CN109924504A - 一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，涉及油脂的合成领域，以中链脂肪酸甘油三酯、长链脂肪酸甘油三酯、共轭亚油酸甘油酯和植物甾醇为原料，在反应器中进行酯交换反应，经预处理步骤，得到中长链甘油三酯；再经进一步处理，并与二氧化硅、N‑乙酰神经氨酸、β‑羟基‑β‑甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓及酵母β‑葡聚糖混合后制备出中长链结构脂质组合物。该方法简单、方便、价廉，同时上述制备方法制得的中长链结构脂质组合物可用于乳腺疾病的营养治疗。
Description
技术领域
本发明涉及油脂的合成领域，具体涉及一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法。
背景技术
乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤，通常出现于女性身上，原位乳腺癌并不致命，但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落，癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，进而危及生命。针对乳腺癌，不同年龄组的临床表现具有不同特点，未婚女性、已婚生育、尚未哺乳的妇女，其主要症状为乳腺胀痛，可同时累及双侧，整个乳房有弥漫性结节感并伴有触痛；35岁以后女性主要症状是乳腺肿块、乳疼和触痛较轻；45岁以后女性常表现为单个或多个散在的囊性肿物，多伴有钝疼、肿痛或烧灼感，绝经后的女性乳房腺体萎缩，囊性病变更为突出。截止到日前，全球乳腺癌发病率一直呈上升趋势，我国虽不是乳腺癌高发国家，但近些年乳腺癌发病率以每年3-5％的速度上升，高出发达国家1-2个百分点，据统计，全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位。除乳腺癌外，乳腺增生、乳房胀痛、肿块、囊性乳腺增生病、乳头状瘤及癌前病变等乳腺疾病同样对众多女性造成了生活、精神及经济等方面的影响。因此，解决上述问题成为临床医学的迫切任务，而放疗、化疗及靶向治疗等仍是治疗乳腺疾病的主要手段，但手术放疗、化疗等在杀死肿瘤细胞、治疗乳腺疾病的同时对人体正常机体细胞也产生了损害作用。针对上述问题，近年来，中长链脂肪酸由于具有能避免酮体中毒，提供功能性、健康性的油脂，同时能改善人体对其的吸收等多种优点逐渐进入人们的视野，目前为止，针对中长链脂肪酸的特性已有较多的综合报道，但其制备通常较为复杂、昂贵，同时有关其方向精准、能够补充营养并实现人体健康的研究也较少。
申请号为201410130465.9的中国专利公开了一种中长链油脂脂肪酸的生产方法，该方法包括将6-12碳的中链脂肪酸甘油三酯和16-24碳的长链脂肪酸甘油三酯在装设有脂肪酶的反应器中经过酯交换反应、饱和碱水中和、吸附剂去皂和真空闪蒸等步骤，得到产品中长链脂肪酸油脂，解决了现有技术中的中长链脂肪酸油脂生产工艺繁琐的难题，具有反应器反应时间短、能耗低的特点。但该发明在脱酸、脱臭等过程中需要消耗大量碱水及吸附剂，此类物质的消耗以及后续的处理为该工艺增加了负担，同时该发明也未说明该中长链油脂脂肪酸在营养治疗方面的作用。申请号为201710996359.2的中国专利公开了一种功能性中长链脂肪酸甘油酯微胶囊及其生产方法，该发明中的胶囊由植物调和油、壁材、乳化剂、油相抗氧化剂、水相抗氧化剂和金属螯合剂、热稳定剂和抗结剂组成，对降血脂、改善胰岛素抗性、保护心血管内皮细胞功能、预防冠心病、改善肠道免疫功能屏障、控制体重、预防乳腺癌、前列腺癌、直结肠癌有积极作用。但该发明中油相制备时需要消耗大量能量及时间，另外在初乳液制备的过程中，油相加入水相，通常有油包水型产生，导致结团现象，需要消耗大量能量及时间进行搅拌或剪切，进而增加了生产的成本、时间及能耗，此外，物理混合中/长链在体内的吸收仍保持原始吸收路径，中/长链各自特点仍未得到发挥。
针对中长链脂质制备过程复杂、耗时、昂贵以及营养治疗方面不明确的问题，应寻找一种集能量、营养治疗为一体的中长链结构脂质组合物制备方法，使得该方法简单、方便、价廉，同时上述制备方法制得的中长链结构脂质组合物可用于乳腺疾病的治疗。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，该方法简单、方便、价廉且耗时、耗能较少，同时上述制备方法制得的中长链结构脂质组合物可用于乳腺疾病的营养治疗。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将中链脂肪酸甘油三酯、长链脂肪酸甘油三酯、共轭亚油酸甘油酯和植物甾醇加入反应器中进行酯交换反应，再经预处理得到中长链甘油三酯；
(2)将步骤(1)中的中长链甘油三酯经进一步处理得到速溶粉，将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉；
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物。
进一步地，步骤(1)中所述中链脂肪酸甘油三酯、长链脂肪酸甘油三酯、共轭亚油酸甘油酯和植物甾醇的重量比为10-72:10-78:5-14:6-12；优选地，所述中链脂肪酸甘油三酯与所述长链脂肪酸甘油三酯的重量比为28:32:7:9。
