CN110016021B - 一种免疫调节剂 - Google Patents

一种免疫调节剂 Download PDF

Info

Publication number
CN110016021B
CN110016021B CN201910015713.8A CN201910015713A CN110016021B CN 110016021 B CN110016021 B CN 110016021B CN 201910015713 A CN201910015713 A CN 201910015713A CN 110016021 B CN110016021 B CN 110016021B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
methyl
reaction
ethyl
added
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910015713.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110016021A (zh
Inventor
李进
张登友
潘飞
冯静超
李应飞
朱文吉
李偲
张毅
魏用刚
陈伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitgen Inc
Original Assignee
Hitgen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hitgen Inc filed Critical Hitgen Inc
Publication of CN110016021A publication Critical patent/CN110016021A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110016021B publication Critical patent/CN110016021B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D411/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D411/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D411/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring

Abstract

本发明提供了式I所示的化合物及其互变异构体、对映异构体，或其药学上可接受的盐、晶型、水合物或溶剂合物。实验结果表明，本发明的化合物能够与STING有效结合，并且本发明的化合物作为STING激动剂可用于治疗治疗各种病症，尤其是对白血病有很好的治疗效果。

Description

一种免疫调节剂
技术领域
本发明涉及一种免疫调节剂。
背景技术
人体的免疫系统通常可分为“天然免疫”和“适应免疫”系统。天然免疫系统在抵抗感染、抑制肿瘤生长以及自身免疫疾病的发病过程中起着重要作用，主要通过模式识别受体识别病原微生物和癌细胞组分，启动下游信号通路，最终通过诱导细胞因子表达，杀灭病原微生物和癌细胞组分，以及适应免疫系统促进抗体和特异性T淋巴细胞生成。
STING(干扰素基因刺激因子，TMEM173，MITA等)是胞内应答DNA入侵的关键节点分子，在胞质DNA刺激下，识别胞质DNA受体的信号，对诱导产生干扰素的过程起关键作用。宿主细胞的DNA识别受体识别外源或内源“非己”DNA后，将信号传递给节点分子STING，然后STING迅速二聚化并从内质网转移至核外周小体上。STING的活化导致IRF3和NKκB途径的上调，从而导致干扰素-β和其它细胞因子的诱导。
CDN首先被发现是负责控制原核细胞应答的第二信使。细菌CDN直接激活STING已通过X射线晶体学进行验证(Burdette DL et al.Nature Immunolog,2013(14):19-26)。已发现新的CDN信号转导分子cGAMP可激活STING，其与STING的相互作用也已经通过X射线晶体学进行验证(Cai X et al.Molecular Cell,2014(54):289-296)。
已经显示与STING结合并充当激动剂的化合物在与人PBMC孵育时诱导1型干扰素和其他细胞因子。诱导人干扰素的化合物可用于治疗各种病症，例如治疗过敏性疾病和其它炎性病症，例如过敏性鼻炎和哮喘，治疗感染性疾病、神经退行性疾病、癌前期综合症和癌症，也可以用作免疫组合物或疫苗佐剂。激活STING可能是用于治疗有关1型IFN途径疾病的潜在方法，所述疾病和病症包括炎性、变应性和自身免疫性疾病、感染性疾病、癌症、癌前期综合征，或作为免疫组合物或疫苗佐剂。
发明内容
本发明提供了式I所示的化合物及其互变异构体、对映异构体，或其药学上可接受的盐、晶型、水合物或溶剂合物：
Figure BDA0001938968520000021
其中，
s为0或1；
B环为被0～4个R5取代的5～6元芳环、被0～4个R5取代的5～6元芳杂环；
R5分别独立选自C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基、-(CH2)nORa、-(CH2)nNRaRb、-(CH2)nNRaC(O)Rb、-(CH2)nC(O)NRaRb、-(CH2)nC(O)ORa、-(CH2)nOC(O)Ra；
R8选自氢、C1～C6烷基；
R4选自氢、C1～C6烷基；
R2选自-CONRaRb；
R1、R3分别独立选自氢、卤素、C1～C6烷基；
Rt选自被0～2个Rf取代的C1～C6烯基、被0～2个Rf取代的C1～C6炔基、-(CH2)mRg、-O(CH2)mRg、-S(CH2)nRf；
Rf选自-ORa、-NRaRb、-NRaC(O)Rb、-NRaC(O)ORb、-C(O)NRaRb、-C(O)ORa、-OC(O)Ra、-OC(O)NRaRb、被0～4个Rc取代的3～10元环烷基、被0～4个Rc取代的4～10元杂环烷基；
每个m、n分别独立为0、1、2、3、4、5或6；
当m为0时，Rg选自被0～4个Rc取代的3～10元环烷基、被0～4个Rc取代的3～10元杂环烷基；
当m为1、2、3、4、5或6时，Rg选自被0～4个Rc取代的3～6元环烷基、被0～4个Rc取代的4元杂环烷基、被0～4个Rc取代的7～10元杂环烷基；
Rc选自氢、-ORd、-NRdRe、卤素、＝O、C1～C6烷基；
Rd、Re分别独立地选自氢、C1～C6烷基；
Ra、Rb分别独立地选自氢、C1～C6烷基。
进一步地，B环为被0～2个R5取代的5～6元芳环、被0～2个R5取代的5～6元芳杂环；
Rt选自被0～1个Rf取代的C1～C6烯基、被0～1个Rf取代的C1～C6炔基、-(CH2)mRg、-O(CH2)mRg、-S(CH2)nRf；
Rf选自-ORa、-NRaRb、-NRaC(O)Rb、-NRaC(O)ORb、-C(O)NRaRb、-C(O)ORa、-OC(O)Ra、-OC(O)NRaRb、被0～2个Rc取代的3～10元环烷基、被0～2个Rc取代的4～10元杂环烷基；
每个m、n分别独立为0、1、2、3、4、5或6；
当m为0时，Rg选自被0～2个Rc取代的3～10元环烷基、被0～2个Rc取代的3～10元杂环烷基；
当m为1、2、3、4、5或6时，Rg选自被0～2个Rc取代的3～6元环烷基、被0～2个Rc取代的4元杂环烷基、被0～2个Rc取代的7～10元杂环烷基。
进一步地，式Ⅰ所示化合物可以式Ⅱ表示：
Figure BDA0001938968520000031
其中，s为0或1；
B环选自被0～2个R5取代
Figure BDA0001938968520000032
R5分别独立选自C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基、-(CH2)nORa、-(CH2)nNRaRb、-(CH2)nNRaC(O)Rb、-(CH2)nC(O)NRaRb、-(CH2)nC(O)ORa、-(CH2)nOC(O)Ra；
X’选自O、亚炔基、S或无；
当X’选自O或无时，
n1为0、1、2，
RS选自3～6元环烷基、4元杂环烷基、7～10元杂环烷基；其中杂环烷基的杂原子为O、N，杂原子个数为1、2；
当X’选自S或亚炔基时，
n1为0、1、2，
RS选自-ORa、-NRaC(O)ORb、4～10元杂环烷基；其中杂环烷基的杂原子为O、N，杂原子个数为1、2；
Ra、Rb分别独立地选自氢、C1～C6烷基。
进一步地，当X’选自O或无时，
n1为0、1、2，
RS选自4元杂环烷基、7～10元杂环烷基；其中杂环烷基的杂原子为O、N，杂原子个数为1、2；
当X’选自S或亚炔基时，
n1为0、1、2，
RS选自-OH、-OCH3、-NHC(O)OCH3、4～6元杂环烷基；其中杂环烷基的杂原子为O、N，杂原子个数为1、2。
进一步地，所述7～10元杂环烷基为螺环；其中，所述螺环为
Figure BDA0001938968520000041
Figure BDA0001938968520000042
更进一步地，式Ⅱ所示的化合物具体为：
Figure BDA0001938968520000043
Figure BDA0001938968520000051
进一步地，式Ⅰ所示化合物可以式Ⅲ表示：
Figure BDA0001938968520000052
其中，
B环选自
Figure BDA0001938968520000061
m为0、1、2、3、4、5、6；
当m为0时，A环选自被0～4个Rc取代的3～6元环烷基、被0～4个Rc取代的3～6元杂环烷基；
当m为1、2、3、4、5、6时，A环选自被0～4个Rc取代的3～6元环烷基、被0～4个Rc取代的4元杂环烷基；Rc选自氢、C1～C6烷基；
R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8分别独立地选自氢、C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基；
R2选自-CONRaRb；其中Ra、Rb分别独立地选自氢、C1～C6烷基。
进一步地，R1、R3、R7、R8选自氢。
进一步地，R5、R6分别独立地选自C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基。
进一步地，R2选自-CONRaRb；其中Ra、Rb分别独立地选自氢。
进一步地，R4选自C1～C6烷基。
进一步地，被0～4个Rc取代的3～6元杂环烷基选自含氮、氧、硫的杂环烷基；Rc选自氢。
进一步地，式Ⅲ所示的化合物可进一步以式Ⅲa表示：
Figure BDA0001938968520000062
其中，m为0、1、2、3、4、5、6；
n为0、1、2、3；
p为0、1、2、3、4；
R1、R3、R7、R8分别独立地选自氢；
R4选自C1～C6烷基；
R5、R6分别独自选自C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基；
R2选自-CONRaRb；其中Ra、Rb分别独立地选自氢；
Rc分别独立地选自氢、C1～C6烷基。
进一步地，式Ⅲ所示的化合物可进一步以式Ⅲb表示：
Figure BDA0001938968520000071
其中，当m为0时，n和q相加为2、3、4；
当m为1、2、3、4、5、6时，n和q相加为2；
p为0、1、2、3、4；
R1、R3、R7、R8分别独立地选自氢；
R4选自C1～C6烷基；
R5、R6分别独立地选自C1～C6烷基、卤素取代的C1～C6烷基；
R2选自-CONRaRb；其中Ra、Rb分别独立地选自氢；
X选择-O-、-NRd-、-S-；
Rc分别独立地选自氢、C1～C6烷基。
更进一步地，式Ⅲ所示的化合物可具体表示为：
Figure BDA0001938968520000072
Figure BDA0001938968520000081
本发明还提供了前述的化合物、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物在制备STING激动剂的用途。
本发明还提供了前述的化合物、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物在制备治疗或预防与STING活性相关的疾病的药物中的用途。
本发明还提供了前述的化合物、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物在制备免疫组合物或疫苗佐剂中的用途。
实验结果表明，本发明的化合物能够与STING有效结合，并且本发明的化合物作为STING激动剂可用于治疗治疗各种病症，尤其是对白血病有很好的治疗效果。
本发明所定义的STING活性相关的疾病是STING在该疾病的病理发生中起重要作用的疾病。
STING活性相关的疾病包括炎性、变应性和自身免疫性疾病、感染性疾病、癌症、癌前期综合征。
“癌症”或“恶性肿瘤”是指以不受控制的细胞异常增殖为特征的多种疾病中的任何一种，受影响的细胞在局部或通过血流和淋巴系统扩散到其他部位的能力的身体(即转移)以及许多特征结构和/或分子特征中的任何一个。“癌细胞”是指经历多步骤肿瘤进展的早期，中期或晚期阶段的细胞。癌症包括肉瘤、乳腺癌、肺癌、脑癌、骨癌、肝癌、肾癌、结肠癌和前列腺癌。在一些实施方案中，式I的化合物用于治疗选自结肠癌、脑癌、乳腺癌、纤维肉瘤和鳞状细胞癌的癌症。在一些实施方案中，癌症选自黑素瘤、乳腺癌、结肠癌、肺癌和卵巢癌。在一些实施方案中，所治疗的癌症是转移性癌症。
炎性疾病包括以组织病理性炎症为特征的多种病症。炎性疾病的例子包括寻常性痤疮、哮喘、腹腔疾病、慢性前列腺炎、肾小球性肾炎、炎症性肠病、盆腔炎、再灌注损伤、类风湿性关节炎、结节病、血管炎、房尘螨引起的气道炎症和间质性膀胱炎。炎性疾病与自身免疫性疾病之间存在显著重叠。本发明的一些实施方案涉及炎性疾病及哮喘的治疗。免疫系统通常涉及炎症性疾病，在过敏反应和一些肌病中都有表现，许多免疫系统疾病导致异常炎症。
本发明中提供的化合物和衍生物可以根据IUPAC(国际纯粹与应用化学联合会)或CAS(化学文摘服务社，Columbus，OH)命名系统命名。
关于本发明的使用术语的定义：除非另有说明，本文中基团或者术语提供的初始定义适用于整篇说明书的该基团或者术语；对于本文没有具体定义的术语，应该根据公开内容和上下文，给出本领域技术人员能够给予它们的含义。
“取代”是指分子中的氢原子被其它不同的原子或分子所替换。
碳氢基团中碳原子含量的最小值和最大值通过前缀表示，例如，前缀(Ca～Cb)烷基表明任何含“a”至“b”个碳原子的烷基。因此，例如，(C1～C4)烷基是指包含1～4个碳原子的烷基。
本发明中Ca～Cb烷氧基、Ca～Cb烷酯基、Ca～Cb烷氨基、Ca～Cb酰基分别是指含有“a”至“b”个碳原子的烷基与对应的氧原子、酯基、氨基、酰基相连得到的基团。
本发明中“环烷烃”、“环烷基”指由碳原子相连形成的饱和环或非芳香性的不饱和环，包括单环、并环或螺环。
本发明中“杂环”、“杂环烷烃”、“杂环烷基”指包含至少一个杂原子的饱和饱和环或非芳香性的不饱和环，包括单环、并环或螺环。其中杂原子指氮原子、氧原子、硫原子。
本发明中“芳环”、“芳基”指由碳原子相连形成的具有芳香性的不饱和环。
本发明中“芳杂环”、“芳杂基”指包含至少一个杂原子的芳香性不饱和环，其中杂原子指氮原子、氧原子、硫原子。
卤素为氟、氯、溴或碘。
本发明中“烯基”指包含至少一个碳碳双键的碳氢基团。
本发明中“炔基”指包含至少一个碳碳三键的碳氢基团。
术语“药学上可接受的”是指某载体、运载物、稀释剂、辅料，和/或所形成的盐通常在化学上或物理上与构成某药物剂型的其它成分相兼容，并在生理上与受体相兼容。
术语“盐”和“可药用的盐”是指上述化合物或其立体异构体，与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐，也包括两性离子盐(内盐)，还包括季铵盐，例如烷基铵盐。这些盐可以是在化合物的最后分离和纯化中直接得到。也可以是通过将上述化合物，或其立体异构体，与一定数量的酸或碱适当(例如等当量)进行混合而得到。这些盐可能在溶液中形成沉淀而以过滤方法收集，或在溶剂蒸发后回收而得到，或在水介质中反应后冷冻干燥制得。本发明中所述盐可以是化合物的盐酸盐、硫酸盐、枸橼酸盐、苯磺酸盐、氢溴酸盐、氢氟酸盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁二酸盐、草酸盐、苹果酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐或三氟乙酸盐。
在某些实施方式中，本发明的一种或多种化合物可以彼此联合使用。也可选择将本发明的化合物与任何其它的活性试剂结合使用，用于制备调控细胞功能或治疗疾病的药物或药物组合物。如果使用的是一组化合物，则可将这些化合物同时、分别或有序地对受试对象进行给药。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用(Bruker AvanceIII 400和Bruker Avance 300)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3),氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
LC-MS的测定使用岛津液质联用仪(Shimadzu LC-MS 2020(ESI))。
HPLC的测定使用岛津高压液相色谱仪(Shimadzu LC-20A)。
反相制备色谱使用Gilson GX-281反相制备色谱仪。
薄层层析硅胶板用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买于安耐吉化学、成都科龙化工、韶远化学科技、百灵威科技等公司。
氢气氛围是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气球。
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
实施例中无特殊说明，反应在氮气氛围下进行。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温。
实施例中无特殊说明，M是摩尔每升。
室温为最适宜的反应温度，为20℃～30℃。
DMF:是指N,N-二甲基甲酰胺。
DMSO:是指二甲基亚砜。
DIPEA：是指二异丙基乙基胺。
Boc:是指叔丁基氧羰基。
TFA:是指三氟乙酸。
DBU:1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯。
HATU:2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。
中间体1c的合成：
Figure BDA0001938968520000111
步骤1：4-氯-3-甲氧基-5-硝基苯甲酰胺的合成
将化合物1a(18.5g，75.3mmol)加入到含有氨水(200ml)的单口瓶中，在60℃搅拌3h。反应液浓缩至100ml，冷却后过滤，固体用冰水洗涤，经干燥后得到4-氯-3-甲氧基-5-硝基苯甲酰胺(化合物1b)(12.5g，54.1mmol)，褐色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.29(s,1H),8.04(d,1H),7.87(d,1H),7.78(s,1H),4.01(s,3H)。
MS(ESI)m/z＝231[M+H]+。
步骤2：4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺的合成
在冰浴下，将化合物1b(12.5g，54.1mmol)分散于干燥的DCM(150ml)中，再把三溴化硼(200ml，1M)慢慢滴加到其中。滴加完后撤掉冰浴，氮气保护，室温下反应过夜。反应完全后，反应液倒入冰水中，剧烈搅拌30min后，过滤，并用水洗涤滤饼，滤饼经干燥后得到4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺(化合物1c)(10g，46.2mmol，85.3％收率)，淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):11.73(s,1H),δ8.21(s,1H),7.92(s,1H),7.80(s,1H),7.66(s,1H)。
MS(ESI)m/z＝217[M+H]+。
中间体1h的合成：
Figure BDA0001938968520000121
步骤1：1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯的合成
将1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸(4g，25.9mmol)分散于干燥DCM(80ml)中，在冰浴下，向其中滴加草酰氯(3.9g，31.1mmol)和催化量的DMF。在室温下反应1h后，将可挥发物减压旋蒸除去。向粗品中加入DCM(20ml)，再旋蒸除去溶剂后得到1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯(化合物1g)(4.46g，100％收率)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
在0℃下，将化合物1g(4.46g，25.9mmol)溶于干燥丙酮(20ml)并滴加到硫氰酸钾(5g，51.5mmol)的丙酮(100ml)溶液中，室温下搅拌3h，反应体系经过滤除去无机盐，滤液浓缩后的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/15)得到1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(化合物1h)(4g，20.4mmol，78.7％)，澄清的棕黄色液体。MS(ESI)m/z＝196[M+H]+。
中间体4-乙基-2-甲基噻唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成：
Figure BDA0001938968520000122
步骤1：4-乙基-2-甲基噻唑-5-甲酰氯的合成
将4-乙基-2-甲基噻唑-5-羧酸(2g，11.7mmol)分散于干燥DCM(40ml)中，在冰浴下，向其中滴加草酰氯(1.9g，15.1mmol)和催化量的DMF。在室温下反应1h后，将可挥发物减压旋蒸除去。向粗品中加入DCM(20ml)，再旋蒸除去溶剂后得到4-乙基-2-甲基噻唑-5-甲酰氯(2.2g，100％收率)，直接用于下一步反应。
步骤2：4-乙基-2-甲基噻唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
在0℃下，将4-乙基-2-甲基噻唑-5-甲酰氯(2.2g，11.7mmol)溶于干燥丙酮(10ml)并滴加到硫氰酸钾(2.3g，23.4mmol)的丙酮(50ml)溶液中，室温下搅拌3h，反应体系经过滤除去无机盐，滤液浓缩后的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/15)得到4-乙基-2-甲基噻唑-5-羰基异硫氰酸酯(2.15g，10.2mmol，收率87％)，澄清的棕黄色液体。
MS(ESI)m/z＝213[M+H]+。
中间体2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯合成
Figure BDA0001938968520000131
步骤1：4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸甲酯的合成
