CN109810159A - 一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，包括萃取液的制备、鹅去氧胆酸与别胆酸胺盐的制备、胺盐精制、别胆酸的制备、鹅去氧胆酸溶液真空回收等工艺步骤。采用本发明方法替代镁盐法，优化了提取别胆酸的生产工艺，更能够快速实现产业化，着重解决了面对国家环保高压监管态势下的环保压力问题。

Description

一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法。

背景技术

在生物领域，胆汁酸的开发利用是人们研究的重要课题之一，尤其在生物化学日新发展的推动下，对胆汁酸的研究更是不断的深入。然而，胆汁酸资源在生物界是有限的，所以任何一种胆汁酸都很重要。鸭胆汁中的主要胆汁酸为别胆酸和鹅去氧胆酸，其中别胆酸的含量为0.9%-1.1%，鹅去氧胆酸的含量为1.0%-1.2%。由于别胆酸是一种优良的饲料添加剂成份，更是合成胆酸、鹅去氧胆酸等其它胆汁酸的重要资源，对其的研究、开发和利用也正在向新的领域拓展。为了使别胆酸的提取纯度和收益率更高，人们采用了多种提取方法，比如先分离鸭胆汁中的鹅去氧胆酸等其它物质，但效果并不显著，这是因为分离鹅去氧胆酸和其它物质时，不仅鹅去氧胆酸的纯度会降低，别胆酸也会随之流失，必将影响别胆酸的提取收益率。此外，目前的别胆酸提取方式一般还是采用传统的镁盐法，由于镁盐法产生的别胆酸中间体的体量大，设备资源占用率高，溶剂耗用大，安全风险高，环保风险与管控压力很大，不利于工业化大规模生产。

因此，如何从鸭胆汁原料中提高别胆酸的收益率，得到更加纯化的鹅去氧胆酸，同时又能化解环保风险，实现工业化大规模生产，已是一个重要的全新课题。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其目的是为了在鸭胆汁原料中提取别胆酸、分离鹅去氧胆酸、脂肪酸。该方法是在溶液PH值区间分别为6.3+0.05和5.8+0.05的条件下，经过两次分级萃取，利用别胆酸与鹅去氧胆酸在此溶剂体系中的溶解度差异，让少量别胆酸被混合溶剂萃取而析出固物，大量别胆酸不被萃取而以水溶液状态存在，此时95-98%的鹅去氧胆酸被萃取溶解到有机溶剂中。然后将固物、水相和有机相的三相混合溶液固液分离，分别收集固物、水相、有机相，合并固物和水相，备用于提取别胆酸；此时的有机相中含有鹅去氧胆酸和2%-5%的别胆酸，再经过成盐、精制、分离别胆酸，得到纯化的鹅去氧胆酸。将精制分离后的别胆酸合并到备用的固物和水相中，经过真空回收、加碱溶解、调酸，最终得到别胆酸成品。

其中，成盐、精制、分离别胆酸时，采用钠盐作为沉淀剂，加入到低水分的乙酸丁酯和脂肪烃类的混合溶剂的溶解液中，利用别胆酸与钠盐在一定温度和PH值条件下反应生成沉淀，而鹅去氧胆酸溶液不反应的情况下，仍以鹅去氧胆酸溶液存在而实现精制分离。

采用本发明方法替代镁盐法，优化了提取别胆酸的生产工艺，更能够快速实现产业化。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，工艺步骤如下：

