CN109971651B - 一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5,8过氧化物中的应用 - Google Patents

一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5,8过氧化物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提出了一种利用烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法：无菌条件下将TE‑3菌丝体转接于内装有已灭菌的液体PDB培养基中；静置发酵，过滤分离发酵液与菌丝体；发酵液以乙酸乙酯萃取3次，合并减压浓缩得浓缩液A；菌丝体丙酮超声提取3次，减压浓缩后以乙酸乙酯萃取3次，合并后得浓缩液B；合并A和B，得发酵物浸膏；加入硅胶拌样，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1进行硅胶柱层析；采用凝胶柱层析分离得到麦角甾醇5，8过氧化物的纯品，该菌株TE‑3为芦竹节菱孢Arthrinium arundinis TE‑3。该制备方法适宜于工业大规模培养，并且产率高，易于分离纯化；发酵培养基成本低，制备简单，可实现工业规模生产，为角甾醇5，8过氧化物的研究应用、工业化生产提供了药源。

Description

一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5,8过氧化物中的 应用
技术领域
本发明涉及一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5，8过氧化物中的应用，属于微生物技术领域。
背景技术
麦角甾醇(ergosterol)，又称麦角固醇，大量存在于酵母菌、霉菌等真菌和某些植物中，是一种重要的植物甾醇，具有重要的生理作用，可以增强人体抵抗疾病的能力，是重要的脂溶性维生素D2源，具有显著的抗菌、抗肿瘤功效。麦角甾醇也是一种食品、饲料及医药等工业中常用的化工原料，可用于可的松、激素黄体酮等药物的生产。麦角甾醇5，8过氧化物是麦角甾醇的C5、C8位发生氧化形成过氧桥的衍生物，是一类较少见的甾醇，多见于一些海洋低等生物中，少见于一些真菌类生物，偶见于高等植物。该化合物是近年来发现的一个热点分子，文献报道该化合物具有促进肿瘤细胞凋亡、抗炎、抗氧化、抑菌等广泛药理作用。特别是在抗肿瘤活性方面，已被证实能诱导人卵巢癌SKOV3、肝癌HepG2等细胞凋亡并对耐药性癌细胞表现出抑制活性。因此，该化合物具有成为新型抗肿瘤药物先导化合物的潜力，具有较高的研究价值和应用价值。
目前，麦角甾醇5，8过氧化物的市场价格约为30万元/克，随着研究的深入，对其市场需求越来越大。麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法主要有微生物发酵法及化学合成法，化学合成法过程复杂且成本高，不能满足于临床研究的需要，因此微生物发酵法成为解决药源问题的重要途径。中国发明专利CN104694401A公开了一种微生物发酵制备麦角甾醇5，8过氧化物的方法。其采用的菌株LPPV001为纯绿青霉Penici//ium verrucosum，保藏号为CGMCC NO.4468。通过所述菌株所述方法发酵生产麦角甾醇5，8过氧化物产率高，且经简单提纯即可制得。
但是关于一种能够通过微生物发酵制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌及其应用目前还未见报道。在对烟草内生真菌化学成分研究过程中，从一株芦竹节菱孢(Arthrinium arundinis TE-3)中大量分离获得麦角甾醇5，8过氧化物，其含量可达2.3％(单体化合物/ 发酵产物)。该菌株具有生长速度快，生长条件温和等有点，适宜于工业大规模培养，并且产率高，易于分离纯化。发酵培养基采用传统的PDB培养基，成本低，制备简单，可实现工业规模生产。
本发明的意义在于通过微生物发酵法，为麦角甾醇5，8过氧化物的制备提供了新的可供选择的菌株，同时为其提取纯化开辟了一条简单易操作的技术路线。
发明内容
基于上述问题，本发明目的在于提供一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5，8过氧化物中的应用，所述麦角甾醇5，8过氧化物化学结构如图1。
本发明涉及一种应用于制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌，所述烟草内生真菌从茄科植物烟草(Nicotinana tabacum L.)的健康植株中采用组织分离法分离获得，所述烟草内生真菌分类命名为芦竹节菱孢(Arthrinium arundinis TE-3)，已于2017年10月31 日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCCNo.14792；保藏地点：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