将4-氯-3-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(10g，40.7mmol)分散于无水二氯甲烷(100mL)中，在冰浴下慢慢滴加三溴化硼(40.8g,162.8mmol),滴加完后慢慢升至室温搅拌反应过夜。反应完全后，在冰浴下缓慢滴加甲醇淬灭，然后将其旋干。在向其中加入甲醇(100mL)，浓硫酸(0.2mL),反应液加热至75℃，搅拌过夜。冷却后，减压浓缩除掉溶剂，再加入150mL水，超声分散后，过滤，固体再用水洗涤，将固体干燥后得到4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸甲酯(8.89g，38.4mmol)。
MS(ESI)m/z＝232[M+H]+。
步骤2：4-氯-3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)苯甲酸甲酯的合成
向2-(氧杂环丁烷-3-基)乙醇(1.0g，9.79mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入TEA(2.7mL，19.58mmol)和对甲苯磺酰氯(2.0g，10.77mmol)，室温下反应2h，加水和二氯甲烷萃取，有机相分别用水、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到2-(氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯(2.2g，8.6mmol)，直接用于下一步反应。
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸甲酯(1.0g,3.9mmol)的DMF(10mL)溶液中加入碳酸钾(1.08g,7.8mmol)、碘化钾(0.13g，0.78mmol)和2-(氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯(1.1g,3.9mmol)，在75℃下反应12h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水、饱和食盐水洗，再干燥浓缩后，得到4-氯-3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)苯甲酸甲酯(1.2g,收率88％)。
MS(ESI)m/z＝316[M+H]+。
步骤3：3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯的合成
向4-氯-3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)苯甲酸甲酯(1.2g,3.8mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.98g，7.6mmol)和正丙胺(0.67g，11.4mmol)，在50℃下反应3h。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到：3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯(1.28g，3.8mmol，100％收率)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝339[M+H]+。
步骤4：3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯的合成
向3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯(1.28g，3.8mmol)的甲醇(15mL)溶液中加入10％Pd/C(0.13g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯(1.1g，3.5mmol)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝308[M+H]+。
步骤5：2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
室温下将3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酸甲酯(472mg，1.53mmol)和1,3-二羧甲基-2-甲基-2-硫代异脲(347.2mg，1.68mmol)溶解在冰醋酸(5mL)中反应混合液升温至80℃，并在此温度下搅拌2h。冷却至室温后，加水稀释，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相用水洗涤，并用无水硫酸钠干燥后浓缩得到的粗品，经反相柱层析分离(洗脱剂：乙腈/水＝30/70，v/v)得化合物(125mg,0.37mmol)。
MS(ESI)m/z＝334[M+H]+。
中间体2-乙基-6-甲基烟酸的合成
Figure BDA0001938968520000141
步骤1：2-乙基-6-甲基烟酸甲酯的合成
将3-氧代戊酸甲酯(1g，7.68mmol),4-三甲基硅基-3-丁炔-2-酮(1.13g，8.068mmol)和乙酸铵(1.78g，23.054mmol)加入到甲醇(50mL)溶液中升温至60℃反应过夜。冷却至室温，浓缩至干，残留液用HCl(1M，20mL)稀释，用乙酸乙酯萃取杂质，水相用固体碳酸氢钠调至pH＝9,用二氯甲烷萃取(30mL×4)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到化合物2-乙基-6-甲基烟酸甲酯(585mg,3.26mmol),直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝180[M+H]+。
步骤2：2-乙基-6-甲基烟酸的合成
将化合物2-乙基-6-甲基烟酸甲酯(585mg，3.27mmol)溶解在THF(10ml),MeOH(5ml)和H2O(2ml)中，冰水冷却下加入氢氧化锂(53.04mg，1.26mmol)，升至室温反应过夜。反应液稀HCl(1M)调至pH＝4,用二氯甲烷萃取(30mL×4)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到化合物2-乙基-6-甲基烟酸(399mg,2.42mmol),收率74％。
MS(ESI)m/z＝166[M+H]+。
中间体4-乙基-2-甲基恶唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
Figure BDA0001938968520000151
步骤1：2-氯-3-氧代戊酸甲酯的合成
将SO2Cl2(7.2g，58mmol)逐滴滴入1(5g，38mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中在冰浴下，升温至室温并搅拌4h，反应液用饱和碳酸钠溶液洗涤，分离的有机相用饱和食盐水洗，然后用无水硫酸钠干燥，过滤得到的滤液旋干得到化合物2-氯-3-氧代戊酸甲酯(6g，36.5mmol)，无色油状物，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝166.0[M+H]+
步骤2：2-乙酰氧基-3-氧代戊酸甲酯的合成
在冰浴下，将TEA(12.5mL)逐滴滴入醋酸(12.5mL)的DMF(63mL)溶液中，升温至室温后，将2-氯-3-氧代戊酸甲酯(6g，36.5mmol)加入反应液中，室温搅拌过夜。TLC监测反应完全，反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤得到的滤液旋干得到化合物2-乙酰氧基-3-氧代戊酸甲酯(3.0g，15.9mmol)，黄色油状物，直接用于下一步反应。
步骤3：4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸甲酯的合成
2-乙酰氧基-3-氧代戊酸甲酯(3.0g，15.9mmol)溶于醋酸(50mL)中，然后加入乙酸铵(9.8g，127.6mmol)。混合液升温至120℃，并在此温度下搅拌4小时。浓缩反应液后，加水稀释，用乙酸乙酯萃取，分离的有机相用依次用水和饱和食盐水洗涤，然后无水硫酸钠干燥，过滤得到的滤液旋干，粗品用硅胶柱分离纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，90/10)得到4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸甲酯(0.52g，3.1mmol)。
MS(ESI)m/z＝170.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.89(s,3H),2.84(q,J＝7.6Hz,2H),2.50(s,3H),1.23(t,J＝7.6Hz,3H).
步骤4：4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸的合成
将4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸甲酯(323mg，1.9mmol)溶解在THF/MeOH(10mL/5mL)中，加入水合氢氧化锂(160mg，3.8mmol)，室温搅拌过夜。加水稀释反应液，加乙酸乙酯萃取，分离的水相用HCl(2M)调节PH至2.0，然后用乙酸乙酯再萃取。再次得到的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸(220mg，1.42mmol)，白色固体。
MS(ESI)m/z＝156.1[M+H]+
步骤5：4-乙基-2-甲基恶唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
将4-乙基-2-甲基恶唑-5-羧酸(220mg，1.42mmol)分散于干燥THF(10ml)中，在冰浴下，向其中滴加草酰氯(270mL，2.13mmol)和催化量的DMF。在室温下反应30min后，将可挥发物减压旋蒸除去。向粗品中加入DCM(20ml)，再旋蒸除去溶剂后得到的黄色油状物粗品，直接用于下一步反应。
在0℃下，将上述黄色油状物溶于干燥丙酮(10ml)并滴加到硫氰酸钾(276mg，2.84mmol)的丙酮(15ml)的溶清液中，室温下搅拌3h，反应体系经过滤除去无机盐，用正己烷洗涤，滤液浓缩后的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/7)得到4-乙基-2-甲基恶唑-5-羰基异硫氰酸酯(176mg，63％)，澄清的浅黄色液体。
MS(ESI)m/z＝197.0[M+H]+
实施例1、本发明化合物的制备
2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0001938968520000171
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)苯甲酰胺的合成
向化合物1c(1.0g，4.6mmol)的DMF(30ml)溶液中加入碳酸钾(1.27g，9.2mmol)和3-碘氧杂环丁烷(1.27g，6.9mmol)，在100℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)苯甲酰胺(化合物1d)(0.8g，2.9mmol，63.9％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝273[M+H]+。
步骤2：3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物1d(0.16g，0.62mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.15g，1.86mmol)和正丙胺(0.14g，1.86mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物1e)(0.14g，0.47mmol)，橙红色固体。
1HNMR(400MHz,DMSO):8.23(s,1H),8.00(s,1H),7.82(s,1H),7.31(s,1H),7.08(s,1H),5.41-5.36(m,1H),4.96(t,2H),4.64(q,2H),3.58(q,2H),3.33(s,1H),1.61-1.56(m,2H),0.89(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝296[M+H]+。
步骤3：3-胺基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物1e(0.144g,0.62mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％Pd/C(0.05g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到化合物1i(0.12g，0.45mmol)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝266[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.092g，0.46mmol)加入到化合物1i(0.12g，0.45mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.19g，0.5mmol)和DBU(0.1g，6.5mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物1(0.058g，0.13mmol，28.3％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO):12.89(s,1H),7.99(s,1H),7.71(s,1H),7.40(s,1H),6.96(s,1H),6.66(s,1H),5.55-5.52(m,1H),5.05(t,2H),4.66-4.62(m,4H),4.39(t,2H),2.19(s,3H),1.87-1.81(m,2H),1.38(t,3H),0.98(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝427[M+H]+。
实施例2、本发明化合物的制备
2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(环丙基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0001938968520000181
步骤1：4-氯-3-(环丙基甲氧基)-5-硝基苯甲酰胺的合成
向化合物1c(0.4g，1.85mmol)的DMF(10ml)溶液中加入碳酸铯(1.2g，3.7mmol)和(溴甲基)环丙烷(0.5g，3.7mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-(环丙基甲氧基)-5-硝基苯甲酰胺(化合物2a)(0.31g,1.15mmol,62％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝271[M+H]+。
步骤2：3-(环丙基甲氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物2a(0.17g，0.62mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.24g，1.86mmol)和正丙胺(0.11g，1.86mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-(环丙基甲氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物2b)(160mg，0.54mmol，87％收率)，橙红色固体。
1HNMR(400MHz,DMSO)8.20(s,1H)7.98(s,1H)7.92(t,1H)7.49(s,1H)3.92(d,2H)3.58(m,2H)1.55～1.64(m,2H)1.23～1.31(m,1H)0.88(t,3H)0.61(q,2H)0.36(q,2H)。
MS(ESI)m/z＝294[M+H]+。
步骤3：3-(环丙基甲氧基)-5-胺基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物2b(0.15g，0.51mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％的Pd/C(0.05g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到3-(环丙基甲氧基)-5-胺基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物2c)(0.130g，0.49mmol，96％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝264[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(环丙基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.09g，0.46mmol)加入到化合物2c(0.125g,0.47mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.18g，0.47mmol)和DBU(0.09g，0.58mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物2(0.051g，0.12mmol，25％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO)7.97(s,1H)7.66(s,1H)7.35(s,2H)6.64(s,1H)4.63(q,2H)4.35(t,2H)4.06(d,2H)2.18(s,3H)1.78～1.87(m,2H)1.36(t,3H)1.29～1.34(m,1H)0.96(t,3H)0.65(q,2H)0.41(q,2H)。
MS(ESI)m/z＝425[M+H]+。
实施例3、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000191
步骤1：4-氯-3-硝基-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺的合成
向3-羟基四氢呋喃(1g，11.3mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入DIPEA(2.9g，22.6mmol)、DMAP(0.13g，1.1mmol)和对甲苯磺酰氯(2.35g，12.4mmol)，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到3-四氢呋喃对甲苯磺酸酯(0.45g，1.85mmol)，直接用于下一步反应。
向化合物1c(0.4g，1.85mmol)的DMF(15ml)溶液中加入碳酸铯(1.2g，3.7mmol)和3-四氢呋喃对甲苯磺酸酯(0.45g，1.85mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺(化合物3a)(0.3g，2.9mmol，56％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝287[M+H]+。
步骤2：3-硝基-4-(丙基氨基)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺的合成
向化合物3a(0.17g，0.62mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.24g，1.86mmol)和正丙胺(0.11g，1.86mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-4-(丙基氨基)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺(化合物3b)(0.16g，0.51mmol，83％收率)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝310[M+H]+。
步骤3：3-氨基-4-(丙基氨基)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺的合成
向化合物3b(0.15g，0.48mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％Pd/C(0.015g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到3-氨基-4-(丙基氨基)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酰胺(化合物3c)(0.13g,0.48mmol,99％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝310[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.085g，0.43mmol)加入到化合物3c(0.12g，0.43mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.165g，0.43mmol)和DBU(0.08g，0.51mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物3(0.05g，0.11mmol，96％纯度，24％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)8.03(s,1H)7.69(s,1H)7.40(s,1H)7.35(s,1H)6.65(s,1H)5.32(s,1H)4.62(q,2H)4.29(t,2H)3.90～4.00(m,4H)2.29～2.38(m,1H)2.19(s,3H)2.07～2.15(m,1H)1.72～1.82(m,2H)1.36(t,3H)0.92(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝441[M+H]+。
实施例4、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000211
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)苯甲酰胺的合成
向氧杂环丁烷-3-基甲醇(0.6g，6.81mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入DIPEA(2.9g，22.6mmol)、DMAP(0.08g，0.68mmol)和对甲苯磺酰氯(2.6g，13.6mmol)，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到氧杂环丁烷-3-基甲基对甲苯磺酸酯(1.2g,4.9mmol，71.9％收率)，直接用于下一步反应。
