CN110041309B - 一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物及制备与应用 - Google Patents

一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物及制备与应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及化学合成技术领域，具体涉及一种2‑羧基哌嗪连接的他克林‑8‑氨基(羟基)喹啉衍生物及制备与应用。所述的2‑羧基哌嗪连接的他克林‑8‑氨基(羟基)喹啉衍生物，为式I化合物或其药学上可接受的盐，以及所述的式I化合物或其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对映异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，包括外消旋混合物。经药理试验证实该类化合物对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性具有抑制作用，属于胆碱酯酶抑制剂；并且还能对β‑淀粉样蛋白的自聚集产生抑制作用，对乙酰胆碱的水解和β‑淀粉样蛋白的自聚集起到延缓作用，进而提高了乙酰胆碱在突触的作用，最终实现有效治疗阿茨海默症的目的。

Description

一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物及 制备与应用
技术领域
本发明涉及化学合成技术领域，具体涉及一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物及制备与应用。
背景技术
阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease，AD)也称为老年痴呆症，在临床上，AD的主要症状包括：认知障碍、失语、执行和记忆力逐渐下降，最终导致死亡。其致病机理尚未明确，发病非常隐匿、与年龄相关，随着年龄的增长患病率增高。
AD的致病机理目前还未确定，目前得到公认的主要有细胞外的β-样淀粉蛋白聚集形成毒性低聚物，细胞内的tau蛋白过磷酸化形成神经纤维缠结，胆碱能神经元受损，导致胆碱能活性下降等等。
AD的致病因素比较多难以对症下药，在研究开发的许多药物中，绝大多数在临床实验中以失败告终。至今全世界只有5种药物被美国食品药品监督管理局(FDA)批准。它们分别为：他克林(Tacrine)、多奈哌齐(Donepezil)、加兰他敏(Galantamine)、利斯的明(Rivastigmine)、美金刚(Memantine)，其中前4种属于乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase, AChE)抑制剂，这些药物并不能彻底治疗AD，只针对单个病因，不能逆转。同时存在肝脏毒性大、生物利用度低等不同程度的缺陷。
从2003年美金刚获得FDA批准以来，到目前为止还没有新药获得上市，因此研究开发有效的治疗AD新药已经刻不容缓。而乙酰胆碱酯酶抑制剂是目前治疗AD最好的药物，所以研究开发具有多靶点协同治疗的胆碱酯酶抑制剂是一个很有希望的策略。
发明内容
为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，该化合物既能对乙酰胆碱酯酶活性具有良好抑制作用，又能很好的抑制β-淀粉样蛋白聚集，可用于治疗阿茨海默症。
本发明的另一目的在于提供上述2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，为式I化合物或其药学上可接受的盐，以及所述的式I化合物或其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对映异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，包括外消旋混合物；
Figure BDA0002018977070000021
其中，X为O或NH，n为2～7的整数，R为氢、氟等；
所述的药用盐优选包括盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐、草酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、磺酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、酒石酸盐和琥珀酸盐等；
所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的制备方法，包含如下步骤：
(1)以N,N'-二苄基乙二胺和2,3-二溴丙酸乙酯为原料，以甲苯为溶剂，在碱性条件下反应，得到化合物Ia；在酸性条件下，经过钯碳催化和氢气的作用下化合物Ia脱苄基保护发生加氢还原反应，得到哌嗪Ib；然后再用三苯基氯甲烷保护哌嗪Ib上受空间位阻小的氨基，得到化合物Ic；
(2)在酸催化下，邻氨基苯酚或苯胺与乙醛进行缩合环化，得到化合物Id(2-甲基-8羟(氨)基喹啉)；化合物Id经苄基或叔丁氧羰基保护羟基或氨基，得到化合物Ie或Ie’，化合物Ie或Ie’经SeO2氧化，得到2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’；
(3)步骤(1)制得的化合物Ic与步骤(2)制得的2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’经三乙酰氧基硼氢化钠还原得到化合物Ig或Ig’；化合物Ig或Ig’在酸性条件下脱去三苯基氯甲烷保护，得到化合物Ih或Ih’；
(4)邻氨基苯甲酸经碱性水解得到化合物Ij；化合物Ij与环己酮在三氯氧磷作用下缩合，得到9-氯他克林Ik，9-氯他克林Ik与氨基酸在惰性溶剂下反应，得到化合物IL；
(5)步骤(4)制得的化合物IL与步骤(3)制得的化合物Ih或Ih’进行偶联反应，得到Im或Im’；Im或Im’经过酯的碱性水解、羟基或氨基脱保护，得到2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物；
所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的制备方法，优选包含如下步骤：
(1)以N,N'-二苄基乙二胺和2,3-二溴丙酸乙酯为原料，以甲苯为溶剂，在碱性条件下20～50℃反应0.5～2h；所得产物经硅胶柱层析分离纯化，得到化合物Ia；在酸性条件下，以乙醇为溶剂，以钯碳为催化剂，化合物Ia和氢气20～50℃反应10～12h，所得产物经过过滤、水洗、浓缩，得到哌嗪Ib；在碱性条件下，以二氯甲烷为溶剂，以哌嗪Ib和三苯基氯甲烷为反应物，20～50℃反应10～12h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ic；
(2)在酸催化下，邻氨基苯酚或苯胺与乙醛60～120℃缩合环化，所得产物经还原或不经还原后进行柱层析或重结晶提纯，得到化合物Id(2-甲基-8羟(氨)基喹啉)；化合物Id经卤化苄或二碳酸二叔丁酯(Boc2O)保护，得到化合物Ie或Ie’；化合物Ie或Ie’和二氧化硒80～100℃氧化反应10～12h以氧化其2-位甲基，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’；
(3)以三乙酰氧基硼氢化钠为还原剂，以步骤(1)制得的化合物Ic与步骤(2)制得的2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’为反应物，20～50℃还原反应10～12h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ig或Ig’；在酸性条件下，Ig或Ig’脱去三苯基氯甲烷保护，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ih或Ih’；
(4)2-氨基苯甲酸甲酯在浓度为20～25wt％的氢氧化钠水溶液中加热回流2～3h，然后分离有机相浓缩干燥，得到化合物Ij；在三氯氧磷作用下，化合物Ij与环己酮回流反应10～12h，所得产物碱化后经柱层析或重结晶提纯，得到9-氯他克林Ik；吡啶碱性条件下，9-氯他克林Ik与氨基酸在惰性溶剂下120～130℃反应8～10h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物IL；
(5)在吡啶碱性条件下，以二氯甲烷和甲醇混合物为溶剂，二环己基碳二亚胺(DCC)为偶联剂，1-羟基苯并三唑(HOBT)为缩合剂，步骤(3)制得的化合物Ih或Ih’与步骤(4)制得的化合物IL发生偶联反应，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Im或Im’；在氢氧化钠水溶液碱性条件下，以乙醇为溶剂，化合物Im或Im’ 20～50℃反应2～3h，产物纯化；然后所得产物进行羟基或氨基脱保护，其中，羟基脱苄基保护以异丙醇为溶剂，1,4-环己二烯和钯碳为催化剂，加热回流10～12h；氨基脱叔丁氧羰基保护以二氯甲烷为溶剂，以三氟乙酸为酸，20～50℃反应1～2h，所得产物经柱层析或重结晶提纯得到最终化合物2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物；
步骤(1)中所述的反应的温度优选为25℃；
步骤(1)中所述的碱性条件优选为在三乙胺存在下形成的碱性体系；
步骤(2)中所述的氧化反应的溶剂优选为醚类；
所述的醚类进一步优选为四氢呋喃、1,4-二氧六环等中的至少一种；
步骤(3)中所述的还原反应的溶剂优选为1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、四氢呋喃中的至少一种；
步骤(3)中所述的还原反应的溶剂进一步优选为1,2-二氯乙烷；
步骤(3)中所述的还原反应的温度优选为25℃；
步骤(3)中所述的Ih的制备方法，优选为：
以甲醇为溶剂，在化合物Ig中加入浓盐酸(36～38wt％)20～50℃反应1～2h；
步骤(3)中所述的Ih’的制备方法，优选为：
以乙醇为溶剂，在化合物Ig’中加入1mol/L盐酸，20～50℃反应2～3h；
步骤(4)中所述的惰性溶剂优选为苯酚；
步骤(5)中所述的偶联反应的条件优选为25～50℃偶联反应8～12h；
步骤(1)所涉及的化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0002018977070000041
步骤(2)所涉及的化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0002018977070000051
步骤(3)所涉及的化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0002018977070000052
步骤(4)所涉及的化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0002018977070000053
步骤(5)所涉及的化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0002018977070000061
所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物在制备防治老年痴呆症药物中的应用；
