CN110025577A - 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用 - Google Patents

一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110025577A
CN110025577A CN201910209456.1A CN201910209456A CN110025577A CN 110025577 A CN110025577 A CN 110025577A CN 201910209456 A CN201910209456 A CN 201910209456A CN 110025577 A CN110025577 A CN 110025577A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mcns
complex
polypeptide
mesoporous carbon
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910209456.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110025577B (zh
Inventor
卢雪梅
张伦
桂水清
王建
曾佳利
陈晴汝
金小宝
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Pharmaceutical University
Original Assignee
Guangdong Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Pharmaceutical University filed Critical Guangdong Pharmaceutical University
Priority to CN201910209456.1A priority Critical patent/CN110025577B/zh
Publication of CN110025577A publication Critical patent/CN110025577A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110025577B publication Critical patent/CN110025577B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/143—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/145—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种多肽药物口服靶向系统M27‑39@FA‑MCNs复合体及其制备方法和应用。其是将介孔碳叶酸化后作为M27‑39多肽的载体，而得到M27‑39@FA‑MCNs复合体，所述的M27‑39多肽的氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK。通过本方法制备的M27‑39@FA‑MCNs复合体的实验技术简单，对获得的M27‑39@FA‑MCNs复合体进行抗结肠癌活性检测和靶向性研究，发现M27‑39@FA‑MCNs复合体与M27‑39多肽相比，具有更显著的抗结肠癌活性和靶向性。

Description

一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备 方法和应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用，具体应用在靶向抗结肠癌方面。
背景技术
结肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，近几年来，随着人们生活水平的提高和饮食习惯的改变，结肠癌的发病率呈上升趋势。在我国，结直肠癌死亡率已位于恶性肿瘤死亡率的第五位，不仅严重危害人类健康，而且给国家带来了严重的社会和经济负担。因此针对结肠癌的药物研究，对降低结肠癌的发病率和病死率具有重大的社会和经济意义。
越来越多的多肽药物被开发并应用于临床。因适应证广、安全性高且疗效显著，多肽药物目前已广泛应用于肿瘤、肝炎、糖尿病、艾滋病等疾病的预防、诊断和治疗。抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMP)是生物免疫系统产生的一类抵抗外界病原体感染的小分子多肽，广泛存在于昆虫、植物、动物及人体内，其中昆虫抗菌肽cecropin是人类发现最早的一类抗菌肽。抗菌肽具有一系列引人注目的生物学活性，包括抗菌、抗炎、抗病毒、抗寄生虫、抑制肿瘤细胞及免疫调节活性等。抗菌肽能够破坏细菌细胞膜或穿过细胞膜作用于胞内靶位点，作用机制独特，不易产生耐药性，对正常人体细胞毒、副作用小。因此在传统抗菌、抗病毒和抗肿瘤药物研发和临床效果不尽如人意的现状下，抗菌肽的上述特点使其显示出了良好的应用开发前景。
M27-39多肽(氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK，具体如SEQ ID NO.1所示)是广东药科大学/广东省生物活性药物研究重点实验室从家蝇幼虫脂肪体cDNA文库中克隆的一种昆虫抗菌肽Musca domestica cecropin的衍生肽，由Musca domestica cecropin的第27～39位而得，与天然Musca domestica cecropin相比具有明显简单的结构，因此更易进入细胞，生产成本更少的优点。但目前还没有公开文献报道M27-39多肽具有抗结肠癌活性。
众所周知，口服给药因用药方便，易于被病人接受，已成为目前应用最广泛的给药方式，也是大多数药物的首选给药途径。而多肽药物最大问题是不能口服，主要是因为易被降解和难穿越肠黏膜。介孔碳(MCNs)是一类新型的非硅基介孔材料，2nm＜孔径＜50nm，具有巨大的比表面积和孔体积，肠道黏附性较好，且合成简单、易操作、无生理毒性。叶酸(FA)受体广泛分布在正常组织及肿瘤组织中，不同点在于多数肿瘤细胞叶酸受体的数量和活性远远超过正常细胞，而且叶酸受体在正常细胞呈极性分布，恶变后失去极性，使血液循环中的药物可接触到该受体，借以将药物靶向导入癌细胞。因此将介孔碳叶酸化后作为多肽药物的载体，制备出多肽药物口服靶向给药系统，能提高多肽药物的生物利用度，延长作用时间以及增加靶向性。
发明内容
本发明的第一个目的是提供M27-39多肽在制备抗结肠癌药物中的应用。
本发明通过实验发现，M27-39多肽具有抗HCT116肿瘤细胞增殖活性，因此可以用于制备抗结肠癌药物，进一步，本发明将介孔碳叶酸化后作为M27-39的载体，形成M27-39@FA-MCNs复合体，该M27-39@FA-MCNs复合体经实验发现，其也具有抗HCT116肿瘤细胞增殖活性，并且其活性明显强于M27-39。进一步研究发现，与M27-39相比，M27-39@FA-MCNs靶向HCT116的效果更好。
因此，本发明提供了M27-39多肽在制备抗结肠癌药物中的应用，所述的M27-39多肽的氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK，具体如SEQ ID NO.1所示。
本发明的第二个目的是提供一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体，其是通过以下方法制备的，其是将介孔碳叶酸化后作为M27-39的载体，而得到M27-39@FA-MCNs复合体。
优选，包括以下步骤：
s1、合成介孔碳；
s2、将介孔碳叶酸化得到FA-MCNs复合体；
s3、将M27-39多肽载入FA-MCNs复合体上得到M27-39@FA-MCNs复合体。该复合体M27-39多肽的载药率为36.45％±0.43％。
优选，所述的合成介孔碳是在水中加入盐酸和F127使其溶解，再加入间苯三酚使其溶解，加入甲醛反应，反应完后用水洗沉淀，干燥，然后在惰性气氛下碳化得到介孔碳。
优选，所述的将介孔碳叶酸化得到FA-MCNs复合体是将壳寡糖溶于氢氧化钠溶液中，然后加入酸化处理过的介孔碳，超声处理，洗涤干燥得到壳寡糖修饰的介孔碳，将壳寡糖修饰的介孔碳分散于PBS缓冲溶液中，再加入叶酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，反应得到FA-MCNs复合体。
优选，所述的将M27-39多肽载入FA-MCNs复合体上是将M27-39多肽与FA-MCNs复合体都加入到水中反应，再洗去未载入进孔内的M27-39多肽，得到M27-39@FA-MCNs复合体。
本发明的第三个目的是提供上述M27-39@FA-MCNs复合体在制备抗结肠癌药物中的应用。
本发明的第四个目的是提供一种抗结肠癌药物，其特征在于，包括有效量的M27-39@FA-MCNs复合体作为活性成分。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
通过本方法制备的M27-39@FA-MCNs复合体的实验技术简单，对获得的M27-39@FA-MCNs复合体进行抗结肠癌活性检测和靶向性研究，发现M27-39@FA-MCNs复合体与M27-39多肽相比，具有更显著的抗结肠癌活性和靶向性。
附图说明
图1为M27-39多肽含量测定标准曲线，载药率。
图2为M27-39@FA-MCNs在体外累计释药率。
图3为FA-MCNs及M27-39@FA-MCNs复合体的TEM图。
图4显示M27-39、FA-MCNs和M27-39@FA-MCNs对正常结肠上皮细胞NCM460无细胞毒性。
图5显示FA-MCNs具有肠上皮生物黏附性及不溶血特性。
图6显示M27-39@FA-MCNs与M27-39相比具有更显著的抗结肠癌活性。
图7为FITC-M27-39@FA-MCNs与FITC-M27-39靶向HCT116细胞的激光共聚焦显微图。
具体实施方式
下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
1、介孔碳(MCNs)的合成：25℃条件下，在40mL去离子水中先后分别加入6mL质量分数36％的浓盐酸，和0.4gF127(表面活性剂)，搅拌溶解。然后加0.24g间苯三酚，溶解，最后缓慢滴加0.14mL甲醛，反应2小时，升温到40℃，反应4h，最后升温到60℃，反应24h。离心水洗三次，45℃下干燥，最后在600℃，氮气气氛中碳化，得到MCNs。
2、叶酸化介孔碳(FA-MCNs)的合成：40mg壳寡糖溶解于0.1mol/L氢氧化钠溶液中，之后加入20mg酸化(体积比硫酸(质量分数98％)：硝酸(质量分数65％)＝3:1的混酸处理)处理过的介孔碳，超声20min后，继续搅拌16h后，洗涤干燥，得到壳寡糖修饰的介孔碳。将壳寡糖修饰的介孔碳20mg超声分散于pH 7.4的PBS缓冲溶液中，之后分别加入30mg FA(叶酸)，60mg1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和60mgN-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，在4℃下反应过夜，得到FA-MCNs。
3、将M27-39、FITC-M27-39(避光条件下)载入FA-MCNs得到M27-39@FA-MCNs复合体和FITC-M27-39@FA-MCNs复合体：分别将10mg的M27-39(即为M27-39多肽，M27-39多肽的氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK)或FICT-M27-39(避光条件下)，与10mg FA-MCNs加入到10mL双蒸水中搅拌4h，以2000r/min的转速离心5min去除未载入进孔内的M27-39或FICT-M27-39，由此分别得到M27-39@FA-MCNs复合体和FITC-M27-39@FA-MCNs复合体。离心后静置，取上清用于紫外定量测试，从而得到M27-39或FICT-M27-39在FA-MCNs的负载量。载药量的计算公式为：载药量(％)＝(W0/W)×100％，其中W0为载入FA-MCNs中的M27-39的质量，W为载药FA-MCNs的质量，M27-39@FA-MCNs复合体的载药量达36.45％(图1)。
所述的M27-39多肽，其氨基酸序列为VAQQAANVAATLK，具体如SEQ ID NO.1所示，FITC-M27-39指的是将荧光标记FITC加载在M27-39上，可以商业合成，本发明是委托北京中科亚光生物科技有限公司合成的。
4、M27-39@FA-MCNs复合体在两种不同介质中的M27-39的释放：取M27-39@FA-MCNs复合体10mg于10mL pH 1.2的人工胃液介质中，保持释放体系温度在37℃，500rpm匀速磁力搅拌2h。分别在30、60、90、120min时，离心(20000×g/30min)取上清1mL，同时立即补充1mL的人工胃液介质，采用紫外分光光度法测定药物含量，计算累积释放百分数。2h后，将上述M27-39@FA-MCNs转移到10mLpH 6.8人工肠液介质中，保持释放体系温度在37℃，500rpm匀速磁力搅拌4h。分别在150、210、240、300、360min时，离心(20000×g/30min)取上清1mL，同时立即补充1mL的人工肠液介质中，采用紫外分光光度法测定药物含量，计算累积释放百分数。在pH 1.2的人工胃液介质中，M27-39@FA-MCNs复合体2h累计释放率为51.12％；在pH6.8的人工肠液中释放4h，最终累计释放率达到87.77％(图2)。
5、FA-MCNs及M27-39@FA-MCNs复合体透射电子显微镜(Transmission ElectronMicroscope,TEM)：TEM可以对固体的精细结构直接成像。样品的制备：将样品粉末在酒精中分散，使用超声波震荡器帮助分散，然后将悬浮液滴于富有多孔炭膜的铜网上，待干燥后，插入电子显微镜。结果显示FA-MCNs表面有丰富的孔道，M27-39能充分地填充到孔道中(图3)。
6、FA-MCNs、M27-39以及M27-39@FA-MCNs对NCM460细胞毒性评价：采用MTT法评价FA-MCNs、M27-39以及M27-39@FA-MCNs对NCM460细胞毒性的影响，具体方法如下：
NCM460细胞于37℃饱和湿度的恒温箱中5％CO2传代培养，培养基为含10％胎牛血清，100U/mL氨苄青霉素和100U/mL链霉素的DMEM，当细胞生长接近80％融合度时，用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，准确计数。
调整细胞浓度为1×105cell/mL，接种于96孔细胞培养板(分16组，每组4个复孔)，培养24小时待细胞贴壁后，弃培养液，分别加入含FA-MCNs(20、40、80、160、320μg/mL)、M27-39(7.5、15、30、60、120μg/mL)及M27-39@FA-MCNs(20、40、80、160、320μg/mL)的培养液，阴性对照组加空白培养液。
第3天弃培养基，用PBS洗板后，每孔加入10μL的5mg/mLMTT溶液和100μL培养基置于恒温培养箱内继续培养4h。取出培养板，弃去上清，每孔加入100μLDMSO，将培养板振摇30min。待MTT氧化产生的结晶完全溶解之后使用酶标仪测定OD值，测定波长为570/630nm，实验重复3次，取平均值。MTT结果显示各浓度梯度的FA-MCNs、M27-39以及M27-39@FA-MCNs对NCM460无细胞毒性(图4)。