（1）萃取液的制备：在鸭胆汁原料中加入氢氧化钠，皂化、冷却，用含量为20%的稀盐酸调PH值至7-8，加入酯类、烷烃类和醇类混合溶剂；其中加入醇类溶剂，是为了增加鸭胆汁中两类主要胆汁酸的溶解度差异。第一次控温53℃-55℃，加入含量为8%+0.5%的稀盐酸萃取，调溶液PH值至6.3+0.05，静置60分钟后分离得一次萃取有机相、一次萃取水相及固物。在一次萃取水相中加入酯类、烷烃类和醇类混合溶剂，第二次控温53℃-55℃，加8%+0.5%的稀盐酸萃取，调溶液PH值为5.8+0.05，静置60分钟后分离得二次萃取有机相、二次萃取水相及固物。合并一次和二次萃取的有机相并检测，在两次萃取合并的有机相中，鹅去氧胆酸与别胆酸的纯度比例一般为（87%-92%）：（2%-5%）。检测两次萃取的水相，别胆酸纯度为98%-99%；检测两次萃取的固物，别胆酸的纯度为93%-95%。

（2）鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备：在步骤（1）制备的两次萃取合并有机相中，加入胺类溶剂，以此作为络合沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离。去除脂肪酸，即动物油脂，纯化别胆酸和鹅去氧胆酸。加热回流反应30分钟，得到鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐结晶物，冷却至35℃，压滤分离，得鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐和母液，母液经高效蒸发器回收，所得溶剂再利用。

（3）胺盐精制：在步骤（2）制备的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐中，加入氢氧化钠溶解，溶解液中加入含量为20%的稀盐酸中和至溶液PH值至2.5-3.5，升温脱水，冷却至35℃，离心分离，得鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品和水相，水相经预处理后进入污水站。将混合粗品干燥至水分小于0.5%，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸与别胆酸纯度比为（89%-92%）：（2%-5%）。将鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品，投入到水分小于1.0%的乙酸丁酯和脂肪烃类的混合溶剂中，加热搅拌回流溶解，冷却至50℃，用钠盐做成盐的沉淀剂，将钠盐配成溶液加入混合溶解液中，调PH值至6.0-6.2，并控温48-52℃成盐，搅拌反应60分钟后冷却至35℃以下，固液分离，固物为别胆酸钠盐，溶液为鹅去氧胆酸溶液。样品送检，钠盐中别胆酸纯度为94%-95%。

（4）别胆酸的制备：将步骤（3）中的别胆酸钠盐与二次萃取水相、萃取固物合并，加热真空回收溶剂，加入氢氧化钠溶解，并调溶解液PH值至11-12；向溶解液中加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至1-2，升温53-55℃脱水，压滤分离，得别胆酸固物，干燥，得到别胆酸成品，水相经预处理后进入污水站。经高效液相色谱检测，别胆酸纯度为95%-97%。

（5）将步骤（3）所得鹅去氧胆酸溶液真空回收至膏状，真空回收过程中，需加入溶液总量0.5%+0.03%的碳酸钠，配成浓度为20%的水溶液加入，保证鹅去氧胆酸溶液在回收时的PH值为7-7.5，以保护膏状物，防止膏状物加热回收过程中被破坏。回收完毕，在膏状物中加入溶液总量80%+3%的水和溶液总量2%+0.02%的氢氧化钠溶解，配置成浓度为28%的水溶液，加热，回流30分钟，冷却至30℃。再加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至2.5-3.5，升温43-45℃脱水，冷却至35℃以下离心，得鹅去氧胆酸固物和水相，水相经预处理后进入污水站，固物干燥后得鹅去氧胆酸成品。经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸纯度为93.5%-95.5%。

进一步地，步骤（1）中所述混合溶剂中酯类、烷烃类和醇类的比例为8:1:1。在酯类中加入醇类，能增加胆汁酸溶解度，特别是有效增加别胆酸与鹅去氧胆酸的萃取分离效果，因为别胆酸比鹅去氧胆酸在醇类溶剂中的溶解度要大。

进一步地，步骤（1）中所述混合溶剂中的酯类为乙酸丁酯、乙酸乙酯或丙酸乙酯。

进一步地，步骤（1）中所述混合溶剂中的烷烃类为二氯乙烷、二氯甲烷或三氯甲烷。

进一步地，步骤（1）中所述混合溶剂中的醇类为丁醇、甲醇或乙醇。

进一步地，步骤（1）中的酯类和醇类混合溶剂，按照丁酯类与丁醇搭配使用，乙酯类与乙醇搭配使用。丁酯对丁醇、乙酯对乙醇的搭配目的是预防酯类溶剂在生产异常情况下被破坏分解成醇后，能够确保分解物与所搭配的醇的一致性，确保其纯度。