进一步地，步骤(1)中所述中长链甘油三酯为6-24碳中长链甘油三酯，所述中链脂肪酸甘油三酯为8-10碳脂肪酸甘油三酯，所述长链脂肪酸甘油三酯为16-24碳脂肪酸甘油三酯，所述8-10碳脂肪酸甘油三酯的原料为棕榈仁油或椰子油，所述16-24碳脂肪酸甘油三酯的原料为葡萄籽油、鳄鱼油、娃娃鱼油、鱼油、藻油EPA、藻油DHA、长柄扁桃油和琉璃苣油中的一种或几种；优选地，所述16-24碳脂肪酸甘油三酯的原料由重量比为1:2:1的葡萄籽油、琉璃苣油和鳄鱼油混合而成；所述植物甾醇为β-谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇中的一种或多种。
进一步地，步骤(1)中所述酯交换反应，反应温度为40-60℃，反应时间为6-15h，所述反应器为带有脂肪酶收集装置的密闭反应器，该反应器装有固定化脂肪酶和游离脂肪酶，所述固定化脂肪酶为435脂肪酶，所述的游离脂肪酶为DF15脂肪酶；所述435脂肪酶的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的4.5-7％，所述DF15脂肪酶的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.6-2％。
进一步地，步骤(1)中所述预处理包括降温后脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯。所述脱色，指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为60-75℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；所述脱臭，指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为240-270℃，压力为0.27-0.40KPa，停留时间为30-60min；所述蒸馏，指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在220-260℃温度条件下蒸馏至无液体流出；所述精滤，指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为50-55℃，压力为1.5-2.5MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液。其中，所述维生素E的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，所述抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
进一步地，步骤(2)中所述进一步处理包括乳化、均质、包埋和喷雾干燥；所述乳化指将中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为38.8-50KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；所述均质，在10万级净化条件下进行；所述包埋指将乳化后的中长链甘油三酯与包埋材料混合、均质，包埋材料的加入量为中长链甘油三酯重量的1-5倍；所述包埋的材料包括葡萄糖浆、低聚异麦芽糖、低聚麦芽糖、麦芽糊精、抗性糊精、聚葡萄糖、异麦芽酮糖醇、L-阿拉伯糖和酶解奶油的一种或几种，含量为包埋材料总重量的40-60％；进一步地，所述包埋材料按重量百分比计，还包括：20-30％蒸馏水、10-15％乳化剂和10-15％稳定剂，所述稳定剂为磷酸氢二钾，所述乳化剂为酪蛋白酸钠或单、双硬脂酸甘油酯；所述喷雾干燥，使用低温辅助干燥塔，进风温度185-195℃，一段干燥85-95℃、二段干燥45-55℃，三段干燥25-45℃；所述二氧化硅与速溶粉的重量比为1-2:1000。
进一步地，步骤(3)中所述中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为15-32:0.6-0.9:1:1-5:0.1-0.6:0.05-0.1:1-6；优选地，所述中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为22:0.8:1:3:0.3:0.08:3；所述的中长链脂肪酸干粉拥有良好的流动性。
本发明所取得的技术效果是：
1.选用脂肪酶进行酯交换反应制备中长链甘油三酯，耗时、耗能较少，同时采用包埋法对中长链甘油三酯进行包埋，同样也减少了能量及时间的消耗，进而降低了成本，制备工艺简单、方便、价廉且耗时耗能较少。
2.当长链脂肪酸甘油三酯的原料由重量比为1:2:1的葡萄籽油、琉璃苣油和鳄鱼油混合而成时，得到的中长链结构脂质组合物拥有极佳的功效。
3.本发明提供的方法制备出的中长链结构脂质组合物能够预防、抑制乳腺疾病，为乳腺疾病提供必要的营养治疗。
具体实施方式
值得说明的是，本发明中的脂肪酶均购自诺维信公司；娃娃鱼油的提取方法参照刘静等人的论文：大鲵油和花生油流变性的研究[J].杨凌职业技术学院学报,2009,8(1):10-12.，油脂纯度提取至90％以上即可；鳄鱼油的提取方法参照林珈好等人的论文：超临界CO2流体萃取法与干法熬制提取暹罗鳄鱼油的比较[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(14):105-107.，油脂纯度提取至90％以上即可；其余材料均为普通的市售材料，因此本发明对其它材料的来源不做具体限定，其中，所购买的山竹提取物的含量≥90％，酵母β-葡聚糖的含量≥90％，魔芋葡甘露聚糖的含量≥99％，β-谷甾醇的含量≥30％，豆甾醇的含量≥15％和菜油甾醇的含量≥12％，共轭亚油酸甘油酯的含量≥80％；脂肪酶收集装置为1000L型脂肪酶收集装置，购自温州天龙机械科技有限公司，其余仪器均为普通的市售仪器，本发明对其它仪器的来源亦不做具体限定。
实施例1
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将10重量份从棕榈仁油中提取的中链脂肪酸甘油三酯、10重量份从葡萄籽油中提取的长链脂肪酸甘油三酯、5重量份共轭亚油酸甘油酯和6重量份β-谷甾醇加入装有435脂肪酶和DF15脂肪酶的带有脂肪酶收集装置的密闭反应器中进行酯交换反应，反应温度为40℃，反应时间为15h。其中，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的4.5％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.6％。降温后再经脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，得到6-24碳中长链甘油三酯，其中，脱色指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为60℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；脱臭指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为240℃，压力为0.27KPa，停留时间为30min；蒸馏指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在220℃温度条件下蒸馏至无液体流出；精滤指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为50℃，压力为1.5MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液；维生素E的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
(2)将步骤(1)中的6-24碳中长链甘油三酯经乳化、均质、包埋和喷雾干燥后，得到速溶粉。其中，乳化指将6-24碳中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为38.8KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；均质在10万级净化条件下进行；喷雾干燥使用低温辅助干燥塔，进风温度185℃，一段干燥85℃、二段干燥45℃，三段干燥25℃；将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉，二氧化硅与速溶粉的重量比为1:1000；包埋指将中长链甘油三酯与葡萄糖浆、蒸馏水、酪蛋白酸钠和磷酸氢二钾混合，包埋材料加入量为6-24碳中长链甘油三酯重量的1倍，四种材料分别占包埋材料总重量的40％，30％，15％和15％。
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物，其中，中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为15:0.6:1:1:0.1:0.05:1。
实施例2
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将72重量份从棕榈仁油中提取的中链脂肪酸甘油三酯、78重量份从葡萄籽油中提取的长链脂肪酸甘油三酯、14重量份共轭亚油酸甘油酯和12重量份豆甾醇加入装有435脂肪酶和DF15脂肪酶的带有脂肪酶收集装置的密闭反应器中进行酯交换反应，反应温度为60℃，反应时间为6h。其中，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的7％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的2％。降温后再经脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，得到6-24碳中长链甘油三酯，其中，脱色指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为75℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；脱臭指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为270℃，压力为0.40KPa，停留时间为60min；蒸馏指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在260℃温度条件下蒸馏至无液体流出；精滤指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为55℃，压力为2.5MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液；维生素E的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