7、FA-MCNs的肠上皮生物黏附性及溶血测定：灌胃给予实验大鼠浓度为5mg/mL的FA-MCNs 2mL，2h后处死大鼠，取回肠中段，生理盐水冲洗3次，观察肠腔内壁FA-MCNs黏附情况并拍摄照片(图5A)。如图5A所示，回肠壁黏附大量黑色物质，即使采用生理盐水反复冲洗肠段，黑色物质仍保持在回肠表面，表明FA-MCNs具有较强的生物粘附性。肠粘附性赋予药物较长的肠道滞留时间，为药物的跨上皮吸收提供充足的时间，从而有助于提高生物利用度。取大鼠血液，1200g离心15min，收集红细胞，再用PBS洗3遍，将FA-MCNs悬浮在PBS中，制成不同浓度梯度的悬液，将150μLFA-MCNs悬液与150μL 2％(细胞与PBS的体积比)的红细胞混合，1％TritonX-100处理的细胞作为阳性对照组，PBS处理组为阴性对照，37℃水浴1h，之后离心15min，拍照，如图5B所示，加入不同浓度的FA-MCNs均没有出现溶血。
8、FA-MCNs、M27-39和M27-39@FA-MCNs对HCT116增殖的影响：采用MTT法分别评价FA-MCNs、M27-39和M27-39@FA-MCNs对HCT116细胞增殖的影响，具体方法如下：
HCT116细胞于37℃饱和湿度的恒温箱中5％CO2传代培养，培养基为含10％胎牛血清，100U/mL氨苄青霉素和100U/mL链霉素的DMEM，当细胞生长接近80％融合度时，用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，准确计数。
调整细胞浓度为1×105cell/mL，接种于96孔细胞培养板(分16组，每组4个复孔)，培养24小时待细胞贴壁后，弃培养液，分别加入含FA-MCNs(20、40、80、160、320μg/mL)、M27-39(7.5、15、30、60、120μg/mL)及M27-39@FA-MCNs(20、40、80、160、320μg/mL)的培养液，阴性对照组加空白培养液。
第3天弃培养基，用PBS洗板后，每孔加入10μL的5mg/mLMTT溶液和100μL培养基置于恒温培养箱内继续培养4h。取出培养板，弃去上清，每孔加入100μLDMSO，将培养板振摇30min。待MTT氧化产生的结晶完全溶解之后使用酶标仪测定OD值，测定波长为570/630nm，实验重复3次，取平均值。MTT结果显示M27-39和M27-39@FA-MCNs复合体均具有抗HCT116肿瘤细胞增殖活性，但M27-39@FA-MCNs复合体(以M27-39@FA-MCNs复合体的量计算，M27-39@FA-MCNs复合体的载药量为36.45％)活性明显强于M27-39(图6)。其中FA-MCNs VS HCT116表示FA-MCNs对HCT116细胞增殖的影响，M27-39VSHCT116表示M27-39对HCT116细胞增殖的影响，M27-39@FA-MCNs VS HCT116表示M27-39@FA-MCNs对HCT116细胞增殖的影响。
9、FITC-M27-39@FA-MCNs与FITC-M27-39靶向HCT116细胞评价：采用激光共聚焦显微镜观察HCT116细胞对FITC-M27-39@FA-MCNs与FITC-M27-39的吞噬后胞内荧光强弱来评价其靶向HCT116细胞作用大小，具体方法如下：
HCT116细胞于37℃饱和湿度的恒温箱中5％CO2传代培养，培养基为含10％胎牛血清，100U/mL氨苄青霉素和100U/mL链霉素的DMEM，当细胞生长接近80％融合度时，用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，准确计数。
调整细胞浓度为1×105cell/mL，接种于6孔细胞培养板(分3组，2个复孔)，培养24小时待细胞贴壁后，弃培养液，用PBS洗板3次，然后分别加入2mLFITC-M27-39@FA-MCNs(750μg/mL)和FITC-M27-39(300μg/mL)继续培养30min，空白组加入2mL培养液。上述细胞培养后用PBS溶液洗涤3次，加入浓度为4％的多聚甲醛溶液固定，细胞核用5μg/mL的DAPI染色。之后用莱卡共聚焦激光扫描显微镜(SP5)在63倍油镜下进行表征。结果显示：与M27-39相比，M27-39@FA-MCNs靶向HCT116的效果更好(图7)。
序列表
<110> 广东药科大学
<120> 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 13
<212> PRT
<213> 家蝇(Musca domestica L.)
<400> 1
Val Ala Gln Gln Ala Ala Asn Val Ala Ala Thr Leu Lys
1 5 10

Claims (9)

1.M27-39多肽在制备抗结肠癌药物中的应用，所述的M27-39多肽的氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK。
2.一种M27-39@FA-MCNs复合体的制备方法，其特征在于，其是将介孔碳叶酸化后作为M27-39多肽的载体，而得到M27-39@FA-MCNs复合体，所述的M27-39多肽的氨基酸序列为：VAQQAANVAATLK。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1、合成介孔碳；
s2、将介孔碳叶酸化得到FA-MCNs复合体；
s3、将M27-39多肽载入FA-MCNs复合体上得到M27-39@FA-MCNs复合体。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的合成介孔碳是在水中加入盐酸和F127使其溶解，再加入间苯三酚使其溶解，加入甲醛反应，反应完后用水洗沉淀，干燥，然后在惰性气氛下碳化得到介孔碳。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的将介孔碳叶酸化得到FA-MCNs复合体是将壳寡糖溶于氢氧化钠溶液中，然后加入酸化处理过的介孔碳，超声处理，洗涤干燥得到壳寡糖修饰的介孔碳，将壳寡糖修饰的介孔碳分散于PBS缓冲溶液中，再加入叶酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，反应得到FA-MCNs复合体。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的将M27-39多肽载入FA-MCNs复合体上是将M27-39多肽与FA-MCNs复合体都加入到水中反应，再洗去未载入进孔内的M27-39多肽，得到M27-39@FA-MCNs复合体。
7.一种按照权利要求2、3、4、5或6所述的制备方法制备得到的M27-39@FA-MCNs复合体。
8.权利要求7所述的M27-39@FA-MCNs复合体在制备抗结肠癌药物中的应用。
9.一种抗结肠癌药物，其特征在于，包括有效量的权利要求7所述的M27-39@FA-MCNs复合体作为活性成分。
CN201910209456.1A 2019-03-19 2019-03-19 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用 Active CN110025577B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910209456.1A CN110025577B (zh) 2019-03-19 2019-03-19 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910209456.1A CN110025577B (zh) 2019-03-19 2019-03-19 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110025577A true CN110025577A (zh) 2019-07-19
CN110025577B CN110025577B (zh) 2021-09-07

Family

ID=67236350

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910209456.1A Active CN110025577B (zh) 2019-03-19 2019-03-19 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110025577B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113460990A (zh) * 2021-05-23 2021-10-01 贵州大学 孔径均一可调壳寡糖基原位n掺杂有序介孔碳的制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009155556A2 (en) * 2008-06-20 2009-12-23 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Crkl targeting peptides
CN103990133A (zh) * 2014-05-07 2014-08-20 沈阳药科大学 一种具有靶向定位释药的介孔碳纳米粒系统及其应用
CN107459568A (zh) * 2017-08-22 2017-12-12 广东药科大学 一种Musca domestica cecropin 衍生肽M27‑39及其应用
CN108530544A (zh) * 2018-03-09 2018-09-14 广东药科大学 一种肝癌细胞靶向抗菌肽嵌合体m27-39-htpp及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009155556A2 (en) * 2008-06-20 2009-12-23 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Crkl targeting peptides
CN103990133A (zh) * 2014-05-07 2014-08-20 沈阳药科大学 一种具有靶向定位释药的介孔碳纳米粒系统及其应用
CN107459568A (zh) * 2017-08-22 2017-12-12 广东药科大学 一种Musca domestica cecropin 衍生肽M27‑39及其应用
CN108530544A (zh) * 2018-03-09 2018-09-14 广东药科大学 一种肝癌细胞靶向抗菌肽嵌合体m27-39-htpp及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
朱杰等: "叶酸功能化介孔碳纳米球负载阿霉素的细胞靶向传递及可控释放", 《化学学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113460990A (zh) * 2021-05-23 2021-10-01 贵州大学 孔径均一可调壳寡糖基原位n掺杂有序介孔碳的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110025577B (zh) 2021-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kumeria et al. Porous silicon for drug delivery applications and theranostics: recent advances, critical review and perspectives
CN106139144B (zh) 一种具有协同抗肿瘤特性的透明质酸修饰的金-碳纳米球及其制备方法与应用
KR102264231B1 (ko) 생체고분자와 금속-유기 프레임워크가 결합된 복합체 및 이의 용도
JP6677914B2 (ja) 卵巣癌用の特異的に標的化された生分解性両親媒性ポリマー、それから製造されたポリマーベシクル及びその使用
CN110368374A (zh) 一种抗肿瘤铂类药物矿化蛋白纳米粒及其制备方法和应用
CN113456613B (zh) 一种近红外光激活型巨噬细胞-纳米前药靶向递药系统的构建及其应用
CN104667289B (zh) 一种抗肿瘤药物载体及其使用方法
CN109157662B (zh) 一种人血清白蛋白-阿霉素交联物纳米颗粒及其应用
Djayanti et al. Mesoporous silica nanoparticles as a potential nanoplatform: therapeutic applications and considerations
Wen et al. Erythrocyte membrane-camouflaged gefitinib/albumin nanoparticles for tumor imaging and targeted therapy against lung cancer
CN113633625B (zh) 一种杂膜负载氧化磷酸化抑制剂的纳米药物及其制备方法
Ci et al. Enhanced delivery of imatinib into vaginal mucosa via a new positively charged nanocrystal-loaded in situ hydrogel formulation for treatment of cervical cancer
CN112334575A (zh) 从条件性重编程细胞获得动物模型的方法以及该动物模型用于筛选抗肿瘤药物的用途
CN111249467A (zh) 肿瘤自靶向多级响应型介孔硅递药系统及其制备方法
CN108434121B (zh) 一种双层核壳结构分子载体
CN105859990A (zh) 侧链含硫辛酰基的聚合物、其制备方法及由其制备的聚合物囊泡及其应用
Wang et al. Mitochondria-targeting folic acid-modified nanoplatform based on mesoporous carbon and a bioactive peptide for improved colorectal cancer treatment
CN110025577A (zh) 一种多肽药物口服靶向系统M27-39@FA-MCNs复合体及其制备方法和应用
CN105820334A (zh) 一种基于氨基酸的聚两性离子纳米颗粒的制备方法
CN105770912A (zh) 具有肿瘤近红外荧光显像功能的载药atp敏感脂质体及其制备方法
CN109125295A (zh) 一种齐墩果酸接枝的壳聚糖载药纳米颗粒及其制备和应用
CN108355132B (zh) 一种磁共振靶向分子探针
CN111000826A (zh) 一种协同化学光热疗法、靶向治疗肝癌的药物及制备方法
CN113827593B (zh) 角鲨烯化西达本胺前药自组装纳米粒及制备方法与应用
CN108421041A (zh) 一种光动力治疗复合物及其制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant