CN110075569B - 糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及有机物分析领域，具体涉及一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，所述再生方法具体包括如下步骤：(1)倒转色谱柱，用水反冲色谱柱；(2)用蛋白酶试剂溶液反冲色谱柱；(3)用表面活性剂溶液反冲色谱柱；(4)用离子基团复活剂溶液反冲色谱柱；(5)用水反冲色谱柱；(6)正置色谱柱，用全血灌注液灌注色谱柱。本发明的再生方法具有针对性强、再生效果好的优点，增加了色谱柱的使用时间和使用次数。

Description

糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法
技术领域
本发明涉及有机物分析领域，具体涉及一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法。
背景技术
高效液相色谱(HPLC)仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
在临床检测中，经常采用糖化血红蛋白分析仪来检测患者的糖化血红蛋白的含量，具体原理就是通过高效液相色谱法中的阳离子交换填料柱来检测静脉血中的糖化血红蛋白含量，从而诊断患者最近3个月内的血糖平均水平，但血液成分较为复杂，个体差异较大，通常血液样品中含有一些对糖化血红蛋白分析具有干扰的物质，例如：盐类、脂质、含脂物质、腐质酸、疏水蛋白质等，这些物质可能与HPLC色谱柱发生相互结合作用。这些物质有比分析的目标物或小或大的保留值，保留值较小的物质如盐类一般来说在空体积时就被冲出色谱柱，这些非目标产物的干扰能被检测器检测到而且能形成色谱峰，气泡，基线上移或者是负峰；有些中等保留值的物质能被缓慢洗出而且表现为宽峰，基线扰动，或者基线漂移；如果血液样品中的一些成分在柱子中有很强的保留而且流动相溶液成分不足以把这些物质洗脱下来，糖化血红蛋白检测是多次上样分析，这些吸附在柱子表面的物质通常就会积累在柱头，这些异常的残留通常只有通过平行实验才能发现。这些被吸附的样品成分累积到一定程度足以使他们开始形成新的固定相。分析物能与这些杂质作用形成一定的分离机制，从而导致保留时间波动，出现拖尾现象。血液中与HPLC色谱柱亲和的物质，经过长时间的积累，柱子的反压能超过泵所能承受的最大压力，使柱子无法工作以及在堵塞处产生空体积。
中国专利申请CN201610365135.7公开了一种高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法，包括以下步骤：(1)倒转阴离子交换填料柱，用40-44倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在4-6L/min；(2)用32-38倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在5-8L/min；(3)用28-30倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在6-9L/min；(4)、用20-28倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在7-10L/min。此方法主要是针对阴离子交换填料柱的再生方法。
徐其进等人在“蛋白质分离与纯化过程中高效离子交换色谱柱的再生[J].分析化学,2000,1(1):46-49.”中公开了使用2％的胰蛋白酶和磷酸盐混合溶液在37℃下处理离子交换色谱柱，柱压显著降低，柱效提高4-13倍，交换容量也得到恢复，但是还有进一步提升的空间。
目前没有有效的针对糖化血红蛋白分析仪(高效液相色谱法)中的阳离子交换填料柱的再生方法，因此，开发一种能解决上述技术问题的糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法是非常必要的。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种针对性强、再生效果好的糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法。
本发明是通过以下技术方案予以实现的：
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用水反冲色谱柱；
(2)用蛋白酶试剂溶液反冲色谱柱；
(3)用表面活性剂溶液反冲色谱柱；
(4)用离子基团复活剂溶液反冲色谱柱；
(5)用水反冲色谱柱；
(6)正置色谱柱，用全血灌注液灌注色谱柱。
优选地，所述方法包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用50-100倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.5-3.0ml/min；
(2)用40-50倍体积的蛋白酶试剂溶液反冲色谱柱，流速控制在0.2-1.5ml/min；
(3)用40-60倍体积的表面活性剂溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5-2.5ml/min；
(4)用40-50倍体积的离子基团复活剂溶液反冲色谱柱，流速控制在1.0-1.5ml/min；
(5)用20-30倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.0-1.5ml/min；
(6)正置色谱柱，用10-20倍体积的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在0.2-3ml/min。
优选地，步骤(1)和步骤(5)中所述水为HPLC级水、超纯水、去离子水、蒸馏水中的一种或多种。
更优选地，步骤(1)和步骤(5)中所述水为HPLC级水或超纯水。
优选地，步骤(2)中所述蛋白酶试剂为胰蛋白酶、糜蛋白酶、I型胶原酶、III型胶原酶、VI型胶原酶、纤维蛋白酶、木瓜蛋白酶、角蛋白酶、DNA酶、胃蛋白酶中的一种或多种。
更优选地，步骤(2)中所述蛋白酶试剂为胰蛋白酶、I型胶原酶、纤维蛋白酶、DNA酶、胃蛋白酶中的一种或多种。
优选地，步骤(3)中所述表面活性剂为EDTA-2Na、SDS、Tween20、Triton100中的一种或多种。
优选地，步骤(4)中所述离子基团复活剂为氢氧化钠、氢氧化钾、高氯酸钠、高氯酸钾、磷酸二氢钠、TRIS、Bis-tris中的一种或多种。
更优选地，步骤(4)中所述离子基团复活剂为氢氧化钠或氢氧化钾。
优选地，步骤(2)中所述蛋白酶试剂溶液是水和蛋白酶试剂配制成的质量分数为0.5-4％的溶液。
优选地，步骤(3)中所述表面活性剂溶液是水和表面活性剂配制成的质量分数为0.1-2％的溶液。
优选地，步骤(4)中所述离子基团复活剂溶液是水和离子基团复活剂配制成的0.1-5mol/L的溶液。
优选地，步骤(6)中所述全血灌注液是由全血灌注液干粉和水配制成的0.5-2g/mL的溶液。
更优选地，步骤(6)中所述水为HPLC级水、超纯水、去离子水、蒸馏水中的一种或多种。
更优选地，步骤(6)中所述水为HPLC级水或超纯水。
本发明的有益效果是：
血液中与HPLC色谱柱亲和的物质，经过长时间的积累，柱子的反压能超过泵所能承受的最大压力，使柱子无法工作以及在堵塞处产生空体积，本发明针对糖化血红蛋白分析仪提出的色谱柱再生方法，将色谱柱倒转，利用水、蛋白酶试剂、表面活性剂、离子基团复活剂、水依次对其进行反冲，蛋白酶试剂溶解色谱柱表面结合的物质，表面活性剂冲洗经由蛋白酶溶解后从色谱柱脱落的干扰物质，离子基团复活剂复活色谱柱的离子基团，水可以平衡离子基团，由此反冲顺序得到的再生色谱柱的效果较好，再利用全血灌注液进行灌注，活化色谱柱，解决了目前没有有效的针对糖化血红蛋白分析仪(高效液相色谱法)中的阳离子交换填料柱的再生方法，针对性较强。
本发明还确定了蛋白酶试剂、表面活性剂、离子基团复活剂分别配制的溶液的浓度、体积和流速，在特定的浓度、流速和体积下，可以进一步提高糖化血红蛋白分析仪(高效液相色谱法)阳离子交换填料柱的准确度、精密度和检测峰形，增加色谱柱的使用时间和使用次数。
附图说明
图1为实施例1所用待再生修复的色谱柱的峰形图。
图2为原装柱的峰形图。
图3为实施例1再生后的色谱柱的峰形图。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
本发明采用的糖化血红蛋白分析仪的机器型号为Arkray 8180，原装柱的峰形图如图2所示。色谱柱经临床实验室检测使用后发现柱压升高报警，峰形改变，出峰时间改变，已经不能满足临床检验的需求，选择柱压、峰形、出峰时间相似的色谱柱作为待再生修复的色谱柱。
实施例1
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱，峰形图如图1所示，其再生方法，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用50倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(2)用40倍体积的质量分数为0.5％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在0.2ml/min；
(3)用40倍体积的质量分数为0.1％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(4)用40倍体积的0.1mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.0ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.0ml/min；
(6)正置色谱柱，用10倍体积的0.5g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在0.2ml/min。
再生后的色谱柱的峰形图如图3所示。
实施例2
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用100倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在3.0ml/min；
(2)用50倍体积的质量分数为4％的纤维蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(3)用60倍体积的质量分数为2％的SDS溶液反冲色谱柱，流速控制在2.5ml/min；
(4)用50倍体积的5mol/L的氢氧化钾溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用30倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的2g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在3ml/min。
实施例3
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用75倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2.5ml/min；
(2)用45倍体积的质量分数为2％的DNA酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用50倍体积的质量分数为1％的Tween20溶液反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(4)用45倍体积的2.5mol/L的高氯酸钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.2ml/min；
(5)用25倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.2ml/min；
(6)正置色谱柱，用15倍体积的1.2g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在1.5ml/min。
实施例4
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。对比例1
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于反冲顺序不同，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(4)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。
对比例2
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于不用全血灌注液灌注色谱柱，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min。
对比例3
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于胰蛋白酶溶液的质量分数为5％，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为5％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。
对比例4
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于胰蛋白酶溶液的流速为2ml/min，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。
对比例5
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于EDTA-2Na溶液的流速为3ml/min，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在3ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。
对比例6
一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，和实施例4的区别仅在于氢氧化钠溶液的流速为2ml/min，其余条件均相同，具体如下：
(1)倒转色谱柱，用60倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(2)用46倍体积的质量分数为1％的胰蛋白酶溶液反冲色谱柱，流速控制在1ml/min；
(3)用45倍体积的质量分数为1.2％的EDTA-2Na溶液反冲色谱柱，流速控制在1.8ml/min；
(4)用42倍体积的2mol/L的氢氧化钠溶液反冲色谱柱，流速控制在2ml/min；
(5)用20倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.1ml/min；
(6)正置色谱柱，用20倍体积的1g/ml的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在2ml/min。
测试例1
测定再生柱的准确度，将实施例1-4和对比例1-6的再生柱，以及Akaray 8180型糖化血红蛋白分析仪的原装柱对同一血液样品进行检测，检测方法相同，重复检测十次，计算检测结果的均值、相对偏差、变异系数CV，相对偏差计算结果如表1所示，CV计算结果如表2所示。
表1再生柱的准确度测试
Figure BDA0002051552370000071
Figure BDA0002051552370000081
表2再生柱的精密度测试
CV/％
原装柱 0.63
实施例1 0.68
实施例2 0.67
实施例3 0.65
实施例4 0.64
对比例1 3.93
对比例2 3.57
对比例3 2.68
对比例4 2.54
对比例5 2.37
对比例6 2.72
由表1可知，实施例1-4的再生柱的相对偏差均小于2％，对比例1-6的再生柱的相对偏差均大于3％，而且实施例1-4的再生柱的相对偏差与原装柱十分接近，所以实施例1-4的再生柱检测结果比较稳定，准确度较高。
由表2可知，实施例1-4的再生柱的CV值均小于1％，对比例1-6的再生柱的CV值均大于2％，而且实施例1-4的再生柱的CV值与原装柱十分接近，所以实施例1-4的再生柱精密度较高。
本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述技术手段所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。以上所述是本发明的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种糖化血红蛋白分析仪高效液相色谱柱的再生方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)倒转色谱柱，用50-100倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.5-3.0ml/min；
(2)用40-50倍体积的蛋白酶试剂溶液反冲色谱柱，流速控制在0.2-1.5ml/min；
(3)用40-60倍体积的表面活性剂溶液反冲色谱柱，流速控制在1.5-2.5ml/min；
(4)用40-50倍体积的离子基团复活剂溶液反冲色谱柱，流速控制在1.0-1.5ml/min；
(5)用20-30倍体积的水反冲色谱柱，流速控制在1.0-1.5ml/min；
(6)正置色谱柱，用10-20倍体积的全血灌注液灌注色谱柱，流速控制在0.2-3ml/min。
2.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(5)中所述水为HPLC级水、超纯水、去离子水、蒸馏水中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(2)中所述蛋白酶试剂为胰蛋白酶、糜蛋白酶、I型胶原酶、III型胶原酶、VI型胶原酶、纤维蛋白酶、木瓜蛋白酶、角蛋白酶、DNA酶、胃蛋白酶中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(3)中所述表面活性剂为EDTA-2Na、SDS、Tween20、Triton100中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(4)中所述离子基团复活剂为氢氧化钠、氢氧化钾、高氯酸钠、高氯酸钾、磷酸二氢钠、TRIS、Bis-tris中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(2)中所述蛋白酶试剂溶液是水和蛋白酶试剂配制成的质量分数为0.5-4％的溶液；步骤(3)中所述表面活性剂溶液是水和表面活性剂配制成的质量分数为0.1-2％的溶液。
7.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(4)中所述离子基团复活剂溶液是水和离子基团复活剂配制成的0.1-5mol/L的溶液。
8.根据权利要求1所述的再生方法，其特征在于，步骤(6)中所述全血灌注液是由全血灌注液干粉和水配制成的0.5-2g/mL的溶液。
9.根据权利要求8所述的再生方法，其特征在于，所述水为HPLC级水、超纯水、去离子水、蒸馏水中的一种或多种。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN113842673B (zh) * 2021-09-07 2023-01-06 济宁海关综合技术服务中心 液相色谱柱再生方法
CN114712894B (zh) * 2022-04-08 2024-04-30 无锡博慧斯生物医药科技有限公司 一种糖化血红蛋白层析柱的活化液、活化方法和应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0292443A1 (en) * 1987-05-18 1988-11-23 A. Menarini S.a.S. A solution for controlling the performance of the ionic exchange chromatography column of HPLC (high performance liquid chromatography) apparatuses, and a process for preparing the same
JPH08233824A (ja) * 1994-12-19 1996-09-13 Bio Rad Lab Inc カラム再生をしないクロマトグラフィによる糖化ヘモグロビンの連続測定法
CN104865326A (zh) * 2015-05-28 2015-08-26 江苏奥迪康医学科技有限公司 糖化血红蛋白分析仪三梯度洗脱分析法
CN105424839A (zh) * 2015-12-15 2016-03-23 袁泳 高效液相色谱仪中反相填料柱的再生方法
CN105561631A (zh) * 2015-12-15 2016-05-11 袁泳 高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法
CN105848746A (zh) * 2013-09-05 2016-08-10 豪夫迈·罗氏有限公司 用于层析重复利用的方法
CN105944772A (zh) * 2016-05-30 2016-09-21 铜陵东晟生态农业科技有限公司 高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0292443A1 (en) * 1987-05-18 1988-11-23 A. Menarini S.a.S. A solution for controlling the performance of the ionic exchange chromatography column of HPLC (high performance liquid chromatography) apparatuses, and a process for preparing the same
JPH08233824A (ja) * 1994-12-19 1996-09-13 Bio Rad Lab Inc カラム再生をしないクロマトグラフィによる糖化ヘモグロビンの連続測定法
CN105848746A (zh) * 2013-09-05 2016-08-10 豪夫迈·罗氏有限公司 用于层析重复利用的方法
CN104865326A (zh) * 2015-05-28 2015-08-26 江苏奥迪康医学科技有限公司 糖化血红蛋白分析仪三梯度洗脱分析法
CN105424839A (zh) * 2015-12-15 2016-03-23 袁泳 高效液相色谱仪中反相填料柱的再生方法
CN105561631A (zh) * 2015-12-15 2016-05-11 袁泳 高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法
CN105944772A (zh) * 2016-05-30 2016-09-21 铜陵东晟生态农业科技有限公司 高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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"高效液相色谱柱清洗与再生方法";刘翻;《分析测试技术与仪器》;20100630;第16卷(第2期);71-77 *

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