转化为中间体XIV。例如，当PG1是Ts和PG3是Boc时，PG3的选择性去除可以通过使用TFA和有机溶剂如DCM的混合物的酸性裂解来实现。然后可以通过用酰胺偶联或还原胺化引入R4和/或R5将中间体XIV转化为中间体XV。酰胺偶联可以通过使用与方案1中已经描述的用于偶联中间体VI和IX的条件类似的条件使中间体XIV和合适的羧酸反应来进行。还原胺化可以通过使中间体XIV与合适的醛以与对方案2的中间体XIIIa所述类似的方式进行反应来进行。或者，中间体XIV上的还原胺化可以通过在催化剂如Pd/C存在下、和在醇溶剂如MeOH或EtOH中催化氢化原位产生的亚胺来进行。
中间体XV可以通过使用与已经描述的用于除去PG2和PG1的条件类似的条件转化为中间体XVI或XVIa，或者使用选择性脱保护条件转化成XVIa以仅除去PG2。
采用已在方案1中描述的相同条件，式I化合物可以从中间体XVI(或XVIa)和IX的酰胺偶联获得。如已在方案1中描述的，当中间体XVIa用于酰胺偶联时，必须除去PG1。
或者，以类似于在方案1中描述的方式，式I化合物(其中R4是酰基部分，例如杂环烷基羰基或环烷基羰基)可以通过与合适的羧酸的酰胺偶联转化相应的化合物(其中R4＝H)。
方案3
在本发明的另一个实施方案中，式I的化合物(其中R5＝H，R1是卤素X＝Cl、Br、I或CN，或例如芳基、杂芳基、羟基炔基、环烷基和环杂烷基，并且进一步任选地被取代)可以根据方案4制备，提供用于制备实施例186至206和217至224的至少一种非限制性合成路线。
中间体VII(其中R1是H)可以通过与相应的NXS(N-卤代琥珀酰亚胺，X：Cl、Br或I)亲电卤化、在有机溶剂如MeCN中并在约室温的温度下进行几小时来转化为中间体XVII。中间体XVII可以在两步合成中转化为中间体XVIII。首先，除去PG2，然后在酰胺偶联条件下将所得羧酸中间体与胺IX偶联。PG2的去除和酰胺偶联均可使用与方案1中已描述的相似的条件进行。
在不同的方法中，以与上面已经描述的将VII转化为XVII的方式类似的方式，中间体XVIII可以通过卤化从中间体X(其中R1是H)获得。
中间体XVIII转化为中间体Xc(当R1为CN时)可以通过金属催化的氰化进行。例如，中间体XVIII可以在Pd催化剂如Pd2(dba)3/1,1'-二茂铁二基双(二苯基膦)存在下、在有机溶剂如DMF中、在高于100℃的温度下与氰化锌反应持续长达一夜或更长时间的时间，产生中间Xc。
中间体XVIII可以通过钯催化的交叉偶联反应例如Sonogashira、Suzuki或下文参考文献中描述的其他(Strategic application of named reactions in organicsynthesis(在有机合成中命名反应的战略应用),L.Kurti,B.Czako,Ed.2005)引入R1基团(芳基、杂芳基、羟基炔基、环烷基或环杂烷基)或者转化为中间体Xd。例如，Sonogashira偶联可以通过在Pd催化剂如PdCl2(dppf)2DCM加合物或四(三苯基膦)钯(0)存在下、在碘化铜(I)和碱如三甲胺存在下、在诸如THF的有机溶剂中、在约90℃或更高的温度下，加热中间体XVIII和合适的伯炔烃持续过夜或更长时间来进行。Suzuki偶联可以例如通过在Pd催化剂如PdCl2(dppf)2DCM加合物的存在下、在水/有机溶剂如DME或THF的混合物中、使用无机碱如碱性碳酸盐，在约90℃或更高的温度下加热中间体XVIII和合适的硼酸或频哪醇酯衍生物持续长达过夜或更长时间来进行。
通过使用与方案1中已经描述的用于去除PG1和PG3的方法类似的方法，中间体XVIII、Xc和Xd可以转化为式I的化合物，其中R1分别是卤素(Cl、Br或I)或氰基(CN)或芳基、杂芳基、炔基、环烷基或环杂烷基。
方案4
在另一个实施方案中，式I的化合物(其中R1是–CH2OH或–CH2CH2OH)可以按照方案5制备。方案5提供用于制备实施例207至216和225至229的至少一种非限制性合成路线。
以与对中间体X(方案1)所述相同的方式，式I化合物(其中R1是–CH2OH或–CH2CH2OH)可以通过除去PG1和PG3由中间体XXIa和/或XXIb制备。在具有保护基团PG5的中间体XXIIb的情况下，所述基团可以在与PG1和PG3相同的条件下裂解。
以与对中间体X(方案1)所述类似的方式，中间体XXIa可以通过中间体XX和IX的酰胺偶联获得。中间体XX可以使用钯催化的O-芳基化从中间体IV和中间体XIX(其中Y是CHO)开始、然后如方案1中所述除去PG2制备。所得的醛中间体可以例如通过在有机溶剂如DCM/MeOH的混合物的硼氢化钠在室温下还原持续过夜或更长时间，得到中间体XX。
中间体XXIb可以按照将III和IV转化为X(方案1)所述的相同的合成顺序从中间体IV和XXII制备，包括用IV进行XXII的O-芳基化，然后去保护PG2和与IX酰胺偶联。中间体XXII可以通过两步合成从中间体XIX制备。包含在Y中的羰基部分的还原可以以与对于中间体XX的方案中所述的相同方式进行。通过使用通常已知的方法，可以用PG5(例如TBDMS)保护所得的醇中间体，得到中间体XXII。
中间体XIX可以以与中间体III类似的方式制备(方案1)。
方案5
本发明的化合物是激酶活性、尤其是Rho-激酶活性的抑制剂。一般而言，作为ROCK抑制剂的化合物可用于治疗许多与ROCK酶机制有关的障碍。
在一个实施方案中，通过本发明的化合物可以治疗的障碍包括青光眼、炎性肠病(IBD)以及选自哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、间质性肺病诸如特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)的肺疾病。
在另一个实施方案中，通过本发明的化合物可以治疗的障碍选自哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)和间质性肺病诸如特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
在另一个实施方案中，所述障碍选自特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
本发明的治疗方法包括向有此需要的患者施用安全且有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。如本文中使用的，关于式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其它药学活性剂的“安全且有效量”是指这样的化合物的量：其足以治疗患者的病症，但是足够低以避免严重的副作用，尽管如此它可以常规地由熟练的技术人员确定。可以一次性施用或根据定量施用方案施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，在所述定量施用方案中，在给定时期的变化的时间间隔施用若干剂量。典型日剂量可以根据所选择的具体施用途径而变化。
本发明还提供了与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式(I)的化合物的药物组合物，例如在Remington’s Pharmaceutical Sciences Handbook,XVII Ed.,Mack Pub.,N.Y.,U.S.A.中描述的那些。
可以根据患者需要施用本发明的化合物和它们的药物组合物，例如，口服、经鼻、肠胃外(皮下、静脉内、肌内、胸骨内和输注)、通过吸入、直肠、阴道、外用(topically)、局部(locally)、透皮和通过眼给药。
可以将各种固体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括如下固体剂型：片剂、软胶囊(gelcap)、胶囊剂、胶囊形片剂(caplets)、颗粒剂、锭剂和整装粉剂(bulk powders)。可以将本发明的化合物单独施用，或与各种药学上可接受的载体、稀释剂(诸如蔗糖、甘露醇、乳糖、淀粉)和已知的赋形剂组合施用，所述赋形剂包括助悬剂、增溶剂、缓冲剂、粘合剂、崩解剂、防腐剂、着色剂、调味剂、润滑剂等。定时释放胶囊剂、片剂和凝胶剂也是有利的。
还可将各种液体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括水溶液剂和非水溶液剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这样的剂型还可以含有合适的已知的惰性稀释剂诸如水和合适的已知的赋形剂诸如防腐剂、润湿剂、甜味剂、调味剂、以及用于乳化和/或悬浮本发明的化合物的试剂。例如，可以以等渗无菌溶液的形式静脉内注射本发明的化合物。其它制剂也是可能的。
通过将化合物与合适的赋形剂诸如可可脂、水杨酸盐和聚乙二醇混合，可以制备用于本发明的化合物的直肠施用的栓剂。
用于阴道施用的制剂可以呈乳膏剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂的形式，其除了活性成分之外还含有也已知的诸如合适的载体。
对于外用施用，所述药物组合物可以是适于施用于皮肤、眼、耳或鼻的乳膏剂、软膏剂、搽剂、洗剂、乳剂、混悬剂、凝胶剂、溶液剂、糊剂、粉剂、喷雾剂和滴剂的形式。局部给药还可以包括通过装置(如透皮贴剂)进行透皮给药。
对于治疗呼吸道疾病，根据本发明的化合物优选地通过吸入来施用。
可吸入的制剂包括可吸入的粉剂、含有推进剂的定量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂。
对于作为干粉给药，可以使用根据现有技术已知的单或多剂量吸入器。在该情况下，该粉末可以填充在明胶、塑料或其它胶囊、药筒或泡罩包中或在储器中。
可以将通常无毒且对本发明化合物是化学惰性的稀释剂或载体(例如乳糖)或适于改善可吸收分数(respirable fraction)的任意其它添加剂加入到粉末化的本发明的化合物中。
包含推进气体(如氢氟烷烃)的吸入气雾剂可以包含溶液或分散形式的本发明的化合物。推进剂驱动的制剂还可以包含其它成分，例如共溶剂、稳定剂或任选的其它赋形剂。
包含本发明化合物的不含推进剂的可吸入制剂可以是在水性、醇性或水醇性介质中的溶液或悬浮液形式，且它们可以通过从现有技术已知的喷射或超声喷雾器或通过软雾喷雾器诸如
来递送。
本发明的化合物可以作为唯一活性剂施用，或与其它药物活性成分联合施用(即作为在固定剂量组合中或在单独配制的活性成分的联合治疗中施用的共治疗剂)，所述其它药物活性成分选自：有机硝酸盐(organic nitrate)和NO供体；吸入的NO；可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的刺激物；prostaciclin类似物PGI2和前列环素受体的激动剂；抑制环鸟苷酸(cGMP)和/或环腺苷酸(cAMP)的降解的化合物，诸如磷酸二酯酶(PDE)1、2、3、4和/或5的抑制剂，特别是PDE 5抑制剂；人嗜中性粒细胞性弹性蛋白酶抑制剂；抑制信号转导级联的化合物，诸如酪氨酸激酶和/或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂；抗血栓形成剂，例如血小板聚集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶物质；用于降低血压的活性物质，例如钙拮抗剂、血管紧张素II拮抗剂、ACE抑制剂、内皮缩血管肽拮抗剂、肾素抑制剂、醛固酮合酶抑制剂、α受体阻滞剂、β受体阻滞剂、盐皮质激素受体拮抗剂；中性内肽酶抑制剂；渗透剂；ENaC阻滞剂；抗炎剂，包括皮质类固醇和趋化因子受体的拮抗剂；支气管扩张剂例如β2激动剂和毒蕈碱拮抗剂；抗组胺药物；镇咳药；抗生素诸如大环内酯和DNA酶药用物质和选择性切割剂诸如重组人脱氧核糖核酸酶I(rhDNA酶)；抑制Smad2和Smad3的ALK5和/或ALK4磷酸化的药剂；色氨酸水解酶1(TPH1)抑制剂和多激酶抑制剂。
在一个优选的实施方案中，将本发明的化合物与以下药剂联合施用：磷酸二酯酶V诸如西地那非、伐地那非和他达拉非；有机硝酸盐和NO供体(例如硝普钠、硝基甘油、单硝酸异山梨酯、硝酸异山梨酯、吗多明或SIN-1和吸入的NO)；合成的prostaciclin类似物PGI2诸如伊洛前列素、曲前列尼尔(treprostinil)、依前列醇和贝前列素；前列环素受体的激动剂诸如selexipag和WO 2012/007539的化合物；可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的刺激物如利奥西呱和酪氨酸激酶如伊马替尼、索拉非尼和尼洛替尼和内皮缩血管肽拮抗剂(例如马昔腾坦、波生坦、西他生坦和安立生坦(ambrisentan))。
本发明的化合物的剂量取决于多种因素，包括要治疗的具体疾病、症状的严重性、给药途径、剂量间隔频率、使用的具体化合物、化合物的效力、毒理学特性(profile)和药代动力学特性。
有利地，可以在例如0.001至1000mg/天、优选0.1至500mg/天的剂量，施用式(I)化合物。
当通过吸入途径施用式(I)化合物时，优选地以被包含在0.001至500mg/天之间、优选0.1至100mg/天之间的剂量施用它们。
包含本发明的化合物的药物组合物适合通过吸入来施用，诸如可吸入的粉剂、含有推进剂的计量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂。
本发明也涉及一种装置，其包含含有根据本发明的化合物的药物组合物，所述装置可以是单次剂量或多次剂量干粉吸入器、定量吸入器和软雾(soft mist)型雾化器。
以下实施例更具体地示例说明本发明。
中间体和实施例的制备
一般实验细节
反应不是在惰性气氛下进行的，除非有规定，所有溶剂和商业试剂都是如收到时使用。
通过色谱法纯化表示使用
Companion纯化系统或Biotage SP1纯化系统的纯化。在使用
SPE Si II筒纯化产物的情况下，‘Isolute SPE Si筒’表示含有未结合的活化二氧化硅(silica)的预填充聚丙烯柱，其含有具有50μm的平均大小和标称
孔隙率的不规则颗粒。合并含有所需产物的级分(通过TLC和/或LCMS分析鉴别)，并在真空中浓缩。在使用SCX-2筒的情况下，‘SCX-2筒’表示含有未末端加帽的丙基磺酸官能化的二氧化硅强阳离子交换吸附剂的
预填充聚丙烯柱。在将HPLC用于纯化(通过MDAP纯化)的情况下，合并含有所需产物的级分(通过TLC和/或LCMS分析鉴别)，并使用Biotage EV10蒸发器除去溶剂。可替换地，将合并的产物级分低压冻干。
在Varian Unity Inova 400波谱仪(具有运行在400MHz的5mm倒置检测三共振探头)上，或在Bruker Avance DRX 400波谱仪(具有运行在400MHz的5mm倒置检测三共振TXI探头)上，或在Bruker Avance DPX 300波谱仪(具有运行在300MHz的标准5mm双频率探头)上，或在Bruker Fourier 300波谱仪(具有运行在300MHz的5mm双探头)上，得到NMR谱。以相对于四甲基硅烷的ppm给出迁移。
用Structure To Name Enterprise 12.0CambridgeSoft(Perkin Elmer)产生实施例和中间体的化学名称。
