CN109884046A - 一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，具体包括以下步骤：准备检测所需物品；试剂管反应；使用OXI‑CHECKER呼吸式快速自由基检测仪对试剂管内试剂的颜色变化进行分析并得出评分。本发明可以快速采集人体呼出气体中的冷凝物与自由基标记物(醛类)，并准确的分析试剂的颜色和RGB数值，利用计算公式换算出最终的自由基评估分数，在3分钟内可以准确的得出检测结果，比传统的血液检测和尿液检测更加快速，便捷，无需专业人士操作，随时，随地可以准确的自我检测自由基的状态。
Description
技术领域
本发明涉及生物学技术领域，具体是一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法。
背景技术
当化学实体间的共价键断开时，其中一个电子留下，新形成了一个原子，这时极易形成自由基，由于孤电子的存在，自由基具有极高的反应性。细胞膜和低密度脂蛋白中含有丰富的多不饱和脂肪酸。多不饱和脂肪酸使得细胞膜具有流动相，自由基尤其喜欢攻击细胞，从其质膜上夺取电子，这就是所谓的脂质过氧化。活性氧以多不饱和脂肪酸的碳碳双键为目标，因为碳碳双键削弱了碳氢单键，这就使得自由基能够轻易地解离碳氢键。自由基将从双键位置处与碳原子相关的氢原子上夺取一个单电子，随后碳原子上留下了一个孤电子，继而形成了一个自由基。为了努力稳定以碳为中心的自由基，分子进行了重排，新排好分子称为共轭双烯，该共轭双烯极易与氧反应形成过氧自由基，随后过氧自由基在扩增过程中又从另一个脂质分子上夺取了一个电子，接下来的链反应中这个过程仍然继续，当脂肪酸被过氧化时，它会分解成醛类，随后可在呼气被排出体外。
自由基在健康和疾病过程中均发挥着非常重要的作用，它们会参与人体疾病过程，对于代谢过程非常重要。饮食、活动、应激、化学品和污染物等外部因素会导致我们的身体产生过多的自由基，它们会损害健康细胞，这就会导致心血管疾病、癌症和快速老化等健康问题。
传统的自由基检测需要到专业的医疗机构和专业人士的操作才能得出结果，检测结果耗时很长，不够快速、便捷，不能随时的自我检测自由基状态，很不方便。因此，本发明提供一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，具体包括以下步骤：
一、准备检测所需物品
准备一个含有微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管以及一台OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪；
二、试剂管反应
a.使用者手持OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管，并向OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管吹气；
b.人体内呼出气体中的自由基标记物与OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管内的自由基检测感光粉末试剂发生反应；
c.自由基检测感光粉末试剂与自由基标记物反应后逐渐出现变色，颜色从黄色逐渐变为粉红色、粉紫色直至变为紫色；
三、OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪对试剂管内试剂的颜色变化进行分析并得出评分
a.试剂管中反应后的试剂在440nm、530nm、570nm光谱区内相关性较好，且在440nm波长处浓度和吸光度(透光率)达到最高的相关性；
b.将步骤二中反应后的试剂管插入OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪中，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪分析试剂管中反应后的RGB分值；
c.依据步骤a在440nm、530nm、570nm波长处RGB中感光性最强的颜色为B(蓝色)和G(绿色)，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪自动设置读取试剂颜色中的B和G的比重，利用B和G的比重，计算得出0-1000的评分，此评分与呼出气体中的自由基标记物含量有关，评分越高说明自由基水平越高。
作为本发明进一步的方案，所述步骤三中计算评分的具体方法如下：
a.先求试剂的RGB分值：仪器读取R＝X，G＝Y，B＝Z分值；
b.再求RGB值的各比重：GP＝G/(X+Y+Z),BP＝B/(X+Y+Z)；
c.G的分数：Gscore＝GP*K+M；
d.B的分数：Bscore＝BP*K+M；
e.自由基的评分分数：Score＝(Gscore+Bscore)/2；
其中，K为斜率，M为截距。
作为本发明再进一步的方案，所述步骤一中OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管中微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的配方如下：二氧化硅、碱性品红、焦亚硫酸钠、85％磷酸、去离子水、活性炭或骨炭。
作为本发明再进一步的方案，所述感光粉末试剂中二氧化硅的颗粒大小在20-50目之间。
作为本发明再进一步的方案，所述感光粉末试剂中各原料用量如下：碱性品红2.5-5克、焦亚硫酸钠10克、85％磷酸20毫升、去离子水1000毫升、活性炭或骨炭30克。
作为本发明再进一步的方案，所述感光粉末试剂的制备工艺如下：
(1)二氧化硅预处理
1)将85％的磷酸稀释成2％-5％的磷酸溶液；
2)2％-5％磷酸与二氧化硅按2:1混合；
3)两者混合，搅拌后，放入恒温干燥箱中干燥，直到干燥到目标重量；
(2)品红液体试剂配制
1)先提取所需量的去离子水，然后加入焦亚硫酸钠；
2)待焦亚硫酸钠全部溶解后再加入碱性品红，边加入边搅拌；
3)待碱性品红全部溶解后加入活性炭或骨炭搅拌，静置，过滤；
4)然后用85％的磷酸调节步骤3)中过滤后溶液PH值，保证溶液的PH值在1.75-1.85之间；
(3)试剂混合
1)将预处理后的二氧化硅与步骤(2)中配制的液体试剂按1:2的比例混合，混合之前将配制的液体试剂用磷酸溶液稀释，保证最终液体的PH值在1.75-1.85之间；
2)混合均匀后放入恒温干燥箱中干燥，干燥至目标重量；
3)干燥冷却后倒入棕色玻璃瓶中，充入氩气排出空气后盖上盖子密封保存。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明可以快速采集人体呼出气体中的冷凝物与自由基标记物(醛类)，并准确的分析试剂的颜色和RGB数值，利用计算公式换算出最终的自由基评估分数，在3分钟内可以准确的得出检测结果，比传统的血液检测和尿液检测更加快速，便捷，无需专业人士操作，随时，随地可以准确的自我检测自由基的状态。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，具体包括以下步骤：
一、准备检测所需物品
准备一个含有微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管以及一台OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪；
二、试剂管反应
a.使用者手持OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管，并向OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管吹气；
b.人体内呼出气体中的自由基标记物与OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管内的自由基检测感光粉末试剂发生反应；
c.自由基检测感光粉末试剂与自由基标记物反应后逐渐出现变色，颜色从黄色逐渐变为粉红色、粉紫色直至变为紫色；
三、使用OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪对试剂管内试剂的颜色变化进行分析并得出评分
a.试剂管中反应后的试剂在440nm、530nm、570nm光谱区内相关性较好，且在440nm波长处浓度和吸光度(透光率)达到最高的相关性；
b.将步骤二中反应后的试剂管插入OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪中，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪分析试剂管中反应后的RGB分值；
c.依据步骤a在440nm、530nm、570nm波长处RGB中感光性最强的颜色为B(蓝色)和G(绿色)，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪自动设置读取试剂颜色中的B和G的比重，利用B和G的比重，计算得出0-1000的评分，此评分与呼出气体中的自由基标记物含量有关，评分越高说明自由基水平越高。
所述步骤三中计算评分的具体方法如下：
a.先求试剂的RGB分值：仪器读取R＝X，G＝Y，B＝Z分值；
b.再求RGB值的各比重：GP＝G/(X+Y+Z),BP＝B/(X+Y+Z)；
c.G的分数：Gscore＝GP*K+M；
d.B的分数：Bscore＝BP*K+M；
e.自由基的评分分数：Score＝(Gscore+Bscore)/2；
其中，K为斜率，M为截距。
所述步骤一中OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管中微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的配方如下：二氧化硅、碱性品红、焦亚硫酸钠、85％磷酸、去离子水、活性炭。
所述感光粉末试剂中二氧化硅的颗粒大小在20目。
所述感光粉末试剂中各原料用量如下：碱性品红2.5克、焦亚硫酸钠10克、85％磷酸20毫升、去离子水1000毫升、活性炭30克。
所述感光粉末试剂的制备工艺如下：
(1)二氧化硅预处理
1)将85％的磷酸稀释成2％-5％的磷酸溶液；
2)2％-5％磷酸与二氧化硅按2:1混合；
3)两者混合，搅拌后，放入恒温干燥箱中干燥，直到干燥到目标重量。
(2)品红液体试剂配制
1)先提取所需量的去离子水，然后加入焦亚硫酸钠；
2)待焦亚硫酸钠全部溶解后再加入碱性品红，边加入边搅拌；
3)待碱性品红全部溶解后加入活性炭搅拌，静置，过滤；
4)然后用85％的磷酸调节步骤3)中过滤后溶液PH值，保证溶液的PH值在1.75-1.85之间。
(3)试剂混合
1)将预处理后的二氧化硅与步骤(2)中配制的液体试剂按1:2的比例混合，混合之前将配制的液体试剂用磷酸溶液稀释，保证最终液体的PH值在1.75-1.85之间；
2)混合均匀后放入恒温干燥箱中干燥，干燥至目标重量；
3)干燥冷却后倒入棕色玻璃瓶中，充入氩气排出空气后盖上盖子密封保存。
实施例2
一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，具体包括以下步骤：
一、准备检测所需物品
准备一个含有微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管以及一台OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪；
二、试剂管反应
a.使用者手持OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管，并向OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管吹气；
b.人体内呼出气体中的自由基标记物与OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管内的自由基检测感光粉末试剂发生反应；
c.自由基检测感光粉末试剂与自由基标记物反应后逐渐出现变色，颜色从黄色逐渐变为粉红色、粉紫色直至变为紫色；
三、使用OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪对试剂管内试剂的颜色变化进行分析并得出评分
a.试剂管中反应后的试剂在440nm、530nm、570nm光谱区内相关性较好，且在440nm波长处浓度和吸光度(透光率)达到最高的相关性；
b.将步骤二中反应后的试剂管插入OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪中，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪分析试剂管中反应后的RGB分值；
c.依据步骤a在440nm、530nm、570nm波长处RGB中感光性最强的颜色为B(蓝色)和G(绿色)，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪自动设置读取试剂颜色中的B和G的比重，利用B和G的比重，计算得出0-1000的评分，此评分与呼出气体中的自由基标记物含量有关，评分越高说明自由基水平越高。
所述步骤三中计算评分的具体方法如下：
a.先求试剂的RGB分值：仪器读取R＝X，G＝Y，B＝Z分值；
b.再求RGB值的各比重：GP＝G/(X+Y+Z),BP＝B/(X+Y+Z)；
c.G的分数：Gscore＝GP*K+M；
d.B的分数：Bscore＝BP*K+M；
e.自由基的评分分数：Score＝(Gscore+Bscore)/2；
其中，K为斜率，M为截距。
所述步骤一中OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管中微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的配方如下：二氧化硅、碱性品红、焦亚硫酸钠、85％磷酸、去离子水、骨炭。
所述感光粉末试剂中二氧化硅的颗粒大小在50目。
所述感光粉末试剂中各原料用量如下：碱性品红5克、焦亚硫酸钠10克、85％磷酸20毫升、去离子水1000毫升、骨炭30克。
所述感光粉末试剂的制备工艺如下：
(1)二氧化硅预处理
1)将85％的磷酸稀释成2％-5％的磷酸溶液；
2)2％-5％磷酸与二氧化硅按2:1混合；
3)两者混合，搅拌后，放入恒温干燥箱中干燥，直到干燥到目标重量。
(2)品红液体试剂配制
1)先提取所需量的去离子水，然后加入焦亚硫酸钠；
2)待焦亚硫酸钠全部溶解后再加入碱性品红，边加入边搅拌；
3)待碱性品红全部溶解后加入骨炭搅拌，静置，过滤；
4)然后用85％的磷酸调节步骤3)中过滤后溶液PH值，保证溶液的PH值在1.75-1.85之间；
(3)试剂混合
1)将预处理后的二氧化硅与步骤(2)中配制的液体试剂按1:2的比例混合，混合之前将配制的液体试剂用磷酸溶液稀释，保证最终液体的PH值在1.75-1.85之间；
2)混合均匀后放入恒温干燥箱中干燥，干燥至目标重量；
3)干燥冷却后倒入棕色玻璃瓶中，充入氩气排出空气后盖上盖子密封保存。
本发明可以快速采集人体呼出气体中的冷凝物与自由基标记物(醛类)，并准确的分析试剂的颜色和RGB数值，利用计算公式换算出最终的自由基评估分数，在3分钟内可以准确的得出检测结果，比传统的血液检测和尿液检测更加快速，便捷，无需专业人士操作，随时，随地可以自我检测自由基的状态。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式。
Claims (6)
1.一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
一、准备检测所需物品
准备一个含有微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的OXI-CHECKER呼吸式自快速由基检测仪试剂管以及一台OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪；
二、试剂管反应
a.使用者手持OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管，并向OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管吹气；
b.人体内呼出气体中的自由基标记物与OXI-CHECKER呼吸式自快速由基检测仪试剂管内的自由基检测感光粉末试剂发生反应；
c.自由基检测感光粉末试剂与自由基标记物反应后逐渐出现变色，颜色从黄色逐渐变为粉红色、粉紫色直至变为紫色；
三、使用OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪对试剂管内试剂的颜色变化进行分析并得出评分
a.试剂管中反应后的试剂在440nm、530nm、570nm光谱区内相关性较好，且在440nm波长处浓度和吸光度(透光率)达到最高的相关性；
b.将步骤二中反应后的试剂管插入OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪中，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪分析试剂管中反应后的RGB分值；
c.依据步骤a在440nm、530nm、570nm波长处RGB中感光性最强的颜色为B(蓝色)和G(绿色)，OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪自动设置读取试剂颜色中的B和G的比重，利用B和G的比重，计算得出0-1000的评分。
2.根据权利要求1所述的一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，所述步骤三中计算评分的具体方法如下：
a.先求试剂的RGB分值：仪器读取R＝X，G＝Y，B＝Z分值；
b.再求RGB值的各比重：GP＝G/(X+Y+Z),BP＝B/(X+Y+Z)；
c.G的分数：Gscore＝GP*K+M；
d.B的分数：Bscore＝BP*K+M；
e.自由基的评分分数：Score＝(Gscore+Bscore)/2；
其中，K为斜率，M为截距。
3.根据权利要求1所述的一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，所述步骤一中OXI-CHECKER呼吸式快速自由基检测仪试剂管中微颗粒催化生物传感自由基检测感光粉末试剂的配方如下：二氧化硅、碱性品红、焦亚硫酸钠、85％磷酸、去离子水、活性炭或骨炭。
4.根据权利要求3所述的一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，所述感光粉末试剂中二氧化硅的颗粒大小在20-50目之间。
5.根据权利要求3所述的一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，所述感光粉末试剂中各原料用量如下：碱性品红2.5-5克、焦亚硫酸钠10克、85％磷酸20毫升、去离子水1000毫升、活性炭或骨炭30克。
6.根据权利要求3-5中任一项所述的一种呼吸式采集自由基标记物的快速检测方法，其特征在于，所述感光粉末试剂的制备工艺如下：
(1)二氧化硅预处理
1)将85％的磷酸稀释成2％-5％的磷酸溶液；
2)2％-5％磷酸与二氧化硅按2:1混合；
3)两者混合，搅拌后，放入恒温干燥箱中干燥，直到干燥到目标重量；
(2)品红液体试剂配制
1)先提取所需量的去离子水，然后加入焦亚硫酸钠；
2)待焦亚硫酸钠全部溶解后再加入碱性品红，边加入边搅拌；
3)待碱性品红全部溶解后加入活性炭或骨炭搅拌，静置，过滤；
4)然后用85％的磷酸调节步骤3)中过滤后溶液PH值，保证溶液的PH值在1.75-1.85之间；
(3)试剂混合
1)将预处理后的二氧化硅与步骤(2)中配制的液体试剂按1:2的比例混合，混合之前将配制的液体试剂用磷酸溶液稀释，保证最终液体的PH值在1.75-1.85之间；
2)混合均匀后放入恒温干燥箱中干燥，干燥至目标重量；
3)干燥冷却后倒入棕色玻璃瓶中，充入氩气排出空气后盖上盖子密封保存。
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