CN109699494B - 培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 - Google Patents
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109699494B CN109699494B CN201910051546.2A CN201910051546A CN109699494B CN 109699494 B CN109699494 B CN 109699494B CN 201910051546 A CN201910051546 A CN 201910051546A CN 109699494 B CN109699494 B CN 109699494B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- sargassum thunbergii
- metal ions
- culturing
- wastewater
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000593522 Sargassum thunbergii Species 0.000 title claims abstract description 100
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 26
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 28
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 claims description 37
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 27
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 23
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 13
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 11
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 10
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 claims description 8
- VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N methyl anthranilate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1N VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 88755TAZ87 Chemical compound NCC(=O)CCC(O)=O ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960002749 aminolevulinic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 6
- 239000011651 chromium Substances 0.000 claims description 6
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 6
- 239000011133 lead Substances 0.000 claims description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 claims description 5
- WLZRMCYVCSSEQC-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+) Chemical compound [Cd+2] WLZRMCYVCSSEQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 claims description 5
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 claims description 5
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 claims description 5
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229940102398 methyl anthranilate Drugs 0.000 claims description 4
- 229960002901 sodium glycerophosphate Drugs 0.000 claims description 4
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 claims description 4
- REULQIKBNNDNDX-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3-dihydroxypropyl hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OCC(O)COP(O)([O-])=O REULQIKBNNDNDX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 3
