CN109757551A - 一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶‑壳聚糖缓释涂膜的制备方法，属于水产品保鲜领域。本发明在壳聚糖涂膜液中添加茶多酚脂质体和溶菌酶，制备茶多酚脂质体/溶菌酶‑壳聚糖缓释涂膜。该工艺操作简单，成本低廉，且该涂膜用于鱼片保鲜能很好地保持鱼片的鲜度、质构和风味，延长其货架期。
Description
技术领域
本发明涉及一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，属于水产品保鲜领域。
背景技术
水产品味道鲜美，营养丰富，但在贮藏、运输和销售等流通环节中易发生腐败而失去营养价值。随着我国经济的发展，人们的生活和饮食方式不断变化，水产品的需求逐年增加，并且水产品的品种也更加多样，产量和出口量不断增加，水产品保鲜也随之备受关注。
茶多酚具有抗氧化性和抑菌性，能有效地抑制水产品中微生物的生长，延缓脂肪氧化，进而延长水产品的货架期。茶多酚中的羟基基团特别活泼，在光照、高温、碱性等条件下极易发生氧化、聚合、缩合等反应，且在生物体内其半衰期较短，从而失去其抗氧化活性及其他生物学功能，使其在储存和应用过程中受到限制。选用合适的缓释体系可有效抑制其快速释放，以拓宽其在食品保鲜中的应用。溶菌酶可选择性杀灭微生物而不作用于食品中的其他物质，保证食品原有营养成分不受损失，是一种很好的天然保鲜剂，被广泛应用于食品保鲜等领域。但是实际应用情况中，溶菌酶的抗菌谱相较于其他生物保鲜剂窄。因此，溶菌酶常与其他保鲜剂复配使用，可提高其保鲜效果。
脂质体是一种新型的纳米载体，将保鲜剂包埋于脂质体中，可使其缓慢释放，获得具有长效保鲜性能的产品。它不仅可以避免其包裹物质的分解，保留其原本的性质，而且可形成缓释微环境，延长保鲜剂的作用时间，因而在食品保鲜材料领域日益受到青睐。
壳聚糖安全无毒，有良好的抗菌性，易成膜。其涂膜具有良好的黏附性、通透性、保湿性和一定的弹韧性，且对氧气﹑二氧化碳﹑水等气体具有选择渗透作用。壳聚糖涂膜液可直接涂覆在食品表面，形成保护膜，调节气体交换，减少水分散失，使其在涂膜保鲜方面具有广阔的应用前景。但单一壳聚糖涂膜的抗菌保鲜性能有限，将其他具有抗菌性能的保鲜剂与壳聚糖涂膜材料复合，可使保鲜剂在一定时间后缓慢释放出来作用到食品的表面，进而长时间防止微生物再度污染，实现很好的食品保鲜效果。
发明内容
本发明提供了一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，其目的是获得工艺简单、成本低的，具有长效保鲜性能的缓释涂膜保鲜材料。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，其特征在于：该方法步骤如下：称取质量分数为0.5～5.0%的壳聚糖溶于体积分数为0.3～3.0%的冰乙酸水溶液中，20～80℃条件下恒温搅拌，待其充分溶解，加入体积分数为0.1～0.6%的甘油，继续搅拌混合均匀，得壳聚糖涂膜液；取40mL茶多酚脂质体悬浊液和0.2～2.0g溶菌酶，充分溶解于100mL壳聚糖涂膜液中，超声脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
进一步地，每100mL茶多酚脂质体悬浊液中含茶多酚0.25～2.0g。
进一步地，所述壳聚糖脱乙酰度为≥85%，粘度为100-200mPa.s。
应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜可在各类鱼片保鲜中的应用，鱼片保鲜步骤如下：鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片，将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液中后捞出，风干，即在鱼片表面形成鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜；装于包装保鲜袋中密封，于-20～4℃中保存。
进一步地，将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液中2～8min后捞出，风干。
本发明具有如下优点及有益效果：
(1) 工艺简单、成本低廉；
(2) 脂质体包覆的茶多酚在涂膜内，形成茶多酚逐级缓释的体系，使保鲜剂的作用时间更长；
(3) 与溶菌酶复配使用，拓宽了保鲜剂的抗菌谱，且溶菌酶于壳聚糖涂膜中缓释，延长其作用时间；
(4) 使鱼片的冷藏保鲜货架期延长。
附图说明
图1为实施例1中涂膜的XRD图；
图2为实施例1中涂膜的FT-IR图；
图3为实施例1中涂膜的平面SEM图；
图4为实施例1中涂膜的断面SEM图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。
本发明在壳聚糖涂膜中添加茶多酚脂质体和溶菌酶，制备茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜。该工艺操作简单，成本低廉，且该涂膜在用于鱼片保鲜中能很好地保持鱼片的鲜度、质构和风味，延长其货架期。
本发明提出了一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，该方法步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取1.98～13.2g大豆卵磷脂和0.264～1.98g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为0.1～1.0%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取0.5～4.0g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mLPBS中，于20~70℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌5～30min。用均质机均质10～30次，2 s开，2 s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，35～55℃旋蒸5～60min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于0～4℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为0.5～5.0%，脱乙酰度≥85%，粘度为100-200mPa.s的壳聚糖，溶于体积分数为0.3～3.0%的冰乙酸水溶液中，20～80℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.1～0.6%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及0.2~2.0g溶菌酶，充分分散于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜溶液中2～8min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于-20～4℃冻藏或冷藏保鲜。
实施例1
如图1-4所示，一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜的制备方法，其步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取13.2g大豆卵磷脂和1.98g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为1.0%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取4.0g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mL磷酸缓冲溶液中，于70℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌30min。用均质机均质30次，2 s开，2s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，55℃旋蒸30min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于4℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为5.0%，脱乙酰度为95%，粘度为200mPa.s的壳聚糖溶于体积分数为3.0%的冰乙酸水溶液中，80℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.6%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及2.0g溶菌酶，充分分散于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜溶液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜液中2min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于4℃冷藏保存。
实施例2
