CN110196320A - 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法 - Google Patents

一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110196320A
CN110196320A CN201910568694.1A CN201910568694A CN110196320A CN 110196320 A CN110196320 A CN 110196320A CN 201910568694 A CN201910568694 A CN 201910568694A CN 110196320 A CN110196320 A CN 110196320A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ray
gamma
isocitric dehydrogenase
low dosage
radiated
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910568694.1A
Other languages
English (en)
Inventor
丁德馨
胡南
易岚
龙鼎新
赵维超
殷杰
穆红香
李广悦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of South China
Original Assignee
University of South China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of South China filed Critical University of South China
Priority to CN201910568694.1A priority Critical patent/CN110196320A/zh
Publication of CN110196320A publication Critical patent/CN110196320A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483—Physical analysis of biological material
    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/49—Blood

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法。根据C57BL/6J小鼠接受的低剂量伽马射线辐照剂量与血清中IDH2的相对表达量的下调率的剂量‑效应关系，C57BL/6J小鼠血清中IDH2的相对表达量的下调率，评估低剂量伽马射线辐照的生物损伤。在建立低剂量率辐照C57BL/6J小鼠模型的基础上，用iTRAQ技术筛选出有意义的差异表达蛋白，并用Western blot进行验证。本方法具有对低剂量辐射敏感、可靠性高、特异性强等多重优点。