(2)将步骤(1)中的6-24碳中长链甘油三酯经乳化、均质、包埋和喷雾干燥后，得到速溶粉。其中，乳化指将6-24碳中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为50KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；均质在10万级净化条件下进行；喷雾干燥使用低温辅助干燥塔，进风温度195℃，一段干燥95℃、二段干燥55℃，三段干燥45℃；将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉，二氧化硅与速溶粉的重量比为2:1000；包埋指将中长链甘油三酯与低聚异麦芽糖，蒸馏水，单、双硬脂酸甘油酯和磷酸氢二钾混合，包埋材料加入量为6-24碳中长链甘油三酯重量的5倍，四种材料分别占包埋材料总重量的60％，20％，10％和10％。
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物，其中，中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为32:0.9:1:5:0.6:0.1:6。
实施例3
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将28重量份从棕榈仁油中提取的中链脂肪酸甘油三酯、32重量份从葡萄籽油中提取的长链脂肪酸甘油三酯、7重量份共轭亚油酸甘油酯和9重量份菜油甾醇加入装有435脂肪酶和DF15脂肪酶的带有脂肪酶收集装置的密闭反应器中进行酯交换反应，反应温度为50℃，反应时间为10h。其中，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的6％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的1.5％。降温后再经脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，得到6-24碳中长链甘油三酯，其中，脱色指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为70℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；脱臭指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为255℃，压力为0.32KPa，停留时间为45min；蒸馏指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在240℃温度条件下蒸馏至无液体流出；精滤指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为53℃，压力为2MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液；维生素E的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
(2)将步骤(1)中的6-24碳中长链甘油三酯经乳化、均质、包埋和喷雾干燥后，得到速溶粉。其中，乳化指将6-24碳中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为45KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；均质在10万级净化条件下进行；喷雾干燥使用低温辅助干燥塔，进风温度190℃，一段干燥90℃、二段干燥50℃，三段干燥35℃；将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉，二氧化硅与速溶粉的重量比为1:1000；包埋指将中长链甘油三酯与葡萄糖浆、蒸馏水、酪蛋白酸钠和磷酸氢二钾混合，包埋材料加入量为6-24碳中长链甘油三酯重量的3倍，四种材料分别占包埋材料总重量的50％，25％，12％和13％。
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物，其中，中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为22:0.8:1:3:0.3:0.08:3。
实施例4
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将15重量份从棕榈仁油中提取的中链脂肪酸甘油三酯、20重量份从葡萄籽油中提取的长链脂肪酸甘油三酯、6重量份共轭亚油酸甘油酯和8重量份β-谷甾醇加入装有435脂肪酶和DF15脂肪酶的带有脂肪酶收集装置的密闭反应器中进行酯交换反应，反应温度为45℃，反应时间为12h，其中，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的5％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的1％。降温后再经脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，得到6-24碳中长链甘油三酯。其中，脱色指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为65℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；脱臭指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为250℃，压力为0.3KPa，停留时间为40min；蒸馏指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在230℃温度条件下蒸馏至无液体流出；精滤指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为52℃，压力为1.8MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液；维生素E的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
(2)将步骤(1)中的6-24碳中长链甘油三酯经乳化、均质、包埋和喷雾干燥后，得到速溶粉。其中，乳化指将6-24碳中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为40KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；均质在10万级净化条件下进行；喷雾干燥使用低温辅助干燥塔，进风温度188℃，一段干燥88℃、二段干燥48℃，三段干燥30℃；将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉，二氧化硅与速溶粉的重量比为1:1000；包埋指将中长链甘油三酯与L-阿拉伯糖，蒸馏水，单、双硬脂酸甘油酯和磷酸氢二钾混合，包埋材料加入量为6-24碳中长链甘油三酯重量的2倍，四种材料分别占包埋材料总重量的45％，28％，13％和14％。
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物，其中，中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为18:0.7:1:2:0.2:0.06:2。
实施例5
一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，包括以下步骤：
(1)将60重量份从棕榈仁油中提取的中链脂肪酸甘油三酯、62重量份从葡萄籽油中提取的长链脂肪酸甘油三酯、10重量份共轭亚油酸甘油酯和11重量份豆甾醇加入装有435脂肪酶和DF15脂肪酶的带有脂肪酶收集装置的密闭反应器中进行酯交换反应，反应温度为55℃，反应时间为8h。其中，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的6.5％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的1.8％。降温后再经脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，得到6-24碳中长链甘油三酯，其中，脱色指将酯交换反应得到的中长链甘油三酯加热至反应温度为72℃，通过蠕动泵抽入脱色柱中，收集并得到脱色后的中长链甘油三酯；脱臭指将已脱色的中长链甘油三酯置于脱臭塔中进行脱臭，脱臭温度为260℃，压力为0.35KPa，停留时间为50min；蒸馏指将已脱色、脱臭后的中长链甘油三酯在250℃温度条件下蒸馏至无液体流出；精滤指将已脱色、脱臭并蒸馏后的中长链甘油三酯在反应温度为54℃，压力为2.2MPa下使用超滤膜装置过滤，并收集滤出的油液；维生素E的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.001％，抗坏血酸棕榈酸酯的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.02％。
(2)将步骤(1)中的6-24碳中长链甘油三酯经乳化、均质、包埋和喷雾干燥后，得到速溶粉。其中，乳化指将6-24碳中长链甘油三酯与蒸馏水混合，二者重量比为1:2，同时使用超声波反应器超声，超声波频率为48KHz，同时进行搅拌，搅拌速度为120r/min，搅拌时间及超声时间为40min，再经高速乳化泵乳化，高速乳化泵转速为2900r/min；均质在10万级净化条件下进行；喷雾干燥使用低温辅助干燥塔，进风温度192℃，一段干燥92℃、二段干燥52℃，三段干燥40℃；将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉，二氧化硅与速溶粉的重量比为2:1000；包埋指将中长链甘油三酯与葡萄糖浆、蒸馏水、酪蛋白酸钠和磷酸氢二钾混合，包埋材料加入量为6-24碳中长链甘油三酯重量的4倍，四种材料分别占包埋材料总重量的55％，22％，11％和12％。
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物，其中，中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为28:0.85:1:4:0.5:0.09:5。
对比例1
与实施例1的区别在于，中链碳脂肪酸甘油三酯为8重量份，长链脂肪酸甘油三酯为8重量份，共轭亚油酸甘油酯为15重量份，菜油甾醇为13重量份。
对比例2
与实施例1的区别在于，中链脂肪酸甘油三酯为80重量份，长链脂肪酸甘油三酯为82重量份，共轭亚油酸甘油酯为3重量份，β-谷甾醇为5重量份。
对比例3
与实施例1的区别在于，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的4％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.4％。
对比例4
与实施例1的区别在于，435脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的8％，DF15脂肪酶的加入量为中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的2.5％。
对比例5
市售乳康片。
中长链结构脂质组合物对小鼠乳腺癌肿瘤转移的影响
小鼠乳腺癌模型建立：选取120只雌性6-8周龄BALB/c小鼠，随机选取10只设为空白对照组，取生长良好的4T1乳腺细胞在剩余11组小鼠左下腿处乳腺组织注射1×10^5个，一周后当小鼠腿部局部肿瘤生长到直径为5mm时，将剩余小鼠随机分为11组，每组10只。
将其中1组小鼠设置为模型对照组，将实施例1-5及对比例1-5的药物分别与0.5％的cmc-Na溶液混悬后给药，给药量为5g/kg(药重/体重)，分别给另外10组小鼠灌胃，连续21日后，停止喂食中长链结构脂质组合物，次日处死小鼠，并取出转移的肺结节计数，得到表1。
表1中长链结构脂质组合物对小鼠乳腺癌肿瘤转移的影响
| 实例 | 转移数(只) | 转移率(％) | 转移抑制率(％) |
| 正常对照组 | 0 | 0 | - |
| 模型对照组 | 10 | 100 | - |
| 实施例1 | 5 | 50 | 50 |
| 实施例2 | 5 | 50 | 50 |
| 实施例3 | 1 | 10 | 90 |
| 实施例4 | 2 | 20 | 80 |
| 实施例5 | 3 | 30 | 70 |
| 对比例1 | 8 | 80 | 20 |
| 对比例2 | 9 | 90 | 10 |
| 对比例3 | 8 | 80 | 20 |
| 对比例4 | 7 | 70 | 30 |
| 对比例5 | 4 | 40 | 60 |
由表1可知，实施例1-5中小鼠乳腺肿瘤转移抑制率均大于等于50％，其中，实施例3中的转移抑制率最高，达到了90％，对比例1-4中小鼠乳腺肿瘤转移抑制率均在50％以下，对比例5中小鼠乳腺肿瘤转移抑制率与实施例1-5接近，同时转移抑制率小于实施例3-5。由上述结果可知，本发明中的中长链结构脂质组合物能够抑制小鼠乳腺癌肿瘤的转移，对乳腺疾病有着良好的营养治疗效果，其效果近似甚至优于市售乳康片。
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种乳腺疾病营养治疗的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将中链脂肪酸甘油三酯、长链脂肪酸甘油三酯、共轭亚油酸甘油酯和植物甾醇加入反应器中进行酯交换反应，再经预处理得到中长链甘油三酯；
(2)将步骤(1)中的中长链甘油三酯经进一步处理得到速溶粉，将速溶粉与二氧化硅混合后，得到中长链脂肪酸干粉；
(3)将步骤(2)中的中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖混合后得到中长链结构脂质组合物。
2.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述中链脂肪酸甘油三酯、长链脂肪酸甘油三酯、共轭亚油酸甘油酯和植物甾醇的重量比为10-72:10-78:5-14:6-12。
3.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述中链脂肪酸甘油三酯为8-10碳脂肪酸甘油三酯，所述长链脂肪酸甘油三酯为16-24碳脂肪酸甘油三酯，所述中长链甘油三酯为6-24碳中长链甘油三酯。
4.根据权利要求3所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：所述8-10碳脂肪酸甘油三酯的原料为棕榈仁油或椰子油；所述16-24碳脂肪酸甘油三酯的原料为葡萄籽油、鳄鱼油、娃娃鱼油、鱼油EPA、鱼油DHA、藻油EPA、藻油DHA、长柄扁桃油和琉璃苣油中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述预处理包括降温后脱色、脱臭、蒸馏和精滤，而后再添加维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯。
6.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述反应器中装有固定化脂肪酶和游离脂肪酶，所述固定化脂肪酶为435脂肪酶，所述游离脂肪酶为DF15脂肪酶。
7.根据权利要求6所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：所述435脂肪酶的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的4.5-7％，所述DF15脂肪酶的加入量为所述中链脂肪酸甘油三酯和长链脂肪酸甘油三酯总重量的0.6-2％。
8.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述进一步处理包括乳化、均质、包埋和喷雾干燥。
9.根据权利要求8所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：所述包埋的材料加入量为中长链甘油三酯重量的1-5倍。
10.根据权利要求1所述的中长链结构脂质组合物制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述中长链脂肪酸干粉、N-乙酰神经氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸钙、魔芋葡甘露聚糖、山竹提取物、接骨木莓与酵母β-葡聚糖的重量比为15-32:0.6-0.9:1:1-5:0.1-0.6:0.05-0.1:1-6。
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