CN110194808A - 一种植物精多糖及在制备美白化妆品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种植物精多糖及在制备美白化妆品中的应用。本发明提供的植物精多糖对酪氨酸酶的IC50值为(87±3.5)μg/mL，对酪氨酸酶的抑制作用与阳性药物曲酸近似强度级别，可以用于美白用途；本发明提供的植物精多糖的制备方法无需借助凝胶柱层析等柱色谱，通过碱提醇析即可制备得到均一性良好的精多糖，适合工业化大生产；本发明提供的美白面膜配方简单，工艺操作性强，含有与阳性药物曲酸近似强度级别的酪氨酸酶抑制剂‑石胡荽精多糖，美白效果优异。

Description

一种植物精多糖及在制备美白化妆品中的应用
技术领域
本发明属于化妆品领域，涉及天然成分的制备及其在化妆品中的应用，具体涉及一种植物精多糖及在制备美白化妆品中的应用。
背景技术
根据化妆品标识管理规定，化妆品是指以涂抹、喷洒或者其他类似方法，散布于人体表面的任何部位，如皮肤、毛发、指趾甲、唇齿等，以达到清洁、保养、美容、修饰和改变外观，或者修正人体气味，保持良好状态为目的的化学工业品或精细化工产品。其中，美白用途的化妆品是众多化妆品中的一个重要类目。
美白的一个重要方向就是抑制黑色素的生成，而酪氨酸酶是黑色素代谢的关键酶，抑制了酪氨酸酶的活性，就可以抑制黑色素的生成。这也是目前市面上绝大部分美白化妆品中含有酪氨酸酶抑制剂的原因。
石胡荽，又名鹅不食草，是一种在多种医药古籍中都有记载的中草药，为一年生草本植物，能通窍散寒、祛风利湿，散瘀消肿，主治鼻炎、跌打损伤等症。
石胡荽易繁殖、生长快、产量多。据不完全统计，它广泛分布在全国20多个省市、地区。全国有充足的药用资源，完全能满足我国的临床用药需求。但是，据调查，我国各地很少有使用石胡荽者。这味中草药，在很多医生的印象中，犹如未闻，更谈不上推广使用。这种现状导致石胡荽成为了一种随处可见、无人开发利用的杂草，造成了极大的资源浪费。
为了充分利用自然资源，变废为宝，对石胡荽的开发具有现实意义。
发明内容
本发明的目的在于充分开发利用自然资源，挖掘发现自然资源中有效的美白成分并用于制备美白化妆品中，提供一种植物精多糖及在制备美白化妆品中的应用。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种具有美白活性的植物精多糖，从石胡荽中分离制备。
一种制备上述植物精多糖的方法，包括如下步骤：
称取石胡荽粉末，加稀碱溶液，常温浸提，提取液过滤后用稀酸溶液调节pH至7.0，减压浓缩，离心除杂，上清液用3倍体积的无水乙醇醇析，沉淀用水复溶后，再次用3倍体积的无水乙醇醇析，如此再重复一次，共醇析3次，最后一次醇析的沉淀依次用乙醇、丙酮、石油醚洗涤，挥干溶剂后用Sevag法脱蛋白、2％活性炭煮沸脱色、透析后，减压浓缩、冷冻干燥得到粗多糖；
取粗多糖，溶于水中，添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为50％，醇析、收集上清液，向上清液中继续添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为75％，醇析、收集沉淀，沉淀用水复溶后冷冻干燥得到精多糖。
优选地，所述稀碱溶液为0.1mol/L NaOH溶液。
优选地，常温浸提24h。
优选地，所述稀酸溶液为0.1mol/L盐酸溶液。
优选地，离心除杂的参数为4000r/min条件下离心10min。
上述植物精多糖在制备美白化妆品中的应用。
所述美白化妆品为美白面膜。
所述美白面膜的配方如下：
所述美白面膜制备工艺包括：先按照配方称取石胡荽精多糖配制成溶液，加入魔芋葡甘聚糖，55℃条件搅拌20min使其溶胀，制备得到A相，备用；再按照配方取适量去离子水，向其中加入山梨醇、丙三醇和防腐剂，搅拌使其充分溶解，制备得到B相，备用；最后，将A相缓慢加入搅拌的B相中，混合均匀。
有益效果：
1、本发明提供的植物精多糖对酪氨酸酶的IC50值为(87±3.5)μg/mL，对酪氨酸酶的抑制作用与阳性药物曲酸近似强度级别，可以用于美白用途；
2、本发明提供的植物精多糖的制备方法无需借助凝胶柱层析等柱色谱，通过碱提醇析即可制备得到均一性良好的精多糖，适合工业化大生产；
3、本发明提供的美白面膜配方简单，工艺操作性强，含有与阳性药物曲酸近似强度级别的酪氨酸酶抑制剂-石胡荽精多糖，美白效果优异。
附图说明
图1为精多糖在Sephacryl S-300 HR凝胶柱层析中的洗脱曲线，可以获得单一、对称的洗脱峰，说明该精多糖为均一性良好的多糖；
图2为精多糖的典型SEM图，可见精多糖呈均一的微粒状，分散均匀。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但不以此限定本发明保护范围。
实施例1：植物精多糖的制备和均一性分析
1、原料的收集和预处理
于江苏省南京市栖霞区栖霞山附近收集新鲜的石胡荽全草，洗净、切段后晒干，临用前粉碎过40目筛。
2、多糖的提取和精制
称取石胡荽粉末2kg，加0.1mol/L NaOH溶液10L，常温浸提24h，提取液过滤后用0.1mol/L盐酸溶液调节pH至7.0，减压浓缩至2L浓缩液，4000r/min条件下离心10min，上清液用3倍体积的无水乙醇醇析，沉淀用1L水复溶后，再次用3倍体积的无水乙醇醇析，如此再重复一次，共醇析3次，最后一次醇析的沉淀依次用乙醇、丙酮、石油醚洗涤，挥干溶剂后用Sevag法脱蛋白、2％活性炭煮沸脱色2h、透析后，减压浓缩、冷冻干燥得到粗多糖175g。
取粗多糖150g，溶于500mL水，添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为50％，醇析、收集上清液，向上清液中继续添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为75％，醇析、收集沉淀，沉淀用水复溶后冷冻干燥得到精多糖92g。
3、凝胶渗透色谱法分析精多糖的均一性
将精多糖配成5mg/mL溶液，上样于Sephacryl S-300 HR凝胶柱，以水为洗脱液，流速为0.2mL/min，每管2mL，苯酚-硫酸法检测多糖洗脱情况，以流出液的管数为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制洗脱曲线。
洗脱曲线如图1所示，精多糖在Sephacryl S-300 HR凝胶柱层析中获得单一、对称的洗脱峰，说明该精多糖为均一性良好的多糖。
4、扫描电子显微镜(SEM)分析
取适量的干燥精多糖，按常规方法制样在扫描电镜下观察，拍照。图2为精多糖的典型SEM图，可见精多糖呈均一的微粒状，分散均匀。
实施例2：植物精多糖的美白活性测定(酪氨酸酶抑制试验)
将实施例1制备的精多糖和阳性药物曲酸配制成不同浓度的样品溶液，酪氨酸酶抑制活性的测定按照王加利等提供的方法进行(驱虫斑鸠菊化学成分及酪氨酸酶抑制活性研究，中药材，第40卷第8期2017年8月)。该反应在96孔培养板中进行，总反应体系为200μL：不同浓度的样品溶液40μL；67mmol/L磷酸盐缓冲液80μL；100U/mL酪氨酸酶溶液40μL；2.5mmol/L左旋多巴40μL。调零孔仅加67mmol/L磷酸盐缓冲液200μL。加样完毕后，混匀，将其置于37℃水浴孵箱中孵育20min，用酶联免疫检测仪检测反应产物在490nm波长处的特异性吸光值(A490)，重复测试3次。按照下式计算精多糖和阳性药物曲酸对酪氨酸酶的抑制率：酪氨酸酶抑制率(％)＝[(A－B)－(C－D)]/(A－B)×100％。其中，A＝A490－药+酶；B＝A490－药－酶；C＝A490+药+酶；D＝A490+药－酶。同时以抑制率对抑制剂浓度作图，根据抑制曲线求得精多糖和阳性药物曲酸的IC50值。
结果阳性药物曲酸的IC50值为(51±2.8)μg/mL；实施例1制备的精多糖的IC50值为(87±3.5)μg/mL，对酪氨酸酶的抑制作用与阳性药物近似强度级别。
实施例3：一种美白面膜的配方及制备工艺
配方如下所示：
制备工艺：先按照配方称取石胡荽精多糖配制成溶液，加入魔芋葡甘聚糖，55℃条件搅拌20min使其溶胀，制备得到A相，备用；再按照配方取适量去离子水，向其中加入山梨醇、丙三醇和防腐剂，搅拌使其充分溶解，制备得到B相，备用；最后，将A相缓慢加入搅拌的B相中，混合均匀。

Claims (10)

1.一种具有美白活性的植物精多糖，其特征在于：从石胡荽中分离制备。
2.一种制备权利要求1所述植物精多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：
称取石胡荽粉末，加稀碱溶液，常温浸提，提取液过滤后用稀酸溶液调节pH至7.0，减压浓缩，离心除杂，上清液用3倍体积的无水乙醇醇析，沉淀用水复溶后，再次用3倍体积的无水乙醇醇析，如此再重复一次，共醇析3次，最后一次醇析的沉淀依次用乙醇、丙酮、石油醚洗涤，挥干溶剂后用Sevag法脱蛋白、2％活性炭煮沸脱色、透析后，减压浓缩、冷冻干燥得到粗多糖；
取粗多糖，溶于水中，添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为50％，醇析、收集上清液，向上清液中继续添加无水乙醇至乙醇体积百分浓度为75％，醇析、收集沉淀，沉淀用水复溶后冷冻干燥得到精多糖。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述稀碱溶液为0.1mol/LNaOH溶液。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：常温浸提24h。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述稀酸溶液为0.1mol/L盐酸溶液。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：离心除杂的参数为4000r/min条件下离心10min。
7.权利要求1所述的植物精多糖在制备美白化妆品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，所述美白化妆品为美白面膜。
9.根据权利要求8所述的应用，所述美白面膜的配方如下：
10.根据权利要求9所述的应用，所述美白面膜制备工艺包括：先按照配方称取石胡荽精多糖配制成溶液，加入魔芋葡甘聚糖，55℃条件搅拌20min使其溶胀，制备得到A相，备用；再按照配方取适量去离子水，向其中加入山梨醇、丙三醇和防腐剂，搅拌使其充分溶解，制备得到B相，备用；最后，将A相缓慢加入搅拌的B相中，混合均匀。
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