进一步地，步骤（2）中所述的胺类溶剂为三乙胺溶剂、三乙醇胺、乙二胺、甲胺或二异丙胺。

进一步地，步骤（3）中所述的钠盐为碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠或亚硫酸钠。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

1、本发明采用提取分离法替代了常规的从鸭胆汁中提取别胆酸时的镁盐法，优化了提取别胆酸的生产工艺，提高了别胆酸的收率，更能快速实现产业化。重点解决了镁盐法提取别胆酸时，产生的别胆酸中间体的体量大、设备资源占用多、生产场地占用大、人工等生产成本居高、溶剂耗用大、安全风险高、环保隐患大的一系列问题，尤其在化解环保风险上有明显优势。其原因在于，两次萃取粗分离别胆酸所得中间体固物非常少，都是以母液形式存在，且母液都是在密闭系统中进行传递；而镁盐法产生大量别胆酸中间体物料后，需大量器皿暂存，大片场地堆放，并耗用大量人工和大量溶剂，利用诸多反应釜反复提取别胆酸中间体物料中残留的鹅去氧胆酸；尤其堆放的别胆酸中间体在存放期间、以及进出压滤机和反应釜过程中，均会产生大量溶剂挥发，在高温天气时的安全隐患巨大，VOCs极不达标。

2、常规的镁盐工艺法中，别胆酸与鹅去氧胆酸都会随提取后的水相有不同程度的流失，流失后的别胆酸收集和处理非常困难和复杂；而本发明方法中，在经过两步萃取分离和成盐精制分离后，能够将所有含别胆酸的各类水相、固物、钠盐沉淀全部集中处理，流失率几乎为零。因此可从鸭胆汁原料中大大提高别胆酸的收益率。

3、通过本发明方法，既能分离出具有药学价值的别胆酸，又能提纯鸭胆汁中的鹅去氧胆酸，分离产生的脂肪酸，能加工提炼油脂，还能加工处理后作为燃料，最大程度地提高了胆汁酸资源的综合利用率。

4、通过本发明方法分离产生的别胆酸，可用于生产胆汁酸的下游产品，如食品添加剂等。也可以直接将别胆酸用来转化成鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸是合成熊去氧胆酸的原料，有效地拓宽了加工生产熊去氧胆酸的原料来源。

5、整个工艺过程产生的污水极易可控，化学需氧量均能达到当地环保部门的排放标准，环保风险几乎为零，整体污水的COD值，在镁盐法的基础上降低了50%。这是因为本发明方法中的水相几乎不含物料，而水相中仅含微量的溶剂都是经过回收收集，所以几乎没有影响COD值的因素。

6、本发明方法产生的下脚料少，且下脚料还能通过萃取循环利用，很大程度上减少了胆汁酸资源的流失。分离别胆酸的步骤中所使用的辅料，尤其是工艺中使用的主要溶剂酯类，为常规高沸点化工溶剂，不属于易制毒类，基本无环境危害和安全风险。

7、本发明方法涉及的工艺条件要求不高，但诸如PH值和水分标准很精细，虽调节空间不大，但在配套设施功能完善的情况下，均具有可控性。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进一步详细说明。

实施例一

一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，包括如下步骤：

（1）萃取液的制备：取鸭胆汁原料500公斤，皂化，得皂化液，皂化液中加氢氧化钠，使氢氧化钠的质量百分比浓度达到14%，室温冷却至析出物浮在皂化液表面，分离并收集下层皂化液，得皂化析出物。向皂化析出物中加入75公斤水，加热溶解后，边搅拌边加入含量为20%的稀盐酸，调节PH值为7.5，加入350公斤乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，其中乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的比例为8:1:1，然后控温54℃，边搅拌边加入含量为8.5%的稀盐酸，调节PH值至6.35，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，将分别收集的上层一次萃取有机相和下层一次萃取水相放入不同的釜中。