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 claims description 2
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 claims description 2
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 abstract description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000004712 air sac Anatomy 0.000 abstract description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 abstract 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 42
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 25
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 23
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Chemical group 0.000 description 8
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 8
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 8
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 6
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 5
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 5
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 4
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 4
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 4
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 4
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 1-ethenylpyrrolidin-2-one;molecular iodine Chemical compound II.C=CN1CCCC1=O CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000153 Povidone-iodine Polymers 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 2
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- RVPVRDXYQKGNMQ-UHFFFAOYSA-N lead(2+) Chemical compound [Pb+2] RVPVRDXYQKGNMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000000442 meristematic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 2
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 229960001621 povidone-iodine Drugs 0.000 description 2
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000033458 reproduction Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 2
- 230000014639 sexual reproduction Effects 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000965254 Apostichopus japonicus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 1
- 241000195522 Fucales Species 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 description 1
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 description 1
- 241000195475 Sargassaceae Species 0.000 description 1
- 241000195474 Sargassum Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000009388 chemical precipitation Methods 0.000 description 1
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000005868 electrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000008113 selfheal Nutrition 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021655 trace metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
Landscapes
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明提供培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，属于海洋生物技术领域，包括提供经消毒、暂养的固着器形成的外植体，然后将外植体在间歇式辐照条件下培育出不定芽，再将不定芽在流动养殖和驯化培养结合的条件下进行扩繁培育；上述辐照条件包括电磁波。本发明提供的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法能获得细胞中可溶性糖含量增加、抗逆性和移栽成活率提高、附着能力和金属离子耐受力增强、可提前长出气囊和生殖托的鼠尾藻幼苗，在培育中，外植体能形成丝状体及细胞簇，继而发育成侧枝较多的芽苗，增加不定芽生成率且产苗量大，可长期进行种质保存和循环培养，不用采集野生藻株，减小工作成本，实现人工大量繁殖培育的目的。
Description
技术领域
本发明属于海洋生物技术领域，具体涉及培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法。
背景技术
在我国，废水的排放量随着工业化水平的快速提高而日益增加，由此产生了严重的环境污染问题。重金属是造成环境污染问题的重要原因之一，当重金属进入到环境中，是不能被生物降解为无害物质的，同时水中的悬浮颗粒通过对重金属离子的吸附和沉淀作用，使得水体重金属长期污染就此产生。更有甚者，存在于生物体内的重金属经过累积、富集，还参与生物圈循环，危害人体健康，是对生态环境危害极大的一类污染物。水体重金属污染已经成为了全社会关注的一个世界性的的环境问题。现阶段，解决水体重金属污染的方法主要有离子交换法、电解法和化学沉淀法等，这些方法多为传统方法，无法对低浓度重金属废水进行有效的处理，且有成本高的弊端，更容易再次形成污染。因此，我们需要一种高效、廉价的重金属处理方法。生物吸附技术是处理工业污染废水的新技术，它以各种生物吸附废水中的重金属离子，效果较好，价格相对便宜，而且针对低浓度水体重金属污染有着良好的处理效果，这已经成为人们日益关注其发展的缘由。
鼠尾藻，隶属于褐藻门，圆子纲，墨角藻目，马尾藻科，马尾藻属。主要分布潮间带，为优势种，北起辽东半岛南至雷州半岛均有分布。鼠尾藻的用途主要有以下几个方面：1、鼠尾藻营养丰富，是刺参人工育苗和养殖中不可替代的优质饵料；2、鼠尾藻含有丰富的海藻多糖、甘露醇、碘、钾、镁、锰、锌、磷、钙、硒等营养成分及多种活性物质，因此表现出促进动物生长孕育、提高增重率、降低饲料系数等功效，可作为海藻粉原料用于饲料中；3、利用藻类细胞壁的粘性，以及多糖、蛋白质和脂类等多种官能团所带的负电荷，与金属离子相结合，并且藻类细胞膜具有高选择性和半透过性的特征，这种膜具有良好的吸附重金属离子的能力，因此藻类可作为生物吸附剂用于吸附废水中的重金属离子。
鼠尾藻雌雄异株，其自然繁殖方式有两种：有性繁殖和营养繁殖，以固着器再生植株的营养繁殖方式为主，有性繁殖为辅，共同维系种群的繁茂。没有一般藻类植物的世代交替，缺少配子体阶段。鼠尾藻的有性繁殖季节性特别强，因此很难采用人为控制其有性生殖节奏的方式大量生产幼苗。脱落主枝后的固着器仍然可以萌发形成新的主枝，这种营养的繁殖方式为我们实施多茬养殖提供方便。然而，现有的鼠尾藻养殖技术需要带有固着器的整株藻类，因此，鼠尾藻的人工繁殖用苗需要全部从自然界中获得，大量的夹苗养殖给自然生态系统带来了巨大的破坏作用。由于鼠尾藻具有较高的价值，大量的野生苗被采集直接用于饲料加工或工业原料。现在，已经很难在潮间带区域发现较大面积的野生鼠尾藻。因此，我们急需一种新的鼠尾藻繁育方式，这种方式可以长期大量生产藻苗并给自然环境带来较少的压力。组织培养技术被越来越多地应用于植物的育苗研究，而且效果明显，因而，采用组织培养的方式来繁殖经济藻类幼苗，对海洋生物技术的发展具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种外植体额外形成丝状体及细胞簇，不定芽生成率高且侧枝繁多的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，所得鼠尾藻幼苗细胞中可溶性糖含量增加，抗逆性和移栽成活率提高，附着能力和金属离子耐受力增强，植株可提前长出气囊和生殖托。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，包括，提供外植体，然后将外植体在辐照条件下培育出不定芽，再将不定芽进行扩繁培育；上述辐照条件包括电磁波。该方法通过组织培养，可完成鼠尾藻苗种的规模化培育，且由于培育过程中细胞周期蛋白相关基因表达量增加，形成了侧枝较多的芽苗，且对幼苗在附着基上的附着能力和对重金属离子的耐受力都进行了强化培育，进而获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株。
作为优选，植体由鼠尾藻固着器制备。鼠尾藻是多年生的大型海藻，附着在岩礁上的固着器可以不断地萌发出新的藻体，成簇的幼嫩的新枝在固着器上生长出来，因此固着器是鼠尾藻的生长点，具有强大的分生能力，因此被选取作为组织培养的外植体来源。
进一步优选，固着器使用前，消毒并暂养于抗生素培养液中2～3天；暂养温度为18～22℃，光照强度为1000～1500lx，光照周期为明:暗＝14:10h。消毒处理用消毒剂具有烧蚀性，在杀灭细菌的同时，也会作用于正常的细胞组织，影响正常细胞的成长或再生，所以外植体消毒后要对组织细胞进行暂养，以清除残留的具有杀伤力的消毒剂，保证后续培养用组织细胞生长活性处于较高水平。