在后处理中使用的常见无机盐的溶液是水溶液。盐水表示NaCl的饱和水溶液。除非另外指出。
LC-MS方法1
将具有C18-反相柱(100×2.1mm Acquity BEH，具有1.7μm粒度)的WatersMicromass ZQ2000质谱仪维持在40℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
梯度：
梯度-时间 流速(mL/min)％A ％B
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法2
Waters Micromass ZQ2000质谱仪，具有C18反相柱(100×2.1mm Acquity BEH，粒径为1.7μm)，保持在40℃，用以下洗脱：A：水+0.1％氨水；B：MeCN+0.1％氨水。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法3
Quattro Micro质谱仪，具有C18反相柱(100×2.1mm Acquity BEH，粒径为1.7μm)，保持在40℃，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法4
QDa质谱仪,具有C18反相柱(50×2.1mm Acquity CSH，粒径为1.7μm),保持在40℃，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法5
QDa质谱仪，具有C18反相柱(50×2.1mm Acquity BEH，粒径为1.7μm)，保持在40℃，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法6
QDa质谱仪，具有C18反相柱(50×2.1mm Acquity BEH，粒径为1.7μm)，保持在50℃，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法7
Waters Platform LC，具有C18反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna 3μm粒径)，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：乙腈+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,ELS,UV(100μl分流至MS，带有在线紫外检测器)
MS电离方法-电喷雾(正离子和负离子)。
LC-MS方法8
QDa质谱仪，具有C18反相柱(50×2.1mm Acquity BEH，粒径为1.7μm)，保持在50℃，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
LC-MS方法9
QZ质谱仪，具有C18反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna，粒径3μm)，用以下洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：MeCN+0.1％甲酸。
梯度：
检测-MS,UV PDA
MS电离方法-电喷雾(正/负离子)。
MDAP方法(酸性的)
将具有XSELECT CSH Prep C18柱(19×250mm,5μm OBD)的Agilent Technologies1260Infinity纯化系统维持在室温。
流动相A:0.1％甲酸水溶液
流动相B:0.1％的甲酸在乙腈中的溶液
流速:20ml/min
梯度程序:10％-95％,22min，中心在特定聚焦的梯度附近
样品:注射20-60mg/ml的在DMSO中的溶液(+任选的甲酸和水)
MDAP方法(碱性的)
将具有XBridge Prep C18OBD柱(19×250mm,5μm OBD)的Agilent Technologies1260Infinity纯化系统维持在室温。
流动相A:0.1％氨水
流动相B:0.1％的氨在乙腈中的溶液
流速:20ml/min
梯度程序:10％-95％,22min，中心在特定聚焦的梯度附近
样品:注射20-60mg/ml的在DMSO中的溶液(+任选的甲酸和水)
SFC方法
使用Waters Thar Prep100制备型SFC系统(P200CO2泵,2545调节泵,2998紫外/可见光检测器,具有Stacked Injection Module的2767液体处理器)或Waters TharInvestigator半制备型系统(Waters Fluid Delivery Module,2998紫外/可见光检测器,Waters Fraction Collection Module)进行超临界流体色谱法(SFC)。为每种化合物指出了使用的柱和等度方法，并使用给出的方法分析单一对映异构体。为了达到要求的％ee纯度，一些化合物可能已经经历第二个纯化过程。
制备型HPLC方法(酸性条件)
当化合物通过HPLC纯化时，将它们在C18反相柱(250×21.2mm PhenomenexKinetex，粒径为5μm)上进行。描述了特定的洗脱混合物，除非另有说明，否则通过UV(254nm)检测峰。通常将含有纯产物的级分合并并冷冻干燥，得到固体。
制备型HPLC方法(碱性条件)
在通过HPLC纯化化合物的情况下，将它们在C18反相柱(250×21.2mm PhenomenexKinetex EVO，粒径为5μm)上进行。描述了特定的洗脱混合物，除非另有说明，否则通过UV(254nm)检测峰。通常将含有纯产物的级分合并并冷冻干燥，得到固体。
手性HPLC(方法A)
通过使用Chiralpak IC柱(21×250mm，5μM)并用15％乙醇的庚烷(含0.5％DEA)以18mL/min的流速洗脱的手性HPLC分离对映体。
在实验部分中使用的缩写：
COMU(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳
(carbenium)六氟磷酸盐
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DEA 二乙胺
DIPEA 二-异丙基乙胺
DME 1,2-二甲氧基乙烷
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
h 小时
HATU (1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶
3-氧化物六氟磷酸盐)
HPLC 高效液相色谱法
IMS 工业甲基化酒精
LCMS 液相色谱法-质谱法
MDAP 质量导向的自动纯化
MeCN 乙腈
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
NCS N-氯代琥珀酰亚胺
NIS N-碘代琥珀酰亚胺
Pd2(dba)3三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd2(dppf)2. [1,1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)
Rt 保留时间
RT 室温
SFC 超临界流体色谱法
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
XPhos 2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯
在下面的操作中，通过带有步骤编号指示的“中间体”或“实施例”编号来鉴别一些起始原料。这仅仅为了辅助化学领域的技术人员阅读而提供。
当提及使用“类似的”或“相似的”操作时，本领域技术人员会明白，这样的操作可能包含微小变化，例如反应温度、试剂/溶剂量、反应时间、后处理条件或色谱纯化条件。
在指出的情况下，实施例中的化合物的立体化学在以下假设上指定：贯穿任意随后的反应条件，维持在起始原料的拆分立体中心处的绝对构型。
对于实施例8、55、57、91和132，通过手性LC或SFC方法测量ee％(对映体过量)。这些方法被认为是用于测定ee％的分析方法的例子。
除非另有说明，否则在化合物名称中报告绝对构型(R)或(S)时，必须认为ee％等于或大于90％。对于具有小于90的ee％的测量值的那些实施例，报告了确切的值。当ee％的测量值尚未测定时，则标记为n.d.(未测定)。
实施例1
步骤A
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-羟基苯基)丙酸甲酯(中间体1A-a)
将3-氟-L-酪氨酸(6.0g，30.12mmol)悬浮在甲醇(120mL)中，并将混合物在冰浴中冷却。逐滴加入亚硫酰氯(11mL，150.6mmol)。将混合物温热至室温，然后搅拌过夜。蒸发溶剂，将残余物溶于水(50mL)中。用饱和碳酸氢钠水溶液碱化混合物后，将产物萃取至乙酸乙酯(4×40mL)中。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发，得到所需产物，为米色固体(4.55g)。
LCMS(方法4):Rt＝0.65min,m/z 214.1[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-羟基苯基)-丙酸甲酯(中间体1B-a)
将中间体1A-a(4.55g，21.34mmol)悬浮在DCM(153mL)和THF(77mL)的混合物中。将混合物在冰浴中冷却，加入二碳酸二叔丁酯(5.12g，23.47mmol)。将反应混合物温热至室温，并搅拌4小时。将溶剂真空蒸发，将粗产物在120g Si柱上进行色谱分离，用0-10％2M甲醇氨的DCM溶液洗脱。得到中间体1B-a，为黄色胶状物(5.96g)。
LCMS(方法4):Rt＝1.29min,m/z 336.2[M+Na]+
步骤C
4-溴-3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶
(中间体1C-a)
将4-溴-3-甲基-7-氮杂吲哚(4.0g，18.95mmol)溶解在DMF(37mL)中，并将溶液在冰浴中冷却。加入氢化钠(60％，在矿物油上，1.14g，28.43mmol)，并将混合物在氮气流下搅拌1小时。逐滴加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(4.0mL，22.74mmol)，然后将反应混合物再搅拌30分钟。用水(20mL)淬灭后，将产物萃取至乙酸乙酯(3×20mL)中。将合并的萃取液干燥(Na2SO4)，并蒸发。将残余物在120g Si柱上进行色谱分离，用0-25％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到中间体1C-a，为无色油状物(3.78g)。
LCMS(方法6):Rt＝1.90min,m/z 341.1/343.0[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)
乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-丙酸甲酯(中间体1D-a)
将中间体1B-a(5.96g，19.02mmol)和1C-a(6.09g，17.84mmol)，Pd2(dba)3(0.82g，0.89mmol)、XPhos(0.85g，1.78mmol)和碳酸钾(5.42g，39.25mmol)在甲苯(224mL)的混合物在氩气氛下超声处理5分钟。将混合物在100℃下加热3小时，然后冷却至室温，然后通过
过滤。蒸发溶剂，将残余物溶于水(40mL)中，并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并蒸发。将粗产物在300g Si柱上进行色谱分离，用0-50％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱。得到产物，为米色固体(4.85g)。
LCMS(方法4):Rt＝1.88min,m/z 574.4[M+H]+
步骤E
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)
乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体1E-a)
将中间体1D-a(4.85g，8.45mmol)溶于甲醇(42mL)、水(42mL)和THF(21mL)的混合物中。加入氢氧化锂水合物(1.06g，25.35mmol)，将反应混合物在室温下搅拌10分钟。减少溶剂，将产物萃取至乙酸乙酯(3×20mL)中。将合并的有机萃取液用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到米色固体(4.74g)。LCMS(方法6):Rt＝1.79min,m/z 560.4[M+H]+
步骤F
(S)-(3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并
[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸
叔丁酯(中间体1F-a)
将中间体1E-a(500mg，0.89mmol)、1-甲基哌啶-4-胺(112mg，0.98mmol)和COMU(457mg，1.07mmol)溶于DCM(15mL)中，并加入DIPEA(0.35mL，1.96mmol)。将反应物在室温下搅拌2.5小时，然后加入另外量的4-氨基-1-甲基哌啶(55mg，0.49mmol)。继续搅拌2小时。加入水(15mL)，并分离DCM层。将水层用DCM(2×10mL)进一步萃取，将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。将产物通过色谱法在40g Si柱上纯化，用0-10％2M甲醇氨的DCM溶液洗脱。得到中间体1F-a，为黄色固体(418mg)。
LCMS(方法4):Rt＝1.27min,m/z 656.3[M+H]+
步骤G
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-
(1-甲基哌啶-4-基)丙酰胺(实施例1)
将中间体1F-a(418mg，0.64mmol)溶解在DCM(7.1mL)和TFA(7.1mL)的混合物中，并将反应物在室温下搅拌4小时。将混合物用甲醇稀释，并通过10g SCX-2柱，用甲醇洗脱，然后用2M甲醇氨洗脱。静置18小时后，蒸发氨溶液，得到残余物，将其通过HPLC纯化，用10-98％乙腈的水(加入0.1％NH4OH)溶液梯度洗脱。获得实施例1，为白色固体(111mg)。
LCMS(方法1):Rt＝1.69min,m/z 425.9[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.38(s,1H),7.97(d,J＝5.4Hz,1H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.28-7.20(m,2H),7.13(d,J＝1.6Hz,1H),7.08(dd,J＝1.3,8.3Hz,1H),6.16(d,J＝4.8Hz,1H),3.53-3.42(m,1H),3.41-3.35(m,1H),2.87(dd,J＝5.9,13.3Hz,1H),2.74-2.54(m,3H),2.38(d,J＝1.0Hz,3H),2.12(s,3H),1.97-1.86(m,2H),1.79-1.69(s,2H),1.68-1.57(m,2H),1.43-1.26(m,2H)。
