CN110129396A - 方格星虫体壁蛋白肽提取物及其制备方法 - Google Patents

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CN110129396A CN201910365002.3A CN201910365002A CN110129396A CN 110129396 A CN110129396 A CN 110129396A CN 201910365002 A CN201910365002 A CN 201910365002A CN 110129396 A CN110129396 A CN 110129396A
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Abstract

本发明适用于生物有效成分提取技术领域,公开了方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法及方格星虫体壁蛋白肽提取物,其中,方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法包括如下步骤:采用鲜活的方格星虫制备方格星虫体壁;将方格星虫体壁粉碎、匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液;对方格星虫体壁匀浆液进行超声波破碎细胞处理,得到超声波处理液;利用蛋白酶对超声波处理液进行酶解得到酶解液;将酶解液依次进行灭酶、离心得到上清酶解液;将上清酶解液冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。本发明的方法,具有安全性高、生产条件温和、易于控制、工艺简单、容易进行工业化生产、成本低等优点;且制得的产品水解度好,蛋白肽含量高。

Description

方格星虫体壁蛋白肽提取物及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物有效成分提取技术领域,尤其涉及一种方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法以及采用该制备方法制成的方格星虫体壁蛋白肽提取物。
背景技术
方格星虫(Sipunculus nudus)俗称沙虫、光裸星虫、沙肠子、沙肠虫、海人参等,其富含蛋白质、脂肪及钙、磷、铁等多种营养成分,具有较高的药用功效和食疗价值,例如,其具有滋阴降火、清肺补虚及补肾养颜等功能,可治疗骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚喘咳、胸闷痰多及妇女产后乳汁稀少等症状,同时对治疗肝炎、肺痨咳嗽、神经衰弱与小儿脾虚等症状均有效果。目前,以方格星虫为原料的相关产品主要以方格星虫干和干制方格星虫粉为主,这些产品并没能充分发挥方格星虫的药用价值。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其旨在解决现有技术中以方格星虫为原料的相关产品没有能充分发挥方格星虫药用价值的技术问题。
为达到上述目的,本发明提供的方案是:一种方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其包括如下步骤:
采用鲜活的方格星虫制备方格星虫体壁;
将所述方格星虫体壁粉碎、匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液;
对所述方格星虫体壁匀浆液进行超声波破碎细胞处理,得到超声波处理液;
利用蛋白酶对所述超声波处理液进行酶解得到酶解液;
将所述酶解液依次进行灭酶、离心得到上清酶解液;
将所述上清酶解液冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
可选地,所述蛋白酶为中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、由动物蛋白酶和风味蛋白酶组成的复合酶中的任意一种;且/或,
所述酶解的条件为:PH为7.0±1.0,温度为55℃±5℃,酶解时间为4h±1h,加酶量为0.5%±0.1%。
可选地,所述超声波破碎细胞处理的实施条件包括:
超声温度为20℃±5℃,超声时间为10min±5min,超声频率为35kHz±0.5kHz,超声波功率为60W±20W。
可选地,将所述酶解液进行灭酶的实施方式为:将装有所述酶解液的容器放在沸水中进行灭酶5min~20min;且/或,
将灭酶后的所述酶解液离心得到所述上清酶解液的实施方式为:将灭酶后的所述酶解液放在4℃±2℃、4000r/min±1000r/min条件下离心15min±5min得到所述上清酶解液;且/或,
将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽的实施方式为:
将所述上清酶解液放入-30℃~-10℃的环境中预冻,然后进行真空冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽提取物。
可选地,方格星虫体壁的制备过程包括:
将鲜活的方格星虫进行清洗、吐沙处理;
去除所述方格星虫的体腔液和内脏,得到所述方格星虫体壁。
可选地,对清洗后的所述方格星虫进行吐沙处理的实施方式为:
将清洗后的方格星虫放入含盐量为5‰~50‰的盐水中进行喂养,每隔1h±0.5h换一次所述盐水喂养,直至所换喂养的盐水中不再有泥沙。
可选地,所述方格星虫体壁匀浆液的制备过程包括:
将清洗干净的所述方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将绞碎后的所述方格星虫体壁放入均质机中均质得到所述方格星虫体壁匀浆液。
可选地,在将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽后还包括如下步骤:将所述方格星虫体壁蛋白肽依次进行粉碎、过筛筛选。
可选地,将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽过筛筛选的实施方式为:
将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽提取物,用60~80目的筛子进行过筛筛选。
本发明的第二个目的在于提供一种方格星虫体壁蛋白肽提取物,其采用上述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法制成。
本发明提供的方格星虫体壁蛋白肽提取物及其制备方法,采用鲜活的方格星虫的体壁作为原材料,利用超声波破碎技术和酶解法制备方格星虫体壁蛋白肽提取物,该制备方法具有安全性高、生产条件温和、易于控制、工艺简单、容易进行工业化生产、成本低等优点;且相较于传统工艺,采用本发明制备方法制得的方格星虫体壁蛋白肽提取物易于吸收,速溶性好,这为工业化连续生产方格星虫体壁蛋白肽提取物奠定了理论基础。采用本发明制得的方格星虫体壁蛋白肽提取物水解度好,蛋白肽含量高;此外,经研究发现,本发明制得的方格星虫体壁蛋白肽提取物具有抗氧化、降血压及免疫调节等功能,有效提高了方格星虫的药用价值,具有较大的应用前景;同时,其还丰富了方格星虫的产品种类,填补了市场上关于方格星虫体壁提取物的产品空白,提高其经济价值。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
需要说明,本发明实施例中涉及“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外,各个实施例之间的技术方案可以相互结合,但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础,当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在,也不在本发明要求的保护范围之内。
蛋白肽是一类分子量较小、结构松散、热稳定性较高、具有多种生物功能的小肽。它是由蛋白质加酶酶解后产生的物质,其能够直接参与人体内的各种功能调节,对摄食、消化、代谢及内分泌等具有积极作用。蛋白肽的吸收机制优于蛋白质和氨基酸,且相较于蛋白质,蛋白肽具有较好的溶解性、起泡性及起泡稳定性,同时其具有远远超于蛋白质和氨基酸的生理活性。
本发明实施例提供的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其包括如下步骤:
采用鲜活的方格星虫制备方格星虫体壁;
将所述方格星虫体壁粉碎、匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液;
对所述方格星虫体壁匀浆液进行超声波破碎细胞处理,得到超声波处理液;
利用蛋白酶对所述超声波处理液进行酶解得到酶解液;
将所述酶解液依次进行灭酶、离心得到上清酶解液;
将所述上清酶解液冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
本发明实施例提供的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法中,采用鲜活的方格星虫制备方格星虫体壁,利于更好地保存方格星虫体壁内的蛋白质功能价值;如果采用方格星虫干,则由于方格星虫干在制备时要将新鲜方格星虫蒸煮几分钟,从而极大可能会影响其蛋白质功能价值。此外,其利用超声波破碎技术和酶解法制备方格星虫体壁蛋白肽提取物,该制备方法具有安全性高、生产条件温和、易于控制、工艺简单、容易进行工业化生产、成本低等优点。且采用本发明实施例的制备方法制得的方格星虫体壁蛋白肽提取物易于吸收、速溶性好、水解度好,蛋白肽含量高,这为工业化连续生产方格星虫体壁蛋白肽提取物奠定了理论基础。此外,经研究发现,本发明实施例制得的方格星虫体壁蛋白肽提取物具有抗氧化、降血压及免疫调节等功能,有效提高了方格星虫的药用价值,具有较大的应用前景;同时,其还丰富了方格星虫的产品种类,填补了市场上关于方格星虫体壁提取物的产品空白,提高其经济价值。
优选地,方格星虫体壁的制备方式为:挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后进行吐沙处理,其中,吐沙处理的实施方式可为:将清洗后的方格星虫放入含盐量为5‰~50‰的淡盐水中喂养,每隔1h±0.5h换一次淡盐水喂养,待其吐尽泥沙(即所换喂养的盐水中不再有泥沙);
将吐尽泥沙的方格星虫取出,去除所述方格星虫的体腔液和内脏,得到所述方格星虫体壁,其具体实施方式可为:将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,剪口,用钝头竹签或钢针将沙虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去内脏至无残留,洗净。
作为本实施例的一较佳实施方案,上述用于喂养方格星虫的淡盐水含盐量为30‰,喂养过程换水的间隔为1h,这样,既利于保证吐沙处理的效率,又可防止盐水含盐量太大影响方格星虫的生存。
优选地,方格星虫体壁匀浆液的制备过程包括:将清洗干净的所述方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将绞碎后的所述方格星虫体壁放入均质机中均质得到所述方格星虫体壁匀浆液。
优选地,超声波破碎细胞处理的实施条件包括:超声温度为20℃±5℃,超声时间为10min±5min,超声频率为35kHz±0.5kHz,超声波功率为60W±20W,其操作安全性高、生产条件温和、易于控制,且利于提高后续酶解的效率和效果,以充分提取方格星虫体壁中的有效蛋白肽成分。
作为本实施例的一较佳实施方案,超声波破碎细胞处理的实施条件包括:超声温度为20℃,超声时间为10min,超声频率为35kHz,超声波功率为60W。
优选地,所述蛋白酶为中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、由动物蛋白酶和风味蛋白酶组成的复合酶中的任意一种。在具体酶解过程中,所用的酶不同,自身的酶切位点不同,从而可得到经不同酶切位点断开的蛋白质多肽。
优选地,所述酶解的条件为:PH为7.0±1.0,温度为55℃±5℃,酶解时间为4h±1h,加酶量为0.5%±0.1%。
作为本实施例的一较佳实施方案,本实施例中各蛋白酶的酶解条件如下表1所示,经检测发现,其酶解效果最佳。
表1各蛋白酶的酶解条件
优选地,将所述酶解液进行灭酶的实施方式为:将装有所述酶解液的容器放在沸水中进行灭酶5min~20min。此处,采用沸水进行灭酶,其操作方便、易于实现。
作为本实施例的一较佳实施方案,将装有所述酶解液的容器放在沸水中进行灭酶的时间为10min,其酶解充分,且利于保证效率。
优选地,将灭酶后的所述酶解液离心得到所述上清酶解液的实施方式为:将灭酶后的所述酶解液放在4℃±2℃(优选为4℃)、4000r/min±1000r/min(优选为4000r/min)条件下离心15min±5min(优选为15min)得到所述上清酶解液。
优选地,将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽的实施方式为:
将所述上清酶解液放入-30℃~-10℃(优选为-20℃)的环境中预冻,然后进行真空冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽。
优选地,在将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽后还包括如下步骤:将所述方格星虫体壁蛋白肽依次进行粉碎、过筛筛选,这样,利于得到粗细均匀的蛋白肽粉,可提高产品的溶解性及作为辅料添加的利用价值。
优选地,将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽过筛筛选的实施方式为:
将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽提取物,用60~80目的筛子进行过筛筛选,这样,利于保证产品的溶解性。
进一步地,本发明实施例还提供了一种方格星虫体壁蛋白肽提取物,其采用上述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法制成。
本发明实施例以新鲜方格星虫为原料,充分发挥其药用功效和食疗价值优势,扩展方格星虫的产业链发展,且其制备方法操作简单,利用超声波辅助酶解可以大大提高水解率,缩短水解时间,生产成本低,产品安全,可提高生产企业的经济效益。
为了检测验证本发明实施例提供的方格星虫体壁蛋白肽提取物的性能,以下提供五个具体实施例制备方格星虫体壁蛋白肽提取物的过程及其检测结果分析:
实施例1:
挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后将其喂养于含盐量为30‰的淡盐水中,每隔1h换淡盐水喂养,待其吐尽泥沙(可通过观察喂养过程中所换淡盐水中是否有泥沙判断泥沙是否吐尽)。
将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,将方格星虫剪口,用钝头竹签或钢针将方格星虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去方格星虫的内脏至无残留,洗净,得到方格星虫体壁。
将清洗干净的方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将其放入均质机中均质成匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液。
将方格星虫体壁匀浆液进行超声破碎细胞处理,其中超声温度为20℃、超声时间为10min、超声频率为35kHz、超声波功率60W,得到超声波处理液。
利用中性蛋白酶酶解超声波处理液得到酶解液。
将酶解液在沸水中灭酶10min,再在4℃、4000r/min的条件下离心15min得到上清酶解液,将上清酶解液放入-20℃的冰箱预冻,然后再进行真空冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
将得到的方格星虫体壁蛋白肽提取物进行粉碎,用60~80目的筛子进行过筛,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物粉,用双层PE包装加入干燥剂置于-20℃的冰箱保存。
实施例2:
挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后将其喂养于含盐量为30‰的淡盐水中,每隔1h换淡盐水喂养,待其吐尽泥沙(可通过观察喂养方格星虫的淡盐水中是否有泥沙判断)。
将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,将方格星虫剪口,用钝头竹签或钢针将方格星虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去方格星虫的内脏至无残留,洗净,得到方格星虫体壁。
将清洗干净的方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将其放入均质机中均质成匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液。
将方格星虫体壁匀浆液进行超声破碎细胞处理,其中超声温度为20℃、超声时间为10min、超声频率为35kHz、超声波功率60W,得到超声波处理液。
利用胰蛋白酶酶解超声波处理液得到酶解液。
将酶解液在沸水中灭酶10min,再在4℃、4000r/min的条件下离心15min得到上清酶解液,将上清酶解液放入-20℃的冰箱预冻,然后再进行真空冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
将得到的方格星虫体壁蛋白肽提取物进行粉碎,用60~80目的筛子进行过筛,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物粉,用双层PE包装加入干燥剂置于-20℃的冰箱保存。
实施例3:
挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后将其喂养于含盐量为30‰的淡盐水中,每隔1h换淡盐水喂养,待其吐尽泥沙。
将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,将方格星虫剪口,用钝头竹签或钢针将方格星虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去方格星虫的内脏至无残留,洗净,得到方格星虫体壁。
将清洗干净的方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将其放入均质机中均质成匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液。
将方格星虫体壁匀浆液进行超声破碎细胞处理,其中超声温度为20℃、超声时间为10min、超声频率为35kHz、超声波功率60W,得到超声波处理液。
利用动物蛋白酶酶解超声波处理液得到酶解液。
将酶解液在沸水中灭酶10min,再在4℃、4000r/min的条件下离心15min得到上清酶解液,将上清酶解液放入-20℃的冰箱预冻,然后再进行真空冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
将得到的方格星虫体壁蛋白肽提取物进行粉碎,用60~80目的筛子进行过筛,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物粉,用双层PE包装加入干燥剂置于-20℃的冰箱保存。
实施例4:
挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后将其喂养于含盐量为30‰的淡盐水中,每隔1h换淡盐水喂养,待其吐尽泥沙。
将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,将方格星虫剪口,用钝头竹签或钢针将方格星虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去方格星虫的内脏至无残留,洗净,得到方格星虫体壁。
将清洗干净的方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将其放入均质机中均质成匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液。
将方格星虫体壁匀浆液进行超声破碎细胞处理,其中超声温度为20℃、超声时间为10min、超声频率为35kHz、超声波功率60W,得到超声波处理液。
利用风味蛋白酶酶解超声波处理液得到酶解液。
将酶解液在沸水中灭酶10min,再在4℃、4000r/min的条件下离心15min得到上清酶解液,将上清酶解液放入-20℃的冰箱预冻,然后再进行真空冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
将得到的方格星虫体壁蛋白肽提取物进行粉碎,用60~80目的筛子进行过筛,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物粉,用双层PE包装加入干燥剂置于-20℃的冰箱内保存。
实施例5:
挑选新鲜、生命力旺盛的方格星虫,清洗后将其喂养于含盐量为30‰的淡盐水中,每隔1h换淡盐水喂养,待其吐尽泥沙。
将吐尽泥沙的方格星虫取出,用无菌水冲洗,用滤纸吸收方格星虫体表的水分,将方格星虫剪口,用钝头竹签或钢针将方格星虫由尾部至吻部方向捅翻过来,除去方格星虫的内脏至无残留,洗净,得到方格星虫体壁。
将清洗干净的方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将其放入均质机中均质成匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液。
将方格星虫体壁匀浆液进行超声破碎细胞处理,其中超声温度为20℃、超声时间为10min、超声频率为35kHz、超声波功率60W,得到超声波处理液。
利用由动物蛋白酶和风味蛋白酶组成的复合酶酶解超声波处理液得到酶解液。
将酶解液在沸水中灭酶10min,再在4℃、4000r/min的条件下离心15min得到上清酶解液,将上清酶解液放入-20℃的冰箱预冻,然后再进行真空冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
将得到的方格星虫体壁蛋白肽提取物进行粉碎,用60~80目的筛子进行过筛,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物粉,用双层PE包装加入干燥剂置于-20℃的冰箱保存。
分别取上述实施例1~5制备过程中的产物作为样品做如下检测:
1)水解度测定
甲醛滴定法:分别取实施例1~5中酶解得到且灭酶后的上清酶解液8.0ml,分别置于200ml的烧杯中,加入60ml的无CO2水,开动磁力搅拌器,加少量碱液调节PH为8.20,再加入10ml的中性甲醛溶液,得到待检测溶液,用0.5mol/L的NaOH溶液调节待检测溶液的PH值至9.20,记录消耗NaOH溶液的体积为V(ml)。同时分别取实施例1~5中相同处理、未酶解的蛋白质溶液(即超声波处理液)8.0ml,按上述方法作空白试验,记录消耗NaOH溶液的体积为V0(ml),则水解度DH的计算公式如下所示:
式中:C为NaOH溶液的浓度(mol/L);V为酶解液消耗NaOH溶液的体积(ml);V0为空白液消耗NaOH溶液的体积(ml);0.014为氮毫克当量;N为底物样品总氮含量(g),具体地,N=新鲜沙虫的总含氮百分比×最初称取的新鲜沙虫质量。
2)蛋白肽含量测定
Folin-酚试剂盒测定法:
试剂甲制备:将2g无水碳酸钠和20mg酒石酸钠溶于100ml 0.2mol/L的氢氧化钠溶液中,制得溶液I;将0.5g五水硫酸铜溶于100ml水中,制得溶液Ⅱ。将溶液Ⅰ和溶液Ⅱ按50:1的比例混合,制得试剂甲。
试剂乙制备:将钨酸钠、钼酸钠、磷酸、浓盐酸和硫酸锂(Li2SO4)按一定比例和浓度混合,制得试剂乙原液。试剂乙原液浓度为2mol/L使用前需稀释一倍,最后浓度为1mol/L。
标准曲线制作:按下表2顺序依次加入试剂,混匀,于室温中放置10min。再加入0.5毫升试剂乙,立即摇匀,在室温放置30min,然后于500nm处比色,测定光密度值。以蛋白质浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。
表2试剂添加顺序表
样品测定:分别取实施例1~5中1ml的样品上清酶解液加入5ml试剂甲混匀,于室温放置10min。再加入0.5ml试剂乙,立即摇匀,于室温中放置30min,然后在500nm处比色,以1ml水代替样品上清酶解液做空白对照,测定后,可以从标准曲线中查出样品中蛋白肽的浓度。
表3为采用实施例1~5制备过程中的产物作为样品进行水解度测定和蛋白肽含量测定的检测数据表。
表3检测数据表
由表3的检测数据可看出,采用本发明实施例提供的制备方法制备得方格星虫体壁蛋白肽提取物,水解度范围为13.83%~26.11%,蛋白肽含量为0.2899mg~0.4975mg,从而可表明采用本发明实施例提供的制备方法制备得方格星虫体壁蛋白肽提取物都具有较高的水解度和蛋白肽含量。
以上所述仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是在本发明的发明构思下,利用本发明说明书内容所作的等效结构变换,或直接/间接运用在其他相关的技术领域均包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (10)

1.一种方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
采用鲜活的方格星虫制备方格星虫体壁;
将所述方格星虫体壁粉碎、匀浆,得到方格星虫体壁匀浆液;
对所述方格星虫体壁匀浆液进行超声波破碎细胞处理,得到超声波处理液;
利用蛋白酶对所述超声波处理液进行酶解得到酶解液;
将所述酶解液依次进行灭酶、离心得到上清酶解液;
将所述上清酶解液冷冻干燥,得到方格星虫体壁蛋白肽提取物。
2.如权利要求1所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶为中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、由动物蛋白酶和风味蛋白酶组成的复合酶中的任意一种;且/或,
所述酶解的条件为:PH为7.0±1.0,温度为55℃±5℃,酶解时间为4h±1h,加酶量为0.5%±0.1%。
3.如权利要求1或2所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,所述超声波破碎细胞处理的实施条件包括:
超声温度为20℃±5℃,超声时间为10min±5min,超声频率为35kHz±0.5kHz,超声波功率为60W±20W。
4.如权利要求1或2所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,将所述酶解液进行灭酶的实施方式为:将装有所述酶解液的容器放在沸水中进行灭酶5min~20min;且/或,
将灭酶后的所述酶解液离心得到所述上清酶解液的实施方式为:将灭酶后的所述酶解液放在4℃±2℃、4000r/min±1000r/min条件下离心15min±5min得到所述上清酶解液;且/或,
将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽的实施方式为:
将所述上清酶解液放入-30℃~-10℃的环境中预冻,然后进行真空冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽提取物。
5.如权利要求1或2所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,方格星虫体壁的制备过程包括:
将鲜活的方格星虫进行清洗、吐沙处理;
去除所述方格星虫的体腔液和内脏,得到所述方格星虫体壁。
6.如权利要求5所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,
对清洗后的所述方格星虫进行吐沙处理的实施方式为:
将清洗后的方格星虫放入含盐量为5‰~50‰的盐水中进行喂养,每隔1h±0.5h换一次所述盐水喂养,直至所换喂养的盐水中不再有泥沙。
7.如权利要求1或2所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,所述方格星虫体壁匀浆液的制备过程包括:
将清洗干净的所述方格星虫体壁放入绞肉机中绞碎,再将绞碎后的所述方格星虫体壁放入均质机中均质得到所述方格星虫体壁匀浆液。
8.如权利要求1或2所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,
在将所述上清酶解液冷冻干燥得到所述方格星虫体壁蛋白肽后还包括如下步骤:将所述方格星虫体壁蛋白肽依次进行粉碎、过筛筛选。
9.如权利要求8所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法,其特征在于,将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽过筛筛选的实施方式为:
将粉碎后的所述方格星虫体壁蛋白肽提取物,用60~80目的筛子进行过筛筛选。
10.一种方格星虫体壁蛋白肽提取物,其特征在于,采用如权利要求1至9任一项所述的方格星虫体壁蛋白肽提取物的制备方法制成。
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