向一次萃取水相的釜中加入300公斤比例为8:1:1的乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，控温53℃，加入含量为8.5%的稀盐酸调PH值为5.85，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，分别收集上层的二次萃取有机相和下层的二次萃取水相。

将二次萃取有机相放入一次萃取有机相的釜中与之合并，并检测两次合并的有机相，别胆酸与鹅去氧胆酸的纯度比为3%：90%。检测二次萃取水相，别胆酸纯度为98.5%。检测合并收集的5公斤固物，别胆酸纯度为93.5%，将合并收集的5公斤固物，投入到二次萃取水相中，待后面成盐精制产生的别胆酸钠盐时，一并处理。

（2）鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备：在步骤（1）制备的两次萃取合并有机相中，加入1.5公斤三乙胺溶剂，以此作为络合沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离。去除脂肪酸，即动物油脂，纯化别胆酸和鹅去氧胆酸。加热回流反应30分钟，得到鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐结晶物，冷却至35℃，压滤分离，得到7.2公斤鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐和母液，母液经高效蒸发器回收，所得溶剂再利用。

（3）胺盐精制：取步骤（2）制备的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐7.2公斤，加入28公斤水和0.4公斤的氢氧化钠，加热碱解，回收三乙胺溶液1.2公斤后，用含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至2.6，升温脱水，冷却至35℃，离心分离，得固态的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品与水相。水相经预处理后进入污水站，混合粗品干燥后，得6.8公斤混合干品，检测水分为0.5%，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸与别胆酸的纯度比为89%：4%。

将6.8公斤混合干品在56公斤比例为9:1的乙酸丁酯和120号汽油的混合溶剂中加热搅拌回流溶解，冷却至50℃，将0.3公斤碳酸钠用0.8公斤水溶解后加入其中，调节PH值6.12，搅拌反应60分钟，再搅拌冷却至33℃，压滤分离，得鹅去氧胆酸溶液和1.2公斤别胆酸钠盐固物。样品送检，钠盐中别胆酸纯度为94.5%。

（4）别胆酸的制备：将1.2公斤别胆酸钠盐加入到存放有二次萃取水相和固物的釜中与之合并，加热真空回收溶剂后，加入1.8公斤氢氧化钠溶解、回收，冷却至50℃，加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为1.5，升温55℃脱水，压滤分离，得别胆酸固物，干燥得别胆酸成品4.95公斤，水相经预处理后进入污水站。经高效液相色谱检测，别胆酸纯度为95.5%。

（5）将步骤（3）所得的鹅去氧胆酸溶液，真空回收，回收完溶剂后，加入0.3公斤碳酸钠用1.2公斤的水溶解成水溶液，继续回收成膏状，再加入50公斤水，加入1.2公斤氢氧化钠用3.1公斤水溶解成水溶液，加热，回流30分钟，冷却至30℃，加含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为2.5，升温45℃脱水，冷却至35℃离心，得鹅去氧胆酸固物和水相，水相经预处理后进入污水站。鹅去氧胆酸固物干燥，得5.58公斤鹅去氧胆酸成品，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸纯度为94.8%。

实施例二

一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，包括如下步骤：

（1）萃取液的制备：取鸭胆汁原料520公斤，皂化，得皂化液，皂化液中加氢氧化钠，使氢氧化钠的质量百分比浓度达到14.5%，室温冷却至析出物浮在皂化液表面，分离并收集下层皂化液，得皂化析出物。向皂化析出物中加入78公斤水，加热溶解后，边搅拌边加入含量为20%的稀盐酸，调节PH值为7.5，加入360公斤乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，其中乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的比例为8:1:1，然后控温53.5℃，边搅拌边加入含量为8%的稀盐酸，调节PH值至6.3，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，将分别收集的上层一次萃取有机相和下层一次萃取水相放入不同的釜中。

向一次萃取水相的釜中加入310公斤比例为8:1:1的乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，控温54℃，加入含量为8%的稀盐酸调PH值为5.8，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，分别收集上层的二次萃取有机相和下层的二次萃取水相。

将二次萃取有机相放入一次萃取有机相的釜中与之合并，并检测两次合并的有机相，别胆酸与鹅去氧胆酸的纯度比为2.8%：89%。检测二次萃取水相，别胆酸纯度为98.8%。检测合并收集的5.2公斤固物，别胆酸纯度为94%，将合并收集的5.2公斤固物，投入到二次萃取水相中，待后面成盐精制产生的别胆酸钠盐时，一并处理。

（2）鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备：在步骤（1）制备的两次萃取合并有机相中，加入1.56公斤三乙胺溶剂，以此作为络合沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离。去除脂肪酸，即动物油脂，纯化别胆酸和鹅去氧胆酸。加热回流反应30分钟，得到鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐结晶物，冷却至35℃，压滤分离，得到7.48公斤鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐和母液，母液经高效蒸发器回收，所得溶剂再利用。

（3）胺盐精制：取步骤（2）制备的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐7.48公斤，加入29公斤水和0.45公斤的氢氧化钠，加热碱解，回收三乙胺溶液1.28公斤后，用含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至2.2，升温脱水，冷却至35℃，离心分离，得固态的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品与水相。水相经预处理后进入污水站，混合粗品干燥后，得7.1公斤混合干品，检测水分为0.48%，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸与别胆酸的纯度比为88.9%：4.1%。

将7.1公斤混合干品在58公斤比例为9:1的乙酸丁酯和120号汽油的混合溶剂中加热搅拌回流溶解，冷却至50℃，将0.4公斤碳酸钠用0.86公斤水溶解后加入其中，调节PH值6.15，搅拌反应60分钟，再搅拌冷却至35℃，压滤分离，得鹅去氧胆酸溶液和1.25公斤别胆酸钠盐固物。样品送检，钠盐中别胆酸纯度为94.7%。

（4）别胆酸的制备：将1.25公斤别胆酸钠盐加入到存放有二次萃取水相和固物的釜中与之合并，加热真空回收溶剂后，加入1.88公斤氢氧化钠溶解、回收，冷却至49℃，加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为1.35，升温54.5℃脱水，压滤分离，得别胆酸固物，干燥得别胆酸成品5.2公斤，水相经预处理后进入污水站。经高效液相色谱检测，别胆酸纯度为95.8%。

（5）将步骤（3）所得的鹅去氧胆酸溶液，真空回收，回收完溶剂后，加入0.33公斤碳酸钠用1.32公斤水溶解成水溶液，继续回收成膏状，再加入52公斤水，加入1.25公斤氢氧化钠用3.2公斤水溶解成水溶液，加热，回流30分钟，冷却至32℃，加含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为2.7，升温45℃脱水，冷却至35℃离心，得鹅去氧胆酸固物和水相，水相经预处理后进入污水站。鹅去氧胆酸固物干燥，得5.65公斤鹅去氧胆酸成品，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸纯度为94.9%。

实施例三

一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，包括如下步骤：

（1）萃取液的制备：取鸭胆汁原料480公斤，皂化，得皂化液，皂化液中加氢氧化钠，使氢氧化钠的质量百分比浓度达到14.2%，室温冷却至析出物浮在皂化液表面，分离并收集下层皂化液，得皂化析出物。向皂化析出物中加入72公斤水，加热溶解后，边搅拌边加入含量为20%的稀盐酸，调节PH值为7.6，加入340公斤乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，其中乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的比例为8:1:1，然后控温54.5℃，边搅拌边加入含量为7.5%的稀盐酸，调节PH值至6.25，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，将分别收集的上层一次萃取有机相和下层一次萃取水相放入不同的釜中。

向一次萃取水相的釜中加入290公斤比例为8:1:1的乙酸丁酯、二氯乙烷和丁醇的混合溶剂，控温55℃，加入含量为7.5%的稀盐酸调PH值为5.75，静置30分钟，分出下层水相，界面层和上层有机相压滤，收集固物，压滤液再静置30分钟，分液，分别收集上层的二次萃取有机相和下层的二次萃取水相。

将二次萃取有机相放入一次萃取有机相的釜中与之合并，并检测两次合并的有机相，别胆酸与鹅去氧胆酸的纯度比为2.9%：90.7%。检测二次萃取水相，别胆酸纯度为94.9%。检测合并收集的4.8公斤固物，别胆酸纯度为93.8%，将合并收集的4.8公斤固物，投入到二次萃取水相中，待后面成盐精制产生的别胆酸钠盐时，一并处理。

（2）鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备：在步骤（1）制备的两次萃取合并有机相中，加入1.44公斤三乙胺溶剂，以此作为络合沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离。去除脂肪酸，即动物油脂，纯化别胆酸和鹅去氧胆酸。加热回流反应30分钟，得到鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐结晶物，冷却至35℃，压滤分离，得到6.9公斤鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐和母液，母液经高效蒸发器回收，所得溶剂再利用。

（3）胺盐精制：取步骤（2）制备的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐6.9公斤，加入27公斤水和0.38公斤的氢氧化钠，加热碱解，回收三乙胺溶液1.15公斤后，用含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至2，升温脱水，冷却至34.8℃，离心分离，得固态的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品与水相。水相经预处理后进入污水站，混合粗品干燥后，得6.5公斤混合干品，检测水分为0.48%，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸与别胆酸的纯度比为89.5%：3.9%。

将6.5公斤混合干品在54公斤比例为9:1的乙酸丁酯和120号汽油的混合溶剂中加热搅拌回流溶解，冷却至50℃，将0.285公斤碳酸钠用0.75公斤水溶解后加入其中，调节PH值6.14，搅拌反应60分钟，再搅拌冷却至34℃，压滤分离，得鹅去氧胆酸溶液和1.15公斤别胆酸钠盐固物。样品送检，钠盐中别胆酸纯度为94.7%。

（4）别胆酸的制备：将1.15公斤别胆酸钠盐加入到存放有二次萃取水相和固物的釜中与之合并，加热真空回收溶剂后，加入1.73公斤氢氧化钠溶解、回收，冷却至49.5℃，加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为1.52，升温54.5℃脱水，压滤分离，得别胆酸固物，干燥得别胆酸成品4.76公斤，水相经预处理后进入污水站。经高效液相色谱检测，别胆酸纯度为95.6%。

（5）将步骤（3）所得的鹅去氧胆酸溶液，真空回收，回收完溶剂后，加入0.29公斤碳酸钠用1.16公斤水溶解成水溶液，继续回收成膏状，再加入48公斤水，加入1.15公斤氢氧化钠用2.96公斤水溶解成水溶液，加热，回流30分钟，冷却至30℃，加含量为20%的稀盐酸中和，调PH值为2.6，升温44.5℃脱水，冷却至35℃离心，得鹅去氧胆酸固物和水相，水相经预处理后进入污水站。鹅去氧胆酸固物干燥，得5.32公斤鹅去氧胆酸成品，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸纯度为94.9%。

上述实施例中投入与产出统计表如下：

（数量单位：公斤 ，纯度与收率单位：%）

投入鸭胆汁数量	别胆酸数量	别胆酸收率	别胆酸纯度	鹅去氧胆酸数量	鹅去氧胆酸收率	鹅去氧胆酸纯度
							500	4.95	0.99	95.5	5.58	1.11	94.8
520	5.2	1.0	95.8	5.65	1.13	94.9
							480	4.76	0.99	95.6	5.32	1.06	94.9

通过上述三个具体实施例的实施，可以得出本发明工艺控制关键点如下：

1、萃取液的制备中：鸭胆汁皂化是在0.1-3公斤压力内完成。

2、萃取液的制备中：皂化液要用酸调节PH值为7-8之间后，才能加入溶剂，是为了防止溶剂在高温强碱性条件下被破坏。

3、萃取液的制备中：在酯类中加入醇类，能增加胆汁酸溶解度，更能有效增加别胆酸与鹅去氧胆酸的萃取分离效果，因为别胆酸比鹅去氧胆酸在醇类溶剂中的溶解度要大，这是工艺关键点。

4、萃取液的制备中：萃取液的制备中：第一次萃取的PH值与第二次萃取的PH值区间分别为6.25-6.35与5.75-5.85，这是工艺关键点，如果两次PH值控制不好，将影响别胆酸分离效果。

5、萃取液的制备中：两次萃取所使用的盐酸浓度为8%+0.5%，区别于本发明工艺中其它步骤所使用的盐酸浓度。如果两次萃取使用的盐酸浓度高于此标准，会形成萃取时加酸产生的酸化速度与萃取溶解速度不匹配，最终导致别胆酸固物中,其鹅去氧胆酸成份增加而使别胆酸纯度不高。

6、萃取液的制备中：萃取分离产生的第一次水相是需要进行第二次萃取的，第二次萃取产生的水相不需要再萃取，两次萃取分离得到的固物均为别胆酸，需要与二次萃取水相、以及成盐精制产生的别胆酸钠盐一并处理，最终得到别胆酸，因此本发明方法的流程中没有导致别胆酸的流失。

7、鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备中：是用胺类溶剂作为沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离脂肪酸（即动物油脂），初步达到纯化别胆酸和鹅去氧胆酸的作用。

8、胺盐精制中：是用钠盐作为沉淀剂，利用低水分的乙酸丁酯、120号汽油的脂肪烃类的混合溶剂，利用别胆酸与钠盐在一定温度和PH值条件下反应生成沉淀，此时的鹅去氧胆酸溶液不反应仍以鹅去氧胆酸溶液存在，而实现精制分离。

9、别胆酸的制备中：合并别胆酸钠盐和二次萃取水相及萃取固物，真空回收完溶剂后，加入氢氧化钠，调溶解液PH值为11-12，是为了溶解固物和钠盐，并在蒸馏溶液中加入氨氮物质，有助于中和反应，有助于纯化别胆酸。

10、步骤（5）中：所得鹅去氧胆酸溶液真空回收成膏状前，需加入一定量的碳酸钠溶液，是为了保护膏状物，防止加热回收过程中鹅去氧胆酸被破坏。

Claims (8)

1.一种能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，工艺步骤如下：

（1）萃取液的制备：在鸭胆汁原料中加入氢氧化钠，皂化、冷却，用含量为20%的稀盐酸调PH值至7-8，加入酯类、烷烃类和醇类混合溶剂；第一次控温53℃-55℃，加入含量为8%+0.5%的稀盐酸萃取，调溶液PH值至6.3+0.05，静置60分钟后分离得一次萃取有机相、一次萃取水相及固物；在一次萃取水相中加入酯类、烷烃类和醇类混合溶剂，第二次控温53℃-55℃，加8%+0.5%的稀盐酸萃取，调溶液PH值为5.8+0.05，静置60分钟后分离得二次萃取有机相、二次萃取水相及固物；合并一次和二次萃取的有机相并检测，在两次萃取合并的有机相中，鹅去氧胆酸与别胆酸的纯度比例为（87%-92%）：（2%-5%）；检测两次萃取的水相，别胆酸纯度为98%-99%；检测两次萃取的固物，别胆酸的纯度为93%-95%；

（2）鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐的制备：在步骤（1）制备的两次萃取合并有机相中，加入胺类溶剂，以此作为络合沉淀剂，利用鹅去氧胆酸、别胆酸与脂肪酸的胺盐在酯类和烷烃类溶剂中溶解度的差异，实现分离；去除脂肪酸，即动物油脂，纯化别胆酸和鹅去氧胆酸；加热回流反应30分钟，得到鹅去氧胆酸与别胆酸的胺盐结晶物，冷却至35℃，压滤分离，得鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐和母液，母液经高效蒸发器回收，所得溶剂再利用；

（3）胺盐精制：在步骤（2）制备的鹅去氧胆酸与别胆酸的混合胺盐中，加入氢氧化钠溶解，溶解液中加入含量为20%的稀盐酸中和至溶液PH值至2.5-3.5，升温脱水，冷却至35℃，离心分离，得鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品和水相，水相经预处理后进入污水站；将混合粗品干燥至水分小于0.5%，经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸与别胆酸纯度比为（89%-92%）：（2%-5%）；将鹅去氧胆酸与别胆酸的混合粗品，投入到水分小于1.0%的乙酸丁酯和脂肪烃类的混合溶剂中，加热搅拌回流溶解，冷却至50℃，用钠盐做成盐的沉淀剂，将钠盐配成溶液加入混合溶解液中，调PH值至6.0-6.2，并控温48-52℃成盐，搅拌反应60分钟后冷却至35℃以下，固液分离，固物为别胆酸钠盐，溶液为鹅去氧胆酸溶液；样品送检，钠盐中别胆酸纯度为94%-95%；

（4）别胆酸的制备：将步骤（3）中的别胆酸钠盐与二次萃取水相、萃取固物合并，加热真空回收溶剂，加入氢氧化钠溶解，并调溶解液PH值至11-12；向溶解液中加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至1-2，升温53-55℃脱水，压滤分离，得别胆酸固物，干燥，得到别胆酸成品，水相经预处理后进入污水站；经高效液相色谱检测，别胆酸纯度为95%-97%；

（5）将步骤（3）所得鹅去氧胆酸溶液真空回收至膏状，真空回收过程中，需加入溶液总量0.5%+0.03%的碳酸钠，配成浓度为20%的水溶液加入，保证鹅去氧胆酸溶液在回收时的PH值为7-7.5，以保护膏状物，防止膏状物加热回收过程中被破坏；回收完毕，在膏状物中加入溶液总量80%+3%的水和溶液总量2%+0.02%的氢氧化钠溶解，配置成浓度为28%的水溶液，加热，回流30分钟，冷却至30℃；再加入含量为20%的稀盐酸中和，调PH值至2.5-3.5，升温43-45℃脱水，冷却至35℃以下离心，得鹅去氧胆酸固物和水相，水相经预处理后进入污水站，固物干燥后得鹅去氧胆酸成品；经高效液相色谱检测，鹅去氧胆酸纯度为93.5%-95.5%。

2.如权利要求1所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（1）中所述混合溶剂中酯类、烷烃类和醇类的比例为8:1:1。

3.如权利要求1或2所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（1）中所述混合溶剂中的酯类为乙酸丁酯、乙酸乙酯或丙酸乙酯。

4.如权利要求3所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（1）中所述混合溶剂中的烷烃类为二氯乙烷、二氯甲烷或三氯甲烷。

5.如权利要求3所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（1）中所述混合溶剂中的醇类为丁醇、甲醇或乙醇。

6.如权利要求5所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（1）中的酯类和醇类混合溶剂，按照丁酯类与丁醇搭配使用，乙酯类与乙醇搭配使用。

7.如权利要求1所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的胺类溶剂为三乙胺溶剂、三乙醇胺、乙二胺、甲胺或二异丙胺。

8.如权利要求1所述的能从鸭胆汁中提高别胆酸收率的方法，其特征在于，步骤（3）中所述的钠盐为碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠或亚硫酸钠。