实施例2至130
通过在每个步骤中替换适当的起始原料，以与实施例1类似的方式制备以下实施例。
中间体1B-b至1B-e的制备
通过在实施例1的步骤A中用所示的起始原料代替酪氨酸，以与中间体1B-a类似的方式制备以下中间体。
中间体1C-b至1C-f的制备
以与中间体1C-a类似的方式从所示起始原料制备以下中间体。
中间体1D-b至1D-g的制备
以与1D-a类似的方式，从所示起始原料制备以下中间体。
中间体1E-b至1E-p的制备
以与中间体1E-a类似的方式，从所示起始原料制备以下中间体。
实施例的制备
以与实施例1类似的方式，按照相同的合成顺序，通过在步骤F中替换为下表中所示的中间体1E和胺起始原料，制备以下实施例。
实施例131
步骤A
4-溴-1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(中间体131A-a)
将4-溴-7-氮杂吲哚(5.0g，28.90mmol)溶解在DMF(40mL)中，并将溶液在室温下在氮气流下搅拌。分批加入氢化钠(60％，在矿物油上，1.50g，37.58mmol)，并将反应搅拌30分钟。经10分钟滴加4-甲苯磺酰氯(5.77g，30.37mmol)的DMF(10mL)溶液，然后将反应物再搅拌2小时。小心地将反应混合物倒入冷水(100mL)中，并搅拌30分钟。通过过滤收集所得沉淀物，并真空干燥。得到产物，为灰白色固体(9.12g)。
LCMS(方法6):Rt＝1.59min,m/z 351.1/353.1[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)-氧基)苯基)丙
酸甲酯(中间体131B)
将中间体1B-c(500mg，1.69mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷基氯(306mg，2.03mmol)和咪唑(288mg，5.25mmol)在DMF(10mL)中的溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物在乙酸乙酯(15mL)和水(15mL)之间分配，分离有机层，用水(2×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到所需产物，为无色油状物(769毫克)。
LCMS(方法6):Rt＝1.89min,m/z 432.4[M+Na]+
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯
基)丙酸甲酯(中间体131C)
将氢化钠(72mg，1.80mmol)加入到中间体131B(692mg，1.69mmol)在THF(10mL)和DMF(1mL)的混合物中的溶液中。搅拌10分钟后，加入甲基碘(316mg，5.08mmol)，并继续搅拌24小时。将反应混合物在乙酸乙酯(5mL)和水(5mL)之间分配，分离有机层，用水(2×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并蒸发。将产物在Si柱(25g)上纯化，用0-25％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到所需产物，为黄色油状物(436mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.95min,m/z 424.3[M+H]+
步骤D
N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-L-酪氨酸甲酯(中间体131D)
将中间体131C(436mg，1.03mmol)在乙酸(4.45mL)、THF(1.5mL)和水(1.5mL)的混合物中的溶液在室温下搅拌18小时，然后在40℃下搅拌18小时和在75℃下搅拌18小时。将反应混合物真空浓缩，通过小心加入固体碳酸钾将pH调节至pH10。将产物萃取至乙酸乙酯(15mL)中，并将有机层干燥(Na2SO4)，并蒸发。将产物在Si柱(25g)上纯化，用0-25％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到所需产物，为无色油状物，静置后结晶(110mg)。
LCMS(方法9):Rt＝2.95min,m/z 332.2[M+Na]+
步骤E
(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体131E-a)
使用与实施例1的步骤D中使用的类似程序，由中间体131A-a和中间体131D制备中间体131E-a。
LCMS(方法9):Rt＝4.18min,m/z 580.1[M+H]+
步骤F
(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体131F-a)
使用与实施例1的步骤E中使用的类似程序，由中间体131E-a制备中间体131F-a。
LCMS(方法9):Rt＝3.77min,m/z 566.1[M+H]+
步骤G
(S)-(1-(环己基氨基)-1-氧代-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-
基)氧基)苯基)丙-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体131G-a)
使用与实施例1的步骤F中所用的类似程序，由中间体131F-a和环己基甲胺制备中间体131G-a。
LCMS(方法9):Rt＝4.39min,m/z 647.2[M+H]+
步骤H
(S)-3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-环己基-2-(甲基氨基)
丙酰胺(实施例131)
将中间体131G-a(118mg，0.182mmol)溶于DCM(4mL)和TFA(4mL)的混合物中，并将溶液在室温下搅拌1小时。将混合物倒在SCX-2柱(10g)上。用甲醇冲洗后，用2M氨的甲醇溶液洗脱产物，蒸发挥发物。将残余物溶于二噁烷(4mL)中，并加入4M氢氧化钠(4mL)。将混合物在80℃下搅拌4小时。将反应混合物用DCM/IPA(10：1)(10mL)稀释，并用盐水洗涤。将水层用DCM(3×10mL)进一步萃取，将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。通过HPLC纯化产物，用0-80％乙腈水溶液(加入0.1％NH4OH)梯度洗脱，得到白色固体(27mg)。
Rt＝2.47min,m/z 393.3[M+H]+(方法1)
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.72(s,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.58(d,J＝8.1Hz,1H),7.34(dd,J＝2.6,3.3Hz,1H),7.25(d,J＝8.6Hz,2H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.36(d,J＝5.4Hz,1H),6.21(dd,J＝1.9,3.5Hz,1H),3.57-3.47(m,1H),3.10(t,J＝6.9Hz,1H),2.76(d,J＝6.9Hz,2H),2.18(s,3H),1.87(s,1H),1.69-1.48(m,4H),1.29-0.99(m,6H).
ee％＝38％
实施例132至144
通过在每个步骤中替换合适的起始原料，以与实施例131类似的方式制备以下实施例。
中间体131A-b的制备
以与中间体131A-a类似的方式，从所示起始原料制备以下中间体。
中间体131E-b至131E-e的制备
根据实施例1的步骤D中使用的方法，以与中间体131E-a类似的方式，从所示起始原料制备以下中间体。
中间体131F-b至131F-e的制备
根据实施例1步骤E中使用的方法，由所示起始原料制备下列中间体。
实施例的制备
使用与实施例131相同的合成顺序，通过在步骤G中替换所示的中间体131F和胺，制备以下实施例。
实施例145
步骤A
(S)-(3-(3-氟-4-羟基苯基)-1-氧代-1-(苯基氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中
间体145A-a)
使用与实施例1的步骤F所用类似的程序，由(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-羟基苯基)丙酸和苯胺制备中间体145A-a。
LCMS(方法6):Rt＝1.36min,m/z 373.1[M-H]-
步骤B
(S)-(3-(3-氟-4-((3-甲基-1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)-1-氧代-1-(苯基氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体145B-a)
使用与用于实施例1的步骤D的程序类似的程序，由中间体145A-a和131A-b制备中间体145B-a。
LCMS(方法6):Rt＝1.80min,m/z 659.3[M+H]+
步骤C
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-
苯基丙酰胺(实施例145)
将中间体145B-a(180mg，0.274mmol)溶解在DCM(5mL)中，并加入TFA(1mL)。在室温下搅拌90分钟后，蒸发挥发物，将残余物溶于甲醇。将溶液加载到SCX-2柱(5g)上。用DCM和甲醇冲洗后，用2M甲醇氨洗脱游离碱。蒸发得到残余物，将其再溶于甲醇(5mL)中。加入氢氧化锂水合物(22mg，0.516mmol)的水(2mL)溶液，将反应物在室温下搅拌18小时，然后在50℃下搅拌2小时。蒸发甲醇，将含水混合物用DCM(12mL)萃取。将有机物干燥(Na2SO4)并蒸发。通过HPLC纯化产物，用10-98％乙腈水溶液(0.1％NH4OH)梯度洗脱，得到白色固体(14mg)。
Rt＝2.62min,m/z 405.2[M+H]+(方法1)
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.38(s,1H),9.84(s,1H),7.94(d,J＝5.4Hz,1H),7.60(d,J＝7.5Hz,2H),7.36-7.12(m,6H),7.05(t,J＝7.4Hz,1H),6.08(d,J＝4.9Hz,1H),3.60(dd,J＝5.7,7.9Hz,1H),3.01(dd,J＝5.5,13.4Hz,1H),2.79(dd,J＝8.1,13.4Hz,1H),2.37(d,J＝1.0Hz,3H),2.00(s,2H).
实施例146至149
通过在每个步骤中替换合适的起始原料，以与实施例145类似的方式制备以下实施例。
中间体145A-b至145A-d的制备
通过在实施例145的步骤A中用所示的胺代替酪氨酸，以与中间体145A-a类似的方式制备以下中间体。
中间体145B-b至145B-e的的制备
以与145B-a类似的方式，从所示起始原料制备以下中间体。
实施例的制备
按照相同的合成顺序，通过在步骤C中代替下表所示的中间体，以与实施例145类似的方式制备以下实施例。
实施例150
步骤A
2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-羟基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(中间体150A)
使用与用于实施例1的步骤A和B的方法相似的方法，由2-氨基-3-(4-羟基苯基)-2-甲基丙酸制备中间体150A。
LCMS(方法6):Rt＝1.27min,m/z 332.1[M+Na]+
步骤B
2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基-3-(4-((1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体150B)
使用与用于实施例1的步骤D的方法类似的方法，由中间体150A和中间体131A-a制备中间体150B。
LCMS(方法6):Rt＝1.73min,m/z 580.2[M+H]+
步骤C
3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-2-((叔丁氧基羰基)-氨基)-
2-甲基丙酸(中间体150C)
将中间体150B(1.0g，1.73mmol)溶解在甲醇(10mL)中，并加入2M氢氧化锂(1mL)。将反应在60℃下搅拌3小时。加入另一份2M氢氧化锂(1mL)，并继续加热4小时。在室温下再搅拌18小时后，蒸发反应混合物，用1M盐酸(20mL)处理，用DCM(30mL)萃取产物。将有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发，得到产物，为胶状物(861mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.13min,m/z 412.3[M+H]+
步骤D
(3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(环己基氨基)-2-甲基-1-
氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体150D)
使用类似于实施例1的步骤F中所用的方法，由中间体150C和环己胺制备中间体150D。
LCMS(方法6):Rt＝1.45min,m/z 493.2[M+H]+(方法1)
步骤D
3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-2-氨基-N-环己基-2-甲基丙
酰胺(实施例150)
使用与实施例1的步骤G中使用的方法类似的方法，由中间体150D制备实施例150。
LCMS(方法1):Rt＝2.47min,m/z 393.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.71(s,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.47(d,J＝8.3Hz,1H),7.35-7.32(m,1H),7.23(d,J＝8.6Hz,2H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.37(d,J＝5.4Hz,1H),6.19(dd,J＝2.0,3.5Hz,1H),3.51-3.43(m,1H),3.05(d,J＝12.8Hz,1H),2.63(d,J＝12.8Hz,1H),1.80(s,2H),1.70-1.47(m,5H),1.34-1.22(m,2H),1.21(s,3H),1.19-0.98(m,3H).