向化合物1c(0.4g，1.85mmol)的DMF(10ml)溶液中加入碳酸铯(1.2g，3.7mmol)和氧杂环丁烷-3-基甲基对甲苯磺酸酯(0.5g，2mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)苯甲酰胺(化合物4a)(0.21g，0.73mmol，39.5％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝287[M+H]+。
1HNMR(400MHz,DMSO):8.30(s,1H),8.08(d,1H),7.94(d,1H),7.81(s,1H),7.33(s,1H),4.76(q,2H),4.50-4.46(m,4H)。
步骤2：3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物4a(0.21g，0.73mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.18g，1.46mmol)和正丙胺(0.08g，1.46mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物4b)(202mg，0.65mmol，89％收率)，橙红色固体。
1HNMR(400MHz,DMSO):8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.85(s,1H),7.59(s,1H),7.33(s,1H),4.77(q,2H),4.46(t,2H),4.31(d,2H),3.50-3.41(m,3H),1.57-1.51(m,2H),0.85(t,3H).
MS(ESI)m/z＝310[M+H]+。
步骤3：3-胺基-5-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物4b(202mg，0.65mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％Pd/C(0.05g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到化合物4c(0.18g，0.65mmol，100％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝280[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.13g，0.67mmol)加入到化合物4c(0.18g，0.65mmol)的DMF(10mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.25g，0.67mmol)和DBU(0.1g，0.67mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物4(110mg，0.25mmol，37.3％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO):12.87(s,1H),8.01(s,1H),7.70(s,1H),7.44(s,1H),7.39(s,1H),6.64(s,1H),4.82(q,2H),4.66(q,2H),4.55(t,2H),4.43(d,2H),4.31(t,2H),3.56-3.53(m,1H),2.19(s,3H),1.87-1.81(m,2H),1.38(t,3H),0.94(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝441[M+H]+。
实施例5、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000221
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)苯甲酰胺的合成
向氧杂环丁烷-2-基甲醇(1g，11.3mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入DIPEA(2.9g，22.6mmol)、DMAP(0.13g，1.1mmol)和对甲苯磺酰氯(2.35g，12.4mmol)，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到氧杂环丁烷-2-基甲基对甲苯磺酸酯(1.9g，7.91mmol，70％收率)，直接用于下一步反应。
向化合物1c(0.3g，1.38mmol)的DMF(15ml)溶液中加入碳酸铯(0.89g，2.76mmol)和氧杂环丁烷-2-基甲基对甲苯磺酸酯(0.5g，2.07mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)苯甲酰胺(化合物5a)(0.25g，0.87mmol，63％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝287[M+H]+。
步骤2：3-硝基-5-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物5a(0.25g，0.87mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.33g，2.52mmol)和正丙胺(0.15g，2.52mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-5-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物5b)(0.19g，95％收率)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝310[M+H]+。
步骤3：3-胺基-5-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物5b(0.18g，0.58mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％的Pd/C(0.05g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到化合物5c(0.16g，0.58mmol，99％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝280[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氧杂环丁烷-2-基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.1g，0.51mmol)加入到化合物5c(0.15g，0.53mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.2g，0.52mmol)和DBU(0.1g，0.64mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物5(0.08g，0.18mmol，98％纯度，34％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO)8.00(s,1H)7.70(s,1H)7.44(s,1H)7.38(s,1H)6.65(s,1H)5.13～5.14(m,1H)4.63(q,3H)4.51～4.56(m,1H)4.31～4.42(m,4H)2.73～2.82(m,1H)2.58～2.67(m,1H)2.18(s,3H)1.77～1.86(m,2H)1.36(t,3H)0.91(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝441[M+H]+。
实施例6、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000241
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)苯甲酰胺的合成
向N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-甲醇(1.0g，5.34mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入DIPEA(1.37g，10.6mmol)、DMAP(0.061g，0.5mmol)和对甲苯磺酰氯(1.1g，5.87mmol)，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲基对甲苯磺酸酯(1.2g，4.9mmol，91％收率)，直接用于下一步反应。
向化合物1c(0.23g，1.08mmol)的DMF(15ml)溶液中加入碳酸铯(0.7g，2.16mmol)和N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲基对苯磺酸酯(0.55g，1.6 1mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)苯甲酰胺(化合物6a)(0.25g，0.65mmol，60％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝386[M+H]+。
步骤2：3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物6a(0.245g，0.63mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.24g，1.86mmol)和正丙胺(0.11g，1.86mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物6b)(0.21g，0.52mmol，82％收率)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝409[M+H]+。
步骤3：3-胺基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物6b(0.2g，0.49mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％的Pd/C(0.06g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C,滤液浓缩后得到3-胺基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物6c)(0.14g，0.36mmol，75％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝379[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.066g，0.34mmol)加入到化合物6c(0.13g，0.34mmol)的DMF(3mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.13g，0.34mmol)和DBU(0.063g，0.41mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相MPLC制备得到化合物6d(0.06g，0.11mmol)。
1HNMR(400MHz,DMSO)1.99(s,1H)7.69(d,1H)7.42(d,1H)7.38(s,1H)6.63(s,1H)4.63(q,2H)4.34(d,2H)4.30(t,2H)4.04(s,2H)3.79(s,2H)3.04～3.12(m,1H)1.72～1.82(m,2H)1.40(s,9H)1.36(t,3H)0.91(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝540[M+H]+。
步骤5：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，向化合物6d(0.05g，0.09mmol)的DCM(3mL)溶液中加入TFA(1mL)。室温下反应1h，浓缩后的粗品经反相HPLC制备得到化合物6(0.027g，0.06mmol，98％纯度，66％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO)8.83(d,2H)8.00(s,1H)7.70(s,1H)7.43(s,1H)7.41(s,1H)6.64(s,1H)4.63(q,2H)4.41(d,2H)4.28(t,2H)4.10～4.18(m,2H)3.88～3.95(m,2H)3.32～3.39(m,1H)2.18(s,3H)1.77(m,2H)1.35(t,3H)0.91(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝440[M+H]+。
实施例7、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000261
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基)苯甲酰胺的合成
向N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-乙醇(1.0g，4.9mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入DIPEA(1.3g，9.8mmol)、DMAP(0.06g，0.49mmol)和对甲苯磺酰氯(1.0g，5.3mmol)，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙基对苯磺酸酯(1.38g，3.9mmol)，直接用于下一步反应。
向化合物1c(0.4g,1.85mmol)的DMF(15ml)溶液中加入碳酸铯(1.2g，3.7mmol)和N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基对甲苯磺酸酯(0.68g，1.9mmol)，在70℃下反应24h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过硅胶柱纯化得到4-氯-3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基)苯甲酰胺(化合物7a)(0.52g，1.3mmol，70％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝400[M+H]+。
步骤2：3-硝基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物7a(0.25g，0.62mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.24g，1.86mmol)和正丙胺(0.11g，1.86mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物7b)(0.22g，0.52mmol)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝423[M+H]+。
步骤3：3-胺基-5-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物7b(0.21g,0.49mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％Pd/C(0.02g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到化合物7c(0.19g，0.48mmol)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝393[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(N-叔丁氧羰基氮杂环丁烷-3-基乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将化合物1h(0.088g，0.45mmol)加入到化合物7c(0.18g，0.45mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.18g，0.47mmol)和DBU(0.085g，0.55mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相MPLC制备得到化合物7d(0.03g,0.05mmol)。
1HNMR(400MHz,DMSO)7.98(s,1H)7.67(d,1H)7.37(d,2H)6.64(s,1H)4.31(t,2H)4.18(t,2)3.90(br,2)3.62(br,2)2.71～2.78(m,1H)2.18(s,3H)2.14(dd,2H)1.80(dd,2H)1.38(s,9H)1.35(t,3H)0.93(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝554[M+H]+。
步骤5：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(氮杂环丁烷-3-基乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，向化合物7d(0.02g，0.036mmol)的DCM(1mL)溶液中加入TFA(1mL)。室温下反应1h，浓缩后的粗品经反相HPLC制备得到化合物7(0.01g，0.023mmol，97％纯度)。
1HNMR(400MHz,DMSO)8.66(d,2H)7.99(s,1H)7.67(s,1H)7.38(s,1H)6.64(s,1H)4.63(q,2H)4.31(t,2H)4.18(t,2H)4.03～4.10(m,2H)3.76～3.85(m,2H)2.97～3.05(m,1H)2.18(s,3H)2.16(t,1H)1.80(dd,2H)1.38(s,9H)1.36(t,3H)0.94(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝454[M+H]+。
实施例8、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000281
步骤1：4-氯-3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)苯甲酰胺的合成
向2-(氧杂环丁烷-3-基)乙醇(1.0g，9.79mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入TEA(2.7mL，19.58mmol)和对甲苯磺酰氯(2.0g，10.77mmol)，室温下反应2h，加水和二氯甲烷萃取，有机相分别用水、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到2-(氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯，直接用于下一步反应。
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺(845mg，3.9mmol)的DMF(10mL)溶液中加入碳酸钾(1.08g,7.8mmol)、碘化钾(0.12g，0.72mmol)和2-(氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯(1.0g，3.9mmol)，在75℃下反应12h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水、饱和食盐水洗，再干燥浓缩后，得到4-氯-3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)苯甲酰胺(化合物8a)(0.86g，收率73.5％)。
MS(ESI)m/z＝301[M+H]+。
步骤2：3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物8a(0.21g，0.73mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(0.18g，1.46mmol)和正丙胺(0.08g，1.46mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到：3-硝基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物8b)(202mg，0.65mmol，89％收率)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝324[M+H]+。
步骤3：3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物8b(202mg，0.65mmol)的甲醇和乙酸乙酯溶液中加入10％Pd/C(0.05g)，氢化还原3h，过滤除掉Pd/C，滤液浓缩后得到3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物8c)(0.18g，0.65mmol，100％收率)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝294[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在0℃，将1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(0.13g，0.67mmol)加入到化合物8c(0.18g，0.65mmol)的DMF(10mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(0.25g，0.67mmol)和DBU(0.1g，0.67mmol)，在室温下反应1h，反应液浓缩后得到粗品经反相HPLC制备得到化合物8(110mg，0.25mmol，37.3％收率)。
1HNMR(400MHz,DMSO):12.85(s,1H),7.99(s,1H),7.67(s,1H),7.37(m,2H),6.64(s,1H),4.75(t,2H),4.64(q,2H),4.39(t,2H),4.31(d,2H),4.18(t,2H),3.24-3.19(m,1H),2.25-2.21(m,5H),1.81(q,2H),1.38(t,3H),0.95(t,3H)。
MS(ESI)m/z＝455[M+H]+。
实施例9、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000291
步骤1：2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙酸乙酯的合成
在–20℃下向TMSCl(3.52g，32.38mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液中加入CuI(267mg，1.4mmol)和化合物9a(2.0g，14.8mmol)并氮气保护，五分钟后，将CH3MgBr(42mL，42mmol，1M的THF溶液)滴加入上述混合液维持在-20℃，滴加完毕，反应液缓慢升温至室温并搅拌3小时，加饱和氯化铵溶液淬灭反应，加二氯甲烷萃取，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后上硅胶柱分离(石油醚/乙酸乙酯＝20/1，v/v)得到2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙酸乙酯(化合物9b)(1.2g，7.6mmol，53.9％收率)无色液体。
MS(ESI)m/z＝159.2[M+H]+
步骤2：2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙醇的合成
向化合物9b(580mg，3.67mmol)的THF(10ml)溶液中加入LiAlH4(167mg，4.4mmol)在冰浴下，反应液缓慢升至室温然后搅拌2h。反应液在冰浴下倒入十水硫酸钠固体中搅拌淬灭，然后过滤，滤饼用二氯甲烷和甲醇冲洗几遍，得到的滤液旋干，即得到2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙醇(化合物9c)(430mg，100％)浅黄色液体，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝117.0[M+H]+
步骤3：2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯的合成
向化合物9c(426mg，3.67mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入TEA(800mg，7.34mmol)和对甲苯磺酰氯(698mg，3.67mmol)在冰浴下，室温下反应2h，分别加水、饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩后得到2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙基4-甲基苯磺酸酯(化合物9d)(650mg，收率65.5％)黄色油状物，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝271.0[M+H]+
步骤4：4-氯-3-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-5-硝基苯甲酰胺的合成
向化合物9d(521mg，2.4mmol)的DMF(10ml)溶液中加入碳酸钾(663mg，4.8mmol)和化合物1c(650mg,2.4mmol)，在75℃下反应3h。反应完后过滤除掉无机盐，将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后，经过乙酸乙酯/石油醚重结晶后过滤后得到4-氯-3-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-5-硝基苯甲酰胺(化合物9e)(700mg,2.22mmol,93％收率)，淡黄色固体。
MS(ESI)m/z＝315.0[M+H]+
步骤5：3-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向化合物9e(700mg,2.22mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入正丙胺(917mg，15.54mmol)，在50℃下反应3h。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物9f)(700mg，2.08mmol，收率93％)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝338.0[M+H]+
步骤6：3-氨基-5-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
化合物9f(700mg，2.08mmol)溶解于甲醇(10mL)，溶清液冷却到0℃，然后依次加入氨水(3mL，20.77mmol)，连二亚硫酸钠(1.81g，10.38mmol)水溶液(5mL)。反应混合液在0℃下搅拌1h，反应液颜色由橙红色变为白色。反应液旋除甲醇，然后加水稀释，加乙酸乙酯萃取(20mL x 4)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗(20mL x 2)，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到3-氨基-5-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(化合物9g)(398mg，收率62％)，黄色油状物。
MS(ESI)m/z＝308.0[M+H]+
步骤7：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5--甲酰胺的合成
在0℃，将1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(248mg，1.27mmol)加入到化合物9g(390mg，1.27mmol)的DMF(5mL)中，滴加完后继续反应20min。然后向反应液中加入HATU(579mg，1.52mmol)和DIPEA(491mg，3.81mmol)，在室温下反应1h，反应液加水稀释，析出白色固体经过滤，然后以二氯甲烷/石油醚重结晶得到化合物9(280mg,0.60mmol,97％纯度，47％收率)。
MS(ESI)m/z＝469.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.84(s,1H),7.98(s,1H),7.67(d,J＝1.1Hz,1H),7.41(s,1H),7.38(s,1H),6.62(s,1H),4.62(q,J＝7.1Hz,2H),4.46(d,J＝5.6Hz,2H),4.33–4.16(m,5H),2.28–2.09(m,4H),1.79(dq,J＝14.4,7.3Hz,2H),1.42–1.19(m,5H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例10、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000311
步骤1：1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的合成
室温下将3-甲基-1氢-吡唑-5-碳酸甲酯(5.39g，38.46mmol)和(2-溴乙氧基)-特丁基二甲基硅烷(11g，45.98mmol)溶解在DMF(60mL)中，再加入碳酸钾(9.66g，70mmol)。
升温至60℃反应12h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(200mL×4)，有机相用水洗涤(100mL×3)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸后,柱层析纯化(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚＝1/10,v/v)得到1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(化合物10a)(4.73g,收率41％),无色油状物。
MS(ESI)m/z＝299[M+H]+。
步骤2：1-(2-羟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的合成
化合物10a(3.7g，12.4mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)中，三氟乙酸(10mL)逐滴加入。反应液室温搅拌30分钟后。旋干反应液，经反相制备纯化(洗脱剂乙腈/水＝30/70，v/v)得到1-(2-羟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(化合物10b)(1.67g，收率73％)，浅黄色固体。
MS(ESI)m/z＝185[M+H]+。
步骤3：1-(2-氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的合成
在冰浴下，将DAST(2.92g，18.13mmol)滴加入化合物10b(1.66g，9.06mmol)和三乙胺(1.83g，18.13mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中，升至室温反应12h。反应液用5％的碳酸氢钠水(40mL)淬灭后用乙酸乙酯萃取(200mL×3)，合并有机相并用水(50mL×3)洗涤，然后柱层析分离(洗脱剂石油醚/乙酸乙酯＝1/3,v/v)得到1-(2-氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(化合物10c)(500mg，收率29％)，油状物。
MS(ESI)m/z＝187[M+H]+。
步骤4：1-(2-氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸的合成
将氢氧化锂(320mg，13.43mmol)的水溶液(2mL)加入化合物10c(495mg，2.66mmol)的四氢呋喃(3mL)和甲醇(2mL)混合液中，反应液室温搅拌2h后。加入20mL水稀释，旋掉有机溶剂后用乙酸乙酯萃取一次，水相用1N HCl调至pH＝4后由乙酸乙酯萃取(10x4)，合并有机相并用水洗涤，旋干溶剂得到化合物1-(2-氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸化合物10d(353mg，收率75％)，无色油状物。
MS(ESI)m/z＝173[M+H]+。
步骤5：1-氟代乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
将化合物10d(350，2.03mmol)分散于干燥DCM(10mL)中，在冰浴下，向其中滴加草酰氯(512mg，4.07mmol)和催化量的DMF。在室温下反应1h后，将可挥发物减压旋蒸除去。向粗品中加入DCM(20mL)，再旋蒸除去溶剂后得到1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯(386mg，100％收率)，直接用于下一步反应。
在0℃下，将1-氟代乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯(386mg，2.03mmol)溶于干燥丙酮(5mL)并滴加到硫氰酸钾(395mg，4.07mmol)的丙酮(15mL)溶液中，室温下搅拌3h，反应体系经过滤除去无机盐，滤液浓缩后的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/15)得到1-氟代乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(化合物10e)(400mg，1.88mmol，92％)，澄清的棕黄色液体。
MS(ESI)m/z＝214[M+H]+。
步骤6：2-(1-(2-氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在冰浴下，将化合物1-氟代乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰基异硫氰酸酯(75mg，0.351mmol)滴加入3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(100mg，0.341mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中，反应0.5h。然后HATU(130mg，0.341mmol)和N,N-二异丙基乙胺(130mg,1.01mmol)加入反应液,继续室温搅拌3h，反应液用由柱层析分离(洗脱剂乙腈/水＝1/3,v/v)得到化合物10(14mg)，白色固体。
MS(ESI)m/z＝473[M+H]+。
1HNMR(400MHz,DMSO)0.93(t,J＝7.0Hz,3H)1.75～1.84(m,2H)2.20(s,3H)3.16～3.25(m,1H)4.15(t,J＝6.4Hz,2H)4.31(t,J＝7.0Hz,2H)4.37～4.42(m,3H)4.71～4.75(m,4H)4.86(t,J＝5.0Hz,1H)4.93(t,J＝4.2Hz,1H)4.99(t,J＝4.2Hz,1H)6.69(s,1H)7.33(d,J＝11.6Hz,1H)7.37(s,1H)7.67(s,1H)7.97(d,J＝6.8Hz,1H)12.83(s,1H)
实施例11、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000331
步骤1：1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯的合成
室温下将3-甲基-1氢-吡唑-5-碳酸甲酯(2.8g，19.98mmol)和2-溴-1,1-二氟乙烷(3.18g，21.94mmol)溶解在DMF(30mL)中，再加入碳酸钾(4.14g，30mmol)。升温至50℃反应12h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(200mL×4)，有机相用水洗涤(100mL×3)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸后,柱层析纯化(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚＝1/10,v/v)得到1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(化合物11a)(2.4g，收率58％)，无色油状物。
MS(ESI)m/z＝205[M+H]+。
步骤2：1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸的合成
将氢氧化锂(1.09g，25.95mmol)的水溶液(10mL)加入化合物11a(1.06g，5.19mmol)的四氢呋喃(10mL)和甲醇(5mL)混合液中。反应液室温搅拌2h后。旋干有机溶剂后先用乙酸乙酯萃取一次后水相用稀盐酸(1M)酸化到pH≈4后由乙酸乙酯萃取(10mLx3)，合并有机相并用水和饱和食盐水洗涤，干燥后旋干溶剂得到1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸(化合物11b)(950mg，收率96％)无色油状物。
MS(ESI)m/z＝191[M+H]+。
步骤3：1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯的合成
将化合物11b(265，1.39mmol)分散于干燥DCM(5mL)中，在冰浴下，向其中滴加草酰氯(190mg，1.5mmol)和催化量的DMF。在室温下反应1h后，将可挥发物减压旋蒸除去。向粗品中加入DCM(20mL)，再旋蒸除去溶剂后得到1-2,2-二氟乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯(289mg，100％收率)，直接用于下一步反应。
在0℃下，将1-2,2-二氟乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-碳酰氯(289mg，1.39mmol)溶于干燥丙酮(5mL)并滴加到硫氰酸钾(270mg，2.78mmol)的丙酮(10mL)溶液中，室温下搅拌3h，反应体系经过滤除去无机盐，滤液浓缩后经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/15)得到1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(化合物11c)(250mg，1.08mmol，77％)，澄清的棕黄色液体。
MS(ESI)m/z＝232[M+H]+。
步骤4：2-(1-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在冰浴下，将化合物1-氟代乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(50mg，0.216mmol)滴加入3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(63mg，0.216mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中，反应0.5h。然后HATU(88mg，0.216mmol)和N,N-二异丙基乙胺(85mg,0.65mmol)加入反应液,继续室温搅拌3h，反应液直接用于反相HPLC纯化(洗脱剂：乙腈/水＝1/3,v/v)得到化合物11(18.42mg，收率17％)，白色固体。
MS(ESI)m/z＝491[M+H]+。
1HNMR(400MHz,DMSO)12.86(s,1H)7.98(s,1H)7.67(s,1H)7.37(s,2H)6.73(s,1H)6.40(t,J＝55.6Hz,1H)5.11(t,J＝12.4Hz,2H)4.72(t,J＝6.8Hz,2H)4.38(t,J＝5.6Hz,2H)4.31(t,J＝6.4Hz,2H)4.15(t,J＝6.0Hz,2H)3.16～3.23(m,1H)2.18～2.24(m,2H)2.20(s,3H)1.79(q,J1＝6.8Hz,J2＝13.6Hz,2H)0.93(t,J＝7.2Hz,3H)
实施例12、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000351
步骤1：2-氯-6-乙基异烟酸甲酯的合成
在室温下，将2,6-二氯烟酸甲酯(544mg，2.64mmol)和二乙基锌(2.64mL，2.64mmol)加到1,4-二氧六环(8mL)中,氮气置换后加入Pd(dppf)Cl2(70mg，0.264mmol)，氮气换气后升温至70℃搅拌反应16h。反应完成后，冷却至室温，加水用乙酸乙酯萃取(20mL x3)，合并有机相并分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并过滤后旋干溶剂，经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/15)得到2-氯-6-乙基异烟酸甲酯(化合物12a)(308mg，0.1.54mmol)，收率：58％。
MS(ESI)m/z＝200[M+H]+。
步骤2：(2-氯-6-乙基吡啶-4-基)甲醇的合成
在冰浴下，将氢化铝锂(71mg，1.87mmol)加到2-氯-6-乙基异烟酸甲酯(305mg，1.53mmol)的四氢呋喃(3mL)中，加完后升至室温反应2h，反应完成后，用氯化铵饱和溶液淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，合并有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并过滤后旋干溶剂得到(2-氯-6-乙基吡啶-4-基)甲醇(化合物12b)(200mg，1.17mmol)，收率75％，直接用于下一步。
MS(ESI)m/z＝172[M+H]+。
步骤3：4-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-2-氯-6-乙基吡啶的合成
在冰浴下，将叔丁基二甲基氯硅烷(210mg，2.55mmol)加到(2-氯-6-乙基吡啶-4-基)甲醇(195mg，1.16mmol)、咪唑(159mg，2.34mmol)和4-二甲氨基吡啶(20mg，0.16mmol)的二氯甲烷(10mL)中，加完后升至室温反应3h，反应完成后加二氯甲烷稀释，用水和饱和食盐水洗涤，旋干溶剂得到的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚v/v＝1/10)得到4-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-2-氯-6-乙基吡啶(化合物12c)(153mg，0.535mmol)，收率：45％。
MS(ESI)m/z＝286[M+H]+。
步骤4：2-((4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-乙基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-甲基-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
在室温下，向化合物12c(78mg，0.272mmol)和2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(91mg，0.273mmol)的1,4-二氧六环(5mL)中加入叔丁醇钾(53mg，0.546mmol),Pd2(dba)3(8.19mg,8.95umol)和Xantphos(10.4mg,17.99umol)，氮气置换后升温至100℃搅拌反应16h。反应完成后，冷却至室温，加水用乙酸乙酯萃取，合并有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，旋干溶剂得到粗品2-((4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-乙基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-甲基-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物12d)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝583[M+H]+。
步骤5：2-((6-乙基-4-(羟基甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
化合物12d粗品用四氢呋喃(3mL)溶解后加入氢氧化锂(34mg，0.819mmol)的水溶液(3Ml)，室温搅拌2h，反应完全后反应液经过反相MPLC纯化后得到2-((6-乙基-4-(羟基甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物12e)(26mg,0.057mmol),两步收率20％。
MS(ESI)m/z＝455[M+H]+。
步骤6：2-((6-乙基-4-(羟基甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
冰浴下,化合物12e(26mg,57.20umol)和氯化铵(10mg,57.20umol)加到DMF(1mL)中，再加入EDCI(17mg,57.20umol)和HOAT(12mg,57.20umol)。反应再室温下搅拌18h后，直接用Prep-HPLC纯化后得到化合物12(1.09mg，2.11umol)收率3.7％。
MS(ESI)m/z＝454[M+H]+。
1HNMR(DMSO,400MHz)0.83(t,J＝6.8Hz,3H),1.23(t,J＝8.0Hz,3H),1.67～1.74(m,2H),2.19(q,J1＝6.8Hz,J2＝14.0Hz,2H),2.63～2.73(m,2H),3.17～3.24(m,1H),4.10(t,J＝6.4Hz,2H),4.38(t,J＝6.0Hz,4H),4.45～4.53(m,2H),4.71(q,J1＝6.0Hz,J2＝7.6Hz,2H),5.35(s,1H),6.79(s,1H),7.16(s,1H),7.23(s,1H),7.68(s,1H),7.88(s,1H),7.91(s,1H),9.50(s,1H)
实施例13、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000371
步骤1：2-((4,6-二甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
在室温下，将2-溴-4,6-二甲基吡啶(75mg,0.41mmol)，2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(91mg，0.273mmol)和碳酸铯(178mg，0.546mmol)加到1,4-二氧六环(4.5mL)中,氮气置换体系空气后加入Pd2(dba)3(8.19mg,8.95umol)和Xantphos(10.4mg,17.99umol)，氮气换气后升温至100℃搅拌反应16h。反应完成后，冷却至室温，加水稀释用乙酸乙酯萃取(10mLx 3)，合并有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，旋干溶剂得到的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/5)得到2-((4,6-二甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物13a)(60mg，0.136mmol)，收率：45％。
MS(ESI)m/z＝439[M+H]+。
步骤2：2-((4,6-二甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
将氢氧化锂(26mg，0.628mmol)的水溶液(1mL)加入化合物13a(55mg，0.125mmol)的四氢呋喃(1mL)和甲醇(1mL)混合液中。反应液室温搅拌2h后加水稀释，旋干有机溶剂后用乙酸乙酯萃取一次，水相用稀盐酸(1M)酸化至pH≈4，乙酸乙酯萃取(10x 4)，合并有机相并用水洗涤，旋干溶剂得到2-((4,6-二甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物13b)(50mg,0.117mmol)，白色固体，收率86％。
MS(ESI)m/z＝425[M+H]+。
步骤3：2-((4,6-二甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
冰浴下,化合物13b(45mg,0.106mmol)和氯化铵(17mg,0.318mmol)加到DMF(1mL)中，再加入EDCI(23mg,0.117mmol)，HOAT(16mg,0.117mmol)和DIPEA(41mg，0.318mmol)。反应液室温下搅拌18h，反应完成后，反应液经Prep-HPLC纯化后得到化合物13(21.74mg，51.33umol)收率43％。
MS(ESI)m/z＝424[M+H]+。
1HNMR(DMSO,400MHz)0.85(t,J＝6.8Hz,3H)1.64～1.78(m,2H)2.19(q,J1＝6.8Hz,J2＝13.6Hz,2H)2.28(s,3H)2.40(s,3H)3.17～3.24(m,1H)4.11(t,J＝6.0Hz,2H)4.31～4.44(m,4H)4.72(dd,J1＝6.4,J2＝7.6Hz,2H)6.65(s,1H)7.19(s,1H)7.26(s,1H)7.68(s,1H)7.91(s,1H)
实施例14、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000381
步骤1：2-((4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-甲基-苯并[d]咪唑-5-羧酸乙酯的合成
在室温下，2-溴-4-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-6-甲基吡啶(85mg，0.268mmol)，2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(60mg，0.179mmol)和碳酸铯(117mg，0.36mmol)加到1,4-二氧六环(4.5mL)中,氮气置换体系空气后加入Pd2(dba)3(8.19mg,8.95umol)和Xantphos(10.4mg,17.99umol)，氮气换气后升温至100℃搅拌反应16h。反应完成后，冷却至室温，加水并用乙酸乙酯萃取(10x 4)，合并有机相并用水和饱和食盐水洗涤，旋干溶剂的得到粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/5)得到2-((4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-甲基-苯并[d]咪唑-5-羧酸乙酯(化合物14a)(50mg，0.087mmol)，收率：48％。
MS(ESI)m/z＝569[M+H]+。
步骤2：2-((4-(羟甲基)-6-甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
化合物14a(49mg，0.086mmol)溶解在混合溶剂四氢呋喃(1mL)和甲醇(1mL)中，再加入氢氧化锂(18mg，0.43mmol)的水(1mL)溶液中。反应液室温搅拌2h后。加水稀释旋干有机溶剂，用乙酸乙酯萃取一次，水相用稀盐酸(1M)酸化至pH≈4，乙酸乙酯萃取(10mL x 3)，合并有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，旋干溶剂得到2-((4-(羟甲基)-6-甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物14b)(37mg,0.084mmol)，白色固体，收率96％。
MS(ESI)m/z＝441[M+H]+。
步骤3：2-((4-(羟甲基)-6-甲基吡啶-2-基)氨基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
冰浴下,化合物14b(35mg,0.079mmol)和氯化铵(12mg,0.237mmol)加到DMF(1mL)中，再加入EDCI(18mg,0.095mmol)和HOAT(13mg,0.095mmol)。混合物室温下搅拌1h，反应完成后，反应液经Prep-HPLC纯化后得到化合物14(23mg，0.052mmol)收率46％。
MS(ESI)m/z＝440[M+H]+。
1HNMR(DMSO,400MHz)0.84(t,J＝6.8Hz,3H)1.67～1.74(m,2H)2.19(q,J1＝6.0Hz,J2＝13.2Hz,2H)2.41(s,3H)3.16～3.24(m,1H)4.10(t,J＝6.0Hz,2H)4.35～4.52(m,6H)4.72(dd,J1＝6.0Hz,J2＝7.2Hz,2H)5.37(t,J＝6.0Hz,1H)6.78(s,1H)7.16(s,1H)7.24(s,1H)7.69(s,1H)7.89(s,1H)7.95(s,1H)9.53(s,1H)
实施例15、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000391
步骤1：3-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
冰浴下，将氨水(3.8mL，26mmol)滴加入3-硝基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(770mg，2.6mmol)的甲醇(30mL)溶液中，5min后，零度下，加入保险粉(2.27mg，13.0mmol)的水溶液(10mL)，继续搅拌1小时。过滤反应液，得到的滤液旋干，加水稀释，乙酸乙酯萃取，分离的有机相用饱和食盐水洗，然后用无水硫酸钠干燥，过滤得到的滤液旋干得到化合物339b(450mg，1.7mmol)收率65％，黄色固体。
MS(ESI)m/z＝266.0[M+H]+
步骤2：N-(5-氨基甲酰基-7-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4-乙基-2-甲基恶唑-5-甲酰胺的合成
在冰浴下，将4-乙基-2-甲基恶唑-5-羰基异硫氰酸酯(44mg，0.23mmol)滴加入化合物3-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(60mg，0.23mmol)的DMF(2mL)中，升至室温搅拌20min，然后依次加入HATU(103mg,0.27mmol)和DIPEA(58mg，0.45mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌2h。逐渐有白色固体析出，过滤并依次用甲醇，水洗涤滤饼，滤饼经干燥得到N-(5-氨基甲酰基-7-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4-乙基-2-甲基恶唑-5-甲酰胺(30mg,收率31％)，白色固体。
MS(ESI)m/z＝428.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(s,1H),7.97(s,1H),7.70(s,1H),7.38(s,1H),6.95(s,1H),5.66–5.39(m,1H),5.03(t,J＝6.6Hz,2H),4.63(dd,J＝7.0,4.9Hz,2H),4.48–4.17(m,2H),3.35(s,3H),3.01(dd,J＝14.7,7.3Hz,2H),2.44(s,3H),1.90–1.70(m,2H),1.21(t,J＝7.5Hz,3H),0.96(t,J＝7.3Hz,3H).
实施例16、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000401
在冰浴下，将4-乙基-2-甲基噻唑-5-羰基异硫氰酸酯(49mg，0.23mmol)滴加入3-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(60mg，0.23mmol)的DMF(2mL)中，反应20min，依次加入HATU(87mg,0.23mmol)和DIPEA(59mg，0.46mmol)，然后升至室温下继续搅拌2h。反应液经反向HPLC纯化得到N-(5-氨基甲酰基-7-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4-乙基-2-甲基噻唑-5-甲酰胺(34.3mg,收率34％),白色固体。
MS(ESI)m/z＝444[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.83(s,1H),7.97(s,1H),7.67(d,J＝1.0Hz,1H),7.38(s,
1H),6.95(d,J＝0.8Hz,1H),5.58–5.47(m,1H),5.02(t,J＝6.7Hz,2H),4.69–4.57(m,2H),4.33(t,J＝7.2Hz,2H),3.20(q,J＝7.5Hz,2H),2.60(s,3H),1.90–1.76(m,2H),1.23(t,J＝7.5Hz,3H),0.95(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例17、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000411
步骤1：3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酰胺的合成
在冰浴下，向3-硝基-4-氯-5-羟基苯甲酰胺(454mg，2.1mmol)和2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-醇(240mg，2.1mmol)的THF(10mL)溶液中加入三苯基膦(825mg，3.2mmol)，氮气置换后，慢慢滴加DIAD(646mg，3.2mmol)。反应体系维持氮气保护，撤掉冰浴后升温至50℃，搅拌反应过夜。反应完全后，浓缩反应液得到的粗品经正向柱色谱分离(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/3，v/v)得到3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酰胺(350mg，1.12mmol)，收率53.3％。
MS(ESI)m/z＝313[M+H]+
步骤2：3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
向3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酰胺(350mg，1.12mmol)的DMSO(10ml)溶液中加入DIPEA(289mg，2.24mmol)和正丙胺(198mg，3.36mmol)，在50℃下反应过夜。待冷却后，将其倒入冰水中，有橙红色固体析出，过滤后经干燥得到3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(300mg，0.9mmol)，橙红色固体。
MS(ESI)m/z＝336[M+H]+
步骤3：3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-氨基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺的合成
冰浴下，将氨水(0.8mL，4.8mmol)滴加入3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-硝基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(300mg，0.9mmol)的甲醇(10mL)溶液中，5min后，零度下，加入保险粉(783mg，4.5mmol)的水溶液(5mL)，继续搅拌1小时。过滤反应液，得到的滤液旋干，加水稀释，乙酸乙酯萃取，分离的有机相用饱和食盐水洗，然后用无水硫酸钠干燥，过滤得到的滤液旋干得到3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-氨基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(270mg，0.89mmol)黄色固体。
MS(ESI)m/z＝306.0[M+H]+
步骤4:7-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
在冰浴下，将1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(39mg，0.2mmol)滴加入化合物304b(60mg，0.2mmol)的DMF(2mL)中，反应20min，依次加入HATU(75mg,0.197mmol)和DIPEA(41mg，0.32mmol)，然后升至室温下继续搅拌2h。反应液经反向HPLC纯化得到化合物(14.2mg,收率15％),白色固体。
MS(ESI)m/z＝467.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.82(s,1H),7.96(s,1H),7.65(s,1H),7.38(s,1H),7.14(s,1H),6.63(s,1H),4.89–4.75(m,1H),4.67(s,2H),4.65–4.59(m,2H),4.58(s,2H),4.29(t,J＝7.2Hz,2H),2.94–2.84(m,2H),2.38–2.25(m,2H),2.17(s,3H),1.76(m,2H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例18、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000421
在冰浴下，将4-乙基-2-甲基恶唑-5-羰基异硫氰酸酯(32mg，0.16mmol)滴加入化合物304b(50mg，0.16mmol)的DMF(2mL)中，反应20min后，依次加入HATU(75mg,0.197mmol)和DIPEA(41mg，0.32mmol)，然后升至室温下继续搅拌2h。逐渐有白色固体析出，过滤并依次用甲醇，水洗涤滤饼，滤饼经干燥得到3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-氨基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(25.4mg,收率34％),白色固体。
MS(ESI)m/z＝468.0[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.71(s,1H),7.95(s,1H),7.65(s,1H),7.38(s,1H),7.13(s,1H),4.93–4.75(m,1H),4.67(s,2H),4.58(s,2H),4.36–4.12(m,2H),3.00(q,J＝7.4Hz,2H),2.94–2.83(m,2H),2.44(s,3H),2.35–2.24(m,2H),1.75(dq,J＝15.0,7.4Hz,2H),
1.20(t,J＝7.5Hz,3H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例19、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000431
在冰浴下，将4-乙基-2-甲基噻唑-5-羰基异硫氰酸酯(32mg，0.16mmol)滴加入3-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基氧基)-5-氨基-4-(丙基氨基)苯甲酰胺(60mg，0.2mmol)的DMF(2mL)中，反应20min，依次加入HATU(75mg,0.197mmol)和DIPEA(41mg，0.32mmol)，然后升至室温继续搅拌2h。反应液经反向HPLC纯化得到化合物(21.4mg,收率28％),白色固体。
MS(ESI)m/z＝484[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(s,1H),7.96(s,1H),7.62(d,J＝1.2Hz,1H),7.37(s,1H),7.13(d,J＝1.0Hz,1H),4.89–4.74(m,1H),4.67(s,2H),4.58(s,2H),4.32–4.16(m,2H),3.20(q,J＝7.5Hz,2H),2.95–2.82(m,2H),2.59(s,2H),2.37–2.23(m,2H),1.84–1.68(m,2H),1.22(t,J＝7.5Hz,3H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例20、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000432
Figure BDA0001938968520000441
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫代甲基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(80mg,0.138mmol)的二氧六环(2mL)溶液中依次加入3-乙酰巯基四氢呋喃(20mg，0.138mmol),Pd2(dba)3(13mg,0.014mmol),xantphos(8mg,0.014mmol),K3PO4(36mg,0.166mmol)，氮气保护下110℃反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，得到粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝1/1，v/v)分离得到目标化合物(34mg，收率40％)。
MS(ESI)m/z＝602[M+H]+
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
向2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫代甲基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(34mg,0.055mmol)的甲醇/THF/水(1/1/1mL)溶液中加入LiOH(5mg，0.11mmol)，50℃反应2h，反应完成。用1M盐酸水溶液调pH＝5-6，然后将反应液浓缩，得到目标化合物(33mg，收率99％)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝588[M+H]+
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(33mg,0.05mmol)的DMF(2mL)溶液中依次加入NH4Cl(4mg，0.07mmol),HATU(26mg,0.07mmol),DIPEA(22mg,0.15mmol)，室温反应过夜。反应完成，将反应液浓缩，加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩得到目标化合物(20mg，收率67％)。
MS(ESI)m/z＝587[M+H]+
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(20mg,0.03mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)，室温反应过夜。反应完成，将反应液浓缩，浓缩得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)分离得到目标化合物(0.85mg，收率7％)。
MS(ESI)m/z＝457[M+H]+
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.93-13.04(m,1H),8.08(s,1H),7.99(s,1H),7.88(s,1H),7.44(s,1H),6.66(s,1H),4.53-4.71(m,4H),3.79-3.91(m,2H),3.49-3.57(m,1H),3.30-3.34(m,2H),2.19(s,3H),1.74-1.87(m,4H),1.52-1.63(m,2H),1.30-1.44(m,3H),0.92-1.00(m,3H).
实施例21、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000451
步骤1：3-溴-5-硝基-4-(丙氨基)苯甲酸甲酯的合成
向3-溴-4-氟-5-硝基苯甲酸甲酯(1g,3.42mmol)的DMF(20mL)溶液中加入DIPEA(1.33g，10.27mmol)和丙胺(404mg，6.85mmol)，室温反应2h，反应完成。加水，EA萃取，有机相分别用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋蒸浓缩得到3-溴-5-硝基-4-(丙氨基)苯甲酸甲酯(化合物21a)(1.16g，收率99％)。
MS(ESI)m/z＝317[M+H]+，319[M+H+2]+
步骤2：3-氨基-5-溴-4-(丙氨基)苯甲酸甲酯的合成
在冰浴下，向化合物21a(1.16g,3.42mmol)的AcOH(20mL)溶液中加入Zn(1.19g，18.3mmol)，室温反应过夜，反应完成。过滤，滤液旋干，所得粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝3/1，v/v)分离得到3-氨基-5-溴-4-(丙氨基)苯甲酸甲酯(化合物21b)(320mg，收率31％)。
MS(ESI)m/z＝287[M+H]+，289[M+H+2]+
步骤3：7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
在冰浴下，将1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰基异硫氰酸酯(218mg,1.11mmol)加入化合物21b(320mg，1.11mmol)的DMF(5mL)溶液中，搅拌反应30min，然后加入DIPEA(288mg，2.22mmol)和HATU(467mg,1.23mmol),升至室温继续搅拌2h，反应完成。加入50mL水，析出固体，将固体过滤，烘干，得到7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物21c)484mg，收率97％)。
MS(ESI)m/z＝448[M+H]+，450[M+H+2]+。
步骤4：7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物21c(484mg,1.08mmol)的THF(10mL)溶液中加入Cs2CO3(1.06g，3.24mmol)和SEMCl(270mg，1.62mmol)，室温反应过夜。反应完成后加水，EA萃取，有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，再干燥过滤，旋干溶剂得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)得到7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物21d)(530mg，收率84％)。
MS(ESI)m/z＝578[M+H]+，580[M+H+2]+
步骤5：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物21d(80mg,0.14mmol)的二氧六环(2mL)溶液中依次加入2-羟基乙硫醇(11mg，0.14mmol)，Pd2(dba)3(13mg,0.014mmol)，xantphos(8mg,0.014mmol)，K3PO4(36mg，0.166mmol)，氮气保护下110℃反应过夜，反应完成。冷至室温，将反应液浓缩，得到粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝1/3，v/v)分离得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物21e)(28mg，收率45％)。
MS(ESI)m/z＝576[M+H]+
步骤6：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟基乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
向化合物21e(28mg,0.063mmol)的甲醇/THF/水(1/1/1mL)溶液中加入LiOH(6mg，0.126mmol)，50℃反应2h，反应完成。停止反应，用1M盐酸水溶液调pH＝5-6，然后将反应液浓缩，得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟基乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物21f)(26mg，收率95％)，直接用于下一步。
MS(ESI)m/z＝562[M+H]+
步骤7：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟基乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物21f(26mg,0.06mmol)的DMF(2mL)溶液中依次加入NH4Cl(5mg，0.09mmol),HOAT(10mg,0.07mmol),EDCI(14mg,0.07mmol),DIPEA(24mg,0.18mmol)，室温反应过夜。反应完成后，将反应液浓缩，加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟基乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物21g)(20mg，收率86％)。
MS(ESI)m/z＝561[M+H]+
步骤8：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-羟基乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物21g(20mg,0.05mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)，室温反应过夜，反应完成后，将反应液浓缩，浓缩得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)分离得到化合物21(6.34mg，收率24％)。
MS(ESI)m/z＝431[M+H]+
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.97(s,1H),8.07(s,1H),7.92(s,1H),7.83(s,1H),7.41(s,1H),6.66(s,1H),4.93-5.02(m,1H),4.51-4.71(m,4H),3.53-3.64(m,2H),3.13-3.23(m,2H),2.19(s,3H),1.73-1.92(m,2H),1.37(t,J＝6.8Hz,3H),0.96(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例22、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000471
Figure BDA0001938968520000481
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物21d(50mg，0.086mmol)的二氧六环(2mL)溶液中依次加入2-乙酰巯基乙基甲醚(12mg，0.086mmol)，Pd2(dba)3(9mg，0.009mmol)，xantphos(6mg，0.009mmol)，K3PO4(22mg，0.104mmol)，氮气保护下110℃反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，得到粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝1/1，v/v)分离得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物22a)(30mg，收率58％)。
MS(ESI)m/z＝590[M+H]+
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
向化合物22a(30mg,0.05mmol)的甲醇/THF/水(1/1/1mL)溶液中加入LiOH(5mg，0.10mmol)，50℃反应2h，反应完成。用1M盐酸水溶液调pH＝5-6，然后将反应液浓缩，得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物22b)(28mg，收率99％)。
MS(ESI)m/z＝576[M+H]+
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物22b(28mg，0.05mmol)的DMF(2mL)溶液中依次加入NH4Cl(4mg，0.07mmol),HOAT(8mg，0.06mmol)，EDCI(12mg，0.06mmol)，DIPEA(19mg，0.15mmol)，室温反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物22c)(26mg，收率93％)。
MS(ESI)m/z＝575[M+H]+
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-甲氧基乙基)硫代)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物22c(26mg,0.05mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)，室温反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，浓缩得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)分离得到化合物22(4.34mg，收率28％)。
MS(ESI)m/z＝445[M+H]+
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.95(s,1H),8.08(s,1H),7.93(s,1H),7.85(s,1H),7.41(s,1H),6.66(s,1H),4.48-4.72(m,4H),3.49-3.57(m,2H),3.27-3.32(m,2H),3.23(s,3H),2.19(s,3H),1.73-1.89(m,2H),1.37(t,J＝6.8Hz,3H),0.97(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例23、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000491
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4)基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物21d(80mg,0.138mmol)的二氧六环(2mL)溶液中依次加入4-乙酰巯基吡喃(23mg，0.138mmol),Pd2(dba)3(13mg,0.014mmol),xantphos(8mg,0.014mmol),K3PO4(36mg,0.166mmol)，氮气保护下110℃反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，得到粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝1/1，v/v)分离得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4)基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物23a)(34mg，收率40％)。
MS(ESI)m/z＝616[M+H]+
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-)基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
向化合物23a(34mg,0.055mmol)的甲醇/THF/水(1/1/1mL)溶液中加入LiOH(5mg，0.11mmol)，50℃反应2h，反应完成。用1M盐酸水溶液调pH＝5-6，然后将反应液浓缩，得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-)基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物23b)(30mg，收率91％)。
MS(ESI)m/z＝602[M+H]+
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物23b(30mg,0.05mmol)的DMF(2mL)溶液中依次加入NH4Cl(4mg，0.07mmol),HOAT(9mg,0.06mmol),EDCI(12mg,0.06mmol),DIPEA(20mg,0.15mmol)，室温反应过夜。反应完成，将反应液浓缩，加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物23c)(20mg，收率67％)。
MS(ESI)m/z＝601[M+H]+
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物23c(20mg,0.03mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)，室温反应过夜。反应完成，将反应液浓缩，浓缩得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)分离得到2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)硫基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺化合物23(0.85mg，收率7％)。
MS(ESI)m/z＝471[M+H]+
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.93-13.04(m,1H),8.08(s,1H),7.99(s,1H),7.88(s,1H),7.44(s,1H),6.66(s,1H),4.53-4.71(m,4H),3.79-3.91(m,2H),3.49-3.57(m,1H),3.30-3.34(m,2H),2.19(s,3H),1.74-1.87(m,4H),1.52-1.63(m,2H),1.30-1.44(m,3H),0.92-1.00(m,3H).
实施例24、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000511
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫代)-1-丙基甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
向化合物21d(80mg,0.138mmol)的二氧六环(2mL)溶液中依次加入N-乙酰乙巯基吗啉(26mg，0.138mmol),Pd2(dba)3(13mg,0.014mmol),xantphos(8mg,0.014mmol),K3PO4(36mg,0.166mmol)，氮气保护下110℃反应过夜，反应完成。将反应液浓缩，得到粗品用正相柱纯化(洗脱剂：PE/EA＝1/1，v/v)分离得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫代)-1-丙基甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物24a)(89mg，收率99％)。
MS(ESI)m/z＝645[M+H]+
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
向化合物24a(89mg,0.138mmol)的甲醇/THF/水(1/1/1mL)溶液中加入LiOH(12mg，0.276mmol)，50℃反应2h，反应完成。用1M盐酸水溶液调pH＝5-6，然后将反应液浓缩，得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物24b)(80mg，收率91％)。。
MS(ESI)m/z＝631[M+H]+
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物24b(80mg,0.127mmol)的DMF(2mL)溶液中依次加入NH4Cl(11mg，0.19mmol),HATU(58mg,0.152mmol),DIPEA(50mg,0.38mmol)，室温反应2h，反应完成。将反应液浓缩，加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩得到粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物24c)(65mg，收率81％)。
MS(ESI)m/z＝630[M+H]+
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-((2-吗啉代乙基)硫基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
向化合物24c(65mg,0.1mmol)的DCM(4mL)溶液中加入TFA(2mL)，室温反应过夜。反应完成，将反应液浓缩，浓缩得到粗品用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水＝2/1，v/v)分离得到化合物24(2.39mg，收率5％)。
MS(ESI)m/z＝500[M+H]+
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.83-13.09(m,1H),8.07(s,1H),7.92(s,1H),7.87(s,1H),7.41(s,1H),6.66(s,1H),4.49-4.74(m,4H),3.40-3.46(m,4H),3.19-3.29(m,2H),2.53-2.59(m,2H),2.25-2.38(m,4H),2.19(s,3H),1.73-1.90(m,2H),1.31-1.44(m,3H),0.91-1.04(m,3H).
实施例25、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000521
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-乙烯基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物25a)的合成
在室温下，将4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.6g，10.4mmol),Pd(dppf)2(380.6mg,0.52mmol)加入到化合物21d(3.0g，5.2mmol)的二氧六环(20mL)溶液中,然后再加入Na2CO3(1.4g，13mmol)的水溶液(10mL).然后在N2保护下置换反应瓶中的空气三次。在油浴中80℃反应过夜。反应冷却至室温，加水稀释，用HCl(3M)调PH值为5～6。用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-乙烯基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物25a)(2.6g，65％纯度)，收率64％。该粗品不需纯化，可直接用于下一步。
MS(ESI)m/z＝512[M+H]+。
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-乙烯基-1H-苯并[d]咪唑唑-5-甲酰胺(化合物25b)的合成
冰浴下，将HATU(2.1g,5.6mmol)加入到化合物25a(2.6g，5.1mmol)的DMF(30mL)溶液中，搅拌0.3h，然后依次加入氯化铵(826.2mg，15.3mmol)和N,N-二异丙基乙胺(3.4g，25.5mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，有机相用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩后的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚，v/v＝1/2)得到2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-7-乙烯基-1H-苯并[d]咪唑唑-5-甲酰胺(化合物25b)(1.2g，2.4mmol)，收率71％。
MS(ESI)m/z＝511[M+H]+。
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-甲酰基-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑唑-5-甲酰胺(化合物25c)的合成
在室温下，分别将NMO(561.6mg,4.8mmol)溶于8mL水，二水合锇酸钾(88.3mg，0.24mmol)溶于5mL水中，加入到化合物25b(1.2g，2.4mmol)的乙腈(20mL)溶液中，加水稀释，用二氯甲烷萃取(10mL×2)有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得中间体。再将此中间体溶于然后二氯甲烷(15mL),然后在室温下加入高碘酸钠(1.0g，4.8mmol)的水溶液(6mL).在室温下反应大约1.5小时。加水稀释，用二氯甲烷萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-甲酰基-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑唑-5-甲酰胺(化合物25c)(1.1g)，不需要纯化，直接用于下一步。
MS(ESI)m/z＝513[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-甲酰基-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物25d)的合成
在室温下将化合物25c(450mg，0.88mmol)溶于氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)中，室温下搅拌2h，减压旋蒸得粗品2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-甲酰基-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物25d)(480mg，70％纯度)，收率91％。
MS(ESI)m/z＝383[M+H]+。
步骤5：7-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基甲基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物25)的合成
在室温下，将2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷(34.5mg,0.35mmol)加入到化合物25d(160×70％mg，0.29mmol)的甲醇(10mL)溶液中，再加入乙酸(100uL)搅拌1h，然后加入氰基硼氢化钠(54.8mg，0.87mmol)，在室温下继续搅拌3h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品该粗品经Prep-TLC和反相柱层析分离(洗脱剂：乙腈/水＝1/3，v/v)得到7-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基甲基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物25)(19.7mg)，白色固体，收率12％。
MS(ESI)m/z＝466[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.08(d,J＝1.5Hz,1H),7.86–7.81(m,1H),6.77(s,1H),4.83(s,4H),4.80(s,2H),4.72(q,J＝7.1Hz,2H),4.52(s,4H),4.40(t,J＝7.5Hz,2H),2.29(s,3H),1.84(q,J＝7.4Hz,2H),1.45(t,J＝7.1Hz,3H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例26、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000541
7-(6-氧杂-2-氮杂螺[3.4]辛-2-基甲基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物26)的合成
在室温下，将6-氧杂-2-氮杂螺[3.4]辛烷(39.6mg,0.35mmol)加入到化合物25e(160×70％mg，0.29mmol)的甲醇(10mL)溶液中，再加入乙酸(100uL)搅拌1h，然后加入氰基硼氢化钠(54.8mg，0.87mmol)，在室温下继续搅拌3h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品该粗品经Prep-HPLC得到7-(6-氧杂-2-氮杂螺[3.4]辛-2-基甲基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物26)(35.5mg)，白色固体，收率26％。
MS(ESI)m/z＝480[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.10(d,J＝1.6Hz,1H),7.89(d,J＝1.7Hz,1H),6.79(s,1H),4.88(s,2H),4.74(q,J＝7.1Hz,2H),4.55–4.24(m,6H),3.96(s,2H),3.84(t,J＝7.0Hz,2H),2.34(d,J＝7.0Hz,2H),2.30(s,3H),1.86(h,J＝7.4Hz,2H),1.47(t,J＝7.1Hz,3H),1.05(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例27、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000551
7-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基甲基)-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物27)的合成
在室温下，将2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛烷(39.6mg,0.35mmol)加入到化合物25d(160×70％mg，0.29mmol)的甲醇(10mL)溶液中，再加入乙酸(100uL)搅拌1h，然后加入氰基硼氢化钠(54.8mg，0.87mmol)，在室温下继续搅拌3h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品该粗品经Prep-HPLC得到化合物27(26.4mg)，白色固体，收率19％。
MS(ESI)m/z＝480[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.11(d,J＝1.7Hz,1H),8.00(d,J＝1.7Hz,1H),6.79(d,J＝0.8Hz,1H),4.80(s,2H),4.79–4.70(m,4H),4.67(s,2H),4.45(t,J＝7.5Hz,2H),3.74(d,J＝36.9Hz,2H),3.57(s,2H),2.51(d,J＝37.3Hz,2H),2.30(s,3H),1.94–1.77(m,2H),1.47(t,J＝7.1Hz,3H),1.06(td,J＝7.4,1.8Hz,3H).
实施例28、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000561
步骤1：7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物28b)的合成
在室温下,将化合物28a’(435mg,2.8mmol),Pd(PPh3)2Cl2(49mg,0.07mmol),CuI(27mg,0.14mmol),t-Bu3P(28mg,0.14mmol),DIPEA(903mg，7mmol加入到化合物28a(810mg，1.4mmol)的DMF(10mL)溶液中,.然后在N2保护下置换反应瓶中的空气三次。在油浴中100℃反应过夜。反应冷却至室温，加水稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸的粗品经硅胶柱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚,v/v＝1/3)得到化合物7-溴-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(化合物28b)(430mg，0.66mmol)收率47％。
MS(ESI)m/z＝653[M+H]+。
步骤2：7-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H--吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物28c)的合成
将化合物28b(430mg,0.66mmol)溶于5mL甲醇，再加入LiOH.H2O(83mg,1.98mmol)的水溶液(3mL).在室温条件下反应过夜。用HCl(3M)将反应液得PH调至5～6，用二氯甲烷萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得产品7-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H--吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(化合物28C)(320mg,0.5mmol),收率76％。
MS(ESI)m/z＝639[M+H]+。
步骤3：叔丁基(3-(5-氨基甲酰基-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H--苯并[d]咪唑-7-基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(化合物28d)的合成
将HATU(209mg,0.55mmol)加入到化合物28b(320mg，0.5mmol)的DMF(10mL)溶液中，搅拌0.5h，然后依次加入氯化铵(81mg，1.5mmol)和N,N-二异丙基乙胺(323mg，2.5mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×3)，无水硫酸钠干燥,减压旋蒸得粗产品叔丁基(3-(5-氨基甲酰基-2-(1-乙基-3-甲基-N-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H--苯并[d]咪唑-7-基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(化合物28d)(310mg，0.49mmol)收率98％。
MS(ESI)m/z＝638[M+H]+。
步骤4：7-(3-氨基丙-1-炔-1-基)-2-(((1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)氨基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物28e)的合成
在室温下，将28d(160mg,0.25mmol)溶于5mL二氯甲烷，再加入三氟乙酸(5mL).在室温下反应大约3h。反应完后，直接减压蒸馏得粗产品7-(3-氨基丙-1-炔-1-基)-2-(((1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)氨基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物28e)(130mg，0.33mmol)，纯度70％，收率92％，不需要纯化，直接用于下一步。
MS(ESI)m/z＝394[M+H]+。
步骤5：甲基(3-(5-氨基甲酰基-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸(化合物28)的合成
在冰浴条件下DIPEA(148mg,1.15mmol),28e’(27mg,0.28mmol)加入到将化合物28e(130mg×70％，0.23mmol)的二氯甲烷溶液(8mL)中，在室温下反应0.5h。加水稀释，用二氯甲烷萃取(10mL×2)，有机相用饱和盐水洗涤(10mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸得粗品用反相柱层析(洗脱剂：乙腈/水＝50/50，v/v)分离得到甲基(3-(5-氨基甲酰基-2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸(化合物28)(51mg,0.11mmol)，收率48％。
MS(ESI)m/z＝466[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.96(s,1H),8.04(d,J＝30.8Hz,2H),7.83(d,J＝5.8Hz,2H),7.39(s,1H),6.67(s,1H),4.62(q,J＝7.1Hz,2H),4.46(t,J＝7.3Hz,2H),4.15(d,J＝5.8Hz,2H),3.59(s,3H),2.19(s,3H),1.80(dt,J＝16.8,8.4Hz,2H),1.36(t,J＝7.0Hz,
3H),0.95(t,J＝7.5Hz,3H).
实施例29、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000581
步骤1：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸甲酯的合成
冰浴下将3-氨基-5-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-4-(丙氨基)苯甲酸甲酯(350mg，1.1mmol)溶解在DMF(10mL)中，保持0℃加入1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰基异硫氰酸酯(221.33mg，1.1mmol)反应30min。保持0℃加入HATU(517.5mg,1.36mmol)反应混合液升至室温反应过夜。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，有机相用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压旋蒸，旋干溶剂得到的粗品经反相柱层析分离(洗脱剂：乙腈/水＝30/70，v/v)得2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸甲酯(461mg，0.98mmol)收率86.5％。
MS(ESI)m/z＝470[M+H]+。
步骤2：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸的合成
将2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸甲酯(100mg，0.213mmol)溶解在THF(3ml),MeOH(1ml)和H2O(1ml)中，冰水冷却下加入氢氧化锂(22.4mg，0.53mmol)，升至室温反应过夜。反应液用稀HCl(1M)调至pH＝4,用二氯甲烷萃取(10mL×4)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸(116mg，超重，含有部分无机盐)，不再纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝456[M+H]+。
步骤3：2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-甲基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
冰浴下，HATU(116.28mg,0.306mmol)加入到2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸(116mg，0.21mmol)的DMF(2mL)溶液中，搅拌0.2h，然后依次加入甲胺盐酸盐(85.97mg，1.273mmol)和N,N-二异丙基乙胺(164.52mg，1.27mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。反应液经反相HPLC分离纯化得到目标化合物(48.7mg,0.1mmol)，白色固体，收率48％。
MS(ESI)m/z＝469[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,1H),8.40(q,J＝4.4Hz,1H),7.63(d,J＝1.2Hz,1H),7.31(d,J＝1.4Hz,1H),4.73(dd,J＝7.8,5.8Hz,2H),4.63(q,J＝7.1Hz,2H),4.39(t,J＝6.1Hz,2H),4.31(t,J＝7.3Hz,2H),4.15(t,J＝6.4Hz,2H),3.20(tt,J＝8.0,6.6Hz,1H),2.80(d,J＝4.4Hz,3H),2.23(t,J＝6.9Hz,2H),2.18(s,3H),1.80(q,J＝7.4Hz,2H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H),0.94(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例30、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000591
Figure BDA0001938968520000601
步骤1：2-(1-乙基-N，3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
将2-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲基羧酸(342mg，0.728mmol)溶解在DMF(20ml),加入碳酸铯(712mg，2.185mmol)，碘甲烷(516.7mg，3.64mmol)室温反应3h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用水洗涤，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到粗品经Prep-TLC纯化得目标化合物(244mg，0.5mmol)收率69.2％。
MS(ESI)m/z＝484[M+H]+。
步骤2：2-(1-乙基-N，3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
将2-(1-乙基-N，3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(244mg，0.50mmol)溶解在THF(5ml),MeOH(2ml)和H2O(2ml)的混合液中中，冰水冷却下加入氢氧化锂(53.04mg，1.26mmol)，升至室温反应过夜。反应液用稀HCl(1M)调至pH＝4,用二氯甲烷萃取(10mL×3)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到目标化合物(221mg，0.47mmol)。
MS(ESI)m/z＝470[M+H]+。
步骤4：2-(1-乙基-N，3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺的合成
冰浴下，HATU(214.78mg,1.414mmol)加入到化合物1d(221mg，0.47mmol)的DMF(5mL)溶液中，搅拌0.2h，然后依次加入氯化铵(75.62mg，1.414mmol)和N,N-二异丙基乙胺(183.45mg，1.414mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。反应液经反相HPLC分离纯化得到目标化合物(187.09mg)，白色固体，收率83.98％。
MS(ESI)m/z＝469[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.05(s,1H),7.74(d,J＝1.3Hz,1H),7.52–7.41(m,2H),4.72(dd,J＝7.8,5.8Hz,2H),4.56(q,J＝7.1Hz,2H),4.38(t,J＝6.1Hz,2H),4.21(dt,J＝24.8,6.4Hz,4H),3.54(s,3H),3.19(tt,J＝7.7,6.3Hz,1H),2.22(t,J＝6.9Hz,2H),2.17(s,3H),1.75(q,J＝7.3Hz,2H),1.33(t,J＝7.1Hz,3H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例31、本发明化合物的制备
Figure BDA0001938968520000611
步骤1：2-(2-乙基-6-甲基烟酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯的合成
冰浴下，HATU(265.62mg,0.699mmol)加入到化合物2-乙基-6-甲基烟酸(117.47mg，0.583mmol)的DMF(10mL)溶液中，搅拌0.2h，然后依次加入2-氨基-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(97mg，0.291mmol)和N,N-二异丙基乙胺(188.23mg，1.45mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。反应液经反相柱层析(洗脱剂：乙腈/水＝30/70，v/v)分离纯化得到目标化合物(70mg，收率50.01％)白色固体。
MS(ESI)m/z＝481[M+H]+。
步骤2：2-(2-乙基-6-甲基烟酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸的合成
将2-(2-乙基-6-甲基烟酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(70mg，0.146mmol)溶解在THF(3ml),MeOH(1ml)和H2O(1ml)中，冰水冷却下加入氢氧化锂(15.31mg，0.365mmol)，升至室温反应过夜。反应液用稀HCl(1M)调至pH＝4,用二氯甲烷萃取(30mL×4)，分离得到的有机相用饱和食盐水洗(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，然后旋干得到目标化合物(73mg)，超重含有无机盐。不再纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z＝467[M+H]+。
步骤3：2-(2-乙基-6-甲基烟酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺
冰浴下，HATU(71.59mg,0.188mmol)加入到2-(2-乙基-6-甲基烟酰胺基)-7-(2-(氧杂环丁烷-3-基)乙氧基)-1-丙基-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(73mg，0.157mmol)的DMF(2mL)溶液中，搅拌0.2h，然后依次加入氯化铵(25.31mg，0.47mmol)和N,N-二异丙基乙胺(60.74mg，0.47mmol)，得到的反应混合液室温下继续搅拌3h。反应液经反相HPLC分离纯化得到目标化合物(29.05mg)，白色固体，收率39.88％。
MS(ESI)m/z＝466[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,1H),8.27(s,1H),7.97(s,1H),7.69(s,1H),7.36(d,J＝10.1Hz,2H),7.22(s,1H),4.72(dd,J＝7.8,5.8Hz,2H),4.39(t,J＝6.1Hz,2H),4.31(q,J＝6.5,5.6Hz,2H),4.16(t,J＝6.4Hz,2H),3.21(dq,J＝14.3,7.2Hz,3H),2.22(q,J＝6.8Hz,2H),1.80(q,J＝7.4Hz,2H),1.27(t,J＝7.4Hz,3H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H).
以下通过试验例的方式来说明本发明的有益效果。
试验例1、生物测试
(1)蛋白质热转移实验(TSA)
用TSA实验进行化合物同Sting蛋白的结合测定，在20mM Hepes,150mM NaCl,1mMMgCl2,1mM DTT,pH＝7.5缓冲液中将100ug/ml Sting蛋白同不同浓度的化合物及5X SYPROOrange染料混合，在qPCR仪上测定蛋白的溶解曲线，用Protein Thermal Shift Software1.3软件拟合Tm值，计算加入不同浓度化合物和未加入化合物时蛋白的Tm差值，根据ΔTm随化合物浓度变化拟合Kd。
Figure BDA0001938968520000621
Figure BDA0001938968520000631
(2)细胞实验
本实验通过检测化合物刺激人外周血单核细胞系THP1细胞(上海细胞库)产生的CXCL10(IP10)细胞因子变化来评价sting激动剂的功能。实验第一天按IP10ELISA检测试剂盒(BD,#550926)说明书包被ELISA板。取化合物DMSO溶解成储液，并用培养基稀释成2X工作浓度，加入96孔板，每孔100μL；取对数生长期的THP1细胞计数，并稀释成2*106/mL浓度，加入上述含化合物的96孔板中，每孔100μL，混匀，于37℃，5％CO2培养箱中培养18小时。第二天取上述细胞培养上清，每孔100μL，按IP10ELISA检测试剂盒(BD,#550926)说明书进行检测，读取OD450值，根据标准曲线换算成IP10浓度，并用GraphPad 5.0拟合剂效曲线计算EC50值。
实施例 EC<sub>50</sub>(μM)
1 1.6
2 4.4
3 2.0
4 1.6
5 1.5
6 16.6
8 4.7
10 6.0
21 2.9
26 9.2
综上，本发明的化合物能够与STING有效结合，并且本发明的化合物作为STING激动剂可用于治疗治疗各种病症，尤其是对白血病有很好的治疗效果。

Claims (4)

1.一种化合物，或其药学上可接受的盐，其特征在于：所述化合物具体为：
Figure FDA0002967795580000011
2.权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐在制备STING激动剂的用途。
3.权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防与STING活性相关的疾病的药物中的用途。
4.权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐在制备免疫组合物或疫苗佐剂中的用途。
CN201910015713.8A 2018-01-08 2019-01-08 一种免疫调节剂 Active CN110016021B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810016633 2018-01-08
CN201810016633X 2018-01-08

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110016021A CN110016021A (zh) 2019-07-16
CN110016021B true CN110016021B (zh) 2021-05-07

Family

ID=67144360

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910015713.8A Active CN110016021B (zh) 2018-01-08 2019-01-08 一种免疫调节剂

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN110016021B (zh)
WO (1) WO2019134707A1 (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112661772B (zh) * 2018-08-24 2022-06-10 杭州阿诺生物医药科技有限公司 干扰素基因刺激蛋白化合物及其制备方法
KR102653190B1 (ko) * 2018-08-29 2024-03-29 애들레이 노르티 바이오파마 컴퍼니 리미티드 고 활성 sting 단백질 작용제 화합물
CN112279835B (zh) * 2019-07-24 2022-07-22 中国医学科学院药物研究所 芳环或芳杂环并咪唑类化合物，其制备方法及制药用途
KR20220056176A (ko) 2019-08-02 2022-05-04 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 암 치료를 위한 sting(인터페론 유전자의 자극인자) 작용제로서의 비스-[n-((5-카바모일)-1h-벤조[d]이미다졸-2-일)-피라졸-5-카복사미드] 유도체 및 관련 화합물
WO2021098844A1 (zh) * 2019-11-20 2021-05-27 成都先导药物开发股份有限公司 一种免疫调节剂
CN112824399B (zh) * 2019-11-20 2022-04-12 成都先导药物开发股份有限公司 一种免疫调节剂
CN112940004B (zh) * 2019-12-11 2022-07-12 中国科学院上海药物研究所 一种杂环化合物及其用途
WO2021206158A1 (ja) 2020-04-10 2021-10-14 小野薬品工業株式会社 がん治療方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160287623A1 (en) * 2013-11-19 2016-10-06 The University Of Chicago Use of sting agonist as cancer treatment
MX2016015928A (es) * 2014-06-04 2017-03-20 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Dinucleotidos ciclicos como moduladores de sting.
CN109563081A (zh) * 2016-04-07 2019-04-02 葛兰素史克知识产权开发有限公司 可用作蛋白调节剂的杂环酰胺类
SI3440076T1 (sl) * 2016-04-07 2022-09-30 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterociklični amidi uporabni kot proteinski modulatorji

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019134707A1 (zh) 2019-07-11
CN110016021A (zh) 2019-07-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110016021B (zh) 一种免疫调节剂
CN110016025B (zh) 一种免疫调节剂
CN111356680B (zh) Nlrp3炎性体的选择性抑制剂
JP6553748B2 (ja) 縮合環化合物、医薬組成物およびその使用
KR20050072824A (ko) 과다증식성 질환 및 혈관신생과 관련된 질병의 치료에유용한 인돌릴 피라지논 유도체
WO2020156363A1 (zh) 一种免疫调节剂
WO2004046118A2 (en) 2-4-(di-phenyl-amino)-pyrimidine derivatives useful for treating hyper-proliferative disorders
WO2020011246A1 (zh) 含苯环的化合物、其制备方法及应用
CN102112449A (zh) 苯基或吡啶基取代的吲唑衍生物
JP2021530442A (ja) 縮合三環系複素環化合物およびその治療上の使用
CN111032644B (zh) 用作雄激素受体拮抗剂的二芳基硫代乙内酰脲化合物
WO2020168927A1 (zh) 含氮并环化合物、其制备方法及用途
WO2019154294A1 (zh) 吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-2-胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
TW201348213A (zh) 喹唑啉二酮衍生物
CN110156656B (zh) 五元杂芳环衍生物、其制备方法、药物组合物及应用
WO2019228404A1 (zh) 一种新型磷酸肌醇3-激酶抑制剂及其制备方法和用途
CN108779115B (zh) 五元杂芳环并桥环类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2022166860A1 (zh) Pim激酶抑制剂
CN113490668A (zh) 用于治疗与apj受体活性有关的疾病的化合物和组合物
CN114315818A (zh) 苯甲酰胺类化合物及其用途
CN111471056B (zh) 一种大环类免疫调节剂
CN116438174A (zh) 化合物及其作为mif抑制剂的用途
CN109666022B (zh) 三氮唑衍生物及其制备方法和用途
CN115557913A (zh) 苯并氮杂环类化合物及其在药物中的应用
CN115551846A (zh) 1,4,5,6-四氢嘧啶-2-胺衍生物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant