CN109929829B - 一种羰基还原酶的固定化方法 - Google Patents
一种羰基还原酶的固定化方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109929829B CN109929829B CN201910116051.3A CN201910116051A CN109929829B CN 109929829 B CN109929829 B CN 109929829B CN 201910116051 A CN201910116051 A CN 201910116051A CN 109929829 B CN109929829 B CN 109929829B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- macroporous resin
- soaking
- carbonyl reductase
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000005751 Alcohol Oxidoreductases Human genes 0.000 title claims abstract description 51
- 108010031132 Alcohol Oxidoreductases Proteins 0.000 title claims abstract description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 43
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 43
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 24
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 18
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 15
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims description 9
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims description 8
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 7
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 5
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 35
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 35
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 4
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 abstract description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 4
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical group O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000002153 concerted effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
本发明属于酶固定化技术领域,具体涉及一种羰基还原酶的固定化方法,具体的为,将大孔树脂置于羰基还原酶溶液中进行吸附固定,所述大孔树脂依次经碱性溶液、乙醇、酸性溶液浸泡活化。该固定化方法操作简单,酶活损失小,稳定性高,适用于机械搅拌或流化床等工业化形式的生产。
Description
技术领域
本发明属于酶固定化技术领域,具体涉及一种羰基还原酶的固定化方法。
背景技术
酶作为一种生物催化剂被广泛应用于多种行业,相较于化学法,其反应条件温和、高选择性、无污染等特点更为人们所青睐。但是,游离酶催化也有着许多缺陷,例如,酶的耐酸碱度低;对温度极为敏感;难与产品分离;造价昂贵,成本高。为了克服游离酶催化存在的缺陷,一种新方法被提了出来,那就是酶的固定化。
所谓的酶固定化技术,就是指在酶活损失较小的前提下,将酶用特定的固体或者不溶于水的材料束缚于一定的空间,用于催化、回收、重复利用的一项新技术。
酶固定化方法主要包括:包埋法、吸附法、交联法和共价法。包埋法:在不改变结构的情况下,把酶固定于半透性的凝胶内部微孔等材料中,形成块、管、膜等形状的固定化酶。吸附法:在酶与载体表面之间存在的分子间作用力、氢键力、离子键的作用下,将酶与载体结合。交联法:利用多功能试剂使酶与酶或酶与载体之间形成得的共价键进行固定,最常用的交联剂是戊二醛,虽然交联法相较于其他方法固定最为牢固,但由于交联过程较为激烈,对酶活影响最大。共价法:通过酶蛋白分子与载体表面上的反应基团之间形成共价键,使得酶固定于载体上。
与游离酶相比固定化酶具有以下优点:(1)固定化酶便于与产物分离,提高了产品纯度;(2)固定化酶可以多次催化,营造利润空间;(3)固定化酶结构韧性大,可以用于装柱等连续化、自动化生产;(4)可控制反应进程;(5)可用于多种酶的固定,进行多酶体系协同催化。
固定化酶技术,可以有效地减少酶催化剂的使用量,提高了产品的纯度,避免了繁琐的分离工作,另外此工艺接近零污染,有利于医药相关产业的清洁生产,进而促进绿色环保社会的建设。
发明内容
本发明主要提供了一种羰基还原酶的固定化方法,羰基还原酶(CR)可以牢固地吸附于大孔树脂的表面及内部空间,有效地提高了酶的利用率,避免了繁琐的分离工作,易于工业化生产。其技术方案如下:
