CN109922671A - 包含铁和益生菌的呈粉末形式的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及呈粉末形式的组合物，其包含益生菌和至少一种铁源，所述至少一种铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物有利地不会引起细菌活力的显著抑制或减少，并且因此这些铁源有利地用于强化包含益生菌的呈粉末形式的组合物。
Description
技术领域
本发明涉及呈粉末形式的组合物，其包含益生菌和至少一种铁源，该至少一种铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物有利地不会引起细菌活力的显著减少，并且因此这些铁源有利地用于强化包含益生菌的呈粉末形式的组合物。
背景技术
有益细菌并且特别是益生菌被添加到范围广泛的产品中且即添加到呈粉末形式的产品中以用液体重构，诸如用于婴儿、幼儿、怀孕或哺乳期的妇女、老年人或由于不利医学病症而需要特定营养的人的营养组合物。此类产品通常包含多种大量营养物质和微量营养物质，以便满足消费者的营养需求。出于营养目的，消费者获得适当量的益生菌和其他营养物质是至关重要的。
特别重要的微量营养物质是铁。在世界范围内，铁缺乏是最普遍的营养物质缺乏中的一种。在人类中，铁对于大量生物过程的作用是必不可少的，诸如氧结合和运输、基因调节、神经功能、免疫功能以及细胞生长和分化的调节。铁缺乏可能导致贫血，以及各种健康问题，诸如甲状腺、免疫和心理功能、体能、认知发育受损，对胰岛素和疲劳的敏感性增加。铁缺乏在怀孕和哺乳期的妇女以及儿童中尤为普遍。
用铁强化食物是对抗铁缺乏的一种方法。因此，非常需要在膳食组合物或补充剂中包含添加的铁源，特别是用于婴儿，小孩，在怀孕前、在怀孕期间和/或在哺乳期间的妇女的膳食组合物或补充剂。多种铁化合物已被用作食物产品和营养补充剂中的铁强化剂。例如，硫酸亚铁因其相对低的价格和高生物利用度而被广泛使用。
然而，本发明人已发现，当用于强化含有益生菌的组合物时，许多铁化合物对益生菌的活力具有有害效应(另外参见共同未决申请PCT/EP2016/063170)。
在大多数情况下，只有当细菌在食用时有活性的情况下才能获得益生菌的益处。因此，为了补偿活的益生菌的损失并确保将适当量的此类细菌递送给消费者，益生菌通常在产品中过量。然而，该解决方案并不完全令人满意，因为过量非常昂贵并且产生浪费。
因此，本发明的目的是提供包含益生菌和添加的铁源的组合物，其中益生菌的活力不会因添加的铁源的存在而受到损害。
发明内容
本发明人意外地发现，当柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物用作含有益生菌的组合物中的铁源时，不会引起细菌活力的减少。
在第一方面，本发明提供呈粉末形式的组合物，其包含至少一种益生菌和铁源，其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
在第二方面，本发明涉及选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物的铁源用于强化呈粉末形式的组合物的用途，所述组合物包含至少一种益生菌。
在第三方面，本发明提供用于制备呈粉末形式的组合物的方法，其包括
a)提供呈粉末形式的第一组合物；
b)将铁源与呈粉末形式的第一组合物混合以形成呈粉末形式的第二组合物；以及
c)在铁源之前或与铁源同时将至少一种益生菌与呈粉末形式的第一组合物混合，或者在添加铁源之后将至少一种益生菌与呈粉末形式的第二组合物混合，
其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
在第四方面，本发明提供用于制备产品的方法，其包括在液体中重构呈粉末形式的组合物，该呈粉末形式的组合物包含至少一种益生菌和铁源，其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
在第五方面，本发明提供能够通过本发明的方法获得或通过本发明的方法获得的产品。
在第六方面，本发明提供用于在向个体提供营养的方法中的本发明的组合物。
在第七方面，本发明提供呈粉末形式的可食用组合物，其包含至少一种益生菌和铁源，用于预防、减少和/或治疗个体的铁缺乏，其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
在第八方面，本发明提供用于在包含至少一种益生菌和添加的铁源的呈粉末形式的组合物的重构期间减少和/或预防益生菌的损失的方法，其特征在于柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物用作添加的铁源。
附图说明
图1：在分别具有每100g的基于麦芽糖糊精的模型组合物10mg和30mg的Fe2+的组合物中鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)(保藏为CGMCC 1.3724)的活力的损失的图形表示。比较两种不同的铁源：呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁以及一水硫酸亚铁。在两种铁浓度下，用一水硫酸亚铁显著降低活的鼠李糖乳杆菌的损失。
图2：在分别具有每100g的基于麦芽糖糊精的模型组合物5mg、25mg和50mg的Fe2+的组合物中长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)(保藏为ATCC BAA-999)的活力的损失的图形表示。比较两种不同的铁源：呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁以及一水硫酸亚铁。在所有铁浓度下，用一水硫酸亚铁显著降低活的长双歧杆菌的损失。
图3：在分别具有每100g的基于麦芽糖糊精的模型组合物5mg、25mg和50mg的Fe2+的组合物中副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)(保藏为CNCM I-2116)的活力的损失的图形表示。比较两种不同的铁源：呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁以及一水硫酸亚铁。在所有铁浓度下，用一水硫酸亚铁显著降低活的副干酪乳杆菌的损失。
图4：在分别具有每100g的婴儿配方食品组合物10mg和30mg的Fe2+的组合物中鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)的活力的损失的图形表示。比较两种不同的铁源：呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁以及一水硫酸亚铁。在两种铁浓度下，用一水硫酸亚铁显著降低活的鼠李糖乳杆菌的损失。
图5：在分别具有每100g的婴儿配方食品组合物25mg和50mg的Fe2+的组合物中长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)的活力的损失的图形表示。比较两种不同的铁源：呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁以及一水硫酸亚铁。在所有铁浓度下，用一水硫酸亚铁显著降低活的长双歧杆菌的损失。
具体实施方式
定义
如本文所用，术语“益生菌”是指活的细菌细胞制剂，其对宿主的健康或康乐具有有益效应[Salminen S，et al.，“Probiotics：how they should be defined”，TrendsFood Sci.Technol，(1999)，10，107-10(Salminen S等人，“益生菌：应如何定义益生菌”，《食品科学与技术趋势》，1999年，第10卷，第107-110页)]。
当细菌能够在受控培养条件下繁殖并形成菌落或悬浮液时，或者当微生物代谢活性和/或膜完整性可使用本领域技术人员已知的方法(诸如例如流式细胞术)建立时，这些细菌被认为是“活的”。如上所述，在用液体(诸如水性液体，优选水)重构细菌之后，干燥的益生菌在它们能够繁殖时以及/或者在可建立膜完整性时被认为是活的。
为了本发明的目的，“重构”是指粉末在液体(诸如水性液体，优选水、如分析微生物学中使用的特定重构培养基、或饮料比如乳或果汁)中的溶解或悬浮。用于重构的液体可以是冷的或温的。优选它是指用水性液体，优选用水重构。
“水性液体”旨在作为包含至少一种水相的液体用于本发明的目的。它可以是例如乳剂、水溶液或分散液或水。优选它是水包油乳剂、水溶液或悬浮液或水。更优选，它是水溶液或悬浮液或水。最优选它是水。
术语“铁”在本文中旨在指定Fe2+或Fe3+，这取决于所使用的铁源。
“添加的铁源”旨在作为仅用于铁补充的益处而添加到组合物中的亚铁或铁化合物用于本发明的目的。根据其性质，组合物可包含来自其他成分的铁，例如来自乳、水果、蔬菜、谷物或纤维组分。存在于此类成分中的铁在此并不旨在作为“添加的铁源”，因为它固有地存在于成分中，该成分主要不是因其铁含量而是因其总营养价值而添加的。
铁源旨在作为组合物中的“基本上唯一的添加的铁源”用于本发明的目的，前提条件是其他添加的铁源以足够少的量使用，不会引起活的益生菌的统计学显著损失。技术人员可通过以下方式来评估是否引起活的细菌的统计学显著损失：应用本申请的示例中描述的方法，并且应用通常已知的统计技术来分析结果。
术语“营养组合物”指定旨在为个体提供完整营养或补充营养(即，满足此类个体的基本营养需求)，并且其中突出的目的是提供营养的产品。营养组合物旨在向具有特殊营养需求的个体提供特定营养物质，诸如婴儿、幼儿、怀孕或哺乳期的妇女、老年人或需要特殊食物(例如，管饲组合物或用于儿科受治疗者的组合物)的患有不利医学病症的人。从“营养产品”中排除了享乐方面突出且营养品质不是头等重要的产品。营养组合物优选包含蛋白质、脂肪、碳水化合物和多种微量营养物质。
在本发明中，术语“婴儿”意指在出生和12月龄之间的儿童。术语“幼儿”是指在12月龄和5步之间，优选在12月龄和3岁之间的儿童。
如本文所用，表述“婴儿配方食品”是指旨在供婴儿用于特定营养用途的并且本身满足这类人的营养需求的食料(符合欧盟委员会2006年12月22日颁发的针对婴儿配方食品和较大婴儿配方食品的第91/321/EEC 2006/141/EC号指令中第2(c)条的规定)。也涉及旨在用于婴儿的营养组合物，并且如在食品法典委员会(法典STAN 72-1981)和婴儿特殊品(包括针对特殊医学目的的食物)中所定义。婴儿配方食品可涵盖一段婴儿配方食品和二段或较大婴儿配方食品。一般来讲，一段婴儿配方食品作为出生婴儿的母乳替代品。二段或较大婴儿配方食品从第6个月开始提供。婴儿配方食品构成了这类人逐渐多样化饮食中的主要液体元素。应当了解，可只用婴儿配方食品喂养婴儿，或者可将婴儿配方食品用作人乳的补充剂或补足物。
“成长乳”(或GUM)从一岁开始提供。其通常为适合幼儿的特定营养需求的含乳饮料。
表述“婴孩食物”意指旨在供婴儿或儿童(诸如幼儿)在出生后的头几年期间用于特定营养用途的食料。
表述“婴儿谷物组合物”意指旨在用于供婴儿或儿童(诸如幼儿)在出生后的头几年期间用于特定营养用途的基于谷物的食料。
术语“强化剂”是指适于与母乳或婴儿配方食品混合的营养组合物。“母乳”应理解为母亲的乳汁或母亲的初乳，或者供乳者的乳汁或供乳者的初乳。
术语“补充剂”是指可用于补充或补足个体营养的组合物。
术语“益生元”意指通过选择地刺激人类结肠中的健康细菌的生长和/或活性，而对宿主具有有益影响的非消化性碳水化合物(Gibson GR，Roberfroid MB.Dietarymodulation of the human colonic microbiota：introducing the concept ofprebiotics.J Nutr.1995；125：1401-12(Gibson GR、Roberfroid MB.，“膳食调节人类结肠微生物群：介绍益生元的概念”，《营养学杂志》，1995年，第125卷，第1401-1412页))。
组合物
本发明的组合物是呈粉末形式的组合物，其包含至少一种益生菌和铁源，所述铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
本发明人意外地发现，在完整营养组合物(诸如婴儿配方食品)的许多成分内，添加的铁导致重构组合物中益生菌的显著损失。另外，本发明人已经确定，三种特定铁盐可有利地与益生菌组合用作铁的营养源，而不会引起此类益生菌的活力的显著损失。这些铁源是柠檬酸亚铁、柠檬酸铁和一水硫酸亚铁。
在优选的实施方案中，铁源选自一水硫酸亚铁、柠檬酸亚铁及其混合物。这些铁源由于它们良好的生物利用度而特别有利。最优选铁源是一水硫酸亚铁，其具有最佳生物利用度。
硫酸亚铁以各种形式的水合存在(一水合物、四水合物、五水合物、六水合物和七水合物)。四水合物、五水合物和六水合物形式不稳定，它们很少在商业上使用。一水硫酸亚铁(有时也指定为“干燥的”)和七水硫酸亚铁均为商业上通常使用的稳定和结晶形式的硫酸亚铁。
硫酸亚铁也通常用于呈喷雾干燥的粉末的形式的粉末状产品中，其通过将溶解的硫酸亚铁在载体中喷雾干燥而形成，诸如麦芽糖糊精(下文称为“呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁”)。在该情况下，硫酸亚铁通常在与载体混合并干燥之前，在酸性pH(诸如pH2)下溶解。在呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁中，铁和硫酸根离子保持彼此解离并且分散在无定形载体中。
现在，本发明人已发现，七水硫酸亚铁和呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁均会引起益生菌活力的显著损失，而用一水合物形式的硫酸亚铁没有观察到益生菌活力的显著损失。不希望受理论束缚，本发明人认为其结晶状态及其低水合水平均显著延迟了一水硫酸亚铁在水性介质中的溶解。另外，本发明人已经确定，在用液体重构粉末状组合物时，益生菌对铁特别敏感。在用液体重构粉末状组合物时，认为一水硫酸亚铁的长溶解时间使益生菌在面对游离铁之前有足够的时间进行再水合，从而减少益生菌的活力损失。
当这样使用一水硫酸亚铁时以及当一水硫酸亚铁分散在无定形基质中时，观察到这种积极效应，前提条件是保留了一水硫酸亚铁的结晶结构和水合水平。具有分散在基质中的一水硫酸亚铁的此类成分可通过将结晶铁盐在载体溶液中混合并喷雾干燥载体来获得。该方法应在不溶解结晶铁盐的情况下通过保持足够高的pH，优选通过保持非酸性pH来进行。本领域技术人员可以常规地评估产品或成分是否包含具有其结晶结构及其水合水平的一水硫酸亚铁。实际上，可采用几种分析技术来识别一水硫酸亚铁，包括偏振显微镜和NIR光谱。
使用一水硫酸亚铁是特别有利的，因为其特征在于同时具有良好的生物利用度和对益生菌活力的低有害影响。一水硫酸亚铁可从例如Dr.Paul Lohmann GmbH KG，Emmerthal，Germany或DSM Nutritional Products，Heerlen，the Netherlands商购获得。
另外，由于在重构时释放的游离铁水平低，柠檬酸亚铁和柠檬酸铁不会显著损害益生菌的活力。因此，这两种铁盐可有利地用作包含益生菌的呈粉末形式的组合物中的铁源。柠檬酸亚铁和柠檬酸铁均可从例如Dr.Paul Lohmann GmbH KG，Emmerthal，Germany或DSM Nutritional Products，Heerlen，the Netherlands商购获得。
在优选的实施方案中，至少50重量％，更优选至少60重量％，更优选至少70重量％，更优选至少80重量％，甚至更优选至少90重量％的添加的铁呈如上所定义的铁源的形式。甚至更优选，如上所定义的铁源基本上是组合物中唯一的添加的铁源。最优选，如上所定义的铁源是组合物中唯一的添加的铁源。
基于组合物的总干重，添加的铁源优选以诸如提供每100g的组合物1mg至300mg，优选1mg至250mg，更优选1mg至200mg，更优选1mg至100mg，甚至更优选1mg至75mg，最优选1mg至50mg的铁的量存在。
任何活的益生菌均可用于本发明的组合物中。本申请中提供的示例表明，所选择的铁源不会损害多种细菌属的活力。该效应不是菌株特定性的，并且可应用于范围广泛的细菌菌株。
可存在于本发明的组合物中的益生菌的示例包括双歧杆菌(bifidobacteria)、乳杆菌(lactobacilli)、乳球菌(lactococci)、肠球菌(enteroeocci)、链球菌(streptococci)、明串珠菌(Leuconostoc)、埃希氏菌(Escherichia)、丙酸杆菌(propionibacteria)或其组合，优选它是乳杆菌属或双歧杆菌属的细菌。
优选益生菌选自以下物种：长双歧杆菌、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、副干酪乳杆菌、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、鼠李糖乳杆菌、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、二乙酰乳酸乳球菌(Lactococcus diacetylactis)、乳脂乳球菌(Lactococcus cremoris)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)、德氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillusde lbrueckii subsp.lactis)、瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、屎肠球菌(Ehterococcus faecium)、假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)、两岐双岐杆菌(Bifidobacteriumbifidum)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius)、以及它们的亚种和/或其混合物中的任一种。
更优选，其选自以下物种：长双歧杆菌、乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、唾液乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、约氏乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、德氏乳杆菌乳酸亚种、瑞士乳杆菌、两岐双岐杆菌、加氏乳杆菌、清酒乳杆菌及其混合物。
可有利地存在于组合物中的细菌菌株的示例包括长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)、长双歧杆菌(保藏为CNCM I-2618)、短双歧杆菌(保藏为CNCM I-3865)、乳双歧杆菌(保藏为CNCM I-3446)、约氏乳杆菌(保藏为CNCM I-1225)、副干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-2116)、鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)、嗜热链球菌(保藏为CNCM I-1422)、嗜热链球菌(保藏为CNCM I-4153)、嗜热链球菌(保藏为CNCM I-1985)、嗜热链球菌(保藏为CNCM I-3915)、干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-1518)、干酪乳杆菌(保藏为ACA-DC 6002)、大肠杆菌Nissle(保藏为DSM 6601)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)(保藏为CNCM I-1198)、乳酸乳球菌(保藏为CNCM I-4154)，或其组合。
更优选的细菌菌株包括长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)、长双歧杆菌(保藏为CNCM I-2618)、短双歧杆菌(保藏为CNCM I-3865)、乳双歧杆菌(保藏为CNCM I-3446)、约氏乳杆菌(保藏为CNCM I-1225)、副干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-2116)、鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)、干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-1518)、干酪乳杆菌(保藏为ACA-DC 6002)、嗜热链球菌(保藏为CNCM I-3915)以及保加利亚乳杆菌(保藏为CNCM I-1198)或其组合。
在进一步优选的实施方案中，益生菌选自长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)、鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)和副干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-2116)及其混合物。
基于干重，益生菌优选以以下量存在于组合物中：每克组合物至少5E+06CFU，优选每克组合物5E+06至1E+12CFU，更优选每克组合物5E+06至5E+11CFU，最优选每克组合物5E+06至5E+10CFU。
所选择的益生菌可根据任何合适的方法培养，并且通过例如已知技术(诸如冷冻干燥或喷雾干燥)制备以供添加到组合物中。另选地，可从特殊供应商诸如DSM、DupontDanisco、Morinaga、Institut Rosell、Christian Hansen和Valio购买已被制成合适的形式的细菌制剂，用于添加到呈粉末形式的组合物中。
呈粉末形式的组合物可以是呈游离粉末的形式或呈压缩粉末的形式，诸如呈片剂的形式。优选呈粉末形式的组合物不旨在以粉末的形式使用，而是在使用之前在液体中，优选在水性液体中，最优选在水中重构。
本发明的呈粉末形式的优选的组合物包括食物或饮料产品、动物喂养产品、人类或动物的营养补充剂、药物组合物或化妆品组合物。
在另一个优选的实施方案中，呈粉末形式的组合物是可食用组合物。
出于提供营养和/或愉悦的目的，食物和饮料产品包括旨在由人类口服食用的所有产品。在优选的实施方案中，产品是营养组合物。更优选它是营养组合物，该营养组合物选自婴儿配方食品、成长乳、婴孩食物、婴儿谷物组合物、强化剂、补充剂以及用于怀孕或哺乳期的妇女的营养组合物。更优选，它选自婴儿配方食品、成长乳、婴儿谷物组合物以及用于怀孕或哺乳期的妇女的营养组合物。甚至更优选它选自婴儿配方食品、成长乳和婴儿谷物组合物。最优选，其为婴儿配方食品或成长乳。
该产品还可以呈动物食物产品或用于动物的营养补充剂的形式。优选，该动物是哺乳动物。动物的示例包括灵长类、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。
呈粉末形式的营养补充剂包括游离粉末或压缩粉末补充剂，并且通常涵盖要溶解在水中或洒在湿食物上或饮料中的补充剂。此类补充剂旨在为食用其的个体提供额外的营养物质和/或健康益处，以及其他有益成分(包括益生菌和铁)。根据本发明的补充剂可用于为人类以及动物提供营养物质和/或健康益处，如上所定义。营养补充剂包括例如添加到母乳中的粉末补充剂，例如用于早产或低出生体重婴儿。它还包括在怀孕前、在怀孕期间和/或在哺乳期间的妇女的补充剂。
药物组合物是旨在治疗或预防对其有需要的受治疗者的不利医学病症的组合物。
化妆品组合物通常旨在用于对身体的美学效应，并且可优选通过口服途径施用。
组合物(优选营养组合物)优选包含蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素和/或其他矿物质。优选，它包含所有这些类型的营养物质。
蛋白质可以是完整的或水解的(广泛或部分水解的)。
根据本发明的营养组合物通常含有脂质源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别相关的。在这种情况下，脂质源可以是适于在婴儿配方食品中使用的任何脂质或脂肪。一些合适的脂肪源包括棕榈油、高油酸葵花油和高油酸红花油。也可添加必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸，以及少量含有大量预先形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，诸如鱼油或微生物油。
根据本发明的组合物可含有碳水化合物源，诸如乳糖、麦芽糖糊精、淀粉及其混合物。根据本发明的组合物还可含有特定类型的碳水化合物：益生元。可根据本发明使用的益生元不受特别限制，并且包括所有促进肠中的益生菌或有益健康微生物生长的食物物质。优选，益生元可选自由以下项组成的组：低聚糖，任选地含有果糖、半乳糖和甘露糖；膳食纤维，特别地可溶性纤维、大豆纤维；菊粉；或其混合物。益生元的一些示例是低聚果糖(FOS)、低聚半乳糖(GOS)、低聚异麦芽糖(IMO)、低聚木糖(XOS)、低聚阿拉伯木聚糖(AXOS)、低聚甘露糖(MOS)、菊粉、聚右旋糖、葡萄糖基蔗糖(GS)、乳蔗糖(LS)、乳果糖(LA)、低聚帕拉金糖(PAO)、低聚麦芽糖、树胶和/或其水解产物、果胶和/或其水解产物。在具体实施方案中，益生元可以是低聚果糖和/或菊粉。可使用的合适的商用产品包括FOS与菊粉的组合，诸如由BENEO以商标Orafti出售的产品，或者由Tate&Lyle以商标STA-出售的聚右旋糖。
益生元还可为BMO(牛乳低聚糖)和/或HMO(人乳低聚糖)，诸如N-乙酰化低聚糖、唾液酸化低聚糖、岩藻糖基化低聚糖，及其任何混合物。
益生元的具体示例是低聚半乳糖、N-乙酰化低聚糖和唾液酸化低聚糖的混合物，其中N-乙酰化低聚糖表示低聚糖混合物的0.5重量％至4.0重量％，低聚半乳糖表示低聚糖混合物的92.0重量％至98.5重量％，并且唾液酸化低聚糖表示低聚糖混合物的1.0重量％至4.0重量％。例如，用于根据本发明的用途的组合物可含有基于干物质的2.5重量％至15.0重量％的CMOS-GOS，前提条件是该组合物包含至少0.02重量％的N-乙酰化低聚糖、至少2.0重量％的低聚半乳糖和至少0.04重量％的唾液酸化低聚糖。WO2006087391和WO2012160080提供制备这样的低聚糖混合物的一些示例。
本发明的组合物还可含有被认为是日常饮食所必需的并且在营养上大量的所有维生素、矿物质以及其他微量营养物质。已确定某些维生素和矿物质的最低需求。矿物质、维生素和任选地存在于本发明组合物中的其他营养物质的示例包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和左旋肉碱。矿物质通常呈盐形式添加。特定矿物质和其他维生素的存在及量将根据预期目标群组而变化。
用于制备呈粉末形式的组合物的方法
在一个买施方案中，本发明涉及用于制备呈粉末形式的组合物的方法，其包括
a)提供呈粉末形式的第一组合物；
b)将铁源与呈粉末形式的第一组合物混合以获得呈粉末形式的第二组合物；以及
c)在铁源之前或与铁源同时将至少一种益生菌与呈粉末形式的第一组合物混合，或者在添加铁源之后将至少一种益生菌与呈粉末形式的第二组合物混合，
其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
呈粉末形式的组合物、铁源和益生菌如上文在“组合物”部分中所述的实施方案中的任一个中所定义。
呈粉末形式的第一组合物可使用本领域已知的任何方法制备，诸如例如喷雾干燥。在这样的方法中，将组合物的成分在湿混合物中混合并在干燥塔中喷雾以形成粉末。敏感性成分(例如比如矿物质或维生素)也可在添加铁源和/或益生菌之前，同时或之后呈干燥形式添加。例如，通常将铁源添加到呈粉末形式的第一组合物中作为包含多种矿物质和维生素的微量元素预混物。
益生菌优选呈包含载体和任选地保护剂的预干混物的形式添加。用于益生菌的载体是将益生菌掺入产品中的本领域的技术人员所熟知的。载体优选碳水化合物，诸如例如麦芽糖糊精。多种保护剂是本领域技术人员已知的。特别合适的保护剂是在同一申请人的共同未决专利申请PCT/EP16/065359中描述的那些保护剂。
混合益生菌的步骤以及混合铁源的步骤可使用本领域已知的任何方法进行，用于将此类类型的成分与粉末组合物混合。例如，混合物可通过干混，在喷雾干燥塔中直接添加，在流化床、涂布机或凝聚机中或在挤出或辊干燥的最后阶段进行。优选，通过干混或通过在流化床中添加来使益生菌和/或铁源与呈粉末形式的组合物混合。最优选，通过干混来使益生菌和/或铁源与呈粉末形式的组合物混合。
在优选的实施方案中，至少50重量％，更优选至少60重量％，更优选至少70重量％，更优选至少80重量％，甚至更优选至少90重量％的组合物中的添加的铁呈如上所定义的铁源的形式。甚至更优选，如上所定义的铁源基本上是组合物中唯一的添加的铁源。最优选，如上所定义的铁源是组合物中唯一的添加的铁源。
特定铁源用于强化呈粉末形式的组合物的用途
柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物可有利地用于强化包含至少一种益生菌的呈粉末形式的组合物。此类铁源有利地提供生物可利用的铁，同时在用液体(诸如水)重构粉末期间不会引起益生菌的活力的显著损失。
一水硫酸亚铁是最生物可利用的铁源之一(在人类中平均生物利用度为100％，在以下文献中描述：Hurrell，Iron Fortification of Foods，Acad.Press Inc.，1985(Hurrell，“食物的铁强化”，学院出版社，1985年))，一水硫酸亚铁是用于本发明目的的优选的铁源。
柠檬酸亚铁也有利地由良好的生物利用度表征(在人类中平均生物利用度为74％，在以下文献中描述：Hurrell，Iron Fortification of Foods，Acad.Press Inc.，1985(Hurrell，“食物的铁强化”，学院出版社，1985年))。出于该原因，优选柠檬酸铁，该柠檬酸铁在大鼠中具有良好的生物利用度(75％)，但是在人类中生物可利用较低(31％)，如以下文献中所指示：Hurrell，Iron Fortification of Foods，Acad.Press Inc.，1985(Hurrell，“食物的铁强化”，学院出版社，1985年))。
在另一个实施方案中，本发明涉及用于强化包含至少一种益生菌的呈粉末形式的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供呈粉末形式的第一组合物；
b)将铁源与呈粉末形式的第一组合物混合以制备呈粉末形式的第二组合物；以及
c)在铁源之前或与铁源同时将至少一种益生菌与呈粉末形式的第一组合物混合，或者在添加铁源之后将至少一种益生菌与呈粉末形式的第二组合物混合，
其中铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
呈粉末形式的第一组合物、呈粉末形式的第二组合物以及方法步骤如上在关于用于制备本发明的组合物的方法的部分中所定义。另外，呈粉末形式的组合物、铁源和益生菌如上在“组合物”部分的任何实施方案中所述。
在优选的实施方案中，至少50重量％，更优选至少60重量％，更优选至少70重量％，更优选至少80重量％，甚至更优选至少90重量％的组合物中的添加的铁呈如上所定义的铁源的形式。甚至更优选，如上所定义的铁源基本上是组合物中唯一的添加的铁源。最优选，如上所定义的铁源是组合物中唯一的添加的铁源。
用于预防、减少和/或治疗铁缺乏的方法的组合物
如上所述，本发明的组合物用生物可利用的铁源强化，本发明还涉及用于预防、减少和/或治疗个体铁的缺乏的方法的组合物。出于该目的，柠檬酸亚铁和一水硫酸亚铁是优选的，一水硫酸亚铁是最优选的铁源。
用于制备产品的方法
本发明涉及用于制备产品(优选可食用产品)的方法，包括在液体中重构呈粉末形式的组合物，该呈粉末形式的组合物包含至少一种益生菌和铁源，其特征在于铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
呈粉末形式的组合物、益生菌和铁源如上述实施方案中的任一个中所定义。
当在液体中重构呈粉末形式的组合物时，使用选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物的铁源是特别有利的。本发明人已发现益生菌在再水合时特别敏感，并且当呈粉末形式的组合物用液体诸如水重构时，活力的损失特别严重。本发明人还发现柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物在该关键时刻不会引起益生菌活力的显著损失，这与常见的铁源相反，诸如七水硫酸亚铁或呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁。
重构优选用水性液体进行，最优选用水进行。为重构而添加的液体(优选水)的量取决于所制备的产品的类型。出于本发明的目的，关键是添加足够的液体以使益生菌重构至其天然水分含量。
产品
本发明还涉及能够通过上述方法获得或通过上述方法获得的产品，优选可食用产品。产品包含在液体总重构的呈粉末形式的组合物，如本发明的任何实施方案中所定义。优选，其在水性液体中，优选在水中重构。
优选，产品是通过重构营养组合物而获得的营养产品，如上所述。
用于提供营养的方法
还可以设想到用于向个体提供营养的方法，其包括用本发明的可食用产品，优选用本发明的营养产品喂养个体。用于该方法中的产品是食物或饮料组合物。优选，它是营养组合物，如上所定义。此类产品特别有利，因为它们包含生物可利用的铁源和稳定浓度的益生菌，因为添加的铁源不会引起益生菌的显著损失。
在一个实施方案中，该方法包括以下步骤：
a)根据本发明的实施方案中的任一个重构呈粉末形式的可食用组合物；以及
b)用重构组合物喂养个体。
在一个实施方案中，个体是具有铁匮乏的个体或存在发生铁匮乏风险的个体。在另一个实施方案中，个体是婴儿、幼儿或者怀孕或哺乳期的母亲。
在另一个优选的实施方案中，可食用组合物为营养组合物。
在另一个实施方案中，本发明涉及用于在向个体提供营养的方法中的根据本发明的组合物。优选，这样的个体如上所定义。
用于预防或减少益生菌的损失的方法
本发明涉及用于在包含至少一种益生菌和添加的铁源的呈粉末形式的组合物的重构期间减少或预防益生菌的损失的方法，其特征在于柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物用作添加的铁源。
益生菌、添加的铁源和呈粉末形式的组合物如在“组合物”部分的任何实施方案中所述。
在优选的实施方案中，柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物表示至少50重量％，更优选至少60重量％，更优选至少70重量％，更优选至少80重量％，甚至更优选至少90重量％的组合物中的添加铁。更优选，柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物基本上是组合物中使用的唯一的添加的铁源。最优选，柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物是组合物中唯一的添加的铁源。换句话讲，组合物不包含在组合物中作为铁源添加的其他亚铁或铁化合物。
本发明人已经表明，通过使用柠檬酸亚铁、柠檬酸铁或一水硫酸亚铁代替其他通常添加的铁源，诸如七水硫酸亚铁或呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁，可以预防或至少显著减少组合物的重构时益生菌的损失。
添加的铁源对益生菌的存活具有重要影响，而由于此类成分的复杂性，作为不旨在主要用于铁补充目的的成分的部分存在的铁源的影响要小得多。除了其他原因之外，它们含有的铁通常在重构组合物时不会被发现为游离铁，并且因此减少了对益生菌的潜在有害效应。
现在将通过以下实施例更详细地描述本发明。
实施例1：铁源对鼠李糖乳杆菌存活的效应
制备五种粉末组合物(样品A至D)，各自包含干燥的鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC1.3724)、铁源和100g的麦芽糖糊精。五种样品的组成汇总于下表1中。
样品如下制备。将麦芽糖糊精、干燥的益生菌粉末和铁源一起添加到500mL塑料烧杯中，并使用T2F干混合器(WAB，Switzerland)以34rpm混合5分钟。将量为25g的新鲜混合的样品在补充有消泡剂的胰蛋白胨盐水溶液中于37℃下稀释1/10。使用(IUL，Spain)均质化5分钟之后，进行十进制稀释。然后将温育之后导致30-300个菌落的适当稀释液转移到皮氏培养皿中，并根据倾注平板法与MRS琼脂混合。固化后，将板在需氧条件下于37℃下温育。温育48h之后，对平板上存在的菌落计数。
表1：样品A至D的组成
1)麦芽糖糊精基质中的喷雾干燥的鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)。组合物中活的细菌的总量为3.1E+10CFU/g。
2)通过将硫酸亚铁溶解在pH2下的水中并在麦芽糖糊精基质中喷雾干燥而获得。该铁源含有8.4重量％的Fe2+。
3)一水硫酸亚铁，含有32.7重量％的Fe2+的干燥的细粉FCC8，来源：Dr.PaulLohmann
结果汇总在图1中。从该图中可以清楚地看出，当使用七水硫酸亚铁时，在重构组合物中观察到活的鼠李糖乳杆菌的显著损失。相反，当在相同条件下使用一水硫酸亚铁时，用相同量的鼠李糖乳杆菌和相同量的Fe2+，未观察到鼠李糖乳杆菌的显著损失。
实施例2：铁源对长双歧杆菌存活的效应
制备七种粉末组合物(样品E至K)，各自包含干燥的长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)、铁源和100g的麦芽糖糊精。七种样品的组成汇总于下表2中。
表2：样品E至K的组成
1)麦芽糖糊精基质中的喷雾干燥的长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)。组合物中活的细菌的总量为3.1E+10CFU/g。
2)通过将硫酸亚铁溶解在pH2下的水中并在麦芽糖糊精基质中喷雾干燥而获得。该铁源含有8.4重量％的Fe2+。
3)一水硫酸亚铁，含有32.7重量％的Fe2+的干燥的细粉FCC8，来源：Dr.PaulLohmann
样品如下制备。将麦芽糖糊精、干燥的益生菌粉末和铁源一起添加到500mL塑料烧杯中，并使用T2F干混合器(WAB，Switzerland)以34rpm混合5分钟。将量为25g的新鲜混合的样品在补充有消泡剂的胰蛋白胨盐水溶液中于37℃下稀释1/10。使用(IUL，Spain)均质化5分钟之后，进行十进制稀释。然后将温育之后导致30-300个菌落的适当稀释液转移到皮氏培养皿中，并根据倾注平板法与RCA琼脂混合。固化后，将板在厌氧条件下于37℃下温育。温育48h之后，对平板上存在的菌落计数。
结果汇总在图2中。从该图中可以清楚地看出，当使用七水硫酸亚铁时，在重构组合物中观察到活的长双歧杆菌的显著损失。相反，当在相同条件下使用一水硫酸亚铁时，用相同量的长双歧杆菌和相同量的Fe2+，未观察到长双歧杆菌的显著损失。
实施例3：铁源对副干酪乳杆菌存活的效应
制备七种粉末组合物(样品L至R)，各自包含干燥的副干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-2116)、铁源和100g的麦芽糖糊精。七种样品的组成汇总于下表3中。
样品如下制备。将麦芽糖糊精、干燥的益生菌粉末和铁源一起添加到500mL塑料烧杯中，并使用T2F干混合器(WAB，Switzerland)以34rpm混合5分钟。将量为25g的新鲜混合的样品在补充有消泡剂的胰蛋白胨盐水溶液中于37℃下稀释1/10。使用(IUL，Spain)均质化5分钟之后，进行十进制稀释。然后将温育之后导致30-300个菌落的适当稀释液转移到皮氏培养皿中，并根据倾注平板法与MRS琼脂混合。固化后，将板在需氧条件下于37℃下温育。温育48h之后，对平板上存在的菌落计数。
结果汇总在图3中。从该图中可以清楚地看出，当使用呈喷雾干燥的形式的溶解的硫酸亚铁时，在重构组合物中观察到活的副干酪乳杆菌的显著损失。相反，当在相同条件下使用一水硫酸亚铁时，用相同量的副干酪乳杆菌和相同量的Fe2+，未观察到副干酪乳杆菌的显著损失。
表3：样品L至R的组成
1)麦芽糖糊精基质中的喷雾干燥的副干酪乳杆菌(保藏为CNCM I-2116)。组合物中活的细菌的总量为3.1E+10CFU/g。
2)通过将硫酸亚铁溶解在pH2下的水中并在麦芽糖糊精基质中喷雾干燥而获得。该铁源含有8.4重量％的Fe2+。
3)一水硫酸亚铁，含有32.7重量％的Fe2+的干燥的细粉FCC8，来源：Dr.PaulLohmann
实施例4：铁源对鼠李糖乳杆菌存活的效应
制备五种粉末组合物(样品S至W)，各自包含干燥的鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC1.3724)、铁源和100g的婴儿配方食品粉末。五种样品的组成汇总于下表4中。
表4：样品S至W的组成
1)麦芽糖糊精基质中的喷雾干燥的鼠李糖乳杆菌(保藏为CGMCC 1.3724)。组合物中活的细菌的总量为3.1E+10CFU/g。
2)通过将硫酸亚铁溶解在pH2下的水中并在麦芽糖糊精基质中喷雾干燥而获得。该铁源含有8.4重量％的Fe2+。
3)一水硫酸亚铁，含有32.7重量％的Fe2+的干燥的细粉FCC8，来源：Dr.PaulLohmann
4)Nestogen 1，来源：Nestlé
样品如下制备。将婴儿配方食品粉末、干燥的益生菌粉末和铁源一起添加到500mL塑料烧杯中，并使用T2F干混合器(WAB，Switzerland)以34rpm混合5分钟。将量为25g的新鲜混合的样品在补充有消泡剂的胰蛋白胨盐水溶液中于37℃下稀释1/10。使用(IUL，Spain)均质化5分钟之后，进行十进制稀释。然后将温育之后导致30-300个菌落的适当稀释液转移到皮氏培养皿中，并根据倾注平板法与MRS琼脂混合。固化后，将板在需氧条件下于37℃下温育。温育48h之后，对平板上存在的菌落计数。
结果汇总在图4中。从该图中可以清楚地看出，当使用七水硫酸亚铁时，在重构组合物中观察到活的鼠李糖乳杆菌的显著损失。相反，当在相同条件下使用一水硫酸亚铁时，用相同量的鼠李糖乳杆菌和相同量的Fe2+，未观察到鼠李糖乳杆菌的显著损失。在完整婴儿配方食品组合物中获得的这些结果与在包含麦芽糖糊精的模型组合物中的实施例1中获得的那些结果一致。这表明一水硫酸亚铁优于七水硫酸亚铁，甚至在复杂的产品基质中也是如此。
实施例5：铁源对长双歧杆菌存活的效应
制备五种粉末组合物(样品X至Z和AA至BB)，各自包含干燥的长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)、铁源和100g的婴儿配方食品粉末。五种样品的组成汇总于下表5中。
表5：样品X至Z和AA至BB的组成
1)麦芽糖糊精基质中的喷雾干燥的长双歧杆菌(保藏为ATCC BAA-999)。组合物中活的细菌的总量为3.1E+10CFU/g。
2)通过将硫酸亚铁溶解在pH2下的水中并在麦芽糖糊精基质中喷雾干燥而获得。该铁源含有8.4重量％的Fe2+。
3)一水硫酸亚铁，含有32.7重量％的Fe2+的干燥的细粉FCC8，来源：Dr.PaulLohmann
4)Nestogen 1，来源：Nestlé
样品如下制备。将婴儿配方食品粉末、干燥的益生菌粉末和铁源一起添加到500mL塑料烧杯中，并使用T2F干混合器(WAB，Switzerland)以34rpm混合5分钟。将量为25g的新鲜混合的样品在补充有消泡剂的胰蛋白胨盐水溶液中于37℃下稀释1/10。使用(IUL，Spain)均质化5分钟之后，进行十进制稀释。然后将温育之后导致30-300个菌落的适当稀释液转移到皮氏培养皿中，并根据倾注平板法与RCA琼脂混合。固化后，将板在厌氧条件下于37℃下温育。温育48h之后，对平板上存在的菌落计数。
结果汇总在图5中。从该图中可以清楚地看出，当使用七水硫酸亚铁时，在重构组合物中观察到活的长双歧杆菌的显著损失。相反，当在相同条件下使用一水硫酸亚铁时，用相同量的长双歧杆菌和相同量的Fe2+，未观察到长双歧杆菌的显著损失。在完整婴儿配方食品组合物中获得的这些结果与在包含麦芽糖糊精的模型组合物中的实施例2中获得的那些结果一致。这表明一水硫酸亚铁优于七水硫酸亚铁，甚至在复杂的产品基质中也是如此。
Claims (15)
1.呈粉末形式的组合物，其包含至少一种益生菌和铁源，其特征在于所述铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述组合物是可食用组合物。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于所述组合物在使用之前用液体重构。
4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于所述铁源是柠檬酸铁或一水硫酸亚铁。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于所述铁源是一水硫酸亚铁。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于呈粉末形式的所述组合物是营养组合物。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于所述营养组合物选自婴儿配方食品、成长乳、婴儿谷物组合物、强化剂、用于怀孕或哺乳期的妇女的补充剂和营养组合物。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于所述铁源以诸如提供每100g的组合物1mg至300mg的铁的量存在。
9.选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物的铁源用于强化呈粉末形式的组合物的用途，所述组合物包含至少一种益生菌。
10.呈粉末形式的可食用组合物，其包含至少一种益生菌和添加的铁源，用于预防、减少和/或治疗个体的铁缺乏，其特征在于所述添加的铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
11.用于制备呈粉末形式的组合物的方法，其包括：
a.提供呈粉末形式的第一组合物；
b.将铁源与呈粉末形式的所述第一组合物混合以获得呈粉末形式的第二组合物；以及
c.在所述铁源之前或与所述铁源同时将至少一种益生菌与呈粉末形式的所述第一组合物混合，或者在添加所述铁源之后将至少一种益生菌与呈粉末形式的所述第二组合物混合，
其特征在于所述铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
12.用于制备产品的方法，其包括在液体中重构呈粉末形式的组合物，所述呈粉末形式的组合物包含至少一种益生菌和铁源，其特征在于所述铁源选自柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁及其混合物。
13.能够通过根据权利要求12所述的方法获得的产品。
14.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其用于在向个体提供营养的方法中。
15.用于在包含至少一种益生菌和添加的铁源的呈粉末形式的组合物的重构期间减少或预防益生菌的损失的方法，其特征在于柠檬酸亚铁、柠檬酸铁、一水硫酸亚铁或其混合物用作所述添加的铁源。
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