CN110025699A - 具有心肌保护作用的彝药复方、有效组分组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及彝药技术领域，特别涉及一种具有心肌保护作用的彝药复方、有效组分组合物及其应用。本发明具体公开了具有心肌保护作用的彝药复方，包括以下组分：云南野生滇紫参、辣木籽、高山红景天、麂胎粉、鹿子角茸、海龙、云三七粉、甘松、红参、黄芪、黑顺片、刺五加、熟地黄、淫羊藿和丹参。本发明还具体公开了具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物。本发明提供的彝药复方或彝药复方的有效组分组合物可有效保护心肌细胞。

Description

具有心肌保护作用的彝药复方、有效组分组合物及其应用
技术领域
本发明涉及彝药技术领域，特别涉及一种具有心肌保护作用的彝药复方、有效组分组合物及其应用。
背景技术
进入21世纪，心力衰竭(Heart Failure，HF)成为心血管防治的主战场。心力衰竭的主要病因在近几十年内发生了很大变化，早在20年前风湿性瓣膜病占据心力衰竭的第一病因(约50％)，而2000年第一位则是冠心病(55.7％)，第二位是高血压(13.9％)，第三位是风湿性瓣膜病(8.9％)，再其次为扩张性心肌病(7.5％)，其它各种病因占14％，可见由动脉粥样硬化导致的冠心病和高血压已成为心力衰竭最主要的两大病因。流行病学资料表明，我国心力衰竭的平均患病率为0.9％，在35-74岁成年人中约为400万患者，预计未来10年心力衰竭的发病还将成倍增加。由于心力衰竭长期治疗和反复加重住院所花费的巨额费用，使得本病成为21世纪最为严重的全球性公共卫生问题，因此，深化心力衰竭研究与防治刻不容缓。
因为心力衰竭涉及的病理生理改变相当复杂，现代医学对它的认识也在不断改进，从过去的血流动力学障碍机制，转变为目前公认的神经内分泌细胞因子机制和心室重塑机制。相应心力衰竭的治疗决策也发生了重大革命，从传统的“强心、利尿、扩血管”模式，转变为针对神经内分泌细胞因子的生物学干预。此外，纠正与改善心肌细胞能量代谢紊乱也逐渐引起关注。虽然近20年来心力衰竭的治疗已由单纯改善血流动力学的传统模式转向对神经内分泌系统激活进行干预为主的模式，但由于近年对心力衰竭病理机制的认识并无新的突破，其药物治疗的发展也随之进入平台期。在原来有效的神经内分泌抑制基础上，加用药物进一步降低死亡率、病残率的作用已经愈来愈有限；而非药物治疗如心室同步化治疗(CRT)在心治疗力衰竭方面取得相当的进展，但由于技术操作难度大、费用高、适应症局限等问题尚难以广泛造福心力衰竭患者。现阶段如何进一步提高心力衰竭临床疗效和改善患者预后的确是一个非常具有挑战性的难题。
综上，亟待有一种具有心肌保护作用的药物出现。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种具有心肌保护作用的彝药复方，可起到有效的心肌保护作用。
本发明还有一个目的是提供一种具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，可起到有效的心肌保护作用。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种具有心肌保护作用的彝药复方，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参10-30份；辣木籽3-15份、高山红景天10-30份、麂胎粉5-20份、鹿子角茸1-5份、海龙5-20份、云三七粉3-12份、甘松10-20份、红参10-30份、黄芪10-40份、黑顺片3-20份、刺五加10-30份、熟地黄10-40份、淫羊藿10-20份和丹参10-30份。
优选的是，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参14-16份；辣木籽5-7份、高山红景天19-22份、麂胎粉9-11份、鹿子角茸2-4份、海龙9-11份、云三七粉9-12份、甘松14-16份、红参14-16份、黄芪29-31份、黑顺片14-16份、刺五加14-16份、熟地黄18-22份、淫羊藿10-14份和丹参18-22份。
优选的是，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参 15份；辣木籽 6份、高山红景天 20份、麂胎粉 10份、鹿子角茸 3份、海龙 10份、云三七粉 10份、甘松 15份、红参 15份、黄芪 30份、黑顺片 15份、刺五加15份、熟地黄 20份、淫羊藿 12份和丹参 20份。
本发明还有一个目的是提供具有心肌保护作用的彝药复方在制备心肌保护药物中的应用。
一种具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物1-100份；辣木籽油或辣木籽多酚0.01-100份；
红景天苷或红景天素 10-300份；PLGF-1或PLGF-2 1×10-6-0.1份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 100-1×105份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100-1×105份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷1-100份；
甘松新酮或甘松挥发油，100-1×104份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 1-100份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 1-100份；
附子多糖或附子苷，25-5×105份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 20-1000份；
地黄多糖、地黄低聚糖 0.01-500份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 1-100份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 1-100份。
优选的是，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物18-22份；
辣木籽油或辣木籽多酚 18-22份；红景天苷或红景天素 18-22份；
PLGF-1或PLGF-2 4×10-6-6×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 98-102份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 98-102份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷18-22份；
甘松新酮或甘松挥发油 18-22份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 18-22份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 18-22份；
附子多糖或附子苷 18-22份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 9-11份；
地黄多糖、地黄低聚糖 198-202份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 18-22份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 9-11份。
优选的是，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物20份；
辣木籽油或辣木籽多酚 20份；红景天苷或红景天素 20份；
PLGF-1或PLGF-2 5×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 100份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷20份；
甘松新酮或甘松挥发油 20份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 20份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 20份；
附子多糖或附子苷 20份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 10份
地黄多糖、地黄低聚糖 200份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 20份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 10份。
本发明还有一个目的是提供具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物在制备心肌保护药物中的应用。
本发明至少包括以下有益效果：
本发明提供的具有心肌保护作用的彝药复方，方中以云南野生滇紫参活血补血、祛风通络；红参大补元气、复脉固脱；黄芪补气固表、利尿消肿，共为君药。臣药以麂胎粉补益肾精、益气养血，鹿子角茸壮元阳、补气血、益精髓，海龙补肾壮阳止喘，淫羊藿温阳祛风除湿，丹参活血化瘀、止痛养血安神。佐以高山红景天健脾益气、散瘀养心，辣木籽益气健脾、安神止痛，云三七粉活血定痛，强心生津，甘松理气止痛，健脾养心，黑顺片补火助阳，刺五加扶正固本、补肾活血，熟地黄补血养阴、填精益髓。以蜂蜜调服和中益气为使药。全方攻补兼施，标本同治，共奏益气活血、填精养心、温阳通脉之效。
彝药复方可通过保护心衰患者受损心肌，对紊乱状态下的心肌收缩性、兴奋性及电传导性进行修复从而产生有效的心肌保护作用；
彝药复方可通过提升肺功能，降低衰竭心肌恶化风险，从而对心衰病情的进展产生一定的遏制作用；
彝药复方改善肺功能，可间接降低右心室的心脏后负荷，进而保护心肌、促进心脏结构和功能恢复；
彝药复方对衰竭心肌具有积极的保护作用，从而促成心肌功能恢复、有效改善了患者生存质量；
彝药复方对衰竭心肌具有积极的保护作用，从而促成心肌功能恢复、提高了患者运动耐力；
彝药复方通过降低IL-6与IL-1β浓度，抑制体内炎症因子的释放，增加心肌收缩力，抑制心室重构，保护心功能；
彝药复方的有效组分组合物对体外缺氧处理的人心肌细胞电生理紊乱状态具有双向调节作用，可稳定心肌细胞间的电信号传导，纠正体外培养的人心肌细胞缺氧所致心律失常，有效恢复其正常搏动节律，维持缺氧状态下人心肌细胞的有效收缩和持续的兴奋传导，起到积极地心肌细胞保护作用。
综上，本发明提供的彝药复方及彝药复方的有效组分组合物可有效保护心肌细胞，进而恢复衰竭心肌的心脏功能。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为ELISA法检测血清IL-6的标准曲线；
图2为安慰剂对照组和彝药复方组中血清IL-6含量的箱线图；
图3为ELISA法检测血清IL-1β的标准曲线；
图4为安慰剂对照组和彝药复方组中血清IL-1β含量的箱线图；
图5为不添加彝药复方有效组分组合物的常规对照培养人心肌细胞免疫荧光鉴定图；
图6为添加彝药复方有效组分组合物辅助培养的人心肌细胞免疫荧光鉴定图；
图7不添加与添加彝药复方有效组分组合物的人心肌细胞在缺氧环境下电生理检测结果对比图，其中，图7a和图7b显示为常规培养心肌细胞缺氧不耐受不耐受出现心律失常；图7c和图7d显示为彝药复方(彝药复方有效组分组合物)辅助培养组缺氧耐受的心肌细胞恢复正常。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
实施例1
一种具有心肌保护作用的彝药复方，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参10份；辣木籽3份、高山红景天10份、麂胎粉5份、鹿子角茸1份、海龙5、云三七粉3份、甘松10份、红参10份、黄芪10份、黑顺片3份、刺五加10份、熟地黄10份、淫羊藿10份和丹参10份。
实施例2
一种具有心肌保护作用的彝药复方，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参30份；辣木籽15份、高山红景天30份、麂胎粉20份、鹿子角茸5份、海龙20份、云三七粉12份、甘松20份、红参30份、黄芪40份、黑顺片20份、刺五加30份、熟地黄40份、淫羊藿20份和丹参30份。
实施例3
一种具有心肌保护作用的彝药复方，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参25份；辣木籽10份、高山红景天25份、麂胎粉15份、鹿子角茸4份、海龙15份、云三七粉11份、甘松17份、红参22份、黄芪35份、黑顺片18份、刺五加24份、熟地黄30份、淫羊藿16份和丹参25份。
实施例4
一种具有心肌保护作用的彝药复方，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参15份；辣木籽6份、高山红景天20份、麂胎粉10份、鹿子角茸3份、海龙10份、云三七粉10份、甘松15份、红参15份、黄芪30份、黑顺片15份、刺五加15份、熟地黄20份、淫羊藿12份和丹参20份。
实施例5
一种具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物1份；
辣木籽油或辣木籽多酚0.01份；
红景天苷或红景天素10份；PLGF-1或PLGF-2 1×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类100份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷1份；
甘松新酮或甘松挥发油，100份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 1份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 1份；
附子多糖或附子苷，25份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 20份；
地黄多糖、地黄低聚糖0.01份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙1份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 1份。
实施例6
一种具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物22份；
辣木籽油或辣木籽多酚 22份；红景天苷或红景天素 22份；
PLGF-1或PLGF-2 6×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 102份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 102份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷 22份；
甘松新酮或甘松挥发油 22份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 22份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 22份；
附子多糖或附子苷 22份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 11份；
地黄多糖、地黄低聚糖 202份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 22份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 11份。
实施例7
一种具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物20份；
辣木籽油或辣木籽多酚 20份；红景天苷或红景天素 20份；
PLGF-1或PLGF-2 5×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 100份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷 20份；
甘松新酮或甘松挥发油 20份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 20份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 20份；
附子多糖或附子苷 20份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 10份
地黄多糖、地黄低聚糖 200份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 20份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 10份。
本申请人基于彝族医药的诊断和治疗思路，充分尊重彝族医药传统用药和剂型习惯，比如以云南白药为代表的散剂，按照彝族医药传统习惯选择剂型，并结合现代医学实验技术，将传统用药与药物有效成分提取工艺相结合，创新性凝练出对心血管疾病所致损伤心肌具备保护作用的彝药复方用于衰竭心肌的挽救治疗。本发明提供的彝药复方通过就地取材选用新鲜药材和多种给药方式并进的综合疗法，比如：彝药复方中加入常规辅料(淀粉、植物油等)，按常规方法制成临床上可接受的片剂、散剂、胶囊剂或颗粒剂口服治疗；或者取彝药复方的有效组分组合物开发为静脉注射剂进行衰竭心肌的挽救治疗，在确保用药和治疗安全的前提下，按照彝族医药理论指导组方，尊重彝医习惯和传统给药方式，并进一步结合现代技术手段加以应用，以“彝族常用，历史悠久，来源清楚，疗效确切”作为衡量标准，在临床及基础研究的转化应用中取得显著效果，以期能为将来开发彝族药及推进彝族医药产业化和现代化发展提供充实的前期研究基础。
具体临床研究及应用如下：
一、彝药复方对慢性心力衰竭患者的心肌保护作用及对外周血炎症因子表达的影响
(1)病例入选标准
①符合中华医学会心血管病学分会、中华心血管病杂志编委会2007年修订的“慢性心力衰竭诊断标准”；
②符合中医心衰病气虚血瘀、胸阳不振诊断标准；
③心功能分级标准按美国纽约心脏病协会(NYHA)标准进行,全部病例均为心功能II-IV级；
④年龄在35-75岁；
⑤签署知情同意书、同意参加试验者。
同时具备上述五个诊断条件即可纳入。
(2)病人资料
依据上述入选标准，纳入2015年7月-2016年8月于我院治疗的患者60例，全部病例选自住院和门诊患者，采用随机数字表，将符合“纳入标准”患者随机单盲分为2组：安慰剂对照组、彝药复方治疗组。两组均进行基础治疗，彝药复方治疗组在基础治疗的基础上口服彝药复方颗粒剂(应用本申请提供的实施例4或实施例7制备获得的颗粒剂)1袋/次，日2次治疗，安慰剂对照组在基础治疗的基础上口服安慰剂治疗，共连续口服治疗3个月。
(3)观察指标
①心功能指标：
左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)和左心室射血分数(LVEF％)等，采用荷兰飞利浦公司IE33超声心动图仪进行测定。
②肺功能指标：
1秒钟用力呼气容积(FEV1)、1秒钟用力呼气容积占预计值百分比(FEV1％)、FEV1/FVC。肺功能测定方法采用德国耶格公司生产的肺功能测量仪测定，使用流量-容积曲线测定最大用力呼气，每例3次，至少2次的第1秒用力呼气容积(FEV1)误差<5％，取FEV1较大的1次测定的各项数值，包括肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量FEV1和FEV1/FVC(％)。
③体重指数(BMI)
BMI＝体重(kg)/身高的平方(m2)。
④6 min步行试验(6MWT)
患者在无带氧的情况下，在直线距离上以尽可能快的速度走6min，最后测出行走的总距离，即为6分钟行走距离；
⑤明尼苏达心衰生活质量调查表(MLHFQ)问卷调查(入选后、三个月)；
⑥其他指标
采用双抗体夹心ELISA法检测外周血血清中IL-1β、IL-6水平。
(4)研究结果
①一般资料比较
安慰剂对照组纳入患者共33例，男18例，女15例，平均(68±10.68)岁；彝药复方治疗组纳入患者27例作为对照，男11例，女16例，平均(67.3±9.98)岁。两组人群在性别、年龄等方面比较均无统计学差异(P＞0.05)，具有可比性(见表1、表2)。
表1两组的年龄比较情况
F＝0.143，P＝0.706＞0.05，方差齐。
经t检验，t＝-0.258，P＝0.797>0.05，提示两组人群的年龄比较无明显差异。
表2两组的性别比较情况
经X2检验，X2＝1.149，P＝0.284>0.05，提示两组的性别比较无明显差异。
以上资料表明两组在性别、年龄等方面基本相似，经统计学处理，P>0.05，具有可比性。
表3 Case Processing Summary
如上述表3所示，入选的58例均为有效值。
②两组治疗前后患者心功能的变化
如表4所示，彝药复方治疗组相对安慰剂对照组，彝药复方治疗组的心率有回升，基本接近正常水平，且经过三个月不同治疗后，对照组增大的LVIDd、LVIDs仍有增大趋势，LVEF有一定程度恢复，而彝药复方治疗组可见LVIDd、LVIDs及LVEF都有较为明显的恢复，差异有统计学意义(P＜0.05)。
表4治疗前后患者心功能变化
注:心率:次/分；LVIDd:左室舒张末期内径,mm；LVIDs:左室收缩末期内径，mm；LVEF:左室射血分数,％.
【注：心脏的结构和功能正常取决于心肌收缩性、兴奋性和电传导性的完整及稳态，心衰患者因心肌重塑所致心肌收缩性、兴奋性及电传导性紊乱，出现心脏结构改变及功能损伤，受损的心肌难以代偿心脏的正常生理功能，出现心脏收缩和/或舒张功能障碍进而影响全身循环血量，导致全身各主要脏器血液灌注不足从而形成一系列严重的临床综合征。经彝药复方治疗后，心衰患者心脏结构和功能都有不同程度的恢复，说明彝药复方可通过保护心衰患者受损心肌，对紊乱状态下的心肌收缩性、兴奋性及电传导性进行修复从而产生有效的心肌保护作用。】
③两组治疗前后患者肺功能和体重指数的变化
彝药复方治疗组较治疗前反映肺功能的指标FEV1％、FEV1/FVC％均明显改善(P＜0.05)，而安慰剂对照组治疗前后则无明显差异(P＞0.05)。两组治疗前后BMI均有不同程度降低，但组间比较未见明显差异(P>0.05)。见表5。
表5治疗前后患者肺功能和体重指数的变化
注:FEV1％:1秒钟用力呼气容积占预计值百分比.体重指数(BMI)BMI＝体重(kg)/身高的平方(m2).与同组治疗前比较，*P＜0.05；与对照组比较,#P＜0.05.
【注：《美国心脏病学会杂志》刊登哈佛大学一项最新研究结果，肺功能障碍是心力衰竭的预测因素之一。肺功能一旦快速下降，罹患心脏疾病的风险也会明显升高。如果FEV1每年下降幅度大于1.9％，或者FEV每年降幅大于2.1％，即被定义为“肺功能快速下降”，FEV1和FEV的快速下降将大幅增加心力衰竭风险或使已有心衰的心脏功能进一步恶化。经彝药复方治疗后，心衰患者肺功能的指标FEV1％、FEV1/FVC％均明显改善，说明彝药复方可通过提升肺功能，降低衰竭心肌恶化风险，从而对心衰病情的进展产生一定的遏制作用。另一方面，肺功能不全与心衰常合并出现并相互胶结形成恶性循环，长期慢性的肺功能低下所致肺动脉循环阻力增加，使右心后负荷升高，成为促发右心衰竭的关键病理环节，彝药复方改善肺功能，可间接降低右心室的心脏后负荷，进而保护心肌、促进心脏结构和功能恢复】
④两组治疗前后患者MLHFQ评分
如表6示，治疗后彝药复方治疗组患者MLHFQ评分明显下降(P<0.05)，安慰剂对照组与彝药复方治疗组比较，评分最高，未见改善且有加重趋势。
表6治疗前后明尼苏达心衰量表评分
注：与同组治疗前比较，*P＜0.05；与彝药复方治疗组比较,#P＜0.05.
【注：心衰患者的治疗目标之一为改善生活质量，心衰患者的心肌功能恢复程度对生活质量产生直接影响，其中明尼苏达心衰量表为心衰最常用的疾病特异性量表，经彝药复方治疗后，MLHFQ评分下降，说明心衰患者的生活质量有了较明显提高，从侧面反映出彝药复方对衰竭心肌具有积极的保护作用，从而促成心肌功能恢复、有效改善了患者生存质量。】
⑤两组治疗前后患者6分钟步行试验结果
6min步行距离的改善情况为彝药复方治疗组>安慰剂对照组，彝药复方治疗组与对照组相比改善明显，差异有统计学意义(P<0.05)。见表7。
表7治疗前后6分钟步行试验结果
注：与同组治疗前比较，*P＜0.05；与彝药复方治疗组比较,#P＜0.05.
【注：6分钟步行试验作为一种亚极量运动试验，它通过对患者运动耐力的检测，能较好地复制患者日常生理状态，反映患者生理状态下心脏的功能状态，是一种无创、简单、安全的评价方法。经彝药复方治疗后，患者6分钟步行距离明显提高，说明心衰患者的心脏功能有了不同程度的恢复，从侧面反映出彝药复方对衰竭心肌具有积极的保护作用，从而促成心肌功能恢复、提高了患者运动耐力。】
⑥两组治疗前后外周血IL-1β、IL-6含量表达变化
本研究显示彝药复方治疗后对IL-1β、IL-6等炎症因子介导的炎症活动有缓解作用(具体数据参见下表8-1、表8-2、表9-1、表9-2、表10-1、表10-2、表11-1、表11-2、表12-1、表12-2、表13-1、表13-2及附图1-4所示)，提示彝药复方保护受损心肌的效应机制可能与其抗炎效果有关，但仍需要今后大样本研究证实。
【注：白介素-1(IL-1)，根据分子结构分为IL-1α和IL-1β，IL-1β可降低心肌收缩力，具有负性肌力作用，同时IL-1β也是促进心室重构的重要因素，而循环血流中主要是IL-1β发挥作用；白介素-6(IL-6)是心衰时血清浓度增高的炎症因子，介导免疫和炎症反应，直接降低心肌收缩力，促进心肌肥厚和重构。IL-6与IL-1β水平与心功能分级呈正相关，对心衰的预后起着至关重要的作用，并且在心衰早期，IL-6与IL-1β水平就会有所升高，是检测心衰的一个敏感性指标。本次实验结果显示，经彝药复方治疗后，心衰患者IL-6与IL-1β水平明显减低，说明彝药复方可能通过降低IL-6与IL-1β浓度，抑制体内炎症因子的释放，增加心肌收缩力，减慢心室重构，保护心肌细胞，达到对慢性心力衰竭的治疗作用。】
表8-1测试情况：ELISA法测血清IL-6含量
表8-2测试情况：ELISA法测血清IL-6含量
彝13 彝17 彝21 彝25 彝29 彝33 对4 对8 对12 对16 对20 对24
彝13 彝17 彝21 彝25 彝29 彝33 对4 对8 对12 对16 对20 对24
彝14 彝18 彝22 彝26 彝30 对1 对5 对9 对13 对17 对21 对25
彝14 彝18 彝22 彝26 彝30 对1 对5 对9 对13 对17 对21 对25
彝15 彝19 彝23 彝27 彝31 对2 对6 对10 对14 对18 对22 对26
彝15 彝19 彝23 彝27 彝31 对2 对6 对10 对14 对18 对22 对26
彝16 彝20 彝24 彝28 彝32 对3 对7 对11 对15 对19 对23 对27
彝16 彝20 彝24 彝28 彝32 对3 对7 对11 对15 对19 对23 对27
注：“标”为标准品，“彝”为彝药复方，“对”为对照组
标准曲线：
Quadratic Fit:y＝a+bx+cx^2
Coefficient Data:
a＝-4.29247163201E-001
b＝1.10674410493E+002
c＝3.37134341020E+001
表9-1对应OD值
表9-2对应OD值
0.211 0.249 0.216 0.217 0.217 0.216 0.119 0.115 0.129 0.124 0.116 0.123
0.212 0.23 0.212 0.217 0.222 0.228 0.12 0.125 0.135 0.127 0.116 0.58
0.212 0.22 0.212 0.229 0.303 0.134 0.117 0.118 0.131 0.122 0.113 0.134
0.217 0.226 0.221 0.22 0.284 0.134 0.124 0.122 0.14 0.123 0.125 0.129
0.219 0.236 0.238 0.237 0.225 0.123 0.117 0.122 0.137 0.132 0.13 0.166
0.22 0.237 0.238 0.224 0.23 0.117 0.116 0.136 0.147 0.146 0.133 0.169
0.219 85.16 0.237 0.246 0.234 0.117 0.126 0.115 0.12 0.16 0.122 0.244
0.216 0.228 0.238 0.227 0.225 0.129 0.114 0.119 0.126 0.124 0.132 0.177
表10-1对应蛋白浓度：
表10-2对应蛋白浓度：
24.424 29.219 25.049 25.175 25.175 25.049 13.218 12.744 14.409 13.813 12.863 13.694
24.549 26.809 24.549 25.175 25.802 26.557 13.337 13.932 15.126 14.170 12.863 17.899
24.549 25.551 24.549 26.683 36.200 15.007 12.981 13.100 14.678 13.575 12.507 15.007
25.175 26.305 25.676 25.551 33.722 15.007 13.813 13.575 15.726 13.694 13.932 14.409
25.425 27.568 27.821 27.694 26.179 13.694 12.981 13.575 15.366 14.767 14.528 18.872
25.551 27.694 27.821 26.053 26.809 12.981 12.863 15.246 16.568 16.448 14.887 19.238
25.425 33.851 27.694 28.837 27.315 12.981 14.051 12.744 13.337 18.142 13.575 28.583
25.049 26.557 27.821 26.431 26.179 14.409 12.626 13.218 14.051 13.813 14.767 20.216
表11-1测试情况：ELISA法测血清IL-1β含量
表11-2测试情况：ELISA法测血清IL-1β含量
彝13 彝17 彝21 彝25 彝29 彝33 对4 对8 对12 对16 对20 对24
彝13 彝17 彝21 彝25 彝29 彝33 对4 对8 对12 对16 对20 对24
彝14 彝18 彝22 彝26 彝30 对1 对5 对9 对13 对17 对21 对25
彝14 彝18 彝22 彝26 彝30 对1 对5 对9 对13 对17 对21 对25
彝15 彝19 彝23 彝27 彝31 对2 对6 对10 对14 对18 对22 对26
彝15 彝19 彝23 彝27 彝31 对2 对6 对10 对14 对18 对22 对26
彝16 彝20 彝24 彝28 彝32 对3 对7 对11 对15 对19 对23 对27
彝16 彝20 彝24 彝28 彝32 对3 对7 对11 对15 对19 对23 对27
注：“标”为标准品，“彝”为彝药复方，“对”为对照组
标准曲线：
3rd degree Polynomial Fit:y＝a+bx+cx^2+dx^3...
Coefficient Data:
a＝-9.53686574359E-001
b＝1.20958416702E+002
c＝1.21566768529E+001
d＝2.61894238228E+001
表12-1对应OD值
表12-2对应OD值
表13-1对应蛋白浓度：
表13-2对应蛋白浓度：
29.664 30.191 26.264 26.264 31.778 30.719 26.524 20.089 29.928 22.390 18.311 21.365
28.876 33.107 35.248 28.09 26.785 24.321 23.161 19.580 25.485 20.344 16.795 22.390
27.306 26.785 26.785 27.045 33.640 18.058 16.795 17.552 23.418 19.326 19.835 19.835
27.306 27.045 27.045 26.785 29.401 18.818 17.552 17.299 21.877 19.326 17.805 21.877
32.840 30.455 26.004 26.785 24.192 17.805 22.134 15.034 21.621 20.344 17.805 34.443
27.045 29.928 26.785 27.567 26.524 18.565 17.805 18.058 24.192 21.110 18.311 30.983
26.785 27.829 25.745 28.09 26.524 20.089 17.805 18.565 18.818 19.072 19.580 13.282
27.567 30.719 28.352 27.567 27.306 20.344 18.565 19.072 22.134 18.818 21.110 12.036
二、彝药组合方对体外培养的人心肌细胞缺氧不耐受所致心律失常的保护作用研究
(1)研究分组
将体外培养的人心肌细胞分为两组：①常规培养组；②彝药组合方有效组分组合物辅助培养组。常规培养组使用正常高糖培养基配制的心肌细胞营养液，彝药组合方有效组分辅助培养组在常规高糖心肌细胞营养液中以1:1000添加DMSO溶解的彝药组合方有效组分组合物，之后继续培养7天，每2天换一次培养液。继而将两组细胞置于缺氧培养箱中1h后取出，用免疫荧光法检测两组心肌细胞特异性标记物c-TNI及心肌收缩蛋白TNNT2、α-actinin蛋白表达量，同时用Axion BioSystems微电极阵列检测心肌收缩和电生理情况。
(2)研究结果
①免疫荧光检测结果参见图5和图6；
②Axion BioSystems微电极阵列电生理检测结果参见图7。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离说明书及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (8)

1.具有心肌保护作用的彝药复方，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参 10-30份；辣木籽 3-15份、高山红景天 10-30份、麂胎粉 5-20份、鹿子角茸 1-5份、海龙 5-20份、云三七粉 3-12份、甘松 10-20份、红参 10-30份、黄芪 10-40份、黑顺片 3-20份、刺五加 10-30份、熟地黄 10-40份、淫羊藿 10-20份和丹参 10-30份。
2.如权利要求1所述的具有心肌保护作用的彝药复方，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参 14-16份；辣木籽 5-7份、高山红景天 19-22份、麂胎粉 9-11份、鹿子角茸 2-4份、海龙 9-11份、云三七粉 9-12份、甘松 14-16份、红参 14-16份、黄芪 29-31份、黑顺片 14-16份、刺五加 14-16份、熟地黄 18-22份、淫羊藿 10-14份和丹参 18-22份。
3.如权利要求1所述的具有心肌保护作用的彝药复方，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
云南野生滇紫参 15份；辣木籽 6份、高山红景天 20份、麂胎粉 10份、鹿子角茸 3份、海龙 10份、云三七粉 10份、甘松 15份、红参 15份、黄芪 30份、黑顺片 15份、刺五加 15份、熟地黄 20份、淫羊藿 12份和丹参 20份。
4.如权利要求1-3中任一项所述的具有心肌保护作用的彝药复方在制备心肌保护药物中的应用。
5.具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物 1-100
份；辣木籽油或辣木籽多酚 0.01-100份；
红景天苷或红景天素 10-300份；PLGF-1或PLGF-2 1×10-6-0.1份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 100-1×105份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100-1×105份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷 1-100份；
甘松新酮或甘松挥发油，100-1×104份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 1-100份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 1-100份；
附子多糖或附子苷，25-5×105份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 20-1000份；
地黄多糖、地黄低聚糖 0.01-500份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 1-100份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 1-100份。
6.如权利要求6所述的具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物 18-22份；
辣木籽油或辣木籽多酚 18-22份；红景天苷或红景天素 18-22份；
PLGF-1或PLGF-2 4×10-6-6×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 98-102份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 98-102份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷 18-22份；
甘松新酮或甘松挥发油 18-22份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 18-22份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 18-22份；
附子多糖或附子苷 18-22份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 9-11份；
地黄多糖、地黄低聚糖 198-202份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 18-22份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 9-11份。
7.如权利要求6所述的具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物，其特征在于，按重量份数计，包括以下组分：
小红参醌、小红参苷、小红参水溶部分提取物II-A或小红参乙酸乙酯提取物 20份；
辣木籽油或辣木籽多酚 20份；红景天苷或红景天素 20份；
PLGF-1或PLGF-2 5×10-6份；
鹿茸多肽、鹿茸蛋白或鹿茸草中苯乙醇苷类 100份；
刁海龙、拟海龙或尖海龙提取物 100份；
三七总皂苷、三七皂苷R1、三七皂苷Ft1、三七素或三七茎叶皂苷 20份；
甘松新酮或甘松挥发油 20份；
人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb2、人参皂苷F1、人参皂苷F2、人参皂苷Rd或人参皂苷Rh2 20份；
黄芪多糖、黄芪甲苷IV、黄芪总皂苷、黄芪皂苷I或黄芪皂苷II 20份；
附子多糖或附子苷 20份；
刺五加苷E、刺五加苷B或刺五加皂苷B 10份
地黄多糖、地黄低聚糖 200份；
淫羊藿苷、淫羊藿素、淫羊藿次苷1或淫羊藿甙 20份；以及
丹参酮I、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D或丹酚酸F 10份。
8.如权利要求5-7中任一项所述的具有心肌保护作用的彝药复方的有效组分组合物在制备心肌保护药物中的应用。
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