一种羰基还原酶的固定化方法,具体的为,将大孔树脂置于羰基还原酶溶液中进行吸附固定,所述大孔树脂依次经碱性溶液、乙醇、酸性溶液浸泡活化。
优选的,所述大孔树脂为大孔树脂D72。
优选的,所述羰基还原酶溶液为羰基还原酶稀释于磷酸缓冲液得到的溶液,其中羰基还原酶的质量分数为0.89-1.23%。
优选的,大孔树脂活化的具体步骤为:先将大孔树脂放置于碱性溶液中浸泡,用去离子水冲洗至中性,然后放置于乙醇中浸泡并用去离子水冲洗至中性,再放置于酸性溶液中浸泡并用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂放于烘箱中烘干。
优选的,所述碱性溶液为氢氧化钠溶液,酸性溶液为盐酸溶液。
优选的,碱性溶液的质量分数为2-4%,于碱性溶液中浸泡的时间为6-8h。
优选的,乙醇的体积分数为95%,于乙醇中浸泡的时间为4-6h。
优选的,酸性溶液的质量分数为5-7%,于酸性溶液中浸泡的时间为6-8h。
优选的,吸附固定的温度为27-34℃,吸附固定时间为150-200min,吸附固定的转速为150-300r/min。
优选的,羰基还原酶的固定率为90-95%。
采用上述方案,本发明具有以下优点:
本发明提供一种利用树脂作为载体固定羰基还原酶的制备方法,将大孔树脂分别放入氢氧化钠溶液、乙醇、盐酸溶液中浸泡,得到活化后的大孔树脂,以活化的大孔树脂为载体,将其放入一定浓度的CR溶液中搅拌吸附固定,得到固定化CR。该固定化方法操作简单,酶活损失小,稳定性高,适用于机械搅拌或流化床等工业化形式的生产。
具体实施方式
以下实施例中的实验方法如无特殊规定,均为常规方法,所涉及的实验试剂及材料如无特殊规定均为常规生化试剂和材料。
实施例1
一种大孔树脂D72固定CR的制备方法,包括如下步骤:
用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾配置0.2mol/L的磷酸缓冲溶液(pH=7.0-7.8),备用。
将26g大孔树脂D72加入到150mL、2%(w)的氢氧化钠溶液中浸泡8h,用去离子水冲洗至中性,放置于150mL、体积分数为95%的乙醇中浸泡4h后用去离子水冲洗至中性,再放置于150mL、5%(w)的盐酸溶液中浸泡8h后用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂D72放于烘箱中以80℃烘干,得到活化好的大孔树脂D72。
将处理好的大孔树脂置于300mL CR溶液(3.25g CR用0.2mol/L磷酸缓冲溶液稀释至300mL)中并于30℃、以200r/min的转速搅拌吸附180min,得到固定化CR。
CR的固定率测定:采用考马斯亮蓝法,测出固定前游离酶含量、固定后上清液游离酶含量,依据固定率计算公式,测出CR的固定率为92.3%。
实施例2
一种大孔树脂NKA固定CR的制备方法,包括如下步骤:
用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾配置0.2mol/L的磷酸缓冲溶液(pH=7.0-7.8),备用。
将26g大孔树脂NKA加入到150mL、2%(w)的氢氧化钠溶液中浸泡8h,用去离子水冲洗至中性,放置于150mL、体积分数为95%的乙醇中浸泡4h后用去离子水冲洗至中性,再放置于150mL、5%(w)的盐酸溶液中浸泡8h后用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂放于烘箱中以80℃烘干,得到活化后的大孔树脂NKA。
将处理好的大孔树脂置于300mL CR溶液(3.25g CR用0.2mol/L磷酸缓冲溶液稀释至300mL)中并于30℃、以200r/min的转速搅拌吸附180min,得到固定化CR。
CR的固定率为83.6%。
实施例3
一种大孔树脂D380固定CR的制备方法,包括如下步骤:
用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾配置0.2mol/L的磷酸缓冲溶液(pH=7.0-7.8),备用。
将26g大孔树脂D380加入到150mL、2%(w)的氢氧化钠溶液中浸泡8h,用去离子水冲洗至中性,放置于150mL、体积分数为95%的乙醇中浸泡4h后用去离子水冲洗至中性,再放置于150mL、5%(w)的盐酸溶液中浸泡8h后用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂放于烘箱中以80℃烘干,得到活化后的大孔树脂D380。
将处理好的大孔树脂置于300mL CR溶液(3.25g CR用0.2mol/L磷酸缓冲溶液稀释至300mL)中并于30℃,以200r/min的转速搅拌吸附180min,得到固定化CR。
CR的固定率为23.7%。
实施例4
一种大孔树脂D152固定CR的制备方法,包括如下步骤:
用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾配置0.2mol/L的磷酸缓冲溶液(pH=7.0-7.8),备用。
将26g大孔树脂D152加入到150mL、2%(w)的氢氧化钠溶液中浸泡8h,用去离子水冲洗至中性,放置于150mL、体积分数为95%的乙醇中浸泡4h后用去离子水冲洗至中性,再放置于150mL、5%(w)的盐酸溶液中浸泡8h后用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂放于烘箱中以80℃烘干,得到活化后的大孔树脂D152。
将处理好的大孔树脂置于300mL CR溶液(3.25g CR用0.2mol/L磷酸缓冲溶液稀释至300mL)中并于30℃、以200r/min的转速搅拌吸附180min,得到固定化CR。
CR的固定率为11.2%。
CR酶活检测
