RU2801210C2

RU2801210C2 - Композиция в форме порошка, содержащая железо и бактерии-пробиотики

Info

Publication number: RU2801210C2
Application number: RU2019113749A
Authority: RU
Inventors: Рафаэль БЕРРОКАЛ ФЛОРЕС; Бертран БУРКИ; Юска ХЮСНИ; Антуан Жан-Пьер РУ
Original assignee: Сосьете Де Продюи Нестле С.А.
Priority date: 2016-11-10
Filing date: 2017-11-09
Publication date: 2023-08-03

Abstract

Изобретение относится к питательной композиции в форме порошка. Питательная композиция содержит по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и моногидрат сульфата железа (II). При этом композиция представляет собой питательную композицию, выбранную из детской смеси, молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, детской композиции на зерновой основе, обогатителя, добавки и питательной композиции для беременных или кормящих женщин. Питательная композиция применяется в целях профилактики, снижения и/или лечения дефицита железа у субъекта. Способ получения продукта включает растворение в жидкости композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и моногидрат сульфата железа (II). Изобретение позволяет снизить или предотвратить потери бактерий-пробиотиков в процессе растворения питательной композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и моногидрат сульфата железа (II). 6 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл., 5 пр.

Description

Область применения изобретения

Настоящее изобретение относится к композиции в форме порошка, содержащей бактерии-пробиотики и по меньшей мере один источник железа, выбранный из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей. Цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) и их смеси преимущественно не вызывают значительного снижения жизнеспособности бактерий, а потому такие источники железа преимущественно используют для обогащения композиции в форме порошка, содержащей бактерии-пробиотики.

Предпосылки создания изобретения

Полезные бактерии и, в частности, бактерии-пробиотики добавляют в широкий спектр продуктов, а именно, в продукты в форме порошка, которые растворяют в жидкости, например питательные композиции для младенцев, детей младшего возраста, беременных или кормящих женщин, пожилых людей или людей, которым необходимо специальное питание из-за неблагоприятного медицинского состояния. Такие продукты обычно содержат большое количество макро- и микроэлементов, для того чтобы обеспечить потребности в питании потребителя. Для целей питания чрезвычайно важно, чтобы потребитель получал соответствующие количества бактерий-пробиотиков и других питательных веществ.

Особенно важным микроэлементом является железо. Во всем мире дефицит железа является одной из наиболее распространенных форм дефицита питательных веществ. В организме человека железо играет существенную роль в функционировании большого числа биологических процессов, таких как связывание и транспорт кислорода, регуляция экспрессии генов, функционирование нервной системы, функционирование иммунитета и регулирование роста и дифференцировки клеток. Дефицит железа может приводить к анемии, а также к различным проблемам со здоровьем, таким как нарушение функции щитовидной железы, иммунных и психических функций, физической работоспособности, когнитивного развития, повышение чувствительности к инсулину и усталость. Дефицит железа особенно распространен среди беременных и кормящих женщин, а также у детей.

Один из подходов к борьбе с дефицитом железа предусматривает обогащение продуктов железом. Таким образом, крайне желательно включать дополнительный источник железа в питательные композиции или диетические добавки, особенно в питательные композиции или добавки для младенцев, детей младшего возраста, женщин до беременности, во время беременности и/или во время грудного вскармливания. В качестве обогащающих железом агентов в пищевых продуктах и питательных добавках используют самые различные соединения железа. Например, широко используют сульфат железа (II) благодаря его относительно низкой стоимости и высокой биодоступности.

Вместе с тем авторы настоящего изобретения обнаружили, что ряд соединений железа при использовании для обогащения композиции, содержащей бактерии-пробиотики, оказывает неблагоприятное воздействие на жизнеспособность бактерий-пробиотиков (см. также одновременно рассматриваемую заявку PCT/EP2016/063170).

В большинстве случаев полезный эффект бактерий-пробиотиков достижим только в том случае, если бактерии живы в момент потребления. Таким образом, для компенсации потери жизнеспособных бактерий-пробиотиков и обеспечения доставки соответствующих количеств таких бактерий потребителю в продукт, как правило, добавляют завышенную дозу бактерий-пробиотиков. Вместе с тем подобное решение не является полностью удовлетворительным, поскольку завышенная дозировка оказывается весьма дорогостоящей и приводит к тратам.

Таким образом, цель настоящего изобретения заключается в том, чтобы обеспечить композиции, содержащие бактерии-пробиотики и добавленный источник железа, в которых присутствие добавленного источника железа не ухудшает жизнеспособность бактерий-пробиотиков.

Изложение сущности изобретения

Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) и их смеси при использовании в качестве источника железа в композиции, содержащей бактерии-пробиотики, не приводят к снижению жизнеспособности бактерий.

В первом аспекте изобретения предложена композиция в форме порошка, содержащая по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, отличающаяся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

Во втором аспекте изобретение относится к применению источника железа, выбранного из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей, для обогащения композиции в форме порошка, причем указанная композиция содержит по меньшей мере одну бактерию-пробиотик.

В третьем аспекте изобретения предложен способ получения композиции в форме порошка, включающий:

a) приготовление первой композиции в форме порошка;

b) введение источника железа в первую композицию в форме порошка для образования второй композиции в форме порошка; и

c) введение по меньшей мере одной бактерии-пробиотика в первую композицию в форме порошка до источника железа или одновременно с ним или введение по меньшей мере одной бактерии-пробиотика во вторую композицию в форме порошка после добавления источника железа,

отличающийся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

В четвертом аспекте изобретения предложен способ получения продукта, включающий растворение в жидкости композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, отличающейся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

В пятом аспекте изобретения предложен продукт, полученный или получаемый способом настоящего изобретения.

В шестом аспекте изобретения предложена композиция настоящего изобретения для применения в способе обеспечения питанием субъекта.

В седьмом аспекте изобретения предложена пищевая композиция в форме порошка, содержащая по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, для применения в целях профилактики, снижения и/или лечения дефицита железа у субъекта, отличающаяся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

В восьмом аспекте изобретения предложен способ снижения и/или предотвращения потерь бактерий-пробиотиков в процессе растворения композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и добавленный источник железа, отличающейся тем, что в качестве добавленного источника железа используют цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) или их смеси.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1. Графическое представление потери жизнеспособности Lactobacillus rhamnosus (которой был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724) в композициях, содержащих соответственно 10 и 30 мг Fe²⁺ на 100 г экспериментальной композиции на основе мальтодекстрина. Сравнивают два различных источника железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, и моногидрат сульфата железа (II). Для обеих концентраций железа потеря жизнеспособных Lactobacillus rhamnosus значительно ниже в случае моногидрата сульфата железа (II).

Фиг. 2. Графическое представление потери жизнеспособности Bifidobacterium longum (которой был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999) в композициях, содержащих соответственно 5, 25 и 50 мг Fe²⁺ на 100 г экспериментальной композиции на основе мальтодекстрина. Сравнивают два различных источника железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, и моногидрат сульфата железа (II). Для всех концентраций железа потеря жизнеспособных Bifidobacterium longum значительно ниже в случае моногидрата сульфата железа (II).

