CN109715637B

CN109715637B - 葡萄糖激酶激活剂及其使用方法

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Publication number: CN109715637B
Application number: CN201780057682.1A
Authority: CN
Inventors: P·T·W·程; 孟巍; M·刘; 王蓓; 赵儒林
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2016-07-22
Filing date: 2017-07-21
Publication date: 2022-04-05
Anticipated expiration: 2037-07-21
Also published as: EP3487862A1; MA45714A; US20190233449A1; KR20190033571A; CN109715637A; JP2019523253A; US10604541B2; KR102513342B1; WO2018017910A1; JP7072557B2

Abstract

提供了一种化合物、对映异构体、前药、非对映异构体或盐，其是葡萄糖激酶的激活剂并因此被认为可用于治疗糖尿病和相关疾病，该化合物具有结构

Description

葡萄糖激酶激活剂及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年7月22日提交的美国临时申请号62/365520的权益，将其内容通过引用明确地并入本文。

技术领域

本发明涉及一种新型膦酸盐化合物、对映异构体、前药、非对映异构体或其盐，其为葡萄糖激酶的激活剂并因此被认为可用于治疗由葡萄糖激酶激活的疾病或病症，例如糖尿病；并且涉及使用这种化合物治疗由葡萄糖激酶激活的疾病或病症(例如糖尿病，尤其是II型糖尿病)的方法。

背景技术

葡萄糖激酶(GK)主要存在于胰腺β细胞和肝实质细胞中，催化葡萄糖转化为葡萄糖-6-磷酸，这是葡萄糖代谢的第一步。葡萄糖激酶也是胰腺β细胞和肝实质细胞中葡萄糖代谢的速率控制酶，其在全身葡萄糖稳态中起重要作用。

Liag,Y.等人(Biochem.J.,309:167-173(1995))报道了年轻人(MODY-2)的II型(成熟期发病)糖尿病是由葡萄糖激酶基因的功能缺失突变引起的，这表明葡萄糖激酶也起着作为人类的葡萄糖传感器的作用。因此，激活葡萄糖激酶并因此增加葡萄糖激酶传感器系统的敏感性从而引起胰岛素分泌增加的化合物将可用于治疗高血糖症和II型糖尿病。

已证明葡萄糖激酶激活剂可有效增强：1)葡萄糖对来自分离的大鼠和人胰岛的胰岛素释放的影响，和2)葡萄糖对分离的培养大鼠胰岛中胰岛葡萄糖激酶的诱导(例如，Matschinsky,F.M.等人,Diabetes,55:1(2006)、和(Matschinsky,F.M.等人编,Glucokinase and Glycemic Disease,from Basics to Novel Therapeutics,Karger,publ.,Ch.6,第360-378页(2004))。在糖尿病动物模型研究中，已经在胰腺钳夹(pancreatic clamp)研究中证明葡萄糖激酶激活剂刺激胰岛素释放、增强糖原合成并减少肝葡萄糖产生。重要的是，已经证明葡萄糖激酶激活剂在2型糖尿病的不同标准动物模型(例如ob/ob小鼠、db/db小鼠和Zucker fa/fa大鼠)中在急性单剂量研究中剂量依赖性地降低血液葡萄糖水平，并且还在口服葡萄糖耐量测试中有效地改善了正常C57/BL6J和ob/ob小鼠二者中的葡萄糖偏移(例如在Matschinsky,F.M.等人编,Glucokinase and GlycemicDisease,from Basics to Novel Therapeutics,Karger,publ.,Ch.6,第360-378页(2004)；以及Fyfe,M.C.等人,Diabetologia,50:1277(2007)中)。

葡萄糖激酶激活剂还展示出在II型糖尿病的慢性动物模型中的抗糖尿病功效。例如，在ob/ob小鼠的一项为期9天的研究中，葡萄糖激酶激活剂改善了整体葡萄糖谱，同时在研究开始和结束时在口服葡萄糖耐量测试中显示出相当的抗高血糖作用(Fyfe,M.C.等人,Diabetologia,50:1277(2007))。在另一个例子中，在40周的长期研究中，葡萄糖激酶激活剂预防饮食诱导的肥胖小鼠(该小鼠是葡萄糖不耐受的)中的高血糖症发展。在口服葡萄糖耐量测试中，在研究结束时，用葡萄糖激酶激活剂处理的、饮食诱导的肥胖小鼠相对于对照组显示出在葡萄糖偏移方面明显的改善(Matschinsky,F.M.等人编,Glucokinase andGlycemic Disease,from Basics to Novel Therapeutics,Karger,publ.,Ch.6,第360-378页(2004))。

因此，激活葡萄糖激酶的化合物可以在治疗炎症、过敏、自身免疫、代谢、癌症和/或心血管疾病中展示出广泛的效用。PCT公开号WO 2007/007041 A1、WO 2008/005914 A1、WO 2008/154563 A1、WO 2008/005964 A1(通过引用并入本文并转让给本申请人)和WO2009/018065 A1公开了激活葡萄糖激酶的化合物。该参考文献还公开了制备这些化合物的各种方法。

还有报道称，肝脏和胰腺中GK的激活可能对糖尿病状态下的循环葡萄糖水平产生深远影响。然而，需高度关注的是靶向胰腺可能导致糖尿病状态的恶化。鉴于此，希望找到通过主要靶向肝脏来最小化对胰腺的影响的新化合物。(Bebernitz等人,J.Med.Chem.2009,52,6142–6152和Massa等人,Life,63(1):1–6,2011年1月)。

还希望找到在以下一个或多个类别方面具有有利和改进特征的化合物：

(a)药物特性(即溶解度、渗透性、对缓释制剂的顺应性)；

(b)剂量要求(例如，较低剂量和/或每日一次给药)；

(c)降低血液浓度峰谷比特征的因素(即清除率和/或分布容积)；

(d)增加受体中活性药物浓度的因素(即蛋白质结合、分布容积、代谢稳定性)；

(e)降低临床药物间相互作用的可能性的因素(细胞色素P450酶抑制或诱导，例如CYP 2D6抑制，参见Dresser,G.K.等人Clin.Pharmacokinet.38:41-57(2000)，将其通过引用特此并入)；和

(f)降低不良副作用可能性的因素(例如，超过激酶受体的药理学选择性、潜在的化学或代谢反应性、有限的CNS渗透、离子通道选择性)。尤其希望找到具有上述药理学特征的所需组合的化合物。

发明内容

根据本发明的一个方面，提供了具有式I的化合物3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺、及其所有立体异构体、其前药和其药学上可接受的盐：

该化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐激活或增强葡萄糖激酶的活性。因此，本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐可用于治疗与葡萄糖激酶缺乏相关的多种疾病或障碍，例如糖尿病和相关病症，与糖尿病相关的微血管并发症，与糖尿病、心血管疾病、代谢综合征及其组分病症相关的大血管并发症，以及其他疾病。可以根据本发明预防、抑制或治疗的与葡萄糖激酶活性缺乏相关的疾病或障碍的例子包括但不限于糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐量减低、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、视网膜病变、神经病、肾病、伤口愈合延迟、动脉粥样硬化及其后遗症、心功能异常、心肌缺血、中风、代谢综合征、高血压、肥胖症、血脂异常、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL、高LDL、非心脏局部缺血、感染、癌症、血管再狭窄、胰腺炎、神经退行性疾病、脂质障碍、认知损害和痴呆、骨病、HIV蛋白酶相关脂肪营养不良、和青光眼。

本发明提供了式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐，使用该化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的药物组合物，以及使用该化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的方法。具体而言，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含单独或与药学上可接受的载体组合的治疗有效量的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐。

此外，根据本发明，提供了一种预防、抑制或治疗与葡萄糖激酶活性缺乏相关的疾病或障碍(如上文和下文所定义的)的进展或发作的方法，其中将治疗有效量的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐给予需要治疗的哺乳动物(即人类)患者。

本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐可以单独使用，或者与一种或多种其他治疗剂组合使用。

此外，本发明提供了一种预防、抑制或治疗如上文和下文所定义的疾病的方法，其中将治疗有效量的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐和/或至少一种其他类型的治疗剂的组合给予需要治疗的哺乳动物(即人类)患者。

另外，本发明描述了化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐，它们与先前在本领域中公开的化合物(例如PCT公开号WO 2008/005964 A1中公开的那些)相比具有有益(优选两倍、更优选三倍)的肝活性/选择性改善，具体而言体内葡萄糖降低。

本发明还描述了化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐，其被认为与先前在本领域中公开的化合物(例如在PCT公开号WO 2008/005964 A1中公开的那些)相比在剂量要求方面具有有益的改善，例如改善的溶解度。

本发明还描述了化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐，与先前在本领域中公开的化合物(例如在PCT公开号WO 2008/005964 A1中公开的那些)相比，其被认为具有降低的临床药物间相互作用(例如细胞色素P450酶抑制或诱导)可能性。

此外，本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐显示出优于先前在本领域中公开的化合物(例如PCT公开号WO 2008/005964 A1中公开的那些)的出乎意料的优点。本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或其盐在一个或多个测定中显示具有肝活性/选择性改善与对葡萄糖激酶的足够活性的所需组合。这种化合物在治疗、抑制或改善本文讨论的一种或多种疾病或障碍中应该更有用。

此外，本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐显示出优于先前在本领域中公开的化合物(例如PCT公开号WO 2008/005964 A1中公开的那些)的出乎意料的优点。本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐在一个或多个测定中显示具有肝活性/选择性改善、对葡萄糖激酶的足够活性、剂量要求的有益改善(例如改善的溶解度)、以及降低的临床药物间相互作用(例如细胞色素P450酶抑制或诱导)可能性的所需组合。这种化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐应更有用于治疗、抑制或改善本文所讨论的一种或多种疾病或障碍。

附图说明

图1.游离碱N-1型的3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的实验和模拟粉末图。

图2.从纯乙醇结晶的呈游离碱N-1型的3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的热分析。

图3.P-2型的3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺-富马酸的实验粉末图。

具体实施方式

根据本发明，提供了具有式I的化合物3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺、及其所有立体异构体、其前药和其药学上可接受的盐：

在另一个实施方案中，本发明的化合物是式I化合物的盐。

在又另一个实施方案中，本发明的化合物是式I化合物的钠盐或钾盐。

在又另一个实施方案中，本发明的化合物是式I化合物的钠盐。

在又另一个实施方案中，本发明的化合物是式I化合物的钾盐。

在再又另一个实施方案中，本发明的化合物是式I化合物的晶型，优选N-1或P-2型，更优选N-1型。

在一个实施方案中，该晶型处于基本上纯的形式。

在一个实施方案中，式I化合物的晶型的特征在于晶胞参数基本上等于以下：

晶胞尺寸：

a＝8.0531(2)

b＝13.5078(3)

c＝13.7063(3)

α＝73.091(1)

β＝88.186(1)

γ＝89.881(1)

空间群：P1

分子/不对称单元(Z’)：2

密度，计算为g-cm^-3：1.425。

在一个实施方案中，本发明的化合物选自下组，该组由以下组成：

在一个实施方案中，式I化合物的晶型表征为基本上根据图1中所示图的粉末X射线衍射图。

在另一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包含单独或任选地与药学上可接受的载体和/或一种或多种其他试剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐。

在另一个实施方案中，本发明涉及增强葡萄糖激酶活性的方法，其包括向有需要的哺乳动物患者(例如人类患者)给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗与葡萄糖激酶活性缺乏有关的疾病或障碍的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

可以根据本发明预防、抑制或治疗的与葡萄糖激酶活性缺乏相关的疾病或障碍的例子包括但不限于上述那些疾病或障碍。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗糖尿病、高血糖症、肥胖症、血脂异常、高血压和认知损害的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

在再另一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗糖尿病的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

在又再另一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗高血糖症的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗肥胖症的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

在一个实施方案中，本发明涉及一种预防、抑制或治疗血脂异常的进展或发作的方法，该方法包括向需要预防、抑制或治疗的哺乳动物患者例如人类患者给予单独或任选地与至少一种其他类型的治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的步骤。

本发明的另一个实施方案涉及式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐在制造用于治疗糖尿病的药剂中的用途。

本发明的另一个实施方案涉及用于在治疗糖尿病的疗法中使用的本发明的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐。

本发明的另一个实施方案涉及用于在治疗哺乳动物糖尿病中使用的本发明的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐。

本发明的另一个实施方案涉及本发明的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐在制造用于治疗糖尿病的药剂中的用途，其中所述治疗包括与另一种治疗剂的组合，以便并行地或以任何顺序来顺序地使用。

本发明的另一个实施方案涉及本发明的式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐与作为治疗糖尿病的药剂的另一种治疗剂的组合。

此外，本发明提供了式I的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐的晶型，使用此类晶型的药物组合物，以及使用此类晶型的方法。

在不脱离本发明的精神或本质属性的情况下，本发明可以以其他特定形式实施。本发明还涵盖本文提到的本发明的替代方面的所有组合。应当理解，本发明的任何和所有实施方案可以与任何其他实施方案结合使用以描述本发明的另外的实施方案。此外，实施方案的任何要素都可以与任何实施方案中的任何和所有其他要素组合以描述另外的实施方案。

定义

本发明的化合物可以以光学活性或外消旋形式分离。本领域熟知如何制备光学活性形式，例如通过拆分外消旋形式或通过从光学活性起始材料合成。除非特别指出具体的立体化学或异构形式，否则意图指结构的所有手性、非对映异构和所有外消旋形式。

本文使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适合用于与人类和动物组织接触使用而没有过多的毒性、刺激性、过敏反应、或其他问题或并发症并与合理的效益/风险比相称的化合物、材料、组合物和/或剂型。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸或碱盐而被修饰。

术语药学上可接受的一种或多种“盐”可以指与无机和有机碱形成的碱性盐。此类盐包括铵盐；碱金属盐，如锂盐、钠盐和钾盐(优选)；碱土金属盐，如钙盐和镁盐；与有机碱形成的盐，如胺类盐(如二环己胺盐，苄星(benzathine)，N-甲基-D-葡萄糖胺和哈胺(hydrabamine)盐)；和与氨基酸(如精氨酸、赖氨酸等)形成的盐；和两性离子，即所谓的“内盐”。无毒的药学上可接受的盐是优选的，但其他盐也可用于例如分离或纯化产物。