所述的老年痴呆症优选为阿尔兹海默症；
所述的药物含有上述2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物或其溶剂化物中的至少一种；公知的，化合物的溶剂化形式通常并不影响化合物自身的生物学活性；
所述的药物可含有一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂；
所述的药物的制剂包括多种临床药物剂型，如片剂、注射液、脂质体纳米粒、控释剂等；
一种防治老年痴呆症药物，含有有效量的上述2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，余量为药用辅料或其它可配伍的药物；
所述药用辅料是指常规的药用赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂和粘合剂等；
所述其它可配伍的药物，指的是以有效剂量的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物为药物原料，再配伍其它天然药物或化学药品；
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
本发明提供了一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，经药理试验证实该类化合物对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性具有抑制作用，属于胆碱酯酶抑制剂；并且还能对β-淀粉样蛋白的自聚集产生抑制作用，具有抗阿茨海默症活性。因此对乙酰胆碱的水解和β-淀粉样蛋白的自聚集起到延缓作用，进而提高了乙酰胆碱在突触的作用，最终实现有效治疗阿茨海默症的目的。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
(1)合成化合物Ia 1,4-二苄基哌嗪-2-羧酸乙酯
称取N,N'-二苄基乙二胺(50g，208.04mmol)加入到装有300mL甲苯的1000mL圆底烧瓶中，再加入三乙胺(72mL，520.1mmol)并不断搅拌，将2,3-二溴丙酸乙酯(54.08g，208.04mmol)溶于50mL甲苯中，再缓慢倒入烧瓶中，反应体系在25℃下搅拌反应30min后，经过减压浓缩去除甲苯，加入水和二氯甲烷萃取分离有机相，有机相用水洗一遍，再用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到黄色油状体化合物Ia 1,4-二苄基哌嗪-2-羧酸乙酯，产率85％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.31–7.29(m,2H),7.26–7.20(m,6H),7.19–7.15(m,2H),4.16–4.06(m,2H),3.90(d,J＝13.6Hz,1H),3.60-3.49(m,2H),3.36–3.28(m,2H),3.08(m,1H),2.76(m,1H),2.56-2.46(m,2H),2.40-2.36(m,2H),1.17(t,J＝6.8Hz,3H)；ESI-MSm/z:339.2[M+H]+
(2)合成化合物Ib哌嗪-2-羧酸乙酯盐酸盐
称取步骤(1)制得的化合物Ia(35g，103.55mmol)于1000mL圆底烧瓶中，再依次加入230mL乙醇、18mL浓盐酸(市购)、1g钯碳，将烧瓶内空气排出，不断充入氢气，反应体系在25℃下搅拌12h；反应完全后，过滤并用水冲洗滤饼，减压浓缩滤液，得23.5g浅黄色固体化合物Ib哌嗪-2-羧酸乙酯盐酸盐，产率为97％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝4.41(q,J＝6.8Hz,2H),4.02-3.98(m,1H),3.80–3.70(m,2H),3.65–3.60(m,2H),3.51-3.43(m,1.19H),3.34-3.32(m,0.82H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H).
(3)合成化合物Ic 1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯
称取步骤(2)制得的化合物Ib(5g，21.65mmol)于250mL圆底烧瓶中，加入二氯甲烷(50mL)和三乙胺(12mL，86.63mmol)，将烧瓶置于冰浴中持续搅拌，然后称取三苯基氯甲烷(6g，21.65mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)中，再逐滴加入烧瓶中，反应体系在25℃下搅拌反应10h；然后向反应体系中加入200mL饱和碳酸钾水溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相再用水洗一遍、用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；粗产物经过硅胶柱层析分离纯化得到黄色固体化合物Ic 1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯，产率为89％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.45(m,5H),7.27-7.23(m,7H),7.16-7.13(m,3H),4.37–4.06(m,2H),3.76(m,1H),3.47–2.72(m,4H),1.78(m,3H),1.37–1.16(m,3H)；ESI-MSm/z:401.2[M+H]+.
实施例2
(1)合成化合物Id 6-氟-2-甲基喹啉-8-醇(X＝O，R＝F)
2-氨基-5-氟苯酚(20g，157.3mmol)和乙醛(27.7g，629.3mmol)在浓盐酸(140mL)中，80℃缩合环化反应2.5h；TLC监测反应结束后，经硅胶柱分离得到黑色油状体产物Id6-氟-2-甲基喹啉-8-醇(X＝O，R＝F)，产率9％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),6.94-6.88(m,2H),2.69(s,3H)；ESI-MSm/z:178.1[M+H]+
(2)合成化合物Id 6-氟-2-甲基喹啉-8-胺(X＝NH，R＝F)
4-氟-2-硝基苯胺(2g，12.8mmol)和乙醛(1.8g，25.6mmol)在盐酸(6M，50mL)和甲苯(20mL)中80℃缩合环化反应3h，经硅胶柱分离纯化后的产物(3g，14.5mmol)与还原性铁粉(2.4g，43.6mmol)在乙酸(30mL)和乙醇(50mL)混合溶液中回流反应2h；TLC监测反应结束后，经硅胶柱分离得到黄色固体Id6-氟-2-甲基喹啉-8-胺(X＝NH，R＝F)，产率76％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,1H),6.69(dd,J＝9.6Hz,2.8Hz,1H),6.63(dd,J＝10.8Hz,2.8Hz,1H),5.13(s,2H),2.68(s,3H)；ESI-MSm/z:177.1[M+H]+.
实施例3
(1)合成化合物Ie 8-苄氧基-2-甲基喹啉(R＝H)
依次称取化合物Id 2-甲基喹啉-8-醇(X＝O，R＝H，直接购买)(5g，31.4mmol)和碳酸钾(6.5g，47.1mmol)于圆底烧瓶(50mL)中，再依次加入溴化苄(3.8mL，31.4mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，将反应体系加热至80℃搅拌反应10h；反应体系冷却后，加水和乙酸乙酯萃取3次，有机相再水洗一遍、用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到白色固体Ie8-苄氧基-2-甲基喹啉(R＝H)，产率为98％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.52(d,J＝7.2Hz,2H),7.40–7.27(m,6H),7.01(dd,J＝7.6Hz,1.6Hz,1H),5.46(s,2H),2.81(s,3H)；ESI-MSm/z:251.1[M+H]+.
(2)合成化合物Ie 8-苄氧基-6-氟-2-甲基喹啉(R＝F)
称取实施例2制得的化合物Id 6-氟-2-甲基喹啉-8-醇(X＝O，R＝F)(2.5g，14.11mmol)，参照步骤(1)操作过程，分离得黑色油状体化合物Ie8-苄氧基-6-氟-2-甲基喹啉(R＝F)，收率为90％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.52(d,J＝7.2Hz,2H),7.38-7.31(m,4H),6.95(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),6.80(dd,J＝10.8Hz,2.4Hz,1H),5.43(s,2H),2.79(s,3H)；ESI-MSm/z:269.1[M+H]+.
(3)合成化合物Ie’2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝H)
称取化合物Id 2-甲基喹啉-8-胺(X＝NH，R＝H，直接购买所得)(15g，94.82mmol)于500mL圆底烧瓶中，向烧瓶中依次加入1,4-二氧六环(150mL)、二碳酸二叔丁酯(82.77g，379.27mmol)，将反应体系加热回流搅拌12h；然后将反应体系冷却至室温25℃，减压浓缩，粗产物经过硅胶柱层析分离纯化得到白色固体化合物Ie’2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝H)，产率为82％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.05(brs,1H),8.38(d,J＝7.2Hz,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.43(t,J＝8.0Hz,1H),7.36(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H),2.74(s,3H),1.60(s,9H)；ESI-MSm/z:260.1[M+H]+.
(4)合成化合物Ie’6-氟-2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)
称取实施例2制得的化合物Id6-氟-2-甲基喹啉-8-胺(X＝NH，R＝F)(7g，39.75mmol)参照步骤(3)操作过程，分离得白色固体化合物Ie’6-氟-2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)，产率为74％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.07(brs,1H),8.21(d,J＝10.8Hz,1H),7.91(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝8.4Hz,1H),6.95(dd,J＝8.8,Hz2.8Hz,1H),2.70(s,3H),1.60(s,9H)；ESI-MSm/z:278.1[M+H]+.