实施例151的制备
以与实施例150类似的方式，按照相同的合成顺序，通过在步骤D中替换下表所示的胺起始原料，从中间体150C制备实施例151。
实施例152
步骤A
(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酰基)哌嗪-1-甲酸苄酯(中
间体152A)
使用与实施例1的步骤F中使用的方法类似的方法，由1E-a和哌嗪-1-甲酸苄酯制备中间体152A。
LCMS(方法6):Rt＝1.89min,m/z 762.2[M+H]+
步骤B
(S)-(3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并
[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代-1-(哌嗪-1-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体
152B)
将中间体152A(1.50g，1.97mmol)溶解在IMS(44.6mL)中，并加入10％钯碳(187mg)。在由气球提供的氢气气氛下搅拌混合物。18小时后，将混合物通过
过滤，并将溶剂真空蒸发。将残余物在40g Si柱上进行色谱分离，用0-10％的2M氨的甲醇溶液在DCM中洗脱。得到产物，为白色固体(951mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.39min,m/z 628.2[M+H]+
步骤C
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-
(哌嗪-1-基)丙-1-酮(实施例152)
将中间体152B(66mg，0.11mmol)溶解在DCM(1.2mL)中，并加入TFA(1.2mL)。将溶液在室温下搅拌3小时。将反应混合物用甲醇稀释，并通过5g SCX-2柱。用甲醇冲洗后，用2M氨的甲醇溶液洗脱产物。蒸发得到残余物，将其溶于THF(1.2mL)中。加入4M氢氧化钠水溶液(1.2mL)，并将反应物在室温下搅拌1小时。用水(8mL)稀释后，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取产物。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。通过HPLC纯化产物，用10-98％乙腈的水(加入0.1％NH4OH)溶液梯度洗脱。得到所需产物，为米色固体(23mg)。
LCMS(方法1):Rt＝1.57min,m/z 398.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.39(s,1H),8.00-7.96(m,1H),7.34-7.20(m,2H),7.15-7.08(m,2H),6.16-6.10(m,1H),3.96-3.89(m,1H),3.50-3.30(m,8H),2.80(dd,J＝6.2,13.2Hz,1H),2.72-2.63(m,2H),2.55-2.52(m,1H),2.38-2.36(m,4H).
ee％(n.d.)
实施例153
步骤A
(S)-(3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并
[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代-1-(4-(哒嗪-4-基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-基)氨基
甲酸叔丁酯(中间体153A)
将中间体152B(150mg，0.24mmol)、哒嗪-4-甲醛(39mg，0.36mmol)和乙酸(0.05mL)在DCE(3mL)中的溶液在室温下在
分子筛上搅拌2.5小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(127mg，0.60mmol)，并继续搅拌1小时。将混合物用甲醇稀释，并通过10g SCX-2柱。用甲醇冲洗后，用2M氨的甲醇溶液洗脱产物。蒸发得到所需产物(168mg)，其无需进一步纯化即可使用。
LCMS(方法6):Rt＝1.69min,m/z 720.3[M+H]+
步骤B
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-
(4-(哒嗪-4-基甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮(实施例153)
使用与实施例1的步骤G中使用的方法类似的方法，由中间体153A制备实施例153。
LCMS(方法1):Rt＝2.07min,m/z 490.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.40(s,1H),9.18-9.15(m,2H),7.99(d,J＝5.4Hz,1H),7.59(dd,J＝2.4,5.1Hz,1H),7.32(dd,J＝1.9,11.8Hz,1H),7.24(dd,J＝8.4,8.4Hz,1H),7.14(s,1H),7.11(dd,J＝1.3,8.3Hz,1H),6.17(d,J＝5.4Hz,1H),3.93(dd,J＝6.8,6.8Hz,1H),3.55(s,2H),3.53-3.36(m,4H),2.80(dd,J＝6.2,13.2Hz,1H),2.67(dd,J＝7.5,13.2Hz,1H),2.43-2.22(m,6H),2.18-2.10(m,1H),1.63-1.83(s,2H).
实施例154至164
通过在步骤A中替换下表中所示的相应醛，以与实施例153类似的方式制备以下实施例。
实施例165
步骤A
(S)-3-((4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲
硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)甲
基)苯甲酸甲酯(中间体165A)
使用类似于实施例153的步骤A的方法，由中间体152B和3-甲酰基苯甲酸甲酯制备中间体165A。
LCMS(方法4):Rt＝1.51min,m/z 776.4[M+H]+
步骤B
(S)-3-((4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲
硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)甲
基)苯甲酸(中间体165B)
使用与实施例1的步骤E中使用的方法类似的方法，由中间体165A制备中间体165B。
LCMS(方法4):Rt＝1.42min,m/z 762.5[M+H]+
步骤C
(S)-(3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并
[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(4-(3-(甲基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-
2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体165C)
使用与实施例1的步骤F中使用的方法类似的方法，由中间体165B和甲胺制备中间体165C。
LCMS(方法4):Rt＝1.37min,m/z 775.5[M+H]+
步骤D
(S)-3-((4-(2-氨基-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)
苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-甲基苯甲酰胺(实施例165)
使用与实施例1的步骤G中使用的方法类似的方法，由中间体165C制备实施例165。
LCMS(方法1):Rt＝1.93min,m/z 545.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.41(s,1H),8.42-8.38(m,1H),7.98(d,J＝5.4Hz,1H),7.75(s,1H),7.73-7.69(m,1H),7.41(d,J＝6.5Hz,2H),7.31(dd,J＝2.1,12.0Hz,1H),7.24(dd,J＝8.4,8.4Hz,1H),7.14-7.08(m,2H),6.16(d,J＝5.4Hz,1H),3.93(dd,J＝6.6,6.6Hz,1H),3.49(s,3H),3.46-3.41(m,3H),2.84-2.76(m,4H),2.67(dd,J＝7.4,13.1Hz,1H),2.38(s,3H),2.37-2.30(m,2H),2.23-2.18(m,1H),2.06(dd,J＝7.4,7.4Hz,1H),1.70(s,2H).
实施例166
使用实施例165的类似方法，通过在步骤A中将醛替换为下表中所示的醛，制备以下实施例。
实施例167
步骤A
(S)-(1-(4-苯甲酰基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔
丁酯(中间体167A)
使用与实施例1的步骤F中使用的条件类似的条件，由中间体152B和苯甲酸制备中间体167A。
LCMS(方法6):Rt＝1.81min,m/z 732.3[M+H]+
步骤B
(S)-2-氨基-1-(4-苯甲酰基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-
b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-1-酮(实施例167)
使用与实施例1的步骤G类似的方法，由中间体167A制备实施例167。
LCMS(方法2):Rt＝3.51min,m/z 502.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.40(s,1H),7.96(d,J＝5.4Hz,1H),7.47-7.38(m,5H),7.35(d,J＝11.8Hz,1H),7.24(t,J＝8.4Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),6.13(d,J＝5.4Hz,1H),3.94-3.94(m,1H),3.71-3.37(m,7H),3.26–3.01(m,1H),2.84(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.72-2.65(m,1H),2.38(s,3H),1.75(s,2H).
实施例168至177
通过在步骤A中将相应的羧酸替换为下表中所示的那些，以与实施例167类似的方式制备以下实施例。
实施例178
步骤A
3-((3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(二甲基氨基)-1-氧代
丙-2-基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体178A)
将实施例113(45mg，0.139mmol)、外消旋的1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(33mg，0.153mmol)和DIPEA(72μL，0.419mmol)溶解在DMF(2mL)和DCM(5mL)的混合物中。加入HATU(63mg，0.166mmol)，并将反应物在室温下搅拌过夜。蒸发得到残余物，其不经进一步纯化而使用(82mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.08和1.09min,m/z 522.3[M+H]+
步骤B
N-(3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(二甲基氨基)-1-氧代
丙-2-基)吡咯烷-3-甲酰胺(实施例178)
将中间体178A(72mg，粗品)溶解在DCM(3mL)中，并加入TFA(1mL)。将反应物在室温下搅拌过夜，然后蒸发挥发物。将残余物溶解在甲醇中，并加载到已用甲醇调节的2g SCX-2柱上。用甲醇冲洗后，用2M氨的甲醇溶液洗脱产物。蒸发溶剂后，将残余物通过HPLC纯化，用10-98％乙腈水溶液(加入0.1％甲酸)梯度洗脱。得到所需产物，为灰白色固体(24mg)。
LCMS(方法3):Rt＝1.93min,m/z 422.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.72(s,1H),8.45(d,J＝8.4Hz,1H),8.33(s,1H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.33-7.30(m,3H),7.10-7.07(m,2H),6.36(d,J＝5.4Hz,1H),6.14(d,J＝2.9Hz,1H),4.96-4.88(m,1H),3.07-2.96(m,2H),2.95(s,3H),2.93-2.88(m,2H),2.87-2.77(m,2H),2.82(s,3H),2.74(dd,J＝6.5,10.5Hz,1H),1.97-1.73(m,2H).
实施例179至180
通过替换如下表中所示的合适的起始材料，以与实施例178类似的方式制备以下实施例
中间体179A至180A的制备
通过在步骤1中将中间体1E-a和胺替换为下表中所示的相应起始原料，以与实施例1类似的方式制备以下中间体。
实施例的制备
通过在步骤A中替换下表中所示的起始材料，以与实施例178类似的方式制备以下实施例。
实施例181
步骤A
2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧
基)苯基)丙酸甲酯(中间体181A)
使用类似于实施例1的步骤D中所用的方法，由中间体131A-a和(叔丁氧基羰基)酪氨酸甲酯制备中间体181A。
LCMS(方法6):Rt＝1.69min,m/z 566.2[M+H]+
步骤B
2-氨基-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯
(中间体181B)
将中间体181A(2.31g，4.09mmol)溶解在DCM(10mL)中，并加入TFA(2mL)。将反应物在室温下搅拌6小时，然后蒸发挥发物。将残余物在24g Si柱上进行色谱分离，用0-10％甲醇的DCM溶液洗脱，得到米色固体产物(2.03g)。
LCMS(方法6):Rt＝1.07min,m/z 466.2[M+H]+
步骤C
2-(环己烷甲酰胺基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)
苯基)丙酸甲酯(中间体181C)
将中间体181B(250mg，0.538mmol)溶解在DCM(10mL)中，并加入DIPEA(140μL，0.806mmol)和环己烷碳酰氯(87μL，0.646mmol)。将反应物在室温下搅拌18小时，然后用DCM(20mL)稀释。将溶液用饱和氯化铵溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。得到固体产物(290mg)
LCMS(方法5):Rt＝1.64min,m/z 576.3[M+H]+
步骤D
2-(环己烷甲酰胺基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)
苯基)丙酸(中间体181D)
将中间体181C(290mg，0.504mmol)溶解在甲醇(5mL)中，并加入氢氧化锂水合物(32mg，0.762mmol)的水(1mL)溶液。将反应物在室温下搅拌过夜。蒸发甲醇，通过加入1NHCl将水溶液调节至pH5。将产物萃取至DCM(10mL)中，并将溶液干燥(Na2SO4)并蒸发，得到所需产物，为固体(248mg)。
LCMS(方法5):Rt＝1.56min,m/z 562.2[M+H]+
步骤E
N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-氧代-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,
3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-2-基)环己甲酰胺(中间体181E)
使用与实施例1的步骤F中使用的类似方法，由中间体181D和N,N-二甲基乙烷-1,2-二胺制备中间体181E。
LCMS(方法6):Rt＝1.19min,m/z 632.4[M+H]+
步骤F
N-(3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-((2-(二甲基氨基)乙
基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己甲酰胺(实施例181)
将中间体181E(153mg，0.267mmol)溶解在甲醇(5mL)中，并加入氢氧化锂水合物(22mg，0.533mmol)的水(1.5mL)溶液。将反应物在室温下搅拌1小时，然后加入THF(3mL)。在50℃下继续搅拌2小时。蒸发溶剂，通过HPLC纯化粗混合物，用10-98％乙腈水溶液(加入0.1％NH4OH)梯度洗脱。获得实施例181，为白色固体(30mg)。
LCMS(方法1):Rt＝2.49min,m/z 478.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.71(s,1H),8.05-8.03(m,1H),7.89(d,J＝8.7Hz,1H),7.82(dd,J＝5.4,5.4Hz,1H),7.33-7.28(m,3H),7.07(d,J＝8.6Hz,2H),6.34(d,J＝5.4Hz,1H),6.16(d,J＝3.5Hz,1H),4.53-4.45(m,1H),3.18-3.10(m,2H),3.01(dd,J＝4.7,13.5Hz,1H),2.75(dd,J＝10.1,13.6Hz,1H),2.28-2.22(m,2H),2.14-2.13(m,6H),1.70-1.54(m,4H),1.50-1.46(m,1H),1.29-1.11(m,6H).
实施例182
步骤A
2-(二甲基氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)
丙酸甲酯(中间体182A)
将中间体181B(475mg，1.022mmol)溶解在IMS(10mL)中，并将溶液加入到含有10％钯碳(50mg)的烧瓶中。加入含水多聚甲醛(37％，0.61mL，8.18mmol)，将容器抽真空并用氢气回填。将反应在室温和氢气氛下搅拌18小时。将混合物通过
过滤，蒸发溶剂，得到所需产物，其不经进一步纯化而使用(603mg粗品)。
LCMS(方法6):Rt＝1.13min,m/z 494.2[M+H]+
步骤B
3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-2-(二甲基氨基)丙酸(中间体
182B)
将中间体182A(504mg，1.02mmol)溶解在甲醇(10mL)中，并加入氢氧化锂水合物(86mg，2.04mmol)的水(2mL)溶液。将反应在50℃下搅拌4小时，然后在室温下搅拌过夜。将溶剂真空蒸发，粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
LCMS(方法6):Rt＝0.59min,m/z 326.2[M+H]+
步骤C
3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-2-(二甲基氨基)-N-(四氢-
2H-吡喃-4-基)丙酰胺(实施例182)
使用类似于实施例1的步骤F中所用的方法，由中间体182B和四氢-2H-吡喃-4-胺制备实施例182。
LCMS(方法1):Rt＝1.95min,m/z 409.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.71(s,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.33(d,J＝3.5Hz,1H),7.26(d,J＝8.6Hz,2H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.35(d,J＝5.4Hz,1H),6.17(d,J＝3.4Hz,1H),3.82-3.70(m,3H),3.30-3.24(m,1H),3.19-3.12(m,2H),2.96(dd,J＝9.6,13.0Hz,1H),2.80(dd,J＝5.0,13.1Hz,1H),2.27(s,6H),1.66-1.59(m,1H),1.50-1.18(m,3H).
实施例183
以与实施例182类似的方式，通过在步骤C中替换下表中所示的胺，制备以下实施例。
实施例184
步骤A
(S)-2-氨基-3-(4-((3-甲基-1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)丙酸甲酯(中间体184A)
使用与实施例1的步骤G中使用的方法类似的方法，由中间体131E-c制备中间体184A。
LCMS(方法8):Rt＝1.18min,m/z 480.2[M+H]+
步骤B
(S)-2-(二甲基氨基)-3-(4-((3-甲基-1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-
基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体184B)
使用类似于用于中间体182A的方法，由中间体184A制备中间体184B。
LCMS(方法6):Rt＝1.17min,m/z 508.4[M+H]+
步骤C
(S)-2-(二甲基氨基)-3-(4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)
丙酸(中间体184C)
使用类似于用于中间体182B的方法，由中间体184B制备中间体184C。
LCMS(方法6):Rt＝0.71min,m/z 340.3[M+H]+
步骤D
(S)-N-环己基-2-(二甲基氨基)-3-(4-((3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)
氧基)苯基)丙酰胺(实施例184)
使用类似于实施例1的步骤F中的酰胺偶联的方法，由中间体184C和环己胺制备实施例184。
LCMS(方法1):Rt＝2.59min,m/z 421.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.35(s,1H),7.98-7.96(m,1H),7.54(d,J＝8.1Hz,1H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),7.12(s,1H),7.02(d,J＝8.5Hz,2H),6.19(d,J＝5.4Hz,1H),3.55-3.46(m,1H),3.17-3.11(m,1H),2.94(dd,J＝9.6,13.0Hz,1H),2.76(dd,J＝5.1,13.0Hz,1H),2.31(d,J＝1.0Hz,3H),2.26(s,6H),1.71-1.46(m,5H),1.29-0.93(m,5H).
(ee％＝75％)
实施例185
步骤A
2-((环己基甲基)氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧
基)苯基)丙酸甲酯(中间体185A)
将中间体181B(250mg，0.538mmol)和环己烷甲醛(72μL，0.589mmol)溶解在DCM(5mL)中，并加入三乙酰氧基硼氢化钠(228mg，1.08mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(5mL)和盐水(5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。产物无需纯化即可用于下一步反应(255mg)。
LCMS(方法5):Rt＝1.26min,m/z 562.3[M+H]+
步骤B
2-((环己基甲基)氨基)-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧
基)苯基)丙酸(中间体185B)
使用类似于实施例1的步骤E中所用的方法，由中间体185A制备中间体185B。
LCMS(方法5):Rt＝1.31min,m/z 548.2[M+H]+
步骤C
2-((环己基甲基)氨基)-N-甲基-3-(4-((1-甲苯磺酰-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-
基)氧基)苯基)丙酰胺(中间体185C)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体185B和甲胺(2M的THF溶液)制备中间体185C。
LCMS(方法6):Rt＝1.19min,m/z 561.3[M+H]+
步骤D
3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-2-((环己基甲基)氨基)-N-甲
基丙酰胺(实施例185)
使用类似于实施例182的步骤B的方法，由中间体185C制备实施例185。
LCMS(方法1):Rt＝2.43min,m/z 407.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.71(s,1H),8.06(d,J＝5.4Hz,1H),7.77-7.70(m,1H),7.32(d,J＝3.5Hz,1H),7.27(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝8.5Hz,2H),6.37(d,J＝5.4Hz,1H),6.14(d,J＝3.4Hz,1H),3.18-3.10(m,1H),2.84(dd,J＝6.0,13.4Hz,1H),2.70(dd,J＝7.9,13.4Hz,1H),2.57(d,J＝4.7Hz,3H),2.34-2.21(m,1H),2.17-2.09(m,1H),1.68-1.56(m,6H),1.32-1.20(m,1H),1.19-1.05(m,3H),0.84-0.73(m,2H).
实施例186
步骤A
(S)-(1-(环己基氨基)-3-(3-氟-4-羟基苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
(中间体186A)
使用与实施例1的步骤F类似的方法，由(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-羟基苯基)丙酸和环己胺制备中间体186A。
LCMS(方法6):Rt＝1.35min,m/z 403.3[M+Na]+
步骤B
(S)-(1-(环己基氨基)-3-(3-氟-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体186B)
使用类似于用于实施例1的步骤D的方法，由中间体186A和中间体1C-c制备中间体186B。
LCMS(方法6):Rt＝1.84min,m/z 627.4[M+H]+
步骤C
(S)-(3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1-(环己基氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体
186C)
将中间体186B(580mg，0.927mmol)溶解在乙腈(15mL)中，并将溶液在0℃下搅拌。加入NBS(173mg，0.972mmol)，并将反应在0℃下搅拌30分钟。在室温下继续搅拌1小时，然后加入1M硫代硫酸钠(15mL)。将产物萃取至乙酸乙酯(3×10mL)中，将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物在12g Si柱上进行色谱分离，用0-30％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱。获得纯产物，为奶油色固体(351mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.91min,m/z 705.3/707.3[M+H]+
步骤D
(S)-2-氨基-3-(4-((3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-N-环
己基丙酰胺(实施例186)
使用与用于实施例1的步骤G的类似程序，从中间体186C制备实施例186。
LCMS(方法1):Rt＝3.08min,m/z 475.1/477.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.16(s,1H),8.08(d,J＝5.5Hz,1H),7.62–7.60(m,2H),7.30-7.23(m,2H),7.09(d,J＝8.3Hz,1H),6.27-6.24(m,1H),3.55-3.47(m,1H),3.40-3.35(m,1H),2.88(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.71(dd,J＝7.4,13.2Hz,1H),1.82(s,2H),1.69-1.49(m,5H),1.32-1.02(m,5H).
实施例187
步骤A
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-羟基苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔
丁酯(中间体187A)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由N-Boc-3-氟-L-酪氨酸和1-苄基哌嗪制备中间体187A。
LCMS(方法6):Rt＝0.94min,m/z 458.3[M+H]+
步骤B
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲
基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体
187B)
使用与用于实施例1的步骤D的类似程序，由中间体187A和中间体1C-c制备中间体187B。
LCMS(方法6):Rt＝1.42min,m/z 704.4[M+H]+
步骤C
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲
基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中
间体187C)
使用与用于中间体186C的程序类似的程序，从中间体187B制备中间体187C。
LCMS(方法6):Rt＝1.49min,m/z 782.3/784.3[M+H]+
步骤D
(S)-2-氨基-1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)
氧基)-3-氟苯基)丙-1-酮(实施例187)
使用与用于实施例1的步骤G的类似程序，从中间体187C合成实施例187。
LCMS(方法1):Rt＝2.42min,m/z 552.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.17(s,1H),8.09(d,J＝5.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.35-7.24(m,6H),7.12(d,J＝8.3Hz,1H),6.27-6.25(m,1H),3.94(t,J＝6.9Hz,1H),3.55-3.38(m,5H),2.80(dd,J＝6.4,13.1Hz,1H),2.68(dd,J＝7.3,13.3Hz,1H),2.34-2.33(m,2H),2.20-2.16(m,1H),2.04(m,1H),1.78-1.78(m,2H).
实施例188
步骤A
(S)-3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸甲酯(中间体188A)
使用类似于中间体186C的程序，由中间体1D-e制备中间体188A。
LCMS(方法6):Rt＝1.88min,m/z 620.2/622.2[M+H]+
步骤B
(S)-3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(中间体188B)
使用类似于实施例1的步骤E的方法，由中间体188A制备中间体188B。
LCMS(方法6):Rt＝1.79min,m/z 606.2/608.2[M+H]+
步骤C
(S)-(3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(环己基氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体188C)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体188B和环己胺制备中间体188C。
LCMS(方法6):Rt＝1.91min,m/z 687.3/689.3[M+H]+
步骤D
(S)-2-氨基-3-(4-((3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-环己基
丙酰胺(实施例188)
使用与用于实施例1的步骤G的类似程序，从中间体188C制备实施例188。
LCMS(方法1):Rt＝3.01min,m/z 457.1/459.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.11(s,1H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.60-7.58(m,2H),7.28(d,J＝8.6Hz,2H),7.10-7.07(m,2H),6.29(d,J＝5.4Hz,1H),3.55-3.46(m,1H),3.39-3.35(m,1H),2.87(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.68(dd,J＝7.4,13.3Hz,1H),1.76-1.75(m,2H),1.69-1.54(m,4H),1.29-1.16(m,3H),1.16-1.02(m,3H).
实施例189
步骤A
(S)-(3-(4-((3-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
(中间体189A)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体188B和四氢-2H-吡喃-4-胺制备中间体189A。
LCMS(方法8):Rt＝1.76min,m/z 689.3/691.3[M+H]+
步骤B
(S)-2-氨基-3-(4-((3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-(四氢-
2H-吡喃-4-基)丙酰胺(实施例189)
使用与用于实施例1的步骤G的脱保护的程序类似的程序，由中间体189A制备实施例189。
LCMS(方法1):Rt＝2.49min,m/z 459.1/461.1
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.12(s,1H),8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.73-7.69(m,1H),7.59(s,1H),7.28(d,J＝8.6Hz,2H),7.09(d,J＝8.5Hz,2H),6.30(d,J＝5.4Hz,1H),3.83-3.70(m,3H),3.40-3.34(m,3H),2.87(dd,J＝5.9,13.2Hz,1H),2.69(dd,J＝7.4,13.2Hz,1H),1.82(s,2H),1.66-1.55(m,2H),1.43-1.26(m,2H).
实施例190
(S)-2-氨基-N-环己基-3-(4-((3-碘-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)
丙酰胺(实施例190)
通过在步骤C中用NIS代替NBS，与实施例186类似地制备实施例190。
LCMS(方法1):Rt＝3.03min,m/z 505.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.13(s,1H),8.06(d,J＝5.4Hz,1H),7.60(s,1H),7.58(d,J＝8.3Hz,1H),7.28(d,J＝8.5Hz,2H),7.07(d,J＝8.5Hz,2H),6.29(d,J＝5.4Hz,1H),3.55-3.46(m,1H),3.39-3.34(m,1H),2.87(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.67(dd,J＝7.5,13.2Hz,1H),1.72-1.52(m,6H),1.30-1.02(m,6H).
实施例191
(S)-2-氨基-3-(4-((3-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-环己基
丙酰胺(实施例191)
通过用NCS代替步骤C NBS，与实施例186类似地制备实施例191。
LCMS(方法1):Rt＝2.96min,m/z 413.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.03(s,1H),8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.60-7.55(m,2H),7.28(d,J＝8.6Hz,2H),7.09(d,J＝8.6Hz,2H),6.29(d,J＝5.5Hz,1H),3.55-3.46(m,1H),3.39-3.34(m,1H),2.87(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.68(dd,J＝7.4,13.3Hz,1H),1.76(s,1H),1.70-1.52(m,5H),1.29-1.05(m,6H).