一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，该方法步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取1.98g大豆卵磷脂和0.264g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为0.1%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取0.5g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mL磷酸缓冲溶液中，于20℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌5min。用均质机均质10次，2 s开，2s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，35℃旋蒸60min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于0℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为0.5%，脱乙酰度为85%，粘度为100Pa.s的壳聚糖溶于体积分数为0.3%的冰乙酸水溶液中，20℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.1%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及0.2g溶菌酶，充分溶解于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜溶液中8min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于-20℃冻藏保存。
实施例3
一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，该方法步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取7.52g大豆卵磷脂和0.98g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为0.5%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取2.0g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mL磷酸缓冲溶液中，于50℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌20min。用均质机均质20次，2 s开，2s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，45℃旋蒸50min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于2℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为2.5%，脱乙酰度为90%，粘度为150mPa.s的壳聚糖溶于体积分数为2.0%的冰乙酸水溶液中，50℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.4%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及1.2g溶菌酶，充分溶解于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜溶液中5min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于0℃冷藏保存。
实施例4
一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，该方法步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取10.2g大豆卵磷脂和1.28g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为0.3%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取3.0g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mL磷酸缓冲溶液中，于40℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌25min。均用均质机均质25次，2 s开，2 s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，45℃旋蒸40min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于1℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为3.0%，脱乙酰度为88%，粘度为125mPa.s的壳聚糖，溶于体积分数为2.5%的冰乙酸水溶液中，60℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.5%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及0.8g溶菌酶，充分溶解于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜溶液中4min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于-18℃冻藏保鲜。
实施例5
一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，该方法步骤如下：
(1) 茶多酚脂质体悬浊液的制备
称取5.2g大豆卵磷脂和0.85g胆固醇，溶解于100mL的二氯甲烷中，加入体积分数为0.8%的Tween-80，充分溶解，作为有机相。称取1.0g茶多酚，溶于100mL pH为 6.5，浓度为0.01 mol/L的磷酸缓冲溶液中，作为水相。将上述100mL有机相和100mL水相一同滴入100mL磷酸缓冲溶液中，于60℃水浴搅拌。滴加结束，继续搅拌15min。用均质机均质15次，2 s开，2s停，将脂质体悬浮液转移至旋蒸瓶中，55℃旋蒸20min；得茶多酚脂质体悬浊液，置于2℃备用。
(2) 涂膜溶液的制备
称取质量分数为3.5%，脱乙酰度为90%，粘度为175mPa.s的壳聚糖溶于体积分数为1.5%的冰乙酸水溶液中，30℃恒温搅拌，待其充分溶解后加入体积分数为0.3%的甘油，继续搅拌，使其混合均匀，得壳聚糖涂膜液。将步骤(1)制备的40mL茶多酚脂质体悬浊液，以及1.8g溶菌酶，充分溶解于100mL壳聚糖涂膜液中，超声波脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
(3) 鱼片的准备
鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片。
(4) 鱼片保鲜
将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖涂膜溶液中3min后捞出，风干，即在鱼片表面形成茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖保鲜涂膜；置于包装保鲜袋中密封，于2℃冷藏保鲜。
Claims (5)
1.一种应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，其特征在于：该方法步骤如下：称取质量分数为0.5～5.0%的壳聚糖溶于体积分数为0.3～3.0%的冰乙酸水溶液中，20～80℃条件下恒温搅拌，待其充分溶解，加入体积分数为0.1～0.6%的甘油，继续搅拌混合均匀，得壳聚糖涂膜液；取40mL茶多酚脂质体悬浊液和0.2～2.0g溶菌酶，充分分散于100mL壳聚糖涂膜液中，超声脱气，得茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液。
2.根据权利要求1所述的应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，其特征在于：每100mL茶多酚脂质体悬浊液中含茶多酚0.25～2.0g。
3.根据权利要求1所述的应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖脱乙酰度为≥85%，粘度为100-200mPa.s。
4.根据权利要求1所制备的应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜在各类鱼片保鲜中的应用，其特征在于：鱼片保鲜步骤如下：鱼体去皮、去骨、去头，取鱼片，将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液中后捞出，风干，即在鱼片表面形成鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶-壳聚糖缓释涂膜；装于包装保鲜袋中密封，于-20～4℃中保存。
5.根据权利要求1所述的应用于鱼片保鲜的茶多酚脂质体/溶菌酶壳聚糖缓释涂膜在各类鱼片保鲜中的应用，其特征在于：将鱼片浸渍于茶多酚脂质体/溶菌酶复合壳聚糖保鲜涂膜液中2～8min后捞出，风干。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190517 |
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