再进一步优选，抗生素培养液中包括0.1～0.2g链霉素、10～20mg新霉素和0.5～1.5mg制霉菌素。向暂养培养液中添加抗生素，可以使得组织细胞在暂养过程中仍然处于无菌状态，避免外植体被污染。
作为优选，外植体培育不定芽的条件如下：温度为13～18℃，光照强度为4000～6000lx，光照周期为明:暗＝14:10h，培养基每隔4周更换一次，培育2～4个月。在上述条件下，外植体中处于分化状态的细胞处于分裂状态，细胞体积随着再生分化速不断增大，继而分化为胚性细胞，促进分化基因的表达，从而使细胞朝着器官分化的方向发展，在较短时间内形成不定芽。
作为优选，电磁波为60Co-γ射线，辐照剂量为10～15Gy。60Co-γ射线具有很强的穿透性，是一种高能电磁波，在再生分化阶段对处于分化状态的细胞进行辐照，外植体除了形成透明愈伤组织以外，射线对部分细胞形成创伤，并促进和增加细胞周期蛋白相关基因的表达，打破了细胞的正常分化周期，在表层细胞上分化形成丝状体，这种丝状体容易游离并形成细胞簇，继而发育成侧枝较多的芽苗，扩大不定芽生成率，有利于后期芽苗生根后，分离出更多幼苗，实现人工大量繁殖培育的目的。
进一步优选，辐照是在开始培育阶段和每次更换完培养基后立即进行。这种间隔式辐照对细胞在不同阶段的特异性分化起促进作用，辐照间隙有利于形成创伤的细胞进行自愈，部分自愈形成愈伤组织，而部分则进行丝状体分化。
作为优选，不定芽进行扩繁培育采用流动养殖和驯化培养相结合的方式。扩繁培育可诱导不定芽生根，通过物理和化学条件的刺激，植物体内生物酶的活性发生变化，诱导根部细胞再生，促使植物快生根、多生根，不定芽发育形成幼苗，继而长成完整的植株，完成培育。
进一步优选，流动养殖中所用无菌海水的流速为0.5～1.5m/s，水深40～80cm。在流水刺激下，鼠尾藻生长迅速，保证苗种粗壮，且能提前长出气囊和生殖托，有利于后期扩大生产规模，流动养殖还可以使鼠尾藻芽苗适应流水的冲击，在移栽后可以牢固地附着在附着基上，适应潮汐冲击。
进一步优选，驯化培养是向所用无菌海水中添加浓度总计为0.01～0.1mmol/L的重金属离子溶液，对鼠尾藻进行驯化；上述重金属离子选自铜、铬、铅、镉离子中的至少一种。鼠尾藻可利用其生物吸附能力对重金属离子进行吸附和去除，在培育阶段用微量重金属离子对幼苗进行驯化，可通过驯化获得具有更高耐受力的苗种，以此获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株。
本发明的有益效果为：
1)本发明中在无菌的条件下，对鼠尾藻固定器形成的外植体直接诱导并形成愈伤组织以及不定芽，继而进行驯化式扩繁培育，进而获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株，完成植物的培养和繁殖；
2)本发明中利用电磁波间歇式辐照外植体，诱导细胞进行自愈而形成愈伤组织，同时促进和增加细胞周期蛋白相关基因的表达，在表层细胞上分化形成丝状体，继而发育成侧枝较多的芽苗，增加不定芽生成率，后期可分离出更多幼苗，实现人工大量繁殖培育的目的；
3)本发明中不定芽扩繁培育用流动养殖和驯化培养的结合方式，有利于植株提前长出气囊和生殖托，还可以使鼠尾藻芽苗增加其在附着基上的附着力，提高苗种对重金属离子的耐受力，增强植物的抗逆性，获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株；
4)本发明中鼠尾藻的培育方法产苗量大，可长期进行种质保存，后期可进行循环培养，不用采集野生藻株，减小工作成本，对生态环境保护起到积极作用。
本发明采用了上述技术方案提供培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
附图说明
图1为实施例9中辐照形成的丝状体在显微镜下的结构示意图；
图2为实施例9中丝状体形成的细胞团在显微镜下的结构示意图；
图3为实施例10中鼠尾藻幼苗体内生化组成成分及含量测定的示意图。
附图标记说明：图1中标尺＝10μm；图2中标尺＝10μm。
具体实施方式
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：
本发明中抗生素培养液还包括以下成分：350mg硝酸钠、50mg甘油磷酸钠、25ml铁与EDTA的1:1摩尔比混合液、500mg Tris、100μg碘化钾，用高压灭菌海水定容到100ml。
本发明中外植体培育不定芽用培养基包括以下成分：350mg硝酸钠、50mg甘油磷酸钠、25ml铁与EDTA的1:1摩尔比混合液、10μg维生素B12、0.5mg硫胺、5μg生物素、500mg Tris，用高压灭菌海水定容到100ml。
本发明中高压灭菌海水制备步骤如下：将海水过滤后，在0.1～0.2MPa压力下，灭菌20～40min，冷却即得。
实施例1：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，包括，提供外植体，然后将外植体在辐照条件下培育出不定芽，再将不定芽进行扩繁培育；上述辐照条件包括电磁波。该方法通过组织培养，可完成鼠尾藻苗种的规模化培育，且由于培育过程中细胞周期蛋白相关基因表达量增加，形成了侧枝较多的芽苗，且对幼苗在附着基上的附着能力和对重金属离子的耐受力都进行了强化培育，进而获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株。
植体由鼠尾藻固着器制备。鼠尾藻是多年生的大型海藻，附着在岩礁上的固着器可以不断地萌发出新的藻体，成簇的幼嫩的新枝在固着器上生长出来，因此固着器是鼠尾藻的生长点，具有强大的分生能力，因此被选取作为组织培养的外植体来源。
