CN109988017A - 一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂,先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌制成复合菌粉,接着将复合菌粉与玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕等制成的预混料混合后厌氧发酵得到发酵料,然后将发酵料倒入聚天冬氨酸、聚乙烯醇水溶液等制成的包覆料中得到预制料,最后将聚己内酯加入预制料中搅匀得到混合物,接着向混合物中加入活性污泥,好氧发酵得到一种微生物菌剂,其施入盐碱土壤后可改善土壤理化性质,满足玉米生长的营养需求,提高玉米产量。
Description
技术领域
本发明涉及微生物肥料技术领域,特别是涉及一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
我国的人均占地面积远远落后于国际人均占地水平,因此,开发利用现有的盐碱地显得尤为重要。在中国,盐碱地占了耕地面积的10%以上,盐碱地是指盐分含量大于0.3%,pH值大于8的土壤生态环境,这样的土壤环境几乎都存在有机质含量低、含氮量低下、有效磷含量低、有效水分含量低、土壤团粒结构差、土壤通透性下降、微生物菌群的活动收到抑制、土壤地温春秋偏低夏季偏高等特性,不仅妨碍了农作物对水肥的吸收,降低了土壤对水、肥、气、热的供应和协调能力,而且限制了土壤肥力的进一步提高和潜在肥力的发挥。
我国盐碱地的成因复杂,盐碱地的严重程度也比较复杂,目前国内对盐碱地的综合开发利用进展缓慢,主要停留在用淡水冲洗稀释,用化学试剂中和以及通过精细的工作手段等进行改良,成本较高,见效慢,而且非常容易再次盐碱化。
中国是世界第二大玉米生产国,玉米作为重要的食物和饲料来源,其种植受到重视。而几乎所有的玉米品种均不耐盐碱,玉米在盐碱地中成活率低,不丰收,目前在盐碱土壤中实现玉米种植仍旧困难重重。
发明内容
本发明的目的就是要提供一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂及其制备方法,改善土壤理化性质,满足玉米生长的营养需求,提高玉米产量。
为实现上述目的,本发明是通过如下方案实现的:
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.5~0.8:0.3~0.5:1~1.2:0.8~1:1.5~2进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.3~0.5:0.5~0.8:5~8混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:80~90搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度10~12%聚乙烯醇水溶液以质量比1:8~10搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
优选的,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:8~10:5~8:20~30。
优选的,步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养4~6天后,分别于150~160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为27~29℃,培养时间为40~50小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为28~30℃,培养时间为45~48小时;洋葱假单胞菌的培养温度为27~29℃,培养时间为42~46小时;褐球固氮菌的培养温度为28~30℃,培养时间为40~50小时;大豆根瘤菌的培养温度为27~29℃,培养时间为48~50小时;绿色木霉菌的培养温度为27~29℃,培养时间为72~75小时。
进一步优选的,以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏8~10份,蛋白胨19~21份,葡萄糖20~22份,琼脂18~20份和1000份去离子水,且其pH为6.8~7.2;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏3~5份,蛋白胨5~6份,NaCl 2~4份,琼脂18~22份和1000份去离子水,且其pH为6.8~7.2;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆195~200份、葡萄糖10~12份、琼脂18~20份,Na2HPO44~6份和1000份去离子水,且其pH为7.0~7.6。
优选的,步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1~2%和0.5~0.8%。
优选的,步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后45~50℃干燥至含水量20~30%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
优选的,步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向65~75℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
优选的,步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:50~60kPa和110~120℃条件下处理50~60分钟。
优选的,步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度25~30℃,pH为6.5~7.5,时间为20~30天。
优选的,步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.8~1m3空气/(m3发酵液·分钟),温度25~30℃,pH为6.5~7.5,时间为8~12小时。
优选的,步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2~3mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
上述微生物菌剂的使用方法,先耕翻盐碱土壤,施入所述微生物菌剂,混合后即可播种玉米,其中,耕翻深度为30~50cm,微生物菌剂的施入量为每平方米1~2kg。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌制成复合菌粉,接着将复合菌粉与玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕等制成的预混料混合后厌氧发酵得到发酵料,然后将发酵料倒入聚天冬氨酸、聚乙烯醇水溶液等制成的包覆料中得到预制料,最后将聚己内酯加入预制料中搅匀得到混合物,接着向混合物中加入活性污泥,好氧发酵得到一种微生物菌剂,其施入盐碱土壤后可改善土壤理化性质,满足玉米生长的营养需求,提高玉米产量。