上述烟草内生真菌在PDA固体培养基上的培养特征为：28℃培养条件下生长迅速，菌丝体呈白色，绒毛状辐射生长，边缘锯齿状，背面为淡黄色，见图2。
上述烟草内生真菌在PDB液体培养基上的培养特征为：28℃下静置培养，培养30天。培养初期(1-5天)，培养基表面出现白色菌丝体；中期(5-15天)菌丝体快速生长形成白色菌膜，均匀铺于培养基表面；后期(15-30天)菌膜增厚，并渐变为浅粉色。见图3。
上述烟草内生真菌的ITS序列如图4所示。将测序结果于NCBI网站 (https：//blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)进行Blast比对。所述内生真菌同芦竹节菱孢Arthrinium arundinis(序列号：LT719147.1)具有较高的同源性，其相似度为99％。
一种利用所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法，包括以下步骤：
(1)无菌条件下，挑取适量斜面培养3天的所述菌株TE-3；
(2)无菌条件下，将该TE-3菌丝体转接于事先内装有已灭菌的300mL液体PDB培养基的1000mL三角烧瓶中；
(3)将三角烧瓶于28℃下静置发酵培养30天，发酵完毕后过滤使发酵液与菌丝体分离；发酵液连续用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并3次萃取液，减压浓缩得浓缩液A；菌丝体连续以3倍量80％丙酮超声提取3次，合并3次丙酮提取液，减压浓缩后连续用3倍量乙酸乙酯萃取3次，合并3次乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得浓缩液B；
(4)合并浓缩液A和浓缩液B，得发酵物浸膏；加入100-200目硅胶拌样，以石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1的混合溶剂作为洗脱剂进行硅胶柱层析；然后采用凝胶柱层析的方法分离该组分，得到化合物麦角甾醇5，8过氧化物的纯品。
进一步，上述的利用所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法中，所述的液体PDB培养基的配方为：马铃薯粉200g/L，蔗糖20g/L。
进一步，上述的利用所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法中，所述麦角甾醇5，8过氧化物纯品通过核磁共振1H NMR谱图检测分析其是否具有环内双键以及反式烯烃基团，并通过13C NMR检测分析是否具有28个碳原子信号及2个连氧季碳信号。
本发明的有益效果：本发明提供了一种用于制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌菌株及其在制备麦角甾醇5，8过氧化物中的应用；该菌株具有生长速度快，生长条件温和等优点，适宜于工业大规模培养，并且产率高，易于分离纯化。发酵培养基采用传统的PDB培养基，成本低，制备简单，可实现工业规模生产。本发明的意义在于通过微生物发酵法，为麦角甾醇5，8过氧化物的制备提供了新的可供选择的菌株，同时为其提纯开辟了一条简单易操作的技术路线。本发明通过可行的大规模发酵方式实现活性物质麦角甾醇5，8过氧化物的大量生产，为该活性物质的研究应用、工业化生产提供了药源。
附图说明
图1为本发明中麦角甾醇5，8过氧化物化学结构式；
图2为本发明中所述烟草内生真菌在PDA固体培养基上的形态；
图3为本发明中所述烟草内生真菌在PDB液体培养基中的形态；
图4为本发明中所述烟草内生真菌的ITS序列；
图5为本发明中麦角甾醇5，8过氧化物核磁共振1H谱图(氘代氯仿)；
图6为本发明中麦角甾醇5，8过氧化物核磁共振13C谱图(氘代氯仿)；
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5，8过氧化物中的应用，包括烟草内生真菌的分离、鉴定、麦角甾醇5，8过氧化物的制备及检测。
实施例1菌株TE-3的分离及鉴定
1、烟草内生真菌TE-3的分离
本发明的烟草内生真菌TE-3为从湖北省恩施州采集的健康烟草叶中得到的菌株。
烟草内生真菌的分离采用组织分离法。首先将烟草叶在自来水下充分冲洗，除去表面的泥土；然后将冲洗的叶片组织按“75％乙醇(1min)-2.5％次氯酸钠(30s)-75％乙醇(1min)”三步消毒法进行表面灭菌，之后用无菌水冲洗3遍；将叶片切成0.5cm×0.5cm大小的小块，将切口插入含有氯霉素的PDA培养基上，28℃恒温培养箱内培养3～7天；待培养基中组织切口处有菌丝长出，用灭菌的接种环挑取菌丝至新的PDA培养基上，划线稀释分离，直至获得纯培养。
2、烟草内生真菌TE-3的分类学鉴定
采用CTAB法提取纯化菌株TE-3的基因组DNA，用0.8％的琼脂糖凝胶电泳检测条带完整性，利用nanodrop检测DNA的纯度和浓度，以ITS1和ITS4通用引物进行PCR扩增，然后将PCR产物利用Sanger测序平台进行测序。该菌株序列如下：
AGGTAACACTCCATACCATCTGTTAACCTACCCAGTTATGCCTCGGCGTAAGCTCGGTTGGAGGCACCTGCAGCTA CCCTGTAGTTGCGGACTGCCAACTCCAGCCGCGGCCCGCCGGCGGTACACTAAACTCTGTTTTATTTTATATTCTGAGCG TCTTATTTTAATAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAA GTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCATCAGTATTCTGGTGGGCATGCC TGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTTAAGCCTAGCTTAGTGTTGGGAATCTGCTGTACTGCAGTTCCTTAAAGACAGTGGCG GAGCGGCGGTAGTCCTCTGAGCGTAGTAATTTATTTCTCGCTTTTGTCAGGCTCTGTCCTCCCGCCATAAAACCCCCAAT TTTTTAGTGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAAAAACCCCGAAGGAAAAACCAA
将该菌株基因序列登录Genbank，通过Blast比对同源性，发现测试结果与芦竹节菱孢 Arthrinium arundinis(序列号：LT719147.1)具有较高的同源性，其相似度为99％。结合形态学将该菌株鉴定为Arthrinium arundinis。该菌株已由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号：CGMCC No.14792，保藏日期：2017年10月31日，保藏地点：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
实施例2麦角甾醇5，8过氧化物的制备及检测
1、麦角甾醇5，8过氧化物的制备
无菌条件下，挑取斜面培养3天的所述菌株TE-3适量；挑取适量TE-3菌丝体转接于1000 mL三角烧瓶中，三角烧瓶内事先装有已灭菌的300mL液体PDB培养基；将三角烧瓶于28℃下静置发酵培养30天；发酵完毕后过滤使发酵液与菌丝体分离，发酵液连续用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并3次萃取液，减压浓缩得浓缩液A；菌丝体连续以3倍量80％丙酮超声提取 3次，合并3次丙酮提取液，减压浓缩后连续用3倍量乙酸乙酯萃取3次，合并3次乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得浓缩液B；合并浓缩液A和B，得发酵物浸膏，加入100-200目硅胶拌样，以石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1的混合溶剂作为洗脱剂进行硅胶柱层析；采用凝胶柱层析的方法分离该组分，得到化合物麦角甾醇5，8过氧化物的纯品。
2、麦角甾醇5，8过氧化物的检测
分离获得的化合物为白色针状晶体，易溶于甲醇、二氯甲烷，熔点为176℃；该化合物的核磁共振谱图见图5和图6。其1H NMR谱图显示，在化学位移δH 6.50和6.24处，各出现一个相互耦合的d峰信号，耦合常数J＝8.5Hz，提示存在环内双键；在δH 5.22和5.14 处，各存在一对dd峰信号，耦合常数分别为J＝15.3，7.5Hz和15.3，8.3Hz，提示存在反式直链烯烃结构。其13C NMR谱图显示28个碳原子信号，较低场的δC 135.4，135.2，132.3，130.7四个信号为不饱和碳原子信号，82.2和79.4的两个季碳信号位于较低场，推测两个信号之间具有过氧桥基团。该化合物的核磁数据和文献(Yue et al. Phytochemistry，2001，56：801-806)报道的数据基本一致，因此可以确定该化合物为麦角甾醇5，8过氧化物。
3、应用意义
该制备方法适宜于工业大规模培养，并且产率高，易于分离纯化；发酵培养基采用传统的PDB培养基，成本低，制备简单，可实现工业规模生产，为该活性物质角甾醇5，8过氧化物的研究应用、工业化生产提供了药源。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，上述假设的这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种应用于制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌，其特征在于：所述烟草内生真菌分类命名为芦竹节菱孢(Arthrinium arundinis) TE-3，已于2017年10月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.14792。