实施例192
步骤A
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)
甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体192A)
使用NIS而不是NBS，以与中间体186C类似的方式，从中间体1D-e制备中间体192A。
LCMS(方法4):Rt＝1.91min,m/z 668.0[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)
甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体192B)
以与实施例1的步骤E类似的方式，由中间体192A制备中间体192B。
LCMS(方法4):Rt＝1.83min,m/z 654.0[M+H]+
步骤C
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲
基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体
192C)
使用与用于实施例1的步骤F的条件相同的条件，由中间体192B和1-苄基哌嗪制备中间体192C。
LCMS(方法4):Rt＝2.64min,m/z 812.1[M+H]+
步骤D
(S)-2-氨基-1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-(吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-1-酮(实施例192)
将在DME(3mL)和水(1mL)的混合物中的中间体192C(200mg，0.247mmol)、吡啶-4-硼酸(61mg，0.496mmol)、PdCl2(dppf)2.CH2Cl2(10mg，0.012mmol)和碳酸钾(75mg，0.543mmol)用氩气鼓泡5分钟。将混合物在90℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。将混合物施加到5g SCX-2柱上，然后用DCM和甲醇冲洗。用2M氨的甲醇溶液洗脱产物，蒸发得到残余物，将其溶于DCM(5mL)中。加入TFA(2mL)，并将溶液在室温下搅拌过夜。在真空中除去挥发性组分后，通过HPLC纯化产物，用10-98％乙腈的水(加入0.1％NH4OH)溶液梯度洗脱。得到所需化合物，为白色固体(53mg)。
LCMS(方法1):Rt＝1.69min,m/z 533.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.25(s,1H),8.47-8.45(m,2H),8.11(d,J＝5.5Hz,1H),7.92(s,1H),7.74-7.71(m,2H),7.32-7.24(m,6H),7.14(d,J＝8.5Hz,2H),6.34(d,J＝5.4Hz,1H),3.91(dd,J＝6.9,6.9Hz,1H),3.57(s,3H),3.43-3.38(m,5H),2.77(dd,J＝6.7,13.1Hz,1H),2.70-2.62(m,1H),2.35-2.17(m,3H),2.06-2.02(m,1H),1.71(s,1H).
(ee％n.d.)
实施例193至202
通过在步骤D中替换下表所示的硼酸或硼酸酯，以与实施例192类似的方式制备以下实施例。
实施例203
(S)-2-氨基-N-环己基-3-(4-((3-环丙基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)丙酰胺(实施例203)
使用类似于实施例192的步骤D的方法，由中间体188C和环丙基硼酸制备实施例203。
LCMS(方法1):Rt＝2.75min,m/z 419.3[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.37(s,1H),7.99(d,J＝5.4Hz,1H),7.57(d,J＝8.1Hz,1H),7.25(d,J＝8.6Hz,2H),7.05(d,J＝8.6Hz,2H),7.02(d,J＝2.0Hz,1H),6.26(d,J＝5.4Hz,1H),3.54-3.45(m,1H),3.38-3.34(m,1H),2.85(dd,J＝5.9,13.2Hz,1H),2.67(dd,J＝7.5,13.1Hz,1H),2.08-2.02(m,1H),1.72-1.61(m,5H),1.55-1.51(m,1H),1.28-1.01(m,6H),0.77-0.71(m,2H),0.60-0.55(m,2H).
ee％＝82％
实施例204
步骤A
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)
甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体204A)
使用类似于实施例1的步骤D的方法，由中间体1C-c和中间体1A-a制备中间体204A。
LCMS(方法6):Rt＝1.99min,m/z 560.3[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙
氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-丙酸甲酯(中间体204B)
使用类似于用于中间体186C的程序，用NIS代替NBS，由中间体204A制备中间体204B。
LCMS(方法4):Rt＝2.09min,m/z 686.3[M+H]+
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙
氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体204C)
使用与实施例1的步骤E中使用的相同的方法，由中间体204B制备中间体204C。
LCMS(方法9):Rt＝2.70min,m/z 672.1[M+H]+
步骤D
(S)-(3-(3-氟-4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,
3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁
酯(中间体204D)
使用类似于实施例1的步骤F中所用的方法，由中间体204C和1-甲基哌啶-4-胺制备中间体204D。
LCMS(方法4):Rt＝1.51min,m/z 768.3[M+H]+
步骤E
(S)-(3-(3-氟-4-((3-苯基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并
[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸
叔丁酯(中间体204E)
将中间体204D(500mg，0.651mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-苯基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(266mg，1.30mmol)、Pd2Cl2(dppf).CH2Cl2(27mg，0.033mmol)、碳酸钾(198mg，1.43mmol)、DME(4mL)和水(0.4mL)的混合物在95℃加热19小时。冷却后，将混合物通过
过滤。将溶液用乙酸乙酯(20mL)稀释，用水(10mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。蒸发得到粗产物，将其在Si柱(24g)上进行色谱分离，用0-100％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，然后用0-10％甲醇的DCM溶液洗脱。获得无色泡沫状的纯产物(180mg)。
LCMS(方法4):Rt＝1.35min,m/z 718.5[M+H]+
步骤F
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-苯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-
(1-甲基哌啶-4-基)丙酰胺(实施例204)
使用类似于用于实施例1的步骤G的方法，由中间体204E制备实施例204。
LCMS(方法1):Rt＝2.21min,m/z 488.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.04(s,1H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.70-7.60(m,4H),7.36-7.18(m,5H),7.07(dd,J＝1.3,8.4Hz,1H),6.24(d,J＝5.2Hz,1H),3.51-3.43(m,1H),3.37(t,J＝6.7Hz,1H),2.85(dd,J＝6.1,13.2Hz,1H),2.73-2.54(m,3H),2.12(s,3H),1.94-1.87(m,2H),1.75(s,2H),1.62-1.54(m,2H),1.42-1.24(m,2H).
实施例205
使用类似于实施例204的程序，通过替换步骤E中给出的硼酸酯，从中间体204D和给出的硼酸酯制备以下实施例。
实施例206
步骤A
4-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(中间体206A)
将4-溴-7-氮杂吲哚(2.5g，12.69mmol)溶解在DMF(20mL)中，并将溶液在氮气流下在冰浴中冷却。加入氢化钠(60％，在矿物油中，635mg，15.88mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后加入4-甲氧基苄基溴(2.81g，13.96mmol)，并将反应物在室温下搅拌2小时。此后，通过小心加入水(30mL)淬灭混合物，并将产物萃取至乙酸乙酯(3×20mL)中。将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物在80g Si柱上进行色谱分离，用0-30％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱。得到纯产物，为奶油色固体(3.62g)。
LCMS(方法4):Rt＝1.61min,m/z 316.9/318.9[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体206B)
根据实施例1的步骤D的程序，由中间体206A和1B-c制备中间体206B。
LCMS(方法4):Rt＝1.65min,m/z 532.1[M+H]+
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-碘-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡咯并[2,
3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体206C)
用NIS代替NBS，使用类似于中间体186C的程序，从中间体206B和NIS制备中间体206C。
LCMS(方法4):Rt＝1.75min,m/z 658.0[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-碘-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡咯并[2,
3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体206D)
使用类似于用于实施例1的步骤E的程序，由中间体206C制备中间体206D。
LCMS(方法4):Rt＝1.68min,m/z 644.0[M+H]+
步骤E
(S)-(3-(4-((3-碘-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)-1-氧代-1-((2-(吡啶-4-基)乙基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体206E)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体206D和2-(吡啶-4-基)乙烷-1-胺制备中间体206E。
LCMS(方法4):Rt＝1.27min,m/z 748.0[M+H]+
步骤F
(S)-2-氨基-3-(4-((3-(4-羟基苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)-N-(2-(吡啶-4-基)乙基)丙酰胺(实施例206)
将中间体206E(170mg，0.228mmol)、(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)硼酸(115mg，0.456mmol)、Pd2Cl2(dppf).CH2Cl2(9mg，mmol)、碳酸钾(69mg，mmol)、DME(3mL)和水(1mL)的混合物在90℃下加热19小时。蒸发得到粗产物，将其在Si柱(24g)上进行色谱分离，用0-10％甲醇的DCM溶液洗脱。将产物溶于TFA(2mL)中，并在90℃下搅拌18小时。加入三氟甲磺酸(34mg，0.288mmol)，并在65℃下继续加热3小时。使反应冷却，倒入SCX-2柱(5g)中。用DCM和甲醇冲洗后，用2M氨的甲醇溶液洗脱产物。蒸发得到粗产物，将其通过HPLC纯化，用10-98％乙腈的水(加入0.1％NH4OH)溶液梯度洗脱，得到白色固体(7mg)。
LCMS(方法1):Rt＝1.74min,m/z 494.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.82(s,1H),9.24(s,1H),8.46-8.43(m,2H),8.02(d,J＝5.5Hz,1H),7.95(dd,J＝5.8,5.8Hz,1H),7.45-7.40(m,3H),7.26-7.19(m,4H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.71-6.68(m,2H),6.25(d,J＝5.4Hz,1H),3.39-3.27(m,3H),2.88(dd,J＝5.1,13.3Hz,1H),2.70(dd,J＝7.1,7.1Hz,2H),2.60(q,J＝7.4Hz,1H),1.69(s,2H).
ee％(n.d.)
实施例207
步骤A
4-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醛
(中间体207A)
使用类似于用于制备中间体1C-a的方法，由3-甲酰基-4-溴-7-氮杂吲哚制备中间体207A。
LCMS(方法4):Rt＝1.91min,m/z 355.1/357.1[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲酰基-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体207B)
根据实施例1的步骤D中的程序，由中间体207A和中间体1B-a制备中间体207B。
LCMS(方法6):Rt＝1.76min,m/z 588.4[M+H]+
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-甲酰基-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体207C)
使用实施例1的步骤E中的类似程序，由中间体207B制备中间体207C。
LCMS(方法6):Rt＝1.69min,m/z 574.3[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟-4-((3-(羟基甲基)-1-((2-(三甲基甲硅
烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙酸(中间体207D)
将中间体207C(386mg，0.674mmol)溶于DCM(10mL)和甲醇(1mL)的混合物中，并加入硼氢化钠(26mg，0.684mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。加入另一部分硼氢化钠(52mg，1.37mmol)，并继续搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。获得产物，为奶油色固体(346mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.59min,m/z 576.3[M+H]+
步骤E
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-((3-(羟基甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔
丁酯(中间体207E)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体207D和1-苄基哌嗪制备中间体207E。
LCMS(方法6):Rt＝1.30min,m/z 734.5[M+H]+
步骤F
(S)-2-氨基-1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(3-氟-4-((3-(羟基甲基)-1H-吡咯并[2,
3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-1-酮(实施例207)
使用类似于实施例1的步骤G的方法，由中间体207E制备实施例207。
LCMS(方法2):Rt＝3.23min,m/z 504.4[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.55(s,1H),8.00(d,J＝5.5Hz,1H),7.34-7.22(m,9H),7.11(dd,J＝1.3,8.3Hz,1H),6.17(d,J＝5.4Hz,1H),4.79-4.76(m,3H),3.94(t,J＝6.8Hz,1H),3.46-3.42(m,5H),2.80(dd,J＝6.3,13.1Hz,1H),2.67(dd,J＝7.4,13.1Hz,1H),2.39-2.29(m,2H),2.25-2.14(m,1H),2.11-2.01(m,1H),1.72-1.71(m,2H).
实施例208至215
通过用下面所示的胺代替步骤E中的1-苄基哌嗪，以与207相似的方式制备以下实施例。
实施例213(替代方法)
步骤A
(4-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲
醇(中间体213A)
使用类似于用于制备中间体207D的程序，由中间体207A制备中间体213A。
LCMS(方法4):Rt＝1.58min,m/z 357.1/359.1[M+H]+
步骤B
4-溴-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧
基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(中间体213B)
用咪唑(78mg，1.14mmol)处理中间体213A(204mg，0.57mmol)的DCM(6.5mL)溶液。加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(102mg，0.68mmol)，并将反应物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(10mL)稀释，分离DCM层。将水层用DCM(10mL)进一步萃取，将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物在25g Si柱上进行色谱分离，用0-30％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到所需产物，为无色油状物(240mg)。
LCMS(方法4):Rt＝2.19min,m/z 471.2/473.2[M+H]+
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲
基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯
基)丙酸甲酯(中间体213C)
根据实施例1的步骤D中的程序，由中间体213B和中间体1B-a制备中间体213C。
LCMS(方法4):Rt＝4.55min,m/z 704.5[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲
基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯
基)丙酸(中间体213D)
使用实施例1的步骤E中的程序，由中间体213C制备中间体213D。
LCMS(方法4):Rt＝4.39min,m/z 690[M+H]+
步骤E
(S)-(3-(4-((3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷
基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1-氧代-1-(4-(吡啶-
2-基甲基)哌嗪-1-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体213E)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体213D和1-(吡啶-2-基甲基)哌嗪制备中间体213E。
LCMS(方法4):Rt＝3.33min,m/z 849.5[M+H]+
步骤F
(S)-2-氨基-3-(3-氟-4-((3-(羟基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯
基)-1-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)丙-1-酮(实施例213)
使用类似于实施例1的步骤G的方法，由中间体213E制备实施例213。
LCMS(方法1):Rt＝1.57min,m/z 505.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.56-11.56(m,1H),8.49(dd,J＝0.9,4.9Hz,1H),8.01(d,J＝5.4Hz,1H),7.79-7.74(m,1H),7.44(d,J＝7.8Hz,1H),7.34-7.22(m,4H),7.11(dd,J＝1.3,8.3Hz,1H),6.19-6.17(m,1H),4.82-4.74(m,3H),3.94(dd,J＝6.9,6.9Hz,1H),3.58(s,2H),3.54-3.37(m,4H),2.80(dd,J＝6.4,13.2Hz,1H),2.71-2.64(m,1H),2.42-2.23(m,3H),2.18-2.07(m,1H),1.79-1.75(m,2H).
实施例216
步骤A
2-(4-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)
乙酸甲酯(中间体216A)
使用与用于中间体1C-a的方法类似的方法，由2-(4-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙酸甲酯制备中间体216A。
LCMS(方法4):Rt＝1.70min,m/z 399.1/401.1[M+H]+
步骤B
2-(4-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)
乙烷-1-醇(中间体216B)
使用与中间体207D的制备中使用的方法类似的方法，由中间体216A制备中间体216B。
LCMS(方法4):Rt＝1.64min,m/z 371.0/373.0[M+H]+
步骤C
4-溴-3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙
氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(中间体216C)
使用与中间体213B的制备中使用的方法类似的方法，由中间体216B制备中间体216C。
LCMS(方法4):Rt＝2.27min,m/z 485.0/487.0[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-(2-((叔丁基二甲基-甲硅烷基)氧基)
乙基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)
丙酸甲酯(中间体216D)
使用类似于实施例1的步骤D的方法，由中间体216C和中间体1B-c制备中间体216D。
LCMS(方法4):Rt＝2.11min,m/z 700.5[M+H]+
步骤E
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙
基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙
酸(中间体216E)
使用类似于实施例1的步骤E中所使用的程序，由中间体216D制备中间体216E。
LCMS(方法4):Rt＝2.08min,m/z 686.5[M+H]+
步骤F
(S)-(1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-(2-羟基乙基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)
乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁
酯(中间体216F)
使用类似于实施例1的步骤D的方法，由中间体216E和1-苄基哌嗪制备中间体216F。
LCMS(方法4):Rt＝2.29min,m/z 730.7[M+H]+
步骤G
(S)-2-氨基-1-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-(4-((3-(2-羟基乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-1-酮(实施例216)
如对实施例1的步骤G所述，从中间体216F合成实施例216。
LCMS(方法1):Rt＝1.71min,m/z 500.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.42(s,1H),7.98(d,J＝5.4Hz,1H),7.33-7.24(m,7H),7.16(d,J＝2.2Hz,1H),7.08(d,J＝8.5Hz,2H),6.21(d,J＝5.4Hz,1H),4.53(dd,J＝5.2,5.2Hz,1H),3.91(dd,J＝6.8,6.8Hz,1H),3.71-3.63(m,2H),3.45-3.42(m,6H),2.95-2.89(m,2H),2.78(dd,J＝6.8,13.1Hz,1H),2.66(dd,J＝6.6,12.7Hz,1H),2.35-2.29(m,2H),2.22-2.17(m,1H),2.03(s,1H),1.77(s,2H).
实施例217
步骤A
(S)-(1-(环己基氨基)-1-氧代-3-(4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体217A)
使用与实施例1的步骤F相同的程序，由中间体1E-e和环己胺制备中间体217A。
LCMS(方法5):Rt＝1.91min,m/z 609.4[M+H]+
步骤B
(S)-(1-(环己基氨基)-3-(4-((3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体217B)
使用与中间体186C相同的程序，通过用NIS代替NBS，由中间体217A制备中间体217B。
LCMS(方法4):Rt＝2.27min,m/z 735.4[M+H]+
步骤C
(S)-(3-(4-((3-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-炔-1-基)-1-((2-(三
甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-(环己基氨
基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体217C)
将在THF(10mL)中的中间体217B(390mg，0.531mmol)、叔丁基二甲基(丙-2-炔-1-基氧基)硅烷(181mg，1.06mmol)、PdCl2(dppf)2.CH2Cl2(22mg，0.027mmol)、碘化亚铜(I)(10mg，0.053mmol)和三甲胺(739mL，5.32mmol)密封在反应管中，并用氩气吹扫容器5分钟。将混合物在90℃加热过夜，然后冷却至室温。将混合物真空浓缩，在24g Si柱上进行色谱分离，用0-30％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到奶油色固体产物(410mg)。
LCMS(方法6):Rt＝2.18min,m/z 777.6[M+H]+
步骤D
(S)-2-氨基-N-环己基-3-(4-((3-(3-羟基并-1-炔-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡
啶-4-基)氧基)苯基)丙酰胺(实施例217)
使用类似于实施例1的步骤G的程序，由中间体217C制备实施例217。
LCMS(方法2):Rt＝3.25min,m/z 433.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δd 12.09(s,1H),8.07(d,J＝5.5Hz,1H),7.69(s,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,1H),7.27(d,J＝8.6Hz,2H),7.07(d,J＝8.5Hz,2H),6.32(d,J＝5.4Hz,1H),5.16(s,1H),4.20(s,2H),3.55-3.47(m,1H),3.36(dd,J＝5.8,7.4Hz,1H),2.87(dd,J＝5.7,13.3Hz,1H),2.67(dd,J＝7.8,13.2Hz,1H),1.84(s,2H),1.72-1.48(m,4H),1.29-1.05(m,6H).
实施例218
步骤A
(S)-(3-(4-((3-氰基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-
b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁
酯(中间体218A)
将在DMF(3mL)中的中间体189A(122mg，0.177mmol)、氰化锌(13mg，0.111mmol)、Pd2(dba)3(8mg，0.009mmol)、1,1'-二茂铁二基双(二苯基膦)(12mg，0.022mmol)、水(5滴)在125℃加热过夜。使混合物冷却，然后在乙酸乙酯(10mL)和盐水(8mL)之间分配。分离有机层，干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物(160mg)不经进一步纯化用于下一步骤。
LCMS(方法8):Rt＝1.65min,m/z 636.4[M+H]+
步骤B
(S)-2-氨基-3-(4-((3-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-N-(四
氢-2H-吡喃-4-基)丙酰胺(实施例218)
使用类似于实施例1的步骤G的方法，由中间体218A制备实施例218。
LCMS(方法1):Rt＝2.26min,m/z 406.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)d 8.38(s,1H),8.19(d,J＝5.5Hz,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),7.16(d,J＝8.6Hz,2H),6.40(d,J＝5.5Hz,1H),3.83-3.71(m,3H),3.41-3.36(m,3H),2.89(dd,J＝5.8,13.2Hz,1H),2.72(dd,J＝7.6,13.2Hz,1H),1.67-1.55(m,2H),1.43-1.27(m,2H).
实施例219至222
以与实施例218类似的方式，由所示的起始原料以两步合成方法制备以下实施例。
实施例223至224
中间体223A至224B的制备
以与实施例1的步骤F所报道的类似方式，由所示的中间体204C和胺制备以下中间体。
实施例的制备
以与实施例218类似的方式，由所示的起始原料以两步合成方法制备以下实施例。
实施例225
步骤A
4-溴-7-甲苯磺酰-7H-吡咯并[2,3-d]吡啶(中间体225A)
与中间体131A-a类似地，由4-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶制备中间体225A。
LCMS(方法7):Rt＝3.82min,m/z 351.9/353.9[M+H]+
步骤B
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-((7-甲苯磺酰-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-
基)氧基)苯基)丙酸甲酯(中间体225B)
使用类似于实施例1的步骤D中所用的方法，由中间体225A和1B-c制备中间体225B。
LCMS(方法5):Rt＝1.73min,m/z 567.3[M+H]+
步骤C
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-{4-[7-(甲苯-4-磺酰基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-
4-基氧基]苯基}丙酸(中间体225C)
将中间体225B(406mg，1.02mmol)溶解在甲醇中，并加入2M氢氧化锂溶液。将反应物在室温下搅拌过夜。真空蒸发甲醇，通过加入1N HCl将所得水溶液酸化至pH5。将产物萃取至DCM(3×8mL)中，将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。获得产物，为奶油色固体(299mg)。
LCMS(方法5):Rt＝1.29min,m/z 399.2[M+H]+
步骤D
(S)-(3-(4-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氧基)苯基)-1-(环己基氨基)-1-氧
代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体225D)
使用类似于实施例1的步骤F的程序，由中间体225C和环己胺制备中间体225D。
LCMS(方法6):Rt＝1.43min,m/z 480.4[M+H]+
步骤E
(S)-3-(4-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氧基)苯基)-2-氨基-N-环己基丙酰胺
(实施例225)
使用类似于实施例1的步骤G的程序，从中间体225D制备实施例225。
LCMS(方法1):Rt＝2.82min,m/z 380.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.19(s,1H),8.28(s,1H),7.63(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝3.5Hz,1H),7.27(d,J＝8.6Hz,2H),7.14(d,J＝8.6Hz,2H),6.41(d,J＝3.5Hz,1H),3.57-3.47(m,1H),3.40-3.35(m,1H),2.90(dd,J＝5.5,13.3Hz,1H),2.66(dd,J＝7.8,13.3Hz,1H),1.72-1.62(m,5H),1.54(dd,J＝3.6,8.9Hz,1H),1.29-1.05(m,6H).
实施例226
通过用表中所示的胺替换步骤D中的胺，以与实施例225类似的方式制备以下实施例。
实施例227
步骤A
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(5-羟基吡啶-2-基)丙酸甲酯(中间体227A)
使用类似于实施例1的步骤B的方法，由(S)-2-氨基-3-(5-羟基吡啶-2-基)丙酸甲酯盐酸盐制备中间体227A。
LCMS(方法6):Rt＝0.86min,m/z 297.1[M+H]+
步骤B
6-氯-4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶
(中间体227B)
使用类似于实施例1的步骤C的方法，由6-氯-4-硝基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶制备中间体227B。
LCMS(方法6):Rt＝4.71min
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.99(s,1H),7.68(d,J＝3.5Hz,1H),7.24(d,J＝3.5Hz,1H),5.75(s,2H),3.60(m,2H),0.98(m,2H),0.00(s,9H).
步骤C
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(5-((6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)
甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)丙酸甲酯(中间体227C)
将在DMSO(5mL)中的中间体227B(302mg，0.924mmol)、中间体227A(273mg，0.922mmol)和碳酸钾(382mg，2.77mmol)在120℃下加热2小时。使反应混合物冷却，然后倒入水(15mL)中。将产物萃取至乙酸乙酯(3×10mL)中，将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。通过Si柱(24g)色谱法纯化产物，用0-40％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱。产物为奶油色固体(320mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.85min,m/z 577.3[M+H]+
步骤D
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(5-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)丙酸甲酯(中间体227D)
将中间体227C(320mg，0.556mmol)和三甲胺(93μL，0.663mmol)在IMS(20mL)中的溶液在氢气覆盖下在10％钯碳(32mg)上搅拌。在室温下18小时后，将混合物通过
过滤，蒸发溶剂，得到所需产物，为奶油色固体(309mg)。
LCMS(方法4):Rt＝1.96min,m/z 543.3[M+H]+
步骤E
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(5-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)丙酸(中间体227E)
根据实施例1步骤E中描述的方法，由中间体227D制备中间体227E。
LCMS(方法6):Rt＝1.65min,m/z 529.3[M+H]+
步骤F
(S)-(1-(环己基氨基)-1-氧代-3-(5-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-
1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体227F)
使用类似于实施例1的步骤F的方法，由中间体227E和环己胺制备中间体227F。
LCMS(方法6):Rt＝1.79min,m/z 610.4[M+H]+
步骤G
(S)-3-(5-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-氨基-N-环己基
丙酰胺(实施例227)
使用类似于用于实施例1的步骤G的方法，由中间体227F制备实施例227。
LCMS(方法1):Rt＝2.36min,m/z 380.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),8.42(d,J＝2.7Hz,1H),8.09(d,J＝5.4Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.56(dd,J＝2.9,8.5Hz,1H),7.38(d,J＝3.6Hz,1H),7.33(d,J＝8.5Hz,1H),6.43(d,J＝5.4Hz,1H),6.24(d,J＝3.5Hz,1H),3.57-3.47(m,2H),3.05(dd,J＝5.3,13.4Hz,1H),2.83(dd,J＝8.2,13.4Hz,1H),1.83(s,2H),1.72-1.59(m,3H),1.58-1.49(m,1H),1.28-1.06(m,6H).