术语药学上可接受的一种或多种“盐”还包括酸加成盐。这些是例如与以下形成：强无机酸，例如矿物酸，如硫酸、磷酸、或氢卤酸(例如HCl或HBr)；强有机羧酸，例如1至4个碳原子的链烷羧酸，未取代的或取代的(例如经卤素取代)，例如乙酸，例如饱和或不饱和的二羧酸(例如草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、邻苯二甲酸或对苯二甲酸)，例如羟基羧酸(例如抗坏血酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸)，例如氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸或赖氨酸或精氨酸)，或苯甲酸；或有机磺酸，例如(C₁-C₄)烷基或芳基磺酸，未取代的或取代的(例如经卤素取代)，例如甲磺酸或对甲苯磺酸。

本发明的药学上可接受的盐可以通过常规的化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可以通过使得游离酸或碱形式的这些化合物与化学计算量的适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或者在这两者的混合物(通常优选非水性介质，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈)中进行反应而制备。合适的盐的列表发现于Remington’s Pharmaceutical Sciences,第17版,Mack Publishing Company,Easton,PA,第1418页(1985)，将该公开通过引用特此并入。

可以在体内转化以提供生物活性剂的任何化合物(即式I的化合物)是在本发明的范围和精神内的前药。

术语“前药”表示这样一种化合物，将其给予受试者时，其通过代谢或化学过程进行化学转化，以产生式I的化合物和/或其盐。例如，包含羧基的化合物可以形成生理学上可水解的酯，其通过在体内水解而充当前药，从而产生配方化合物本身。这些前药优选口服给予，因为在许多情况下水解主要在消化酶的影响下发生。肠胃外给药可以在酯本身具有活性的情况下使用，或者在血液中发生水解的那些情况下使用。

如本文所用的术语“前药”包括通过使用本领域技术人员已知的程序使式I的化合物与烷基、烷氧基或芳基取代的酰化剂反应以产生乙酸酯、新戊酸酯、甲基碳酸酯、苯甲酸酯等而形成的酯和碳酸酯。

各种形式的前药在本领域中是熟知的，并描述于：

a)Wermuth,C.G.等人,The Practice of Medicinal Chemistry,第31章,Academic Press(1996)；

b)Design of Prodrugs,Bundgaard,H.编,Elsevier(1985)；

c)Bundgaard,H.,第5章,“Design and Application of Prodrugs,”A Textbookof Drug Design and Development,第113-191页,Krosgaard-Larsen,P.等人编,HarwoodAcademic Publishers(1991)；以及

d)Testa,B.等人,Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism,Wiley-VCH(2003)。

将所述参考文献通过引用并入本文。

术语“互变异构体”是指式I的化合物及其盐，可以以其互变异构形式存在，其中氢原子转置到分子的其他部分，因此分子原子之间的化学键得以重排。应理解，所有互变异构体形式只要它们可存在都包括在本发明内。

此外，式I的化合物可以在其制备之后优选分离和纯化，以获得包含按重量计的量为等于或大于99％的式I化合物(“基本上纯的”化合物I)的组合物，该组合物然后如本文所述被使用或配制。此类“基本上纯的”式I化合物在本文中也被认为是本发明的一部分。

考虑了本发明的化合物的所有立体异构体，可以是混合物，也可以是纯的或基本上纯的形式。本发明的化合物可以展现出多态性。此外，式I的化合物可以以对映异构体或非对映异构体形式或其混合物存在。制备方法可以使用外消旋体、对映异构体或非对映异构体作为起始材料。当制备非对映异构体或对映异构体产物时，可以通过常规方法例如色谱法或分级结晶分离它们。

“稳定的化合物”和“稳定的结构”意为表明一个化合物从反应混合物中分离时能足够稳定的存在，达到有用的纯度，并配制成有效的治疗剂。本发明旨在实施稳定的化合物。

“治疗有效量”旨在包括有效治疗或预防糖尿病和/或肥胖症的单独的本发明的化合物的量或本发明的化合物与其他活性成分相组合的组合的量。

如本文所用，“治疗”(“treating”或“treatment”)覆盖对哺乳动物(特别是人类)中疾病状态的治疗，并且包括：(a)特别是当这种哺乳动物时易具有疾病状态但尚未被诊断为具有疾病状态时，预防哺乳动物发生疾病状态；(b)抑制疾病状态，即阻止其发展；和/或(c)缓解疾病状态，即引起疾病状态的消退。

本发明旨在包括在本发明的化合物中出现的所有原子同位素。同位素包括具有相同原子序数但质量数不同的那些原子。作为一般例子而非限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。本发明的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述的那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替以其他方式使用的未标记的试剂来制备。

本文中用于表征特定型(例如“N-1”)的名称不应被视为对具有相似或相同物理和化学特征的任何其他物质进行限制，而应理解为这些名称仅仅是标识符，其应根据本文另外提出的特征信息来解释。

本发明至少部分地提供了作为新型材料的3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的游离碱的晶型，其特别是处于药学上可接受的形式。在某些优选的实施方案中，游离碱的晶型处于基本上纯的形式。游离碱的晶型的优选实施方案作为N-1和P-2型公开于实施例4中。

如本文所用，“多晶型物”是指具有相同化学组成但具有形成晶体的分子、原子和/或离子的不同空间排列的晶型。

如本文所用，“无定形物”是指非结晶的分子、原子和/或离子固体形式。

晶型的样品可以具有基本上纯的相均匀性，表明存在优势量的单一晶型和任选少量的一种或多种其他晶型。样品中存在多于一种晶型可以通过例如粉末X射线衍射(PXRD)或固态核磁共振光谱法(SSNMR)等技术来确定。例如，在实验测量的PXRD图与模拟的PXRD图的比较中存在额外峰可以指示样品中有多于一种晶型。可以从单晶X射线数据计算模拟的PXRD。参见Smith,D.K.,“AFORTRAN Program for Calculating X-Ray PowderDiffraction Patterns”,Lawrence Radiation Laboratory,Livermore,California,UCRL-7196(1963年4月)。

优选地，晶型具有基本上纯的相均匀性，如实验测量的PXRD图中总峰面积的小于10％、优选小于5％、更优选小于2％源自额外峰(该额外峰在模拟的PXRD图中不存在)所指示的。最优选的是具有基本上纯的相均匀性的晶型，其中实验测量的PXRD图中的总峰面积的小于1％源自额外峰(该额外峰在模拟的PXRD图中不存在)。

制备晶型的程序是本领域已知的。晶型可通过各种方法制备，包括例如从合适的溶剂中结晶或重结晶、升华、从熔体中生长、从另一相进行固态转化、从超临界流体中结晶、和喷射喷雾。晶型从溶剂混合物中结晶或重结晶的技术包括例如蒸发溶剂、降低溶剂混合物的温度、晶体接种于分子和/或盐的过饱和溶剂混合物、冷冻干燥溶剂混合物、以及向溶剂混合物中添加抗溶剂(反溶剂)。

可以使用单晶X射线衍射来表征和区分型式，该单晶X射线衍射是基于晶胞和在固定分析温度下型式的单晶的强度测量。晶胞和强度分析的详细描述提供于Stout等人,第3章,X-Ray Structure Determination:A Practical Guide,MacMillan Co.,New York(1968)中，将其通过引用并入本文。可替代地，可以根据观察到的分数原子坐标来表征晶格内空间关系中原子的独特排列。关于用于结构分析的分数坐标的实验确定参见Stout等人的参考文献。表征结晶结构的另一种手段是通过粉末X射线衍射分析(其中将实验或观察到的衍射轮廓与代表纯粉末材料的模拟轮廓进行比较，两者均在相同的分析温度下)和对受试形式的测量(表征为一系列的2θ值和强度)。

如本文所用，术语“可忽略的重量损失”由TGA表征，表明存在纯(非溶剂化的)晶型。

在本发明的一个实施方案中，3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的晶型以基本上纯的形式提供。此晶型可以用于药物组合物中，该药物组合物可以任选地包含一种或多种例如选自下组的其他组分，该组由以下组成：赋形剂、载体、和具有不同分子结构的其他活性药物成分或活性化学实体之一。

在另一个实施方案中，提供了组合物，其本质上由3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的晶型组成。此实施方案的组合物可以包含基于该型式在组合物中的重量至少90重量％的该型式。

反应杂质和/或加工杂质的存在可通过本领域已知的分析技术确定，例如色谱法、核磁共振光谱法、质谱法或红外光谱法。

晶型可通过各种方法制备，包括例如从合适的溶剂中结晶或重结晶、升华、从熔体中生长、从另一相进行固态转化、从超临界流体中结晶、和喷射喷雾。晶型从溶剂混合物中结晶或重结晶的技术包括例如蒸发溶剂、降低溶剂混合物的温度、晶体接种于分子和/或盐的过饱和溶剂混合物、冷冻干燥溶剂混合物、以及向溶剂混合物中添加抗溶剂(反溶剂)。高通量结晶技术可用于制备包括多晶型物的晶型。

在Byrn,S.R.等人,Solid-State Chemistry of Drugs,第2版,SSCI,WestLafayette,Indiana(1999)中讨论了药物的晶体(包括多晶型物)、药物晶体的制备方法和表征。

对于使用溶剂的结晶技术，一种或多种溶剂的选择通常取决于一个或多个因素，例如化合物的溶解度、结晶技术和溶剂的蒸汽压。可以使用溶剂的组合；例如，可以将化合物溶解在第一溶剂中以提供溶液，然后添加抗溶剂以降低化合物在溶液中的溶解度并提供晶体的形成。“抗溶剂”是在其中化合物具有低溶解度的溶剂。用于制备晶体的合适溶剂包括极性和非极性溶剂。

在一种制备晶体的方法中，将3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺在合适的溶剂中悬浮和/或搅拌，以提供浆料，可将其加热以促进溶解。如本文所用，术语“浆料”是指游离碱的饱和溶液，其还可含有额外量的化合物，以在给定温度下提供化合物和溶剂的非均匀混合物。在这方面，合适的溶剂包括例如极性非质子溶剂和极性质子溶剂，以及这些中的两种或更多种的混合物，如本文所公开的。

可以将晶种添加到任何结晶混合物中以促进结晶。如熟练技术人员所清楚的，接种用作控制特定晶型生长的手段或用作控制结晶产物的粒度分布的手段。因此，所需晶种量的计算取决于可用晶种的大小和平均产品颗粒的所需大小，如例如在Mullin,J.W.等人,“Programmed cooling of batch crystallizers”,Chemical Engineering Science,26:369-377(1971)中所述。通常，需要小尺寸的晶种来有效地控制批次中晶体的生长。小尺寸的晶种可以通过对较大的晶体进行筛分、研磨或微粉化或通过对溶液进行微结晶来产生。应注意的是，晶体的研磨或微粉化不会导致结晶性从所需的晶型发生任何变化(即，变为无定形物或变为另一种多晶型物)。

可以在真空下过滤冷却的混合物，并且可以用合适的溶剂(例如冷重结晶溶剂)洗涤分离的固体，并在氮气吹扫下干燥，以提供所需的晶型。可以通过合适的光谱或分析技术分析分离的固体，例如SSNMR、DSC、PXRD等，以确保形成产物的优选晶型。基于在结晶程序中最初使用的3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的重量，得到的晶型典型地以大于约70重量％、但优选大于90重量％的分离产率的量产生。如果需要，可以将产物共研磨或通过网筛以使产物去块。

晶型可以直接从用于制备3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的最终工艺步骤的反应介质中制备。这可以例如通过在最终工艺步骤中使用溶剂或溶剂混合物来实现，游离碱可以从该溶剂或溶剂混合物中结晶。可替代地，可以通过蒸馏或溶剂添加技术获得晶型。用于此目的的合适溶剂包括本文所述的那些溶剂中的任一种，包括质子极性溶剂(例如醇)和非质子极性溶剂(例如酮)。

作为一般指导，可以过滤反应混合物以除去任何不需要的杂质、无机盐等，然后用反应或结晶溶剂洗涤。可以浓缩所得溶液以除去过量的溶剂或气态成分。如果采用蒸馏，收集的馏出物的最终量可以根据工艺因素而变化，包括例如容器尺寸、搅拌能力等。作为一般指导，在进行溶剂置换之前，可将反应溶液蒸馏至原始体积的约1/10。可以对反应进行取样和测定，以根据标准工艺技术确定反应程度和wt％产物。如果需要，可以添加或除去另外的反应溶剂以优化反应浓度。优选地，将最终浓度调节至约50wt％，此时通常产生浆料。

可优选在不蒸馏反应混合物的情况下将溶剂直接添加至反应容器中。尽管最终浓度可根据所需的纯度、回产率等而变化，但溶液中游离碱的最终浓度优选为约4％至约7％。添加溶剂后可搅拌反应混合物并同时加热。举例来说，可将反应混合物搅拌约1小时，同时加温至约70℃。优选将反应热过滤并用反应溶剂、添加的溶剂、或其组合洗涤。可以将晶种添加至任何结晶溶液中以启动结晶。

可以将本文描述的各种型式通过使用本领域普通技术人员已知的各种分析技术彼此进行区分。此类技术包括但不限于X射线粉末衍射(PXRD)。确切地，可以使用单晶X射线衍射来表征和区分型式，该单晶X射线衍射是基于在固定分析温度下给定型式的单晶的晶胞测量。晶胞的详细描述提供于Stout等人,第3章,X-Ray Structure Determination:APractical Guide,MacMillan Co.,New York(1968)中，将其通过引用并入本文。可替代地，可以根据观察到的分数原子坐标来表征晶格内空间关系中原子的独特排列。表征结晶结构的另一种手段是通过粉末X射线衍射分析(其中将衍射轮廓与代表纯粉末材料的模拟轮廓进行比较，两者均在相同的分析温度下运行)和对受试形式的测量(表征为一系列的2θ值(通常为四个或更多个))。