固着器使用前，消毒并暂养于抗生素培养液中2天；暂养温度为18℃，光照强度为1000lx，光照周期为明:暗＝14:10h。消毒处理用消毒剂具有烧蚀性，在杀灭细菌的同时，也会作用于正常的细胞组织，影响正常细胞的成长或再生，所以外植体消毒后要对组织细胞进行暂养，以清除残留的具有杀伤力的消毒剂，保证后续培养用组织细胞生长活性处于较高水平。
抗生素培养液中包括0.1g链霉素、10mg新霉素和0.5mg制霉菌素。向暂养培养液中添加抗生素，可以使得组织细胞在暂养过程中仍然处于无菌状态，避免外植体被污染。
外植体培育不定芽的条件如下：温度为16℃，光照强度为4000lx，光照周期为明:暗＝14:10h，培养基每隔4周更换一次，培育4个月。在上述条件下，外植体中处于分化状态的细胞处于分裂状态，细胞体积随着再生分化速不断增大，继而分化为胚性细胞，促进分化基因的表达，从而使细胞朝着器官分化的方向发展，在较短时间内形成不定芽。
电磁波为60Co-γ射线，辐照剂量为10Gy。60Co-γ射线具有很强的穿透性，是一种高能电磁波，在再生分化阶段对处于分化状态的细胞进行辐照，外植体除了形成透明愈伤组织以外，射线对部分细胞形成创伤，并促进和增加细胞周期蛋白相关基因的表达，打破了细胞的正常分化周期，在表层细胞上分化形成丝状体，这种丝状体容易游离并形成细胞簇，继而发育成侧枝较多的芽苗，扩大不定芽生成率，有利于后期芽苗生根后，分离出更多幼苗，实现人工大量繁殖培育的目的。
辐照是在开始培育阶段和每次更换完培养基后立即进行。这种间隔式辐照对细胞在不同阶段的特异性分化起促进作用，辐照间隙有利于形成创伤的细胞进行自愈，部分自愈形成愈伤组织，而部分则进行丝状体分化。
不定芽进行扩繁培育采用流动养殖和驯化培养相结合的方式。扩繁培育可诱导不定芽生根，通过物理和化学条件的刺激，植物体内生物酶的活性发生变化，诱导根部细胞再生，促使植物快生根、多生根，不定芽发育形成幼苗，继而长成完整的植株，完成培育。
流动养殖中所用无菌海水的流速为0.5m/s，水深40cm。在流水刺激下，鼠尾藻生长迅速，保证苗种粗壮，且能提前长出气囊和生殖托，有利于后期扩大生产规模，流动养殖还可以使鼠尾藻芽苗适应流水的冲击，在移栽后可以牢固地附着在附着基上，适应潮汐冲击。
驯化培养是向所用无菌海水中添加浓度总计为0.1mmol/L的重金属离子溶液，对鼠尾藻进行驯化；上述重金属离子重金属离子为铜、铬、铅、镉离子等量混合。鼠尾藻可利用其生物吸附能力对重金属离子进行吸附和去除，在培育阶段用微量重金属离子对幼苗进行驯化，可通过驯化获得具有更高耐受力的苗种，以此获得吸附和去除能力更强的鼠尾藻幼苗及植株。
实施例2：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，具体步骤如下：
1)取鼠尾藻固着器清洗后，用体积浓度为80％的酒精消毒15s，然后用体积浓度为2％的聚维酮碘溶液消毒15s，再用体积浓度为2％的次氯酸钠溶液消毒15min，用灭菌海水冲洗，然后置于包括0.2g链霉素、20mg新霉素和1.5mg制霉菌素的抗生素培养液中，于温度22℃、光照强1500lx、光照周期明:暗＝14:10h的条件下暂养2天；
2)在超净工作台里，将固着器从抗生素培养液中取出，用灭菌海水冲洗干净，然后转移到灭菌的表面皿，用刀将固着器外周被漂白了的表皮切去，将中心部分切成2mm3大小的块状，即得固着器外植体；
3)将固着器外植体置于培育不定芽用培养基中，用辐照剂量为15Gy的60Co-γ射线照射，然后于温度18℃、光照强度6000lx、光照周期明:暗＝14:10h的条件下培育3.5个月，培养基每隔4周更换一次，每次更换完培养基后立即用辐照剂量为15Gy的60Co-γ射线照射，可得不定芽；
4)将不定芽固定在砖块附着基上，用流速为1.5m/s、深度为80cm的无菌海水流动养殖，上述无菌海水中添加浓度总计为0.1mmol/L的重金属离子溶液，对鼠尾藻进行驯化培育，重金属离子为铜、铬、铅、镉离子等量混合，上述养殖温度为20℃，采用普通日光照射。
实施例3：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，具体步骤如下：
1)取鼠尾藻固着器清洗后，用体积浓度为80％的酒精消毒15s，然后用体积浓度为2％的聚维酮碘溶液消毒15s，再用体积浓度为2％的次氯酸钠溶液消毒15min，用灭菌海水冲洗，然后置于包括0.15g链霉素、15mg新霉素和0.5mg制霉菌素的抗生素培养液中，于温度20℃、光照强度1500lx、光照周期明:暗＝14:10h的条件下暂养3天；
2)在超净工作台里，将固着器从抗生素培养液中取出，用灭菌海水冲洗干净，然后转移到灭菌的表面皿，用刀将固着器外周被漂白了的表皮切去，将中心部分切成2mm3大小的块状，即得固着器外植体；
3)将固着器外植体置于培育不定芽用培养基中，用辐照剂量为12Gy的60Co-γ射线照射，然后于温度16℃、光照强度5000lx、光照周期明:暗＝14:10h的条件下培育3个月，培养基每隔4周更换一次，每次更换完培养基后立即用辐照剂量为12Gy的60Co-γ射线照射，可得不定芽；
4)将不定芽固定在砖块附着基上，用流速为1m/s、深度为60cm的无菌海水流动养殖，上述无菌海水中添加浓度总计为0.08mmol/L的重金属离子溶液，对鼠尾藻进行驯化培育，重金属离子为铜、铬、铅、镉离子等量混合，上述养殖温度为18℃，采用普通日光照射。
实施例4：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，与实施例3不同之处在于：步骤4)中所用无菌海水中还包括0.03mM的氨茴酸甲酯和0.07mM的5-氨基酮戊酸，上述5-氨基酮戊酸被鼠尾藻吸收后，可参与叶绿素a的合成和积累过程中，有利于鼠尾藻光合作用进行，另外5-氨基酮戊酸和氨茴酸甲酯协同作用，促进鼠尾藻体内果聚糖合成酶的相关表达，使得鼠尾藻幼苗中可溶性糖含量升高，而可溶性糖含量的增加，使得鼠尾藻幼苗在渗透压改变的环境下，仍能维持细胞内的正常水分，具有渗透调节作用，以此增强植物的抗逆性，有利于提高幼苗的移栽成活率。其他步骤与实施例3中一致。