实施例4
(1)合成化合物If 8-苄氧基喹啉-2-甲醛(R＝H)
称取实施例3制得的化合物Ie 8-苄氧基-2-甲基喹啉(R＝H)(7g，28.07mmol)和二氧化硒(6.23g，56.14mmol)于圆底烧瓶(250mL)中，向烧瓶中加入1,4-二氧六环(160mL)，将反应体系加热至100℃搅拌12h。反应体系冷却至室温后，过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼、再用水洗一遍，有机相经过无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩。粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到黄色固体化合物If 8-苄氧基喹啉-2-甲醛(R＝H)，产率为76％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝10.32(brs,1H),8.27(d,J＝8.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.60–7.51(m,3H),7.49–7.44(m,1H),7.42-7.38(m,2H),7.35-7.31(m,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),5.49(s,2H)；ESI-MSm/z:265.1[M+H]+.
(2)合成化合物If 8-苄氧基-6-氟喹啉-2-甲醛(R＝F)
称取实施例3制得的化合物Ie 8-苄氧基-6-氟-2-甲基喹啉(R＝F)(4g，14.96mmol)参照步骤(1)操作过程，分离得棕色固体化合物If 8-苄氧基-6-氟喹啉-2-甲醛(R＝F)，产率为41％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝10.27(brs,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,1H),7.55(d,J＝7.2Hz,2H),7.42(t,J＝7.2Hz,2H),7.37-7.34(m,1H),7.08(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),6.95(dd,J＝10.8Hz,2.8Hz,1H),5.46(s,2H)；ESI-MSm/z:283.1[M+H]+.
(3)合成化合物If’2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝H)
称取实施例3制得的化合物Ie’2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝H)(20.13g，77.93mmol)，参照步骤(1)操作过程，分离得黄色固体化合物If’2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝H)，产率为80％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝10.25(brs,1H),8.99(brs,1H),8.51(d,J＝7.6Hz,1H),8.28(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.65(t,J＝6.1Hz,1H),7.50-7.48(m,1H),1.61(s,9H)；ESI-MSm/z:274.1[M+H]+.
(4)合成化合物If’6-氟-2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)
称取实施例3制得的化合物Ie’6-氟-2-甲基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)(2g，7.25mmol)参照步骤(1)操作过程，分离得黄色固体化合物If’6-氟-2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)，产率为75％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝10.22(brs,1H),9.03(brs,1H),8.35(d,J＝11.2Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.11-7.08(m,1H),1.61(s,9H)；ESI-MSm/z:292.1[M+H]+.
实施例5
(1)合成化合物Ig 1-(8-苄氧基喹啉-2-甲基)-4-三苯甲基哌嗪-2-羧酸乙酯(R＝H)
依次称取步骤(4)制得的化合物If 8-苄氧基喹啉-2-甲醛(R＝H)(1.6g，6.08mmol)和步骤(1)制得的化合物Ic 1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯(2.42g，6.08mmol)加入到圆底烧瓶中，再向烧瓶中加入100mL1,2-二氯乙烷，反应体系在25℃下搅拌2h，向体系中加入三乙酰氧基硼氢化钠(5.08g，24.32mmol)，反应体系继续搅拌12h；向烧瓶中加入水(100mL)、加入饱和碳酸钠水溶液调节至碱性(PH≈10)，加入二氯甲烷萃取三次，分离有机相，有机相用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；粗产物用硅胶柱层析分离纯化得到黄色固体化合物Ig(R＝H)，产率为86％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.64–7.05(m,23H),7.00(dd,J＝6.4Hz,2.0Hz,1H),5.42(s,2H),4.41–3.89(m,4H),3.64-3.63(m,1H),3.51–2.43(m,4H),2.03(m,1H),1.85(m,1H),1.28–1.23(m,3H)；ESI-MSm/z:648.3[M+H]+.
(2)合成化合物Ig 1-(8-苄氧基-6-氟喹啉-2-甲基)-4-三苯甲基哌嗪-2-羧酸乙酯(R＝F)
依次称取步骤(4)制得的化合物If 8-苄氧基-6-氟喹啉-2-甲醛(R＝F)(1.72g，6.11mmol)和步骤(1)制得的化合物Ic 1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯(2.45g，6.11mmol)参照步骤(1)操作过程，分离得黄色固体化合物Ig(R＝F)，产率为77％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.52–7.15(m,21H),6.93(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝10.8Hz,2.4Hz,1H),5.41(s,2H),4.18-3.86(m,4H),3.64(m,1H),3.48(m,2H),2.65(m,1H),1.67(m,2H),1.31–1.21(m,3H)；ESI-MSm/z:666.3[M+H]+.
(3)合成化合物Ig’1-[8-(叔丁氧羰基)氨基喹啉-2-甲基]-4-三苯甲基哌嗪-2-羧酸乙酯(R＝H)
依次称取步骤(4)制得的化合物If’2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯((R＝H)(3.4g，12.48mmol)和步骤(1)制得的化合物Ic1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯(5g，12.48mmol)参照步骤(1)操作过程分离得到白色固体化合物Ig’(R＝H)，产率为85％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.00(brs,1H),8.38(d,J＝7.2Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.45-7.35(m,7H),7.36-7.34(m,1H),7.33–7.20(m,7H),7.15(m,3H),4.13(q,J＝7.2Hz,2H),3.86(m,1H),3.66–3.31(m,2H),3.04(m,1H),2.60(m,1H),2.05(m,1H),1.61(s,9H),1.42–1.29(m,3H),1.26-1.24(m,3H)；ESI-MSm/z:657.3[M+H]+.
(4)合成化合物Ig’1-[8-(叔丁氧羰基)氨基-6-氟喹啉-2-甲基]-4-三苯甲基哌嗪-2-羧酸乙酯(R＝F)
依次称取步骤(4)制得的化合物If’6-氟-2-甲酰基喹啉-8-氨基甲酸叔丁酯(R＝F)(2g，6.89mmol)和步骤(1)制得的化合物Ic 1-三苯甲基哌嗪-3-羧酸乙酯(2.76g，6.89mmol)参照步骤(1)操作过程分离得到白色固体化合物Ig’(R＝F)，产率为83％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.02(brs,1H),8.19(d,J＝10.8Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.42–7.06(m,16H),6.92(d,J＝6.4Hz,1H),4.18-4.08(m,5H),3.48(m,2H),3.01-2.85(m,1H),2.56(m,1H),1.58(s,9H),0.88-0.84(m,3H)；ESI-MSm/z:675.3[M+H]+.
实施例6
(1)合成1-(8-苄氧基喹啉-2-甲基)哌嗪-2-羧酸乙酯Ih(R＝H)
称取实施例5制得的化合物Ig(R＝H)(5.2g，8.02mmol)于圆底烧瓶(250mL)中，再依次加入甲醇(110mL)、浓盐酸(10mL，市购)，反应体系在室温25℃下搅拌1h；向体系中加入水(100mL)，再加入饱和碳酸钠水溶液中和至碱性(PH≈10)。减压浓缩除去甲醇，用二氯甲烷萃取3次分离有机相，有机相用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩。粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到黄色油状体化合物Ih(R＝H)，产率为93％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H),7.52(d,J＝7.2Hz,2H),7.40–7.27(m,5H),7.03(dd,J＝7.2Hz,1.6Hz,1H),5.43(s,2H),4.21(q,J＝6.8Hz,2H),4.15–3.95(m,2H),3.40-3.38(m,1H),3.21–3.12(m,2H),3.05–2.97(m,1H),2.97–2.84(m,2H),2.53–2.37(m,1H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)；ESI-MSm/z:406.2[M+H]+.
(2)合成1-(8-苄氧基-6-氟喹啉-2-甲基)哌嗪-2-羧酸乙酯Ih(R＝F)
称取实施例5制得的化合物Ig(R＝F)(3.1g，4.65mmol)参照步骤(1)操作过程分离得到黄色油状体化合物Ih(R＝F)，产率为80％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.02(d,J＝8.8Hz,1H),7.78(d,J＝8.8Hz,1H),7.51(d,J＝7.2Hz,2H),7.40-7.31(m,3H),6.97(dd,J＝8.8Hz,2.8Hz,1H),6.82(dd,J＝10.8Hz,2.8Hz,1H),5.40(s,2H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),4.16-4.12(m,1H),3.93(d,J＝14.4Hz,1H),3.38-3.36(m,1H),3.23–3.09(m,2H),3.04–2.95(m,1H),2.95–2.84(m,2H),2.47–2.37(m,1H),1.28(t,J＝6.8Hz,3H)；ESI-MSm/z:424.2[M+H]+.
(3)合成1-[8-(叔丁氧羰基)氨基喹啉-2-甲基]哌嗪-2-羧酸乙酯Ih’(R＝H)
称取实施例5制得的化合物Ig’(R＝H)(7.0g，10.65mmol)于250mL圆底烧瓶中，再依次加入乙醇(100mL95wt％)、70mL盐酸(1M)，反应体系在室温25℃下搅拌1.5h。向体系中加入水(100mL)，再加入氢氧化钠水溶液(1M)中和至碱性(PH≈10)。减压浓缩除去乙醇，用二氯甲烷萃取分离有机相，有机相用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩。粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到白色固体化合物Ih’(R＝H)，产率为90％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.00(brs,1H),8.38(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.48-7.37(m,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),4.00(dd,J＝72.4Hz,14.4Hz,2H),3.33(t,J＝4.4Hz,1H),3.15(d,J＝4.4Hz,2H),3.08–2.98(m,1H),2.98–2.82(m,2H),2.43-2.38(m,1H),1.59(s,9H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)；ESI-MSm/z:415.2[M+H]+.
(4)合成1-[8-(叔丁氧羰基)氨基-6-氟喹啉-2-甲基]哌嗪-2-羧酸乙酯Ih’(R＝F)
称取实施例5制得的化合物Ig’(R＝F)(3.6g，5.33mmol)参照步骤(3)操作过程分离得到黄色固体化合物Ih’(R＝F)，产率为90％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝9.04(brs,1H),8.22(d,J＝10.8Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,1H),6.99(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),4.00(dd,J＝72.4Hz,14.4Hz,2H),3.32(t,J＝4.8Hz,1H),3.15(d,J＝4.4Hz,2H),3.05–2.99(m,1H),2.96–2.85(m,2H),2.42-2.36(m,1H),1.59(s,9H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)；ESI-MSm/z:433.2[M+H]+.
实施例7
(1)合成化合物Ij 2-氨基苯甲酸
称取化合物Ii 2-氨基苯甲酸甲酯(直接购买，30g，198.46mmol)在20wt％氢氧化钠水溶液(200mL，1250mmol)中回流3h；反应结束后中和至酸性PH≈4，用二氯甲烷萃取3次。有机相分离后加入无水硫酸镁干燥，再过滤、减压蒸馏浓缩得到白色固体化合物Ij，产率为94％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝7.95-7.93(m,1.6Hz,1H),7.35–7.29(m,1H),6.72–6.64(m,2H)；ESI-MSm/z:138.0[M+H]+.
(2)合成化合物Ik 9-氯-1,2,3,4-四氢吖啶
步骤(1)制得的化合物Ij(10g，73mmol)与环己酮(8mL，73mmol在三氯氧磷(80mL，850mmol)中回流12h；反应物反应完全后中和至碱性PH≈12；用二氯甲烷萃取三次，有机相用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；得到的粗产物经过硅胶柱层析分离纯化得到棕黄色固体化合物Ik，产率为88％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.18-8.15(m,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.68-7.64(m,1H),7.56-7.51(m,1H),3.13(t,J＝6.0Hz,2H),3.03(t,J＝6.4Hz,2H),2.0–1.9(m,4H)；ESI-MSm/z:218.1[M+H]+.
(3)合成化合物IL(n＝3)4-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁酸
步骤(2)制得的化合物Ik(2g，9.18mmol)、4-氨基丁酸(1.89g，18.36mmol)、苯酚(5g，53mmol)和吡啶(13.7mmol)混合加热至120℃搅拌10h；反应结束后，经过硅胶柱层析分离纯化得到黄色固体化合物IL(n＝3)，产率为92％。
1H NMR(400MHz,D2O):δ＝7.74(d,J＝8.8Hz,1H),7.55(t,J＝7.6Hz,1H),7.23-7.20(m,2H),3.53(t,J＝7.2Hz,2H),2.64(m,2H),2.42(t,J＝6.8Hz,2H),2.20(m,2H),1.90–1.83(m,2H),1.74(m,4H)；ESI-MSm/z:285.2[M+H]+.
(4)合成化合物IL(n＝4)5-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)戊酸
化合物Ik(4.65g，21.36mmol)和5-氨基戊酸(5g，42.68mmol)参照步骤(3)操作过程分离得棕黄色固体化合物IL(n＝4)，产率为10％。
1H NMR(400MHz,CDCl3+MeOD):δ＝8.29(d,J＝8.4Hz,1H),7.77-7.73(m,1H),7.69-7.66(m,1H),7.51-7.49(m,1H),3.89-3.86(t,J＝6.8Hz,2H),2.93(t,J＝6.0Hz,2H),2.2.62(t,J＝5.6Hz,2H),2.27(t,J＝6.8Hz,2H),1.87–1.86(m,4H),1.78–1.76(m,2H),1.64-1.60(m,2H)；ESI-MSm/z:299.2[M+H]+.
(5)合成化合物IL(n＝5)6-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)己酸
化合物Ik(4.15g，19.06mmol)和6-氨基己酸(5g，38.12mmol)参照步骤(3)操作过程分离得到棕黄色固体化合物IL(n＝5)，产率为74％。
1H NMR(400MHz,D2O+MeOD):δ＝7.97(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(t,J＝7.6Hz,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.37(t,J＝8.0Hz,1H),3.70(t,J＝6.8Hz,2H),2.76(m,2H),2.37(m,2H),2.28(t,J＝7.2Hz,2H),1.80(m,4H),1.68–1.64(m,2H),1.54–1.49(m,2H),1.35–1.29(m,2H)；ESI-MSm/z:313.2[M+H]+.
实施例8
(1)合成化合物Im(n＝5，R＝H)1-[(8-(苄氧基)喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯
实施例6制得的化合物Ih(1.23mmol，R＝H)和实施例7制得的化合物IL(1.23mmol，＝5)，二环己基碳二亚胺(1.23mmol)和1-羟基苯并三唑(1.23mmol)于圆底烧瓶(50mL)中，向烧瓶中加入二氯甲烷和甲醇混合物(体积比约为10:1，总体10mL)，再加入吡啶(3mL)，反应体系在50℃下搅拌反应12h。向烧瓶中加入水(50mL)，再用二氯甲烷萃取3次，有机相用无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩；粗产物经硅胶柱层析分离纯化得到黄色固体Im(n＝5，R＝H)，收率为70％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.97-7.94(m,2H),7.71-7.67(m,1H),7.53-7.49(m,3H),7.38–7.28(m,6H),7.04(dd,J＝6.8Hz,2.4Hz,1H),5.39(s,2H),4.25-4.13(m,3H),3.99-3.93(m,1H),3.59–3.44(m,5H),3.07(m,2H),2.69(m,2H),2.37–2.26(m,2H),1.89(m,4H),1.71-1.65(m,4H),1.47-1..42(m,2H),1.30–1.18(m,6H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ＝171.47–170.94(m),158.38,158.10,157.78,154.19,151.25,146.56,139.90,137.08,136.55,128.68,128.18(d,J＝74.9Hz),127.12,126.30,123.78,122.94,121.05(d,J＝28.3Hz),120.88–120.63(m),119.89(d,J＝11.0Hz),115.50,110.68,70.95,62.23(d,J＝35.4Hz),61.86(d,J＝9.3Hz),61.13,60.87,49.27–49.17(m),48.89(d,J＝36.2Hz),48.41–48.23(m),47.86(d,J＝33.7Hz),45.46,44.00,41.46,33.38,33.05–32.77(m),32.60(d,J＝26.4Hz),31.44,29.70,26.61(d,J＝8.2Hz),24.66(d,J＝16.6Hz),22.95,22.57,14.28(d,J＝15.2Hz)；ESI-MSm/z:700.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-羟基)喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸1
步骤(1)制得的化合物Im(0.3mmol，n＝5，R＝H)溶解于乙醇(95wt％，10mL)中，并转移到圆底烧瓶中，再加入氢氧化钠溶液(1M，6mL)，反应体系在25℃下搅拌2h；反应完全后，向反应体系中加入盐酸溶液(1M)中和至酸性、减压浓缩、加入甲醇溶解、过滤、滤液经无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩得到100mg黄色固体；再将此固体全部溶解于异丙醇(10mL)中，向此溶液中加入1,4-环己二烯(0.42mmol)、钯碳(0.28mmol)，反应体系加热回流搅拌12h；反应溶液冷却至室温25℃，过滤，减压浓缩，粗产物经硅胶板分离纯化得到黄色固体化合物1，收率为61％。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ＝13.50(brs,1H),8.51(t,J＝8.8Hz,1H),8.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.88-7.81(m,2H),7.74-7.68(m,2H),7.60-7.48(m,3H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),4.69-4.63(m,1H),4.47–4.43(m,1H),4.15–4.04(m,2H),3.86(m,2H),3.80–3.60(m,2H),3.50(m,1H),3.38(m,1H),3.24(m,1H),2.98(m,2H),2.66(m,2H),2.38-2.32(m,2H),1.84(m,4H),1.76(m,2H),1.52(m,2H),1.36(m,2H)；13CNMR(100MHz,MeOD):δ＝172.59,156.67,150.28,138.40,132.71,128.99(d,J＝16.0Hz),127.88,126.94–125.49(m),125.05(d,J＝20.5Hz),118.45(d,J＝47.5Hz),115.69,113.75,111.52,62.61,33.35,33.04–32.95(m),31.87(d,J＝24.1Hz),29.84,27.89,26.52–26.21(m),25.62(d,J＝55.2Hz),24.42(d,J＝56.0Hz),23.43,21.59,20.44；FTMS(ESI)calcdforC34H40N5O4:582.3082([M+H]+)；found:582.3068；Elemental analysis for C34H39N5O4·2.36CF3COOH·9.82H2O·1.31CH3CN(apparentMw＝1080.51):calculatedC,45.91；H,6.01；N,8.18；foundC,45.90；H,6.06；N,8.17.
实施例9
合成1-[(8-(苄氧基)-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im(n＝5，R＝F)
实施例6制得的化合物Ih(0.71mmol，R＝F)和实施例7制得的化合物IL(0.71mmol，n＝5)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im(n＝5，R＝F)，黄色固体，收率83％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.47(t,J＝8.4Hz,1H),8.22-8.19(m,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.76–7.64(m,2H),7.48-7.41(m,2H),7.45–7.27(m,4H),6.98(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),6.84(dd,J＝10.8Hz,2.8Hz,1H),6.20(brs,1H),5.37(s,2H),4.27-4.07(m,4H),4.02–3.90(m,3H),3.75–3.64(m,1H),3.56(m,1H),3.48–3.37(m,1H),3.27-3.17(m,3H),2.62-2.49(m,3H),2.42–2.31(m,2H),1.94–1.78(m,6H),1.74–1.64(m,2H),1.55–1.44(m,2H),1.29-1.21(m,4H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ＝171.36–170.63(m),155.70(dd,J＝16.4,7.3Hz),151.51,136.14,132.25,128.67,128.09,127.13,125.11,124.14,122.09,121.85,121.11,115.86,110.94,103.46–103.36(m),102.63(d,J＝20.1Hz),101.72,101.41,71.21,62.31,61.91,61.17,60.87,48.58,48.29–48.15(m),48.29–47.50(m),45.45,44.01,41.50,32.91–32.42(m),32.24(d,J＝26.0Hz),30.57,28.42(s),26.00,23.78,21.95,20.68,14.29(d,J＝16.3Hz)；ESI-MSm/z:718.4[M+H]+.
(2)合成1-[(6-氟-8-羟基喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸2
步骤(1)制得的化合物Im(0.35mmol，n＝5，R＝F)参照实施例8步骤(2)操作过程，分离纯化得到黄色固体化合物2，收率为7％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.28-8.24(m,1H),7.68-7.42(m,4H),7.26–6.99(m,2H),6.60-6.48(m,1H),4.59-4.45(m,1H),4.13(m,1H),3.83(m,1H),3.67–3.46(m,1H),2.93(m,2H),2.60(m,2H),2.46-2.35(m,1H),2.17-2.01(m,1H),1.97–1.46(m,8H),1.44–1.30(m,2H),1.27–1.16(m,6H)；13C NMR(100MHz,MeOD):δ＝158.90,156.63,143.39,138.36,132.69,125.14,124.96,124.69,118.70,115.66,104.59,101.94,101.74,99.99,56.09,41.85,29.87,27.92,25.76(d,J＝15.2Hz),24.69,24.08,23.52,21.60,20.45,20.03,15.89,15.51；FTMS(ESI)calcdforC34H39FN5O4:600.2988([M+H]+)；found:600.2974；Elemental analysis for C34H38 F N5O4·6CH3OH·6CH3CH2OH·0.96CH2Cl2·18H2O·3HCl(apparent Mw＝1581.85):calculated C,40.18；H,8.78；N,4.43；found C,40.13；H,8.58；N,4.42.
实施例10
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)喹啉)-2-甲基]-4-[4-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)丁酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝3，R＝H)
实施例6制得的化合物Ih’(0.72mmol，R＝H)和实施例7制得的化合物IL(0.72mmol，n＝3)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝3，R＝H)，黄色固体，收率93％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.94(d,J＝4.4Hz,1H),8.45-8.38(m,2H),8.21(d,J＝8.8Hz,1H),8.11(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),7.68-7.61(m,2H),7.48(t,J＝8.4Hz,1H),7.41-7.35(m,2H),4.31–4.13(m,4H),4.04-3.97(m,2H),3.66-3.56(m,2H),3.28-3.22(m,2H),3.06–3.0(m,1H),2.76–2.55(m,4H),2.22-2.18(m,4H),1.86-1.77(m,6H),1.58(s,9H),1.29-1.25(m,4H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ＝171.53,170.99,156.85–156.71(m),156.47(d,J＝30.3Hz),155.86,152.87,151.09,139.01,137.36–136.04(m),134.90,132.08,128.57,127.18(d,J＝6.0Hz),125.85,124.73(d,J＝8.7Hz),124.32,121.07(d,J＝27.1Hz),120.93–120.40(m),119.99,114.71,111.03,80.60,77.23,61.37–60.77(m),50.81,47.71,44.39,31.89,28.44,25.01,22.11,20.75；ESI-MSm/z:681.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基喹啉)-2-甲基]-4-[4-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)丁酰基]哌嗪-2-羧酸3
步骤(1)制得的化合物Im’(0.36mmol，n＝3，R＝H)溶解于乙醇(95wt％，10mL)中，并转移到圆底烧瓶中，再加入氢氧化钠溶液(1M，5mL)，反应体系在室温25℃下搅拌2h；反应完全后，向反应体系中加入盐酸溶液(1M)中和至酸性、减压浓缩、加入甲醇溶解、过滤、滤液经无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩得到226.5mg黄色固体；再将此固体全部溶解于二氯甲烷(10mL)中，向此溶液中加入三氟乙酸(6mL)，反应体系在室温25℃下搅拌2h。减压浓缩，再加入二氯甲烷溶解，再减压浓缩(如此反复3次)，粗产物经硅胶板分离纯化得到黄色固体化合物3，收率为15％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.67(d,J＝8.8Hz,1H),8.50(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,1H),7.85-7.80(m,2H),7.74-7.71(m,3H),7.57(t,J＝7.6Hz,1H),4.46–4.30(m,4H),4.07-4..01(m,2H),3.71-3.68(m,1H),3.16-3.06(m,4H),2.99(m,2H),2.71-2.64(m,4H),2.23-2.14(m,3H),1.95(m,4H)；13C NMR(100MHz,MeOD):δ＝157.77,157.35,156.63,150.00,140.82,132.56,128.26,127.87,125.67,125.58(d,J＝17.9Hz),124.83,121.45,118.55,116.05,113.22,111.40,56.09,51.08,40.03,37.52,30.40,29.85,29.33,27.88,24.49,23.55(d,J＝13.7Hz),23.48,21.62,20.45,16.07,16.17,15.59,15.69；FTMS(ESI)calcd for C32H37N6O3:553.2929([M+H]+)；found:553.2915；Elemental analysisfor C32H36N6O3·16.88CF3COOH·3H2O·9HCl(apparent Mw＝2858.37):calculated C,27.61；H,2.37；N,2.94；foundC,27.43；H,2.15；N,2.92.
实施例11
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[4-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)丁酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝3，R＝F)
实施例6制得的化合物Ih’(1.15mmol，R＝F)和实施例7制得的化合物IL(1.15mmol，n＝3)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝3，R＝F)，黄色固体，收率99％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.97(brs,1H),8.20(d,J＝10.8Hz,1H),8.08-8.01m,3H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),7.53(t,J＝6.8Hz,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,1H),6.97(dd,J＝8.4Hz,2.0Hz,1H),4.20–4.06(m,4H),3.73–3.64(m,2H),3.55-3.52(m,1H),3.43-3.36(m,1H),3.26–3.16(m,1H),3.09(m,2H),2.67(m,2H),2.55–2.42(m,3H),2.11–2.01(m,2H),1.91–1.80(m,4H),1.57(s,9H),1.29–1.22(m,5H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ＝171.03(dd,J＝14.8,6.8Hz),162.31,159.87,155.99,155.70,152.53,136.85(d,J＝13.7Hz),136.33,134.47,129.56,127.67,126.65(d,J＝180.7Hz),123.97(d,J＝5.2Hz),123.71–123.66(m),123.71–122.86(m),122.14(d,J＝22.1Hz),121.86–121.71(m),118.71,114.08,111.32,105.42,105.09,102.88,102.66,81.09,61.97–61.09(m),60.93,60.38,53.43,49.30,48.91,48.33,47.76(d,J＝10.7Hz),45.49,44.23,41.74,31.76,30.93(d,J＝12.0Hz),29.67(d,J＝4.9Hz),29.34,28.36,25.81,25.56,24.72(d,J＝7.4Hz),22.72,22.04,14.24(t,J＝14.3Hz)；ESI-MSm/z:699.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[4-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)丁酰基]哌嗪-2-羧酸4
步骤(1)制得的化合物Im’(0.35mmol，n＝3，R＝F)参照实施例10步骤(2)操作过程，分离得化合物4，黄色固体，收率25％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.56-8.54(m,1H),8.40-8.38(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.76–7.58(m,4H),7.48-7.39(m,2H),4.34-4.30(m,2H),4.20-4.18(m,1H),4.14-4.12(m,1H),4.02-3.95(m,2H),3.64-3.58(m,1H),3.09(m,3H),2.92(m,2H),2.62-2.60(m,4H),2.08-2.01(m,2H),1.85(m,3H),1.50(m,1H)；found:571.2823；Elemental analysis forC32H35FN6O3·17.1CF3COOH·2.8H2O·8.2HCl(apparentMw＝2900.3):calculatedC,27.39；H,2.27；N,2.90；foundC,27.65；H,2.52；N,2.48.
实施例12
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)喹啉)-2-甲基]-4-[5-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)戊酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝4，R＝H)
实施例6制得的化合物Ih’(0.72mmol，R＝H)和实施例7制得的化合物IL(0.72mmol，n＝4)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝4，R＝H)，黄色固体，收率97％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.28(t,J＝9.6Hz,1H),8.19-8.11(m,2H),7.76–7.58(m,3H),7.51–7.43(m,1H),7.40–7.35(m,2H),4.23–4.12(m,1H),4.10-4.06(m,1H),4.04-3.96(m,2H),3.87-3.85(m,2H),3.54(m,1H),3.37–3.30(m,1H),3.18–3.04(m,2H),2.90(m,2H),2.60-2.59(m,2H),2.50–2.30(m,2H),1.85(m,4H),1.77-1.72(m,3H),1.62-1.60(m,2H),1.47(s,9H),1.28-1.19(m,2H),1.17-1.10(m,2H)；13C NMR(100MHz,MeOD):δ＝174.12,172.13171.11,169.75,156.79(d,J＝42.4Hz),156.54–156.35(m),152.89,150.26,138.34,137.47–136.57(m),134.49,132.68,127.33(d,J＝8.3Hz),126.58(d,J＝10.9Hz),125.96,125.08(d,J＝17.5Hz),121.48(d,J＝21.0Hz),121.19–121.01(m),120.21,118.68,117.26,115.66,114.37(d,J＝9.2Hz),111.53,80.34,61.67–61.50(m),61.50–60.61(m),60.43,58.28,53.44,50.70,45.33,44.77,44.52,43.74,43.33,41.36,32.64,31.98–31.73(m),31.51(d,J＝21.7Hz),29.50(d,J＝8.0Hz),27.91,27.28,24.80(d,J＝17.4Hz),23.45,21.85,21.54(d,J＝6.9Hz),20.43(s),13.28(t,J＝8.2Hz).ESI-MSm/z:695.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基喹啉)-2-甲基]-4-[5-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)戊酰基]哌嗪-2-羧酸5
步骤(1)制得的化合物Im’(0.36mmol，n＝4，R＝H)参照实施例10步骤(2)操作过程，分离得化合物5，黄色固体，收率39％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.33-8.12(m,2H),7.17-7.66(m,2H),7.51-7.45(m,2H),7.40-7.25(m,2H),7.15-7.01(m,1H),4.61-4.51(m,1H),4.20-4.17(m,1H),3.97-3.75(m,5H),3.63-3.59(m,2H),2.91(m,2H),2.74–2.31(m,4H),1.86-1.56(m,9H)；13C NMR(100MHz,MeOD):δ＝172.38,156.67,150.28,138.36,132.69,125.09(d,J＝19.0Hz),118.67,115.69,111.53,56.08,31.24,29.57,27.92,24.72,23.54,21.61,21.33,20.44,16.08,15.89,15.70；FTMS(ESI)calcd for C33H39N6O3:567.30782([M+H]+)；found:567.30768；Elemental analysis for C33H38N6O3·0.4CF3COOH·11.52H2O(apparentMw＝818.96):calculated C,49.53；H,7.50；N,10.26；foundC,49.59；H,7.57；N,10.30.
实施例13
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[5-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)戊酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝4，R＝F)
实施例6制得的化合物Ih’(0.80mmol，R＝F)和实施例7制得的化合物IL(0.8mmol，n＝4)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝4，R＝F)，黄色固体，收率88％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.37(t,J＝8.4Hz,1H),8.20-8.06(m,2H),7.73-7.68(m,3H),7.57-7.55(m,1H),7.43-7.35(m,1H),7.16-7.11(m,1H),4.35–4.24(m,1H),4.21-4.01(m,4H),3.98-3.93(m,2H),3.63-3.51(m,2H),3.49–3.38(m,2H),3.27–3.11(m,2H),3.00(m,2H),2.70-2.69(m,2H),2.57-2.38(m,2H),1.95-1.94(m,4H),1.87–1.77(m,2H),1.75-1.67(m,2H),1.57(s,9H),1.35-1.33(m,2H),1.28-1.24(m,1H),1.20-1.18(m,1H)；13CNMR(100MHz,MeOD):δ＝172.08(d,J＝11.2Hz),171.04(d,J＝8.9Hz),169.75,156.64,152.52(d,J＝2.6Hz),150.28,138.36,136.70(d,J＝13.9Hz),134.33,132.68,127.92,125.65,124.99,122.71,122.49,118.67,117.25,111.54,110.42,104.52,102.82,102.59,80.86,60.80(d,J＝12.7Hz),60.45,58.33,45.30,44.67(d,J＝27.4Hz),43.73,43.32,41.34,32.63,31.59,29.54,27.91,27.21,23.57,21.56(d,J＝11.3Hz),20.43,13.21；ESI-MSm/z:713.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[5-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)戊酰基]哌嗪-2-羧酸6
步骤(1)制得的化合物Im’(0.71mmol，n＝4，R＝F)参照实施例10步骤(2)操作过程，分离得化合物6，黄色固体，收率10％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.33-8.31(m,1H),8.08-8.07(m,1H),7.79–7.59(m,3H),7.56–7.41(m,2H),6.66-6.63(m,1H),4.20-4.11(m,2H),4.07(t,J＝6.4Hz,1H),3.97(t,J＝6.8Hz,1H),3.93–3.82(m,2H),2.92(m,2H),2.82-2.70(m,2H),2.76–2.57(m,3H),2.57(m,1H),2.46–2.38(m,2H),1.86(m,3H),1.77-1.75(m,2H),1.65-1.60(m,2H),1.59–1.47(m,3H)；FTMS(ESI)calcdforC33H38FN6O3:585.29839([M+H]+)；found:585.29803.Elemental analysis for C33H37FN6O3·0.56CF3COOH·11.3H2O(apparentMw＝851.24):calculatedC,48.1；H,7.07；N,9.87；foundC,48.32；H,7.15；N,9.64.
实施例14
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝5，R＝H)
实施例6制得的化合物Ih’(0.72mmol，R＝H)和实施例7制得的化合物IL(0.72mmol，n＝5)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝5，R＝H)，黄色固体，收率84％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.94(brs,1H),8.50(d,J＝8.4Hz,1H),8.38-8.37(m,1H),8.17-8.15(m,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,1H),7.71–7.60(m,2H),7.47-7.39(m,3H),4.26-4.10(m,4H),4.01–3.91(m,3H),3.65-3.57(m,2H),3.45-3.41(m,2H),3.29-3.26(m,3H),2.61(m,2H),2.43–2.33(m,2H),1.89-1.84(m,6H),1.75–1.66(m,2H),1.58(s,9H),1.51-1.50(m,2H),1.34-1.31(m,2H),1.28-1.26(m,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ＝171.05,155.60,152.88,151.57,138.90,136.92,134.91,132.33,127.14,125.16,124.08,121.14,119.98,115.79,114.66,110.86,61.78,61.28(d,J＝19.0Hz),60.90,53.42,48.00,44.08,41.57,30.59,28.41(d,J＝5.8Hz),26.00,24.22–24.07(m),23.86(d,J＝25.4Hz),21.94,20.66,14.25；ESI-MSm/z:709.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸7
步骤(1)制得的化合物Im’(0.35mmol，n＝5，R＝H)参照实施例10步骤(2)操作过程，分离得化合物7，黄色固体，收率42％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.58(d,J＝8.4Hz,1H),8.30(d,J＝8.8Hz,1H),7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.76-7.71(m,2H),7.65–7.60(m,3H),7.53–7.45(m,1H),4.37–4.15(m,3H),3.87(t,J＝6.8Hz,2H),3.59-3.56(m,1H),3.09-3.0(m,4H),2.91(m,2H),2.73-2.67(m,1H),2.62(m,2H),2.43–2.33(m,1H),1.86(m,4H),1.80-1.72(m,2H),1.65-1.55(m,2H),1.40-1.36(m,2H)；13C NMR(150MHz,MeOD):δ＝156.70,155.91,150.28,140.86(d,J＝19.7Hz),138.42,134.97,132.66,128.26,127.87,125.65,125.17,124.95,121.44,118.68,115.73,111.55,56.08(t,J＝21.5Hz),50.94,39.98,37.28,31.51,29.75,27.92,25.86,23.90,23.46,21.61,20.45,16.04–15.72(m)；FTMS(ESI)calcdforC34H41N6O3:581.3242([M+H]+)；found:581.3230；Elemental analysis for C34H40N6O3·2CH3OH·2CH3CH2OH·7.15CF3COOH·7H2O·8.2HCl(apparent Mw＝1975.99):calculated C,32.98；H,4.52；N,4.25；found C,32.81；H,4.15；N,4.23.
实施例15
(1)合成1-[(8-((叔丁氧羰基)氨基)-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸乙酯Im’(n＝5，R＝F)
实施例6制得的化合物Ih’(1.16mmol,R＝F)和实施例7制得的化合物IL(1.16mmol，n＝5)参照实施例8步骤(1)操作过程，分离得化合物Im’(n＝5，R＝F)，黄色固体，收率85％。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ＝8.99(s,1H),8.45(d,J＝8.4Hz,1H),8.24-8.17(m,2H),8.05(d,J＝8.4,Hz,1H),7.68-7.64(m,2H),7.41(t,J＝8.0Hz,1H),7.00(dd,J＝8.8Hz,2.8Hz,1H),4.28–4.08(m,4H),4.05–3.93(m,4H),3.67–3.57(m,2H),3.45-3.40(m,1H),3.26-3.23(m,3H),3.1-3.02(m,1H),2.63-2.60(m,2H),2.55-2.48(m,1H),2.40-2.34(m,2H),1.89-1.84(m,6H),1.72-1.67(m,2H),1.59(s,9H),1.54–1.47(m,2H),1.35–1.24(m,4H)；ESI-MSm/z:727.4[M+H]+.
(2)合成1-[(8-氨基-6-氟喹啉)-2-甲基]-4-[6-((1,2,3,4-四氢吖啶)-9-氨基)己酰基]哌嗪-2-羧酸8
步骤(1)制得的化合物Im’(0.14mmol,n＝5,R＝F)参照实施例10步骤(2)操作过程，分离得化合物8，黄色固体，收率78％。
1H NMR(400MHz,MeOD):δ＝8.29(d,J＝8.8Hz,1H),8.06-7.98(m,1H),7.76-7.64(m,2H),7.50-7.46(m,2H),6.65-6.60(m,2H),4.16-4.13(m,1H),4.02–3.82(m,4H),3.75-3.70(m,1H),3.60-3.55(m,1H),2.91(m,2H),2.61(m,2H),2.61-2.34(m,2H),1.86-1.74(m,6H),1.57-1.56(m,2H),1.39-1.37(m,2H),1.28–1.13(m,3H)；13C NMR(100MHz,MeOD):δ＝172.64,161.35,156.62,150.23,138.37,132.67,125.13,124.93,120.86,118.68,115.65,111.48,98.44,96.88,96.66,63.37,49.80,43.41,31.65,29.78,27.89,25.79(d,J＝8.0Hz),24.07(d,J＝9.9Hz),23.44,21.59,20.43；FTMS(ESI)calcdforC34H40FN6O3:599.3148([M+H]+)；found:599.3141；Elemental analysis for C34H39 FN6O3·5.48CF3COOH·17.78H2O·0.3CH3CN(apparentMw＝1555.06):calculated C,35.16；H,5.20；N,5.67；found C,35.02；H,5.18；N,5.65.
效果实施例
(1)胆碱酯酶抑制活性测试方法：
乙酰胆碱酯酶酶源采用电鳐冻干粉，丁酰胆碱酯酶采用马血清冻干粉，实验前用磷酸二氢钾缓冲液(PH＝7.4)稀释至0.2U/mL，用比色法测定AChE和BuChE的抑制活性。具体实验步骤如下：
A.母液配制：①0.1M PBS buffer pH＝7.40：准确配制0.1M Na2HPO4水溶液和0.1MKH2PO4水溶液；然后将Na2HPO4水溶液与KH2PO4水溶液按体积比约为4:1混合，最后用pH计检测，并将pH值调至7.4。②0.2U/mL AChE/BuChE：用0.1M PBS buffer将AChE/BuChE配制成0.2U/mL溶液，现配现用。③1mM5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)：用0.1M PBS buffer将DTNB配制成1mM溶液，现配现用。④1mM碘代硫代乙酰胆碱(S-acetylthiocholineiodide，ATCI)或者碘化硫代丁酰胆碱(S-butyrylthiocholine iodide，BTCI)：用0.1M PBSbuffer将ATCI/BTCI配制成1mM溶液，现配现用。⑤待测化合物先用DMSO配成10mM，再用0.1M PBS稀释至所需浓度。
B.实验步骤：在透明的96微孔板中：①空白组：每孔加入50μL 0.1M PBS，25μL 1mMATCI/BTCI，125μL 1mMDTNB。②对照组：每孔加入50μL 0.1 M PBS，25μL 1mM ATCI/BTCI，125μL 1mM DTNB。③实验组：每孔加入25μL 0.1M PBS，25μL 1mM ATCI/BTCI，125μL 1mMDTNB，25μL待测化合物。④上述三组溶液在室温25℃下静置30min后，空白组每孔加50μL0.1M PBS，对照组和实验组每孔加50μL AChE/BuChE(立即开始计时)，然后立即开始用酶标仪测试在405nm处的吸光度值(每5分钟读数一次，共35分钟)，并记录酶标仪第一次读数时间，作出时间与吸光度值的线性曲线，并计算其切线斜率；然后再作化合物浓度对数与斜率的线性关系图，GraphPad Prism 5软件计算50％抑制时的摩尔浓度IC50值。所有样品均平行测三次。
酶活性抑制率计算公式：
Figure BDA0002018977070000241
ω表示抑制率；F0表示不含酶和待测化合物时，溶液的背景吸光度；F1表示含有酶，但不加待测化合物时的吸光度；F2表示同时含有酶和待测化合物的吸光度。
(2)β-淀粉样蛋白的自聚集抑制活性测试方法：
β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)冻干粉溶解于六氟异丙醇，室温25℃静置16个小时进行解聚，再在室温25℃下用氮气流吹除六氟异丙醇，得解聚的Aβ1-42用DMSO溶解配制成浓度为200μM溶液。用荧光法测定化合物的Aβ自聚集抑制活性。具体步骤：
制备Aβ1-42单体：①称取0.16mg Aβ1-42于离心管中，加入160μL 1,1,1,3,3,3-六氟异丙醇(HFIP)配成1mg/mL溶液，在室温25℃下，300rmp解聚过夜。②用氩气将已解聚的Aβ1-42吹干，再用隔膜真空泵抽干3h。③将DMSO加入Aβ1-42中，配成200μM溶液。
制备待测化合物溶液和ThT溶液：①先将化合物用DMSO配成10mM，再用PBS稀释至200μM。②称取一定量固体硫黄素T(Thioflavin T,ThT)溶解于PBS中配成10mM ThT-PBS母液，再取一定量母液稀释成5μM ThT-PBS溶液。
配置待测溶液及其孵育：①空白组母液：200μL PBS溶液。②对照组母液：20μL PBS+20μL Aβ1-42(200μM)+160μL PBS。③样品组母液：20μL化合物(200μM)+20μL Aβ1-42(200μM)+160μL PBS。④将上述三组母液分别放入离心管中，在37℃下，300rpm震荡孵育72h。
酶标仪检测荧光值：将已经孵育好的三组待测液加入黑色96微孔板：①空白组：50μLPBS+100μL ThT(5μM)。②对照组：50μL对照组母液+100μL ThT(5μM)。③样品组：50μL样品组母液+100μL ThT(5μM)。④静置30 min后，读取激发波长为435 nm，发射波长为485 nm的荧光值，计算化合物对Aβ1-42聚集的抑制率。所有样品均平行测三次。
Aβ1-42聚集抑制率计算公式
Figure BDA0002018977070000251
ω表示抑制百分率；F0表示不含Aβ1-42和待测化合物时，硫黄素T溶液的背景荧光值；F1表示含Aβ1-42，但不加待测化合物时的荧光值；F2表示同时含有Aβ1-42和待测化合物的荧光值。
依照上述方法测试所得部分化合物的活性结果列表如下：
表1胆碱酯酶抑制IC50及Aβ自聚集抑制率
Figure BDA0002018977070000252
其中，“-”表示未做此实验；
从表1看，每一个化合物对胆碱酯酶都具有一定的抑制作用，除了4和6外，均处于亚微摩尔级，其中最好的是化合物5，AChE和BuChE的IC50值分别为0.089μM和0.06μM。同时，除了化合物2、4、6外，其他化合物对Aβ1-42的自聚集抑制率均优于对照物(58.3％)。最好的是化合物5达到91.8％。综合两方面的活性数据，化合物5具有最好的效果，有望成为多靶点抗阿茨海默症药物的先导化合物。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，其特征在于为式I化合物或其药学上可接受的盐；
Figure FDA0003328279490000011
其中，X为O或NH，n为2～7的整数，R为氢或氟。
2.根据权利要求1所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，其特征在于：
所述的药用盐选自盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐、草酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、磺酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、酒石酸盐或琥珀酸盐。
3.权利要求1或2所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)以N,N'-二苄基乙二胺和2,3-二溴丙酸乙酯为原料，以甲苯为溶剂，在碱性条件下反应，得到化合物Ia；在酸性条件下，经过钯碳催化和氢气的作用下化合物Ia脱苄基保护发生加氢还原反应，得到哌嗪Ib；然后再用三苯基氯甲烷保护哌嗪Ib上受空间位阻小的氨基，得到化合物Ic；
(2)在酸催化下，邻氨基苯酚或苯胺与乙醛进行缩合环化，得到化合物Id；化合物Id经苄基或叔丁氧羰基保护羟基或氨基，得到化合物Ie或Ie’，化合物Ie或Ie’经SeO2氧化，得到2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’；
(3)步骤(1)制得的化合物Ic与步骤(2)制得的2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’经三乙酰氧基硼氢化钠还原得到化合物Ig或Ig’；化合物Ig或Ig’在酸性条件下脱去三苯基氯甲烷保护，得到化合物Ih或Ih’；
(4)邻氨基苯甲酸甲酯经碱性水解得到化合物Ij；化合物Ij与环己酮在三氯氧磷作用下缩合，得到9-氯他克林Ik，9-氯他克林Ik与氨基酸在惰性溶剂下反应，得到化合物IL；
(5)步骤(4)制得的化合物IL与步骤(3)制得的化合物Ih或Ih’进行偶联反应，得到化合物Im或Im’；化合物Im或Im’经过酯的碱性水解、羟基或氨基脱保护，得到2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物；
所述的化合物Ia、哌嗪Ib、化合物Ic、化合物Id、化合物Ie、化合物Ie’、2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If、2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If’、化合物Ij、9-氯他克林Ik和化合物IL的结构式依次如下所示：
Figure FDA0003328279490000021
所述的化合物Ig或Ig’的结构式如下所示：
Figure FDA0003328279490000022
所述的化合物Ih或Ih’的结构式如下所示：
Figure FDA0003328279490000023
所述的化合物Im或Im’的结构式如下所示：
Figure FDA0003328279490000031
4.根据权利要求3所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)以N,N'-二苄基乙二胺和2,3-二溴丙酸乙酯为原料，以甲苯为溶剂，在碱性条件下20～50℃反应0.5～2h；所得产物经硅胶柱层析分离纯化，得到化合物Ia；在酸性条件下，以乙醇为溶剂，以钯碳为催化剂，化合物Ia和氢气20～50℃反应10～12h，所得产物经过过滤、水洗、浓缩，得到哌嗪Ib；在碱性条件下，以二氯甲烷为溶剂，以哌嗪Ib和三苯基氯甲烷为反应物，20～50℃反应10～12h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ic；
(2)在酸催化下，邻氨基苯酚或苯胺与乙醛60～120℃缩合环化，所得产物经还原或不经还原后进行柱层析或重结晶提纯，得到化合物Id(2-甲基-8羟(氨)基喹啉)；化合物Id经卤化苄或二碳酸二叔丁酯保护，得到化合物Ie或Ie’；化合物Ie或Ie’和二氧化硒80～100℃氧化反应10～12h以氧化其2-位甲基，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’；
(3)以三乙酰氧基硼氢化钠为还原剂，以步骤(1)制得的化合物Ic与步骤(2)制得的2-甲酰基-8-羟(氨)基喹啉衍生物If或If’为反应物，20～50℃还原反应10～12h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ig或Ig’；在酸性条件下，Ig或Ig’脱去三苯基氯甲烷保护，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Ih或Ih’；
(4)2-氨基苯甲酸甲酯在浓度为20～25wt％的氢氧化钠水溶液中加热回流2～3h，然后分离有机相浓缩干燥，得到化合物Ij；在三氯氧磷作用下，化合物Ij与环己酮回流反应10～12h，所得产物碱化后经柱层析或重结晶提纯，得到9-氯他克林Ik；吡啶碱性条件下，9-氯他克林Ik与氨基酸在惰性溶剂下120～130℃反应8～10h，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物IL；
(5)在吡啶碱性条件下，以二氯甲烷和甲醇混合物为溶剂，二环己基碳二亚胺为偶联剂，1-羟基苯并三唑为缩合剂，步骤(3)制得的化合物Ih或Ih’与步骤(4)制得的化合物IL发生偶联反应，所得产物经柱层析或重结晶提纯，得到化合物Im或Im’；在氢氧化钠水溶液碱性条件下，以乙醇为溶剂，化合物Im或Im’20～50℃反应2～3h，产物纯化；然后所得产物进行羟基或氨基脱保护，其中，羟基脱苄基保护以异丙醇为溶剂，1,4-环己二烯和钯碳为催化剂，加热回流10～12h；氨基脱叔丁氧羰基保护以二氯甲烷为溶剂，以三氟乙酸为酸，20～50℃反应1～2h，所得产物经柱层析或重结晶提纯得到最终化合物2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物。
5.权利要求1或2所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物在制备防治老年痴呆症药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物在制备防治老年痴呆症药物中的应用，其特征在于：
所述的老年痴呆症为阿尔兹海默症。
7.根据权利要求5所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物在制备防治老年痴呆症药物中的应用，其特征在于：
所述的药物可含有一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
8.根据权利要求5所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物在制备防治老年痴呆症药物中的应用，其特征在于：
所述的药物的制剂为片剂、注射液、脂质体纳米粒或控释剂。
9.一种防治老年痴呆症药物，其特征在于含有有效量的权利要求1或2所述的2-羧基哌嗪连接的他克林-8-氨基(羟基)喹啉衍生物，余量为药用辅料或其它可配伍的药物。
10.根据权利要求9所述的防治老年痴呆症药物，其特征在于：
所述药用辅料为溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂和粘合剂中的至少一种。
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