由上述实施例可知,以大孔树脂D72作为载体的固定率最高,因此对其进行酶活检测:取1g游离CR,将其加入29.5mL的反应液(1.5mol/L NADPH,1.0mol/L ATS-6)中,在pH=7.0,T=35℃条件下反应,ATS-7的产率约为89.6%。取固定了1g CR的大孔树脂,在上述相同的条件下进行反应,ATS-7的产率约为86.6%,通过对比游离酶催化合成ATS-7的产率,可以得出结论:与游离酶相比,固定化CR酶活损失小于3.4%。
表一CR固定率的测定
以大孔树脂D72为最佳固定化载体,将活化后的D72用于吸附固定CR,固定率约为92.3%,经检测,固定化CR酶活损失小于3.4%。该方法操作简单,酶活损失小,稳定性高,且固定化酶结构韧性大,可以用于搅拌、装柱等工业化生产。
对本领域的技术人员来说,可根据以上描述的技术方案以及构思,做出其它各种相应的改变以及形变,而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种羰基还原酶的固定化方法,其特征在于:将大孔树脂D72置于羰基还原酶溶液中进行吸附固定,所述大孔树脂D72依次经碱性溶液、乙醇、酸性溶液浸泡活化,所述羰基还原酶溶液为羰基还原酶稀释于磷酸缓冲液得到的溶液,其中羰基还原酶的质量分数为0.89-1.23%;
大孔树脂活化的具体步骤为:先将大孔树脂放置于碱性溶液中浸泡,用去离子水冲洗至中性,然后放置于乙醇中浸泡并用去离子水冲洗至中性,再放置于酸性溶液中浸泡并用去离子水冲洗至中性,倾倒上清液并将大孔树脂放于烘箱中烘干;
所述碱性溶液为氢氧化钠溶液,酸性溶液为盐酸溶液,碱性溶液的质量分数为2-4%,于碱性溶液中浸泡的时间为6-8h,乙醇的体积分数为95%,于乙醇中浸泡的时间为4-6h,酸性溶液的质量分数为5-7%,于酸性溶液中浸泡的时间为6-8h,吸附固定的温度为27-34℃,吸附固定时间为150-200min,吸附固定的转速为150-300r/min。
2.根据权利要求1所述的羰基还原酶的固定化方法,其特征在于:羰基还原酶的固定率为90-95%。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910116051.3A CN109929829B (zh) | 2019-02-15 | 2019-02-15 | 一种羰基还原酶的固定化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910116051.3A CN109929829B (zh) | 2019-02-15 | 2019-02-15 | 一种羰基还原酶的固定化方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109929829A CN109929829A (zh) | 2019-06-25 |
CN109929829B true CN109929829B (zh) | 2023-03-10 |
Family
ID=66985545
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910116051.3A Active CN109929829B (zh) | 2019-02-15 | 2019-02-15 | 一种羰基还原酶的固定化方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN109929829B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108642035B (zh) * | 2018-05-08 | 2022-03-25 | 江苏理工学院 | 一种硅胶固定gdh催化制备nadph的方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014150633A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Immobilized ketoreductases and process for making and using immobilized ketoreductase |
CN104722100A (zh) * | 2015-03-18 | 2015-06-24 | 李�杰 | Ab-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺 |
CN105368886A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-03-02 | 江苏万年长药业有限公司 | 一种树脂固定卤醇脱卤酶催化合成(r)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯的工艺 |
CN105969757A (zh) * | 2016-06-03 | 2016-09-28 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种酶的固定化方法及应用 |
-
2019
- 2019-02-15 CN CN201910116051.3A patent/CN109929829B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014150633A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Immobilized ketoreductases and process for making and using immobilized ketoreductase |
CN104722100A (zh) * | 2015-03-18 | 2015-06-24 | 李�杰 | Ab-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺 |
CN105368886A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-03-02 | 江苏万年长药业有限公司 | 一种树脂固定卤醇脱卤酶催化合成(r)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯的工艺 |
CN105969757A (zh) * | 2016-06-03 | 2016-09-28 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种酶的固定化方法及应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN109929829A (zh) | 2019-06-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hu et al. | Mesoporous silicas synthesis and application for lignin peroxidase immobilization by covalent binding method | |
CN105624128B (zh) | 一种固定化单胺氧化酶及其在合成手性氮杂双环化合物中的应用 | |
JPH0338B2 (zh) | ||
CN103723725B (zh) | 硅烷化活性炭的制备方法、固载化酶的制备方法 | |
CN109929829B (zh) | 一种羰基还原酶的固定化方法 | |
CN107475239B (zh) | 一种辣根过氧化物酶的固定化方法及其应用 | |
CN109266639A (zh) | 一种双重固定化酶及其制备方法和应用 | |
Demirci et al. | Urease-immobilized PEI cryogels for the enzymatic hydrolysis of urea and carbon dioxide uptake | |
Li et al. | Reversible, selective immobilization of nuclease P1 from a crude enzyme solution on a weak base anion resin activated by polyethylenimine | |
CN104711248A (zh) | 一种消除底物毒性的方法 | |
CN113717966B (zh) | 一种水凝胶/金属有机框架复合载体的制备方法及应用 | |
CN106148319B (zh) | 基于反应吸附法制备固定化酶的方法 | |
CN114231521B (zh) | 一种改性凹凸棒土固载酶制备方法及其应用 | |
Sun et al. | Preparation of 3D porous cellulose‐chitosan hybrid gel macrospheres by alkaline urea system for enzyme immobilization | |
CN110982691B (zh) | 一种金纳米棒功能化整体柱固定化酶反应器的制备方法 | |
CN110294824B (zh) | 一种高效阳离子型聚合物的制备方法及其应用 | |
CN107641623B (zh) | 伯胺基固定化酶载体及其制备方法 | |
CN112126640A (zh) | 中性脲酶固定化及其在降解黄酒尿素中的应用 | |
CN111607584A (zh) | 一种树脂固定化海洋环糊精葡萄糖基转移酶的方法 | |
KR100509738B1 (ko) | 실리카겔 또는 복합실리카겔 담체를 이용한 효소의 고정화방법 | |
Anming et al. | Covalent assembly of penicillin acylase in mesoporous silica based on macromolecular crowding theory | |
Sharma et al. | Covalent Immobilization of Yeast Alcohol Dehydrogenase on an Amine-Functionalized Polymeric Resin Enhances Stability for Furfural Hydrogenation to Furfuryl Alcohol Using Ethanol as the Terminal Reductant | |
CN105274085A (zh) | 一种由CS/SiO2超薄膜构筑的块体大孔复合材料固定化漆酶的制备方法 | |
Abd El-Ghaffar et al. | Grafted pectin with glycidyl methacrylate for multi-sites urease immobilization | |
Monsan et al. | Use of papain immobilized on spherosil for beer chillproofing |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240104 Address after: 226400 Yangkou Chemical Industrial Park, Rudong County, Nantong City, Jiangsu Province Patentee after: NANTONG WANNIANCHANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Address before: 213001 No. 1801 Wu Cheng Road, Changzhou, Jiangsu Patentee before: JIANGSU University OF TECHNOLOGY |
|
TR01 | Transfer of patent right |