可以使用表征型式的其他手段，例如固态核磁共振(SSNMR)光谱法、差示扫描量热法(DSC)、热成像、和结晶或无定形形态的大体检查。这些参数也可以组合使用来表征受试型式。

本领域普通技术人员将理解，可以获得具有取决于所使用的测量条件的测量误差的X射线衍射图。具体而言，通常已知X射线衍射图的强度可根据所使用的测量条件和晶体的形状或形态而波动。应进一步理解，相对强度也可根据实验条件而变化，因此不应考虑强度的精确数量级。另外，常规X射线衍射图的衍射角的测量误差典型地为约0.2°或更小，优选约0.1°(如下文所述)，并且应当考虑与上述衍射角相关的这种测量误差程度。因此，应理解本发明的晶型不限于提供与本文公开的附图中所绘的X射线衍射图完全相同的X射线衍射图的晶型。提供与附图中公开的X射线衍射图基本相同的X射线衍射图的任何晶型都落入本发明的范围内。确定X射线衍射图的实质同一性的能力在本领域普通技术人员的能力范围内。

实施例

在以下实施例中进一步定义本发明。应该理解的是，实施例仅以说明的方式给出。从以上讨论和实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不脱离其精神和范围的情况下，可以进行各种改变和修改以使本发明适应各种用途和条件。因此，本发明不受下文所述的说明性实施例的限制，而是由所附权利要求限定。

缩写

DMAP 二甲基氨基吡啶

DMF N,N-二甲基甲酰胺

EDAC 3-乙基-3'-(二甲基氨基)丙基-碳二亚胺盐酸盐(或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)

Et₂O 乙醚

EtOH 乙醇

EtOAc 乙酸乙酯

equiv. 当量

g 克

h 小时

HOBT 羟基苯并三唑

HPLC 高压液相色谱法

i-Pr₂EtN 二(异丙基)乙胺

LCMS 液相色谱-质谱

MeOH 甲醇

min 分钟

mL 毫升

mmol 毫摩尔

NaHMDS 双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠

rt 保留时间

THF 四氢呋喃

实施例1

3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺

中间体1A：(2R)-1-甲氧基-2-丁醇

在氩气下在-10℃向CuI(32.4g，170mmol)于THF(680mL)中的搅拌悬浮液中经30min逐滴添加CH₃MgBr溶液(510mL，3.0M于Et₂O中，1532mmol)。将反应混合物在-10℃搅拌20min，冷却至-40℃，并且在-40℃逐滴添加(R)-2-(甲氧基甲基)环氧乙烷(50g，568mmol)。将反应混合物加温至室温并在室温下搅拌18h。将反应混合物冷却至-40℃并小心地用饱和水性NH₄Cl(500mL)和水(500mL)淬灭。移去冷却浴，并将反应混合物搅拌(暴露于空气中)2h，直至获得深蓝色溶液。分离各相，并将有机相用Et₂O(500mL)萃取。将合并的有机萃取物用MgSO₄干燥，通过二氧化硅凝胶垫过滤，并用Et₂O(200mL)洗涤二氧化硅凝胶垫。将合并的滤液真空浓缩，以提供呈浅黄色油状物的中间体1A(53.2g，90％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.78-3.66(m,1H),3.42(dd,J＝9.3,2.8Hz,1H),3.39(s,3H),3.25(dd,J＝9.3,7.7Hz,1H),1.54-1.42(m,2H),0.97(t,J＝7.4Hz,3H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ76.62,71.0,58.5,25.7,9.5；[α]^21.9 _D(EtOH,27.46mg/mL)＝+6.41°；C₅H₁₂O₂的分析计算值：C,57.66％；H,11.61％,实测值：C,57.78％；H,11.19％。

中间体1B：5-溴-2-(甲硫基)吡啶

在室温下，在氩气下，向2,5-二溴吡啶(180g，760mmol)于DMF(1500mL)中的搅拌溶液中添加甲硫醇钠(55.9g，798mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。添加另外的甲硫醇钠(19.1g，272.5mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物在50℃下真空浓缩至约700mL。将残余物用水(1000mL)稀释，并将产物用Et₂O(4x 500mL)萃取。将合并的有机萃取物用饱和水性NaHCO₃和盐水洗涤。将有机相用MgSO₄干燥并真空浓缩，以提供呈白色固体的中间体1B(143.8g，92％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-AS-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)85.4％,rt＝3.14min；[M+H]⁺＝204.03；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.45(d,J＝1.8Hz,1H),7.54(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),2.50(s,3H)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ158.6,150.1,138.2,122.6,115.6,13.4；C₆H₆BrNS的分析计算值:C,35.31；H,2.96；N,6.86；实测值：C,35.25％；H,2.94％；N,6.78％。

中间体1C：5-溴-2-(甲基磺酰基)吡啶

在室温下向中间体1B(143g，701mmol)于水(1200mL)中的搅拌溶液中添加

单过硫酸盐(1077g，1752mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物进行过滤，并将滤饼用水洗涤并真空干燥，以提供呈白色固体的中间体1C(148.5g，90％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)98.7％,rt＝1.75min；[M+H]⁺＝237.99；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.76(dd,J＝2.2,0.7Hz,1H),8.08(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.95(d,J＝8.1Hz,1H),3.20(s,3H)；¹³C NMR(75MHz；CDCl₃)δ156.21,151.1,140.8,125.51,124.82,122.4,40.0；C₆H₆BrNO₂S的分析计算值:C,30.52；H,2.56；N,5.93；实测值：C,30.52％；H,2.56％；N,5.93％。

中间体1D：3-羟基-5-[[6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基]氧基]苯甲酸甲酯

向3,5-二羟基苯甲酸甲酯(42.7g，254mmol)于DMF(400mL)中的搅拌溶液中添加中间体1C(30g，127mmol)和Cs₂CO₃(53.8g，165mmol)，并在110℃下将反应混合物搅拌18h。将反应混合物冷却至室温，用水(200mL)和饱和水性NaHCO₃(200mL)稀释，在室温下搅拌15min并用EtOAc(2x 250mL)洗涤。将水相在冰/水浴中冷却，用浓HCl酸化至pH＝3，并用EtOAc(2x250mL)萃取。将合并的有机萃取物用MgSO₄干燥并真空浓缩，以提供棕色油状物。将该油状物进行色谱分离(SiO₂；1000g；从0％EtOAc/己烷至80％EtOAC/己烷的连续梯度)，以提供呈白色固体的中间体1D(18.99g，46.2％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ,4.6x50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)90.0％,rt＝2.55min；[M+H]⁺＝324.1；¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.48(d,J＝2.5Hz,1H),8.09(d,J＝8.5Hz,1H),7.48-7.44(m,2H),7.31(s,1H),6.84(t,J＝2.3Hz,1H),3.94(s,3H),3.26(s,3H)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ166.1,158.1,156.8,155.4,151.2,140.8,133.0,125.2,122.9,114.0,112.4,112.0,52.6,40.5；C₁₄H₁₃NO₆S的分析计算值：C,52.01；H,4.05；N,4.33；实测值：C,51.94％；H,3.90％；N,4.29％。

中间体1E：(S)-3-((1-甲氧基丁-2-基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)氧基)苯甲酸

在氩气下，在0℃下，向中间体1D(23.8g，73.6mmol)、中间体1A(10.81g，96mmol)和三苯基膦(23.17g，88mmol)于THF(200mL)中的搅拌溶液中逐滴添加偶氮二甲酸二叔丁酯(25.4g，110mmol)。将反应混合物加温至室温并在室温下搅拌15h。将反应混合物用EtOAc稀释，顺序地用水、1N水性HCl和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物进行色谱分离(SiO₂；330g；从0％EtOAc/己烷至50％EtOAC/己烷的连续梯度)，以提供呈无色油状物的中间体1E(25.3g，84％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％ B至100％ B的连续梯度+在100％ B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)92％,rt＝3.32min；99.8％ee(SFC；Chiralpak AD-H,0.46x 25cm,5μm柱，在200-400nm处检测；流速＝3mL/min；等度70/30CO₂/MeOH流动相；100巴压力)；[M+H]⁺＝410.1；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.41(d,J＝2.6Hz,1H),8.00(d,J＝8.8Hz,1H),7.46(dd,J＝2.2,1.5Hz,1H),7.38(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.24(dd,J＝2.2,1.5Hz,1H),6.86(t,J＝2.4Hz,1H),4.40-4.26(m,1H),3.85(s,3H),3.51(dd,J＝5.1,2.2Hz,2H),3.32(s,3H),3.17(s,3H),1.75-1.63(m,2H),0.94(t,J＝7.5Hz,3H)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ165.7,160.3,156.6,155.5,151.8,140.8,133.1,125.2,122.8,113.7,112.8,112.6,79.2,73.9,59.3,52.4,40.4,24.2,9.5；[α]^23.4 _D(EtOH,5.73mg/mL)＝-21.75°；C₁₉H₂₃NO₇S的分析计算值：C,55.73％；H,5.66％；N,3.42％；实测值：C,55.92％；H,5.46％；N,3.41％。

中间体1F：(S)-3-((1-甲氧基丁-2-基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)氧基)苯甲酸

将中间体1E(155g，379mmol)和LiOH.H₂O(27.2g，1136mmol)于THF(1500mL)/H₂O(500mL)中的搅拌溶液在室温下搅拌18h。将反应混合物真空浓缩以去除THF，并将剩余的水溶液用Et₂O(2x 40mL)洗涤，用1N水性HCl酸化至pH 2，然后用EtOAc(2x 40mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(50mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥并真空浓缩，以提供呈无色油状物的粗产物。将此油状物从EtOAc/己烷(4次)和MeOH/H₂O(4次)重结晶，以提供白色固体(100.4g)。将来自这些重结晶的合并的母液进行真空浓缩，以提供无色油状物，将其从EtOAc/己烷(4次)和MeOH/H₂O(4次)重结晶，以提供另外的白色固体(21.5g)。将所有重结晶的物质合并，以提供呈白色固体的中间体1F(121.9g，80.6％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％ B的连续梯度+在100％ B1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)99％,rt＝3.02min；[M+H]⁺＝396.1；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.48(d,J＝2.2Hz,1H),8.08(dd,J＝8.6,0.4Hz,1H),7.59-7.56(m,1H),7.45(dd,J＝8.7,2.8Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),6.96(t,J＝2.3Hz,1H),4.48-4.35(m,1H),3.63-3.55(m,2H),3.40(s,3H),3.24(s,3H),1.82-1.69(m,2H),1.00(t,J＝7.5Hz,3H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ:170.4,160.5,156.7,155.6,151.6,140.8,132.2,125.2,122.9,114.2,113.4,79.3,74.0,59.3,40.4,24.1,9.6；[α]^23.4 _D(CHCl₃,3.84mg/mL)＝-20.48°；C₁₈H₂₁NO₇S的分析计算值：C,54.67％；H,5.35％；N,3.54％；实测值：C,54.44％；H,5.30％；N,3.49％。

中间体1G：4-(氯甲基)噻唑-2-胺盐酸盐

向1,3-二氯丙-2-酮(35g，276mmol)于丙酮(150mL)中的搅拌的25℃溶液中逐滴添加硫脲(20.98g，276mmol)于丙酮(800mL)中的25℃溶液。将得到的混合物在室温下搅拌72h。将反应混合物过滤，并将滤饼用冷丙酮洗涤。将滤饼在真空下干燥，以提供呈白色固体的中间体1G(49.6g，97％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％ B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)91％,rt＝0.19min；[M+H]⁺＝148.9；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.01(s,1H),4.73(s,2H)；¹³C NMR(100MHz,DMSO-d₆)δ:170.4,135.9,108.3,37.6；C₄H₆Cl₂N₂S的分析计算值：C,25.96％；H,3.27％；N,15.14％；实测值：C,26.2％；H,3.46％；N,15.22％。

中间体1H：[4-(氯甲基)噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯

向中间体1G(50g，270mmol)于水(100mL)和CH₂Cl₂(210mL)中的搅拌的0℃混合物中分批添加NaHCO₃(45.3g，539mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌15min。添加NaCl(21.5g)以使水层饱和，并将混合物在0℃下搅拌5min。将水相用CH₂Cl₂(10x 210mL)萃取，并将合并的有机萃取物真空浓缩至约800mL。向此溶液中添加二碳酸二叔丁酯(64g，293mmol)和DMAP(1.65g，13.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物用1N水性HCl(2x260mL)洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩，以提供呈白色固体的中间体1H(61.9g，97％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％ B至100％ B的连续梯度+在100％ B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)92％,rt＝3.10min；[M+H]⁺＝249.1；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.89(s,1H),4.65(s,2H),1.57(s,9H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ:161.9,152.6,146.6,110.7,83.0,40.9,28.2；C₉H₁₃ClN₂O₂S的分析计算值：C,43.46％；H,5.27％；N,11.26％；实测值：C,43.84％；H,5.25％；N,11.22％。

中间体1I：1,3,2-二氧磷杂环己烷2-氧化物

在氩气下，将二乙基膦酸盐(555g，4019mmol)和丙-1,3-二醇(306g，4019mmol)的溶液在130℃下搅拌6h。反应容器配有短程蒸馏头和接收器。缓慢施加140mmHg的真空。将反应混合物在140mmHg和130℃下搅拌直至EtOH蒸馏停止(约4h)。将反应混合物冷却至100℃，缓慢施加50mmHg的真空，并将反应混合物在50mmHg和100℃下搅拌直至蒸馏停止(1h)。将真空缓慢降至0.5mmHg，并通过在0.5mmHg和120-125℃下蒸馏来分离呈透明油状物的标题化合物。将此油状物静置固化，以提供呈白色固体的中间体1I(443.5g，90％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.06(d,J＝676.1Hz,1H),4.20-4.37(m,4H),2.04-2.20(m,1H),1.60-1.71(m,1H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ67.2(d,J＝6.9Hz),26.0(d,J＝8.4Hz)；³¹P NMR(160MHz,CDCl₃)δ4.4(d,J＝668.8Hz)；C₃H₇O₃P的分析计算值：C,29.52％；H,5.78％；实测值：C,29.37％；H,5.78％。

中间体1J：(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在0℃向NaHMDS于THF中的搅拌溶液(450mL的1M溶液；450mmol)中逐滴添加中间体1I(62.8g，515mmol)于THF(65mL)中的溶液，并将所得浆料在0℃搅拌45min。在0℃逐滴添加中间体H化合物(32g，129mmol)于THF(98mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后移去冷却浴，并将反应混合物在室温下再搅拌6h。将反应混合物冷却至0℃，并将反应用饱和水性NH₄Cl(300mL)缓慢淬灭。将有机相用盐水(300mL)洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩成浅黄色泡沫，将该浅黄色泡沫用EtOAc(200mL)研磨，过滤，用EtOAc(25mL)洗涤并真空干燥，以提供呈白色固体的中间体1J(13.8g)。将合并的EtOAc洗涤液进行真空浓缩，以提供黄色泡沫，对该黄色泡沫进行色谱分离(SiO₂；330g；从0％ MeOH/EtOAc至6％ MeOH/EtOAc的连续梯度，然后为从6％MeOH/CH₂Cl₂至20％MeOH/CH₂Cl₂的连续梯度)，以提供白色固体(10.0g)。将这些白色固体合并，以提供呈白色固体的中间体1J(23.8g，55.4％产率)。HPLC(YMCCombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)98％,rt＝2.57min；[M+H]⁺＝335.1；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.82(d,J＝4.2Hz,1H),4.57-4.42(m,2H),4.36-4.20(m,2H),3.37(d,J＝20.9Hz,2H),2.10-2.01(m,1H),1.99-1.89(m,1H),1.56(s,9H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ:161.2,152.5,140.4,109.6,82.5,66.8,29.5,28.0,26.0；³¹P NMR(160MHz,CDCl₃)δ19.4；C₁₂H₁₉N₂O₅PS的分析计算值：C,43.11％；H,5.72％；N,8.37％；实测值：C,43.36％；H,5.45％；N,8.38％。

中间体1K：2-((2-氨基噻唑-4-基)甲基)-1,3,2-二噁磷杂己环2-氧化物甲磺酸盐

向中间体1J(42g，126mmol)于乙腈(200mL)中的搅拌悬浮液添加甲磺酸(15.1g，157mmol)，并将反应混合物在55℃搅拌12h。在55℃，添加甲基叔丁基醚(200mL)；将反应混合物冷却至0℃并在0°搅拌3h。将混合物过滤，并将固体用冷的1:1乙腈:甲基叔丁基醚(50mL)洗涤，然后在40℃真空干燥以提供呈灰白色固体的中间体1K(41g，98.5％产率)。HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)99％,rt＝0.19min；[M+H]⁺＝235.1；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ6.90(s,3H),6.31(d,J＝4.1Hz,1H),4.42-4.34(m,2H),4.34-4.25(m,2H),3.21(d,J＝20.1Hz,2H),2.10-1.99(m,1H),1.78-1.70(m,1H)；¹³C NMR(100MHz,CD₃OD)δ:172.4,131.8,106.4,69.8,39.6,27.5,25.9,24.5；³¹P NMR(160MHz,DMSO-d₆)δ15.8；C₈H₁₅N₂O₆PS₂的分析计算值：C,29.09％；H,4.58％；N,8.48％；P,9.38％；S,19.41％；实测值：C,29.44％；H,4.79％；N,8.48％；P,8.67％；S,17.78％。

实施例1

向中间体1K(23.08g，73.4mmol)于DMF(160mL)中的搅拌悬浮液中添加i-Pr₂EtN(15.8g，122mmol)，并将反应混合物加热至70℃。将中间体1F(24.2g，61.2mmol)、HOBT水合物(10.78g，70.4mmol)和EDAC(16.42g，86mmol)添加至70℃反应混合物中。将反应混合物在80℃下搅拌25min。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc(600mL)稀释，顺序地用H₂O(250mL)、饱和水性NaHCO₃(2X 250mL)、1N水性HCl(250mL)和盐水(250mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥并真空浓缩，以提供白色泡沫(40g)。将白色泡沫从EtOH(350mL)中重结晶，以提供呈白色固体的实施例1(34.4g，92％产率)。分析型HPLC(YMC CombiScreen ODS-A S-5μ4.6x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝4mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄以及B＝10:90:0.2H₂O:MeOH:H₃PO₄)99.6％,rt＝2.57min；≥99.0％ee(SFC；Chiralcel OJ-H,0.46x 25cm,5μm柱，在200nm处检测；流速＝3mL/min；等度80/20CO₂/MeCN:iPrOH(1:1)流动相；150巴压力)；[M+H]⁺＝612.2；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.74(br.s,1H),8.51(d,1H),8.09(d,1H),7.61-7.68(m,1H),7.54(m,1H),7.46-7.50(m,1H),6.93(m,1H),6.87(d,1H),4.46-4.58(m,1H),4.28-4.41(m,2H),4.03-4.19(m,2H),3.69(d,2H),3.58-3.62(m,2H),3.39(s,3H),3.24(s,3H),1.89-1.97(m,2H),1.71-1.83(m,2H),1.60-1.71(m,1H),1.00(m,3H)；¹³C NMR(100MHz,CD₃OD)δ:166.0,162.2,160.2,158.3,157.6,153.3,142.4,142.2,136.8,127.2,124.3,113.6,113.0,112.8,112.4,80.4,75.1,69.3,59.6,40.8,29.1,28.1,27.5,25.3,9.9；³¹P NMR(160MHz,CD₃OD)δ:21.11；[α]^21.9 _D(MeCN,4.19mg/mL)＝-18.4°；C₂₅H₃₀N₃O₉PS₂的分析计算值：C,49.10％；H,4.95％；N,6.86％；实测值：C,49.09％；H,4.96％；N,6.87％。

可替代地，可根据以下反应方案制备实施例1：

实施例2

3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的钠盐

中间体2A：4-戊基苯酚钠(中间体2A)

将4-戊基苯酚(3.604g，21.94mmol)溶解在100mL 1颈梨形烧瓶中的MeOH(10mL)中，该烧瓶配备有磁力搅拌器和氩气入口。添加NaOH(0.878g，21.94mmol)于MeOH(24mL)和水(6mL)的混合物中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌15min。将反应混合物真空浓缩成半固体，将该半固体在100℃下真空干燥过夜，以提供白色固体。将白色固体在石油醚(40mL)上浆化，将浆料过滤并将滤饼用石油醚(2x 10mL)洗涤。将滤饼在真空下干燥，以提供呈白色固体的中间体2A(3.9424g，96％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ6.52(d,J＝8.3Hz,2H),5.99(d,J＝8.2Hz,2H),2.25(t,J＝7.4Hz,2H),1.41(quin,J＝7.4Hz,2H),1.33-1.15(m,4H),0.84(t,J＝6.9Hz,3H)。

实施例2

将实施例1(11.024g，18.02mmol)溶解在250mL 1颈烧瓶中的THF(50mL)中，该烧瓶配备有磁力搅拌器、回流冷凝器和氩气入口。添加中间体2A(3.36g，18.02mmol)于THF(12.50mL)中的溶液，并将混合物在室温下搅拌1h。将混合物缓慢添加至搅拌的Et₂O(1000mL)中，过滤所得浆料。将滤饼用Et₂O(3x 100mL)洗涤并真空干燥，以提供呈灰白色无定形固体的实施例2(11.3166g，99％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.59(d,J＝2.7Hz,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.62(dd,J＝8.2,2.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.37(s,1H),6.81(t,J＝2.5Hz,1H),6.42(d,J＝3.8Hz,1H),4.46(s,1H),4.39-4.19(m,4H),3.54-3.49(m,2H),3.34-3.22(m,8H),2.08-1.93(m,1H),1.74-1.57(m,3H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H)。

实施例3

3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的钾盐

将实施例1(0.2g，0.327mmol)溶解在25mL 1颈梨形烧瓶中的THF(比率：16.00，体积：8mL)中，该烧瓶配备有磁力搅拌器和氩气入口。添加4-戊基苯酚钾(0.066g，0.327mmol)于THF(比率：1.000，体积：0.5mL)中的溶液，并将混合物在室温下搅拌2h。将混合物逐滴添加至搅拌的Et₂O(100mL)中。将所得浆料进行过滤，将滤饼用Et₂O(3x 1mL)洗涤并真空干燥，以提供呈浅黄色无定形固体的实施例3(0.1927g，91％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.60(1H,d,J＝2.75Hz),8.05(1H,d,J＝8.79Hz),7.63(1H,dd,J＝8.79,2.75Hz),7.57(1H,s),7.37(1H,s),6.83(1H,br.s.),6.46(1H,br.s.),4.43-4.52(1H,m),4.21-4.38(4H,m),3.52(2H,d,J＝5.50Hz),3.21-3.34(8H,m),1.92-2.07(1H,m),1.59-1.73(3H,m),0.93(3H,t,J＝7.42Hz)。

实施例4

3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的晶型

如下文所述制备和表征游离碱3-(((1S)-1-(甲氧基甲基)丙基)氧基)-5-((6-(甲基磺酰基)-3-吡啶基)氧基)-N-(4-((2-氧负基-1,3,2-二噁磷杂己环-2-基)甲基)-1,3-噻唑-2-基)苯甲酰胺的晶型。

表征型式的程序

单晶数据

在Bruker-Nonius(BRUKER AXS,Inc.，5465East Cheryl Parkway Madison，WI53711USA)CAD4系列衍射仪上收集数据。通过对25个高角度反射的实验衍射仪设置的最小二乘分析获得晶胞参数。使用Cu Kα辐射

在恒定温度下使用θ-2θ可变扫描技术测量强度，并且仅针对洛伦兹极化因子校正强度。针对一半扫描时间在扫描的极端情况下收集背景计数。可替代地，使用Cu Kα辐射

在Bruker-NoniusKappa CCD2000系统上收集单晶数据。在收集程序套件中使用HKL2000软件包对测量的强度数据进行编索引和处理(Otwinowski,Z.等人Macromolecular Crystallography,第276卷,第307-326页,Carter,W.C.,Jr.等人编,Academic,NY(1997))。(Collect数据收集和处理用户界面：Collect:Data collection software,R.Hooft,Nonius B.V.,1998.)可替代地，使用Cu Kα辐射

在Bruker-AXS APEX2CCD系统上收集单晶数据。用APEX2软件包/程序套件对测量的强度数据进行编索引和处理(APEX2数据收集和处理用户界面：APEX2用户手册，v1.27；BRUKER AXS,Inc.,5465East Cheryl Parkway Madison,WI 53711USA)。

当指示时，在数据收集期间将晶体在Oxford cryo系统的冷流中冷却(OxfordCryosystemsCryostream冷却器：Cosier,J.等人,J.Appl.Cryst.,19:105(1986))。

通过直接方法解析结构，并使用SDP(SDP，Structure Determination Package，Enraf-Nonius，Bohemia NY 11716)基于观察到的反射进行精细化。SDP软件中的散射因子，包括f'和f”，取自“International Tables for Crystallography”，第IV卷，表2.2A和2.3.1(Kynoch Press,Birmingham,England(1974))的具有微小局部修改的软件包或晶体学包MAXUS(maXus解决方案和精细化软件套件：Mackay,S.等人，maXus：用于从衍射数据或SHELXTL⁴解决和精细化晶体结构的计算机程序。通过全矩阵最小二乘法精细化得到的原子参数(坐标和温度因子)。在精细化中最小化的函数是Σw(|Fo|-|Fc|)²。R定义为Σ||Fo|-|Fc||/Σ|Fo|，而Rw＝[Σw(|Fo|-|Fc|)²/Σw|Fo|²]^1/2，其中w是基于观察到的强度的误差的适当加权函数。在精细化的所有阶段检查差异图。使用各向同性温度因子将氢引入理想位置，但不改变氢参数。

X射线粉末衍射数据(PXRD)

使用Bruker C2GADDS获得PXRD数据。辐射为Cu Kα(40KV，40mA)。样品检测器距离为15cm。将粉末样品置于直径为1mm或更小的密封玻璃毛细管中；在数据收集期间旋转毛细管。收集3≤2θ≤35°的数据，其中样品暴露时间至少为1000秒。将所得到的二维衍射弧积分以产生传统的1维PXRD图，其步长为0.02度2θ，范围为3至35度2θ。

差示扫描量热法(DSC)

DSC实验是在TA

型号Q1000或2920中进行。将样品(约2-6mg)在铝盘中称重并准确记录至百分之一毫克，并转移至DSC。用氮气以50mL/min吹扫仪器。在室温和300℃之间以10℃/min的加热速率收集数据。该图是在吸热峰朝下的情况下制作的。

热重分析(TGA)

TGA实验是在TA

型号Q500或2950中进行。将样品(约10-30mg)置于预先去皮重的铂盘中。准确测量样品的重量并用仪器记录至千分之一毫克。用氮气以100mL/min吹扫炉子。在室温和300℃之间以10℃/min的加热速率收集数据。

型式的准备和分析

型式制备，PXRD、DSC和TGA表征

实施例4a，型式N-1：将粗制实施例1(20.77g)从无水乙醇(每次175mL)中重结晶两次，以提供呈白色结晶固体的N-1型物质(16.0g；73％)。在无水乙醇溶液中，晶体从实施例1生长为无色针状物。N-1型由DSC热谱图表征，其吸热起始通常在约166℃，在较高温度下可能继而发生其他事件。N-1型由PXRD图表征，其匹配由单晶结构数据产生的模拟图。N-1型还由TGA曲线表征，该曲线在高达约275℃下具有可忽略的重量损失，并与单晶结构一致。

实施例4a的特征在于晶胞参数基本上等于以下：

晶胞尺寸：

a＝8.0531(2)

b＝13.5078(3)

c＝13.7063(3)

α＝73.091(1)

β＝88.186(1)

γ＝89.881(1)