实施例5：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，与实施例3不同之处在于：步骤3)中未使用60Co-γ射线进行辐照培养。其他步骤与实施例3中一致。
实施例6：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，与实施例3不同之处在于：步骤4)中未使用无菌海水进行流动养殖，仅采用驯化培养的方式对不定芽进行扩繁培育。其他步骤与实施例3中一致。
实施例7：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，与实施例3不同之处在于：步骤4)中未使用重金属离子的驯化培养，仅采用无菌海水流动养殖的方式对不定芽进行扩繁培育。其他步骤与实施例3中一致。
实施例8：
培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，与实施例3不同之处在于：步骤4)的具体步骤为：将不定芽固定在砖块附着基上，用深度为60cm的无菌海水在温度为18℃、普通日光照射的条件下静态养殖扩繁。其他步骤与实施例3中一致。
实施例9：
鼠尾藻外植体在培养基中的形态学变化
取实施例3中经辐照后的外植体，用荧光倒置显微镜在明视场下直接观察，并对外植体中形成的丝状体和丝状体形成的细胞团进行拍照，如附图1、2。
实施例10：
鼠尾藻幼苗体内生化组成成分及含量测定
分别取实施例3和实施例4中扩繁培育4个月后的鼠尾藻植株，统一选取植株叶片，并对叶片细胞中的叶绿素和可溶性糖含量进行测定，测定结果如附图3所示。
结果说明，叶绿素和可溶性糖含量均有所增加，叶绿素含量增加量较小，是由于叶绿素合成过程较复杂，同时也会受到光合作用的影响，因此变化不显著；可溶性糖含量增加显著，说明实施例4中添加的5-氨基酮戊酸和氨茴酸甲酯增益作用明显，有利于增强植物的抗逆性，提高幼苗的移栽成活率。
实施例11：
鼠尾藻对重金属离子的吸附试验
分别取实施例3～8所得鼠尾藻幼苗，附着在相同附着基上，置于pH为6的金属离子混合溶液中，上述混合溶液中的包括浓度分别为800mg/L、1000mg/L、500mg/L、800mg/L的铜、铬、铅、镉离子，鼠尾藻幼苗的投放量为20g/L，在鼠尾藻投放60min后，对溶液进行测定，其结果如下表1。
表1鼠尾藻对重金属离子的吸附试验
| Cu<sup>2+</sup>吸附率％ | Cr<sup>2+</sup>吸附率％ | Pb<sup>2+</sup>吸附率％ | Cd<sup>2+</sup>吸附率％ | |
| 实施例3 | 92.5 | 97.6 | 94.3 | 98.3 |
| 实施例4 | 93.6 | 97.3 | 94.6 | 98.4 |
| 实施例5 | 91.7 | 95.4 | 90.6 | 96.1 |
| 实施例6 | 91.8 | 95.6 | 91.2 | 96.3 |
| 实施例7 | 86.5 | 90.3 | 83.1 | 90.1 |
| 实施例8 | 87.6 | 90.4 | 82.6 | 90.5 |
由上表可知，实施例3和4的幼苗对重金属离子吸附效果最好，且两组结果差异不明显；实施例5和6的幼苗对重金属离子吸附效果次之，且两组结果差异不明显，说明辐照和流水养殖对鼠尾藻的吸附能力产生了间接影响；实施例7和8的幼苗对重金属离子吸附效果最差，且两组结果差异不明显，说明培育期间使用微量金属离子对幼苗进行驯化，有利于废水中高浓度金属离子的吸附和去除。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。
Claims (5)
1.培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，其特征在于：提供外植体，然后将所述外植体在辐照条件下培育出不定芽，再将所述不定芽进行扩繁培育；所述辐照条件包括电磁波；
所述外植体培育不定芽的条件如下：温度为13～18℃，光照强度为4000～6000lx，光照周期为明:暗＝14:10h，培养基每隔4周更换一次，培育2～4个月；
所述电磁波为60Co-γ射线；所述辐照剂量为10～15Gy；
所述外植体由鼠尾藻固着器制备；
所述辐照是在开始培育阶段和每次更换完培养基后立即进行；
所述不定芽进行扩繁培育采用流动养殖和驯化培养相结合的方式；
所述驯化培养是向所用无菌海水中添加浓度总计为0.01～0.1mmol/L的重金属离子溶液，对鼠尾藻进行驯化；所述重金属离子选自铜、铬、铅、镉离子中的至少一种；
所述外植体培育不定芽用培养基成分为：350mg硝酸钠、50mg甘油磷酸钠、25ml铁与EDTA的1:1摩尔比混合液、10μg维生素B12、0.5mg硫胺、5μg生物素、500mg Tris，用高压灭菌海水定容到100ml。
2.根据权利要求1述的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，其特征在于：所述固着器使用前，消毒并暂养于抗生素培养液中2～3天；所述暂养温度为18～22℃，光照强度为1000～1500lx，光照周期为明:暗＝14:10h。
3.根据权利要求2所述的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，其特征在于：所述抗生素培养液成分为：350mg硝酸钠、50mg甘油磷酸钠、25ml铁与EDTA的1:1摩尔比混合液、500mg Tris、100μg碘化钾，用高压灭菌海水定容到100ml；其中抗生素为0.1～0.2g链霉素、10～20mg新霉素和0.5～1.5mg制霉菌素。
4.根据权利要求1所述的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，其特征在于：所述流动养殖中无菌海水的流速为0.5～1.5m/s，水深40～80cm。
5.根据权利要求4所述的培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法，其特征在于：所述无菌海水中还包括0.03mM的氨茴酸甲酯和0.07mM的5-氨基酮戊酸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910051546.2A CN109699494B (zh) | 2019-01-21 | 2019-01-21 | 培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910051546.2A CN109699494B (zh) | 2019-01-21 | 2019-01-21 | 培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109699494A CN109699494A (zh) | 2019-05-03 |
| CN109699494B true CN109699494B (zh) | 2021-12-14 |
Family
ID=66262183
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910051546.2A Active CN109699494B (zh) | 2019-01-21 | 2019-01-21 | 培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109699494B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112640773B (zh) * | 2020-12-21 | 2021-12-07 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种鼠尾藻新生枝的消毒处理方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101422134B (zh) * | 2007-10-29 | 2011-05-04 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 组织培养叶片法大量繁育鼠尾藻幼苗的方法 |
| JP5779677B2 (ja) * | 2013-02-04 | 2015-09-16 | 昭和電工株式会社 | 植物栽培方法及び植物栽培装置 |
| CN105993907B (zh) * | 2016-06-21 | 2020-02-07 | 山东省海洋生物研究院 | 一种鼠尾藻的采苗方法及其早期培育方法 |
-
2019
- 2019-01-21 CN CN201910051546.2A patent/CN109699494B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109699494A (zh) | 2019-05-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1218626C (zh) | 一种改进的培养海藻的方法 | |
| CN107094625B (zh) | 一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法 | |
| CN104920201B (zh) | 一种海带苗种培育方法 | |
| CN101116424A (zh) | 高效诱导培养百合小鳞茎的方法 | |
| CN1736176A (zh) | 一种鼠尾藻苗种生产技术 | |
| EP0380692B1 (en) | Plant tissue culture process | |
| CN109699494B (zh) | 培育用于吸附废水中金属离子的鼠尾藻的方法 | |
| CN108935087B (zh) | 一种云锦杜鹃多倍体的培育方法 | |
| CN102577690A (zh) | 一种促进苦草种子萌发与生长的方法 | |
| CN104663439B (zh) | 一种伊乐藻组织培养与快速繁殖方法 | |
| CN105850736A (zh) | 一种仙茅人工种子的制作方法 | |
| CN111802248A (zh) | 一种黄草乌胚状体的诱导培养方法 | |
| Chandimali et al. | Seaweed callus culture: A comprehensive review of current circumstances and future perspectives | |
| CN111448987B (zh) | 一种获得海带丝状体的组织培养方法及其应用 | |
| CN115029294A (zh) | 一种桫椤孢子无菌繁殖的方法 | |
| CN101422134B (zh) | 组织培养叶片法大量繁育鼠尾藻幼苗的方法 | |
| CN114521489A (zh) | 一种秋水仙素变温诱导柳树染色体加倍的方法 | |
| CN109548655B (zh) | 苦郎树的组织培养方法 | |
| CN102160524A (zh) | 一种卡帕藻属海藻原生质体分离培养和再生植株的方法 | |
| CN115568418B (zh) | 一种箭叶淫羊藿优株块根无性快繁的育苗方法 | |
| CN104041405A (zh) | 一种快速筛选高产海带品系的新方法 | |
| CN117089509B (zh) | 一种槲蕨孢子诱导原叶体的组培培养基和方法及应用 | |
| CN108617561A (zh) | 一种提高马氏珠母贝植核贝留核率和优质珠率的方法 | |
| CN116034873B (zh) | 一种柽柳组织快繁方法 | |
| CN114097831B (zh) | 一种增强抗逆能力的组合物及其在黄瓜种植中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |