CN110225913B - Fgfr4抑制剂晶型及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
FGFR4抑制剂的晶型及其制备方法,以及含有治疗有效量的该类化合物药物组合物和在治疗癌症的应用。晶型稳定性好、不具有引湿性,溶解度良好,在制剂生产过程中具有良好的适应性,能实现药物良好的溶出行为,确保药物在体内具有良好的生物利用度。并且晶型制备工艺简单,收率高,适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及药物合成领域,具体涉及式(I)所示化合物游离碱不同的晶型及其制备方法和用途。
背景技术
化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(所示如式I)。式(I)化合物公开于豪森专利PCT/CN2017/084564,式I化合物为成纤维细胞生长因子受体抑制剂,成纤维细胞生长因子受体(FGFR)属于受体酪氨酸激酶跨膜受体,包括4个受体亚型,分别为FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。FGFR调节细胞增殖、生存、分化和迁移等多种功能,在人体发育和成人各项机体功能中发挥重要作用。FGFR在多种人类肿瘤中表现异常,包括基因扩增、突变和过表达,是肿瘤靶向治疗研究的重要靶点。
发明内容
本发明的目的在于提供式(I)化合物的晶型I、II、III、和IV,晶型采用了X-射线粉末衍射表征,使用的Cu-Ka辐射。
本发明提供的晶型I,其X-射线粉末衍射图谱在2θ(±0.2°)值为7.810°、6.990°、25.122°、15.717°、11.648°、13.033°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型I,其X-射线粉末衍射图还在2θ(±0.2°)值为20.926°、22.742°、19.111°、29.621°、23.798°、17.619°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型I,其X-射线粉末衍射图基本如图1所示。
本发明提供的晶型II,其X-射线粉末衍射图谱在2θ(±0.2°)值为6.867°、19.300°、7.840°、19.629°、23.828°、14.467°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型II,其X-射线粉末衍射图还在2θ(±0.2°)值为26.894°、17.548°、20.869°、11.726°、20.412°、13.845°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型II,其X-射线粉末衍射图基本如图2所示。
本发明提供的晶型III,其X-射线粉末衍射图谱在2θ(±0.2°)值为7.821°、15.700°、20.579°、13.120°、21.610°、6.985°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型III,其X-射线粉末衍射图还在2θ(±0.2°)值为23.745°、11.758°、19.049°、25.098°、12.087°、8.330°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型III,,其X-射线粉末衍射图基本如图3所示。
本发明提供的晶型IV,为N-甲基吡咯烷酮溶剂合物,其X-射线粉末衍射图谱在2θ(±0.2°)值为6.573°、20.866°、20.203°、26.810°、8.848°、13.585°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型IV,其X-射线粉末衍射图还在2θ(±0.2°)值为13.231°、21.926°、5.875°、12.121°、14.534°、17.043°处具有特征峰。
更进一步的,本发明提供的晶型IV,其X-射线粉末衍射图基本如图4所示。
本发明的另一目的在于提供式(I)化合物晶型I、II、III和IV的制备方法。
本发明提供的晶型I的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
1.室温下,将式(I)化合物游离碱固体溶于有机溶剂中,得到澄清溶液,
2.滴加反溶剂至固体析出,
3.过滤样品即得晶型I。
所述的正溶剂包括但不局限于二氯甲烷和三氯甲烷,反溶剂包括但不局限于正己烷和正庚烷。
本发明提供的晶型II的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
1.用有机溶剂将游离碱固体在加热条件下溶清,
2.自然降温析出固体,
3.过滤样品即得晶型II。
所述的溶剂包括但不局限于二甲亚砜和丙酮。加热温度优选40℃~60℃。
本发明提供的晶型II的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
1.用有机溶剂将游离碱固溶清,
2.加入晶种,并加入反溶剂至固体析出,过滤样品即得晶型II。
所述有机溶剂包括但不局限于二甲亚砜和二氯甲烷,所述反溶剂包括但不局限于乙酸乙酯和正庚烷。