空间群：P1

分子/不对称单元(Z’)：2

密度，calc g-cm^-3：1.425。

可替代地，如下制备实施例4a：

在环境温度下将二氯甲烷(28L，11体积)、粗制实施例1(2.53kg，1.0当量)依次添加至30L反应器中。将所得混合物搅拌10分钟以影响溶解，然后添加氧化铝(2.82kg，6.7当量)。添加完成后，将反应混合物搅拌30分钟。此后，将反应混合物通过3kg硅藻土床过滤，然后用二氯甲烷(30.4L，12体积)洗涤硅藻土床。将合并的滤液真空浓缩，然后添加经过精炼过滤的乙醇(6L)。添加完成后，将所得混合物在降低的温度(低于55℃)下浓缩，以提供浓缩的混合物(7L，3体积)。将精炼过滤的乙醇(30L，12体积)添加至浓缩的混合物中，并将所得混合物加热至60℃至65℃。一旦达到规定的温度，添加实施例4a的晶种(12.5g)，然后将反应混合物在60℃至65℃下搅拌30min。在此时期结束时，将反应混合物冷却至25℃，在此温度下搅拌4小时。此后，将反应混合物在离心机中过滤，用乙醇(5L)洗涤，然后旋转干燥1小时。在此时期结束时，将所得物质在65℃下真空干燥6小时，以提供实施例4a(2.27kg)。

还如下制备实施例4a：

将粗制实施例1(50mg)在75℃下溶解于无水EtOH(15体积当量)中。溶解完成后，将溶液冷却至20℃，在此温度下保持不少于一小时且不超过4h的时间，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在90℃下溶解于正丁醇(15体积当量)中。溶解完成后，将溶液冷却至20℃，在此温度下保持不少于一小时且不超过4h的时间，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在80℃下溶解于异丁醇(15体积当量)中。溶解完成后，将溶液冷却至20℃，在此温度下保持不少于一小时且不超过4h的时间，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在80℃下溶解于叔丁醇(15体积当量)中。溶解完成后，将溶液冷却至30℃，在此温度下保持不少于一小时且不超过4h的时间，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在20℃下溶解于二甲基亚砜(4体积当量)中。溶解完成后，经不少于30min且不超过1小时的时间添加水(9.5体积当量)。添加完成后，将所得混合物在20℃下搅拌不少于12小时，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在20℃下溶解于二甲基甲酰胺(4体积当量)中。溶解完成后，经不少于30min且不超过1小时的时间添加水(20体积当量)。添加完成后，将所得混合物在20℃下搅拌不少于12小时，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

将粗制实施例1(50mg)在50℃下溶解于丙酮(30体积当量)中。溶解完成后，经不少于30min且不超过1小时的时间添加水(15体积当量)。添加完成后，将所得混合物浓缩至不低于20体积当量且不高于30体积当量。一旦达到规定的浓度，除去热量，并将混合物冷却至20℃持续不少于12小时，以提供呈白色结晶固体的实施例4a。

实施例4b，富马酸共晶，型式P-2：将实施例4a在20℃下溶解于MeOH(20L/kg)中，然后通过真空蒸馏过夜来除去溶剂，以产生残余物。向所得残余物中添加乙酸乙酯和庚烷(20L/kg，比率为1:2v:v)的混合物，以获得浆料。将所得浆料加热至50℃，在此温度下剧烈搅拌2h。此后，将浆料冷却至25℃，在此温度下搅拌3h。在此时期结束时，将所得固体通过离心进行分离，以提供呈(1:1)富马酸盐的实施例4b。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.36(d,J＝2.7Hz,1H),7.92(d,J＝8.8Hz,1H),7.54(s,1H),7.37(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),7.34(s,1H),6.77(t,J＝2.2Hz,1H),6.72(d,J＝3.8Hz,1H),6.64(s,2H),4.45-4.36(m,1H),4.36-4.25(m,2H),4.13-3.99(m,2H),3.49-3.40(m,2H),3.32-3.19(m,5H),3.09(s,3H),1.87(s,2H),1.75-1.56(m,4H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H)。型式P-2由PXRD图表征。

实施例5和6

中间体5A-丁酸碘甲酯

在100mL 1颈圆底烧瓶中(在氩气下，用铝箔避光)，将丁酸氯甲酸酯(0.25g，1.83mmol)于丙酮(50mL)中的溶液中添加NaI(0.549g，3.66mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后过滤；用丙酮(5mL)洗涤滤饼，并将合并的滤液真空浓缩，以提供橙色油状物，将其用Et₂O(10mL)研磨并过滤。将剩余物质真空浓缩，以提供呈棕色油状物的中间体5A(0.291g，70％产率)，将其不经进一步纯化用于下一反应。

实施例5和实施例6：

在氩气下，向实施例1(0.2g，0.327mmol)于DMF(5mL)中的溶液中依次添加Cs₂CO₃(0.266g，0.817mmol；加热真空干燥)和N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.333g，1.64mmol)，然后逐滴添加中间体5A(0.112g，0.490mmol)于DMF(1mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30min，然后通过分析型HPLC和LC/MS确定反应完成。然后将反应混合物倒入水(15mL)中并用EtOAc(2x 15mL)萃取；将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)并真空浓缩，以提供黄色油状物。将此物质溶解于CH₃CN(2mL)中，并通过制备型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A-30x 250mm柱，在220nm处检测；流速＝40mL/min；经25min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 5min保持时间，其中A＝90:10H₂O:MeCN和B＝10:90H₂O:MeCN]进行纯化。将较快洗脱的产物1(保留时间19.1min)进行真空浓缩，以提供白色固体。将较慢洗脱的产物2(保留时间19.6min)也进行真空浓缩，以提供白色固体。将较快洗脱的产物1(不纯)溶解在CH₃CN(2mL)中，并通过制备型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A-30x 250mm柱，在220nm处检测；流速＝40mL/min；经25min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 5min保持时间，其中A＝90:10H₂O:MeCN和B＝10:90H₂O:MeCN]进一步纯化，以提供呈白色固体的实施例6(19mg；8％产率)。分析型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％B至100％B的连续流+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]保留时间＝3.60min,100％纯度；[M+H]⁺＝712.2；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.49(d,J＝2.2Hz,1H),8.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.50(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.08(s,1H),7.06(d,J＝3.8Hz,1H),6.89(s,1H),6.86(s,1H),6.07(s,2H),4.55-4.42(m,2H),4.40-4.24(m,4H),3.59-3.52(m,2H),3.41(d,J＝20.3Hz,3H),3.36(s,3H),3.23(s,3H),2.29(t,J＝7.4Hz,2H),2.19-2.07(m,1H),1.95-1.83(m,1H),1.78-1.68(m,2H),1.67-1.56(m,2H),0.98(t,J＝7.4Hz,3H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H)。

将较慢洗脱的级分2(不纯)溶解在CH₃CN(2mL)中，并将物质通过制备型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A-30x 250mm柱，在220nm处检测；流速＝40mL/min；经30min从40％B至70％B的连续梯度+在100％B 5min保持时间，其中A＝90:10H₂O:MeCN和B＝10:90H₂O:MeCN]进一步纯化，以提供呈白色固体的实施例5(119mg，50％产率)。分析型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％ B至100％ B的连续梯度+在100％ B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1 H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1 H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]保留时间＝3.70min,98.8％纯度；[M+H]⁺＝712.2；¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.50(d,J＝2.7Hz,1H),8.04(d,J＝8.2Hz,1H),7.86-7.83(m,1H),7.63-7.60(m,1H),7.45(dd,J＝8.2,2.7Hz,1H),6.88-6.84(m,1H),6.60(d,J＝4.9Hz,1H),6.37(s,2H),4.64-4.54(m,2H),4.53-4.45(m,1H),4.37-4.25(m,2H),3.63-3.59(m,2H),3.51(d,J＝20.9Hz,2H),3.39(s,3H),3.22(s,3H),2.30(t,J＝7.4Hz,2H),2.15-1.97(m,2H),1.83-1.73(m,2H),1.66-1.55(m,2H),1.01(t,J＝7.4Hz,3H),0.89(t,J＝7.4Hz,3H)。

可替代地，实施例6可根据以下程序制备：

中间体6A

在配备有磁力搅拌器的48mL玻璃密封管中，向实施例1(1.5g，2.452mmol)于CH₂Cl₂(15mL)中的溶液中依次添加磷腈碱P1-叔丁基三(四亚甲基)(1.532g，4.90mmol)和(氯甲基)(甲基)硫烷(0.284g，2.94mmol)。将反应管用Ar冲洗、加盖，并将反应混合物在50℃搅拌过夜，然后冷却至室温。将反应混合物真空浓缩，以提供棕色油状物，将其溶解在最少量的CH₂Cl₂中并进行色谱分离(120g SiO₂；经35min在己烷中的0-100％EtOAC梯度，然后经35min在CH₂Cl₂中的0-10％MeOH)，以提供呈黄色泡沫的中间体6A(1.029g，62％产率)。分析型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]保留时间＝3.403min.,[M+H]⁺＝671.9,¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.48(d,J＝2.7Hz,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.48(dd,J＝8.2,2.7Hz,1H),7.04-6.99(m,2H),6.85-6.82(m,1H),6.81(s,1H),5.27(s,2H),4.57-4.43(m,3H),4.41-4.32(m,1H),4.31-4.19(m,3H),3.60-3.52(m,3H),3.43(d,J＝20.9Hz,2H),3.38(s,3H),3.23(s,4H),2.22(s,3H),2.10-1.98(m,2H),1.97-1.85(m,1H),1.78-1.68(m,3H),0.98(t,J＝7.4Hz,4H)。

中间体6B

在Ar下，向中间体6A(0.400g，0.595mmol)于CH₂Cl₂(12.5mL)中的溶液中添加三乙胺盐酸盐(0.246g，1.79mmol)，然后逐滴添加磺酰氯(0.595mL，0.595mmol)。将反应混合物在室温下在Ar下搅拌90min，之后通过分析型HPLC和LC/MS检测到反应完成。将反应混合物真空浓缩，以提供呈白色固体的中间体6B(393mg；0.595mmol；100％粗产率)，将其不经进一步纯化用于下一反应。分析型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]；保留时间＝3.335min，[M+H]⁺＝656(甲醇加合物)。

实施例6

在Ar下，向中间体6B(0.393g，0.595mmol)于MeCN(10mL)中的溶液中依次添加丁酸(0.163mL，1.79mmol)和K₂CO₃(0.329g，2.38mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌3h，然后分析型HPLC和LC/MS指示反应完成。将反应混合物冷却至室温并过滤；用MeCN(2mL)洗涤剩余的固体，并将合并的滤液真空浓缩至约2mL体积。将此粗产物通过制备型HPLC[Phen LunaAXIA-5μC-18-30x 100mm柱，在220nm处检测；流速＝40mL/min；经20min从10％B至75％B的连续梯度+在100％B 2min保持时间，其中A＝90:10H₂O:MeCN以及B＝10:90H₂O:MeCN]纯化两次以提供呈白色固体的实施例6(277mg，64％产率)。分析型HPLC(Sunfire C18 3.5μM,3.0X150mm柱，在220和254nm处检测；流速＝1mL/min；经12min从10％B至100％B的连续梯度+在100％B 3min保持时间，其中A＝95:5:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝5:95:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H)；保持时间＝9.62min；纯度＝98％；[M+H]⁺＝712.0,¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.49(d,J＝2.2Hz,1H),8.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.50(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.08(s,1H),7.06(d,J＝3.8Hz,1H),6.89(s,1H),6.86(s,1H),6.07(s,2H),4.55-4.42(m,2H),4.40-4.24(m,4H),3.59-3.52(m,2H),3.41(d,J＝20.3Hz,3H),3.36(s,3H),3.23(s,3H),2.29(t,J＝7.4Hz,2H),2.19-2.07(m,1H),1.95-1.83(m,1H),1.78-1.68(m,2H),1.67-1.56(m,2H),0.98(t,J＝7.4Hz,3H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H)。

实施例7

中间体7A

在0℃下，将浓HCl(2.89mL，34.6mmol)缓慢添加至磷酸二叔丁酯钾(8.6g，34.6mmol)于水(10mL)中的溶液中。将沉淀的固体通过过滤收集，用少量冰水(约5mL)洗涤，并真空干燥，以提供呈白色固体的中间体7A(7.1g，33.8mmol，98％产率)。

中间体7B

将在水中的中间体7A(2.9g，13.8mmol)、Bu₄NHSO₄(0.468g，1.38mmol)和NaHCO₃(9.27g，110mmol)与CH₂Cl₂(各50mL)的混合物在0℃下搅拌10min，然后经30min逐滴添加氯甲基氯代硫酸酯(2.09mL，20.7mmol)。然后将反应在室温下搅拌18h，然后将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并真空浓缩。将残余物进行色谱分离(24g SiO₂；连续梯度的EtOAc/己烷(经15min 0％至30％)，以提供呈透明油状物的中间体7B(2.1g，8.12mmol，59％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ5.63(d,J＝14.8Hz,2H),1.54-1.49(s,18H)；³¹P NMR(162MHz,CDCl₃)δ-11.94(s)。

中间体7C

在Ar下，向实施例1(250mg，0.409mmol)于DMF(7.5mL)中的溶液中依次添加中间体7B(254mg，0.981mmol)、Bu₄NI(53mg，0.143mmol)和Cs₂CO₃(333mg，1.02mmol)，并将反应混合物在35℃下搅拌过夜，然后通过分析型HPLC和LC/MS检测到反应完成。将反应冷却至室温，过滤，并将剩余固体用CH₂Cl₂(25mL)洗涤。将合并的滤液真空浓缩，以提供黄色油状物，将其溶解在MeOH(2mL)中，并通过制备型HPLC[Luna-5μC-18(2)30x 250mm柱，在220nm处检测；流速＝20mL/min；经30min从40％B至100％B的连续梯度+在100％B 7min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeOH:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1 H₂O:MeOH:CF₃CO₂H]纯化，以提供呈透明油状物的中间体7C(0.1768g，51.9％产率)。分析型HPLC[Luna-5μ C-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]；保持时间＝3.78min.,[M+H]⁺＝834.3,¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.47(d,J＝2.7Hz,1H),8.03(d,J＝8.2Hz,1H),7.86-7.83(m,1H),7.67-7.64(m,1H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.86-6.82(m,1H),6.63(d,J＝4.4Hz,1H),6.23(d,J＝10.4Hz,2H),4.62-4.51(m,2H),4.50-4.42(m,1H),4.39-4.28(m,2H),3.65-3.54(m,4H),3.38(s,3H),3.22(s,3H),2.11-2.03(m,1H),1.79-1.71(m,2H),1.58-1.52(m,1H),1.42(s,18H),1.00(t,J＝7.4Hz,3H)。

