CN110024903A - 复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料及其制备方法属于可不翻料的复合菌固态耗氧发酵技术。原料为：棉籽粕、菜籽粕、鲜白酒糟、黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)、枯草芽孢杆菌(BNCC188080)；制备方法，首先制备专用的上下均匀温度的饲料发酵床，再用复合菌对蛋白质饲料进行两次提入发酵的两阶段固态耗氧发酵，制得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料。优点：在对棉籽粕粉和菜籽粕粉，白酒糟、米曲霉、枯草芽孢杆菌有很好的协同作用，发酵方式使用了专用的发酵装置，能在发酵过程中方便快捷的进行添加发酵菌，使其对棉籽粕和菜籽粕发酵效果更好，饲养效果更好。

Description

复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料及其制备方法
技术领域
本发明属于饲料发酵技术领域，特别是分两阶段发酵，发酵期间可不翻料的复合菌固态耗氧发酵技术。
背景技术
近年来，随着“玉米-豆粕”型日粮的大面积推广，豆粕的需要量越来越大。2017年我国大豆总需求量达到11079万吨，但是国内大豆产量不超过1500万吨/年，2017年我国大豆进口9553万吨，较2016年增加1162万吨。蛋白饲料资源的匮乏逐渐成为制约我国畜牧业发展的关键因素，而且国际环境影响，价格波动较大，给我过饲料业和畜牧业的发展带来了很大的阻力。因此开发新型蛋白饲料资源的成为了我国饲料业发展的新方向。
我国棉花和油菜的种植大国，菜籽粕和棉籽粕产量高、价格低廉、蛋白质含量较高，是宝贵的蛋白质饲料资源，但棉籽粕和菜籽粕含有多种抗营养因子，不仅影响饲料饲料的适口性和营养价值，还会对动物肝脏、甲状腺等器官产生不利影响。其中，菜籽粕含有硫代葡萄糖苷、芥酸等抗营养因子，使其应用收到了极大的限制，在饲料中的利用不足 30％。棉籽粕含有棉酚等抗营养因子，可能会造成适口性差、采食量低，动物生长受阻、繁殖力下降等问题，严重是可造成动物死亡。因此棉粕在动物饲料中的用量很少，一般不会超过5％。因此寻求新方法将菜籽粕和棉籽粕进行合理的利用，可在一定程度上解决我国蛋白饲料资源短缺等问题，对我国饲料业和畜牧业的发展具有重要意义。
黑曲霉能产生多种酶(纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶等)，是重要的工业酶制剂生产菌种，不仅酶的产量和活性较高，而且生长旺盛、发酵周期短、不产生毒素，是美国FAD认证的安全菌种。米曲霉能有效的将淀粉、纤维素降解为酵母菌易利用的单糖等物质，合成菌体蛋白，但米曲霉只产生外切水解肽酶，对于蛋白质的利用是有限的，芽孢杆菌能够产生活性较强的蛋白质内切肽酶、淀粉酶和脂肪酶，其能够分泌很多动物机体本身所不具有的酶，还有降解饲料中复杂碳水化合物如果胶、葡聚糖、纤维素等的酶，并且能够提高饲料中氨基酸含量，弥补其他菌种的不足。
将菜籽粕、棉籽粕和鲜白酒糟作为发酵底物，通过微生物进行耗氧固态发酵，不仅能较大程度的降低抗营养因子和霉菌毒素的含量，增加适口性，还能提高其营养价值，蛋白含量达到48％以上，并将植物蛋白转化为菌体蛋白，降低肽链长度，平衡氨基酸的组成，同时饲料中富含芽孢杆菌等益生菌和纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶等有益物质，可调节胃肠道微生态平衡，提高饲料转化率、降低饲料成本。刘军等对菜粕进行单菌株发酵试验，测得米曲霉发酵后的硫苷降解率为65％，黑曲霉为49％，粗蛋白分别达到了40.5％和40％。施安辉等研究发现，微生物发酵能有效地降解棉粕中的游离棉酚，脱毒率在70％以上；张文举等利用热带假丝酵母ZD-3与黑曲霉ZD-8对已灭菌的棉粕进行固态发酵处理，脱毒率达到91.64％，棉粕底物中粗蛋白含量提高了27.83％，体外消化率提高了20.90％。
目前，工业生产中采用微生物发酵棉籽粕或菜籽粕生产发酵饲料，能提高粗蛋白质含量，降低肽链的长度，平衡氨基酸组成，有效的降解抗营养因子的量，提高适口性。但是现有微生物菌种产酶能力较低，限制了微生物在饲料工业中的应用，同时缺乏米曲霉、黑曲霉和枯草芽孢杆菌复合菌对棉籽粕和菜籽粕进行混合固态耗氧的研究。
发明内容
本发明的目的是提供饲料蛋白含量、酶活性更高，氨基酸组成平衡，适口性更好的复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料，及其两阶段方法发酵方法。
本发明的内容如下：
复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料，其各原料的重量比为：混合发酵原料1000- 1200公斤，复合菌种800克；其中，
混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4-5份，菜籽粕4-5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4-5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1-2份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324) 1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g。
黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)由济宁玉园生物科技有限公司提供；枯草芽孢杆菌(BNCC188080)由北京北纳创联生物技术研究院提供。棉籽粕和菜籽粕被粉碎成50-200目的粉状。
复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料的制备方法，其特征在于：首先制备专用的上下均匀温度的饲料发酵床，再用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，制得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料；
[一]、专用的上下均匀温度的饲料发酵床结构为，包括有蓬发酵槽(1)和气水循环系统(2)；
有蓬发酵槽1的结构：包括一个上面开口的长槽形容器4，长槽形容器4的底部是倾斜的斜面槽底5，在斜面槽底5与长槽形容器4的上面开口之间设有多孔载料板6，多孔载料板6上有许多能穿过气和水雾的气水孔7；在长槽形容器4的斜面槽底5最低位置设有气水输入管8，气水输入管8的一端与斜面槽底5上面的长槽形容器4内空相通，气水输入管8的另一端与气水循环系统2相通；长槽形容器4的上面开口四周用软蓬布盖9覆盖，软蓬布盖9上开有一个或多个气水出孔10，有一个或多个气水出孔10上连通有气水输出管11，有一个或多个气水出孔10上设有可开关的盖布块12；
气水循环系统2结构：包括鼓风机13，鼓风机13分别与气水输入管8和气水输出管11，气水输出管11的三通管上还连通有外风管14，外风管14上设有外风管阀门15，外风管14与气水出孔10之间的气水输出管11上设有气水输出管阀门16；气水输入管8上连通有水雾输入管17，水雾输入管17还与水雾发生器18连通，水雾输入管17上设有水雾开关19。
[二]、用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，其步骤如下：
2.1准备各原料，其各原料的重量比为：饲料1000-1200公斤，复合菌种800克；其中，混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4-5份，菜籽粕4-5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4-5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1-2份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324) 1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g；
2.2混合各原料，把全部用量的棉籽粕、菜籽粕、鲜白酒糟混合均匀得原混合饲料；把全部用量的黑曲霉，一半用量的米曲霉，全部用量的地衣枯草芽孢杆菌均匀得混合菌；混合菌用于第一阶段发酵，剩余一半用量的米曲霉用于第二阶段发酵补充菌种；
取混合饲料1公斤与混合菌进行扩增混合均匀，再加入10公斤混合饲料扩增混合均匀，再加入100公斤混合饲料扩增混合均匀，最与全部混合饲料混合均匀，并同时喷洒式加入水，使其按重量比，含水量为水：饲料＝50-55％，得菌料混合物；
2.3放入发酵床：把菌料混合物放入上下均匀温度的饲料发酵床的多孔载料板6上，再在饲料上面覆盖一层软蓬布盖9，把软蓬布盖9与长槽形容器4开口的四周密封；
2.4第一阶段发酵：把气水循环系统2的气水输出管11插入软蓬布盖9的气水出孔10之中，打开外风管阀门15，关闭气水输出管阀门16和水雾开关19，用外风管14连通外面设置提供的摄氏35度热风，开启鼓风机13，把摄氏35度热风从气水输入管8吹入到多孔载料板6的空间，使摄氏35度热风从多孔载料板6进入到多孔载料板6上的菌料混合物，为菌料混合物发酵提供适的温度；待多孔载料板6上面10-20公分处的饲料温度到摄氏35度后，关闭外风管阀门15和水雾开关19，打开气水输出管阀门16，使在发酵的饲料中间温度高的热量均匀散发到温度低的地方，使被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度均匀并保持在摄氏35度左右；当被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门16，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门 15进入，较高温度的气体从没有气水输出管11的气水出孔10排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏35度发酵3天；
2.5第二阶段发酵：把剩余一半用量的酱油曲精混入摄氏30度的温水中，静止放置3-6 小时后，倒入水雾发生器18，打开水雾开关19和气水输出管阀门16，关闭外风管阀门15，开启鼓风机13和水雾发生器18，当被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门16，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门 15进入，较高温度的气体从没有气水输出管11的气水出孔10排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏33-37度发酵1天；
2.6结束发酵：把软蓬布盖9去掉，使长槽形容器4中的饲料上面全部直接触空气，保持关闭气水输出管阀门16和水雾开关19，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门15进入，较高温度的气体从饲料上面排入空风，把长槽形容器4中的饲料全部冷却到常温，获得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料。
在对棉籽粕粉和菜籽粕粉的发酵中，白酒糟中的微生物和黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)、枯草芽孢杆菌(BNCC188080)有很好的协同作用，从下面的本发明发酵前后各营养成分的变化表和本发明发酵蛋白饲料对舍饲牦牛生长性能的影响表可见本发明发酵蛋白饲料可提高平均日增重，减少料重比，替代豆粕，提高经济效益，并减少霉菌毒素含量，提高饲料卫生指标，降低养殖风险。
用上述本发明发酵方法制得的蛋白质饲料与没发酵的原料对比试验如下：
表1 发酵前后各营养成分的变化
注：负数表示发酵后该成分降低。
由表1可知，用上述本发明方法发酵后，粗蛋白、钙、磷和灰分水平分别提高19.56％、28.57％、19.35％和14.87％，说明本发明的混合菌固态好氧发酵可以提高棉菜粕中可利用营养成分的含量；中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维分别降低14.48％和2.39％，说明发酵可降低棉菜粕中纤维素的含量，提高棉菜粕的营养价值。
表2 发酵前后霉菌毒素含量的变化
注：ND表示未检出，检出限为0.2mg/kg
由表2可知，用上述本发明方法发酵后，发酵后黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮含量分别较发酵前分别降低了21.25％和28.56％，脱氧雪腐镰刀菌烯醇未检出。《GB 13078-2017饲料卫生标准》对黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇给出的限量分别是30ug/kg、1000ug/kg和5mg/kg。发酵后的个霉菌毒素含量均低于该标准，符合《GB13078-2017饲料卫生标准》要求。
本发明发酵蛋白饲料在牦牛中的饲喂试验
1.1试验设计
选择体重182.51±29.57、体况毛色一致的麦洼牦牛20头，随机分为对照组和试验组，每组10头牦牛。对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂添加4.5％的发酵蛋白饲料的精料；粗料由发酵酒糟和青贮玉米秸秆组成。试验期间，所有牦牛拴系饲养，自由采食，自由饮水。预饲期15天，试验期80天。实验开始和结束清晨空腹称重，每天记录采食量。
1.2饲料配方
对照组饲喂基础精料(养殖场原有精料)，试验组饲喂添加4.5％本发明发酵蛋白饲料的精料。各组精料的重量比配方见表3。
表3 各处理组精料的组成及营养成分重量比(％)
原料名称 对照组 试验组
玉米 70.00 70.00
豆粕 14.00 14.00
玉米酒精糟 9.40 4.90
磷脂粉 1.50 1.50
碳酸钙 1.20 1.20
食盐 1.00 1.00
小苏打 1.00 1.00
预混料 1.90 1.90
发酵蛋白质饲料 - 4.50
合计 100 100
1.3测定指标及方法
1.3.1生长性能
试验开始和结束时，晨饲前对每头试验牦牛空腹称重，记录初重和末重；每日饲喂时，精确记录每头牦牛的喂料量及剩料量，计算干物质采食量，试验结束后计算平均日增重、平均干物质采食量以及料重比。
平均日增重(g/d)＝(末重-初重)/试验天数
干物质采食量(kg)＝总干物质采食量/试验天数
料重比＝平均干物质采食量/平均日增重
1.3.2养分消化率
试验结束前三天，采集饲料样品和粪样，采用采用盐酸不溶灰分(AIA)法测定营养成分的消化率。其计算公式如下：
某养分表观消化率(％)＝100-(饲料中AIA含量/粪中AIA含量)×(粪中某养分含量/饲料中某养分含量)×100
2.试验结果
2.1本发明发酵蛋白饲料对牦牛生长性能的影响
试验牦牛生长性能见表4。结果表明，在牦牛精料中添加本发明发酵蛋白饲料可以显著提高牦牛的生产性能、干物质采食量(P＜0.05)，降低料重比(P＜0.05)，平均日增重较对照组提高41.69％，料重比较对照组降低26.27％。
表4 发酵蛋白饲料对舍饲牦牛生长性能的影响
项目 对照组 试验组
初始体重/kg 180.67±27.98 181.78±27.97
结束体重/kg 230.00±34.54 257.11±31.77
平均日增重(g/d) 640.43±148.80 907.41±85.02
干物质采食量(kg/d) 4.84±0.59 5.48±0.56
料重比 8.07±1.72 5.95±0.72
2.2发酵蛋白饲料对牦牛养分消化率的影响
试验牦牛生长养分消化率见5。结果表明，在牦牛精料中添加本发明发酵蛋白饲料可显著的提高消化率(P＜0.05)，其中，有机物、粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率分别提高了3.38％、5.48％、14.67％和16.45％。
表5 发酵蛋白饲料对舍饲牦牛养分消化率的影响
本发明发酵蛋白饲料替代豆粕在肉牛中的饲喂试验
1.试验内容
1.1试验设计
选择体重182.51±29.57、体况毛色一致的西杂牛30头，采用单因素随机区组式样设计，按体重相近的原则随机分为3组(对照组、试验I组、试验II组)，每组10头牛。分别饲喂发酵蛋白饲料替代豆粕的日粮，替代比例分别为0、50％、100％。试验期间，所有西杂牛拴系饲养，自由采食，自由饮水。预饲期15天，试验期60天。试验开始和结束清晨空腹称重，每天记录采食量。
1.2试验日粮
对照组饲喂玉米-豆粕型日粮，试验I组饲喂50％豆粕+50％本发明发酵蛋白饲料日粮，试验II组饲喂本发明发酵蛋白饲料型日粮。各组日粮的重量比配方见表6。
表6 各处理组日粮的组成及营养成分重量比(％)
项目 对照组 试验I组 试验II组
玉米 40.00 40.00 40.00
豆粕 7.50 3.75 -
发酵蛋白饲料 - 3.75 7.50
皇竹草 25.00 25.00 25.00
发酵酒糟 25.00 25.00 25.00
碳酸钙 0.70 0.70 0.70
碳酸氢钠 0.51 0.51 0.51
食盐 0.30 0.30 0.30
预混料 1.00 1.00 1.00
合计 100 100 100
2、试验结果
由表7可知，用发酵蛋白饲料替代豆粕对肉牛的生长性能无显著影响(P＞0.05)，但试验组的采食量更高，料重比更低，说明发酵蛋白饲料可以达到替代豆粕，增加采食量的同时降低料重比。
表7 发酵蛋白饲料替代豆粕对肉牛生长性能的影响
项目 对照组 试验I组 试验II组
初重 482.86±43.76 482.14±59.29 485.83±36.80
末重 557.14±48.03 560.00±41.88 557.50±48.35
日增重 1238.09±334.82 1297.62±339.72 1194.45±296.59
采食量 11.87±0.87 12.62±0.94 12.03±1.01
料重比 10.65±1.72 10.13±1.88 10.44±1.95
本发明的优点：在对棉籽粕粉和菜籽粕粉的发酵中，白酒糟中的微生物和黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)、枯草芽孢杆菌 (BNCC188080)有很好的协同作用，发酵方式使用了专用的发酵装置，能在发酵过程中方便快捷的进行添加发酵菌，使其对棉籽粕和菜籽粕发酵效果更好，饲养效果更好。
本发明发酵前后各营养成分的变化和本发明发酵蛋白饲料对舍饲牦牛生长性能的影响可见，本发明发酵蛋白饲料可提高平均日增重，减少料重比，替代豆粕，提高经济效益，并减少霉菌毒素含量，提高饲料卫生指标，降低养殖风险。
附图说明
图1是本发明的部分剖面立体结构示意图；
图2是本发明的外面观察立体结构示意图；
图3是本发明的横剖面结构示意图；
图4是本发明的纵剖面结构示意图；
图中1是有蓬发酵槽、2是气水循环系统、4是长槽形容器、5是斜面槽底、6是多孔载料板、7是气水孔、8是气水输入管、9是软蓬布盖、10是气水出孔、11是气水输出管、12 是可开关的盖布块、13是鼓风机、14是冷风管、15是冷风管阀门、16是气水输出管阀门、17是水雾输入管、18是水雾发生器、19是水雾开关。
具体实施方式
实施例1、复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料
复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料，其各原料的重量比为：混合发酵原料1000 公斤，复合菌种800克；其中，
混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4份，菜籽粕5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)2份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324) 1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g。
黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)由济宁玉园生物科技有限公司提供；枯草芽孢杆菌(BNCC188080)由北京北纳创联生物技术研究院提供。棉籽粕和菜籽粕被粉碎成50-200目的粉状。
实施例2、复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料
复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料，其各原料的重量比为：混合发酵原料1200 公斤，复合菌种800克；其中，
混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕5份，菜籽粕4份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324) 1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g。
黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)由济宁玉园生物科技有限公司提供；枯草芽孢杆菌(BNCC188080)由北京北纳创联生物技术研究院提供。棉籽粕和菜籽粕被粉碎成50-200目的粉状。
实施例3、复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料的制备方法
如图1、2、3、4，
复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料的制备方法，首先制备专用的上下均匀温度的饲料发酵床，再用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，制得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料；
[一]、专用的上下均匀温度的饲料发酵床结构为，包括有蓬发酵槽1和气水循环系统 2；
有蓬发酵槽1的结构：包括一个上面开口的长槽形容器4，长槽形容器4的底部是倾斜的斜面槽底5，在斜面槽底5与长槽形容器4的上面开口之间设有多孔载料板6，多孔载料板6上有许多能穿过气和水雾的气水孔7；在长槽形容器4的斜面槽底5最低位置设有气水输入管8，气水输入管8的一端与斜面槽底5上面的长槽形容器4内空相通，气水输入管8的另一端与气水循环系统2相通；长槽形容器4的上面开口四周用软蓬布盖9覆盖，软蓬布盖9上开有一个或多个气水出孔10，有一个或多个气水出孔10上连通有气水输出管11，有一个或多个气水出孔10上设有可开关的盖布块12；
气水循环系统2结构：包括鼓风机13，鼓风机13分别与气水输入管8和气水输出管11，气水输出管11的三通管上还连通有外风管14，外风管14上设有外风管阀门15，外风管14与气水出孔10之间的气水输出管11上设有气水输出管阀门16；气水输入管8上连通有水雾输入管17，水雾输入管17还与水雾发生器18连通，水雾输入管17上设有水雾开关19；
[二]、用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，其步骤如下：
2.1准备各原料，其各原料的重量比为：饲料1000-1200公斤，复合菌种800克；其中，混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4-5份，菜籽粕4-5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4-5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1-2份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324) 1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g；
黑曲霉(CICC2139AS3.324)、米曲霉(CICC2329沪酿3.042)由济宁玉园生物科技有限公司提供；枯草芽孢杆菌(BNCC188080)由北京北纳创联生物技术研究院提供。棉籽粕和菜籽粕被粉碎成50-200目的粉状。
2.2混合各原料，把全部用量的棉籽粕、菜籽粕、鲜白酒糟混合均匀得原混合饲料；把全部用量的黑曲霉，一半用量的米曲霉，全部用量的地衣枯草芽孢杆菌均匀得混合菌；混合菌用于第一阶段发酵，剩余一半用量的米曲霉用于第二阶段发酵补充菌种；
取混合饲料1公斤与混合菌进行扩增混合均匀，再加入10公斤混合饲料扩增混合均匀，再加入100公斤混合饲料扩增混合均匀，最与全部混合饲料混合均匀，并同时喷洒式加入水，使其按重量比，含水量为水：饲料＝50-55％，得菌料混合物；
2.3放入发酵床：把菌料混合物放入上下均匀温度的饲料发酵床的多孔载料板6上，再在饲料上面覆盖一层软蓬布盖9，把软蓬布盖9与长槽形容器4开口的四周密封；
2.4第一阶段发酵：把气水循环系统2的气水输出管11插入软蓬布盖9的气水出孔10之中，打开外风管阀门15，关闭气水输出管阀门16和水雾开关19，用外风管14连通外面设置提供的摄氏35度热风，开启鼓风机13，把摄氏35度热风从气水输入管8吹入到多孔载料板6的空间，使摄氏35度热风从多孔载料板6进入到多孔载料板6上的菌料混合物，为菌料混合物发酵提供适的温度；待多孔载料板6上面10-20公分处的饲料温度到摄氏35度后，关闭外风管阀门15和水雾开关19，打开气水输出管阀门16，使在发酵的饲料中间温度高的热量均匀散发到温度低的地方，使被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度均匀并保持在摄氏35度左右；当被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门16，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门 15进入，较高温度的气体从没有气水输出管11的气水出孔10排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏35度发酵3天；
2.5第二阶段发酵：把剩余一半用量的酱油曲精混入摄氏30度的温水中，静止放置3-6 小时后，倒入水雾发生器18，打开水雾开关19和气水输出管阀门16，关闭外风管阀门15，开启鼓风机13和水雾发生器18，当被发酵的饲料在长槽形容器4内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门16，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门 15进入，较高温度的气体从没有气水输出管11的气水出孔10排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏33-37度发酵1天；
2.6结束发酵：把软蓬布盖9去掉，使长槽形容器4中的饲料上面全部直接触空气，保持关闭气水输出管阀门16和水雾开关19，打开外风管阀门15，让低温空气从外风管阀门15进入，较高温度的气体从饲料上面排入空风，把长槽形容器4中的饲料全部冷却到常温，获得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料。

Claims (2)

1.复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料，其各原料的重量比为：混合发酵原料1000-1200公斤，复合菌种800克；其中，
混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4-5份，菜籽粕4-5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4-5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1-2份；复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324)1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g。
2.根据权利要求1所述的复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料的制备方法，其特征在于：首先制备专用的上下均匀温度的饲料发酵床，再用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，制得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料；
[一]、专用的上下均匀温度的饲料发酵床结构为，包括有蓬发酵槽(1)和气水循环系统(2)；
有蓬发酵槽(1)的结构：包括一个上面开口的长槽形容器(4)，长槽形容器(4)的底部是倾斜的斜面槽底(5)，在斜面槽底(5)与长槽形容器(4)的上面开口之间设有多孔载料板(6)，多孔载料板(6)上有许多能穿过气和水雾的气水孔(7)；在长槽形容器(4)的斜面槽底(5)最低位置设有气水输入管(8)，气水输入管(8)的一端与斜面槽底(5)上面的长槽形容器(4)内空相通，气水输入管(8)的另一端与气水循环系统(2)相通；长槽形容器(4)的上面开口四周用软蓬布盖(9)覆盖，软蓬布盖(9)上开有一个或多个气水出孔(10)，有一个或多个气水出孔(10)上连通有气水输出管(11)，有一个或多个气水出孔(10)上设有可开关的盖布块(12)；
气水循环系统(2)结构：包括鼓风机(13)，鼓风机(13)分别与气水输入管(8)和气水输出管(11)，气水输出管(11)的三通管上还连通有外风管(14)，外风管(14)上设有外风管阀门(15)，外风管(14)与气水出孔(10)之间的气水输出管(11)上设有气水输出管阀门(16)；气水输入管(8)上连通有水雾输入管(17)，水雾输入管(17)还与水雾发生器(18)连通，水雾输入管(17)上设有水雾开关(19)；
[二]、用复合菌对蛋白质饲料进行固态耗氧发酵，其步骤如下：
2.1准备各原料，其各原料的重量比为：饲料1000-1200公斤，复合菌种800克；其中，混合发酵原料的组成及重量比为：棉籽粕4-5份，菜籽粕4-5份，鲜白酒糟2份；其鲜白酒糟的水分含量为58-60％；
复合菌种中各原料的重量比为：黑曲霉(CICC2139AS3.324)4-5份，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)4份，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1-2份；
复合发酵菌剂中各原料的活菌数：黑曲霉(CICC2139 AS3.324)1.10×1010～1.15×1010cfu/g，米曲霉(CICC2329沪酿3.042)1.10×1010～1.14×1010cfu/g，枯草芽孢杆菌(BNCC188080)1.90×1010～2.10×1010cfu/g；
2.2混合各原料，把全部用量的棉籽粕、菜籽粕、鲜白酒糟混合均匀得原混合饲料；把全部用量的黑曲霉，一半用量的米曲霉，全部用量的地衣枯草芽孢杆菌均匀得混合菌；混合菌用于第一阶段发酵，剩余一半用量的米曲霉用于第二阶段发酵补充菌种；
取混合饲料1公斤与混合菌进行扩增混合均匀，再加入10公斤混合饲料扩增混合均匀，再加入100公斤混合饲料扩增混合均匀，最与全部混合饲料混合均匀，并同时喷洒式加入水，使其按重量比，含水量为水：饲料＝50-55％，得菌料混合物；
2.3放入发酵床：把菌料混合物放入上下均匀温度的饲料发酵床的多孔载料板(6)上，再在饲料上面覆盖一层软蓬布盖(9)，把软蓬布盖(9)与长槽形容器(4)开口的四周密封；
2.4第一阶段发酵：把气水循环系统(2)的气水输出管(11)插入软蓬布盖(9)的气水出孔(10)之中，打开外风管阀门(15)，关闭气水输出管阀门(16)和水雾开关(19)，用外风管(14)连通外面设置提供的摄氏35度热风，开启鼓风机(13)，把摄氏35度热风从气水输入管(8)吹入到多孔载料板(6)的空间，使摄氏35度热风从多孔载料板(6)进入到多孔载料板(6)上的菌料混合物，为菌料混合物发酵提供适的温度；待多孔载料板(6)上面10-20公分处的饲料温度到摄氏35度后，关闭外风管阀门(15)和水雾开关(19)，打开气水输出管阀门(16)，使在发酵的饲料中间温度高的热量均匀散发到温度低的地方，使被发酵的饲料在长槽形容器(4)内各个地方温度均匀并保持在摄氏35度左右；当被发酵的饲料在长槽形容器(4)内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门(16)，打开外风管阀门(15)，让低温空气从外风管阀门(15)进入，较高温度的气体从没有气水输出管(11)的气水出孔(10)排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏35度发酵3天；
2.5第二阶段发酵：把剩余一半用量的酱油曲精混入摄氏30度的温水中，静止放置3-6小时后，倒入水雾发生器(18)，打开水雾开关(19)和气水输出管阀门(16)，关闭外风管阀门(15)，开启鼓风机(13)和水雾发生器(18)，当被发酵的饲料在长槽形容器(4)内各个地方温度在摄氏37度后，关闭气水输出管阀门(16)，打开外风管阀门(15)，让低温空气从外风管阀门(15)进入，较高温度的气体从没有气水输出管(11)的气水出孔(10)排出到外面而降低在发酵的饲料，使在发酵的饲料保持摄氏33-37度发酵1天；
2.6结束发酵：把软蓬布盖(9)去掉，使长槽形容器(4)中的饲料上面全部直接触空气，保持关闭气水输出管阀门(16)和水雾开关(19)，打开外风管阀门(15)，让低温空气从外风管阀门(15)进入，较高温度的气体从饲料上面排入空风，把长槽形容器(4)中的饲料全部冷却到常温，获得复合菌固态耗氧发酵优化的蛋白质饲料。
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CN114540234A (zh) * 2022-03-02 2022-05-27 西南民族大学 一种戊糖乳杆菌及其在抗冻融青贮中的应用

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