本发明提供的晶型III的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
1.室温下,向式(I)化合物游离碱固体中加入有机溶剂得到悬浮液,
2.打浆,过滤样品即得晶型III。
所述的有机溶剂包括但不局限于丙酮和2-丁酮。
本发明提供的晶型IV的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
1.室温下,用N-甲基吡咯烷酮溶剂将式(I)化合物游离碱固体溶清,
2.滴加反溶剂至固体析出,
3.过滤样品即得N-甲基吡咯烷酮溶剂合物晶型IV。
所述的反溶剂包括但不限于异丙醚和甲基叔丁基醚。
目前尚无文献报道式(I)化合物的晶型,本发明公开的晶型为式(I)化合物的游离碱晶型,这几个晶型稳定性好、不具有引湿性,溶解度良好,在制剂生产过程中具有良好的适应性,能实现药物良好的溶出行为,确保药物在体内具有良好的生物利用度。相应晶型制备工艺简单,收率高,适合工业化生产。因此,本发明晶型非常适合药物制剂应用,具有良好的临床应用前景。
附图说明
图1为实施例二式(I)化合物晶型I的XRPD图谱。
图2为实施例三式(I)化合物晶型II的XRPD图谱。
图3为实施例六式(I)化合物晶型III的XRPD图谱。
图4为实施例七式(I)化合物晶型IV的XRPD图谱。
具体实施方式
实施例一:式(I)化合物的制备
第一步4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇的制备
室温下,将2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-甲醛(1.0g,4.2mmol),4-氨基丁烷-1-醇(0.45g,5.1mmol)溶于DCE(15mL),搅拌2小时,然后加入NaBH(OAc)3(1.35g,6.4mmol),室温下搅拌过夜。反应液用CH2Cl2(100mL)稀释,有机相依次用水(10mL)和饱和食盐水(15mL)洗涤,并用无水硫酸钠干燥,浓缩后柱层析得到化合物4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇(0.9g,69%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.13(s,1H),5.17(s,1H),4.84(s,1H),3.73(s,2H),3.66-3.49(m,2H),3.42(s,6H),3.40-3.36(m,2H),2.71(t,J=6.3Hz,2H),2.68-2.56(m,2H),1.95-1.81(m,2H),1.74-1.55(m,4H);
MS m/z(ESI):310.2[M+H]+.
第二步3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮的制备
冰水浴下,将4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇(0.6g,1.94mmol)溶于DCE(15mL),然后加入二(三氯甲基)碳酸酯(0.22g,0.76mmol),缓慢滴加三乙胺(0.78g,7.76mmol),然后在室温下搅拌3小时。将反应温度升至80℃,在80℃下反应6小时,反应冷却至室温后,用CH2Cl2(100mL)稀释,有机相依次用水(10mL)和饱和食盐水(15mL)洗涤,并用无水硫酸钠干燥,浓缩后柱层析得到化合物3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮(0.37g,57%)。
MS m/z(ESI):336.2[M+H]+.
第三步苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯的制备
3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮(670mg,2mmol),碳酸二苯酯(643mg,3mmol)混合于THF(15mL)中,N2氛围下,冷却至-78℃,滴加LiHMDS的THF(4mL,4mmol)溶液,自然升至室温反应过夜。加入饱和NH4Cl水溶液(100mL),乙酸乙酯(100mL×2)萃取,有机相用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,浓缩后柱层析得标题化合物苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((3-羰基吗啉代)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯(432mg,47%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(s,1H),7.38(m,2H),721(m,3H),5.22(s,1H),4.77(s,2H),4.16(m,2H),3.95(m,2H),3.39(s,6H),3.25(m,2H),2.84(t,J=6.5Hz,2H),1.87(m,2H),1.64(m,4H);
MS m/z(ESI):456.2[M+H]+.
第四步:(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺的合成
(R)-6-氨基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)尼古丁腈(30mg,0.14mmol),苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯(60mg,0.13mmol)溶于THF(5mL)中,N2氛围下冷却至-78℃,滴加LiHMDS的THF(0.3mL,0.3mmol)溶液于反应液中,自然升至室温反应过夜。加入饱和NH4Cl水溶液(50mL),用乙酸乙酯(50mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,浓缩后柱层析得标题化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(65mg,86%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.70(s,1H),8.18(s,1H),7.60(s,2H),5.41(s,1H),5.12(d,J=7.8Hz,1H),4.73(s,2H),4.20-4.11(m,2H),4.06-3.99(m,2H),3.93(s,1H),3.52-3.48(m,7H),3.46-3.42(m,1H),3.39(s,3H),3.26-3.21(m,2H),2.83(t,J=6.2Hz,2H),2.03-1.95(m,2H),1.91-1.83(m,2H),1.67-1.62(m,2H),1.31(d,J=6.6Hz,3H);
MS m/z(ESI):568.3[M+H]+.
第五步:(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺的合成
(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(65mg,0.12mmol)溶于THF/水(体积比:11/4,4.5mL)中,加入浓HCl(0.45mL,5.4mmol),室温反应2h。加入饱和NaHCO3水溶液(50mL),用乙酸乙酯(50mL×2)萃取,合并有机相并用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,浓缩后柱层析得标题化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(30mg,51%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.57(s,1H),10.26(s,1H),8.17(s,1H),7.71(s,1H),7.63(s,1H),5.27(s,1H),4.95(s,2H),4.19-4.12(m,2H),4.11-4.04(m,2H),3.94(s,1H),3.52(m,1H),3.48-3.37(m,4H),3.33-3.28(m,2H),2.93(t,J=6.3Hz,2H),2.04(m,2H),1.93-1.85(m,2H),1.73(m,2H),1.39-1.28(m,3H);
MS m/z(ESI):522.2[M+H]+.
实施例二:晶型I的制备
称取2g式(I)化合物固体样品于250mL茄形瓶中。加入20mL二氯甲烷至固体溶清,滴加100mL的正庚烷,析出固体后,继续搅拌2小时,过滤样品即得晶型I,其XRPD图谱如图1所示。
实施例三:晶型II的制备
称取2g式(I)化合物固体样品于50mL茄形瓶中。加入16mL二甲亚砜,油加热至60℃将固体全部溶清。自然降温至室温,析出固体,过滤,即得晶型II,其XRPD图谱如图2所示,HPLC纯度为98.7%。
实施例四:晶型II的制备
称取1g式(I)化合物固体样品于50mL茄形瓶中。加入5mL二甲亚砜,油加热至60℃将固体全部溶清。缓慢降温,加入晶种,加入乙酸乙酯50ml搅拌,过滤,即得晶型II,其XRPD图谱基本如图2所示,,HPLC纯度为99.4%。
实施例五:晶型II的制备
称取25g式(I)化合物固体样品于1000mL茄形瓶中。加入170mL二氯甲烷至固体全部溶清。加入100mL乙酸乙酯,加入晶种,缓慢加入乙酸乙酯400mL,降至室温搅拌,过滤,即得晶型II,其XRPD图谱基本如图2所示,HPLC纯度为98.9%。
实施例六:晶型III的制备
称取1g式(I)化合物固体样品于50mL茄形瓶中。加入10mL丙酮,得到悬浮液。室温下,磁力搅拌10天,过滤,即得晶型III,其XRPD图谱如图3所示。
实施例七:晶型IV的制备
称取3g式(I)化合物固体样品于100mL茄形瓶中。室温下加入30mL N-甲基吡咯烷酮将固体全部溶清。搅拌条件下缓慢滴加30mL异丙醚,析出大量白色固体。析出固体后过滤样品,即得N-甲基吡咯烷酮溶剂合物晶型IV,其XRPD图谱如图4所示。
实验例一:酶学实验
1.FGFR4酶学实验
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)的方法测试化合物对FGFR4激酶活性的抑制作用,并得出化合物对FGFR4激酶活性的半数抑制浓度IC50。
1)在384孔板中加入1~5uLFGFR4酶溶液,酶终浓度为0.1~5nM。
2)加入1~5uL梯度稀释好的化合物溶液。
3)加入1~5uL底物混合液包含底物多肽终浓度5~50nM和ATP终浓度10~200uM。
4)室温孵育0.5~3小时。
5)加入10uL EDTA和含标记抗体的检测液,室温孵育1小时。
6)酶标仪测定各板孔的665nm荧光信号值。
7)通过荧光信号值计算抑制率。
8)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC50,具体实施例酶学活性见表1。
2.FGFR1酶学实验
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)的方法测试化合物对FGFR1激酶活性的抑制作用,并得出化合物对FGFR1激酶活性的半数抑制浓度IC50。
1)在384孔板中加入1~5uLFGFR1酶溶液,酶终浓度为0.1~5nM。
2)加入1~5uL梯度稀释好的化合物溶液。
3)加入1~5uL底物混合液包含底物多肽终浓度5~50nM和ATP终浓度10~200uM。
4)室温孵育0.5~3小时。
5)加入10uL EDTA和含标记抗体的检测液,室温孵育1小时。
6)酶标仪测定各板孔的665nm荧光信号值。
7)通过荧光信号值计算抑制率。
8)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC50,具体实施例酶学活性见表1。
表1
化合物编号 | FGFR4 IC<sub>50</sub>(nM) | FGFR1 IC<sub>50</sub>(nM) |
式(I)化合物 | 0.96 | >10000 |
3.Hep 3B细胞增殖抑制实验
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对Hep 3B细胞增殖的抑制作用,并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50。
1)在96孔细胞培养板中接种50~100uL的Hep 3B细胞悬液,密度为1~5×104细胞/mL,将培养板于培养箱培养16~24小时(37℃,5%CO2)。
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液,将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5%CO2)。
3)每孔加入50~100uL CellTiter-Glo试剂,室温振荡或静置5~30分钟。
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
5)通过化学发光信号值计算抑制率。
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC50,具体实施例细胞活性见表2。
4.HuH-7细胞增殖抑制实验
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对HuH-7细胞增殖的抑制作用,并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50。
1)在96孔细胞培养板中接种50~100uL的HuH-7细胞悬液,密度为1~5×104细胞/mL,将培养板于培养箱培养16~24小时(37℃,5%CO2)。
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液,将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5%CO2)。
3)每孔加入50~100uL CellTiter-Glo试剂,室温振荡或静置5~30分钟。
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
5)通过化学发光信号值计算抑制率。
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC50,具体实施例细胞活性见表2。
5.SK-HEP-1细胞增殖抑制实验
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对SK-HEP-1细胞增殖的抑制作用,并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50。
1)在96孔细胞培养板中接种50~100uL的SK-HEP-1细胞悬液,密度为1~5×104细胞/mL,将培养板于培养箱培养16~24小时(37℃,5%CO2)。
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液,将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5%CO2)。
3)每孔加入50~100uL CellTiter-Glo试剂,室温振荡或静置5~30分钟。
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
5)通过化学发光信号值计算抑制率。
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC50,具体实施例细胞活性见表2。
表2
化合物编号 | Hep 3B IC<sub>50</sub>(nM) | HuH-7 IC<sub>50</sub>(nM) | SK-HEP-1 IC<sub>50</sub>(nM) |
式(I)化合物 | 0.6 | 2.6 | >10000 |
6.大鼠的PK分析
本发明优选实施例的大鼠药物代谢动力学试验采用SD大鼠(上海杰思捷实验动物有限公司)进行。
■给药方式:单次灌胃给药。
■给药剂量:5毫克/10毫升/千克。
■制剂处方:0.5%CMC和1%Tween 80,超声溶解。
■取样点:给药后0.5、1、2、4、6、8和24小时。
■样品处理:
1)静脉采血0.2mL,置于K2EDTA试管中,室温1000~3000×g离心5~20min分离血浆,于-80℃保存。
2)血浆样品40uL加入160uL乙腈沉淀,混合后500~2000×g离心5~20分钟。
3)取处理后上清溶液100uL进行LC/MS/MS分析待测化合物的浓度,LC/MS/MS分析仪器:AB Sciex API 4000。
■液相分析:
●液相条件:Shimadzu LC-20AD泵
●色谱柱:phenomenex Gemiu 5um C18 50×4.6mm
●移动相:A液为0.1%甲酸水溶液,B液为乙腈
●流速:0.8mL/min
●洗脱时间:0-3.5分钟,洗脱液如下:
时间/分钟 | A液 | B液 |
0.01 | 80% | 20% |
0.5 | 80% | 20% |
1.2 | 10% | 90% |
2.6 | 10% | 90% |
2.7 | 80% | 20% |
3.8 | 80% | 20% |
■药代动力学:
主要参数用WinNonlin 6.1计算得到,大鼠药代实验结果见下表3:
表3
7.体内药效试验步骤及结果
7.1实验目的
通过体内药效实验筛选出药效较为明显且毒副作用较小的化合物。
7.2实验主要仪器和试剂
7.2.1仪器:
1、超净工作台(BSC-1300IIA2,上海博讯实业有限公司医疗设备厂)
2、CO2培养箱(Thermo)
3、离心机(Centrifuge 5720R,Eppendorf)
4、全自动细胞计数仪(Countess II,Life)
5、移液器(10-20uL,Eppendorf)
6、显微镜(TS100,尼康)
6、游标卡尺(500-196,日本三丰)
7、细胞培养瓶(T25/T75/T225,Corning)
7.2.2试剂
1、MEM培养基(11095-080,gibico)
2、胎牛血清(FBS)(10099-141,gibico)
3、0.25%胰蛋白酶(25200-056,gibico)
4、青链霉素双抗(SV30010,GE)
5、磷酸盐缓冲液(PBS)(10010-023,gibico)
7.3实验步骤
7.3.1细胞培养及细胞悬液制备
a,从细胞库中取出一株Hep 3B细胞,用MEM培养基(MEM+10%FBS+1%Glu+1%SP)复苏细胞,复苏后的细胞置细胞培养瓶中(在瓶壁标记好细胞种类、日期、培养人名字等)置于CO2培养箱中培养(培养箱温度为37℃,CO2浓度为5%)。
b,待细胞铺满培养瓶底部80-90%后传代,传代后细胞继续置于CO2培养箱中培养。重复该过程直到细胞数满足体内药效需求。
c,收集培养好的细胞,用全自动细胞计数仪计数,根据计数结果用PBS重悬细胞,制成细胞悬液(密度7×107/mL),置于冰盒中待用。
7.3.2细胞接种、量瘤:
a,接种前用一次性大小鼠通用耳标标记裸鼠,并用75%医用酒精消毒接种部位皮肤。
b,接种时混匀细胞悬液,用1mL注射器抽取0.1~1mL细胞悬液、排除气泡,然后将注射器置于冰袋上待用。
c,依次给试验裸鼠接种(接种部位位于裸鼠右侧背部靠右肩位置皮下接种0.1mL细胞悬液)。
7.3.3荷瘤鼠量瘤、分组、给药
a,根据肿瘤生长情况,在接种后第14-16天量瘤、并计算肿瘤大小。
肿瘤体积计算:肿瘤体积(mm3)=长(mm)×宽(mm)×宽(mm)/2
b,根据肿瘤大小,采用随机分组的方法进行分组。
c,根据分组结果,开始给予测试药物(给药方式:口服给药,给药剂量:30mg/kg,给药体积:10mL/kg,给药频率:2次/天,给药周期:14天,溶媒:0.5%CMC/1%吐温80)。
d,开始给予测试药物后每周二次量瘤、称重。
e,实验结束后安乐死动物。
7.4试验数据:
分组 | 动物数量(只) | 给药天数(天) | 抑瘤率 |
空白对照 | 5 | 14 | - |
式(I)化合物 | 5 | 14 | 181.67% |
实验例二:晶型II流动性考察
对实施例3-5制备的晶形II进行流动性考察,测量制备晶形的休止脚,试验结果如下:
表4
实施例3 | 实施例4 | 实施例5 | |
休止角 | 32 | 34 | 32 |
试验结果表明,本发明制备的晶形II粒径适中,适合制剂的开发。
实验例三:晶型I和晶形II稳定性考察
1、影响因素试验考察
分别取实施例二和实施例三的样品,按照影响因素考察条件进行稳定性研究,试验结果如下:
表5
表6
试验结果表明,晶型I和晶形II在影响因素条件下放置是稳定的。
2、样品微粉后的晶型研究
取实施例三的样品,进行原料微粉,微粉后将上述样品进行X-射线粉末衍射检测,数据见表7。
表7
序号 | 微粉前 | 微粉后 |
1 | 7.049 | 6.888 |
2 | 7.918 | 7.870 |
3 | 14.488 | 14.520 |
4 | 17.636 | 17.582 |
5 | 19.560 | 19.323 |
6 | 20.334 | 20.283 |
7 | 23.836 | 23.888 |
8 | 27.047 | 26.949 |
X-射线粉末衍射谱表明,II晶型样品在微粉前后晶型不变。
Claims (26)
2.根据权利要求1所述的晶型I,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱在2θ±0.2°值为7.810°、6.990°、25.122°、15.717°、11.648°、13.033°、20.926°、22.742°、19.111°、29.621°、23.798°和17.619°处具有特征峰。
3.根据权利要求1所述的晶型I,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱如图1所示。
4.一种制备权利要求1所述的晶型I的方法,包括以下步骤,
(1)将式(I)化合物游离碱固体溶于有机溶剂中,得到澄清溶液,
(2)滴加反溶剂至固体析出,过滤,得晶型I。
5.根据权利要求4的制备方法,所述有机溶剂选自二氯甲烷或三氯甲烷,所述反溶剂选自正己烷或正庚烷。
6.一种药物组合物,所述药用组合物包含有效量的权利要求1的晶型I及药学上可接受的赋形剂。
8.根据权利要求7所述的晶型II,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱在2θ±0.2°值为6.867°、19.300°、7.840°、19.629°、23.828°、14.467°、26.894°、17.548°、20.869°、11.726°、20.412°和13.845°处具有特征峰。
9.一种制备权利要求7的晶型II的方法,包括以下步骤:
(1)用有机溶剂将游离碱固体在加热条件下溶清,
(2)自然降温析出固体,过滤即得晶型II。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述有机溶剂选自二甲亚砜或丙酮。
11.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述加热温度选自40℃~60℃。
12.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述加热温度为60℃。
13.一种药物组合物,所述药用组合物包含有效量的权利要求7的晶型II及药学上可接受的赋形剂。
15.根据权利要求14所述的晶型III,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱在2θ±0.2°值为7.821°、15.700°、20.579°、13.120°、21.610°、6.985°、23.745°、11.758°、19.049°、25.098°、12.087°和8.330°处具有特征峰。
16.根据权利要求14所述的晶型III,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱如图3所示。
17.制备权利要求14所述的式(I)化合物晶型III的方法,包括以下步骤,
(1)向式(I)化合物游离碱固体中加入有机溶剂得到悬浮液,
(2)打浆,过滤样品即得晶型III。
18.根据权利要求17所述的制备方法,其特征在于,所述有机溶剂选自丙酮或2-丁酮。
19.一种药物组合物,所述药用组合物包含有效量的权利要求14的晶型III及药学上可接受的赋形剂。
21.根据权利要求20所述的晶型IV,其特征还在于,其X-射线粉末衍射图谱在2θ±0.2°值为6.573°、20.866°、20.203°、26.810°、8.848°、13.585°、13.231°、21.926°、5.875°、12.121°、14.534°和17.043°处具有特征峰。
22.根据权利要求20所述的晶型IV,其特征在于,其X-射线粉末衍射图谱如图4所示。
23.根据权利要求20所述的晶型IV,其特征在于,所述晶型为N-甲基吡咯烷酮溶剂合物。
24.制备权利要求20所述的式(I)化合物游离碱晶型IV的方法,包括以下步骤:
(1)用N-甲基吡咯烷酮溶剂将式(I)化合物游离碱固体溶清,
(2)滴加反溶剂至固体析出。
25.根据权利要求24的制备方法,其特征在于,所述反溶剂选自异丙醚或甲基叔丁基醚。
26.一种药物组合物,所述药用组合物包含有效量的权利要求20的晶型IV及药学上可接受的赋形剂。
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