Фиг. 3. Графическое представление потери жизнеспособности Lactobacillus paracasei (которой был присвоен депозитный номер CNCM I-2116) в композициях, содержащих соответственно 5, 25 и 50 мг Fe²⁺ на 100 г экспериментальной композиции на основе мальтодекстрина. Сравнивают два различных источника железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, и моногидрат сульфата железа (II). Для всех концентраций железа потеря жизнеспособных Lactobacillus paracasei значительно ниже в случае моногидрата сульфата железа (II).

Фиг. 4. Графическое представление потери жизнеспособности Lactobacillus rhamnosus (которой был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724) в композициях, содержащих соответственно 10 и 30 мг Fe²⁺ на 100 г композиции детской смеси. Сравнивают два различных источника железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, и моногидрат сульфата железа (II). Для обеих концентраций железа потеря жизнеспособных Lactobacillus rhamnosus значительно ниже в случае моногидрата сульфата железа (II).

Фиг. 5. Графическое представление потери жизнеспособности Bifidobacterium longum (которой был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999) в композициях, содержащих соответственно 25 и 50 мг Fe²⁺ на 100 г композиции детской смеси. Сравнивают два различных источника железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, и моногидрат сульфата железа (II). Для всех концентраций железа потеря жизнеспособных Bifidobacterium longum значительно ниже в случае моногидрата сульфата железа (II).

Подробное описание изобретения

Определения

Используемый в настоящем документе термин «бактерии-пробиотики» относится к препаратам из живых бактериальных клеток с благоприятным воздействием на здоровье или состояние организма хозяина [Salminen S, et al., “Probiotics: how they should be defined”, Trends Food Sci. Technol, (1999), 10, 107-10].

Бактерии считаются «живыми», когда они способны размножаться в контролируемых условиях культивирования и образовывать колонии или суспензии или когда метаболическая активность микроорганизма и/или целостность мембраны могут быть установлены с помощью способов, известных специалисту в данной области, таких как, например, проточная цитометрия. Высушенные бактерии-пробиотики считаются живыми, если они способны размножаться и/или если есть возможность установить целостность мембраны, как описано выше, после растворения бактерий в жидкости, например в водной жидкости, предпочтительно в воде.

Для целей настоящего изобретения термин «растворение» относится к разведению или суспендированию порошка в жидкости, например в водной жидкости, предпочтительно в воде, в специальной среде разведения, которая используется в аналитической микробиологии, или в напитке, таком как молоко или сок. Жидкость, используемая для растворения, может быть холодной или теплой. Этот термин предпочтительно относится к растворению в водной жидкости, предпочтительно в воде.

В целях настоящего изобретения термин «водная жидкость» подразумевает жидкость, содержащую по меньшей мере одну водную фазу. Это может быть, например, эмульсия, водный раствор, или взвесь, или вода. Водная жидкость предпочтительно представляет собой эмульсию типа «масло в воде», водный раствор, или суспензию, или воду. Более предпочтительно она представляет собой водный раствор или суспензию, или воду. Наиболее предпочтительно она представляет собой воду.

Термин «железо» в настоящем документе призван обозначать либо Fe²⁺, либо Fe³⁺ в зависимости от используемого источника железа.

В целях настоящего изобретения термин «добавленный источник железа» подразумевает соединение железа (II) или железа (III), добавленное к композиции исключительно с намерением увеличить количество железа. В зависимости от своего характера композиция может содержать железо, поступающее из других ингредиентов, например из молока, фруктов, овощей, зерновых или компонентов волокон. Железо, присутствующее в таких ингредиентах, не рассматривается в настоящем документе как «добавленный источник железа», поскольку по своей природе содержится в таком ингредиенте, который изначально добавляют не по причине содержания в нем железа, а благодаря его питательной ценности в целом.

В целях настоящего изобретения источник железа должен быть, «по существу, единственным добавленным источником железа» в композиции, при условии что другие добавленные источники железа используют в достаточно малом количестве, чтобы не вызывать статистически значимую потерю жизнеспособных бактерий-пробиотиков. Специалист в данной области может оценить, обусловлена ли статистически значимая потеря жизнеспособных бактерий применением способа, описанного в примерах настоящей заявки, применяя общеизвестные статистические методики для анализа результатов.

Термин «питательная композиция» обозначает продукт, предназначенный для обеспечения сбалансированным питанием или дополнительным питанием субъекта (например, для удовлетворения важнейших потребностей в питании такого субъекта), и главная цель которого заключается в обеспечении питания. Питательная композиция призвана обеспечить конкретными питательными веществами субъекта со специальными потребностями в питании, например младенцев, детей младшего возраста, беременных или кормящих женщин, пожилых людей или людей с неблагоприятным медицинским состоянием, которые нуждаются в специальных продуктах (например, композиции для кормления через зонд или композиции для педиатрических пациентов). Продукты со значимым гедоническим аспектом, для которых питательные качества не имеют особого значения, исключены из сферы охвата термина «питательные продукты». Питательные композиции предпочтительно содержат белки, жиры, углеводы и разнообразные микроэлементы.

В настоящем изобретении термин «младенец» обозначает ребенка в возрасте от момента рождения до 12 месяцев. Термин «ребенок младшего возраста» относятся к ребенку в возрасте от 12 месяцев до 5 лет, предпочтительно от 12 месяцев до 3 лет.

Выражение «детская смесь» при использовании в настоящем документе относится к продукту питания, специально предназначенному для применения в пищу младенцами, который сам по себе удовлетворяет потребности в питании этой категории лиц (статья 2(c) Директивы Европейской комиссии 91/321/EEC 2006/141/EC от 22 декабря 2006 г. о детских смесях и смесях для прикармливаемых детей). Оно также относится к питательной композиции, предназначенной для младенцев, как определено в Codex Alimentarius (Codex STAN 72-1981) и стандарте «Infant Specialities» (включая статью «Food for Special Medical Purpose»). Детские смеси могут включать начальные детские смеси и смеси для прикармливаемых детей. Обычно начальная смесь в качестве заменителя грудного молока предназначена для младенцев с рождения. Смесь для прикармливаемых детей, как правило, дают, начиная с 6-го месяца. Она составляет главный жидкий элемент в постепенно увеличивающемся разнообразии рациона для лиц данной категории. Следует понимать, что младенцев можно вскармливать исключительно детскими смесями или можно применять детскую смесь в качестве добавки или дополнения к грудному молоку.

«Молочные смеси для детей от 1 до 3 лет» (или GUM) дают после одного года и далее. По существу, это напиток на основе молока, адаптированный для специфических потребностей в питании у детей младшего возраста.

