CN109923122A - 新型肽以及包含其的用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物 - Google Patents
新型肽以及包含其的用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种新型肽以及包含其的用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物。所述肽具有促进表皮细胞之间的结合以及显著增加连接蛋白的表达的活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型肽以及包含其的用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物。所述肽具有促进表皮细胞之间的结合以及增加连接蛋白(junction proteins)的表达的活性。
背景技术
人的皮肤除了皮肤最外层(角质)外,由表皮层(epidermis)和真皮层(dermis)组成,并且其下由含有脂肪组织(adipose tissue)的皮下组织(hypodermis)组成。表皮层主要由表皮细胞(keratinocytes)组成,并且真皮层主要由真皮成纤维细胞(dermalfibroblasts)组成。
以改善皱纹及防止皮肤老化为目标的功能性化妆品材料主要是促进皮肤真皮层(dermis)的主要细胞真皮成纤维细胞中的胶原蛋白的表达或者抑制分解胶原蛋白的蛋白酶的天然物、化合物、肽材料,以及促进真皮细胞的生长的生长因子(growth factors)、细胞因子(cytokines)等蛋白质。然而,已知具有这种效果的大多数活性材料实际上很难穿过皮肤的表皮层(epidermis)并到达真皮层。
表皮层起到抑制外部有害物质、紫外线、化学物质等的渗透以及维持保湿的屏障作用。起这种作用的主要细胞是表皮细胞,已知表皮细胞在维持皮肤屏障(skin barrier)的同时,分泌炎症调节因子(细胞因子、趋化因子等),因此调节真皮层下面组织中的免疫应答。已知表皮层的这种皮肤屏障功能源自表皮细胞之间的结合,即细胞与细胞之间的连接蛋白(junction protein)的表达和激活。这种连接蛋白不仅针对细胞外部的感染起到主要物理防御的作用,而且针对细胞内外部的化学刺激起到保护真皮细胞以及抑制免疫作用失衡的重要的防御屏障作用。连接蛋白通常分为四组:紧密连接(tight junction)蛋白、粘附连接(adherens junction)蛋白、间隙连接(gap junction)蛋白和细胞桥粒(desmosomes),其中,已知紧密连接蛋白(例如密封蛋白(claudins)、闭锁蛋白(occludins)、ZO-1、ZO-2等)为起到阻止分子特别是水溶性物质迁移通过细胞之间的空间并抑制细胞渗透性(cellpermeability)的功能而有助于保护细胞屏障的主要因子。因此,期望一种促进表皮细胞之间的结合及/或增加连接蛋白表达的材料可以通过保护和激活皮肤屏障,有效用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成。
发明内容
技术问题
本发明人合成了各种肽片段,并对这些合成肽的活性进行了评价。其结果,发现具有特定序列的肽片段不仅具有优异的促进表皮细胞之间的结合的活性,而且还显著增加连接蛋白的表达。
因此,本发明的目的在于提供所述肽片段。
此外,本发明的另一个目的在于提供一种用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物,其包含所述肽片段。
技术方案
根据本发明的一个方面,提供一种肽,其由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成。
根据本发明的另一个方面,提供一种用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物,其包含由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成的肽。
有益效果
本发明发现特定的肽片段,即如SEQ ID NO:1~7所示的肽不仅具有优异的促进表皮细胞之间的结合的活性,而且还显著增加连接蛋白的表达。因此,所述肽能够有效地应用于用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物。
附图说明
图1示出通过使用人表皮细胞(Human epidermal keratinocytes)的细胞-细胞相互作用分析(cell-cell interaction assay)对表皮细胞之间的结合功效进行评价而获得的结果。泳道(Lane)1为培养细胞未经结合细胞(即染色的细胞)处理的组(对照组1),泳道2为培养细胞经结合细胞(即染色的细胞)处理的组(对照组2),泳道3至泳道9为用结合细胞(即染色的细胞)处理分别经SEQ ID NO:1~7的肽处理的培养细胞的组。
具体实施方式
本说明书中,“皮肤老化(skin aging)”是指由内在和外在因素引起的皮肤老化,例如包括伴随有皮肤皱纹形成的皮肤光老化(photoaging),优选包括伴随有皮肤皱纹形成的由紫外线刺激引起的皮肤光老化。
此外,“皮肤皱纹(skin wrinkle)”是指在皮肤上形成的皱纹(wrinkle formationon skin)。
本发明提供一种肽,其由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成。
并且,本发明提供一种用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物,其包含由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成的肽。
本发明人合成了各种肽片段,并对这些合成肽的活性进行了评价。令人惊讶的是,发现具有特定序列的肽片段,即如SEQ ID NO:1~7所示的肽不仅促进有助于保护和激活皮肤屏障的表皮细胞(组成皮肤表皮层的主要细胞)之间的物理结合,而且还显著增加连接蛋白(junction proteins)的表达。因此,根据本发明的肽能够有效地应用于用于改善皮肤老化及/或抑制皮肤皱纹形成的化妆料组合物。所述如SEQ ID NO:1~7所示的肽可以根据常规的合成肽的方法来进行合成。
本发明的化妆料组合物可以为包含所述肽作为有效成分的功能性化妆料组合物的形式。所述化妆料组合物可以根据常规的制备化妆料的方法制备为各种形式。例如,所述化妆料组合物可以制备为包含所述肽的化妆品、化妆水、霜、乳液等的形式,这可以用常规的清洁水、收敛液及保湿液进行稀释来使用。此外,所述化妆料组合物可以包含化妆料组合物领域中通常使用的诸如稳定剂、增溶剂、维生素、颜料及香料的常规助剂。在所述化妆料组合物中,所述肽的含量可以为改善皮肤老化及/或抑制皮肤皱纹形成的有效的量,例如,相对于组合物的总重量,可以含有0.001~2重量%的含量,优选可以含有约0.1~2重量%的含量。
以下,通过实施例对本发明进行更加详细的说明。但是,这些实施例仅用于例示本发明,本发明并不限定于此。
实施例1:肽的合成
使用FMOC固相方法(FMOC solid-phase method),用自动化合成仪(PeptrEx-R48,Peptron公司,大田市,韩国)合成下述表1中的SEQ ID NO:1~7的肽。通过使用C18分析用RP柱(Shiseido capcell pak)的反相高效液相色谱(reverse-phase HPLC)(Prominence LC-20AB,岛津公司(Shimadzu),日本)对所合成的肽进行精制及分析,并使用质谱仪(HP 1100系列LC/MSD,惠普公司(Hewlett-Packard),罗斯维尔,美国)进行鉴定。
表1
肽名称* | SEQ ID NO | 氨基酸序列(序列长度) |
AdhPep-5-1 | SEQ ID NO:1 | GRALARG(7聚体) |
AdhPep-5-2 | SEQ ID NO:2 | GRALARGGRALARG(14聚体) |
AdhPep-5-3 | SEQ ID NO:3 | GRGDSPGRALARGGRALARG(20聚体) |
AdhPep-10 | SEQ ID NO:4 | AKPTYK(6聚体) |
AdhPep-10-1 | SEQ ID NO:5 | AKPTYKAKPTYK(12聚体) |
AdhPep-11 | SEQ ID NO:6 | AYDPGYK(7聚体) |
AdhPep-11-2 | SEQ ID NO:7 | AYDPGYKAYDPGYKAYDPGYK(21聚体) |
*肽名称:为了便于实验给予的任意名称
实施例2:表皮细胞之间的结合功效的评价
为了评价表皮细胞之间的结合功效,进行如下细胞-细胞相互作用分析(cell-cell interaction assay)。在24孔板的每个孔中以5×104细胞的浓度接种人表皮细胞(Human epidermal keratinocytes)(赛默飞世尔科技公司(Thermo FisherScientific)),并在CO2培养箱中,在添加有人表皮细胞生长添加剂(Human KeratinocyteGrowth Supplement)(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific))的EpiLife培养基(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific))中培养24小时。对其用浓度为100nM的各个SEQ ID NO:1~7的肽进行处理,反应40分钟后,更换培养基。用Vybrant DiO细胞标记染料(Cell-labeling dye)(美国生命技术公司(Life Technologies))对人表皮细胞进行染色,然后将染色的细胞(1.5×105个细胞)用经所述肽处理的细胞进行处理,并反应10分钟。为了比较,将培养细胞未经结合细胞(即染色的细胞)处理的组作为对照组1,将培养细胞仅经结合细胞处理的组(未经肽处理的组)作为对照组2。用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤各组的细胞三次,然后用细胞解离溶液(cell stripper solution)解离细胞并转移至黑色孔板(black well plate),在480/501nm的波长下测量荧光强度,其结果如图1所示。从图1的结果可以知道,与未经肽处理的组(对照组2)相比,分别用SEQ ID NO:1~7的肽处理的试验组中的表皮细胞之间的结合显著增加。
<110> 车医科学大学校产学协力团
<120> 新型肽以及包含其的用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 1
Gly Arg Ala Leu Ala Arg Gly
1 5
<210> 2
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 2
Gly Arg Ala Leu Ala Arg Gly Gly Arg Ala Leu Ala Arg Gly
1 5 10
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 3
Gly Arg Gly Asp Ser Pro Gly Arg Ala Leu Ala Arg Gly Gly Arg Ala
1 5 10 15
Leu Ala Arg Gly
20
<210> 4
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 4
Ala Lys Pro Thr Tyr Lys
1 5
<210> 5
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 5
Ala Lys Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Thr Tyr Lys
1 5 10
<210> 6
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 6
Ala Tyr Asp Pro Gly Tyr Lys
1 5
<210> 7
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成肽
<400> 7
Ala Tyr Asp Pro Gly Tyr Lys Ala Tyr Asp Pro Gly Tyr Lys Ala Tyr
1 5 10 15
Asp Pro Gly Tyr Lys
20
Claims (2)
1.一种肽,其由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成。
2.一种用于抑制皮肤老化或皮肤皱纹形成的化妆料组合物,其包含由SEQ ID NO:1~7中的任一种氨基酸序列组成的肽。
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GR01 | Patent grant | ||
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