实施例7

将中间体7C(177mg，0.212mmol)于AcOH:水(6.25mL的4:1混合物)中的溶液在60℃下在Ar下搅拌2h，之后分析型HPLC和LC/MS指示反应完成。在真空中除去挥发物，以提供透明油状物，将其溶解于MeOH(4mL)中，并通过制备型HPLC[XBridge Prep Phenyl-5μOBD-19x100mm柱，在220nm处检测；流速＝20mL/min；经20min从0％B至75％B的连续梯度+在100％B5min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeOH:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeOH:CF₃CO₂H]纯化两次，以提供呈白色固体的实施例7(77mg，48％产率)。分析型HPLC[Luna-5μC-18(2)100A–2.0x 50mm柱，在220nm处检测；流速＝0.8mL/min；经4min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 1min保持时间，其中A＝90:10:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝10:90:0.1H₂O:MeCN:CF₃CO₂H]；保留时间＝3.02min,99.7％纯度；[M+H]⁺＝722.0,¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.45(d,J＝2.7Hz,1H),8.01(d,J＝8.2Hz,1H),7.66(s,1H),7.56(s,1H),7.50(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),6.92(d,J＝3.8Hz,1H),6.89(t,J＝2.2Hz,1H),6.13(d,J＝11.0Hz,2H),4.51-4.30(m,5H),3.64-3.54(m,4H),3.37(s,3H),3.17(s,3H),2.11-1.99(m,1H),1.98-1.87(m,1H),1.79-1.65(m,2H),0.97(t,J＝7.4Hz,3H),³¹P NMR(162MHz,CDCl₃)δ17.4(s),-0.65(s)。

实施例8和9

在室温下，向实施例1(100mg，0.163mmol)于MeCN(5mL)中的溶液中添加N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(162μL，0.654mmol)。5min后，添加K₂CO₃(45mg，0.33mmol)，然后添加氯甲基异丙基碳酸酯(49.9mg，0.327mmol)。将反应在室温下搅拌30min，然后在45℃下加热16h，之后将其冷却至室温。将反应混合物进行真空浓缩，并添加EtOAc。用饱和水性NH₄Cl洗涤有机层，用MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(Phenomenex Luna AXIA 5μmC18 30x 100mm柱；在220nm处检测；流速＝10mL/min；经30min从0％B至100％B的连续梯度+在100％B 7min保持时间，其中A＝90:10H₂O:MeOH以及B＝90:10MeOH:H₂O)纯化粗物质，以提供略微不纯的实施例8和实施例9。将实施例8和9各自通过色谱法(4g SiO₂柱；在EtOAc中的0％-12％MeOH的连续梯度)进一步纯化，以提供高度纯化的呈白色固体的实施例8(14mg，0.019mmol，12％产率)和实施例9(34mg，0.047mmol，29％产率)。

实施例8：

分析型HPLC(Sunfire C18 3.5μM,3.0X150mm柱，在220和254nm处检测；流速＝1mL/min；经15min从10％B至100％B的连续梯度+在100％ B3min保持时间，其中A＝95:5:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝5:95:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H)；保留时间＝9.17min；纯度＝97％；[M+H]⁺＝728.3。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:8.50(d,J＝2.20Hz,1H),8.08(d,J＝8.25Hz,1H),7.50(dd,J＝2.75,8.80Hz,1H),7.09(m,1H),7.04(d,J＝3.85Hz,1H),6.90(m,1H),6.87(m,1H),6.10(s,2H),4.86(m,1H),4.43-4.50(m,2H),4.37(m,1H),4.22-4.31(m,2H),3.57(m,2H),3.44(d,J＝20.63Hz,2H),3.37(s,3H),3.24(s,3H),2.09(m,1H),1.84(m,1H),1.74(M,2H),1.29(d,J＝6.33Hz,6H),0.99(t,J＝7.43Hz,3H)。³¹P NMR(202.45MHz,CDCl₃)δ:18.66。

实施例9：

分析型HPLC(Sunfire C18 3.5μM,3.0X150mm柱，在220和254nm处检测；流速＝1mL/min；经15min从10％B至100％B的连续梯度+在100％B3min保持时间，其中A＝95:5:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H以及B＝5:95:0.05H₂O:MeCN:CF₃CO₂H)；保留时间＝9.35min；分析纯度＝98.5％；[M+H]⁺＝728.3。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:8.47(d,J＝2.20Hz,1H),8.00(d,J＝8.79Hz,1H),7.82(s,1H),7.60(s,1H),7.42(dd,J＝2.75,8.79Hz,1H),6.82(m,1H),6.56(d,J＝4.40Hz,1H),6.39(s,2H),4.80-4.86(m,1H),4.49-4.58(m,2H),4.46(m,1H),4.24-4.33(m,2H),3.57(m,2H),3.50(d,J＝20.34Hz,2H),3.36(s,3H),3.19(s,3H),2.01(m,1H),1.74(m,2H),1.74(M,2H),1.24(d,J＝6.05Hz,6H),0.97(t,J＝7.15Hz,3H)。

用于葡萄糖激酶激活的测定

本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐激活葡萄糖激酶。可以用于测试本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐在激活葡萄糖激酶方面的测定是本领域已知的，例如在美国专利号6,320,050、6,384,200和6,610,846以及WO004/052869中以及在Castellano,A.L.等人,“Glucokinase activating ureas”,Bioorg.Med.Chem.Letters,15:1501-1504(2005)、以及Grimsby,J.,等人“AllostericActivators of Glucokinase:Potential Role in Diabetes Therapy”,Science,301:370-373(2003)中公开的。

通常，已经鉴定本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐在浓度等于或有力地大于100μM、优选10μM、更优选1μM的浓度下增强葡萄糖激酶的活性，从而证明本发明的化合物是葡萄糖激酶活性的特别有效的增强剂。可以将效力计算并表示为EC₅₀(达到50％完全激活的浓度)和/或高于背景的最大激活百分比，并且是指使用上述测定系统测量的活性。

测定和生物数据

已经在以下测定中对本发明的化合物、其对映异构体、前药、非对映异构体或盐进行了测试，并且已经显示出是葡萄糖激酶的激活剂。

葡萄糖激酶串联酶测定

通过将GK、ATP和葡萄糖孵育持续不连续的时间段然后用EDTA(乙二胺四乙酸)淬灭来测量人葡萄糖激酶(GK)的酶活性。然后通过进行检测测定来测量产物葡萄糖-6-磷酸(G6P)的相对量，该检测测定中使用G6P脱氢酶并在405nm波长下测量ThioNAD(硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)到ThioNADH(硫代二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的转化。此“未偶联的”酶促反应表示为GK“串联”测定。可以使用此测定评估化合物对GK的激活。遵循下文描述的GK串联测定方案，在5和12μM的葡萄糖下使用从0至100mM的一系列激活剂化合物浓度。将人全长葡萄糖激酶(GK，15nM)与5或12mM葡萄糖在具有透明底部的384孔黑色微量滴定板中孵育。为了引发GK反应，将镁-ATP(3mM终浓度)添加至缓冲液中的GK(最终缓冲液条件：25mMHEPES缓冲液，pH 7.1，包含1mM二硫苏糖醇和5％DMSO)中。总反应体积为20μL。使反应进行十分钟，然后用5μL EDTA淬灭；最终45mM)。然后将检测反应的组分ThioNAD和G6PDH(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)(最终浓度分别为650μM和3.33单位)以25μL的体积一起添加(以使总体积为50μL)。在

Plus 384吸光度酶标仪(Molecular Devices)上在405nm下进行吸光度测量。读取吸光度，减去背景葡萄糖-6-磷酸水平，之后将激活计算为对照活性的百分比。在运载体(DMSO)的存在下使用GK测定对照活性，减去背景葡萄糖-6-磷酸。背景葡萄糖-6-磷酸是通过在用ATP引发反应之前用EDTA预先淬灭GK来测定。

人GK的表达和纯化

使全长人肝脏GK(未标记)在BL21STAR(DE3)pLysS细胞(Invitrogen)中在25℃表达，如Mookhtiar等人(1)所述。蛋白质纯化基本上如Lange(2)所述，其中具有略微修改。简而言之，将细胞沉淀通过三轮冷冻和解冻来裂解，在15000g离心澄清，并用40％-65％(NH₄)₂SO₄沉淀。将得到的沉淀重悬于缓冲液中，透析，并直接施加至

(Sigma)柱，然后用线性100-600mM KCl梯度进行洗脱。将含有GK的级分合并，相对于25mM Hepes pH7.2/1mM MgCl2/1mM EDTA/0.1M KCl/1mM DTT透析过夜，然后再次用添加了10％甘油的相同缓冲液透析。

参考文献

1.Mookhtiar,K.A.et al.,“Heterologous expression and characterizationof rat liver glucokinase regulatory protein”,Diabetes,45:1670-1677(1996).

2.Lange,A.J.et al.,“Expression and site-directed mutagenesis ofhepatic glucokinase”,Biochem.J.,277:159-163(1991).

在下面的表1中可找到所比较的化合物的数据(参见WO 2008/005964 A1、U.S.7,432,287和U.S.7,977,367)。比较数据显示本发明化合物的出乎意料的在以下方面中的显著改善：1)水溶性，2)人肝微粒体中的代谢稳定性；3)细胞色素P450酶抑制的减少和/或4)人葡萄糖激酶的抑制。

体内研究：口服葡萄糖耐量测试(OGTT)

在进行实验前喂养高脂肪饮食(来自脂肪的60％kcal)持续26周的雄性DIO(饮食诱导的肥胖)C57BL/6J小鼠中进行口服葡萄糖耐量测试。在用于实验之前将小鼠禁食过夜。将测试化合物或运载体(1)40％PEG 400+10％Cremophore+50％水或2)10％二甲基乙酰胺+10％乙醇+10％Cremophore+70％水)口服给予，60min之后口服给予剂量为2g/kg体重的葡萄糖溶液(口服葡萄糖耐量测试；OGTT)。从在给予葡萄糖之前和之后的不同时间点(2小时的时间历程)取得的尾部采血样品测量血液葡萄糖水平。产生血液葡萄糖的时间曲线，并计算在0-120min从基线曲线下面积(ΔAUC)的变化(给予葡萄糖的时间为时间零)。

在下面的表2中可找到所比较的化合物的数据(参见WO 2008/005964 A1和WO2009/041475 A1)。比较数据显示如上所述的在DIO小鼠中的OGTT测试中葡萄糖AUC水平的出乎意料的降低。

体内研究：药代动力学研究

通过本领域普通技术人员已知的方法进行药代动力学(PK)筛选研究。

例如，将研究化合物以10mg/kg作为在PEG400/Cremphor EL/水(40/10/50)运载体中的溶液口服给予雄性C57Black6j(C57B16J)小鼠(每个时间点N＝3)。在PK研究之前将小鼠禁食过夜。在给予后0.5小时、1小时、2小时和4小时通过心脏出血取血样。向血液样品(约0.2mL)中添加K₂EDTA并在4℃(1500-2000x g)下离心以获得血浆。在给予后1小时收集肝样品(N＝3)。用3体积的水将肝组织匀浆化，以形成均匀的匀浆物。将血浆和肝脏样品储存在-20℃，然后通过LC/MS/MS对它们进行分析。使用线性和对数梯形求和计算血浆AUC。通过将肝脏中的总浓度除以各小鼠的血浆浓度来计算肝脏-血浆(L/P)比率。报告来自3只小鼠的L/P比率的平均值连同标准差。

在下面的表3中可找到所比较的化合物的数据(参见WO 2008/005964 A1和WO2009/041475 A1)。比较数据显示本发明化合物出乎意料的显著肝脏选择性。

对于另外的PK研究，在大鼠中以10mg/kg给予作为溶液(40％PEG400+10％Cremaphore+50％水)的前药实施例化合物(一般程序如上针对小鼠PK研究所述的来进行)，并在给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时取血样。在下面的表4中可找到本发明的前药化合物的数据。数据显示本发明化合物出乎意料的显著肝脏选择性。

表4

PK数据

出人意料的是，与本领域中已知的化合物相比，发现本发明的化合物具有有益的药理学特征，例如，如下的组合：肝脏选择性、在较低剂量水平下改善的葡萄糖减少、改善的溶解度和降低的细胞色素P450酶抑制或诱导。参见表1、2、3和4。例如，本发明的实施例1和WO 2008/005964A1的实施例169。本发明的实施例1具有：1)在人GK下36nM的EC₅₀，2)26.8μM的CYP450 2C9 IC₅₀，3)74μg/mL的水溶解度，4)在10μmol/kg剂量下47％的葡萄糖AUC降低(在饮食诱导的肥胖小鼠中口服葡萄糖耐量测试[OGTT]之后)，以及5)在雄性C57Bl6J小鼠中在给予10mg/kg剂量1小时之后，21626±1359nM的肝脏暴露和约39:1的肝脏:血浆比率。相比之下，具有针对GK的相似活性(54nM的GK EC₅₀)的WO 2008/005964 A1的实施例169针对CYP450 2C9为6倍(CYP450 2C9 IC₅₀为4.02μM)，溶解性是十八分之一(水溶性为4μg/mL)，在饮食诱导的肥胖小鼠中在口服葡萄糖耐量测试之后在降低葡萄糖AUC方面的有效性是六分之一(在10μmol/kg下葡萄糖AUC降低8％)，并给出在肝脏中约十三分之一的药物暴露(在将10mg/kg剂量给予至雄性C57Bl6J小鼠1小时后为1608±345nM)，以及三分之一的肝脏:血浆选择性(13.9:1对比39:1)。

效用和组合

A.效用

本发明的化合物具有作为葡萄糖激酶活性增强剂的活性，因此可用于治疗与葡萄糖激酶活性有关的疾病。

因此，可以将本发明的化合物给予哺乳动物，优选人，以治疗各种病症和障碍，包括但不限于治疗、预防以下或减缓以下的进展：糖尿病和相关病症、与糖尿病相关的微血管并发症、与糖尿病相关的大血管并发症、心血管疾病、代谢综合征及其组分病症、和其他疾病。因此，认为本发明的化合物可用于预防、抑制或治疗糖尿病(尤其是II型糖尿病)、高血糖症、葡萄糖耐量减低、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、视网膜病变、神经病、肾病、伤口愈合延迟、动脉粥样硬化及其后遗症、心功能异常、心肌缺血、中风、代谢综合征、高血压、肥胖症、血脂异常、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL、高LDL、非心脏局部缺血、感染、癌症、血管再狭窄、胰腺炎、神经退行性疾病、脂质障碍、认知损害和痴呆、骨病、HIV蛋白酶相关脂肪营养不良、和青光眼。

代谢综合征或“综合征X”描述于Ford等人,J.Am.Med.Assoc.,287:356-359(2002)以及Arbeeny等人,Curr.Med.Chem.-Imm.,Endoc.&Metab.Agents,1:1-24(2001)。

B.组合

本发明在其范围内包括药物组合物，其包含与药物载体或稀释剂相组合的作为活性成分的治疗有效量的本发明化合物。任选地，本发明的化合物可以与一种或多种其他治疗剂(例如抗糖尿病药或其他药物活性物质)组合使用。

本发明的化合物可以与一种或多种可用于治疗上述障碍的其他合适治疗剂组合使用，该一种或多种其他合适治疗剂包括：抗糖尿病药、抗高血糖药、抗高胰岛素血症药、抗视网膜病药、抗神经病药、抗肾病药、抗动脉粥样硬化药、抗缺血药、抗高血压药、抗肥胖症药、抗血脂异常药、抗血脂异常药、抗高脂血症药、抗高甘油三酯药、抗高胆固醇血症药、抗再狭窄药、抗胰腺药、降脂药、食欲抑制剂、心力衰竭治疗、外周动脉疾病治疗和抗炎药。

用于与本发明的化合物组合使用的合适抗糖尿病药的例子包括胰岛素和胰岛素类似物(例如LysPro胰岛素，包含胰岛素的吸入制剂)；胰高血糖素样肽；磺酰脲和类似物(例如氯磺丙脲、格列本脲、甲苯磺丁脲、甲磺氮草脲、醋酸己脲、格列吡嗪、优降糖、格列美脲、瑞格列奈、美格列奈)；双胍类(例如二甲双胍、苯乙双胍、丁二胍)；α2-拮抗剂以及咪唑啉类(例如咪格列唑、伊格列哚、德格列哚、咪唑克生、依法克生、氟洛克生)；其他胰岛素促分泌素(例如利诺格列、促胰岛素(insulinotropin)、毒蜥外泌肽-4、N,N-二甲基-N′-[2-(4-吗啉基)苯基]胍(E)-2-丁烯二酸盐(BTS-675820)、(-)-N-(反式-4-异丙基环己烷羰基)-D-苯基丙氨酸(A-4166))；噻唑烷二酮类以及PPAR-γ激动剂(例如环格列酮、吡格列酮、曲格列酮、罗格列酮)；PPAR-α激动剂，例如非诺贝特、吉非贝齐)；PPARα/γ双重激动剂(例如莫格他唑、培利格列扎、阿格列扎)；SGLT2抑制剂(例如3-(苯并[b]呋喃-5-基)-2′,6′-二羟基-4′-甲基苯丙酮-2′-O-(6-O-甲氧基羰基)-β-d-吡喃葡糖苷(T-1095TanabeSeiyaku)、根皮苷、TS-033(Taisho)、达格列净(BMS)、sergiflozin(Kissei)、AVE 2268(Sanofi-Aventis))、卡格列净；11-β-羟基甾脱氢酶I型抑制剂(例如AMG221、INCB13739)；二肽基肽酶-IV(DPP4)抑制剂(例如沙格列汀、西他列汀、维达列汀、阿格列汀和地格列汀)；胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂(例如艾塞那肽(Byetta)、NN2211(利拉鲁肽，NovoNordisk)、AVE0010(Sanofi-Aventis)、R1583(Roche/Ipsen)、SUN E7001(Daiichi/Santory)、GSK-716155(GSK/Human Genome Sciences)和毒蜥外泌肽-4(PC-DACTM)；醛糖还原酶抑制剂(例如公开于WO 99/26659中的那些)；RXR激动剂(例如瑞格列扎(JTT-501)、5-[[6-[(2-氟苯基)甲氧基]-2-萘基]甲基]-2,4-噻唑烷二酮(MCC-555)、5-[[3-(5,6,7,8-四氢-3,5,5,8,8-五甲基-2-萘基)-4-(三氟甲氧基)-苯基]亚甲基]-2,4-噻唑烷二酮(MX-6054)、DRF2593、法格列扎、(±)-5-[(2,4-二氧代噻唑-5-基)甲基]-2-甲氧基-N-[[(4-三氟甲基)苯基]-甲基]苯甲酰胺(KRP-297)、6-[1-(5,6,7,8-四氢-3,5,5,8,8-五甲基-2-萘基)环丙基]-3-吡啶羧酸(LG100268))；脂肪酸氧化抑制剂(例如氯莫克舍、乙莫克舍；α-葡糖苷酶抑制剂：precose、阿卡波糖、米格列醇、乙格列酯、伏格列波糖、2,6-双脱氧-2,6-亚氨基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖基-D-甘油-L-古洛-庚糖醇(MDL-25,637)、卡格列波糖)；β-激动剂(例如甲基酯[4-[(2R)-2-[[(2R)-2-(3-氯苯基)-2-羟基乙基]氨基]丙基]苯氧基]-乙酸(BRL 35135)、2-[4-[(2S)-2-[[(2S)-2-(3-氯苯基)-2-羟基乙基]氨基]丙基]苯氧基]-乙酸(BRL 37344)、4-[(3R)-3-[双[(2R)-2-羟基-2-苯基乙基]氨基]丁基]-苯甲酰胺(Ro 16-8714)、2-[4-[2-[[(2S)-2-羟基-3-苯氧基丙基]氨基]乙氧基]苯氧基]-N-(2-甲氧基乙基)-乙酰胺(ICI D7114)、5-[(2R)-2-[[(2R)-2-(3-氯苯基)-2-羟基乙基]氨基]丙基]-3-苯并二茂-2,2-二羧酸二钠盐(CL 316,243)、TAK-667、AZ40140)；磷酸二酯酶抑制剂(cAMP和cGMP两种类型)(例如西地那非、9-((1S,2R)-2-氟-1-甲基丙基)-2-甲氧基-6-(1-哌嗪基)嘌呤盐酸盐(L-686398)、L-386,398)；胰淀素激动剂(例如普兰林肽)；脂氧合酶抑制剂(例如masoprocal)；生长抑素类似物(例如兰瑞肽、司格列肽、奥曲肽)；胰高血糖素拮抗剂(例如BAY 276-9955)；胰岛素信号传导激动剂、胰岛素模拟物、PTP1B抑制剂(例如2-[2-(1,1-二甲基-2-丙烯基)-1H-吲哚-3-基]-3,6-二羟基-5-[7-(3-甲基-2-丁烯基)-1H-吲哚-3-基]-2,5-环己二烯-1,4-二酮(L-783281)、TER17411、TER17529)；糖异生作用抑制剂(例如GP3034)；生长抑素类似物和拮抗剂；抗脂肪分解剂(例如烟酸、阿西莫司、N-环己基-2′-O-甲基-腺苷(WAG 994))；葡萄糖转运刺激剂(例如4-氯-α-[(4-甲基苯基)磺酰基]-苯庚酸(BM-130795))；葡萄糖合酶激酶抑制剂(例如氯化锂、CT98014、CT98023)；雪花莲碱受体激动剂；趋化因子受体拮抗剂CCR2/5(例如NCB3284、MK-0812、INCB8696、马拉韦罗(Pfizer)和维利韦洛)；甲状腺受体激动剂(例如KB-2115(KaroBio))；葡萄糖激酶激活剂(例如RO-27-4375、RO-28-1675(Roche)、6-[[3-[(1S)-2-甲氧基-1-甲基乙氧基]-5-[(1S)-1-甲基-2-苯基乙氧基]苯甲酰基]氨基]-3-吡啶甲酸(GKA-50AstraZeneca))；GPR 40调节剂(例如(S)-4-(二甲基氨基)-3-(4-((4-甲基-2-对甲苯基噻唑-5-基)甲氧基)苯基)-4-氧代丁酸、6-氯-2-(4-氯苄基硫代)-1-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑、TAK-875、CNX011、和P1736)以及GPR-119调节剂(例如PSN821(OSI Pharmaceuticals))。

用于与本发明的化合物组合使用的合适降脂药和抗动脉粥样硬化药的例子包括一种或多种MTP/ApoB分泌抑制剂(例如dirlopatide、N-(2,2,2-三氟乙基)-9-[4-[4-[[[4′-(三氟甲基)[1,1′-联苯]-2-基]羰基-]氨基]-1-哌啶基]丁基]-9H-芴-9-甲酰胺、甲磺酸盐、CP-741952(Pfizer)、SLx-4090(Surface Logix))；HMG CoA还原酶抑制剂(例如阿伐他汀、瑞舒伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀)；鲨烯合成酶抑制剂、PPARα激动剂和苯氧酸衍生物(例如非诺贝特、吉非贝齐)；ACAT抑制剂；脂氧合酶抑制剂；胆固醇吸收抑制剂(例如依折麦布)；甲状腺受体激动剂(例如如上所述)；回肠Na+/胆汁酸共转运体抑制剂(例如乳在Drugs of the Future,24:425-430(1999)中公开的化合物；LDL受体活性的上调剂(例如(3R)-3-[(13R)-13-羟基-10-氧代四癸基]-5,7-二甲氧基-1(3H)-异苯并呋喃酮(Taisho Pharmaceutical Co.Ltd.)以及(3α,4α,5α)-4-(2-丙烯基)-胆甾烷-3-醇(Eli Lilly)；胆汁酸螯合剂(例如

LoCholest以及

以及苯氧酸衍生物，例如安妥明、

和Tricot)；胆甾醇酯转运蛋白抑制剂(例如托西曲匹和(2R)-3-{[3-(4-氯-3-乙基-苯氧基)-苯基]-[[3-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]甲基]氨基}-1,1,1-三氟-2-丙醇)；盐酸及其衍生物(例如尼克酸、阿西莫司)；PCSK9抑制剂；LXR激动剂(例如在美国专利申请号公开号2003/01814206、2005/0080111和2005/0245515中公开的那些)；脂氧合酶抑制剂(例如如在WO 97/12615中公开的苯并咪唑衍生物，如在WO 97/12613中公开的15-LO抑制剂，如在WO 96/38144中公开的异噻唑酮，以及如Sendobry等人,“Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabbits witha highly selective 15-lipoxygenase inhibitor lacking significant antioxidantproperties”,Brit.J.Pharmacology,120:1199-1206(1997)、以及Cornicelli等人,“15-Lipoxygenase and its Inhibition:A Novel Therapeutic Target for VascularDisease”,Current Pharmaceutical Design,5:11-20(1999)公开的15-LO抑制剂)。

优选的降血脂药是普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀、atavastatin、以及瑞舒伐他汀。

用于与本发明的化合物组合使用的合适抗高血压药的例子包括β肾上腺素能阻滞剂、钙通道阻滞剂(L型和T型；例如地尔硫卓、维拉帕米、硝苯吡啶、氨氯地平以及mybefradil)、利尿剂(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟甲噻嗪、下氟噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯噻嗪、多噻嗪、苯噻脞、依他尼酸tricrynafen、氯噻酮、利尿磺胺、musolimine、丁苯氧酸、triamtrenene、阿米洛利、安体舒通)、肾素抑制剂(例如阿利吉仑)、ACE抑制剂(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、ceranopril、cilazopril、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦、厄贝沙坦、缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如西他生坦、atrsentan、以及在美国专利号5,612,359和6,043,265中公开的化合物)、双重ET/AII拮抗剂(例如WO 00/01389中公开的化合物)、中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(例如双重NEP-ACE抑制剂)(例如奥帕曲拉和格莫曲拉)、硝酸盐、中央α激动剂(例如可乐定)、α1阻滞剂(例如哌唑嗪)、动脉血管扩张剂(例如敏乐定)、交感神经阻滞药(例如resperine)、肾素抑制剂(例如阿利吉仑(Novartis))。

用于与本发明的化合物组合使用的合适抗肥胖药的例子包括大麻素受体1拮抗剂或反向激动剂(例如利莫那班、(4S)-3-(4-氯苯基)-N-[(4-氯苯基)磺酰基]-4,5-二氢-N′-甲基-4-苯基-1H-吡唑-1-甲脒(SLV 319)、CP-945598(Pfizer)、舒利那班(SR-147778，Sanofi-Aventis)、N-[(1S,2S)-3-(4-氯苯基)-2-(3-氰基苯基)-1-甲基丙基]-2-甲基-2-{[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氧基}丙酰胺(Merck)和在Hertzog,D.L.,ExpertOpin.Ther.Patents,14:1435-1452(2004)中讨论的那些)；β3肾上腺素能激动剂(例如雷法贝隆(AJ9677，Takeda/Dainippon)、N-[4-[2-[[(2S)-3-[(6-氨基-3-吡啶基)氧基]-2-羟基丙基]氨基]乙基]苯基]-4-(1-甲基乙基)-苯磺酰胺(L750355，Merck)或CP331648(Pfizer)或其他已知的β3激动剂(如在美国专利号5,541,204、5,770,615、5,491,134、5,776,983和5,488,064中公开的)，其中雷法贝隆、N-[4-[2-[[(2S)-3-[(6-氨基-3-吡啶基)氧基]-2-羟基丙基]氨基]乙基]苯基]-4-(1-甲基乙基)-苯磺酰胺、以及CP331648是优选的)；脂肪酶抑制剂(例如奥利司他或塞利司他，其中奥利司他是优选的)；血清素和去甲肾上腺素重摄取抑制剂(例如西布曲明(Abbott)和特索芬辛(Neurosearch))，其中西布曲明是优选的；多巴胺重摄取抑制剂(例如buproprion，GSK)；或5-HT_2C激动剂(例如盐酸氯卡色林(Arena)、WAY-163909[(7bR,10aR)-1,2,3,4,8,9,10,10a-八氢-7bH-环戊-[b][1,4]二氮杂革[6,7,1hi]吲哚]，其中盐酸氯卡色林是优选的)；5-HT6受体拮抗剂(Suven，Biovitrum，Epix)、抗癫痫药托吡酯(Johnson&Johnson)和唑尼沙胺、睫状神经营养因子激动剂(例如

