CN109847090B - 一种具有抗菌、柔软特性的卫生巾 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种具有较为广谱性的抗菌肽用于制备抗菌卫生巾，不仅能够广谱性的杀灭微生物，还具有较好的透气性，适宜大规模推广应用。

Description

一种具有抗菌、柔软特性的卫生巾

技术领域

本发明属于生活用品领域，具体涉及一种具有抗菌、柔软特性的卫生巾及其制备方法。

背景技术

卫生巾作为女性的日常生活用品，其主要构成材料是PE膜，高分子复合纸，高分子吸收体，部分卫生巾还会有一些特殊材料，如清爽因子含有薄荷脑、鱼腥草和洗必泰等中西药成分，这些成分具有消炎、解毒、清热作用，使用时有清凉舒适的感觉。同时在一定程度上抑制细菌生长。

目前，市场上的卫生巾样式繁多，功能多样，以味道清香、具有抗菌作用和能防治妇科病等作为卖点的卫生巾吸引了不少女性消费者。专家提醒，卫生巾使用不当易引发妇科病。

市面上的药物卫生巾一般都宣称有抗菌、止痒等保健功效。这对患有妇科疾病的女性或许管用，但健康女性就没必要使用。统计资料表明，在妇科病门诊就诊的病人中，有3％一5％的病人是因卫生巾使用不当引起的，如霉菌性阴道炎、过敏性皮炎等疾病。

如果经常使用药物卫生巾或护垫，会打破私处的酸碱平衡，造成对药物卫生巾的依赖性，降低私处自我免疫和清洁的作用，反而更易受到细菌侵害。而对于有些皮肤敏感的女性，使用药物卫生巾更应注意，可能会引起皮肤过敏，出现私处癌痒等症状。

在专利领域，CN102058899B公开了一种具有杀菌消炎功能的卫生巾，它是由无尘纸、无纺布、吸水纸、复合纸、透气膜、棉纱网、甘菊油及罗勒精油经加工制备而成，该发明声称具有消炎、止痛、杀菌、止痒、去异味的作用，可以调节女性月经期间的不适及经血的异味，抑制细菌的滋生，提高机体的抵抗力，可以令使用者保健养身。

CN103352322B涉及一种竹炭抗菌布的制备方法及竹炭抗菌卫生巾，通过控制竹炭微粒的制造方法、竹炭微粒与纺织短纤维或长丝混合加工工艺，保证竹炭抗菌布在抑菌抗菌方面有较好的效果，从源头防止细菌对人体的侵害，充分利用竹炭微粒产生负离子和远红外线，消毒灭菌，有效加快人体血液循环，改善人体内环境，适用于普通使用，更适用于卫生巾制作，表面光洁，手感松软，具有优良的抑菌杀菌性和吸湿性，成本降低，满足卫生指标要求；通过合理设置卫生巾结构，采用本身抗菌杀菌性较好的竹炭抗菌布制成卫生巾中吸水芯层和隔离层之间的竹炭抗菌层，并加入竹炭吸附层，有效吸附卫生巾在使用过程中产生的异味，优化杀菌抑菌效果。

抗菌肽的种类、数量繁多，结构也是复杂多变的。因此很难找到统一的抗菌肽模型来进行广泛的研究。另外，盲目使用基因工程的方法表达抗菌肽，而没有对抗菌肽的结构和功能以及体内外活性进行全面的探讨，导致表达得到的抗菌肽大多活性不高，或者具有溶血活性和细胞毒性。目前为止，已经有很多种方法来研究抗菌肽的结构和功能之间的关系。比如通过自然存在的天然抗菌肽的氨基酸替换或删减来产生一系列衍生物，或通过构建抗菌肽库的方法筛选抗菌肽，或利用最简化的方法来得到仅含有几种氨基酸的全新抗菌肽等方法。基于抗菌肽良好的生物学特性以及抗菌持久性，其可以广泛的应用与各个领域，在卫生巾中也多有涉及。但是提供一种改进的具有高效广谱性以及较好活性的抗菌肽卫生巾仍然是本领域迫切的需求。