2.一种利用权利要求1所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)无菌条件下，挑取适量斜面培养3天的所述菌株TE-3；
(2)无菌条件下，将该TE-3菌丝体转接于事先内装有已灭菌的300mL液体PDB培养基的1000mL三角烧瓶中；
(3)将三角烧瓶于28℃下静置发酵培养30天，发酵完毕后过滤使发酵液与菌丝体分离；发酵液连续用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并3次萃取液，减压浓缩得浓缩液A；菌丝体连续以3倍量80％丙酮超声提取3次，合并3次丙酮提取液，减压浓缩后连续用3倍量乙酸乙酯萃取3次，合并3次乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得浓缩液B；
(4)合并浓缩液A和浓缩液B，得发酵物浸膏；加入100-200目硅胶拌样，以石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1的混合溶剂作为洗脱剂进行硅胶柱层析；然后采用凝胶柱层析的方法分离该组分，得到化合物麦角甾醇5，8过氧化物的纯品。
3.根据权利要求2所述的一种利用权利要求1所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法，其特征在于：所述的液体PDB培养基的配方为：马铃薯粉200g/L，蔗糖20g/L。
4.根据权利要求2所述的一种利用权利要求1所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法，其特征在于：所述麦角甾醇5，8过氧化物纯品通过核磁共振1HNMR谱图检测分析其是否具有环内双键以及反式烯烃基团，并通过13CNMR检测分析是否具有28个碳原子信号及2个连氧季碳信号。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112940950B (zh) * 2021-04-29 2022-11-11 广西壮族自治区农业科学院 一株节菱孢菌属真菌菌株及其应用
CN114517214A (zh) * 2022-02-21 2022-05-20 湖南环境生物职业技术学院 一种经表观遗传学改造提高内生真菌发酵产物4-羟基苯乙醇产量的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101012268A (zh) * 2005-12-09 2007-08-08 包海鹰 簇生沿丝伞石油醚提取物及制备方法以及在制备治疗肿瘤的药物用途
CN104694401A (zh) * 2015-04-09 2015-06-10 临沂大学 纯绿青霉菌株及用其生产麦角甾醇过氧化物的方法
CN105505798A (zh) * 2016-01-15 2016-04-20 中国人民解放军第二军医大学 一种产麦角甾醇内生真菌及其应用
CN105585608A (zh) * 2015-11-28 2016-05-18 正源堂（天津）生物科技有限公司 从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇过氧化物的方法及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101012268A (zh) * 2005-12-09 2007-08-08 包海鹰 簇生沿丝伞石油醚提取物及制备方法以及在制备治疗肿瘤的药物用途
CN104694401A (zh) * 2015-04-09 2015-06-10 临沂大学 纯绿青霉菌株及用其生产麦角甾醇过氧化物的方法
CN105585608A (zh) * 2015-11-28 2016-05-18 正源堂（天津）生物科技有限公司 从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇过氧化物的方法及其应用
CN105505798A (zh) * 2016-01-15 2016-04-20 中国人民解放军第二军医大学 一种产麦角甾醇内生真菌及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Cytotoxic metabolites from the cultures of endophytic fungi from Panax ginseng;Cheng-Jian Zheng等;《Applied Microbiology and Biotechnology》;20130623;第7617-7625页 *
紫苏内生真菌Penicillium sp.12Y25化学成分及抑菌活性研究;李晓君等;《西北农林科技大学学报（自然科学版）》;20150909;第43卷(第10期);第64-69,76页 *

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