CN109846047A - 一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽及其制备方法和应用 - Google Patents

一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于食品领域，公开了一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽及其制备方法和应用。该方法包括以下步骤：将鱼在富硒的水体环境中养殖，投喂富硒饲料；将鱼捕捞上来之后杀鱼制备鱼胶原短肽；将鱼胶原短肽溶液与硒盐溶液混合均匀，然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管中，高速离心形成薄膜状态，维持离心状态6‑10分钟，得到活性硒蛋白肽溶液；向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，升温至30‑35℃，再通过高静压250‑350MPa处理8‑10分钟，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽。食用含有本发明富含活性硒鱼胶原蛋白肽的食物，可有效增强对硒的吸收，减少因缺硒导致的各种人体疾病。

Description

一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于食品领域，具体涉及一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽及其制备方法和应用。
背景技术
硒是人体必需的微量元素。硒参与了人体内多种生理反应，包括合成多种含硒酶和含硒蛋白。硒也被称为人体微量元素中的抗癌之王，经常吃含有硒的食物可以提高身体免疫力，有防治糖尿病，白内障，心脑血管等疾病的发生。国外人群调查资料表明，癌症的发生、死亡率与人体内硒含量呈负相关关系，补硒能有效抑制多种人类肿瘤的发生。富硒食品一般分为天然富硒食品(又称活性硒食品)，外源硒富硒食品(又称人工有机硒食品)。有研究表明，人体对天然富硒食品中硒的吸收利用率更高，可以更有效提升硒在人体中的生理功效。当然，人体内硒含量过高也会导致中毒，但目前中国人的日常硒摄入量不足(600μg/d)。因此，通过改变种养殖业的环境及加工技术，通过生物转化提高食品成分活性硒的含量，将有助于改善人们的健康水平。
土壤、水源中硒的含量不同也造成各地产出农、林、牧、渔产品中硒含量的差异。因此，通过增加种植、养殖环境中的硒含量，从而提高动植物体内的活性硒，是生产优质富硒食品原料的上佳方法。一般而言，海产品中鱼类、虾类的硒含量都较高，对环境中的硒具有较高的生物转化率，提高体内活性硒的含量。因此，通过增加水体硒的含量可提高鱼、虾类水产产品的硒含量，而且改变养殖水体的硒含量相对于改变土壤中硒含量更加容易实现。
发明内容
为了克服现有技术中存在的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备方法。
本发明的又一目的在于提供一种上述制备方法制备得到的富含活性硒鱼胶原蛋白肽。
本发明的再一目的在于提供一种上述富含活性硒鱼胶原蛋白肽的应用。
本发明目的通过以下技术方案实现：
一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼在富硒的水体环境中养殖3-7天，养殖池水体的含硒量为0.08-0.12μg/cm3，控制养殖池中的水流速度为0.2-0.3米/秒；用富硒饲料投喂养殖池中的鱼，捕捞前一天停止投喂；
所述富硒饲料是按照以下步骤制备得到：将富硒酵母和米糠按照质量比1：50混合均匀，装入密封发酵桶，密闭后厌氧条件发酵8-12小时，然后打开盖子翻搅通风，维持温度28-34℃发酵36-48小时，再密闭发酵24小时，造粒后获得富硒饲料；
(2)将鱼捕捞上来之后杀鱼取鱼肉，将加工副产物鱼皮和鱼骨通过湿法超微粉碎，控制粒度小于60目，再加入到浓度为0.60-0.72μg/cm3的亚硒酸钠水溶液中，通过膜分离使胶原蛋白肽分子量不高于800Da，得到鱼胶原短肽溶液；
(3)将质量浓度0.2-0.4wt％的鱼胶原短肽溶液与质量浓度0.005-0.01wt％的硒盐溶液混合均匀，然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管中，在16000-20000×g的速度下离心形成薄膜状态，维持离心状态6-10分钟，得到活性硒蛋白肽溶液；
(4)向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，海藻多糖在活性硒蛋白肽溶液形成的质量浓度为0.25-0.38wt％，升温至30-35℃，再通过高静压250-350MPa处理8-10分钟，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽，低温密封保藏。
步骤(1)所述鱼为罗非鱼或鲳鱼，养殖池中的水体根据鱼为淡水鱼或者海水鱼来调节水中的盐含量；所述养殖池是利用坡地地形，建立多个阶梯状养殖池。养殖池中水体中的硒含量为正常海水硒含量的8-12倍。
在步骤(3)的离心过程中改变蛋白肽与硒的结合方式，使部分无机硒在此过程中与蛋白肽结合从而转化成活性硒，形成结构稳定的鱼蛋白-硒的结合物，得到活性硒蛋白肽溶液。
步骤(3)所述离心管倾斜45°的高速离心装置包括支架、可控速电动机和离心管；离心管固定在支架上，并且与水平线呈45°夹角；离心管带有高密封性离心管塞，温度传感器穿过高密封性离心管塞伸入离心管中；支架和可控速电动机以电气相连。
步骤(4)所述升温至30-35℃是可以有助于提高高压过程中硒与肽的结合，形成结构稳定的肽-硒络合物；所述再通过高静压250-350MPa处理8-10分钟是可以强化肽硒的结构稳定性。
步骤(4)所述低温密封保藏是在0-10℃温度下保藏。
一种根据上述的制备方法制备得到的富含活性硒鱼胶原蛋白肽。
上述的富含活性硒鱼胶原蛋白肽在制备富硒保健品中的应用。所述应用可以提高人体对硒的吸收和利用。富硒鱼胶原蛋白肽粉的含量和用法用量根据国家相关标准即可。
本发明首先利用富硒水体养殖，增加鱼体内硒含量，使无机硒通过鱼体生物转化为活性硒，再通过活性硒-蛋白肽的转化和制备技术，提高蛋白肽产品中活性硒的含量，利用短肽吸收好的特点提高人体对活性硒的吸收。本发明所制备的补硒胶原蛋白肽利用生物发酵的小肽易于被人体肠道吸收的特点，通过形成稳定结构的肽硒络合物，将肽硒以高压技术和高速离心技术增强肽硒络合物的稳定性，即可提高蛋白中活性硒的含量，又可达到提高硒吸收率的效果。
与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：与目前主流富硒食品采用富硒农产品为原料或者加工过程中添加无机硒的制备方式不同，由本发明方法制得的活性硒胶原蛋白肽粉，首先也采用富硒水体养殖技术提高鱼皮、骨等原料中的有机硒含量，然后通过酶膜耦合制备小分子胶原蛋白肽，主要得到易被小肠和十二指肠吸收的2肽到6肽，最后通过高速离心状态下肽与硒离子的有机结合，形成结构稳定的肽-硒络合物，利用小分子肽容易被肠道粘膜细胞吸收的特点增强人体对硒离子的吸收，再通过高压技术和高速离心技术增强硒-肽结构的稳定性，以活性硒的方式提高人体对硒的吸收和利用。食用含有本发明富含活性硒鱼胶原蛋白肽的食物，可有效增强对硒的吸收，减少因缺硒导致的各种人体疾病，本发明富含活性硒鱼胶原蛋白肽能改变现有补硒食品大多是靠添加外源无机硒等带来的不利影响。
附图说明
图1为离心管倾斜45°的高速离心装置，其中1为支架，2为可控速电动机，3为离心管，4为高密封性离心管塞，5为温度传感器，6为样品。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
以下实施例中使用的离心管倾斜45°的高速离心装置如图1所示，包括支架1、可控速电动机2和离心管3；离心管3固定在支架1上，并且与水平线呈45°夹角；离心管3带有高密封性离心管塞4，温度传感器5穿过高密封性离心管塞4伸入离心管3中；支架1和可控速电动机2以电气相连。可控速电动机2可以控制支架1带动离心管转动。样品6为本发明需要离心的混合溶液。
实施例1：
1.富硒环境的养殖：利用坡地地形特点，建立多个阶梯状养殖池，添加亚硒酸钠等硒盐调配水体中的含硒量在0.08μg/cm3，大约为正常海水硒含量的10倍；并维持水中硒的浓度，利用水池地形的特点控制水池中的水流速在0.3米/秒；将养殖或捕捞的活体罗非鱼或鲳鱼放入养殖池中(可根据海水鱼或淡水鱼调节水中的盐含量)，使鱼在富硒的水体环境生活7天。
2.富硒饲料的制备：按照质量比1：50添加富硒酵母到米糠中，混合均匀，装入密封发酵桶，密闭后厌氧条件发酵10小时，然后打开盖子翻搅通风，维持温度31℃发酵42小时，再密闭发酵24小时；造粒后获得富硒饲料，作为主要饲料投喂养殖池的鱼，捕捞前一天停止喂料。
3.富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备：将鱼捕捞上来之后杀鱼取鱼肉，将加工副产物鱼皮和鱼骨通过湿法超微粉碎，控制粒度小于60目，再加入到浓度为0.72μg/cm3的亚硒酸钠水溶液中，通过膜分离使胶原蛋白肽分子量不高于800Da，得到鱼胶原短肽溶液；
4.活性硒蛋白的转化和制备：将质量浓度0.,3wt％的鱼胶原短肽溶液与质量浓度0.01wt％的硒盐溶液混合均匀，然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管中，在18000×g的高速离心形成薄膜状态，维持离心状态6分钟，在这个过程中改变蛋白肽与硒的结合方式，使部分无机硒在此过程中与蛋白肽结合从而转化成活性硒，形成结构稳定的鱼蛋白-硒的结合物，得到活性硒蛋白肽溶液。
5.鱼胶原蛋白肽与活性硒的结合强化：向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，海藻多糖在活性硒蛋白肽溶液形成的质量浓度为0.30wt％，升温至35℃，有助于提高高压过程中硒与肽的结合，形成结构稳定的肽-硒络合物；再通过高静压300MPa处理10分钟，强化肽硒的结构稳定性，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽，即富硒蛋白肽，低温密封保藏。
实施例2：
1.富硒环境的养殖：利用坡地地形特点，建立多个阶梯状养殖水池，添加亚硒酸钠等硒盐调配水体中的含硒量在0.10μg/cm3，大约为正常海水硒含量的8倍；并维持水中硒的浓度，利用水池地形的特点控制水池中的水流速在0.25米/秒；将养殖或捕捞的活体罗非鱼或鲳鱼放入养殖池中(可根据海水鱼或淡水鱼调节水中的盐含量)，使鱼在富硒的水体环境生活5天。
2.富硒饲料的制备：按照质量比1：50添加富硒酵母到米糠中，混合均匀，装入密封发酵桶，密闭后厌氧条件发酵12小时，然后打开盖子翻搅通风，维持温度28℃发酵36小时，再密闭发酵24小时；造粒后获得富硒饲料，作为主要饲料投喂养殖池的鱼，捕捞前一天停止喂料。
3.富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备：将鱼捕捞上来之后杀鱼取鱼肉，将加工副产物鱼皮和鱼骨通过湿法超微粉碎，控制粒度小于60目，再加入到浓度为0.60μg/cm3的亚硒酸钠水溶液中，通过膜分离使胶原蛋白肽分子量不高于800Da，得到鱼胶原短肽溶液；
4.活性硒蛋白的转化和制备：将质量浓度0.2wt％的鱼胶原短肽溶液与质量浓度0.0075wt％的硒盐溶液混合均匀，然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管，在20000×g的高速离心形成薄膜状态，维持离心状态10分钟，在这个过程中改变蛋白肽与硒的结合方式，使部分无机硒在此过程中与蛋白肽结合从而转化成活性硒，形成结构稳定的鱼蛋白-硒的结合物，得到活性硒蛋白肽溶液。
5.鱼胶原蛋白肽与活性硒的结合强化：向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，海藻多糖在活性硒蛋白肽溶液形成的质量浓度为0.25wt％，升温至33℃，有助于提高高压过程中硒与肽的结合，形成结构稳定的肽-硒络合物；再通过高静压350MPa处理8分钟，强化肽硒的结构稳定性，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽，即富硒蛋白肽，低温密封保藏。
实施例3：
1.富硒环境的养殖：利用坡地地形特点，建立多个阶梯状养殖水池，添加亚硒酸钠等硒盐调配水体中的含硒量在0.12μg/cm3，大约为正常海水硒含量的12倍；并维持水中硒的浓度，利用水池地形的特点控制水池中的水流速在0.2米/秒；将养殖或捕捞的活体罗非鱼或鲳鱼放入养殖池中(可根据海水鱼或淡水鱼调节水中的盐含量)，使鱼在富硒的水体环境生活3天。
2.富硒饲料的制备：按照质量比1：50添加富硒酵母到米糠中，混合均匀，装入密封发酵桶，密闭后厌氧条件发酵8小时，然后打开盖子翻搅通风，维持温度34℃发酵36小时，再密闭发酵24小时，造粒后获得富硒饲料，作为主要饲料投喂养殖池的鱼，捕捞前一天停止喂料。
3.富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备：将鱼捕捞上来之后杀鱼取鱼肉，将加工副产物鱼皮和鱼骨通过湿法超微粉碎，控制粒度小于60目，再加入到浓度为0.66μg/cm3的亚硒酸钠水溶液中，通过膜分离使胶原蛋白肽分子量不高于800Da，得到鱼胶原短肽溶液；
4.活性硒蛋白的转化和制备：将质量浓度0.4wt％的鱼胶原短肽溶液与质量浓度0.005wt％的硒盐溶液混合均匀；然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管，在16000×g的高速离心形成薄膜状态，维持离心状态8分钟，在这个过程中改变蛋白肽与硒的结合方式，使部分无机硒在此过程中与蛋白肽结合从而转化成活性硒，形成结构稳定的鱼蛋白-硒的结合物，得到活性硒蛋白肽溶液。
5.鱼胶原蛋白肽与活性硒的结合强化：向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，海藻多糖在活性硒蛋白肽溶液形成的质量浓度为0.38wt％，升温至30℃，有助于提高高压过程中硒与肽的结合，形成结构稳定的肽-硒络合物；再通过高静压250MPa处理9分钟，强化肽硒的结构稳定性，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽，即富硒蛋白肽，低温密封保藏。
由上述实施例制得的富硒蛋白肽的细胞试验结果显示，相同条件下caco-2细胞内检测到硒的吸收率达到16.71±0.83％，而相同浓度有机硒的吸收率余额为4.33±0.52％，无机硒的吸收率仅为1.60±0.31％，说明有机硒更容易被细胞吸收。动物试验的结果也证明(表1)，将富硒蛋白肽混入饲料，按照小白鼠的体重进行饲养，饲养15天后喂食本发明所制备补硒饲料的试验组小白鼠血液中硒离子平均含量明显高于对照组和普通饲料组，如表1所示，说明本发明制备的富硒蛋白肽有利于哺乳动物的消化和吸收。
表1不同含硒食品对小鼠血液中硒含量的影响
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种富含活性硒鱼胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将鱼在富硒的水体环境中养殖3-7天，养殖池水体的含硒量为0.08-0.12μg/cm3，控制养殖池中的水流速度为0.2-0.3米/秒；用富硒饲料投喂养殖池中的鱼，捕捞前一天停止投喂；
所述富硒饲料是按照以下步骤制备得到：将富硒酵母和米糠按照质量比1：50混合均匀，装入密封发酵桶，密闭后厌氧条件发酵8-12小时，然后打开盖子翻搅通风，维持温度28-34℃发酵36-48小时，再密闭发酵24小时，造粒后获得富硒饲料；
(2)将鱼捕捞上来之后杀鱼取鱼肉，将加工副产物鱼皮和鱼骨通过湿法超微粉碎，控制粒度小于60目，再加入到浓度为0.60-0.72μg/cm3的亚硒酸钠水溶液中，通过膜分离使胶原蛋白肽分子量不高于800Da，得到鱼胶原短肽溶液；
(3)将质量浓度0.2-0.4wt％的鱼胶原短肽溶液与质量浓度0.005-0.01wt％的硒盐溶液混合均匀，然后灌入离心管倾斜45°的高速离心装置的离心管中，在16000-20000×g的速度下离心形成薄膜状态，维持离心状态6-10分钟，得到活性硒蛋白肽溶液；
(4)向活性硒蛋白肽溶液中添加海藻多糖，海藻多糖在活性硒蛋白肽溶液形成的质量浓度为0.25-0.38wt％，升温至30-35℃，再通过高静压250-350MPa处理8-10分钟，喷雾干燥，得到富含活性硒鱼胶原蛋白肽，低温密封保藏。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述鱼为罗非鱼或鲳鱼，养殖池中的水体根据鱼为淡水鱼或者海水鱼来调节水中的盐含量；所述养殖池是利用坡地地形，建立多个阶梯状养殖池。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(4)所述低温密封保藏是在0-10℃温度下保藏。
4.一种根据权利要求1所述的制备方法制备得到的富含活性硒鱼胶原蛋白肽。
5.根据权利要求4所述的富含活性硒鱼胶原蛋白肽在制备富硒保健品中的应用。
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