CN105944772A - 高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法，它包括以下步骤：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用40‑44倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在4‑6L/min；（2）、用32‑38倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在5‑8L/min；（3）、用28‑30倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在6‑9 L/min；（4）、用20‑28倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在7‑10 L/min。本发明的有益效果是再生效果好，阴离子交换填料柱中水分含量少。

Description

高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法
技术领域
本发明涉及有机物分析领域，尤其涉及高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法。
背景技术
高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
通常，样品中含有一些对分析者来说不感兴趣的东西。盐、脂质、含脂物质、腐质酸、疏水蛋白质和其它一些生物物质是一些可能在使用时与HPLC柱发生相互作用的物质。这些物质有比分析者的目标物或少或大的保留值。那些保留值较小的物质如盐类一般来说在空体积时就被冲出色谱柱。这些非目标产物的干扰能被检测器检测到而且能形成色谱峰，气泡，基线上移或者是负峰。如果样品成分在柱子中有很强的保留而且流动相溶液成分不足以把这些物质洗脱下来，多次上样后，这些吸附在柱子表面的物质通常就会积累在柱头。这些行为通常只有通过平行实验才能发现。有着中等保留值的样品能被缓慢洗出而且表现为宽峰，基线扰动，或者基线漂移。有时候这些被吸附的样品成分累积到一定程度足以使他们开始形成新的固定相。分析物能与这些杂质作用形成一定的分离机理。保留时间会波动，拖尾会出现。如果足够的污染产生，柱子的反压能超过泵所能承受的最大压力，使柱子无法工作以及在堵塞处产生空体积。这时，我们就要对色谱柱进行再生。
发明内容
本发明要解决的技术问题是现有的高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱再生方法效果差，无专门的再生方法，为此提供一种高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法。
本发明的技术方案是：高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法，它包括以下步骤：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用40-44倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在4-6L/min；（2）、用32-38倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在5-8L/min；（3）、用28-30倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在6-9 L/min；（4）、用20-28倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在7-10 L/min。
本发明的有益效果是采用HPLC级水-甲醇-氯仿-二甲亚砜流速逐渐提高、与阴离子交换填料柱相比的体积倍数逐渐降低的方法来再生阴离子交换填料柱，再生效果好，缩短了再生流程，阴离子交换填料柱中水分含量少。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用40倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在4L/min；（2）、用32倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在5L/min；（3）、用28倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在6L/min；（4）、用20倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在7 L/min。
实施例2：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用42倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在5L/min；（2）、用36倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在6L/min；（3）、用29倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在7L/min；（4）、用24倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在9L/min。
实施例3：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用44倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在6L/min；（2）、用38倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在8L/min；（3）、用30倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在9 L/min；（4）、用28倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在10 L/min。
本发明可以有效去除阴离子交换填料柱中的水分，保证固定相的水分含量变化较小，从而保持水分条件的一致性。

Claims (1)

1.高效液相色谱仪中阴离子交换填料柱的再生方法，其特征是它包括以下步骤：（1）、倒转阴离子交换填料柱，用40-44倍体积的HPLC级水反冲阴离子交换填料柱，HPLC级水流速控制在4-6L/min；（2）、用32-38倍体积的甲醇反冲阴离子交换填料柱，甲醇流速控制在5-8L/min；（3）、用28-30倍体积的氯仿反冲阴离子交换填料柱，氯仿流速控制在6-9 L/min；（4）、用20-28倍体积的二甲亚砜反冲阴离子交换填料柱，二甲亚砜流速控制在7-10 L/min。
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