CN110215476B - 一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用,本发明制备一种香叶子叶或块茎乙醇提取物,取风干的香叶子叶或块茎粉碎后,在室温下用乙醇浸泡,然后减压蒸馏,浓缩得到香叶子叶或块茎提取物。通过分析香叶子叶或块茎提取物对小鼠抑郁样行为和神经递质等的影响,研究其抗抑郁作用,实现香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用。
Description
技术领域
本发明属于香叶子药用技术领域,具体涉及一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用。
背景技术
抑郁症是一种以持续性精神障碍为特征的常见精神障碍疾病。患者通常伴随着长期的悲伤和无助,严重的抑郁症可导致自杀。此外,抑郁症还增加患者得冠状动脉和糖尿病的几率。据世界卫生组织统计,全世界超过3亿人患有抑郁症,并且以每年18%的速度持续增长。然而只有不到一半的抑郁症患者能够接受有效的治疗。尽管抑郁症很普遍,但它的生理和病理学与其他慢性和潜在的疾病相比较,仍处在初级阶段。目前传统的抗抑郁药物存在起效慢、无效率高、安全性低等问题,因此不断探索新型的抗抑郁药物至关重要。国内外学者逐渐开始从天然植物中寻找安全、高效的抗抑郁剂。
中医理论认为,气郁和肝功能失泄是抑郁症的病机之一。樟科山胡椒属植物因其具有芳香气味,多具有理气的功效。山胡椒属植物香叶子(Lindera fragrans Oliv.)的报道相对较少。香叶子是《四川省中药材标准》收载的台乌的基源植物,在民间具有悠久的药用历史,但其化学成分研究的文献报道很少、未见其药理活性的报道,且资源丰富,值得深入研究以阐明其药效物质基础。据《贵州药植目录》记载,香叶子具有温中通脉、行气散结的功效,入药部位为叶和树皮。《湖南民间药物资料》中记载香叶子枝叶具有顺气的功效,被用于治疗胃肠炎和胃溃疡。除此以外尚未发现对其化学成分和药理活性的深入研究。
发明内容
本发明的目的在于:提供一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用,通过分析香叶子叶或块茎提取物对小鼠抑郁样行为和神经递质等的影响,研究其抗抑郁作用,实现香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用。
本发明采用的技术方案如下:
一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用。
慢性不可预知应激刺激下,机体大量分泌ACTH继而促进CORT的分泌,引起HPA轴的持续性功能亢进和高皮质醇血症,造成一系列抑郁表现,恶性循环。经本发明的研究表明,CUMS小鼠的血清CORT相较于正常组显著升高,而香叶子可调节CORT的含量起到抗抑郁作用。大量CORT的分泌会降解5-HT的前体—色氨酸,进而导致5-HT含量的降低。香叶子还可调节海马区5-HT的浓度。而抑郁症的发生也与中枢神经系统NE的缺乏有关,香叶子可升高海马区NE的浓度。通过香叶子提取物对血清CORT、海马5-HT以及海马NE的调节作用,使抑郁小鼠恢复到正常水平。
本发明的研究发现,香叶子叶或块茎的提取物中含有的主要化合物,包括异喹啉型生物碱,主要是阿朴啡类生物碱(如去甲异波尔定、波尔定碱等);黄酮及其苷类(如槲皮素、山奈酚及其苷);呋喃倍半萜及其内酯类;丁内酯类;酚苷类等。香叶子提取物表现出抗抑郁作用可能跟其含有的上述类型的化合物密切相关。
进一步地,香叶子叶或块茎提取物为香叶子叶或块茎乙醇提取物。
进一步地,香叶子叶或块茎提取物的制备方法如下:
取干燥的香叶子叶或块茎,粉碎后,在室温下用95%乙醇浸泡3-5次,每次5-7d,得到提取液;将每次浸泡所得提取液混合后减压蒸馏,浓缩即得。
进一步地,所述香叶子叶或块茎提取物的制备方法如下:
取干燥的香叶子叶或块茎,粉碎后,在室温下用95%乙醇浸泡4次,每次6d,分别得到4次浸泡的提取液;将4次浸泡所得提取液混合后减压蒸馏,浓缩即得。
综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:
1、本发明丰富了抗抑郁天然植物类型,香叶子叶或块茎提取物中含有的具有抗抑郁效果的化合物,为香叶子资源的开发和综合利用提供新线索与理论基础;
2、本发明通过分析香叶子叶或块茎提取物对小鼠抑郁样行为和神经递质等的影响,研究其抗抑郁作用,实现香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用;
3、本发明香叶子叶或块茎提取物可以显著提高抑郁小鼠糖水消耗,缩短悬尾不动时间,因此,具有明显的抗抑郁活性,且不具有剂量依赖性;
4、本发明香叶子叶或块茎提取物可调节CORT的含量起到抗抑郁作用,还可调节海马区5-HT的浓度,可升高海马区NE的浓度,通过香叶子叶或块茎提取物对血清CORT、海马5-HT以及海马NE的调节作用,使抑郁小鼠恢复到正常水平;
5、本发明的香叶子叶或块茎提取物高剂量组在行为学测试实验中表现出最佳的抗抑郁效果,但香叶子低剂量组在降低血清CORT、升高5-HT的含量方面效果最佳;香叶子中剂量组在升高NE含量方面效果最佳。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本发明的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为小鼠蔗糖偏好测试结果图;
图2为小鼠悬尾不动时间测试结果图;
图3为小鼠血清CORT测试结果图;
图4为小鼠海马区5-HT测试结果图;
图5为小鼠海马区NE测试结果图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明,并不用于限定本发明,即所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
因此,以下对在附图中提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
需要说明的是,术语“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下,由语句“包括一个……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例
本发明较佳实施例提供的一种香叶子叶或块茎提取物。
其中,香叶子叶或块茎提取物为香叶子叶或块茎乙醇提取物。香叶子叶或块茎提取物的制备方法如下:
取风干的香叶子叶或块茎300g,粉碎机粉碎后,在室温下用95%乙醇浸泡4次,每次6d,分别得到4次浸泡的提取液;将4次浸泡所得提取液混合后,用旋转蒸发仪减压蒸馏,浓缩即得香叶子叶或块茎提取物浸膏43.7g。
将香叶子浸膏溶于5vt%的羧甲基纤维素钠溶液中分别制成香叶子高剂量组113.08mg/mL、中剂量组56.54mg/mL、低剂量组28.27mg/mL溶液。
实验例1
实验动物:雄性昆明小鼠120只,体重18-22g。实验开始前不限制饮食与用水条件,在实验环境中适应性饲养7d。
实验准备:适应性喂养7d后称取小鼠体重,将差异较大的小鼠剔除。剩余符合标准的小鼠随机分为空白组(GC)、模型组(MG)、阳性组(FXT)、香叶子高剂量组(XH)、香叶子中剂量组(XM)、香叶子低剂量组(XL),每组12只。实验过程中,每隔两个星期称取小鼠体重并记录。
小鼠抑郁模型(CUMS法)建立:参照Willner P的慢性轻度不可预见应激加孤养复制抑郁症模型,将空白组除外的各组小鼠进行孤养,一笼一只,养于25.5×15×14cm的小鼠笼中。每天随机选取以下5种应激中的1种进行刺激,且每天刺激的时间段不同:禁食禁水24h;止血钳夹尾:用止血钳夹住鼠尾距离尾跟1cm处,持续1min;潮湿垫料12h:每100g垫料加入200mL自来水,混合均匀,持续12h;5℃冷水游泳5min;束缚2h:将小鼠放入束缚管中,使其仅能进行微小的肢体动作,持续2h。各种刺激方法交替进行,持续28d。
造模的同时所有动物每天一次灌胃给药,持续14d。阳性组给予5vt%的羧甲基纤维素钠溶液溶解的氟西汀;空白组和模型组给予5vt%的羧甲基纤维素钠溶液;给药组分别给予实施例配制好的不同剂量香叶子叶或块茎提取物。
实验期间小鼠的体重变化如下:与正常组小鼠相比,模型组小鼠体重显著性下降。给药组小鼠体重之间无显著性差异,且随着造模时间的增长,体重增长越来越缓慢。结果显示CUMS模型造成小鼠体重下降,模型组、氟西汀组和香叶子各剂量组之间体重增长无显著性差异。
(1)蔗糖消耗实验
末次给药前72h,训练小鼠饮用含糖水。每笼同时放置2个水瓶,第1个24h内,每只小鼠给予2瓶1vt%蔗糖水。适应24h以后,每只小鼠给予1瓶1vt%蔗糖水,1瓶纯水。再次适应24h后,禁食禁水12h。禁食禁水后,每只小鼠笼放置事先量好的2瓶水:一瓶1vt%蔗糖水,一瓶纯水,4h后,取2瓶水称量。对小鼠的糖水偏爱进行计算(糖水偏爱=糖水消耗/总消耗×100%)。
小鼠蔗糖偏好测试结果如图1所示。CUMS小鼠与正常组小鼠相比,蔗糖消耗量显著性下降(P<0.01)。与CUMS模型小鼠相比,氟西汀组、香叶子高低剂量组蔗糖消耗量出现了显著性增加(P<0.01)。香叶子中剂量组与模型组相比蔗糖消耗量出现了增加(P<0.05)。结果表明,CUMS小鼠给药香叶子后,蔗糖消耗量显著上升。
(2)悬尾实验
末次给药1h后进行悬尾实验,将小鼠距尾端1cm处用医用胶带固定于高台,使小鼠呈倒挂状态,头部离箱底约15cm,共6min,前两分钟为适应期,不做记录,记录后4min静止不动时间的总和。不动行为的评判标准为小鼠停止挣扎,身体倒悬呈垂直状态,静止不动。
悬尾不动时间测试结果如图2所示。CUMS小鼠与正常组小鼠相比,悬尾不动时间显著性增加(P<0.01)。与CUMS模型小鼠相比,各组悬尾不动时间呈现不同程度的降低。其中香叶子高剂量组和氟西汀组效果类似,能够显著性缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.01);香叶子中低剂量组也能在一定程度上缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.05)。
实验例2
对小鼠血清CORT,海马区5-HT和NE的含量进行检测,研究香叶子叶或块茎提取物的抗抑郁机制。
实验动物、实验准备和小鼠抑郁模型建立均同实验例1。
末次给药后,眼球快速取血,血液静置2h,3000r/min离心10min,分离血清,可直接检测CORT;眼球取血以后,断头法快速处死小鼠。在冰盘上剖开头部,快速将大脑剥离,用冰生理盐水冲洗掉表面的血液,随后用滤纸吸除水分。沿矢状缝分离双侧大脑,将两侧海马组织剥离,分别称重。预冷的PBS洗去组织上残留的血迹,按比例加入PBS(1g组织加入9mLPBS),匀浆器研磨充分,3000rpm离心10min,取上清检测。
小鼠血清CORT测试结果如图3所示。CUMS小鼠与正常组小鼠相比,血清CORT的含量显著性升高(P<0.01)。与CUMS模型小鼠相比,香叶子中低剂量组均可以显著性的逆转CUMS引起的血清CORT含量的升高(P<0.01);香叶子高剂量组可以降低CUMS引起的血清CORT含量的升高(P<0.05)。
小鼠海马区5-HT测试结果如图4所示。CUMS小鼠与正常组小鼠相比,5-HT的含量显著性降低(P<0.01)。与CUMS模型小鼠相比,香叶子中低剂量组均可以显著性的逆转CUMS引起的海马5-HT含量的降低(P<0.01)。
小鼠海马区NE测试结果如图5所示。CUMS小鼠与正常组小鼠相比,小鼠海马区NE的含量显著性降低(P<0.01)。与CUMS模型小鼠相比,香叶子中剂量组可以显著性的逆转CUMS引起的海马NE含量的降低(P<0.01)。香叶子高剂量组可以升高海马NE含量(P<0.05)。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用,其特征在于,香叶子叶提取物或香叶子块茎提取物的制备方法如下:
取干燥的香叶子叶或香叶子块茎,粉碎后,在室温下用95%乙醇浸泡3-5次,每次5-7d,得到提取液;将每次浸泡所得提取液混合后减压蒸馏,浓缩即得。
2.根据权利要求1所述的香叶子叶或块茎提取物在制备抗抑郁药物中的应用,其特征在于,所述香叶子叶提取物或香叶子块茎提取物的制备方法如下:
取干燥的香叶子叶或香叶子块茎,粉碎后,在室温下用95%乙醇浸泡4次,每次6d,分别得到4次浸泡的提取液;将4次浸泡所得提取液混合后减压蒸馏,浓缩即得。
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香叶子抗抑郁活性初步研究;西南交通大学;《西南交通大学2019年大学生创新创业训练计划立项结果https://wenku.baidu.com/view/40104536f424ccbff121dd36a32d7375a417c6c9.html》;20190502;第7页 * |
香叶子的化学成分研究;邱澄;《中国药学杂志》;20010331;第36卷(第3期);第185页 * |
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