CN110063303B - 一种适宜生产药用僵蚕的蚕种组合 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种适宜生产药用僵蚕的蚕种组合，它是含有下述品种的蚕种组成：白春×芳绣、川山×蜀水、锦苑×凌州、两广二号。本发明还提供了一种药用僵蚕养殖方法，包括：春季和晚秋交替发种白春×芳绣或/和川山×蜀水，夏季和早秋选择锦苑×凌州或两广二号，养殖温度26±2℃，湿度75±5％RH，充分饱食。本发明可操作性强，节省成本，且所产僵蚕产量较高，外观形态较好、品质优良，该方法适用于人工规模化养殖僵蚕。
Description
技术领域
本发明涉及一种多季药用僵蚕生产的蚕种组合。
背景技术
僵蚕来源于蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus 4～5龄的幼虫感染白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体，是常用大宗中药材之一，主要用于治疗肝风夹痰、惊痫抽搐、小儿急惊、破伤风等疾病。随着僵蚕药理成分和功能研究方面研究的深入以及相关新产品的不断研发，僵蚕在药用领域的应用将越来越广泛。在僵蚕的实际生产过程中，不同蚕种对白僵菌及其他杂菌表现出不同的感染率，导致家蚕生长周期不一，产量不稳定，最终影响僵蚕质量。
自古以来僵蚕蚕种主要来源于丝蚕品种，丝蚕全年多季生产，针对不同气候条件，一般春季和晚秋蚕品种类似，夏季和早秋蚕种一致，不同蚕种存在差异，因此丝蚕蚕种不一定适宜于僵蚕生产。不同季节对丝蚕蚕种选择需要综合考虑产量和丝茧质量，僵蚕生产蚕种选择则针对白僵菌敏感性、对其它杂菌抗病性、产量和药材质量。不同品种家蚕对白僵菌敏感性不同，导致接种后生长发育不同，最终影响僵蚕产量与质量。
杨琼等，药用白僵蚕的人工培养研究[J]，广东蚕业44(4)：34-38公开了白僵蚕的人工培养方法，对菌种筛选、最佳接种剂量、适宜蚕品种等研究，其中，使用的蚕种有：多化品种：防4、加秋；中系二化品种：丰9、春5、粤引3、泰黄1；日系二化品种：研7、湘A、Kinshu形、231霞；四元杂交种： 9·芙×7·湘、7·湘×9·芙；当其接种浓度控制在105个/mL～106个/mL时，在2天内基本达到90％以上发病死亡，蚕体较小，僵蚕产量和质量也无法保证。
发明内容
对于实际生产，选择僵蚕产量较高、质量较好的蚕种更有发展前景。本发明通过比较不同季节养蚕区蚕种，筛选出一种多季滚动式药用僵蚕生产的蚕种组合，该蚕种感染率高、所产僵蚕产量和质量均较稳定，品质优良。
本发明提供了一种适宜生产药用僵蚕的蚕种组合，它是含有下述品种的蚕种组成：白春×芳绣、川山×蜀水。
其中，所述蚕种还包含锦苑×凌州。
其中，所述蚕种还包含两广二号。
本发明提供了一种药用僵蚕养殖方法，它包括前期养殖：以桑叶为食料，通过人工养殖家蚕Bombyx mori Linnaeus至五龄；接种；扩座；僵死前饲喂；加工，其中所述家蚕的蚕种选自白春×芳绣、川山×蜀水、锦苑×凌州和/ 或两广二号。
其中，所述养殖的次数至少包括春季、夏季、早秋、晚秋四季养殖。
其中，所述春季和晚秋交替使用的蚕种是：白春×芳绣或/和川山×蜀水。
其中，所述夏季和早秋交替使用的蚕种是：锦苑×凌州或两广二号。
本发明针对不同季节使用不同蚕种组合，提高接种成功率，可用于滚动式养殖僵蚕，产量高且稳定；本发明可用于生产专用僵蚕药材，保证质量和产量，且可操作性强。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1蚕种验证实验产量对比图
具体实施方式
实施例1僵蚕蚕种筛选
1实验材料
1.1材料来源
7532×932、锦苑×凌州、白春×芳绣、川山×蜀水、两广二号的蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)。
1.2仪器与试药
Agilent 1200 HPLC高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；DZKW-4型电子恒温水浴锅 (北京中兴伟业仪器有限公司)；恒温鼓风干燥箱(上海琅玕实验设备有限公司)；BP-121s精密电子天平(十万分之一，浙江精密仪器有限公司)；BS-200S-WEI精密电子天平(千分之一，北京赛多利斯仪器系统有限公司)；马弗炉(Lindberg/Blue M)。
白僵菌素(批号：L280Q50，北京百灵威科技有限公司)，乙腈为色谱纯，甲醇、乙醇、吐温-80等试剂均为分析纯，水为超纯水。
2试验设计
2.1接种方法
用含0.05％吐温80无菌水(23～28℃)配制白僵菌原液，采用血球计数板测定孢子浓度，将白僵菌原液稀释成1×108个/mm2。选取食桑旺盛五龄家蚕，接种白僵菌工作液，喷施3次，以蚕体见露珠为度。保持温度25±2℃，湿度90±5％RH，控制2小时后饲喂桑叶。
2.2春季和晚秋蚕种筛选
本实验选择四个家蚕品种进行品比试验，7532×932、锦苑×凌州、白春×芳绣、川山×蜀水，每组3个重复，共计12个处理区。饲喂温度26±2℃，湿度70±5％RH，光照/黑暗(10：14)环境，给桑量以充分饱食为度。
2.3夏季和早秋蚕种筛选
本实验选择四个家蚕品种进行品比试验，7532×932、锦苑×凌州、川山×蜀水、两广二号，每组3个重复，共计12个处理区。饲喂温度26±2℃，湿度70±5％RH，光照/黑暗(10：14)环境，给桑量以充分饱食为度。
2.4质量指标测定
本实验参照《中国药典》2015年版·一部僵蚕项下总灰分、酸不溶性灰分、进出物含量测定方法进行检测；参照陈辉等一种安全快速测定僵蚕中白僵菌素含量的高效液相方法研究测定白僵菌素含量。
3结果与分析
3.1不同品种家蚕生长指标比较分析
不同品种家蚕生长指标测定结果见表1。由表可知，春季和晚秋蚕种五龄起蚕初鲜重较夏季和早秋蚕种高。春季和晚秋僵蚕养殖，不同蚕种初鲜重差异显著，p(3,8)＝0.022<0.05，以川山×蜀水初鲜重较大为0.86g，7532×932 最轻为0.71g；夏季和早秋僵蚕养殖，以锦苑×凌州和川山×蜀水初鲜重较重，两广二号最轻为0.62g。
接种白僵菌后，不同季节家蚕生长状况不同。春季和晚秋僵蚕养殖，以锦苑×凌州和白春×芳绣增重倍数较大，产量较高；7532×932生长缓慢，增重倍数最小，产量低。夏季和早秋僵蚕养殖，以锦苑×凌州和川山×蜀水增重倍数较大，产量较高；两广二号和7532×932生长缓慢，增重倍数最小，产量低。
针对僵蚕滚动式生产，春季和晚秋优选和川山×蜀水交替式滚动发种；夏季和早秋优选锦苑×凌州。
表1不同家蚕品种生长指标差异比较
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.2不同品种家蚕接种效果差异分析
不同品种家蚕接种效果结果见表2。由表可知，春季和晚秋僵蚕养殖僵死率较夏季和早秋高，且春季和晚秋僵蚕养殖时间较长，但夏季和早秋病死率较高。春季和晚秋以7532×932病死率较低，对杂菌抗性较佳；夏季和早秋以锦苑×凌州和川山×蜀水病死率较高，对杂菌抗性较差。
针对僵蚕滚动式生产，春季和晚秋各蚕种接种效果均较佳；夏季和早秋以锦苑×凌州和两广二号接种效果较佳，且杂菌不易引起蚕病。
表2不同家蚕品种接种效果
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.3不同品种家蚕对僵蚕药材质量的影响
不同品种家蚕所产僵蚕药材质量均符合现行药典规定，结果见表3。春季和晚秋蚕种四丝腺环得率明显较高，7532×932最高达90.67％，白春×芳绣最低为79.27％；对于夏季和早秋，以两广二号和7532×932四丝腺环得率最高，外观性状较好。
表3不同家蚕品种对僵蚕质量的影响(
n＝2)
3.4不同季节僵蚕生产蚕种选择
对于春季和晚秋，生产上建议用白春×芳绣和川山×蜀水。7532×932产量较低，不建议用于生产，锦苑×凌州产量相对较高，但丝腺环得率较低，僵蚕质量较差，不利于生产优质药材，白春×芳绣和川山×蜀水产量较高，蚕体较大，加之丝腺环得率较高，有利于生产优质药材。
对于夏季和早秋，生产上用锦苑×凌州。夏季蚕种两广二号和7532×932 产量较低，不建议用于生产，锦苑×凌州和川山×蜀水产量较高，而且僵蚕药材质量符合现行药典规定，但川山×蜀水丝腺环得率较低，为保证优质药材生产，建议使用锦苑×凌州。
综上结果，本发明适用生产药用僵蚕的组合有以下两种形式：
一，春季和晚秋交替使用白春×芳绣或/和川山×蜀水，夏季和早秋使用锦苑×凌州；
二、对于追求高品质药材生产夏季和早秋使用两广二号。
实施例2僵蚕养殖方法
1实验材料
锦苑×凌州、白春×芳绣、川山×蜀水、两广二号的蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)。
2试验设计
2.1接种方法
用含0.05％吐温80无菌水(23～28℃)配制白僵菌原液，采用血球计数板测定孢子浓度，将白僵菌原液稀释成1×108个/mm2。选取食桑旺盛五龄家蚕，接种白僵菌工作液，喷施3次，以蚕体见露珠为度。保持温度25±2℃，湿度90±5％RH，控制2小时后饲喂桑叶。
2.2养殖方法
实验验证以丝蚕养殖为对照，以春季和晚秋筛选蚕种，夏季和早秋筛选蚕种为实验组，每组3个重复，设计春季、夏季、早秋和晚秋四季养殖实验，详细信息见表1。
表1实验方法
3结果与分析
由表2可知，对照组所得僵蚕产量最低为6.21kg·m-2；由图1可知，实验组所得僵蚕产量较高，实验组2针对各季僵蚕生产选择适宜蚕种组合，其僵蚕产量最高达6.99kg·m-2。由于对照组采用丝蚕生产养殖模式发放蚕种，蚕种来源不稳定，养殖管理不规范，导致僵蚕产量较低。而实验组针对不同季节选择适宜蚕种，保证蚕种来源稳定，养殖管理较佳，僵蚕产量较高。综上，针对僵蚕滚动式生产，对应季节选择适宜蚕种，采用交替发种方式保证蚕种来源稳定，提高僵蚕产量。
表2蚕种验证实验产量对比
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
综上，本发明针对不同季节使用不同蚕种组合，即保证了蚕种来源稳定，又能有效提高接种成功率，使僵蚕产量和质量相较于现有生产水平有显著的提高，具备实际推广应用价值。
Claims (4)
1.一种适宜生产药用僵蚕的蚕种组合，其特征在于：它是由下述品种的蚕种组成：
白春×芳绣、川山×蜀水、锦苑×凌州、两广二号；
所述白春×芳绣或/和川山×蜀水在春季和晚秋使用，锦苑×凌州或/和两广二号在夏季和早秋使用。
2.一种药用僵蚕养殖方法，它包括前期养殖：以桑叶为食料，通过人工养殖家蚕Bombyx mori Linnaeus至五龄；接种；扩座；僵死前饲喂；加工，其特征在于：所述家蚕的蚕种选自权利要求1所述的蚕种。
3.根据权利要求2所述的养殖方法，其特征在于：所述养殖的次数至少包括春季、夏季、早秋、晚秋四季养殖。
4.根据权利要求2所述的养殖方法，其特征在于：所述养殖的温度26±2 ℃，湿度75±5%RH。
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| CN110063303A (zh) | 2019-07-30 |
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