CN109819914A - 一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法 - Google Patents

一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，包括如下步骤：(1)选取卵形鲳鲹鱼苗和布氏鲳鲹鱼苗采用网箱在池塘内，水温20℃～22℃下强化培育，再将网箱转移至海区，水体流速＜0.6m/s；选择3～4龄，体重4.0kg以上的卵形鲳鲹作为雌性亲和布氏鲳鲹作为雄性亲本；(2)杂交繁殖：a.将养殖雌性亲本的水体温度升温至24～26℃，将养殖雄性亲本的水体温度升温至28～32℃，且升温速率为每周上升1℃，判定亲鱼的性成熟；b.人工催产；c.人工采精、挤卵；d.人工杂交授精；e.受精卵孵化，得到杂交品种的白金鲳鱼苗。本发明的亲本培育质量好，受精率和孵化率高，其获得杂交品种白金鲳鱼苗，存活率高，畸形率低，适用于规模化杂交品种的白金鲳鱼苗的生产。

Description

一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法。
背景技术
卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)，俗称金鲳、鲳鲹、红三黄腊鲳。体呈卵圆形，高且甚侧扁，随着成长而逐渐向后延长；体长为体高1.7～1.9倍，为头长3.8倍；尾柄短细，侧扁；头小，高大于长，枕骨嵴明显，吻长于眼径，眼小，前位；侧线呈直线状或微波状，无棱鳞，无离鳍，胸鳍较宽，短于头长，尾鳍叉形，尾鳍深叉稍内弯，末端尖细。背鳍、臀鳍、尾鳍均暗色至暗橙色，甚至金黄色，背部肉厚呈蓝灰色，腹部银色，体侧无任何斑点。
布氏鲳鲹(Trachinotus blochii)，俗称狮鼻鲳鲹、金鲳、金枪、红沙瓜仔。体呈鲳形，甚侧扁，随着成长而逐渐向后延长；第一背前骨呈圆形，尾柄短细，背腹侧无肉质棱脊无凹槽，吻钝，眼小，侧线呈直线状或微波状，无棱鳞，无离鳍，尾鳍深叉，末端尖细。体背蓝灰，腹部银白，体侧无任何斑点。背鳍暗色，臀鳍暗色至暗橙色而具棕色缘；尾鳍暗色至暗橙色而具黑色缘。
布氏鲳鲹和卵形鲳鲹，均俗称金鲳，是同属、不同种的鲳鲹鱼类。但养殖周期、耐低温习性、生长速度等均不相同，并且对水温的适应性也存在明显差异，卵形鲳鲹能够适应冬季低温，在9～10℃下能正常生存，在海南、广东和福建南部沿海养殖可顺利越冬；而布氏鲳鲹对低温适应性较差，水温在14℃以下难以存活，在广东和福建养殖难以自然越冬。由于两种鱼在外观上的相似，目前通常是将两种鱼直接进行混养，但因两者本身的差异性，却容易导致因冻害而造成的养殖成本的损失，养殖难度增加，对产品的产量和品质也难以把控的问题，现有也没有关于针对这两种鱼规范有效的人工杂交的方法，以能够稳定地获得高质量的杂交品种。
发明内容
本发明提出一种受精率和孵化率高的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其获得杂交品种白金鲳鱼苗，存活率高，适用于规模化杂交品种的白金鲳鱼苗的生产。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，包括如下步骤：
(1)亲本选择和培育：
选取卵形鲳鲹鱼苗和选取布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在20～22℃条件下强化培育30～50天，网箱内设有充气气石，水体流速为0.3～0.5m/s，水深为16～16.5m，且每周进行一次冲水；再将网箱的安装转移至不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为18～18.5m，水体流速为＜0.6m/s；选择3～4龄，体重4.0kg以上的卵形鲳鲹作为雌性亲本；选择3～4龄，体重4.0kg以上的布氏鲳鲹作为雄性亲本；
在亲本选择后的次月进行营养强化，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，且日投喂量为鱼体质量的3～5％；
(2)杂交繁殖：
a.亲鱼性腺的发育：将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼的水体温度升温至24～26℃，将养殖雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度升温至28～32℃，并且升温的速率为每周上升1℃，加快性腺成熟，直至判定雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼均达到性成熟；并筛选出性成熟的亲鱼在20～22℃下独立培育，日投喂量为鱼体质量的1～2％；
