CN110063304A - 一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了采用的养殖条件选择控温控湿环境的方法，接种环境控制24～28℃，85～95％RH，五龄家蚕每张纸需要准备蚕台面积不少于30m2，养殖环境控制24～28℃，70～80％RH，清除杂物，每6小时通风换气一次。本发明还提供了一种优质高产的药用僵蚕养殖方法，它包括如下步骤：a、前期养殖：定时给桑；加网除沙；眠前处理；b、接种环境：调节接种室温湿度，通风换气；c、接种：喷雾接种三次，起蚕后0～16小时内完成；d、扩座：蚕台面积不少于30m2，逐日扩座。本发明适用于人工规模化养殖药用僵蚕，产量较高，品质优良。
Description
技术领域
本发明涉及一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法。
背景技术
僵蚕来源于蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus 4～5龄的幼虫感染白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体，是典型的动物药之一，具有抗惊厥、抗血栓、促纤溶、抗癌、降脂、美容等药理作用。随着僵蚕药理成分和功能方面的深入研究，应用将越来越广泛。僵蚕质量优劣会极大影响其研究及开发，因此优质高产僵蚕的养殖方法研究显得非常重要。
申请号：201710507501.2，发明名称：一种规模化养殖僵蚕的施菌方法，公开了一种规模化养殖僵蚕的施菌方法，通过振动补湿机将养殖房内的湿度调整在75-90％RH，通过电加热器将养殖房内的温度调整在24-26℃，持续15-25分钟关闭振动补湿机和电加热器，打开养殖房的通风装置对养殖房内通风，使养殖房内的湿度和温度快速恢复到接种准备前的状态，最后对蚕给叶供食正常饲养。申请号：201510431732.0，发明名称：一种僵蚕的培养方法，公开了一种僵蚕的培养方法，幼蚕喷洒接种后置于温度为23～25℃、湿度大于95％的条件下饲养48h，再在自然环境中饲养至家蚕成熟，收获，干燥处理，即得。
僵蚕养殖多参照丝蚕养殖，环境控制一般参照大蚕养殖，即温度为24～28℃、湿度为70～75％RH，每日定时给桑2～3次，待家蚕僵死变白，捡出晒干即可。目前对于丝茧的养殖方式是否同样适用于僵蚕，并未有相关文献报道。实际生产中存在着空心蚕、蚕体瘦小等情况，导致市场僵蚕质量参差不齐。因此，针对僵蚕由自然染菌到人工规模化接种转变的特殊性，控制养殖环境以保证僵蚕产量及质量显得非常关键。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法，它包括如下步骤：
a、接种环境控制：调节温度24～28℃，湿度85～95％RH，接种后再控制2小时；
b、僵蚕密度控制：每张纸五龄家蚕需要准备蚕台面积不少于30m2；
c、养殖环境控制：调节温度24～28℃，湿度70～80％RH，清除杂物，每6小时通风换气一次。
本发明还提供了一种优质高产药用僵蚕养殖方法，它包括如下步骤：
1)、接种前处理：接种前饲喂家蚕1次或不饲喂家蚕；
2)、接种：按照权利要求1控制接种环境，用含0.05％吐温80无菌水配制的白僵菌工作液接种，接种2小时后通风换气，饲喂桑叶；
3)、养殖：按权利要求1控制僵蚕密度和养殖环境，养殖至蚕僵死。
其中，1)步骤所述的接种前不饲喂家蚕。
其中，2)步骤所述的接种时间为五龄起蚕后0～16小时内。
其中，所述的接种时间为五龄起蚕后0～8小时。
其中，2)步骤所述的接种方式为喷雾接种、浸润接种、饲喂接种。
其中，所述的接种方式为喷雾接种。
其中，所述的喷雾接种次数是3次。
其中，2)步骤所述无菌水温度为23～28℃，所述白僵菌工作液浓度为1×106～1×108个/mm2。
本发明一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法，控制接种环境和后期养殖环境，保证家蚕接种成功率，同时提高僵蚕产量和质量。本发明一种优质高产的药用僵蚕养殖方法，采用喷雾接种法，不影响家蚕接种，且易于标准化操作，适合工业化大生产；本发明通过合理的密度配置，控制家蚕养殖环境，最大限度保证优质僵蚕生产。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1养殖密度对不同等级僵蚕产量的影响
具体实施方式
实施例1僵蚕接种环境控制方法
1实验材料
蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)，吐温-80。
2试验设计
用含0.05％吐温80无菌水(23～28℃)配制白僵菌原液，采用血球计数板测定孢子浓度，将白僵菌原液稀释成1×106～1×108个/mm2。
选取大小均匀、生长状况良好的五龄家蚕，接种白僵菌，控制接种环境，每组3个重复，共计12个处理区，环境控制见表1。五龄家蚕养殖温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(10：14)环境，给桑量以充分饱食为度。
表1接种环境控制方法
3结果与分析
3.1接种环境控制对家蚕生长的影响
接种环境控制有利于僵蚕增产。由表2可知，接种环境控制在一定温度湿度范围内，僵蚕产量较高，接种环境24～28℃，85～95％RH，控制2小时，僵蚕鲜产量最高达1.84kg·m-2。接种环境24～28℃，低湿环境控制2小时较高湿环境更利于僵蚕生长，长时间控制在高湿环境不利于家蚕生长，当85～95％RH控制4小时，家蚕增重倍数和僵死重最低为3.63倍、3.61g。由表3可知，接种环境控制在一定温度湿度范围内，僵蚕接种效果较佳。高湿环境易引起僵蚕病死率增加，当85～95％RH控制4小时病死率最大为3.17％。低湿环境不利于家蚕接种，且活蚕较多。综上，生产上应控制接种环境。
表2接种环境控制对僵蚕生长指标的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
表3接种环境控制对僵蚕接种效果的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.2接种环境控制对僵蚕质量的影响
接种环境控制有利于生产优质僵蚕。由表4可知，接种环境24～28℃，85～95％RH，控制2小时，僵蚕药材丝腺腺环得率高达44.67％。高湿环境控制4小时，僵蚕病死率高，且空心率高达20.67％，可能是僵蚕病死感染其他杂菌，导致空心率较高。综上，优质高产僵蚕生产需要控制接种环境，以24～28℃，85～95％RH，控制2小时较佳。
表4接种环境控制对僵蚕质量的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
实施例2僵蚕接种方法
1实验材料
蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)，吐温-80。
2试验设计
2.1接种方式筛选
选取健康的五龄家蚕幼虫进行接种。设置空白组和实验组，空白组不接种，实验组采用3种接种方式，方式1(浸润)、方式2(喷雾)、方式3(饲喂)，每组3个重复，共计12个处理区，操作详情见表1。接种后环境温度24～28℃，湿度90±5％RH，控制2小时后给桑量。五龄家蚕养殖温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(14：10)环境，给桑量以充分饱食为度。
表1实验及接种操作详情
2.2接种次数筛选
选取健康的五龄家蚕幼虫进行接种，设置空白组和实验组，空白组接种含0.05％吐温80无菌水，实验组接种等量白僵菌工作液，分别接种1次、接种2次、接种3次、接种4次，每组3个重复，共计15个处理区。接种后环境温度24～28℃，湿度90±5％RH，控制2小时后给桑量。五龄家蚕养殖温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(14：10)环境，给桑量以充分饱食为度。
3结果与分析
3.1接种方式筛选结果
接种方式导致僵蚕产量存在差异。由表2可知，不同接种方式家蚕增重倍数差别不大，僵死重以饲喂组和喷雾组较大，产量以浸染组和喷雾组较高，达到2kg·m-2。
人工接种白僵菌，家蚕僵死率增加。由表3可知，饲喂组僵死率较低为20.78％，活蚕率为77.14％，浸染组和喷雾组僵死率均高于90％，表明白僵菌接种主要依靠体表入侵。浸染组僵死率显著高于喷雾组和饲喂组，表明浸染组接种效果更好。但浸染组不宜于工业大生产，操作繁琐。综上，接种方式采用喷雾接种。
表2接种方式对僵蚕产量的影响
注：同列与浸染组比较*p<0.05，“-”表示未测得数据
表3接种方式对接种效果的影响
注：同列与浸染组比较*p<0.05
3.2接种次数筛选结果
喷雾接种次数增加，僵蚕产量降低。由表4可知，接种次数影响僵蚕增重倍数，以喷雾4次最低为2.2倍。由表5可知，空白组僵死率为2.25％，病死率为1.89％，增长倍数最大为3.74，表明此家蚕生长良好，环境无白僵菌等致病菌感染。喷雾次数越多，僵死率越高，最高达98％，喷雾1次与4次相差12.11％，表明喷雾均匀度对家蚕接种效果影响显著。综上，考虑生产中可操作性，喷雾次数选择3次。
表4喷雾次数对僵蚕产量的影响
注：同列与喷雾1次比较*p<0.05，“-”表示未测得数据
表5喷雾次数对接种效果的影响
注：同列与喷雾1次比较*p<0.05，“-”表示未测得数据
实施例3僵蚕接种时间选择方法
1实验材料
蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)，吐温-80。
2试验设计
2.1接种时间初探
选取五龄家蚕幼虫，分别于起蚕第0h，第2h，第4h，第6h接种白僵菌工作液，每组3个重复，共计12个处理区。饲喂温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(10：14)环境，给桑量以充分饱食为度。
2.2接种时间优化
选取五龄家蚕幼虫，分别于起蚕第0h，第8h，第16h，第24h、第32h接种白僵菌工作液，每组3个重复，共计15个处理区。饲喂温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(10：14)环境，给桑量以充分饱食为度。
3结果与分析
3.1接种时间初探试验结果
由表1和表2可知，五龄起蚕后，家蚕体壁较薄，容易感染，考察接种时间对家蚕接种效果的影响。从生长状况出发，0～6h相隔2小时接种，其鲜重、增重倍数、僵死重、产量差异不显著，表明该时间段内接种时间对家蚕生长无显著影响。僵死效果显示，接种时间延后，其僵死率均超过90％，表明该时间段内接种成功率较高，但活蚕率和病死率差异显著，时间2活蚕率较高、病死率较低，其综合低于5％，可能是家蚕自身差异引起，对家蚕生长影响不显著。综合考虑，0～6h相隔2h接种，家蚕生长和僵蚕产量差异不显著，因此五龄起蚕后需要在0～6h完成接种。
表1接种时间对僵蚕生长指标的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
表2接种时间对接种效果的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.2接种时间优化试验结果
由表3和表4可知，从生长状况出发，随着接种时间延后，家蚕鲜重、增重倍数、僵死重、产量显著降低，尤其时间5接种，产量只有0.68kg·m-2，表明接种时间延后不利于家蚕生长，且导致僵蚕生产产量降低。僵死效果显示，接种时间延后，其病死家蚕显著升高，僵死家蚕显著减少，表明接种时间会影响接种效果。综合考虑，接种时间延后影响家蚕生长状况，使家蚕抵抗力降低，导致其它病菌致死家蚕，同时不利于白僵菌接种成功，因此选择五龄起蚕0～16h完成接种，其中0～8h产量最高，故最优为0～8h。
表3接种时间对僵蚕生长指标的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
表4接种时间对接种效果的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
实施例4僵蚕养殖密度方法
1实验材料
蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)，吐温-80。
2试验设计
选取大小均匀、生长状况良好的五龄家蚕，分别设置400头/m2(密度1)、800头/m2(密度2)、1200头/m2(密度3)、1600头/m2(密度4)、2000头/m2(密度5)共5个养殖密度，3个重复，共计15个处理区。接种后养殖温度26±2℃，湿度75±5％RH，光照/黑暗(14：10)环境，给桑量以充分饱食为度。
3结果与分析
3.1养殖密度对僵蚕产量的影响
不同养殖密度对僵蚕产量有影响。相同养殖面积，密度越大僵蚕产量越高，最高为6.66kg·m-2。
表1不同养殖密度对僵蚕产量的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.2养殖密度对僵蚕质量的影响
随密度增大，僵蚕产出一级品显著减少，F(4,10)＝11.067，P<0.05，以密度1产出一级僵蚕较多，密度2产出二级僵蚕较多，密度4产出三级僵蚕较多。结合市场价值，一级僵蚕150元/kg，二级120元/kg，三级80元/kg，扣除成本，不同密度下，每张纸所得僵蚕收益差异显著，F(4,10)＝4.731，P<0.05，以密度1、密度2、密度5收益较高。由表2和图1综合考虑，增加优质僵蚕生产建议密度1～密度2，即每张纸五龄家蚕需要准备蚕台面积不少于30m2。
表2不同养殖密度对僵蚕质量的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
实施例5一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法
1实验材料
蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus蚕种(购自四川省阆中蚕种场)，白僵菌Beauveria assiana(Bals.)Vuillant(成都中医药大学提供)，吐温-80。
2实验方法
选取大小均匀、生长状况良好的五龄家蚕，接种白僵菌。僵蚕养殖环境条件设置高湿环境、控温控湿环境、自然环境、高温环境，详见表1。
表1养殖环境控制方法
3结果与分析
3.1养殖环境控制对僵蚕生长的影响
家蚕接种白僵菌后，其养殖条件对僵蚕生产非常重要。由表2可知，高温环境无家蚕僵死，病死率高达95％，表明高温不利于僵蚕生产。自然环境养殖条件粗放，温湿度不易控制，家蚕僵死率较低，病死率较高为2.3％，但自然环境下白僵菌生长周期延长，家蚕的食桑量增加，导致产量较高。。控制温度和湿度，家蚕僵死率高达98％，且产量达到1.3kg·m-2。家蚕增重倍数顺序为自然环境>高湿环境＝控温控湿>高温环境，但高温环境产量最低为0，可能是高温环境抑制白僵菌繁殖，使家蚕无法僵化，导致家蚕死后黑化腐烂。
表2养殖条件对僵蚕生长指标的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
3.2养殖环境控制对僵蚕质量的影响
僵蚕养殖环境控制影响僵蚕质量。由表3可知，高温环境无僵蚕产生。自然环境所产僵蚕空心率和患病僵蚕率最高为11.5％和9.33％，表明粗放的温湿度环境不利于优质僵蚕生产。控制温湿度所得僵蚕四丝腺环得率最高达29.33％，空心率降低约7％，患病僵蚕率6％，表明优质僵蚕生产需要控制养殖环境。综上，养殖优质药用僵蚕，环境需保持温度24～28℃，湿度70～80％RH。
表3养殖条件对僵蚕质量指标的影响
注：同一列不同小写字母表示p<0.05差异显著
综上，本发明药用僵蚕的生产环境控制方法，即保证了家蚕接种成功率，又提高了僵蚕产量和质量，最大限度保证了优质僵蚕生产，易于生产推广使用；本发明的僵蚕养殖方法，采用喷雾接种法，并通过合理的密度配置，一方面使家蚕接种操作标准化，又便于工业化大生产，具备实际应用价值。
Claims (9)
1.一种适宜药用僵蚕生产的环境控制方法，其特征在于，它包括如下步骤：
a、接种环境控制：调节温度24～28℃，湿度85～95％RH，接种后再控制2小时；
b、僵蚕密度控制：每张纸五龄家蚕需要准备蚕台面积不少于30m2；
c、养殖环境控制：调节温度24～28℃，湿度70～80％RH，清除杂物，每6小时通风换气一次。
2.一种优质高产药用僵蚕养殖方法，其特征在于，它包括如下步骤：
1)、接种前处理：接种前饲喂家蚕1次或不饲喂家蚕；
2)、接种：按照权利要求1控制接种环境，用含0.05％吐温80无菌水配制的白僵菌工作液接种，接种2小时后通风换气，饲喂桑叶；
3)、养殖：按权利要求1控制僵蚕密度和养殖环境，养殖至蚕僵死。
3.根据权利要求2所述养殖方法，其特征在于，1)步骤所述的接种前不饲喂家蚕。
4.根据权利要求2所述养殖方法，其特征在于，2)步骤所述的接种时间为五龄起蚕后0～16小时内。
5.根据权利要求4所述养殖方法，其特征在于，所述的接种时间为五龄起蚕后0～8小时。
6.根据权利要求2所述养殖方法，其特征在于，2)步骤所述的接种方式为喷雾接种、浸润接种、饲喂接种。
7.根据权利要求6所述养殖方法，其特征在于，所述的接种方式为喷雾接种。
8.根据权利要求7所述养殖方法，其特征在于，所述的喷雾接种次数是3次。
9.根据权利要求2所述养殖方法，其特征在于，2)步骤所述无菌水温度为23～28℃，所述白僵菌工作液浓度为1×106～1×108个/mm2。
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