CN110122382A - 一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法，属于鲶鱼繁育技术领域，本发明给斑点胡鲶施用催产药物，首次施用5.5～6.5h后，再次给施用催产药物，施用7.5～8.5h后，进行人工授精，实现斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育；所述催产药物包括鱼脑垂体、促黄体素释放素和地欧酮中的一种或几种；所述斑点胡鲶为母本，所述尖齿胡鲶为父本。本发明将斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交繁育后，平均受精率为77.07％或80.57％，平均孵化率为32.48％或31％，平均出苗量为24960尾或24096尾。

Description

一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法

技术领域

本发明属于鲶鱼繁育技术领域，尤其涉及一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法。

背景技术

杂交育种是一种经典的育种方法。不同类型的亲本进行杂交，可以将双亲控制不同性状的优良基因结合于一体，或将双亲中控制同一性状的不同微效基因积累起来，产生在该性状上超过亲本的类型。在渔业上，杂种优势的利用已成为提高渔业产量的重要途径。

斑点胡鲶Clarias macrocephalus主要分布在泰国至越南，是泰国极为名贵的鱼类，它具有体色鲜艳、肉质细嫩、味道鲜美的特点，1982年7月由中国水产科学院珠江水产研究所从泰国引进该种鱼，人工繁殖及养殖技术都获得了成功，现已在我国南方推广养殖。尖齿胡鲶Clariasgariepinus，原产于非洲，属热带鱼类，1981年引进中国，现已在我国推广养殖，取得了很好的经济效益。目前尚未见有关斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交繁育方面的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法，给斑点胡鲶施用催产药物，首次施用5.5～6.5h后，再次施用催产药物，施用7.5～8.5h后，进行人工授精，实现斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育；

所述催产药物包括鱼脑垂体、促黄体素释放素和地欧酮中的一种或几种；

所述斑点胡鲶为母本，所述尖齿胡鲶为父本。

优选的，当所述催产药物为鱼脑垂体时，所述鱼脑垂体为取自达性成熟年龄的露斯塔野鲮的脑垂体。

优选的，所述首次施用鱼脑垂体的方式包括：以所述母本的体重计，将体重是0.3倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本。

优选的，所述再次施用鱼脑垂体的方式包括：以所述母本的体重计，将体重是0.7倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本。

优选的，当所述催产药物为促黄体素释放素和地欧酮时，首次施用时，所述促黄体素释放素的施用量以母本的体重计，为1.5～2.5μg/kg；所述地欧酮的施用量以母本的体重计，为4～6mg/kg。

优选的，当所述催产药物为促黄体素释放素和地欧酮时，再次施用时，所述促黄体素释放素的施用量以母本的体重计，为3～5μg/kg；所述地欧酮的施用量以母本的体重计，为4～6mg/kg。

优选的，在人工授精时，所述母本与父本的数量比为3:1。

优选的，所述斑点胡鲶的生殖腺指数在10％以上。

优选的，所述斑点胡鲶的体重为300～500g。

优选的，所述尖齿胡鲶已达性成熟年龄，体重为1400～1600g。

本发明实施例的结果显示：斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交繁育后，平均受精率为77.07％或80.57％，平均孵化率为32.48％或31％，平均出苗量为24960尾或24096尾。

具体实施方式

本发明提供了一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法，给斑点胡鲶施用催产药物，首次施用5.5～6.5h后，再次施用催产药物，施用7.5～8.5h后，进行人工授精，实现斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育；所述催产药物包括鱼脑垂体、促黄体素释放素和地欧酮中的一种或几种；所述斑点胡鲶为母本，所述尖齿胡鲶为父本。

在本发明中，所述斑点胡鲶为母本，所述斑点胡鲶的选择标准优选包括：斑点胡鲶腹部膨大柔软，生殖孔微红，体重在300～500g之间。在本发明中，所述斑点胡鲶的生殖腺指数优选在10％以上，具体的优选为12.65％、13.14％或16.70％。本发明选择指数在10％以上性腺发育的雌鱼表示雌鱼发育达到了一定的成熟度并且发育基本同步。

在本发明中，所述生殖腺指数(％)＝性腺重/鱼体重×100。

在本发明中，所述斑点胡鲶的绝对繁殖力优选为234048～362443粒，更优选为298935粒；所述斑点胡鲶的相对繁殖力优选为686962～1190561粒/kg，更优选为862304粒/kg。在本发明中，所述绝对繁殖力(粒)＝雌性亲鱼的实际怀卵量；所述相对繁殖力(粒/kg)＝绝对繁殖力/雌性亲鱼体重。

在本发明中，所述尖齿胡鲶为父本，所述尖齿胡鲶的选择标准优选包括：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红，达性成熟年龄，体重优选为1400～1600g，更优选为1500g。

在本发明中，在人工授精时，所述母本与父本的数量比优选为3:1。在本发明中，所述人工授精优选为干法人工授精，本发明对所述干法人工授精的条件无特殊限定，采用常规即可，在本发明实施例中，所述干法人工授精优选包括：将雌鱼腹部和盆擦干，用手柔和地挤压雌鱼腹部，把鱼卵挤于盆中；同时将雄鱼剖腹取精巢，剪碎，用0.9％氯化钠溶液洗出精液；将精液倒于鱼卵上，用羽毛轻轻搅拌，使卵授精。

本发明给斑点胡鲶施用催产药物，首次施用5.5～6.5h后，再次施用催产药物，施用7.5～8.5h后，进行人工授精。

本发明优选首次使用催产药物6h后再次给斑点胡鲶施用催产药物。

本发明优选再次给斑点胡鲶施用催产药物，施用8h后，进行人工授精。

在本发明中，所述催产药物包括鱼脑垂体、促黄体素释放素和地欧酮中的一种或几种。

在本发明中，当所述催产药物优选为鱼脑垂体时，所述首次施用鱼脑垂体的方式优选包括：以所述母本的体重计，将体重是0.3倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本；所述再次施用鱼脑垂体的方式优选包括：以所述母本的体重计，将体重是0.7倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本。在本发明中，将摘取的脑垂体除去血污和脂肪等组织，放入体积为脑垂体20倍的无水酒精中脱脂、脱水，浸泡8小时后换一次无水酒精，连续处理2次。将垂体取出，放在干净的白纸上晾干，放入研钵加一定量0.9％的氯化钠溶液，在研钵中研磨成悬浮液，使每毫升注射液中含有体重为1kg露斯塔野鲮的脑垂体剂量，本发明优选将注射液注射于母本。

在本发明中，所述鱼脑垂体优选为到达性成熟年龄的露斯塔野鲮的脑垂体。本发明的亲本隶属鲤形目胡鲇科胡鲇属，鱼脑垂体取自露斯塔野鲮隶属鲤形目鲤科野鲮属。本发明采用亲缘关系相对较远的露斯塔野鲮的脑垂体也能取得较好的催产效果。

在本发明中，当所述催产药物优选为促黄体素释放素和地欧酮时，首次施用时，所述促黄体素释放素的施用量以每千克母本的体重计，优选为1.5～2.5μg，更优选为2μg；所述地欧酮的施用量以每千克母本的体重计，优选为4～6mg，更优选为5mg。

在本发明中，再次施用促黄体素释放素和地欧酮时，每千克母本施用的促黄体素释放素的量优选为3～5μg，更优选为4μg；每千克母本施用的地欧酮的量优选为4～6mg，更优选为5mg。

本发明优选取适量的促黄体素释放素，加入一定量0.9％氯化钠溶液，使每毫升注射液中含有1μg的促黄体素释放素，将得到的促黄体素释放素溶液施用于鱼。本发明优选取适量的地欧酮，加入一定量0.9％氯化钠溶液，使每毫升注射液中含有1mg的地欧酮，将得到的地欧酮溶液施用于鱼。

本发明对所述催产药物的施用方法没有特殊限定，采用本领域常规施用的方法即可，如通过注射施用。

本发明在斑点胡鲶和尖齿胡鲶人工授精后，优选将得到的受精卵进行孵化。

在本发明中，当所述催产药物为鱼脑垂体时，所述受精卵孵化时，水的温度优选为26.4～27.2℃，更优选为26.6℃；所述水的硬度优选为160.5～183mg/L，更优选为174mg/L；所述水的碱度优选为290～369.5mg/L，更优选为326.5mg/L；所述水的溶氧量优选为8.78～9.15mg/L，更优选为9.12mg/L；所述水的pH值优选为8.15～8.24。

在本发明中，当所述催产药物为促黄体素释放素和地欧酮时，所述受精卵孵化时，水的温度优选为26.6～27.6℃，更优选为26.7℃；所述水的硬度优选为156.5～183.5mg/L，更优选为174mg/L；所述水的碱度优选为331～385mg/L，更优选为368.5mg/L；所述水的溶氧量优选为8.64～9.35mg/L，更优选为9.3mg/L；所述水的pH值优选为8.17～8.39，更优选为8.29。

下面结合实施例对本发明提供的一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1～6中的斑点胡鲶的性腺重在42.40～51.63g之间，生殖腺指数在12.65～16.70％之间，0.1g卵的含卵量在552～702粒之间，绝对繁殖力在234048～362443粒之间，相对繁殖力在686962～1190561粒/kg之间。

实施例1

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软，生殖孔微红，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为345g、360g和375g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾尖齿胡鲶体重为1400g。

取一尾体重为1080g露斯塔野鲮的脑垂体，用0.9％氯化钠溶液制成1.08ml脑垂体溶液。

对体重分别为345g、360g和375g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.1035ml、0.108ml和0.1125ml露斯塔野鲮脑垂体溶液，首次注射6h后再次依次分别注射0.2415ml、0.252ml和0.2625ml露斯塔野鲮的脑垂体溶液，注射8h后，进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为26.6℃，水的硬度为160.5mg/L，水的碱度为369.5mg/L，水的溶氧量为9.15mg/L，水的pH值为8.24。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为75、68、72、75和73，平均受精率为72.6％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为27、29、31、32和27，平均孵化率为29.2％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为26879尾。

实施例2

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软，生殖孔微红，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为360g、355g和365g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾尖齿胡鲶体重为1500g。

取一尾体重为1080g露斯塔野鲮的脑垂体，用0.9％氯化钠溶液制成1.08ml脑垂体溶液。

对体重分别为360g、355g和365g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.108ml、0.1065ml和0.1095ml露斯塔野鲮的脑垂体溶液，首次注射6h后再次依次分别0.252ml、0.2485ml和0.2555ml露斯塔野鲮的脑垂体溶液，注射8h后，进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为26.4℃，水的硬度为174mg/L，水的碱度为290.4mg/L，水的溶氧量为8.78mg/L，水的pH值为8.24。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为71、82、85、76和80，平均受精率为78.8％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为36、39、35、37和38，平均孵化率为37.0％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为22618尾。

实施例3

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软生殖孔微红，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为370g、380g和360g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾尖齿胡鲶体重为1600g。

取一尾体重为1110g露斯塔野鲮的脑垂体，用0.9％氯化钠溶液制成1.11ml脑垂体溶液。

对体重分别为370g、380g和360g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.111ml、0.114ml和0.108ml露斯塔野鲮的脑垂体溶液，首次注射6h后再次依次分别注射0.259ml、0.266ml和0.252ml露斯塔野鲮的脑垂体溶液，注射8h后，与尖齿胡鲶进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为27.2℃，水的硬度为183mg/L，水的碱度为326.5mg/L，水的溶氧量为9.12mg/L，水的pH值为8.15。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为76、80、84、77和82，平均受精率为79.8％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为32，32，31，32，29，平均孵化率为31.2％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为25383尾。

实施例4

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软生殖孔微红，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为365g、365g和380g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾的尖齿胡鲶体重为1400g。

对体重分别为365g、365g和380g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.73ml、0.73ml和0.76ml促黄体素释放素溶液(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.825ml、1.825ml和1.9ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，首次注射6h后再次依次分别注射1.46ml、1.46ml和1.52ml促黄体素释放素溶液(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.825ml、1.825ml和1.9ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，注射8h后，进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为26.7℃，水的硬度为156.5mg/L，水的碱度为368.5mg/L，水的溶氧量为9.35mg/L，水的pH值为8.29。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为62、62、70、73和62，平均受精率为65.8％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为32、31、33、31和29，平均孵化率为32.2％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为23693尾。

实施例5

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软生殖孔红肿，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为340g、370g和400g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾尖齿胡鲶体重为1500g。

对体重分别为340g、370g和400g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.68ml、0.74ml和0.8ml促黄体素释放素溶液(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.7ml、1.85ml和2ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，首次注射6h后再次依次分别注射1.36ml、1.48ml和1.6ml促黄体素释放素溶液(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.7ml、1.85ml和2ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，注射8h后，进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为26.6℃，水的硬度为174mg/L，水的碱度为385mg/L，水的溶氧量为9.3mg/L，水的pH值为8.39。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为96、94、92、98和98，平均受精率为95.6％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为30，27，32，31，30，平均孵化率为30.0％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为24458尾。

实施例6

以斑点胡鲶为母本，选择标准为：斑点胡鲶腹部膨大柔软生殖孔红肿，用于干法人工授精的三尾斑点胡鲶的体重分别为330g、360g和400g。

以尖齿胡鲶为父本，选择标准为：雄鱼外形健壮丰满、富有光泽、生殖突微红、达性成熟年龄。用于干法人工授精的一尾尖齿胡鲶体重为1600g。

对体重分别为330g、360g和400g的斑点胡鲶首次依次分别注射0.66ml、0.72ml和0.8ml促黄体素释放素溶液(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.65ml、1.8ml和2ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，首次注射6h后再次依次分别注射促黄体素释放素溶液1.32ml、1.44ml和1.6ml(浓度为1μg/ml)，依次分别注射1.65ml、1.8ml和2ml地欧酮溶液(浓度为1mg/ml)，注射8h后，进行干法人工授精，对受精卵进行孵化。

孵化条件为：水的温度为27.6℃，水的硬度为183.5mg/L，水的碱度为331mg/L，水的溶氧量为8.64mg/L，水的pH值为8.17。

授精8h后，随机取样受精卵测定受精率，5个重复，每个重复随机取样检查100粒卵，好卵(卵球内有正常胚胎)数分别为80、78、83、82和78，平均受精率为80.2％。

24h后测定孵化率，随机取受精卵100粒，统计出膜鱼苗数，共5个重复，出膜鱼苗数分别为31、32、30、29和32，平均孵化率为30.8％。

72h后，采用打样法计算出苗量，出苗量为24137尾。

实施例7

解剖镜(10*)下观察实施例1～6的斑点胡鲶和尖齿胡鲶人工授精得到的受精卵的胚胎发育情况，结果见表1。

表1杂交鲶受精卵的胚胎发育时序

从表1中可以得出，斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交得到的受精卵的胚胎发育有17个阶段。

由以上实施例可以得出，当采用鱼脑垂体为催产药物时，斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交繁育后，平均受精率为77.07％，平均孵化率为32.48％，平均出苗量为24960尾。当采用促黄体素释放素和地欧酮为催产药物时，斑点胡鲶和尖齿胡鲶杂交繁育后，平均受精率为80.57％，平均孵化率为31％，平均出苗量为24096尾。斑点胡鲶和尖齿胡鲶的受精卵到孵化期，在水温26～27℃时需要26h22min，先后为卵裂阶段、桑椹期、胚囊期、原肠期、神经胚期、肌节出现期和孵化早期。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育方法，其特征在于，给斑点胡鲶施用催产药物，首次施用5.5～6.5h后，再次施用催产药物，施用7.5～8.5h后，进行人工授精，实现斑点胡鲶和尖齿胡鲶的杂交繁育；

所述催产药物包括鱼脑垂体、促黄体素释放素和地欧酮中的一种或几种；

所述斑点胡鲶为母本，所述尖齿胡鲶为父本。

2.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，当所述催产药物为鱼脑垂体时，所述鱼脑垂体为取自达性成熟年龄的露斯塔野鲮的脑垂体。

3.根据权利要求1或2所述的杂交繁育方法，其特征在于，所述首次施用鱼脑垂体的方式包括：以所述母本的体重计，将体重是0.3倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本。

4.根据权利要求1或2所述的杂交育种方法，其特征在于，所述再次施用鱼脑垂体的方式包括：以所述母本的体重计，将体重是0.7倍母本的露斯塔野鲮所含脑垂体剂量施用于母本。

5.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，当所述催产药物为促黄体素释放素和地欧酮时，首次施用时，所述促黄体素释放素的施用量以母本的体重计，为1.5～2.5μg/kg；所述地欧酮的施用量以母本的体重计，为4～6mg/kg。

6.根据权利要求1或5所述的杂交繁育方法，其特征在于，当所述催产药物为促黄体素释放素和地欧酮时，再次施用时，所述促黄体素释放素的施用量以母本的体重计，为3～5μg/kg；所述地欧酮的施用量以母本的体重计，为4～6mg/kg。

7.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，在人工授精时，所述母本与父本的数量比为3:1。

8.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，所述斑点胡鲶的生殖腺指数在10％以上。

9.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，所述斑点胡鲶的体重为300～500g。

10.根据权利要求1所述的杂交繁育方法，其特征在于，所述尖齿胡鲶已达性成熟年龄体重为1400～1600g。