(Regeneron))；脑源性神经营养因子(BDNF)、阿立新拮抗剂、组胺受体-3(H3)调节剂、黑色素浓集激素受体(MCHR)拮抗剂(例如GSK-856464(GlaxoSmithKline)、T-0910792(Amgen))；二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)抑制剂(例如BAY-74-4113(Bayer)、PF-04620110、以及LCQ908)；乙酰CoA羧化酶(ACC)抑制剂(例如N-(4-(4-(4-异丙氧基苯氧基)苯基)丁-3-炔-2-基)乙酰胺(A-80040，Abbott)、(R)-蒽-9-基(3-(吗啉-4-羰基)-1,4′-二哌啶-1′-基)甲酮(CP-640186，Pfizer))、SCD-1抑制剂(如Jiang等人,Diabetes,53(2004),(abs 653-p)所述)；胰淀素受体激动剂(例如在WO 2005/025504中公开的化合物)；甲状腺受体激动剂(例如如上所述)；生长激素促分泌素受体(GHSR)拮抗剂(例如A-778193(Abbott)、瘦素和瘦素模拟物(例如OB-3(Aegis/Albany Medical College)、瘦素类似物A-100和A-200(Amgen)、CBT-001452(Cambridge Biotechnology)、ML-22952(Millennium))、PYY受体激动剂(例如AC-162352(Amylin)、PYY-3-36(Emishere)、PYY(3-36)NH2(Unigene))、NPY-Y4激动剂(7TMPharma WO 2005/089786(A2,A3)-1)、NPY-5拮抗剂(例如NPY5RA-972(AstraZeneca)、GW-594884A(GlaxoSmithKline)、J-104870(Banyu))；MTP/apoB分泌抑制剂(如上所述)、和/或厌食药。

可任选地与本发明的化合物组合使用的厌食药包括右苯丙胺、芬特明、苯丙醇胺、或马吲哚，其中右苯丙胺是优选的。

可与本发明的化合物组合使用的其他化合物包括CCK受体激动剂(例如SR-27895B)；甘丙肽受体拮抗剂；MCR-4拮抗剂(例如N-乙酰基-L-正亮氨酰基-L-谷氨酰胺基-L-组氨酰基-D-苯丙氨酰基-L-精氨酰基-D-色氨酰基-甘氨酰胺(HP-228)；尿皮质素模拟物、CRF拮抗剂、和CRF结合蛋白(例如米非司酮(RU-486)、尿皮质素)。

此外，本发明的化合物可以与HIV蛋白酶抑制剂(包括但不限于

和

)组合使用。

用于与本发明的化合物组合使用的合适的记忆增强剂、抗痴呆药或认知促进剂的实施例包括但不限于

加兰他敏、多奈哌齐、利斯的明、加兰他敏、美金刚、他克林、美曲膦酯、毒蕈碱、xanomelline、司来吉兰和毒扁豆碱。

用于与本发明的化合物组合使用的合适抗炎药的例子包括但不限于NSAIDS、泼尼松、对乙酰氨基酚、阿司匹林、可待因、芬太尼、布洛芬、吲哚美辛、酮咯酸、吗啡、萘普生、非那西丁、吡罗昔康、舒芬太尼、苏林酸、干扰素α、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、地塞米松、flucatisone、倍他米松、氢化可的松、倍氯米松、

和

将上述专利和专利申请通过引用并入本文。

当与本发明的化合物组合使用时，上述其他治疗剂可以例如以Physicians’DeskReference中指示的、如上述专利中所述的、或者如以其他方式由本领域普通技术人员确定的那些量使用。

剂量和制剂

可以按口服剂型如片剂、胶囊(每种包括缓释或定时释放制剂)、丸剂、粉末、颗粒、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆和乳液给予本公开文本的化合物。还可以将它们按静脉内(推注或输注)、腹膜内、皮下或肌内形式给予，所有这些都使用药学领域普通技术人员熟知的剂型。可以单独给予它们，但通常与基于给药的选择途径和标准药学实践所选择的药物载体一起给予。

当然，本发明的化合物的剂量方案将根据已知因素而变化，该已知因素例如：特定药剂的药效动力学特征及其给药模式和途径；接受者的物种、年龄、性别、健康、医疗状况和体重；症状的性质和程度；并行治疗的种类；治疗频率；给药途径、患者的肾和肝功能、以及所需的效果。医师或兽医可以确定和规定预防、抵抗或阻止障碍进展所需的药物的有效量。

作为一般指导，每种活性成分的每日口服剂量，当用于指示的效果时，将在约0.001至1000mg/kg体重、或每天约0.01至100mg/kg体重之间、或可替代地在约1.0至20mg/kg/天之间的范围内。本发明的化合物可以按单个日剂量给予，或者总日剂量可以按每日两次、三次或四次的分剂量给予。在一个实施方案中，活性成分的每日口服剂量为3和600mg之间，每日一次给予或每日两次以分剂量给予。可替代地，可以将活性成分以每日两次给予的10-20mg剂量或者每日给予的40至100mg剂量给予。可替代地，可以将活性成分每天两次给予12.5mg的剂量或每天一次75mg的剂量。可替代地，可以将活性成分以3mg、10mg、30mg、100mg、300mg、和600mg的剂量给予，每天给予一次或两次。

可以通过局部使用合适的鼻内运载体以鼻内形式或使用透皮贴剂通过透皮途径来给予本发明的化合物。当以透皮递送系统的形式给予时，剂量给予在整个剂量方案中当然是连续的而不是间歇的。

典型地将化合物与针对预期给药形式适当选择的并与常规的制药实践一致的合适药物稀释剂、赋形剂或载体(在本文统称为药物载体)混合给予，预期给药形式为口服片剂、胶囊、酏剂、糖浆等。

例如，对于片剂或胶囊形式的口服给药，可将活性药物组分与口服无毒药学上可接受的惰性载体(如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸氢钙、硫酸钙、甘露醇、山梨醇等组合；对于液体形式的口服给药，可将口服药物组分与任何口服无毒药学上可接受的惰性载体(如乙醇、甘油、水等)组合。此外，当需要或必要时，也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶(如阿拉伯树胶、黄芪胶)或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

本发明的化合物还可以按脂质体递送系统(如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡)的形式给予。脂质体可以由各种磷脂形成，例如胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱。

本发明的化合物还可以与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。此类聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与可用于实现药物控制释放的一类可生物降解聚合物偶联，这些可生物降解聚合物例如是聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯、以及交联或两亲性水凝胶嵌段共聚物。

适用于给药的剂型(药物组合物)的每剂量单位可含有约1毫克至约100毫克的活性成分。在这些药物组合物中，活性成分通常按重量计以基于组合物总重量的约0.5％-95％的量存在。

明胶胶囊可含有活性成分和粉末状载体，例如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。类似的稀释剂可用于制备压缩片剂。片剂和胶囊均可制成缓释产品，以经数小时时间连续释放药物。压缩片剂可以是糖衣或薄膜包衣的以掩盖任何令人不愉快的味道并保护片剂免受大气影响，或肠溶包衣的以在胃肠道中选择性地崩解。

用于口服给药的液体剂型可包含着色剂和调味剂，以增加患者的接受度。

通常，水、合适的油、盐水、水性右旋糖(葡萄糖)、和相关的糖溶液和二醇(如丙二醇或聚乙二醇)是胃肠外溶液的合适载体。用于肠胃外给药的溶液可包含活性成分的水溶性盐、合适的稳定剂、以及缓冲物质(如果需要的话)。单独或组合的抗氧化剂如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸是合适的稳定剂。还使用柠檬酸及其盐和EDTA钠。此外，肠胃外溶液可包含防腐剂，例如苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、以及氯丁醇。

合适的药物载体描述于Remington’s Pharmaceutical Sciences,MackPublishing Company，其为此领域中的标准参考。

用于给予本发明化合物的代表性有用的药物剂型可以说明如下：

胶囊

可以通过填充标准的两片式硬明胶胶囊来制备大量的单元胶囊，每个胶囊具有100毫克粉末状活性成分、150毫克乳糖、50毫克纤维素和6毫克硬脂酸镁。

软明胶胶囊

可以制备活性成分于可消化油(如大豆油、棉籽油或橄榄油)中的混合物，并通过正排量泵将该混合物注入明胶中以形成包含100毫克活性成分的软明胶胶囊。应洗涤和干燥胶囊。

片剂

片剂可通过常规程序来制备，使得剂量单元为100毫克活性成分、0.2毫克胶体二氧化硅、5毫克硬脂酸镁、275毫克微晶纤维素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖。可以施加适当的包衣以增加适口性或延迟吸收。

分散体

可以通过本领域技术人员已知的方法制备喷雾干燥的分散体以用于口服给药。

注射剂

适用于注射给予的肠胃外组合物可以通过将按重量计1.5％的活性成分在按体积计10％的丙二醇和水中搅拌来制备。应使得溶液与氯化钠等渗并灭菌。

悬浮液

可以制备水性悬浮液以用于口服给药，使得每个5mL包含100mg细分的活性成分、200mg羧甲基纤维素钠、5mg苯甲酸钠、1.0g山梨醇溶液(U.S.P.)和0.025mL香草醛。

当将两种或更多种前述第二治疗剂与实施例的化合物一起给予时，通常，鉴于当组合给予时治疗剂的加和或协同效应，典型日剂量和典型剂型中每种组分的量可以相对于当单独给予时药剂的常用剂量而言减少。

特别是当作为单一剂量单元提供时，组合的活性成分之间存在化学相互作用的可能性。因此，当实施例的化合物和第二治疗剂以单剂量单元组合时，它们被配制成使得尽管活性成分以单一剂量单元组合，但活性成分之间的物理接触被最小化(即降低)。例如，一个活性成分可以是肠溶包衣的。通过对活性成分之一进行肠溶包衣，不仅可以使组合的活性成分之间的接触最小化，而且可以控制胃肠道中这些组分之一的释放，使得这些组分之一不在胃中释放，而是在肠道中释放。也可以将活性成分之一用一种材料包衣，该材料在整个胃肠道中实现缓释并且还用于使组合的活性成分之间的物理接触最小化。此外，缓释的组分可以另外进行肠溶包衣，使得此组分的释放仅在肠道中发生。再另一种方法涉及配制组合产品，其中将一种组分用缓释和/或肠溶释放聚合物包衣，并且将另一种组分也用聚合物(如低粘度级羟丙基甲基纤维素(HPMC))或本领域中已知的其他适当材料包衣，以进一步分离活性组分。聚合物包衣用于形成针对与其他组分相互作用的附加屏障。

一旦结合本公开文本，使得无论以单一剂型给予还是以分开的形式给予(但在同时以相同的方式给予)的本发明组合产品的组分之间的接触最小化的这些以及其他方式对于本领域技术人员来说都是易于清楚的。

Claims

1.一种化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其为

2.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其是该化合物的盐。

3.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其是该化合物的钠盐或钾盐。

4.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其是该化合物的钠盐。

5.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其是该化合物的钾盐。

6.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其为该化合物的晶型，其中该晶型是N-1或P-2形式，其中N-1形式表征为基本上如图1中所示的实验XRPD图，P-2形式表征为基本上如图3中所示的实验XRPD图。

7.权利要求1的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其为该化合物的晶型，其中该晶型是N-1形式，其中N-1形式表征为基本上如图1中所示的实验XRPD图。

8.权利要求6-7中任一项的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其中该晶型处于基本上纯的形式。

9.权利要求7的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，其中该化合物的该晶型的特征在于晶胞参数基本上等于以下：

晶胞尺寸：

a＝8.0531(2)

b＝13.5078(3)

c＝13.7063(3)

α＝73.091(1)

β＝88.186(1)

γ＝89.881(1)

空间群：P1

分子/不对称单元(Z’)：2

密度，计算为g·cm^-3：1.425。

10.一种选自下组的化合物、其对映异构体、非对映异构体或盐，该组由以下组成：

以及

11.一种药物组合物，其包含：如权利要求1至10中任一项定义的化合物、其对映异构体、非对映异构体或其药学上可接受的盐；及其药学上可接受的载体。

12.权利要求11的药物组合物，其还包含至少一种其他类型的治疗剂。

13.根据权利要求1-10中任一项的化合物、其对映异构体、非对映异构体或其药学上可接受的盐在制造用于治疗以下疾病的药剂中的用途：糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐量减低、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、视网膜病变、神经病、肾病、伤口愈合延迟、动脉粥样硬化及其后遗症、心功能异常、心肌缺血、中风、代谢综合征、高血压、肥胖症、血脂异常、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL、高LDL、非心脏局部缺血、感染、癌症、血管再狭窄、胰腺炎、神经退行性疾病、脂质障碍、认知损害和痴呆、骨病、HIV蛋白酶相关脂肪营养不良、或青光眼。

14.根据权利要求1-10中任一项的化合物、其对映异构体、非对映异构体或其药学上可接受的盐，用于在治疗以下疾病的疗法中使用：糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐量减低、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、视网膜病变、神经病、肾病、伤口愈合延迟、动脉粥样硬化及其后遗症、心功能异常、心肌缺血、中风、代谢综合征、高血压、肥胖症、血脂异常、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL、高LDL、非心脏局部缺血、感染、癌症、血管再狭窄、胰腺炎、神经退行性疾病、脂质障碍、认知损害和痴呆、骨病、HIV蛋白酶相关脂肪营养不良、或青光眼。