Выражение «детское питание» означает продукт питания, специально предназначенный для применения в пищу младенцами или детьми, такими как дети младшего возраста, в течение первых лет жизни.

Выражение «детская композиция на зерновой основе» означает продукт питания на зерновой основе, специально предназначенный для применения в пищу младенцами или детьми, такими как дети младшего возраста, в течение первых лет жизни.

Термин «обогатитель» относится к питательным композициям, которые подходят для смешивания с грудным молоком или детской смесью. Термин «грудное молоко» следует понимать как материнское молоко или молозиво материнского молока, или донорское молоко или молозиво донорского молока.

Термин «добавка» относится к композиции, которую можно использовать для добавки или дополнения к питанию субъекта.

Термин «пребиотик» означает неперевариваемые углеводы, которые благоприятно влияют на организм-хозяина, выборочно стимулируя рост и/или активность полезных для здоровья бактерий в толстом кишечнике человека (Gibson GR, Roberfroid MB. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J Nutr. 1995;125:1401-12).

Композиция

Композиция настоящего изобретения представляет собой композицию в форме порошка, содержащую по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, при этом указанный источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что из многих компонентов сбалансированной питательной композиции, например детской смеси, добавленное железо является причиной значительных потерь бактерий-пробиотиков в растворенной композиции. Кроме того, авторы настоящего изобретения установили, что три определенные соли железа можно преимущественно использовать в качестве источников железа для питания в сочетании с бактериями-пробиотиками, не вызывая значительной потери жизнеспособности таких бактерий-пробиотиков. К таким источникам железа относятся цитрат железа (II), цитрат железа (III) и моногидрат сульфата железа (II).

В предпочтительном варианте осуществления источник железа выбран из моногидрата сульфата железа (II), цитрата железа (II) и их смесей. Такие источники железа имеют наибольшее преимущество вследствие их хорошей биодоступности. Наиболее предпочтительным источником железа является моногидрат сульфата железа (II), который обладает наилучшей биодоступностью.

Сульфат железа (II) существует в различных формах гидратации (моно-, тетра-, пента-, гекса- и гептагидрат). Формы тетра-, пента- и гексагидрата нестабильны, а потому их редко используют в коммерческих целях. Моногидрат сульфата железа (II) (также иногда называемый «обезвоженным») и гептагидрат сульфата железа (II) стабильны и представляют собой кристаллические формы сульфата железа (II), которые широко применяются в коммерции.

Сульфат железа (II) также широко применяют в порошковых продуктах в форме полученного распылительной сушкой порошка, который получают посредством распылительной сушки сульфата железа (II), растворенного в носителе, например в мальтодекстрине (в дальнейшем называемый «растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой»). В этом случае сульфат железа (II) обычно растворяют при кислом рН, например рН 2, прежде чем смешивать с носителем и проводить сушку. В растворенном сульфате железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, ионы железа и ионы сульфата остаются отделены друг от друга и диспергированы в аморфном носителе.

Таким образом, авторы настоящего изобретения обнаружили, что гептагидрат сульфата железа (II) и сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, вызывают значительную потерю жизнеспособности бактерий-пробиотиков, тогда как в присутствии моногидратной формы сульфата железа (II) значительной потери жизнеспособности бактерий-пробиотиков не отмечается. Не ограничиваясь какой-либо теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что кристаллическое состояние и низкий уровень гидратации моногидрата сульфата железа (II) в совокупности значительно замедляют его растворение в водной среде. Кроме того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что бактерии-пробиотики особенно чувствительны к железу во время растворения композиции в форме порошка в жидкости. Полагают, что в процессе растворения композиции в форме порошка в жидкости, продолжительное время растворения моногидрата сульфата железа (II) обеспечивает достаточно времени для регидратации бактерий-пробиотиков до их контакта со свободным железом, тем самым, снижая потери жизнеспособности бактерий-пробиотиков.

Такой положительный эффект наблюдается при использовании моногидрата сульфата железа (II) в чистом виде и при использовании моногидрата сульфата железа (II), диспергированного в аморфной матрице, при условии сохранения кристаллической структуры и степени гидратации моногидрата сульфата железа (II). Такой ингредиент с диспергированным в матрице моногидратом сульфата железа (II) можно получить смешением кристаллической соли железа в растворе носителя с последующей распылительной сушкой носителя. Процесс проводят без растворения кристаллической соли железа, поддерживая достаточно высокий рН, предпочтительно поддерживая pH вне кислотной области. Специалист в данной области, опираясь на обычные способы, может определить, содержит ли продукт или ингредиент моногидрат сульфата железа (II) с его кристаллической структурой и степенью гидратации. Действительно, можно использовать несколько аналитических методик для идентификации моногидрата сульфата железа (II), включая поляризационную микроскопию и БИК-спектроскопию.

Применение моногидрата сульфата железа (II) наиболее преимущественно, поскольку он одновременно отличается хорошей биодоступностью и низким вредным воздействием на жизнеспособность бактерий-пробиотиков. Моногидрат сульфата железа (II) коммерчески доступен, например его предлагают Dr. Paul Lohmann GmbH KG, г. Эммерталь, Германия или DSM Nutritional Products, г. Херлен, Нидерланды.

Кроме того, из-за низкого уровня свободного железа, выделяемого в момент растворения, цитрат железа (II) и цитрат железа (III) не оказывают значительного вредного воздействия на жизнеспособность бактерий-пробиотиков. Таким образом, эти две соли железа можно преимущественно использовать в качестве источников железа в композиции в форме порошка, содержащей бактерии-пробиотики. Цитрат железа (II) и цитрат железа (III) коммерчески доступны, например их предлагают Dr. Paul Lohmann GmbH KG, г. Эммерталь, Германия или DSM Nutritional Products, г. Херлен, Нидерланды.

В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере 50 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 60 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 70 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 80 мас.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 90 мас.%. добавленного железа находится в форме источника железа, как определено выше. Еще более предпочтительно источник железа, как определено выше, по существу, является единственным добавленным источником железа в композиции. Наиболее предпочтительно источник железа, как определено выше, является единственным добавленным источником железа в композиции.

Добавленный источник железа предпочтительно присутствует в количестве, достаточном для обеспечения от 1 до 300 мг, предпочтительно от 1 до 250 мг, более предпочтительно от 1 до 200 мг, более предпочтительно от 1 до 100 мг, еще более предпочтительно от 1 до 75 мг, наиболее предпочтительно от 1 до 50 мг железа на 100 г композиции в расчете на общую массу сухого вещества композиции.

В композиции настоящего изобретения можно использовать любые живые бактерии-пробиотики. Примеры, представленные в настоящей заявке, показывают, что выбранные источники железа не ухудшают жизнеспособность различных родов бактерий. Действие композиции не является штаммоспецифическим, и ее можно применять к широкому диапазону бактериальных штаммов.

Примеры бактерий-пробиотиков, которые могут входить в состав композиции настоящего изобретения, включают в себя бифидобактерии, лактобациллы, лактококки, энтерококки, стрептококки, Leuconostoc, Escherichia, пропионовокислые бактерии или их комбинации, предпочтительно к ним относятся бактерии из родов Lactobacillus или Bifidobacterium.

Бактерии-пробиотики предпочтительно выбирают из видов Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus reuteri, Lactococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Lactococcus diacetylactis, Lactococcus cremoris, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lactobacillus helveticus, Escherichia coli, Enterococcus faecium, Leuconostoc pseudomesenteroides, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus sakei, Streptococcus salivarius, а также из любых их подвидов и/или их смесей.

Наиболее предпочтительно их выбирают из видов Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lactobacillus helveticus, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus sakei и их смесей.

Примеры штаммов бактерий, которые могут преимущественно присутствовать в композиции, включают в себя Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2618), Bifidobacterium breve (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3865), Bifidobacterium lactis (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3446), Lactobacillus johnsonii (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1225), Lactobacillus paracasei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2116), Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724), Streptococcus thermophilus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1422), Streptococcus thermophilus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-4153), Streptococcus thermophilus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1985), Streptococcus thermophilus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3915), Lactobacillus casei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1518), Lactobacillus casei (которому был присвоен депозитный номер ACA-DC 6002), Escherichia coli Nissle (которому был присвоен депозитный номер DSM 6601), Lactobacillus bulgaricus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1198), Lactococcus lactis (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-4154) или их комбинации.

Наиболее предпочтительные штаммы включают Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2618), Bifidobacterium breve (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3865), Bifidobacterium lactis (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3446), Lactobacillus johnsonii (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1225), Lactobacillus paracasei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2116), Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724), Lactobacillus casei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-1518), Lactobacillus casei (которому был присвоен депозитный номер ACA-DC 6002), Streptococcus thermophilus (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-3915) и Lactobacillus bulgaricus которому был присвоен депозитный номер (CNCM I-1198) или их комбинации.

В еще более предпочтительном варианте осуществления бактерии-пробиотики выбраны из Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999), Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724) и Lactobacillus paracasei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2116) и их смесей.

Бактерии-пробиотики предпочтительно присутствуют в композиции в количестве по меньшей мере 5E + 06 КОЕ на грамм композиции в расчете на массу сухого вещества, предпочтительно от 5E + 06 до 1E + 12 КОЕ на грамм композиции, более предпочтительно от 5E + 06 до 5E + 11 КОЕ на грамм композиции, наиболее предпочтительно от 5E + 06 до 5E + 10 КОЕ на грамм композиции.

Выбранные бактерии-пробиотики можно культивировать в соответствии с любым подходящим способом и готовить для добавления в композицию с помощью известных методик, например сушки сублимацией или распылительной сушки. В альтернативном варианте осуществления бактериальные препараты можно приобрести у специализированных поставщиков, таких как DSM, Dupont Danisco, Morinaga, Institut Rosell, Christian Hansen и Valio, в уже готовой подходящей форме для добавления в композицию в форме порошка.

Композиция в форме порошка может быть в форме сыпучего порошка или в форме прессованного порошка, например в форме таблетки. Композиция в форме порошка предпочтительно не предназначена для применения в форме порошка, а должна быть растворена в жидкости, предпочтительно в водной жидкости, наиболее предпочтительно в воде, перед применением.

Предпочтительные композиции в форме порошка, составляющие предмет настоящего изобретения, включают в себя пищевой продукт или напиток, продукт для кормления животных, питательную добавку для человека или животного, фармацевтическую композицию или косметическую композицию.

В другом предпочтительном варианте осуществления композиция в форме порошка представляет собой пищевую композицию.

Пищевые и питьевые продукты включают все продукты, предназначенные для употребления людьми перорально с целью получения питания и/или удовольствия. В предпочтительном варианте осуществления продукт представляет собой питательную композицию. Такой продукт более предпочтительно представляет собой питательную композицию, выбранную из детской смеси, молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, детского питания, детской композиции на зерновой основе, обогатителя, добавки и питательной композиции для беременных или кормящих женщин. Такой продукт более предпочтительно выбран из детской смеси, молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, детской композиции на зерновой основе и питательной композиции для беременных или кормящих женщин. Еще более предпочтительно он выбран из детской смеси, молочной смеси для детей от 1 до 3 лет и детской композиции на зерновой основе. Наиболее предпочтительно он представляет собой детскую смесь или молочную смесь для детей от 1 до 3 лет.

Продукт также может быть представлен в форме пищевого продукта для животных или питательной добавки для животных. Предпочтительно животное представляет собой млекопитающее. Примеры животных включают приматов, коров, овец, коз, лошадей, собак, кошек, кроликов, крыс, мышей, рыб, птиц и т. п.

Питательные добавки в форме порошка включают в себя сыпучие порошковые или прессованные порошковые добавки и, как правило, включают в себя добавки для растворения в воде или для посыпания влажного продукта или напитка. Такие добавки предназначены для обеспечения употребляющего их субъекта дополнительными питательными веществами и/или полезным для здоровья эффектом, а также другими полезными ингредиентами, в том числе бактериями-пробиотиками и железом. Добавку в соответствии с настоящим изобретением можно использовать для обеспечения питательными веществами и/или эффектом, полезным для здоровья людей, а также животных, как определено выше. Например, питательные добавки включают порошковые добавки для добавления в грудное молоко, например для преждевременно родившихся младенцев или младенцев с низким весом при рождении. Они также включают в себя добавки для женщин до беременности, во время беременности и/или во время грудного вскармливания.

К фармацевтическим композициям относятся композиции, предназначенные для лечения или профилактики неблагоприятного медицинского состояния у нуждающегося в этом субъекта.

Косметические композиции, как правило, предназначены для эстетического воздействия на организм и могут предпочтительно вводиться перорально.

Композиция, предпочтительно питательная композиция, предпочтительно содержит белок, углеводы, жиры, витамины и/или другие минеральные вещества. Предпочтительно она содержит все перечисленные виды питательных веществ.

Белки могут быть нативными или гидролизованными (глубоко или частично гидролизованными).

Питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением, по существу, содержит источник липидов. Это особенно важно, если питательная композиция настоящего изобретения представляет собой детскую смесь. В этом случае источником липидов может быть любой липид или жир, который подходит для применения в детских смесях. Некоторые подходящие источники жира включают в себя пальмовое масло, подсолнечное масло с высоким содержанием олеиновой кислоты и сафлоровое масло с высоким содержанием олеиновой кислоты. Можно также добавлять незаменимые жирные кислоты - линолевую кислоту и α-линоленовую кислоту, а также небольшие количества масел, содержащих большие количества арахидоновой кислоты и докозагексаеновой кислоты в готовом виде, например рыбьи жиры или микробные масла.

Композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать источник углеводов, такой как лактоза, мальтодекстрин, крахмал и их смеси. Композиция в соответствии с настоящим изобретением может также содержать определенный вид углеводов: пребиотики. Пребиотики, которые можно использовать в соответствии с настоящим изобретением, не имеют конкретных ограничений и включают в себя все пищевые вещества, которые активируют в кишечнике рост пробиотиков или полезных для здоровья микроорганизмов. Предпочтительно их можно выбирать из группы, состоящей из олигосахаридов, необязательно содержащих фруктозу, галактозу и маннозу; пищевые волокна, в частности растворимые волокна, волокна сои; инулин; или их смеси. Некоторыми примерами пребиотиков являются фруктоолигосахариды (FOS), галактоолигосахариды (GOS), изомальтоолигосахариды (IMO), ксилоолигосахариды (XOS), арабиноксилоолигосахариды (AXOS), маннанолигосахариды (MOS), инулин, полидекстроза, гликозилсахароза (GS), лактосахароза (LS), лактулоза (LA), палатинозоолигосахариды (PAO), мальтоолигосахариды, камеди и/или их гидролизаты, пектины и/или их гидролизаты. В конкретном варианте осуществления пребиотики могут представлять собой фруктоолигосахариды и/или инулин. Подходящие коммерчески доступные продукты, которые могут использоваться, включают в себя комбинации FOS с инулином, такие как продукт, продаваемый компанией BENEO под торговым названием Orafti, или полидекстрозу, продаваемую компанией Tate & Lyle под торговым названием STA-LITE®.

Пребиотик также может представлять собой BMO (олигосахарид из коровьего молока) и/или ОГМ (олигосахарид грудного молока), например N-ацетилированные олигосахариды, сиалилированные олигосахариды, фукозилированные олигосахариды и любые их смеси.

Конкретным примером пребиотика является смесь галактоолигосахарида (-ов), N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов) и сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), в которой N-ацетилированный (-ые) олигосахарид (-ы) составляет (-ют) от 0,5 до 4,0 мас.% олигосахаридной смеси, галактоолигосахарид (-ы) составляет (-ют) от 92,0 до 98,5 мас.% олигосахаридной смеси, а сиалилированный (-ые) олигосахарид (-ы) составляет (-ют) от 1,0 до 4,0 мас.% олигосахаридной смеси. Например, композиция для применения в соответствии с изобретением может содержать от 2,5 до 15,0 мас.% CMOS-GOS в пересчете на сухое вещество с условием, что композиция содержит по меньшей мере 0,02 мас.% N-ацетилированного олигосахарида, по меньшей мере 2,0 мас.% галактоолигосахарида и по меньшей мере 0,04 мас.% сиалилированного олигосахарида. В WO2006087391 и WO2012160080 приведено несколько примеров получения такой смеси олигосахаридов.

Композиция изобретения может также содержать все витамины, минералы, а также другие питательные микроэлементы, которые, как известно, являются обязательными в повседневном пищевом рационе, в значимых с точки зрения питания количествах. Для некоторых витаминов и минеральных веществ установлены минимальные требования. Примеры минеральных веществ, витаминов и других питательных веществ, которые необязательно присутствуют в композиции настоящего изобретения, включают в себя витамин А, витамин В1, витамин В2, витамин В6, витамин В12, витамин E, витамин K, витамин C, витамин D, фолиевую кислоту, инозит, ниацин, биотин, пантотеновую кислоту, холин, кальций, фосфор, йод, магний, медь, цинк, марганец, хлор, калий, натрий, селен, хром, молибден, таурин и L-карнитин. Минеральные вещества обычно добавлены в форме солей. Наличие и количества конкретных минеральных веществ и других витаминов зависят от заданной целевой группы.

Способ получения композиции в форме порошка

В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу получения композиции в форме порошка, включающему

b) введение источника железа в первую композицию в форме порошка для формирования второй композиции в форме порошка; и

отличающемуся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

Композиция в форме порошка, источник железа и бактерии-пробиотики соответствуют определениям, приведенным в любом из вариантов осуществления, описанных выше в разделе «Композиция».

Первую композицию в форме порошка можно приготовить с использованием любого известного в данной области способа, такого как, например, распылительная сушка. В таком способе ингредиенты композиции смешивают во влажной смеси и распыляют в сушильной башне с образованием порошка. Неустойчивые ингредиенты, такие как, например, минеральные вещества или витамины, также можно добавлять в сухой форме до, одновременно или после добавления источника железа и/или бактерий-пробиотиков. Например, обычно источник железа добавляют к первой композиции в форме порошка в виде заранее приготовленной смеси микроэлементов, содержащей различные минеральные вещества и витамины.

Бактерии-пробиотики предпочтительно добавляют в форме заранее приготовленной смеси, содержащей носитель и необязательно защитные агенты. Носители для бактерий-пробиотиков хорошо известны специалистам в области введения бактерий-пробиотиков в продукты. Таким носителем предпочтительно является углевод, например мальтодекстрин. Специалистам в данной области известно множество различных защитных агентов. Особенно подходящими защитными агентами являются те, которые описаны в совместно рассматриваемой заявке на патент PCT/EP16/065359 того же заявителя.

Стадии введения бактерий-пробиотиков и стадия введения источника железа могут проводиться с использованием любого, известного в данной области, способа смешивания таких типов ингредиентов с порошковой композицией. Например, введение можно осуществлять посредством сухого смешения, путем непосредственной подачи в башню для распылительной сушки, в псевдоожиженный слой, в устройство для нанесения покрытия или агломератор или на заключительной стадии экструзии или вальцовой сушки. Бактерии-пробиотики и/или источник железа предпочтительно смешивают с композицией в форме порошка посредством сухого смешения или введением в псевдоожиженный слой. Бактерии-пробиотики и/или источник железа наиболее предпочтительно смешивать с композицией в форме порошка посредством сухого смешения.

В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере 50 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 60 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 70 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 80 мас.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 90 мас.% добавленного железа в композиции находится в форме источника железа, как определено выше. Еще более предпочтительно источник железа, как определено выше, по существу, является единственным добавленным источником железа в композиции. Наиболее предпочтительно источник железа, как определено выше, является единственным добавленным источником железа в композиции.

Применение определенных источников железа для обогащения композиции в форме порошка

Для обогащения композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере один вид бактерий-пробиотиков, можно преимущественно использовать цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) и их смеси. Такие источники железа преимущественным образом обеспечивают биодоступное железо, в то же время не вызывая значительной потери жизнеспособности бактерий-пробиотиков в процессе растворения порошка в жидкости, например в воде.

Моногидрат сульфата железа (II) является одним из наиболее биодоступных источников железа (средняя биодоступность в организме человека 100%, как описано в Hurrell, Iron Fortification of Foods, Acad. Press Inc., 1985), поэтому моногидрат сульфата железа (II) является предпочтительным источником железа для цели настоящего изобретения.

Цитрат железа (II) также преимущественно характеризуется хорошей биодоступностью (средняя биодоступность в организме человека 74%, как описано в Hurrell, Iron Fortification of Foods, Acad. Press Inc., 1985). По этой причине он предпочтителен по сравнению с цитратом железа (III), который отличается хорошей биодоступностью в организме крыс (75%), но менее биодоступен для организма человека (31%), как отмечается в Hurrell, Iron Fortification of Foods, Acad. Press Inc., 1985).

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу обогащения композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере один вид бактерий-пробиотиков, причем указанный способ включает в себя следующие стадии:

b) введение источника железа в первую композицию в форме порошка для получения второй композиции в форме порошка; и

при этом источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

Первая композиция в форме порошка, вторая композиция в форме порошка и стадии способа соответствуют приведенному в разделе выше описанию способа получения композиции настоящего изобретения. Кроме того, композиция в форме порошка, источник железа и бактерии-пробиотики соответствуют описанию в любом из вариантов осуществления в разделе «Композиция».

Композиция для применения в способе профилактики, снижения и/или лечения дефицита железа

Композиция настоящего изобретения обогащена биодоступным источником железа, как описано выше. Настоящее изобретение также относится к композиции для применения в способе профилактики, снижения и/или лечения дефицита железа у субъекта. Для этой цели предпочтительными являются цитрат железа (II) и моногидрат сульфата железа (II), при этом наиболее предпочтительным источником железа является моногидрат сульфата железа (II).

Способ получения продукта

Изобретение относится к способу получения продукта, предпочтительно пищевого продукта, включающего растворение в жидкости композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, отличающейся тем, что источник железа выбран из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей.

Композиция в форме порошка, бактерии-пробиотики и источник железа соответствуют определениям, приведенным в любом из вариантов осуществления, описанных выше.

Применение источника железа, выбранного из цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) и их смесей, наиболее преимущественно, если композицию в форме порошка растворяют в жидкости. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что бактерии-пробиотики особенно чувствительны во время регидратации и что потеря жизнеспособности была особенно остро выраженной при растворении композиции в форме порошка в жидкости, например в воде. Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) и их смеси не вызывали значительной потери жизнеспособности бактерий-пробиотиков в этот критический момент, в отличие от распространенных источников железа, таких как гептагидрат сульфата железа (II) или растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой.

Растворение предпочтительно проводится с использованием водной жидкости, наиболее предпочтительно, воды. Количество жидкости, предпочтительно воды, добавляемой для растворения, зависит от типа приготовляемого продукта. Ключевым для цели настоящего изобретения является то, что для восстановления естественного содержания влаги у бактерий-пробиотиков, добавляют достаточное количество жидкости.

Продукт

Изобретение также относится к продукту, предпочтительно к пищевому продукту, который получаемого или полученного с помощью способа, описанного выше. Такой продукт содержит композицию в форме порошка, как определено в любом варианте осуществления настоящего изобретения, растворенную в жидкости. Его предпочтительно растворяют в водной жидкости, предпочтительно в воде.

Такой продукт предпочтительно представляет собой питательный продукт, полученный растворением питательной композиции, как описано выше.

Способ обеспечения питанием

Также рассмотрен способ обеспечения питанием субъекта, включающий вскармливание субъекта пищевым продуктом настоящего изобретения предпочтительно питательным продуктом настоящего изобретения. Использованный в данном способе продукт представляет собой композицию продукта или напитка. Предпочтительно он представляет собой питательную композицию, как определено выше. Такие продукты являются наиболее преимущественными, поскольку содержат биодоступный источник железа и стабильные концентрации бактерий-пробиотиков, поскольку добавленный источник железа не вызывает значительной потери бактерий-пробиотиков.

В одном варианте осуществления способ включает в себя следующие стадии:

a) растворение пищевой композиции в форме порошка в соответствии с любыми вариантами осуществления изобретения; и

b) кормление субъекта растворенной композицией.

В одном варианте осуществления субъектом является субъект, страдающий от нехватки железа, или субъект, подверженный риску развития нехватки железа. В другом варианте осуществления субъектом является младенец, ребенок младшего возраста или беременная или кормящая мать.

В другом предпочтительном варианте осуществления пищевая композиция представляет собой питательную композицию.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции в соответствии с настоящим изобретением для применения в способе обеспечения питанием субъекта. Таким субъектом предпочтительно является субъект в соответствии с приведенным выше определением.

Способ предотвращения или снижения потери бактерий-пробиотиков

Изобретение относится к способу снижения или предотвращения потерь бактерий-пробиотиков в процессе растворения композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и добавленный источник железа, отличающейся тем, что в качестве добавленного источника железа используют цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) или их смеси.

Бактерии-пробиотики, добавленный источник железа и композиция в форме порошка соответствуют описанным в любом варианте осуществления раздела «Композиция».

В предпочтительном варианте осуществления цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) или их смесь составляют по меньшей мере 50 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 60 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 70 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 80 мас.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 90 мас.% добавленного железа в композиции. Более предпочтительно цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) или их смесь, по существу, являются единственным добавленным источником железа, используемым в композиции. Наиболее предпочтительно цитрат железа (II), цитрат железа (III), моногидрат сульфата железа (II) или их смесь являются единственным добавленным источником железа в композиции. Иными словами, композиция не содержит других соединений железа (II) или железа (III), добавленных в композицию в качестве источника железа.

Авторы настоящего изобретения продемонстрировали, что использование цитрата железа (II), цитрата железа (III), моногидрата сульфата железа (II) вместо других обычно добавляемых источников железа, таких как гептагидрат сульфата железа (II) или растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, может позволить предотвратить или по меньшей мере значительно снизить потерю бактерий-пробиотиков в момент растворения композиции.

Добавленный источник железа оказывает существенное влияние на выживание бактерий-пробиотиков, тогда как влияние источников железа, присутствующих в составе ингредиента, который главным образом вводят не в целях добавки железа, оказывается гораздо меньше по причине сложного состава таких ингредиентов. Среди прочих причин железо, которое они содержат, как правило, не проявляется в качестве свободного железа во время растворения композиции и, таким образом, имеет пониженное потенциально вредное воздействие на бактерии-пробиотики.

Настоящее изобретение будет более подробно описано ниже с помощью следующих примеров.

Пример 1. Влияние источника железа на выживаемость Lactobacillus rhamnosus

Было приготовлено пять композиций в форме порошка (образцы с A по D), каждый из которых содержал высушенный штамм Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724), источник железа и 100 г мальтодекстрина. Сводные данные для композиции из пяти образцов приведены ниже в таблице 1.

Образцы получали следующим образом. Мальтодекстрин, сухой порошок пробиотика и источник железа одновременно добавляли в пластиковый химический стакан емкостью 500 мл и перемешивали в течение 5 минут при 34 об/мин с использованием смесителя для сухого смешивания Turbula^® T2F (WAB, Швейцария). Только что перемешанный образец в количестве 25 г разбавляли в соотношении 1/10 в водном растворе триптоновой соли с добавлением противовспенивающего агента при 37 °C. После 5 минут гомогенизации с использованием Masticator^® (IUL, Испания) проводили десятичные разведения. Результат соответствующего разведения в виде 30–300 колоний после инкубации переносили в чашку Петри и смешивали с агаром MRS в соответствии с чашечным методом. После отверждения планшеты инкубировали при 37°C в аэробных условиях. Через 48 ч инкубации проводили подсчет колоний, присутствующих на планшетах.

Таблица 1. Композиция образцов A–D

Ингредиент	Образец A	Образец B	Образец C	Образец D	Образец E
Высушенный L. rhamnosus ¹⁾	90 мг	90 мг	90 мг	90 мг	90 мг
Источник железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой²⁾	0 мг	119 мг	0 мг	357 мг	0 мг
Источник железа: моногидрат сульфата железа (II)³⁾	0 мг	0 мг	31 мг	0 мг	92 мг
Мальтодекстрин	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г
Количество Fe²⁺, обеспечиваемое источником железа	0 мг	10 мг	10 мг	30 мг	30 мг

1) Высушенный распылительной сушкой Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724) в мальтодекстриновой матрице. Общее количество живых бактерий в композиции составляет 3,1 E + 10 КОЕ/г.

2) Полученный растворением сульфата железа (II) в воде при pH2 и распылительной сушкой в мальтодекстриновой матрице. Этот источник железа содержит 8,4 мас.% Fe²⁺.

3) Моногидрат сульфата железа (II), сухой мелкодисперсный порошок FCC8, содержащий 32,7 мас.% Fe²⁺, поставщик: Dr. Paul Lohmann

Результаты приведены на Фиг. 1. Из приведенного графика очевидно, что при использовании гептагидрата сульфата железа (II) наблюдалась значительная потеря живых L. rhamnosus в растворенных композициях. Напротив, при использовании моногидрата сульфата железа (II) в тех же условиях с тем же количеством L. rhamnosus и тем же количеством Fe²⁺ значительная потеря L. rhamnosus не наблюдалась.

Пример 2. Влияние источника железа на выживаемость Bifidobacterium longum

Было приготовлено семь композиций в форме порошка (образцы с Е по К), каждый из которых содержал высушенный штамм Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999), источник железа и 100 г мальтодекстрина. Сводные данные для композиции из семи образцов приведены ниже в таблице 2.

Таблица 2. Композиция образцов E–K

Ингредиент	Образец E	Образец F	Образец G	Образец H	Образец I	Образец J	Образец K
Высушенный B. longum¹⁾	130 мг	130 мг	130 мг	130 мг	130 мг	130 мг	130 мг
Источник железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой²⁾	0 мг	60 мг	0 мг	298 мг	0 мг	595 мг	0 мг
Источник железа: моногидрат сульфата железа (II)³⁾	0 мг	0 мг	15 мг	0 мг	76 мг	0 мг	153 мг
Мальтодекстрин	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г
Количество Fe²⁺, обеспечиваемое источником железа	0 мг	5 мг	5 мг	25 мг	25 мг	50 мг	50 мг

1) Высушенный распылительной сушкой Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999) в мальтодекстриновой матрице. Общее количество живых бактерий в композиции составляет 3,1 E + 10 КОЕ/г.

Образцы получали следующим образом. Мальтодекстрин, сухой порошок пробиотика и источник железа одновременно добавляли в пластиковый химический стакан емкостью 500 мл и перемешивали в течение 5 минут при 34 об/мин с использованием смесителя для сухого смешивания Turbula^® T2F (WAB, Швейцария). Только что перемешанный образец в количестве 25 г разбавляли в соотношении 1/10 в водном растворе триптоновой соли с добавлением противовспенивающего агента при 37°C. После 5 минут гомогенизации с использованием Masticator^® (IUL, Испания) проводили десятичные разведения. Результат соответствующего разведения в виде 30–300 колоний после инкубации переносили в чашку Петри и смешивали с агаром RCA в соответствии с чашечным методом. После отверждения планшеты инкубировали при 37°C в анаэробных условиях. Через 48 ч инкубации проводили подсчет колоний, присутствующих на планшетах.

Результаты приведены на Фиг. 2. Из приведенного графика очевидно, что при использовании гептагидрата сульфата железа (II) наблюдается значительная потеря живых Bifidobacterium longum в растворенных композициях. Напротив, при использовании моногидрата сульфата железа (II) в тех же условиях с тем же количеством Bifidobacterium longum и тем же количеством Fe²⁺ значительная потеря Bifidobacterium longum не наблюдалась.

Пример 3. Влияние источника железа на выживаемость Lactobacillus paracasei

Было приготовлено семь композиций в форме порошка (образцы с L по R), каждый из которых содержал высушенный штамм Lactobacillus paracasei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2116), источник железа и 100 г мальтодекстрина. Сводные данные для композиции из семи образцов приведены ниже в таблице 3.

Результаты приведены на Фиг. 3. Из приведенного графика очевидно, что при использовании растворенного сульфата железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой, наблюдалась значительная потеря живых Lactobacillus paracasei в растворенных композициях. Напротив, при использовании моногидрата сульфата железа (II) в тех же условиях с тем же количеством Lactobacillus paracasei и тем же количеством Fe²⁺ значительная потеря Lactobacillus paracasei не наблюдалась.

Таблица 3. Композиция образцов L–R

Ингредиент	Образец L	Образец M	Образец N	Образец O	Образец P	Образец Q	Образец R
Высушенный L. paracasei¹⁾	85 мг	85 мг	85 мг	85 мг	85 мг	85 мг	85 мг
Источник железа: растворенный сульфат железа (II) в форме, полученной распылительной сушкой²⁾	0 мг	60 мг	0 мг	298 мг	0 мг	595 мг	0 мг
Источник железа: моногидрат сульфата железа (II)³⁾	0 мг	0 мг	15 мг	0 мг	76 мг	50 мг	153 мг
Мальтодекстрин	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г
Количество Fe²⁺, обеспечиваемое источником железа	0 мг	5 мг	5 мг	25 мг	25 мг	50 мг	50 мг

1) Высушенный распылительной сушкой Lactobacillus paracasei (которому был присвоен депозитный номер CNCM I-2116) в мальтодекстриновой матрице. Общее количество живых бактерий в композиции составляет 3,1 E + 10 КОЕ/г.

Пример 4. Влияние источника железа на выживаемость Lactobacillus rhamnosus

Было приготовлено пять композиций в форме порошка (образцы с S по W), каждый из которых содержал высушенный штамм Lactobacillus rhamnosus (которому был присвоен депозитный номер CGMCC 1.3724), источник железа и 100 г порошка детской смеси. Сводные данные для композиции из пяти образцов приведены ниже в таблице 4.

Таблица 4. Композиция образцов S–W

Ингредиент	Образец S	Образец T	Образец U	Образец V	Образец W
Высушенный L. rhamnosus ¹⁾	90 мг	90 мг	90 мг	90 мг	90 мг
Источник железа: гептагидрат сульфата железа (II)²⁾	0 мг	119 мг	0 мг	357 мг	0 мг
Источник железа: кристаллический моногидрат сульфата железа (II)³⁾	0 мг	0 мг	31 мг	0 мг	92 мг
Порошок детской смеси⁴⁾	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г
Количество Fe²⁺, обеспечиваемое источником железа	0 мг	10 мг	10 мг	30 мг	30 мг

4) Nestogen 1, поставщик: Nestlé

Образцы получали следующим образом. Порошок детской смеси, сухой порошок пробиотика и источник железа одновременно добавляли в пластиковый химический стакан емкостью 500 мл и перемешивали в течение 5 минут при 34 об/мин с использованием смесителя для сухого смешивания Turbula^® T2F (WAB, Швейцария). Только что перемешанный образец в количестве 25 г разбавляли в соотношении 1/10 в водном растворе триптоновой соли с добавлением противовспенивающего агента при 37°C. После 5 минут гомогенизации с использованием Masticator^® (IUL, Испания) проводили десятичные разведения. Результат соответствующего разведения в виде 30–300 колоний после инкубации переносили в чашку Петри и смешивали с агаром MRS в соответствии с чашечным методом. После отверждения планшеты инкубировали при 37 °C в аэробных условиях. Через 48 ч инкубации проводили подсчет колоний, присутствующих на планшетах.

Результаты приведены на Фиг. 4. Из приведенного графика очевидно, что при использовании гептагидрата сульфата железа (II) наблюдалась значительная потеря живых L. rhamnosus в растворенных композициях. Напротив, при использовании моногидрата сульфата железа (II) в тех же условиях с тем же количеством L. rhamnosus и тем же количеством Fe²⁺ значительная потеря L. rhamnosus не наблюдалась. Эти результаты, полученные для сбалансированной композиции детской смеси, согласуются с результатами, полученными в примере 1, для экспериментальной композиции, содержащей мальтодекстрин. Это показывает, что моногидрат сульфата железа (II) обладает преимуществами по сравнению с гептагидратом сульфата железа (II) даже в сложной по составу матрице продукта.

Пример 5. Влияние источника железа на выживаемость Bifidobacterium longum

Было приготовлено пять композиций в форме порошка (образцы с X по Z и с АА по ВВ), каждый из которых содержал высушенный штамм Bifidobacterium longum (которому был присвоен депозитный номер ATCC BAA-999), источник железа и 100 г порошка детской смеси. Сводные данные для композиции из пяти образцов приведены ниже в таблице 5.

Таблица 5. Композиция образцов X–Z и AA–BB

Ингредиент	Образец X	Образец Y	Образец Z	Образец АА	Образец BB
Высушенный B. longum	100 мг	100 мг	100 мг	100 мг	100 мг
Источник железа: гептагидрат сульфата железа (II)¹⁾	0 мг	298 мг	0 мг	595 мг	0 мг
Источник железа: кристаллический моногидрат сульфата железа (II)²⁾	0 мг	0 мг	77 мг	0 мг	154 мг
Порошок детской смеси⁴⁾	100 г	100 г	100 г	100 г	100 г
Количество Fe²⁺, обеспечиваемое источником железа	0 мг	25 мг	25 мг	50 мг	50 мг

4) Nestogen 1, поставщик: Nestlé

Образцы получали следующим образом. Порошок детской смеси, сухой порошок пробиотика и источник железа одновременно добавляли в пластиковый химический стакан емкостью 500 мл и перемешивали в течение 5 минут при 34 об/мин с использованием смесителя для сухого смешивания Turbula^® T2F (WAB, Швейцария). Только что перемешанный образец в количестве 25 г разбавляли в соотношении 1/10 в водном растворе триптоновой соли с добавлением противовспенивающего агента при 37 °C. После 5 минут гомогенизации с использованием Masticator^® (IUL, Испания) проводили десятичные разведения. Результат соответствующего разведения в виде 30–300 колоний после инкубации переносили в чашку Петри и смешивали с агаром RCA в соответствии с чашечным методом. После отверждения планшеты инкубировали при 37 °C в анаэробных условиях. Через 48 ч инкубации проводили подсчет колоний, присутствующих на планшетах.

Результаты приведены на Фиг. 5. Из приведенного графика очевидно, что при использовании гептагидрата сульфата железа (II) наблюдается значительная потеря живых Bifidobacterium longum в растворенных композициях. Напротив, при использовании моногидрата сульфата железа (II) в тех же условиях с тем же количеством Bifidobacterium longum и тем же количеством Fe²⁺ значительная потеря Bifidobacterium longum не наблюдалась. Эти результаты, полученные для сбалансированной композиции детской смеси, согласуются с результатами, полученными в примере 2, для экспериментальной композиции, содержащей мальтодекстрин. Это показывает, что моногидрат сульфата железа (II) обладает преимуществами по сравнению с гептагидратом сульфата железа (II) даже в сложной по составу матрице продукта.

Claims

1. Композиция в форме порошка, содержащая по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, отличающаяся тем, что источником железа является моногидрат сульфата железа (II), при этом композиция представляет собой питательную композицию, выбранную из детской смеси, молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, детской композиции на зерновой основе, обогатителя, добавки и питательной композиции для беременных или кормящих женщин.

2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что композиция является пищевой композицией.

3. Композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что композиция должна быть растворена в жидкости перед применением.

4. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что источник железа присутствует в количестве, достаточном для обеспечения от 1 до 300 мг железа на 100 г композиции.

5. Применение моногидрата сульфата железа (II) в составе композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик, для снижения или предотвращения потерь бактерий-пробиотиков в процессе растворения композиции в форме порошка.

6. Пищевая композиция в форме порошка, содержащая по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и добавленный источник железа, для применения в целях профилактики, снижения и/или лечения дефицита железа у субъекта, отличающаяся тем, что добавленным источником железа является моногидрат сульфата железа (II).

7. Способ получения композиции в форме порошка, включающий:

a. приготовление первой композиции в форме порошка;

b. введение источника железа в первую композицию в форме порошка для формирования второй композиции в форме порошка; и

c. введение по меньшей мере одной бактерии-пробиотика в первую композицию в форме порошка до источника железа или одновременно с ним или введение по меньшей мере одной бактерии-пробиотика во вторую композицию в форме порошка после добавления источника железа,

отличающийся тем, что источником железа является моногидрат сульфата железа (II).

8. Способ получения продукта, включающий растворение в жидкости композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и источник железа, отличающийся тем, что источником железа является моногидрат сульфата железа (II).

9. Способ снижения или предотвращения потерь бактерий-пробиотиков в процессе растворения композиции в форме порошка, содержащей по меньшей мере одну бактерию-пробиотик и добавленный источник железа, отличающийся тем, что в качестве добавленного источника железа используют моногидрат сульфата железа (II).