CN110123846A - 牛樟芝萃取物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及牛樟芝萃取物的用途。一种牛樟芝萃取物供应用于制备用来治疗蓝光诱导的视网膜发炎的医药品的用途，其中，所述牛樟芝萃取物是牛樟芝经水萃取的产物或牛樟芝经乙醇萃取的产物。
Description
技术领域
本发明涉及一种牛樟芝萃取物的用途，特别是涉及一种牛樟芝萃取物用来治疗蓝光诱导的视网膜发炎的用途。
背景技术
眼睛是感知光线的器官，而光线会聚焦于眼睛的视网膜上，以产生影像。医学研究显示，蓝光会对视网膜产生伤害而产生发炎现象，甚至会导致黄斑部病变。若长时间过量照射蓝光，容易导致视网膜细胞产生大量自由基，而使视网膜色素上皮细胞层的过氧化物质增加，因而对视网膜细胞造成氧化压力，并启动细胞凋亡机制，引起视网膜色素上皮细胞及感光细胞的凋亡。
因此，如何降低蓝光对视网膜的伤害是亟需解决的重要问题，尤其是对于现今大多仰赖许多具有发出蓝光的电子产品(包括平板显示器、电脑显示器，或手机等)的社会。
发明内容
本发明的目的在于提供一种牛樟芝萃取物供应用于制备用来治疗蓝光诱导的视网膜发炎的医药品的用途，其中，所述牛樟芝萃取物是牛樟芝经水萃取的产物或牛樟芝经乙醇萃取的产物。
以下将就本发明内容进行详细说明。
所述牛樟芝萃取物是牛樟芝经水萃取的产物或牛樟芝经乙醇萃取的产物。较佳地，所述牛樟芝萃取物是牛樟芝经乙醇萃取的产物。所述牛樟芝为牛樟芝子实体、牛樟芝菌丝体，或上述的组合。较佳地，所述牛樟芝为牛樟芝子实体。
较佳地，所述蓝光为波长在420nm至460nm的蓝光。
在本发明中，选用视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium cells)。所述视网膜色素上皮细胞例如人类视网膜色素上皮细胞ARPE-19。
依据本发明，所述医药品可进一步包含有被广泛地使用于药物制造技术的药学上可接受的载剂(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，所述药学上可接受的载剂可包含一或多种选自于下列的试剂：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegrating agent)、分散剂(dispersing agent)、粘结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、稳定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wetting agent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorption delaying agent)、脂质体(liposome)以及类似物。有关这些试剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。
依据本发明，所述医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成适合于局部地(topically)投药的剂型。
本发明的有益效果在于：利用牛樟芝萃取物，能够使因蓝光诱导产生的视网膜发炎得以被减缓。
具体实施方式
本发明将就下面的实施例来做进一步说明，但应了解的是，所述实施例仅供例示说明用，而不应被解释为本发明的实施上的限制。
制备例1
将购自神农真菌生技有限公司的牛樟芝子实体利用一台高速研磨机(厂牌：五加国际)进行5分钟的研磨处理，且研磨至形成目数(mesh number)为50的牛樟芝子实体粉末。
制备例2
人类视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞株[购自美国菌种保存中心(AmericanType Culture Collection)且目录编号为CRL-2302]与培养基质设置于直径为10公分的培养皿内，然后，将所述培养皿放置于37℃且含有5％的CO2的培养箱中进行一个月的培养处理，且每周继代一次，共继代两次，而获得继代的ARPE-19细胞，且细胞量为1×106个。所述培养基质包含DMEM/F12培养基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium:Nutrient mixtureF-12；厂牌：Invitrogen Ltd)及胎牛血清(fetal bovine serum，简称FBS)。所述DMEM/F12培养基包括D-葡萄糖、L-谷氨酰胺及丙酮酸钠，但不包括酚红。在所述DMEM/F12培养基中所述D-葡萄糖的浓度为3151mg/L、所述L-谷氨酰胺的浓度为2.5mM，且所述丙酮酸钠的浓度为0.5mM。在所述培养基质中所述胎牛血清的浓度为10vol％。
比较例1
于37℃且含有5％的CO2的培养箱中，将3×104个制备例2的继代的ARPE-19细胞以波长为420nm至460nm且照射强度为6.1W/m2的蓝光灯管照射4小时，然后，停止照射并静置20小时，接着，取出并进行离心处理，然后取出上清液并利用酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA)对所述上清液进行细胞激素白细胞介素-8(interleukin-8，简称IL-8)的测定。
比较例2
比较例2与比较例1不同在于：比较例2未以所述蓝光灯管照射。
实施例1
将100克的制备例1的牛樟芝子实体粉末与1000克的水混合并于100℃下回流1小时以进行第一次萃取处理。接着，进行第一次过滤处理，而获得第一水萃取液及第一滤饼，然后，将所述第一滤饼与1000克的水混合并于100℃下回流1小时以进行第二次萃取处理。接着，进行第二次过滤处理，而获得第二水萃取液及第二滤饼。将所述第一水萃取液与所述第二水萃取液合并，并置于80℃的烘箱中72小时以将水移除，形成牛樟芝经水萃取的产物。将0.1克的牛樟芝经水萃取的产物及1mL的水混合后，再加入9mL的DMEM(Dulbecco'sModified Eagle Medium)培养基，然后，进行过滤处理及灭菌处理，而形成10mg/mL的第一溶液。所述DMEM培养基含有胎牛血清，但未含有青霉素及链霉素。利用所述DMEM培养基将所述第一溶液稀释成一个混合液，且在所述混合液中所述牛樟芝经水萃取的产物的浓度为1mg/mL。于37℃且含有5％的CO2的培养箱中，放置一个96-孔培养盘(96-well plate)并于每一孔中放入3×104个制备例2的继代的ARPE-19细胞与0.2mL的所述混合液，且以波长为420nm至460nm且照射强度为6.1W/m2的蓝光灯管照射4小时，接着，停止照射并静置20小时，然后，取出并进行离心处理，接着，取出上清液并利用ELISA对所述溶液进行IL-8的测定。
实施例2至3
所述实施例2至3以与所述实施例1相同步骤进行，不同主要在于：混合液中牛樟芝经水萃取的产物的浓度不同，且依序为1.5mg/mL及2mg/mL。
实施例4
将100克的制备例1的牛樟芝子实体粉末与1000克的浓度为95vol％的乙醇水溶液混合并于60℃进行萃取处理。接着，进行过滤处理，而获得乙醇萃取液，然后，使用减压浓缩机(EYELA N-1200A)于40℃下将乙醇及水自所述乙醇萃取液中移除，形成牛樟芝经乙醇萃取的产物。将0.1克的牛樟芝经乙醇萃取的产物及1mL的乙醇混合后，再加入9mL的DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基，然后，进行过滤处理及灭菌处理，而形成10mg/mL的第二溶液。利用所述DMEM培养基将所述第二溶液稀释成一个混合液，且在所述混合液中所述牛樟芝经乙醇萃取的产物的浓度为0.5mg/mL。于37℃且含有5％的CO2的培养箱中，放置一个96-孔培养盘(96-well plate)并于每一孔中放入3×104个制备例2的继代的ARPE-19细胞与0.2mL的所述混合液，并以波长为420nm至460nm且照射强度为6.1W/m2的蓝光灯管照射4小时，接着，停止照射并静置20小时，然后，取出并进行离心处理，接着，取出上清液并利用ELISA对所述溶液进行IL-8的测定。
实施例5至6
所述实施例5至6是以与所述实施例4相同步骤进行，不同主要在于：混合液中牛樟芝经乙醇萃取的产物的浓度不同，且依序为0.75mg/mL及1mg/mL。
酶联免疫吸附分析法：(1)建立标准曲线，使用Human IL-8ELISA MAXTM Deluxe套组(厂牌：BioLegend)并配置IL-8的浓度分别为0pg/mL、1.5pg/mL、2.5pg/mL、5pg/mL、10pg/mL、20pg/mL、40pg/mL，及80pg/mL的标准溶液，接着，利用酶免疫分析仪器(厂牌：BioTek；型号：EL808)量测450nm的吸光值，然后，以浓度值为横轴，而吸光值为纵轴，绘制出标准曲线。(2)利用Human IL-8ELISA MAXTMDeluxe套组及所述酶免疫分析仪器，获得比较例1至2的上清液及实施例1至6的上清液在450nm的吸光值，接着，利用上述标准曲线，计算出在比较例1至2的上清液及实施例1至6的上清液中IL-8的浓度。
表1
在表1中，由比较例2的实验数据可知，在未照射蓝光的条件下，IL-8的含量为138.2±6.9，而由比较例1的实验数据可知，照射蓝光后，IL-8的含量增加至345.1±7.5，由上述可知，蓝光的存在会使得ARPE-19细胞株分泌出更多的IL-8。再者，由实施例1至6的实验数据可知，在蓝光的照射后，所述牛樟芝经水萃取的产物及牛樟芝经乙醇萃取的产物的存在会使得IL-8减少。
综上所述，本发明牛樟芝经水萃取的产物及牛樟芝经乙醇萃取的产物确实能够用来治疗蓝光诱导的视网膜发炎，故确实能达成本发明的目的。
Claims (6)
1.一种牛樟芝萃取物供应用于制备用来治疗蓝光诱导的视网膜发炎的医药品的用途，其中，所述牛樟芝萃取物是牛樟芝经水萃取的产物或牛樟芝经乙醇萃取的产物。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述蓝光为波长在420nm至460nm的蓝光。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述牛樟芝为牛樟芝子实体。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药品进一步包含有药学上可接受的载剂。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述药学上可接受的载剂包含一或多种选自于由下列所构成的群组中的试剂：溶剂、缓冲液、乳化剂、悬浮剂、分解剂、崩解剂、分散剂、粘结剂、赋形剂、稳定剂、螯合剂、稀释剂、胶凝剂、防腐剂、润湿剂、润滑剂、吸收延迟剂以及脂质体。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药品是呈供局部投药的剂型。
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| CN107573432A (zh) * | 2017-08-08 | 2018-01-12 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种具有抗炎效果的牛樟芝寡糖及其制备方法和用途 |
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2018
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- 2018-03-09 CN CN201810196452.XA patent/CN110123846A/zh active Pending
Patent Citations (4)
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|---|---|---|---|---|
| TW201018462A (en) * | 2004-02-27 | 2010-05-16 | Simpson Biotech Co Ltd | Novel mixture and compounds from mycelia of antrodia camphorata having hepatoprotection, anti-inflammatory and anti-tumor activities |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 陈松等: "蓝光诱导人视网膜色素上皮细胞复制衰老状态下IL-8 和MCP-l mRNA 的表达", 《第一届中国眼科学基础研究大会暨研究生导师论坛论文集》 * |
Also Published As
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