实施例228
通过在步骤F中代替表中所示的胺，以与实施例227类似的方式制备以下实施例。
实施例229
步骤A
(R)-(1-(环己基氨基)-3-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔
丁酯(实施例229A)
将(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟-4-羟基苯基)丙酸(500mg，1.58mmol)和环己胺(172mg，1.74mmol)、DIPEA(822μL,4.74mmol)和HATU(719mg，1.90mmol)在室温下在DMF(2mL)和DCM(10mL)的混合物中搅拌。3小时后，将反应混合物真空浓缩，将残余物在DCM(20mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物在Si柱(40g)上通过色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到奶油色泡沫状物(468mg)。
LCMS(方法6):Rt＝1.40min,m/z 397.1[M-H]-
步骤B
(R)-(3-(4-((6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]
吡啶-4-基)氧基)-3,5-二氟苯基)-1-(环己基氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(实
施例229B)
使用类似于用于中间体227C的程序，由中间体229A和中间体227B制备中间体229B。
LCMS(方法6):Rt＝1.97min,m/z 679.3[M+H]+
步骤C
(R)-(1-(环己基氨基)-3-(3,5-二氟-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲
基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(实施例
229C)
使用类似于用于中间体227D的方法，由中间体229B制备中间体229C。
LCMS(方法6):Rt＝1.87min,m/z 645.4[M+H]+
步骤D
(R)-3-(4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氧基)-3,5-二氟苯基)-2-氨基-N-环
己基丙酰胺(实施例229)
将中间体229C(216mg，0.336mmol)溶解在DCM(5mL)中，并加入TFA(1mL)。在室温下搅拌1小时后，蒸发挥发物，将残余物溶于甲醇(10mL)中。加入2M氢氧化锂(2mL)，并将反应物在室温下搅拌18小时。蒸发甲醇，将含水混合物用DCM(12mL)萃取。将有机物干燥(Na2SO4)并蒸发。通过HPLC纯化产物，用10-98％乙腈的水(加入0.1％甲酸)溶液的梯度洗脱，得到白色固体(67mg)。
LCMS(方法1):Rt＝2.86min,m/z 415.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.85(s,1H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(dd,J＝2.5,3.4Hz,1H),7.18(d,J＝9.0Hz,2H),6.36(d,J＝5.5Hz,1H),6.34(dd,J＝1.9,3.4Hz,1H),3.58-3.49(m,1H),3.47(t,J＝6.7Hz,1H),2.91(dd,J＝6.1,13.2Hz,1H),2.77(dd,J＝7.5,13.3Hz,1H),1.73-1.49(m,6H),1.32-1.03(m,6H).
使用下面给出的条件拆分以下外消旋实施例，得到纯的对映异构体。
本发明化合物的药理学活性
体外抑制活性测定描述
使用ADP-Glo试剂盒(Promega)可以在10μl含有40mM Tris pH7.5、20mM MgCl20.1mg/ml BSA、50μM DTT和2.5μM肽底物(髓磷脂碱蛋白)的测定中确定本发明的化合物抑制Rho激酶活性的有效性。将化合物溶解在DMSO中，使得所述测定中DMSO的终浓度是1％。在25℃执行所有反应/温育。将化合物(2ul)和Rho激酶1或2(4μl)混合并温育30分钟。通过加入ATP(4μl)使得所述测定中ATP的终浓度是10μM，开始反应。1小时温育以后，加入10μlADP-Glo试剂，并在另外45分钟温育以后，加入20ul激酶检测缓冲液，并将混合物温育另外30分钟。在光度计上测量发光信号。对照由不含有化合物的测定孔组成，使用没有加入酶的测定孔确定背景。以剂量-响应形式试验化合物，并在化合物的每个浓度计算激酶活性的抑制。为了确定IC50(抑制50％的酶活性所需要的化合物浓度)，使用具有可变斜率的S形拟合将数据拟合至％抑制相对于Log10化合物浓度的图，并将最大值固定至100％和将最小值固定至0％。为了确定Ki值，利用Cheng-Prusoff方程式(Ki＝IC50/(1+[S]/Km)。
根据本发明的化合物表现出低于5μM的Ki值，且对于大多数本发明的化合物，Ki甚至低于500nM。
各种化合物的结果提供在下面表1中并表达为活性的范围。
表1
其中根据以下分类标准，根据其对ROCK-I和ROCK-II同种型的抑制活性，根据效力对化合物进行分类：
+++:Ki<3nM
++:Ki在3-30nM范围内
+:Ki>30nM。
Claims (10)
1.式(I)的化合物或其药学上可接受的盐
其中
X1和X2在每次出现时独立地为CH基团或氮原子，
p为0或1至3的整数；
当存在时，每个R是卤素；
R0为-H或(C1-C6)烷基；且R1选自由以下组成的组：
-H，
卤素，
-CN，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
(C3-C10)环烷基，
(C2-C6)羟基炔基，
芳基，其为苯基，
取代的苯基，其为羟基苯基，
杂芳基，其选自异噁唑基、吡啶基、噻唑基，
取代的杂芳基，其选自N-甲基咪唑基、N-乙基吡唑基、噻吩基-甲腈，和(C3-C6)杂环烷基，其为二氢吡咯基、二氢呋喃基；
R2为-H或(C1-C6)烷基；且R3选自由以下组成的组：
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)氨基烷基，其为R7R8N-(C1-C6)烷基，
(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，
(C3-C10)环烷基，
取代的(C3-C10)环烷基，其选自羟基甲基环己基、羟基乙基环己基、氰基-环己基、4-氨基羰基-环己烷-4-基、4-二甲基氨基甲基-环己烷-4-基，
(C3-C8)杂环烷基，其选自四氢吡喃基、奎宁环基，
取代的(C3-C8)杂环烷基，其为N-甲基哌啶基、(羟基甲基)-N-甲基哌啶基、N-苄基哌啶基、N-甲基氮杂环丁烷-3-基、4-羟基甲基-四氢吡喃-4-基，
芳基，其选自苯基、二氢茚基，
取代的苯基，其为三氟甲基苯基，
杂芳基，其选自噻唑基、吡啶基、异喹啉基，
取代的杂芳基，其为氯吡啶基，
芳基(C1-C6)烷基，其选自苄基、苯乙基，
取代的芳基(C1-C6)烷基，其为对-羟甲基苄基，
杂芳基(C1-C6)烷基，其选自(吡啶基)乙基、(噻吩基)甲基，
取代的杂芳基(C1-C6)烷基，其为(N-苯基-吡唑基)乙基，
(C3-C8)环烷基(C1-C6)烷基，
(C3-C8)杂环烷基(C1-C6)烷基，其选自(哌啶-4-基)甲基、吗啉代丙基，
取代的(C3-C8)杂环烷基(C1-C6)烷基，其选自(N-苄基哌啶基)甲基、(N-甲基哌啶-4-基)甲基、N-甲基氮杂环丁烷-3-基-甲基；
或者，R2和R3与它们连接的氮原子一起形成杂环基，或取代的杂环基，其选自
哌嗪-N-基、甲基哌嗪-N-基、苯基-N-甲基哌嗪-N-基、N-苯基-哌嗪-N-基、三甲基哌嗪-N-基、4-苄基-3,5-二甲基哌嗪-N-基、(羟基甲基)-N-甲基哌嗪-N-基、乙酰基(哌嗪-N-基)、苯乙酰基(哌嗪-N-基)、苯甲酰基(哌嗪-N-基)、4-(((二甲基氨基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基、环丙基(哌嗪-N-基)、环丙基甲基(哌嗪-N-基)、环丙烷羰基(哌嗪-N-基)、环己烷羰基(哌嗪-N-基)、N-甲基哌啶-4-羰基(哌嗪-N-基)、4-(吡啶-3-羰基)哌嗪-N-基、4-(1-甲基-1H-吡唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-(1H-噻唑-4-羰基)哌嗪-N-基、4-二甲基氨基羰基(哌嗪-N-基)、(苯基磺酰基)哌嗪-N-基、(吡啶基)哌嗪-N-基、(吡啶基甲基)哌嗪-N-基、(甲氧基乙基)哌嗪-N-基、(苄基)哌嗪-N-基、(甲氧基苄基)哌嗪-N-基、(3-(二甲基氨基丙氧基)苄基)哌嗪-N-基、(氟苄基)哌嗪-N-基、(甲基苄基)哌嗪-N-基、N-(((甲基氨基羰基)苯基)甲基)哌嗪-N-基、N-(((甲基氨基羰基)呋喃基)甲基)哌嗪-N-基、(苯乙基)哌嗪-N-基、(嘧啶基甲基)哌嗪-N-基、(2(甲硫基)嘧啶基甲基)哌嗪-N-基、(((甲基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-N-基、((N-甲基-咪唑-5-基)甲基)哌嗪-N-基、((1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲基)哌嗪-N-基、((甲基噻唑基)甲基)哌嗪-N-基、((吡嗪-2-基)甲基)哌嗪-N-基、((1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)哌嗪-N-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)哌嗪-N-基、(喹喔啉-2-基甲基)哌嗪-N-基、((1,2,3-噻二唑-4-基)甲基)哌嗪-N-基、(哒嗪-4-基甲基)哌嗪-N-基，
苯基吡咯烷-N-基、(吡啶基)吡咯烷-N-基，
哌啶-N-基、(二甲基氨基)哌啶-N-基、4-((二甲基氨基)甲基)哌啶-N-基、苄基哌啶-N-基、苄基羟基哌啶-N-基、吡啶基哌啶-N-基、吡啶基氧基哌啶-N-基、(苯基磺酰基)哌啶-N-基，
4-苯基-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基，
苯基吗啉-N-基，
3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-N-基、3-(二甲基氨基)甲基-氮杂环丁烷-N-基，
3-(二甲基氨基)吡咯烷-N-基、3-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)吡咯烷-N-基，
或者双环杂环基或取代的双环杂环基，其选自5,6-二氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-基、3,4-二氢-2,7-萘啶-2(1H)-基)、1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-基、六氢吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪-8(1H)-基、3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基、5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、5-苄基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)、2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-甲基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基；
R4选自
H，
(C1-C6)烷基，
(C3-C6)环烷基-(C1-C6)，和
(C3-C6)环烷基-羰基；且
R5独立地选自由以下组成的组：
H，
(C1-C6)烷基；
R6选自-H、(C1-C6)烷基；
R7和R8在每次出现时独立地选自由以下组成的组：
H，
(C1-C6)烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中X1和X2中的每一个是CH基团，所有其它变量如在权利要求1中所定义。
3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中，
X1和X2都是CH基团；
p为0或1至3的整数；
当存在时，每个R是卤素；
R0是-H；且
R1独立地选自由以下组成的组
-CN，
(C1-C6)烷基，
(C1-C6)羟基烷基，
R2是-H，
和R3选自由以下组成的组：
(C3-C10)环烷基，
(C3-C8)杂环烷基，
杂芳基(C1-C6)烷基；
R4和R5都是H，
R6是-H。
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，所述化合物选自：
5.药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的、单独的或与另外一种或多种活性成分组合的、在权利要求1-4中的任一项中定义的化合物或其药学上可接受的盐。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其适合通过吸入施用，其选自可吸入的粉剂、含有推进剂的计量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂。
7.根据权利要求1-4中的任一项所述的化合物在制备药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，所述药物用于预防和/或治疗肺疾病，所述肺疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病、特发性肺P纤维化和肺性高血压。
9.根据权利要求7所述的用途，所述药物用于预防和/或治疗肺疾病，所述肺疾病是肺动脉高血压。
10.在权利要求1-4中的任一项中定义的化合物与一种或多种活性成分的组合，所述活性成分选自以下类别：有机硝酸盐和NO供体；吸入的NO；可溶性鸟苷酸环化酶的刺激物；prostaciclin类似物PGI2和前列环素受体的激动剂；抑制环鸟苷酸和/或环腺苷酸的降解的化合物；人嗜中性粒细胞性弹性蛋白酶抑制剂；抑制信号转导级联的化合物；用于降低血压的活性物质；中性内肽酶抑制剂；渗透剂；ENaC阻滞剂；抗炎剂，包括皮质类固醇和趋化因子受体的拮抗剂；支气管扩张剂；抗组胺药物；镇咳药；抗生素和DNA酶药用物质和选择性切割剂；抑制Smad2和Smad3的ALK5和/或ALK4磷酸化的药剂；色氨酸水解酶1抑制剂和多激酶抑制剂。
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