发明内容

本发明涉及一种抗菌卫生巾，包括卫生巾主体及主体两侧的护翼，其特征在于，所述卫生巾主体由表面抗菌层、吸附层和底层组成，所述主体两侧的护翼由表面层和底层粘接在一起；所述卫生巾主体表面抗菌层由抗菌丝制成。

所述抗菌层为由抗菌肽制备的抗菌丝构成。

进一步的，本发明提供一种抗菌肽，所述抗菌肽的序列如SEQ ID NO：1或2所示。其中，所述抗菌肽中的功能肽基团为：通过使用碱性氨基酸精氨酸(Arg)残基来提供正电荷来吸引细菌表面的负电荷，再通过由脂肪族氨基酸异亮氨酸(Ile)和芳香族氨基酸苯丙氨酸(Phe)与磷脂发生疏水性作用，从而产生生物学活性破坏细菌的细胞膜，另外，通过多重复的结构，使得杀菌性能得到指数级的提高。

SEQ ID NO：1：IRFARVGIRFKEIPFHRYWIRFNPLDFWRWIRFAWVSVF

SEQ ID NO：2：IRFLNVIRFTMHIRFWSHYVPIFWIWNEFFIRFKYGWIRFHF

进一步的，本发明提供一种抗菌多肽菌丝的制备方法，A壳聚糖溶液的制备：在室温下将粘均相对分子量为12万的壳聚糖溶解在体积百分浓度为90％的乙酸溶液中，配成质量百分浓度为7％的溶液，搅拌8小时，获得半透明褐色壳聚糖乙酸溶液；

B聚乙烯醇溶液的制备：将聚合度3500，醇解度88％的聚乙烯醇溶于去离子水中，配成质量百分浓度为10％的溶液；

C将上述壳聚糖溶液与聚乙烯醇溶液按质量比5/1混合，获得壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液；

D壳聚糖/聚乙烯醇/SEQ ID NO：1或2多肽共混溶液的制备：往上述的壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液中分别加入占溶液质量百分浓度为0.1％的多肽，搅拌至完全溶解；

E壳聚糖/聚乙烯醇/多肽电纺纤维丝的制备：将步骤D获得的壳聚糖/聚乙烯醇/多共混溶液加入到静电纺丝装置中。在静电压为30kv，注射泵流速0.5ml/h，喷丝口直径为0.50mm，距金属接收屏距离8cm的条件下静电纺丝成膜，获得载肽纤维直径为125-150nm的纤维丝。

进一步的，所述吸附层夹在表面层与底层之间，所述吸附层中添加有吸附材料，所述吸附材料为高分子吸水颗粒。

进一步的，所述卫生巾主体的长度为25cm之间，宽度为7cm。

所述的抗菌卫生巾既适用于日用卫生巾，也适用于夜用卫生巾。

有益效果

本发明提供了一种具有较为广谱性的抗菌肽用于制备抗菌卫生巾，不仅能够广谱性的杀灭微生物，还具有较好的透气性，适宜大规模推广应用。

以上实施例仅用以说明的技术方案而非限制，尽管实施例中本实用做了较为详尽的说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，均应涵盖在本实用新型的权利要求范围当中。

具体实施方式

实施例1抗菌肽的制备及抗菌肽的抑菌和溶血活性

采用人工合成的方法制备并获得了SEQ ID NO：1和2的多肽，具体制备方式为上海生工有限公司合成制备。

溶血活性的测定：采集小鼠的新鲜血液lmL，肝素抗凝后溶解到2ml PBS溶液中，1OOOg离心5min，收集红细胞；用PBS洗涤3遍，再用1Oml PBS重悬；取100μL红细胞悬液与100μL用PBS溶解的不同浓度的抗菌肽溶液混合均匀，在37℃培养箱内恒温孵育1h；1h后取出，4℃、1000g离心5min；取出上清液用酶标仪在540nm处测光吸收值；每组取平均值。其中100μlPBS作为阴性对照。检测结果为SEQ ID NO:1的溶血浓度为3956.36±312.52μM，检测结果为SEQ ID NO:2的肽的溶血浓度为3732.44±289.48μM，与PBS的溶血指数相差不多。由于溶血浓度的数值越大，表明该抗菌肽的溶血活性越低。因此，本发明提供的抗菌肽的溶血活性最低，具有较好的应用前景。

实施例2抗菌多肽菌丝的制备

A壳聚糖溶液的制备：在室温下将粘均相对分子量为12万的壳聚糖溶解在体积百分浓度为90％的乙酸溶液中，配成质量百分浓度为7％的溶液，搅拌8小时，获得半透明褐色壳聚糖乙酸溶液；

B聚乙烯醇溶液的制备：将聚合度3500，醇解度88％的聚乙烯醇溶于去离子水中，配成质量百分浓度为10％的溶液；

C将上述壳聚糖溶液与聚乙烯醇溶液按质量比5/1混合，获得壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液；

D壳聚糖/聚乙烯醇/SEQ ID NO：1多肽共混溶液的制备：往上述的壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液中分别加入占溶液质量百分浓度为0.1％的多肽，搅拌至完全溶解；

E壳聚糖/聚乙烯醇/多肽电纺纤维丝的制备：将步骤D获得的壳聚糖/聚乙烯醇/多共混溶液加入到静电纺丝装置中。在静电压为30kv，注射泵流速0.5ml/h，喷丝口直径为0.50mm，距金属接受屏距离8cm的条件下静电纺丝成膜，获得载肽纤维直径为125-150nm的纤维丝。

实施例3抗菌多肽菌丝的制备

A壳聚糖溶液的制备：在室温下将粘均相对分子量为12万的壳聚糖溶解在体积百分浓度为90％的乙酸溶液中，配成质量百分浓度为7％的溶液，搅拌8小时，获得半透明褐色壳聚糖乙酸溶液；

B聚乙烯醇溶液的制备：将聚合度3500，醇解度88％的聚乙烯醇溶于去离子水中，配成质量百分浓度为10％的溶液；

C将上述壳聚糖溶液与聚乙烯醇溶液按质量比5/1混合，获得壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液；

D壳聚糖/聚乙烯醇/SEQ ID NO：2多肽共混溶液的制备：往上述的壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液中分别加入占溶液质量百分浓度为0.1％的多肽，搅拌至完全溶解；

E壳聚糖/聚乙烯醇/多肽电纺纤维丝的制备：将步骤D获得的壳聚糖/聚乙烯醇/多共混溶液加入到静电纺丝装置中。在静电压为30kv，注射泵流速0.5ml/h，喷丝口直径为0.50mm，距金属接受屏距离8cm的条件下静电纺丝成膜，获得载肽纤维直径为125-150nm的纤维丝。

实施例4抗菌氧氟沙星菌丝的制备(对照)

A壳聚糖溶液的制备：在室温下将粘均相对分子量为12万的壳聚糖溶解在体积百分浓度为90％的乙酸溶液中，配成质量百分浓度为7％的溶液，搅拌8小时，获得半透明褐色壳聚糖乙酸溶液；

B聚乙烯醇溶液的制备：将聚合度3500，醇解度88％的聚乙烯醇溶于去离子水中，配成质量百分浓度为10％的溶液；

C将上述壳聚糖溶液与聚乙烯醇溶液按质量比5/1混合，获得壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液；

D壳聚糖/聚乙烯醇/氧氟沙星共混溶液的制备：将氧氟沙星研磨成粉末，往上述的壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液中分别加入占溶液质量百分浓度为1％的氧氟沙星，搅拌至完全溶解；

E壳聚糖/聚乙烯醇/氧氟沙星电纺纤维丝的制备：将步骤D获得的壳聚糖/聚乙烯醇/氧氟沙星共混溶液加入到静电纺丝装置中。在静电压为30kv，注射泵流速0.5ml/h，喷丝口直径为0.50mm，距金属接受屏距离8cm的条件下静电纺丝成膜，获得载药纤维直径为125nm的纤维丝。

实施例5卫生巾的制备以及功能验证

(1)卫生巾制备

将实施例2和3和4制备得到的纤维丝分别单独加工制备成为表面抗菌层布，依次黏贴吸附层和底层制备成为抗菌卫生巾主体，其中所述主体两侧的护翼由表面层和底层粘接在一起。分别命名为KJT1卫生巾、KJT2卫生巾和KSS卫生巾杀菌后备用。

(2)卫生巾功效验证

动物新西兰大白兔以及小鼠由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，体重2.5-2.8kg，动物处于非动情期且阴道口无分泌物、充血、水肿及其它损伤情况。试验菌株：大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌CATCC 6538)和白色念珠菌(ATCC 10231均为中国科学院微生物研究所提供。

(2.1)阴道劲膜刺激试验

将上述制备得到的3种卫生巾样品l0g加入100ml灭菌生理盐水，密封于萃取容器中搅拌后置于37℃下放置24h，冷却到室温，搅拌后取样液作为受试物。实验时将长度8cm左右的钝头软管与2ml的注射器连接。注射器与导管注满受试液备用。每只动物各准备一套。将动物仰面固定，暴露出会阴和阴道口。将导管用受试液湿润后轻柔地插入阴道((4-5cm)，并用注射器缓慢注入2ml受试液，抽出导管即完成染毒。对照组动物用生理盐水作同样处理。于24h后用气栓法处死动物，剖腹取出完整的阴道，纵向切开，肉眼观察是否有充血、水肿等表现，供病理取材时参考。然后将阴道放入10％福尔马林溶液中固定24h以上，选取阴道的两端和中央3个部位的组织制片，HE染色后，进行病理学检查并参照《消毒技术规范》要求进行评分。

阴道粘膜试验结果取阴道做病理切片观察，试验后动物无明显不适，次日解剖取阴道做病理切片观察，结果见表1，两个多肽卫生巾样品的刺激指数为1和0，相对属于无刺激性。

表1一次阴道黏膜刺激实验结果

注:1将每组3只动物的3个部位的刺激反应积分相加后除以观察总数(动物数X3)即得刺激反应平均积分；2将试验组平均积分减去对照组平均积分即得出刺激指数，进而可进行刺激强度的分级。

(2.2)变态反应试验

取卫生巾作为受试物。小鼠随机分为3组，试验组、阴性对照组、阳性对照组((2,4一二硝基氯代苯)，每组16只，雌雄各半。试验前24h，将鼠背部左侧去毛，范围为3cm X 3cm。将原样涂在2cm X 2cm纱布上，敷贴于动物去毛皮肤，用无刺激性油纸覆盖，再用无刺激胶布加以固定6h。第7d和第14d以同样方法重复1次。于末次诱导14d后，将原样涂在2cm X 2cm纱布上，敷贴于鼠背部右侧去毛区(接触前24h剪毛，范围为3cm X 3cm)，封闭固定6h后去掉受试物，分别于24h和48h观察皮肤反应，根据皮肤反应评分标准评分。阴性对照组仅给以受试物激发处理。阳性对照组的操作程序同试验组，以阳性致敏物替代受试物。试验结束时根据致敏率评价其致敏强度。结果如表2所示：

表2皮肤变态反应实验结果

从表2的皮肤变态反应试验结果可见阳性组豚鼠皮肤出现明显红斑及水肿，致敏率65.0％(13/20)，对照组-KSS卫生巾的致敏率25％(5/20)，但实验组及阴性组均表现正常。

(2.3)抑菌试验依据GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》在室温下对样品进行检测，48h后观察结果。如表3所示：

表3.1抑菌实验结果(实验组1-KJT1卫生巾)

表3.2抑菌实验结果(实验组1-KJT2卫生巾)

表3.3抑菌实验结果(KSS卫生巾)

抑菌试验结果发现随时间推移，KJT2卫生巾和KJT1卫生巾样品对3种试验菌株生长均有不同程度的抑制，见表3，抑菌效果随时间延长而增强，对大肠杆菌的抑制程度高于金黄色葡萄球菌和白色念珠菌，而且20min后抑菌率都能达到99.9％以上。对照的KSS卫生巾在抑菌效果上就有很大的折扣，其对白色念珠菌的杀菌效果最差。

上述实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

序列表

<110> 宜春希宇生物制品有限公司

<120> 一种具有抗菌、柔软特性的卫生巾

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 39

<212> PRT

<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum

<400> 1

Ile Arg Phe Ala Arg Val Gly Ile Arg Phe Lys Glu Ile Pro Phe His

1 5 10 15

Arg Tyr Trp Ile Arg Phe Asn Pro Leu Asp Phe Trp Arg Trp Ile Arg

20 25 30

Phe Ala Trp Val Ser Val Phe

35

<210> 2

<211> 42

<212> PRT

<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum

<400> 2

Ile Arg Phe Leu Asn Val Ile Arg Phe Thr Met His Ile Arg Phe Trp

1 5 10 15

Ser His Tyr Val Pro Ile Phe Trp Ile Trp Asn Glu Phe Phe Ile Arg

20 25 30

Phe Lys Tyr Gly Trp Ile Arg Phe His Phe

35 40

Claims (7)

1.一种抗菌多肽卫生巾的制备方法，其步骤包括：

A壳聚糖溶液的制备：在室温下将粘均相对分子量为12万的壳聚糖溶解在体积百分浓度为90％的乙酸溶液中，配成质量百分浓度为7％的溶液，搅拌8小时，获得半透明褐色壳聚糖乙酸溶液；

B聚乙烯醇溶液的制备：将聚合度3500，醇解度88％的聚乙烯醇溶于去离子水中，配成质量百分浓度为10％的溶液；

C将上述壳聚糖溶液与聚乙烯醇溶液按质量比5/1混合，获得壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液；

D壳聚糖/聚乙烯醇/SEQ ID NO：2多肽共混溶液的制备：往上述的壳聚糖/聚乙烯醇复合体溶液中分别加入占溶液质量百分浓度为0.1％的SEQ ID NO：2多肽，搅拌至完全溶解；

E壳聚糖/聚乙烯醇/多肽电纺纤维丝的制备：将步骤D获得的共混溶液加入到静电纺丝装置中，在静电压为30kv，注射泵流速0.5ml/h，喷丝口直径为0.50mm，距金属接收屏距离8cm的条件下静电纺丝成膜，获得载肽纤维直径为125-150nm的纤维丝；

F将上一步获得的纤维丝加工制备成为表面抗菌层布，依次黏贴吸附层和底层制备成为抗菌卫生巾主体，其中所述主体两侧的护翼由表面层和底层粘接在一起即制备得到卫生巾。

2.如权利要求1所述方法制备得到的卫生巾。

3.如权利要求2所述的卫生巾，其中所述吸附层夹在表面层与底层之间，所述吸附层中添加有吸附材料，所述吸附材料为高分子吸水颗粒。

4.如权利要求3所述的卫生巾，所述卫生巾主体的长度为25cm之间，宽度为7cm。

5.如权利要求4所述的卫生巾，其特征在于所述卫生巾为日用卫生巾或夜用卫生巾。

6.抗菌肽，其序列如SEQ ID NO：2所示。

7.权利要求6所述的抗菌肽在制备抗菌卫生巾中的应用。