b.人工催产：对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行催产，将筛选出性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持在22～23℃，催产剂为：100～200IU/kg鱼体质量的HCG和1～3ug/kg鱼体质量的LRH-A2，进行一次性催产；将筛选出性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持25～29℃；催产剂为：100～200IU/kg鱼体质量的HCG和2～5ug/kg鱼体质量的LRH-A3，一次性进行催产；
c.人工采精、挤卵：分别从雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼中取得卵子和白色精液；
d.人工杂交授精：向精液中加入过滤海水，混合均匀后，按每公斤卵子3～6ml精液的比例将精液淋入装有卵子的容器中，进行人工授精，搅拌均匀后，静置5～10min，用过滤海水冲洗受精卵2～3遍，静置分离8～10min，取上浮受精卵进行乳化；
e.受精卵孵化：将上浮受精卵放入孵化桶内孵化，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
本发明的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，选取了自养的卵形鲳鲹作为雌性亲本和布氏鲳鲹作为雄性亲本，进行人工杂交育种获得杂交新品种白金鲳鱼苗。本发明通过控制亲鱼的培育条件和亲鱼的鱼龄的方法，进行了强化培育和营养强化，选择3～4龄，体重4.0kg以上的作为亲本，方便亲鱼适应养殖环境，亲鱼存活率高，便于亲本的筛选，提高亲本质量；同时，根据亲鱼是属于暖水性中上层鱼类，且对水温的适应性存在较大差异的特点，在控制性腺发育的过程中，分别在将两种鱼的水体温度控制在24～26℃和28～32℃之间，并且保存均匀稳定的升温速率，避免亲鱼因温度环境改变而产生应激反应，降低发病率和死亡率，并且使两个品种的雌雄亲本性腺能够同步发育成熟，从而保证雌雄亲鱼的性腺发育效果，提高卵子和精子质量，实现有效地人工杂交受精，受精率和孵化率高。
进一步说明，步骤(1)中，卵形鲳鲹鱼苗和选取布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在20℃条件下强化培育40天。首先将鱼苗在池溏内进行强化培育，通过温度调控、水流速度和水深使鱼苗能够稳定的发育，提高鱼苗的成长质量，每周进行一次冲水和将鱼苗在一定条件的海区中培育，更有效促进鱼苗的性腺发育，提高亲鱼提供的卵子和精子质量，提高人工授精成功率。
进一步说明，步骤(1)中，所述营养强化，在亲本选择后的次月日投喂量为鱼体质量的3～4％。在亲本培育的过程中，通过添加蚕蛹粉至配合饲料中和增加投喂量达到营养强化，不仅能够对亲鱼补充饲料的营养，而且还可以提高了亲鱼饲料的摄取量，提高饲料的利用率，降低饲养成本。
进一步说明，步骤(1)中，分别选取体重4.0～5.0kg的卵形鲳鲹鱼苗和布氏鲳鲹鱼苗进行培育。优选体重为4.0～5.0kg的卵形鲳鲹鱼苗和布氏鲳鲹鱼苗进行培育，提高鱼存活率，且体型均匀一致，有利于后期的人工杂交，提高杂交品种的质量。
进一步说明，所述雌性卵形鲳鲹亲鱼与所述雄性布氏鲳鲹亲鱼的杂交数量比例为：6:1。控制两者的杂交数量，保证足够的卵子和精子数量，提高受精率和孵化率。
进一步说明，步骤a中，每周定期对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行性腺成熟度观察，待雌鱼腹部可见明显的卵巢轮廓，生殖孔微红；雄鱼泄殖孔略封闭，生殖孔微红，腹部痩扁，即可判定为达到性成熟，并筛选出性成熟的亲鱼在22℃独立培育，日投喂量为鱼体质量的1％。将判定为性成熟的亲鱼在一定温度下进行独立培育，减少干扰，稍微投喂量，以提高性成熟亲鱼尤其是雌性卵形鲳鲹亲鱼的存活率，便于后期人工采精挤卵。
进一步说明，步骤b中，雌性卵形鲳鲹亲鱼在水温为23℃下进行一次性催产，雄性布氏鲳鲹亲鱼在水温28℃下进行一次性催产。通过分别对性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼和性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼的进行催产，同时针对其性腺成熟的特点，进一步控制了催产的水体温度条件，利用所设定相应的催产剂，实现有效的一次性进行催产，提高催产率，促进亲鱼的性腺的快速成熟。
进一步说明，步骤c中，所述人工采精、挤卵为：在亲鱼催产后24小时后开始每1小时检查，轻压雌性卵形鲳鲹亲鱼腹部有卵子流出时开始进行人工挤卵，从前向生殖孔方向推挤，使卵子由生殖孔流出；同理，轻压雄性布氏鲳鲹亲鱼的腹部，从前向生殖孔方向推挤，使白色精液由生殖孔流出。
进一步说明，步骤d中，所述卵子和精液的混合比例为：每公斤卵子4～5ml精液。在人工杂交授精精的过程中，需要严格控制卵子与精液的比例，并且为避免因精液粘稠而影响受精效果，采用了过滤海水稀释和冲洗受精卵，使卵子和精液能够充分接触，保证正常受精，提高受精效果。
进一步说明，步骤e中，将上浮受精卵放入孵化桶内，在水温为22～28℃，盐度为5～11，pH为7.5～8的条件下进行流水孵化，孵化2～3天后，调整盐度至11～18，孵化3天以上时，调整盐度至18～25；孵化密度为8～10万粒受精卵/m3，微充气，水中溶解氧在6mg/L以上，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。通过将选取的受精卵在一定的水温和pH的条件下进行流水孵化，同时，根据不同的孵化阶段对其盐度进行分段调控，控制孵化密度和水中溶解氧在6mg/L以上，提高孵化率，使孵化出仔鱼能够良好地生存条件，便于仔鱼的转移培育。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1.本发明筛选自养的卵形鲳鲹作为雌性亲本和布氏鲳鲹作为雄性亲本，进行人工杂交育种获得杂交新品种白金鲳鱼苗，通过控制亲鱼的培育条件和亲鱼的鱼龄的方法，进行了强化培育和营养强化，选择3～4龄，体重4.0kg以上的母鱼作为亲本，方便亲鱼适应养殖环境，亲鱼存活率高，便于亲本的筛选，提高亲本质量；
2.通过在控制性腺发育的过程中，分别将两种鱼的水体温度控制在24～26℃和28～32℃之间，并且保存均匀稳定的升温速率，避免亲鱼因温度环境改变而产生应激反应，降低发病率和死亡率，而且使两个品种的雌雄亲本性腺能够同步发育成熟，从而保证雌雄亲鱼的性腺发育效果，提高卵子和精子质量，受精率和孵化率高；
3.本发明获得的白金鲳鱼苗，其杂交存活率高，体长为体高的2倍，与金鲳同等条件对比鱼体宽大，同比约宽15％～25％，与金鲳同等条件对比涨标速度快，同比成长速度快20％～35％，抗病力强，对细菌、寄生虫有较强的免疫力，养殖难度低，适用于规模化杂交品种的白金鲳鱼苗的生产，市场推广前景广阔。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1-一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，包括如下步骤：
(1)亲本选择和培育：
选取自养的卵形鲳鲹鱼苗和选取野生或台湾布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在21℃条件下强化培育30天，网箱内设有充气气石，水体流速为0.3m/s，水深为16m，且每周进行一次冲水；再将网箱的安装转移至小风浪、水体交换充分，不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为18m，水体流速为＜0.6m/s；选择3龄，体重4.0kg以上的卵形鲳鲹作为雌性亲本；选择3龄，体重4.0kg以上的布氏鲳鲹作为雄性亲本；
在亲本选择后的次月进行营养强化，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，且日投喂量为鱼体质量的3％；
(2)杂交繁殖：
a.亲鱼性腺的发育：将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼的水体温度至26℃，将养殖雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度升温至28℃，并且升温的速率为每周上升1℃，加快性腺成熟，每周定期对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行性腺成熟度观察，待雌鱼腹部可见明显的卵巢轮廓，生殖孔微红；雄鱼泄殖孔略封闭，生殖孔微红，腹部痩扁，即可判定为达到性成熟，并筛选出性成熟的亲鱼在22℃独立培育，日投喂量为鱼体质量的1％；
b.人工催产：将筛选出性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持在23℃，催产剂为：150IU/kg鱼体质量的HCG和2ug/kg鱼体质量的LRH-A2，进行一次性催产；将筛选出性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持29℃；催产剂为：150IU/kg鱼体质量的HCG和4ug/kg鱼体质量的LRH-A3，一次性进行催产；
c.人工采精、挤卵：轻压雌性卵形鲳鲹亲鱼腹部有卵子流出时开始进行人工挤卵，从前向生殖孔方向推挤，使卵子由生殖孔流出；同理，轻压雄性布氏鲳鲹亲鱼的腹部，从前向生殖孔方向推挤，使白色精液由生殖孔流出；
d.人工杂交授精：向精液中加入过滤海水，混合均匀后，按每公斤卵子3ml精液的比例将精液淋入装有卵子的容器中，进行人工授精，搅拌均匀后，静置10min，用过滤海水冲洗受精卵3遍，静置分离8min，取上浮受精卵进行乳化；
e.受精卵孵化：将上浮受精卵放入孵化桶内，在水温为22℃，盐度为5，pH为7.5的条件下进行流水孵化，孵化3天后，调整盐度至11，孵化4天后，调整盐度至18；孵化密度为8万粒受精卵/m3，微充气，水中溶解氧在6mg/L以上，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
实施例2-一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，包括如下步骤：
(1)亲本选择和培育：
选取自养的卵形鲳鲹鱼苗和选取野生或台湾布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在20℃条件下强化培育50天，网箱内设有充气气石，水体流速为0.5m/s，水深为16.5m，且每周进行一次冲水；再将网箱的安装转移至小风浪、水体交换充分，不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为18.5m，水体流速为＜0.6m/s；选择4龄，体重4.0kg的卵形鲳鲹作为雌性亲本；选择4龄，体重4.0kg的布氏鲳鲹作为雄性亲本；
在亲本选择后的次月进行营养强化，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，且日投喂量为鱼体质量的5％；其中，雌性卵形鲳鲹亲鱼与所述雄性布氏鲳鲹亲鱼的杂交数量比例为：6:1；
(2)杂交繁殖：
a.亲鱼性腺的发育：将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼的水体温度升温至24℃，将养殖雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度升温至32℃，并且升温的速率为每周上升1℃，加快性腺成熟，每周定期对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行性腺成熟度观察，待雌鱼腹部可见明显的卵巢轮廓，生殖孔微红；雄鱼泄殖孔略封闭，生殖孔微红，腹部痩扁，即可判定为达到性成熟，并筛选出性成熟的亲鱼在20℃独立培育，日投喂量为鱼体质量的2％；
b.人工催产：将筛选出性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持在22℃，催产剂为：100IU/kg鱼体质量的HCG和1ug/kg鱼体质量的LRH-A2，进行一次性催产；将筛选出性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持25℃；催产剂为：100IU/kg鱼体质量的HCG和2ug/kg鱼体质量的LRH-A3，一次性进行催产；
c.人工采精、挤卵：在亲鱼催产后24小时后开始每1小时检查，轻压雌性卵形鲳鲹亲鱼腹部有卵子流出时开始进行人工挤卵，从前向生殖孔方向推挤，使卵子由生殖孔流出；同理，轻压雄性布氏鲳鲹亲鱼的腹部，从前向生殖孔方向推挤，使白色精液由生殖孔流出；
d.人工杂交授精：向精液中加入过滤海水，混合均匀后，按每公斤卵子6ml精液的比例将精液淋入装有卵子的容器中，进行人工授精，搅拌均匀后，静置5min，用过滤海水冲洗受精卵2遍，静置分离10min，取上浮受精卵进行乳化；
e.受精卵孵化：将上浮受精卵放入孵化桶内，在水温为28℃，盐度为11，pH为8的条件下进行流水孵化，孵化3天，调整盐度至18，孵化4天后，调整盐度至25；孵化密度为10万粒受精卵/m3，微充气，水中溶解氧在6mg/L以上，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
实施例3-一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，包括如下步骤：
(1)亲本选择和培育：
选取自养的卵形鲳鲹鱼苗和选取野生或台湾布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在22℃条件下强化培40天，网箱内设有充气气石，水体流速为0.3～0.5m/s，水深为16m，且每周进行一次冲水；再将网箱的安装转移至小风浪、水体交换充分，不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为18m，水体流速为＜0.6m/s；选择3～4龄，体重4.0kg的卵形鲳鲹作为雌性亲本；选择3～4龄，体重500克的布氏鲳鲹作为雄性亲本；
在亲本选择后的次月进行营养强化，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，且日投喂量为鱼体质量的4％；其中，雌性卵形鲳鲹亲鱼与所述雄性布氏鲳鲹亲鱼的杂交数量比例为：6:1；
(2)杂交繁殖：
a.亲鱼性腺的发育：将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼的水体温度升温至25℃，将养殖雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度升温至30℃，并且升温的速率为每周上升1℃，加快性腺成熟，每周定期对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行性腺成熟度观察，待雌鱼腹部可见明显的卵巢轮廓，生殖孔微红；雄鱼泄殖孔略封闭，生殖孔微红，腹部痩扁，即可判定为达到性成熟，并筛选出性成熟的亲鱼在21℃独立培育，日投喂量为鱼体质量的1％；
b.人工催产：将筛选出性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持在22℃，催产剂为：200IU/kg鱼体质量的HCG和3ug/kg鱼体质量的LRH-A2，进行一次性催产；将筛选出性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持26℃；催产剂为：200IU/kg鱼体质量的HCG和5ug/kg鱼体质量的LRH-A3，一次性进行催产；
c.人工采精、挤卵：在亲鱼催产后24小时后开始每1小时检查，轻压雌性卵形鲳鲹亲鱼腹部有卵子流出时开始进行人工挤卵，从前向生殖孔方向推挤，使卵子由生殖孔流出；同理，轻压雄性布氏鲳鲹亲鱼的腹部，从前向生殖孔方向推挤，使白色精液由生殖孔流出；
d.人工杂交授精：向精液中加入过滤海水，混合均匀后，按每公斤卵子4ml精液的比例将精液淋入装有卵子的容器中，进行人工授精，搅拌均匀后，静置8min，用过滤海水冲洗受精卵3遍，静置分离8min，取上浮受精卵进行乳化；
e.受精卵孵化：将上浮受精卵放入孵化桶内，在水温为25℃，盐度为8，pH为8的条件下进行流水孵化，孵化3天后，调整盐度至15，孵化4天后，调整盐度至20；孵化密度为9万粒受精卵/m3，微充气，水中溶解氧在6mg/L以上，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比例组1
对比实施例a1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)中，将鱼苗采用网箱在池塘内培育时，将水温控制在23℃条件下强化培育，培育20天，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例b1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)中，将鱼苗采用网箱在池塘内培育时，将水体流速控制为0.6m/s，水深为15m；其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例c1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)中，将鱼苗直接通过网箱放置于小风浪、水体交换充分，不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为20m，且水体流速为0.7m/s；其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例d1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)中，选择2龄，体重为300克的卵形鲳鲹作为雌性亲本和2龄，体重为300克的布氏鲳鲹作为雄性亲本；其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例e1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)的强化培育的营养强化中，采用常规的配合饲料进行投喂，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。其中，常规的配合饲料为鳗鱼配合料。
对比实施例f1：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤(1)的强化培育的营养强化中，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，而其日投喂量为鱼体质量的1％，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比例组2
对比实施例a2：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤a中，在亲鱼性腺发育的过程中，将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度均控制为27℃，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例b2：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤a中，在亲鱼性腺发育的过程中，将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度分别直接升温至24℃和28℃，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例c2：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤a中，将筛选出性成熟的亲鱼分别在其原本的水温下独立培育，并保持日投喂量不变，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比例组3
对比实施例a3:依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤b中，将筛选出的性成熟的亲鱼，分别直接通过催产剂进行一次性催产，不控制其催产时的水体温度；其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例b3:依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤d中，将精液直接与卵子混合，混合比例为每公斤卵子7ml精液，混合之后再采用过滤海水冲洗受精卵，其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
对比实施例c3：依据实施例3的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法的步骤，仅改变步骤e中，在受精卵孵化的过程中，将盐度固定地设定为15；其余人工杂交的参数条件均相同，进行人工杂交育种，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
本发明将由上述实施例1～3、对比例组1～3中的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交繁殖，以及将雌性卵形鲳鲹和雄性布氏鲳鲹直接进行自然混养繁殖的效果进行了统计和比对，其结果如下表：
卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交繁殖效果比对表
根据上表可以看出，由本发明的实施例1～3所进行的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交繁殖，相比对比例1～3和自然混养繁殖，其受精率均在67％以上，其受精卵的孵化率均在93％以上，初孵仔鱼畸形率明显降低，且仔鱼的存活率均可在85％以上，并且，根据实施例1、2和3中还可以得到，在实施例2和3中的亲本培育过程中，还进一步设定了雌性卵形鲳鲹亲鱼与所述雄性布氏鲳鲹亲鱼的杂交数量比例为：6:1；使得其受精率进一步提高，可达到68％以上，其受精卵的孵化率也明显提高，初孵仔鱼畸形率进一步降低。
在对比例组1中，对比实施例a1～c1中，将鱼苗在池塘网箱内养殖时，将其水温控制较高，培育时间较短；或改变水箱在海区中的落潮水深为20m，水体流速为＞0.6m/s；或将鱼苗直接于海区中培育，其水深较深、水体流速较高；均不利于鱼苗在后期今入海区养殖的适应性，其对亲本的生长影响较大，导致其存活率较低，从而影响亲本的受精率、孵化率明显降低，其仔鱼的畸形率较高。
对比实施例c1、d1和e1中，选择鱼龄较低，体重较低的鱼苗作为杂交的亲本，或者在强化培育中使用常规的配合饲料和降低了其日投喂量，均不利于亲本的培育，亲本的平均质量较低，影响其后期的性腺的发育效果，使两个品种的雌雄亲本性腺同步发育成熟难度增大，降低了亲本的卵子和精子质量，导致其受精率降低。
对比例组2中，对比实施例a2和b2中，由于改变了在亲鱼性腺发育的过程中的水体温度，或在性成熟后未严格控制其水温和投喂量，其雌雄亲鱼的性腺难以保证同步发育成熟，性腺发育不稳定，从而导致其相比实施例3，受精率大大降低，初孵仔鱼畸形率较高。
对比例组3的对比实施例a3中，在性成熟的亲鱼的人工催产过程中，未控制其水体温度，会降低亲本的卵子和精子质量；在对比实施例b3和c3中在人工授精的过程中，并未采用过滤海水对精液进行稀释，会降低卵子和精子的受精效果；而在孵化的过程中，将盐度固定地设定为15，会降低受精卵的孵化效果；从而会影响人工杂交繁殖的效果，相比实施例3，其受精率和孵化率大大降低，初孵仔鱼畸形率较高、仔鱼存活率低。
因此，本发明提出的卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其亲本培育的质量好，可有效使两个品种的雌雄亲本性腺能够同步发育成熟，提高卵子和精子质量，从而实现高受精率和孵化率的人工杂交育种方法，其获得杂交品种白金鲳鱼苗，存活率高，畸形率低，可适用于规模化杂交品种的白金鲳鱼苗的生产。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)亲本选择和培育：
选取卵形鲳鲹鱼苗和选取布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在20～22℃条件下强化培育30～50天，网箱内设有充气气石，水体流速为0.3～0.5m/s，水深为16～16.5m，且每周进行一次冲水；再将网箱的安装转移至不受内港淡水河污染源影响的海区，落潮水深为18～18.5m，水体流速为＜0.6m/s；选择3～4龄，体重4.0kg以上的卵形鲳鲹作为雌性亲本；选择3～4龄，体重4.0kg以上的布氏鲳鲹作为雄性亲本；
在亲本选择后的次月进行营养强化，采用含有蚕蛹粉的配合饲料进行投喂，且日投喂量为鱼体质量的3～5％；
(2)杂交繁殖：
a.亲鱼性腺的发育：将养殖雌性卵形鲳鲹亲鱼的水体温度升温至24～26℃，将养殖雄性布氏鲳鲹亲鱼的水体温度升温至28～32℃，并且升温的速率为每周上升1℃，加快性腺成熟，直至判定雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼均达到性成熟；并筛选出性成熟的亲鱼在20～22℃下独立培育，日投喂量为鱼体质量的1～2％；
b.人工催产：对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行催产，将筛选出性成熟的雌性卵形鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持在22～23℃，催产剂为：100～200IU/kg鱼体质量的HCG和1～3ug/kg鱼体质量的LRH-A2，进行一次性催产；将筛选出性成熟的雄性布氏鲳鲹亲鱼独立培育的5天后进行催产，将水温维持25～29℃；催产剂为：100～200IU/kg鱼体质量的HCG和2～5ug/kg鱼体质量的LRH-A3，一次性进行催产；
c.人工采精、挤卵：分别从雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼中取得卵子和白色精液；
d.人工杂交授精：向精液中加入过滤海水，混合均匀后，按每公斤卵子3～6ml精液的比例将精液淋入装有卵子的容器中，进行人工授精，搅拌均匀后，静置5～10min，用过滤海水冲洗受精卵2～3遍，静置分离8～10min，取上浮受精卵进行乳化；
e.受精卵孵化：将上浮受精卵放入孵化桶内孵化，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
2.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤(1)中，卵形鲳鲹鱼苗和选取布氏鲳鲹鱼苗先采用网箱在池塘内，将水温控制在20℃条件下强化培育40天。
3.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤(1)中，所述营养强化，在亲本选择后的次月日投喂量为鱼体质量的3～4％。
4.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤(1)中，分别选取体重4.0～5.0kg的卵形鲳鲹鱼苗和布氏鲳鲹鱼苗进行培育。
5.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：所述雌性卵形鲳鲹亲鱼与所述雄性布氏鲳鲹亲鱼的杂交数量比例为：6:1。
6.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤a中，每周定期对雌性卵形鲳鲹亲鱼和雄性布氏鲳鲹亲鱼进行性腺成熟度观察，待雌鱼腹部可见明显的卵巢轮廓，生殖孔微红；雄鱼泄殖孔略封闭，生殖孔微红，腹部痩扁，即可判定为达到性成熟，并筛选出性成熟的亲鱼在22℃独立培育，日投喂量为鱼体质量的1％。
7.根据权利要求6所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤b中，雌性卵形鲳鲹亲鱼在水温为23℃下进行一次性催产，雄性布氏鲳鲹亲鱼在水温为28℃下进行一次性催产。
8.根据权利要求7所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤c中，所述人工采精、挤卵为：在亲鱼催产后24小时后开始每1小时检查，轻压雌性卵形鲳鲹亲鱼腹部有卵子流出时开始进行人工挤卵，从前向生殖孔方向推挤，使卵子由生殖孔流出；同理，轻压雄性布氏鲳鲹亲鱼的腹部，从前向生殖孔方向推挤，使白色精液由生殖孔流出。
9.根据权利要求1所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤d中，所述卵子和精液的混合比例为：每公斤卵子4～5ml精液。
10.根据权利要求9所述的一种卵形鲳鲹和布氏鲳鲹的人工杂交育种方法，其特征在于：步骤e中，将上浮受精卵放入孵化桶内，在水温为22～28℃，盐度为5～11，pH为7.5～8的条件下进行流水孵化，孵化2～3天后，调整盐度至11～18，孵化3天以上时，调整盐度至18～25；孵化密度为8～10万粒受精卵/m3，微充气，水中溶解氧在6mg/L以上，待杂交的仔鱼孵化出膜时，收集转移至培育池中培育，获得杂交品种的白金鲳鱼苗。
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