复合菌粉中微生物种类丰富,皮状丝孢酵母菌和绿色木霉菌有利于激活土壤中的磷元素,并促进玉米秸杆粉、蘑菇渣、棉粕、活性污泥中的有机质降解,改善盐碱土壤环境;凝结芽孢杆菌能够提高玉米对土壤中的磷、钾转化吸收,并有固氮、促生作用;大豆根瘤菌起到促进植物种子萌发、促进根际发育的作用;洋葱假单胞菌在营养缺乏状况下仍能繁殖,能利用许多物质生长,对玉米苗具有防病和促进生长的作用。故复合菌粉中各微生物协同配合促进玉米生长,提高玉米产量。
聚天冬氨酸、聚乙烯醇和聚己内酯均具有良好的生物降解性,聚天冬氨酸和聚乙烯醇制成的包覆料可以附着于固体物料表面,它们在施用后缓慢降解,实现微生物和发酵所得营养物质的缓慢释放,持续改善盐碱土壤环境。而且,聚己内酯可以用作细胞生长支持材料,有利于微生物繁殖生长,改善玉米根须生长环境,促进玉米生长。
在制备预混料时,玉米秸杆粉、蘑菇渣、棉粕进行加热加压处理,物料的细胞壁充分破碎,促进纤维素、木质素、半纤维素等成分的充分脱除,增加与微生物的接触面积,提高厌氧发酵效率。
本发明所得微生物菌剂经厌氧发酵和好氧发酵两步发酵处理,微观具有孔洞结构,具有较好的保水功能,提高玉米种子的发芽率,并具有壮苗效果,促进玉米生长。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明涉及的皮状丝孢酵母菌,购自上海一研生物科技有限公司;大豆根瘤菌、凝结芽孢杆菌,购自上海沪峥生物科技有限公司;绿色木霉菌,购自武汉吉业升化工有限公司;洋葱假单胞菌,购自上海酶联生物科技有限公司;褐球固氮菌,购自上海研生生化试剂有限公司。
实施例1
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.5:0.3:1:0.8:1.5进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.3:0.5:5混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:80搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度10%聚乙烯醇水溶液以质量比1:8搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:8:5:20。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养4天后,分别于150r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为27℃,培养时间为40小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;洋葱假单胞菌的培养温度为27℃,培养时间为42小时;褐球固氮菌的培养温度为28℃,培养时间为40小时;大豆根瘤菌的培养温度为27℃,培养时间为48小时;绿色木霉菌的培养温度为27℃,培养时间为72小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏8份,蛋白胨19份,葡萄糖20份,琼脂18份和1000份去离子水,且其pH为6.8;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏3份,蛋白胨5份,NaCl 2份,琼脂18份和1000份去离子水,且其pH为6.8;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆195份、葡萄糖10份、琼脂18份,Na2HPO44份和1000份去离子水,且其pH为7.0。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1%和0.5%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后45℃干燥至含水量20%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向65℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:50kPa和110℃条件下处理50分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度25℃,pH为6.5,时间为20天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.8m3空气/(m3发酵液·分钟),温度25℃,pH为6.5,时间为8小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
实施例2
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.8:0.5:1.2:1:2进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.5:0.8:8混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:90搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度12%聚乙烯醇水溶液以质量比1:10搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:10:8:30。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养6天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为29℃,培养时间为50小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为30℃,培养时间为48小时;洋葱假单胞菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;褐球固氮菌的培养温度为30℃,培养时间为50小时;大豆根瘤菌的培养温度为29℃,培养时间为50小时;绿色木霉菌的培养温度为29℃,培养时间为75小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏10份,蛋白胨21份,葡萄糖22份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.2;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏5份,蛋白胨6份,NaCl 4份,琼脂22份和1000份去离子水,且其pH为7.2;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆200份、葡萄糖12份、琼脂20份,Na2HPO46份和1000份去离子水,且其pH为7.6。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的2%和0.8%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后50℃干燥至含水量30%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向75℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:60kPa和120℃条件下处理60分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度30℃,pH为7.5,时间为30天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量1m3空气/(m3发酵液·分钟),温度30℃,pH为7.5,时间为12小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径3mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
实施例3
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.5:0.5:1:1:1.5进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.5:0.5:8混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:80搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度12%聚乙烯醇水溶液以质量比1:8搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:10:5:30。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养4天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为27℃,培养时间为50小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为28℃,培养时间为48小时;洋葱假单胞菌的培养温度为27℃,培养时间为46小时;褐球固氮菌的培养温度为28℃,培养时间为50小时;大豆根瘤菌的培养温度为27℃,培养时间为50小时;绿色木霉菌的培养温度为27℃,培养时间为75小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏8份,蛋白胨21份,葡萄糖20份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为6.8;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏5份,蛋白胨5份,NaCl 4份,琼脂18份和1000份去离子水,且其pH为7.2;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆195份、葡萄糖12份、琼脂18份,Na2HPO46份和1000份去离子水,且其pH为7.0。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的2%和0.5%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后50℃干燥至含水量20%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向75℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:50kPa和120℃条件下处理50分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度30℃,pH为6.5,时间为30天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.8m3空气/(m3发酵液·分钟),温度30℃,pH为6.5,时间为12小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
实施例4
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.8:0.3:1.2:0.8:2进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.3:0.8:5混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:90搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度10%聚乙烯醇水溶液以质量比1:10搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:8:8:20。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养6天后,分别于150r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为29℃,培养时间为40小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为30℃,培养时间为45小时;洋葱假单胞菌的培养温度为29℃,培养时间为42小时;褐球固氮菌的培养温度为30℃,培养时间为40小时;大豆根瘤菌的培养温度为29℃,培养时间为48小时;绿色木霉菌的培养温度为29℃,培养时间为72小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏10份,蛋白胨19份,葡萄糖22份,琼脂18份和1000份去离子水,且其pH为7.2;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏3份,蛋白胨6份,NaCl 2份,琼脂22份和1000份去离子水,且其pH为6.8;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆200份、葡萄糖10份、琼脂20份,Na2HPO44份和1000份去离子水,且其pH为7.6。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1%和0.8%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后45℃干燥至含水量30%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向65℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:60kPa和110℃条件下处理60分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度25℃,pH为7.5,时间为20天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量1m3空气/(m3发酵液·分钟),温度25℃,pH为7.5,时间为8小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径3mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
实施例5
一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.6:0.4:1.1:0.9:1.8进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.4:0.7:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度11%聚乙烯醇水溶液以质量比1:9搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:9:6:25。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;褐球固氮菌的培养温度为29℃,培养时间为45小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏9份,蛋白胨20份,葡萄糖21份,琼脂19份和1000份去离子水,且其pH为7;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
对比例1
一种微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比0.6:0.4:1.1:0.9:1.8进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.4:0.7:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度11%聚乙烯醇水溶液以质量比1:9搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:9:6:25。
步骤(1)中,分别将凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;褐球固氮菌的培养温度为29℃,培养时间为45小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种微生物菌剂。
对比例2
一种微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.6:0.4:1.1:0.9进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.4:0.7:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度11%聚乙烯醇水溶液以质量比1:9搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:9:6:25。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏9份,蛋白胨20份,葡萄糖21份,琼脂19份和1000份去离子水,且其pH为7;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种微生物菌剂。
对比例3
一种微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.6:0.4:1.1:0.9:1.8进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、水以质量比1:0.4:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度11%聚乙烯醇水溶液以质量比1:9搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:9:6:25。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;褐球固氮菌的培养温度为29℃,培养时间为45小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏9份,蛋白胨20份,葡萄糖21份,琼脂19份和1000份去离子水,且其pH为7;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种微生物菌剂。
对比例4
一种微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.6:0.4:1.1:0.9:1.8进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.4:0.7:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)省略;
(4)步骤(2)所得发酵料,作为预制料;
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、聚己内酯、活性污泥的质量比为1:6:25。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;褐球固氮菌的培养温度为29℃,培养时间为45小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏9份,蛋白胨20份,葡萄糖21份,琼脂19份和1000份去离子水,且其pH为7;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种微生物菌剂。
对比例5
一种微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.6:0.4:1.1:0.9:1.8进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.4:0.7:7混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温(25℃),得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:85搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度11%聚乙烯醇水溶液以质量比1:9搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料;
(5)向预制料中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
其中,发酵料、包覆料、活性污泥的质量比为1:9:6:25。
步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养5天后,分别于160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为28℃,培养时间为45小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为29℃,培养时间为46小时;洋葱假单胞菌的培养温度为28℃,培养时间为44小时;褐球固氮菌的培养温度为29℃,培养时间为45小时;大豆根瘤菌的培养温度为28℃,培养时间为49小时;绿色木霉菌的培养温度为28℃,培养时间为73小时。
以重量份计,所述YPD培养基包括:酵母浸膏9份,蛋白胨20份,葡萄糖21份,琼脂19份和1000份去离子水,且其pH为7;以重量份计,所述肉汁胨培养基包括:牛肉膏4份,蛋白胨5.5份,NaCl 3份,琼脂20份和1000份去离子水,且其pH为7.1;以重量份计,所述PDA培养基包括:土豆198份、葡萄糖11份、琼脂19份,Na2HPO45份和1000份去离子水,且其pH为7.2。
步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1.5%和0.7%。
步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后48℃干燥至含水量25%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
步骤(2)中,所述聚乙烯醇水溶液的制备方法如下:向70℃的水中加入聚乙烯醇,搅拌至完全溶解,冷却至室温(25℃),即得所述聚乙烯醇水溶液。
步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:55kPa和115℃条件下处理55分钟。
步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度28℃,pH为7,时间为25天。
步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.9m3空气/(m3发酵液·分钟),温度28℃,pH为7.1,时间为9小时。
步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2mm的颗粒。
通过上述制备方法得到的一种微生物菌剂。
试验例
任选一块盐碱地,随机划分为11块,一块作为空白对照组,另外十块分别施用实施例1~5和对比例1~5的微生物菌剂,播种玉米(品种:先玉335),生长情况见表1。
田间管理:
基肥:播种前进行土地耕翻平整,然后进行施肥,对照田施用碳酸氢铵50kg/亩、普通过磷酸钙50kg/亩。其余分别施用实施例1~5和对比例1~5的微生物菌剂,微生物菌剂的使用方法,先耕翻盐碱土壤,施入所述微生物菌剂,混合后即可播种玉米,其中,耕翻深度为40cm,微生物菌剂的施入量为每平方米1.5kg;
播种日期:2018年5月6日
追肥:2018年7月上旬对照田追施尿素25kg/亩。
收获:2018年10月3日。
表1.玉米生长情况比较
出苗率(%) | 青枯病发病率(%) | 产量(kg/m<sup>2</sup>) | |
实施例1 | ≥98 | 0 | 2.88 |
实施例2 | ≥98 | 0 | 2.86 |
实施例3 | ≥98 | 0 | 2.91 |
实施例4 | ≥98 | 0 | 2.91 |
实施例5 | ≥98 | 0 | 2.95 |
对比例1 | 75 | 6.7 | 2.02 |
对比例2 | 80 | 8.6 | 2.00 |
对比例3 | 86 | 1.2 | 2.11 |
对比例4 | 90 | 9.2 | 1.88 |
对比例5 | 90 | 5.5 | 1.92 |
对照组 | 15 | 12 | 1.21 |
由表1可知,与对照组相比,实施例1~5的微生物菌剂可促进盐碱土壤中玉米生长。对比例1略去步骤(1)中的皮状丝孢酵母菌,对比例2略去步骤(1)中的褐球固氮菌,对比例3略去步骤(2)中棉粕,对比例4略去步骤(3),对比例5略去步骤(5)中的聚己内酯,玉米生长情况明显较差。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (10)
1.一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)复合菌粉的制备:先将皮状丝孢酵母菌、大豆根瘤菌、绿色木霉菌、凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌菌株分别单独进行接种、发酵、絮凝、压滤、干燥及粉碎,得到相应的菌粉,然后将所得菌粉依次以质量比1:0.5~0.8:0.3~0.5:1~1.2:0.8~1:1.5~2进行混合,得到复合菌粉,备用;
(2)接着将玉米秸秆粉、蘑菇渣、棉粕、水以质量比1:0.3~0.5:0.5~0.8:5~8混合搅匀,加热加压处理,自然冷却至室温,得到预混料;然后将步骤(1)所得复合菌粉与所述预混料以质量比1:80~90搅拌混匀,厌氧发酵,得到发酵料,备用;
(3)另外将聚天冬氨酸与质量浓度10~12%聚乙烯醇水溶液以质量比1:8~10搅拌混匀,得到包覆料,备用;
(4)然后将步骤(2)所得发酵料倒入步骤(3)所得包覆料中,得到预制料。
(5)最后将聚己内酯加入预制料中,搅匀得到混合物,接着向所得混合物中加入活性污泥,搅拌混匀,好氧发酵,即得一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,发酵料、包覆料、聚己内酯、活性污泥的质量比约为1:8~10:5~8:20~30。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,分别将皮状丝孢酵母菌接种于YPD培养基,凝结芽孢杆菌、洋葱假单胞菌、褐球固氮菌接种于肉汁胨培养基,大豆根瘤菌、绿色木霉菌接种于PDA培养基,培养4~6天后,分别于150~160r/min摇床培养,各自的培养条件如下:皮状丝孢酵母菌的培养温度为27~29℃,培养时间为40~50小时;凝结芽孢杆菌的培养温度为28~30℃,培养时间为45~48小时;洋葱假单胞菌的培养温度为27~29℃,培养时间为42~46小时;褐球固氮菌的培养温度为28~30℃,培养时间为40~50小时;大豆根瘤菌的培养温度为27~29℃,培养时间为48~50小时;绿色木霉菌的培养温度为27~29℃,培养时间为72~75小时。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,利用磷酸氢二钠和氯化钙絮凝,两者的加入量分别为发酵所得发酵液质量的1~2%和0.5~0.8%。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,压滤、干燥及粉碎的具体方法为:采用板框压滤,然后45~50℃干燥至含水量20~30%,旋风分离后利用粉碎机粉碎,过30目筛,即得所述菌粉。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,加热加压处理的具体方法为:50~60kPa和110~120℃条件下处理50~60分钟。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,厌氧发酵的条件为:温度25~30℃,pH为6.5~7.5,时间为20~30天。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,好氧发酵的条件为:空气流量0.8~1m3空气/(m3发酵液·分钟),温度25~30℃,pH为6.5~7.5,时间为8~12小时。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,好氧发酵后所得产物经喷浆造粒,制成粒径2~3mm的颗粒。
10.根据权利要求1~9中任一项所述制备方法得到的一种适于盐碱土壤玉米种植的微生物菌剂。
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