Description

一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损 伤的方法
技术领域
本发明属于低剂量伽马射线辐照生物损伤评价技术领域，利用分子标记物进行低剂量伽马射线辐照生物损伤评价的方法，具体是利用C57BL/6J小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2(Isocitrate dehydrogenase 2 , IDH2)的相对表达量下调率来评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法。
背景技术
“核污染”是指天然放射性核同位素以及人工合成核同位素在环境中扩散的过程。它不仅包括核辐照、原子尘埃等本身引起的污染，还有这些物质对环境的污染后带来的次生污染。伽马射线辐照能导致细胞组分和结构发生显著变化，并对生物体造成严重的损害。高剂量的电离辐照短期会对生物个体产生急性伤害，容易被检测和评估，而低剂量电离辐照一般不会引起生物个体的急性反应往往不被重视。随着伽马射线辐照广泛用于医疗保健、核军工、食品药品灭菌等领域，增加了人体暴露，公众越来越关注低剂量伽马射线辐照对生物体的影响。因此，筛选出检测速度快、对低剂量电离辐照敏感性、特异性强、可靠性高的生物标志物对低剂量伽马射线辐照损伤进行评价具有十分重要的意义。
生物标志物不仅可以估算伽马射线辐照剂量，还可以检测和评估伽马射线辐照对健康的影响，同时也可用于临床和医疗管理。伽马射线辐照损伤的早期生物标志物对暴露于伽马射线辐照人员的分类，治疗和随访以及放射治疗之前，治疗期间以及治疗之后的放射性毒性评估是至关重要的。生物体可能通过改变蛋白质的表达水平及其翻译后修饰状态来响应伽马射线辐照。iTRAQ 技术是新兴的高通量蛋白质组学方法，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。因此，可以通过iTRAQ 技术筛选组织样品中差异表达的蛋白质来确定与伽马射线辐照相关的生物标志物。
发明内容
本发明提供一种利用C57BL/6J小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）的相对表达量的下调率来评价低剂量伽马射线辐照损伤的方法。本发明利用C57BL/6J小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）对低剂量伽马射线辐照非常敏感的特性，根据C57BL/6J小鼠接受的低剂量伽马射线辐照剂量与血清中IDH2的相对表达量的下调率的剂量-效应关系，C57BL/6J小鼠血清中IDH2的相对表达量的下调率，评估低剂量伽马射线辐照的生物损伤。其原理是，发明人通过iTRAQ 技术筛选发现了接受低剂量伽马射线辐照后C57BL/6J小鼠血清中的IDH2的相对表达量对低剂量伽马射线辐照非常敏感，且存在一定的剂量-效应关系。IDH2是调节线粒体氧化还原平衡和通过产生NADPH减少氧化应激诱导的细胞损伤的关键酶，血清中IDH2表达下调，可能破坏线粒体氧化还原，诱导氧化损伤。在一定的低剂量电离辐照剂量范围内，机体受到的辐照损伤越大，IDH2的相对表达量就越低，IDH2蛋白表达的高低直接与人体辐照氧化损伤程度密切相关，该方法具有对剂量辐照敏感、可靠性高、特异性强等多重优点。
具体步骤是：
（1）建立低剂量辐照C57BL/6J小鼠模型；
（2）采集血清；
（3）IDH2相对表达量下调率的检测；
（4）辐照损伤综合评价。
具体步骤如下：
其进一步的措施是：
所述的建立低剂量辐照C57BL/6J小鼠模型具体方法为：
选取6周到7周的C57BL/6J成年雄性小鼠，随机分4组，每组6只老鼠，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠分别放在剂量率为12.5、25.0和50.0 μGy/h的伽马射线辐照环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h。
所述的采集血清具体方法为：
采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清。
所述的IDH2的相对表达量下调率的检测具体方法为：
将收集的接受过低剂量伽马射线辐照的C57BL/6J小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后进行IDH2的相对表达量下调率分析。
所述的蛋白提取具体步骤如下：
用树脂沉淀样本中的蛋白，4℃，12000 r/min离心20 min，去掉上清，晾干，-80℃保存备用。在干燥后的蛋白质团块中加入200-250 μL L3裂解液，用枪头反复吹打直至蛋白质充分分散。超声助溶，4℃，12000 r/min，离心20 min，吸出上清液，转移至新的EP管中。
所述总蛋白浓度测定的具体步骤如下：
将0.2 mg/ml 的BSA 标准品溶液加稀释液，依次稀释成0、5、10、20、50、100、150和200μg/ml 的标准品溶液。然后测定它们在562 nm下的吸光度值，绘制标准曲线。测定每个样品溶液在562 nm下的吸光度值后，再通过标准曲线计算出样品中蛋白质的浓度。
所述蛋白质变性的具体步骤如下：
将蛋白质溶液按照4:1的比例加入5×蛋白质上样缓冲液，沸水浴变性15 min，放入-20℃冰箱保存备用。
所述凝胶电泳的具体步骤如下：
将30％丙烯酰胺、1.5 M TRIS－HCl、10％SDS、AP和TEMED按照一定比例配制成10%的分离胶和5%的浓缩胶；待分离胶凝固后，在电泳槽中加入电泳液，将变性后的蛋白质样品加入电泳孔中，进行电泳。将浓缩胶电压调至75 V，分离胶电压调至120 V，电泳至溴酚蓝刚跑至分离胶底部，即可终止电泳，进行转膜。
所述转膜的具体步骤如下：
先采用甲醇将PVDF膜进行活化，再在膜的底部放置5-6张7×9 cm的滤纸，再一同放置于转膜仪中，加入转膜液，300 mA恒流转膜半小时。转膜过程中，将转膜槽放置于冰水中降温。
所述免疫反应的具体步骤如下：
将转好的膜用5%的脱脂牛奶（0.5% TBST稀释）封闭，在脱色摇床上混匀1 h。采用TBST溶解的5%脱脂牛奶对IDH2一抗（鼠抗人）进行1:100浓度稀释，然后将其与封闭好的膜进行混匀，4 ℃下孵育过夜。用2% TBST对IDH2一抗孵育过夜的膜进行清洗，室温下在脱色摇床上清洗3次，每次5 min。最后用TBST对二抗（羊抗鼠）稀释3000倍，室温下孵育30 min后，在脱色摇床上清洗三次，每次5 min。
所述化学发光反应的具体步骤如下：
在暗室中将ECLA和ECLB两种试剂在离心管中等体积混合，将PVDF膜的蛋白面朝上，加入混合好的ECL溶液充分反应1-2 min后，放入凝胶成像系统进行扫描分析。
所述的凝胶成像扫描分析的具体步骤如下：
采用凝胶成像系统对蛋白条带进行拍照，再采用Alpha软件分析目标带的光密度值。通过对IDH2蛋白灰度值扫描获得IDH2蛋白表达量，对内参蛋白GAPDH蛋白灰度值扫描获得GAPDH蛋白表达量；将IDH2蛋白表达量除以内参蛋白GAPDH蛋白表达量即获得IDH2的相对表达量。
所述IDH2的相对表达量下调率分析的具体步骤如下：
IDH2相对表达量下调率按公式（1）进行计算：
IDH2相对表达量下调率按公式（1）进行计算，
（1）
所述辐照损伤综合评价的方法是：
采用IDH2的相对表达量下调率来评价低剂量伽马射线辐照生物损伤。当C57BL/6J小鼠血清中的IDH2的相对表达量下调率在10%以内时，表明低剂量伽马射线辐照对无生物损伤效应；当C57BL/6J小鼠血清中的IDH2的相对表达量下调率大于10%而小于20%时，此时的低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为Ⅰ级；当C57BL/6J小鼠血清中的IDH2的相对表达量下调率大于20%而小于40%时，此时的低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为Ⅱ级；当C57BL/6J小鼠血清中的IDH2的相对表达量下调率大于40%时，此时的低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为Ⅲ级。当低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级达到Ⅰ级时，职业人员应加强辐照防护；当低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级达到Ⅱ级时，职业人员应及时休息一段时间；当低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级达到Ⅲ级时，职业人员应调离工作岗位，并接受适当治疗。
本专利发明是利用蛋白质组学全定量iTRAQ 技术分析差异表达的蛋白，鉴定IDH2作为低剂量伽马射线辐照损伤生物标志物，然后利用IDH2的相对表达量与辐射损伤之间的剂量-效应关系来评价低剂量伽马射线的生物损伤效应。相比于其他的生物效应标志物及评价方法，该方法具有对低剂量辐射敏感、可靠性高、特异性强等多重优点。
具体实施方式
实施例1
选取6周到7周的C57BL/6J成年雄性小鼠，随机分4组，每组6只老鼠，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠放在伽马射线辐照剂量率为12.5 μ Gy/h的环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h。采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清。将收集的接受过低剂量电离射线辐照的C57BL/6J小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后按照公式（1）进行IDH2的相对表达量下调率分析。
C57BL/6J成年雄性小鼠在 12.5 μ Gy/h的剂量率下辐照90 d，每天辐照8 h，接受9 mGy的低剂量伽马射线辐照后，血清中IDH2的相对表达量下调率为17.5%，此时低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为级，职业工作人员应增强辐照防护。
实施例2
选取6周到7周的C57BL/6J成年雄性小鼠，随机分4组，每组6只老鼠，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠放在伽马射线辐照剂量率为25.0 μGy/h的环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h。采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清。将收集的接受过低剂量电离射线辐照的C57BL/6J小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后按照公式（1）进行IDH2的相对表达量下调率分析。
C57BL/6J成年雄性小鼠在 25.0 μGy/h的剂量率下辐照90 d，每天辐照8 h，接受18 mGy的低剂量伽马射线辐照后，血清中IDH2相对表达量下调率为32.5 %，此时低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为级，职业工作人员应及时休息一段时间。
实施例3
选取6周到7周的C57BL/6J成年雄性小鼠，随机分4组，每组6只老鼠，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠放在伽马射线辐照剂量率为50.0 μGy/h的环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h。采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清。将收集的接受过低剂量电离射线辐照的C57BL/6J小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后按照公式（1）进行IDH2的相对表达量下调率分析。
C57BL/6J成年雄性小鼠在 50.0 μGy/h的剂量率下辐照90 d，每天辐照8 h，接受36 mGy的低剂量伽马射线辐照后，血清中IDH2相对表达量下调率为41.6 %，此时低剂量伽马射线辐照的生物损伤等级为级，职业工作人员应调离原工作岗位，并接受适当治疗。
以上仅仅是本发明的较佳实施方式，根据本发明的上述构思，本领域的熟练人员还可对此作出各种修改和变换。例如，变换辐照射线的类型、变换小鼠模型的类型、调整辐照剂量率、采用不同辐照时间和辐照剂量、变换辐照损伤评价体系等等。然而，这些类似的变换和修改均属于本发明的实质。

Claims (10)

1.一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，利用C57BL/6J小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2对低剂量伽马射线辐照非常敏感的特性，根据小鼠接受的低剂量伽马射线辐照剂量与血清中IDH2的相对表达量的下调率的剂量-效应关系，小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量的下调率，评估低剂量伽马射线辐照的生物损伤，其特征在于，具体步骤包括：
（1）建立低剂量辐照小鼠模型；
（2）采集血清；
（3）异柠檬酸脱氢酶2相对表达量下调率的检测；
（4）辐照损伤综合评价；
所述建立低剂量辐照小鼠模型具体为：
选取6周到7周的雄性小鼠，分组，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠分别放在剂量率为12.5、25.0和50.0 μGy/h的伽马射线辐照环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h；
所述的采集血清具体方法为：
采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清；
所述的异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量下调率的检测具体方法为：
将收集的接受过低剂量伽马射线辐照的小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后进行异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量下调率分析。
2.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，所述蛋白提取具体步骤如下：
淀样本中的蛋白，去上清，晾干，-80℃保存，干燥后的蛋白质团块中加入200-250 μLL3裂解液，反复吹打直至蛋白质分散，超声助溶，4℃，12000 r/min，离心20 min，吸出上清液，转移至EP管中。
3.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述总蛋白浓度测定的具体步骤如下：
将0.2 mg/ml 的BSA 标准品溶液加稀释液，依次稀释成0、5、10、20、50、100、150和200μg/ml 的标准品溶液，然后测定它们在562 nm下的吸光度值，绘制标准曲线，然后测定每个样品溶液在562 nm下的吸光度值后，再通过标准曲线计算出样品中蛋白质的浓度。
4.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述蛋白质变性的具体步骤如下：
将蛋白质溶液按照4:1的比例加入5×蛋白质上样缓冲液，沸水浴变性15 min，放入-20℃冰箱保存备用。
5.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述凝胶电泳的具体步骤如下：
将30％丙烯酰胺、1.5 M TRIS－HCl、10％SDS、AP和TEMED配制成10%的分离胶和5%的浓缩胶；待分离胶凝固后，在电泳槽中加入电泳液，将变性后的蛋白质样品加入电泳孔中，进行电泳，将浓缩胶电压调至75 V，分离胶电压调至120 V，电泳至溴酚蓝刚跑至分离胶底部，即终止电泳，进行转膜。
6.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述转膜的具体步骤如下：
先采用甲醇将PVDF膜进行活化，再在膜的底部放置5-6张7×9 cm的滤纸，再一同放置于转膜仪中，加入转膜液，300 mA恒流转膜半小时，转膜过程中，将转膜槽放置于冰水中降温。
7.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述免疫反应的具体步骤如下：
将转好的膜用5%的脱脂牛奶封闭，在脱色摇床上混匀1 h，采用TBST溶解的5%脱脂牛奶对异柠檬酸脱氢酶2一抗进行1:100浓度稀释，然后将其与封闭好的膜进行混匀，4 ℃下孵育过夜；用2% TBST对异柠檬酸脱氢酶2一抗孵育过夜的膜进行清洗，室温下在脱色摇床上清洗3次，每次5 min；最后用TBST对二抗稀释3000倍，室温下孵育30 min后，在脱色摇床上清洗三次，每次5 min。
8.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述化学发光反应的具体步骤如下：
在暗室中将ECLA和ECLB两种试剂在离心管中等体积混合，将PVDF膜的蛋白面朝上，加入混合好的ECL溶液充分反应1-2 min后，放入凝胶成像系统进行扫描分析。
9.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述的凝胶成像扫描分析的具体步骤如下：
采用凝胶成像系统对蛋白条带进行拍照，再采用Alpha软件分析目标带的光密度值，通过对异柠檬酸脱氢酶2蛋白灰度值扫描获得异柠檬酸脱氢酶2蛋白表达量，对内参蛋白GAPDH蛋白灰度值扫描获得GAPDH蛋白表达量；将异柠檬酸脱氢酶2蛋白表达量除以内参蛋白GAPDH蛋白表达量即获得异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量。
10.根据权利要求1所述的一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，其特征在于，
所述异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量下调率分析的具体步骤如下：
异柠檬酸脱氢酶2相对表达量下调率按公式（1）进行计算：
异柠檬酸脱氢酶2相对表达量下调率按公式（1）进行计算，
（1）。
CN201910568694.1A 2019-06-27 2019-06-27 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法 Pending CN110196320A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910568694.1A CN110196320A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910568694.1A CN110196320A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110196320A true CN110196320A (zh) 2019-09-03

Family

ID=67755282

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910568694.1A Pending CN110196320A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110196320A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100015655A1 (en) * 2008-07-17 2010-01-21 Abbott Laboratories Methods and Kits for Detecting and Quantifying Damage Caused by a Parasite
CN103529469A (zh) * 2013-10-14 2014-01-22 苏州大学 一种筛选大鼠早期辐射损伤生物标记物的方法及用途
CN105263578A (zh) * 2013-03-28 2016-01-20 蒙彼利埃大学医疗中心 确定放射敏感性的方法
CN105319343A (zh) * 2015-12-02 2016-02-10 南华大学 一种利用斑马鱼胚胎致畸率进行低剂量伽马辐射生物预警的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100015655A1 (en) * 2008-07-17 2010-01-21 Abbott Laboratories Methods and Kits for Detecting and Quantifying Damage Caused by a Parasite
CN105263578A (zh) * 2013-03-28 2016-01-20 蒙彼利埃大学医疗中心 确定放射敏感性的方法
CN103529469A (zh) * 2013-10-14 2014-01-22 苏州大学 一种筛选大鼠早期辐射损伤生物标记物的方法及用途
CN105319343A (zh) * 2015-12-02 2016-02-10 南华大学 一种利用斑马鱼胚胎致畸率进行低剂量伽马辐射生物预警的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
罗芳芳 等: "电离辐照损伤对小鼠睾丸组织氧化磷酸化信号通路的影响", 《中国药理学通报》 *
黄辰 等: "《医学实验研究概论》", 31 July 2014, 西安交通大学出版社 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103472229B (zh) 一种癌胚抗原磁微粒化学发光免疫分析检测试剂盒
CN104316685B (zh) 一种二乙酰精胺的检测试剂盒及制备方法和应用
CN108918884A (zh) 定量检测犬c反应蛋白的免疫层析试纸条及其制备方法
CN105067615B (zh) 一种基于酰胺基团纳米胶乳增强比浊法动物c‑反应蛋白的检测试剂盒及检测方法
CN107300620B (zh) 一种基于maldi-tof-ms的死宰肉鉴别方法及系统
CN108613977B (zh) 一种n末端脑钠肽前体检测试剂盒
CN105759057A (zh) 一种检测阿尔兹海默综合症ms4a6a的干式免疫荧光试剂盒和制备方法
CN104650234A (zh) 抗akr1b10蛋白单克隆抗体及其应用
CN105866407A (zh) 一种曲霉菌半乳甘露聚糖抗原免疫检测试剂盒及其制备方法与应用
CN112189140A (zh) 检测检验物质与血液或血液成分之间的相互作用，评估免疫状态评估及检测疾病
Zhai et al. Rapid detection of Vibrio parahaemolyticus using magnetic nanobead-based immunoseparation and quantum dot-based immunofluorescence
CN109307766A (zh) 胃蛋白酶原ⅰ检测试剂盒
CN107228940B (zh) 一种胱抑素c的检测试剂及方法
CN106191286A (zh) 布鲁氏菌的检测方法、试剂盒及其应用
CN110196320A (zh) 一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法
Wang et al. Rapid quantification of chlorpromazine residues in pork using nanosphere-based time-resolved fluorescence immunoassay analyzer
CN115267203A (zh) 一种检测羊布鲁氏菌病特异性IgG和IgM含量的方法及应用
EP3467503A1 (en) Lung cancer detection method and detection kit
Buffone et al. Characterization and evaluation of immunochemical methods for the measurement of fecal α 1-antitrypsin
CN110221337A (zh) 一种利用α-1抗蛋白酶评价铀矿粉尘内照射生物损伤的方法
JPS58135460A (ja) 癌診断のための試薬
Kodama et al. VMA mass screening program of neuroblastoma for infants in Nagoya City, Japan.
KR101739703B1 (ko) Trail 기반 뇌염 감별진단 방법 및 장치
Thomson et al. A coded study of antitumor immunity to human lung cancer assayed by tube leukocyte adherence inhibition
CN107976543A (zh) 一种结核病检测试剂盒及检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190903

RJ01 Rejection of invention patent application after publication