CN109652326B - 一株副干酪乳杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株副干酪乳杆菌及其应用,属于微生物以及微生物发酵技术领域。本发明从牦牛乳制品中分离筛选出了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),此副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)产2,3‑丁二酮能力强,发酵24h后,2,3‑丁二酮产量可高达为759μg/kg;将此副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)应用于酸奶油的制备,可显著增强酸奶油的奶香味,提高酸奶油的市场竞争力。
Description
技术领域
本发明涉及一株副干酪乳杆菌及其应用,属于微生物以及微生物发酵技术领域。
背景技术
酸奶油是指以稀奶油为原料,经纯乳酸菌发酵剂发酵后通过进一步加工制成的一种乳制品,其表面光亮,质地均匀,具有独特的酸香味,且营养丰富,即可直接食用,又是西餐的理想配料,在各年龄层次的消费者中均有广阔的市场。
有研究表明,影响消费者购买酸奶油的主要因素依次为风味、价格、可用性和品牌,而Shepard等人(L.shepard,R.E.miracle,et al.Relating sensory and chemicalproperties of sour cream to consumer acceptance[J].Journal of dairy science,2013,96(9):5435-5454.)则通过研究发现,酸奶油中的奶香味受到消费者的偏爱。
目前已知,影响酸奶油风味的主要物质是2,3-丁二酮、乙酸和丁酸等,其中,2,3-丁二酮是奶香味的主要贡献者;而用GC-MS检测32种市售酸奶油中的2,3-丁二酮的含量,测得的结果为,2,3-丁二酮普遍含量在0.45~130μg/kg之间,其中,只有3种市售酸奶油中含量较高,分别为164μg/kg、172μg/kg、261μg/kg,因此,现有的市售酸奶油中2,3-丁二酮含量普遍较低,高2,3-丁二酮含量的奶香风味酸牛奶在市场上仍然存在空缺。
发明内容
为解决上述问题,本发明从牦牛发酵乳中分离筛选出了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),此副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)产2,3-丁二酮能力强,发酵24h后,2,3-丁二酮产量可高达为759μg/kg;将此副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)应用于酸奶油的制备,可显著增强酸奶油的奶香味,提高酸奶油的市场竞争力。
本发明的技术方案如下:
本发明提供了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)已于2017年04月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.14023,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)是从我国四川阿坝自治州的牦牛发酵乳中分离得到的,该菌株经MRS培养基分离、纯化,革兰氏染色,过氧化氢酶鉴定,PCR扩增,凝胶电泳和测序分析,其16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示,将该序列在GenBank中进行比对,结果显示菌株与副干酪乳杆菌的同源性为100%,故判定菌株为副干酪乳杆,命名为鼠李糖乳杆菌副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)经培养,杆状,白色,表明光滑湿润,边缘整齐,突起的菌落;产2,3-丁二酮能力强,降低pH和产酸能力弱。
本发明提供了上述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)在制备食品、药品方面的应用。
本发明提供了一种酸奶油的制备方法,所述方法为使用上述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
在本发明的一种实施方式中,所述方法为将稀奶油经均质、巴氏杀菌后冷却,得到稀奶油原料;在稀奶油原料中接种权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)菌液作为发酵剂进行发酵,得到酸奶油。
在本发明的一种实施方式中,所述稀奶油的脂肪含量为18%~30%。
在本发明的一种实施方式中,所述稀奶油的脂肪含量为20%。
在本发明的一种实施方式中,所述均质的条件为压强12MPa~21MPa、温度40℃~85℃。
在本发明的一种实施方式中,所述均质的条件为压强18MPa、温度60℃。
在本发明的一种实施方式中,所述巴士杀菌的条件为温度74℃~82℃、时间30min或温度85℃~90℃、时间25~60s。
在本发明的一种实施方式中,所述巴士杀菌的条件为温度79℃、时间30min。
在本发明的一种实施方式中,所述冷却为冷却至21℃~30℃。
在本发明的一种实施方式中,所述冷却为冷却至26℃。
在本发明的一种实施方式中,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液的活菌数不低于109cfu/mL。
在本发明的一种实施方式中,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液的接种量为稀奶油原料体积的0.5%~3%。
在本发明的一种实施方式中,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液的接种量为稀奶油原料体积的2%。
在本发明的一种实施方式中,所述发酵的条件为温度20℃~30℃、时间16h~20h。
在本发明的一种实施方式中,所述发酵的条件为温度21℃、时间24h。
在本发明的一种实施方式中,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
在本发明的一种实施方式中,所述发酵终点为可滴定酸度0.8、pH 4.5。
在本发明的一种实施方式中,所述方法还包含待酸奶油发生凝乳后,将酸奶油于3℃~5℃下放置24h~48h。
在本发明的一种实施方式中,所述方法还包含待酸奶油发生凝乳后,将酸奶油于4℃下放置36h。
本发明提供了应用上述一种酸奶油的制备方法制备得到的酸奶油。
本发明提供了上述一种酸奶油的制备方法在制备食品方面的应用。
有益效果:
(1)本发明从牦牛发酵乳中分离筛选出了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei),此副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)产2,3-丁二酮能力强,发酵24h后,2,3-丁二酮产量可高达为759μg/kg;
(2)将本发明的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)应用于酸奶油的制备,可显著增强酸奶油的奶香味,提高酸奶油的市场竞争力;
(3)本发明的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)为可用于食品的安全菌株,用此菌株发酵生产酸奶油,安全健康。
生物材料保藏
一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),分类学命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),已于2017年04月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.14023,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
附图说明
图1:副干酪乳杆菌CGMCC No.14023发酵过程中的pH变化;
图2:副干酪乳杆菌CGMCC No.14023发酵过程中的可滴定酸度变化;
图3:添加副干酪乳杆菌CGMCC No.14023的酸奶油的感官评定结果;
具体实施方式
本发明的实施例仅作为本发明内容的进一步说明,不能作为本发明的限定内容或范围。
下述实施例中涉及的培养基如下:
MRS液体培养基:称取蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,葡萄糖20g,无水乙酸钠2g,MgSO4.7H2O 0.5g,MnSO4.H2O 0.25g,柠檬酸氢二铵2g,K2HPSO4.3H2O,吐温80 1mL溶于1L去离子水中,115℃灭菌20min。
下述实施例中涉及的检测方法如下:
2,3-丁二酮含量检测(GC-MS法):
气谱条件为:Rtx-WAX毛细管柱;柱子规格:30m×0.25mm×0.25mm,进口温度为250℃,分流比5,柱流速1mL/min,载气为氦气;程序升温:初始温度40℃,保持3min;10℃/min升温至90℃;5℃/min升温至200℃,保持5分钟。
质谱条件为:离子化方式EI,发射能量为70eV,发射电流为200μA,检测器电压为1.4kV,离子源温度250℃,接口温度230℃,四级杆温度:150℃,质荷比30~500。化合物检索结果与NIST和Varian2个标准谱库进行匹配,相似度达到80%以上确认为目的化合物。
以10μL的0.2mg/mL癸酸乙酯为内标,计算2,3-丁二酮含量。
可滴定酸度检测方法:
参照国标GB 5009.239-2016:称取10g(精确到0.01g)混匀的酸奶油,置于250mL的锥形瓶中,加30mL中性乙醇-乙醚混合液,混匀,加入2.0mL酚酞指示液,混匀后用0.1000mol/L氢氧化钠标准溶液滴定,边滴边转动烧瓶,直到颜色与参比溶液的颜色相似,且5s内不消退,整个滴定过程在45s内完成;
滴定过程中,向锥形瓶中吹入氮气,防止溶液吸收空气中的二氧化碳;
记录消耗的氢氧化钠标准滴定溶液毫升数(V2),带入公式(1)计算;
试样中的酸度数值以(°T)表示,按下式计算:
X2=(c2×V2×100)/(m2×0.1)……………………………(1)
式中:
X2——试样的酸度,单位为度(°T);
c2——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度,单位为摩尔每升(mol/L);
V2——滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积,单位为毫升(mL);
m2——试样的质量,单位为克(g);
0.1——酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度,单位为摩尔每升(mol/L)。
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。
感官评定法:
以500人为样本,称取实施例中制备得到的酸奶油10g,置于2个透明无味的带盖的30mL塑料品尝杯中,进行气味和滋味感官评定,用无味的一次性塑料勺取滋味感官评定时用的样品。不同的酸奶油样品以随机顺序摆放,感官评定员对酸奶油样品的气味和滋味感官属性进行评分,品尝2个样品的间隙,矿泉水清洗口腔,并用苏打饼干消除奶油的风味和口感,每批提供3~4个样品,每个样品重复两次,每个风味属性的强度用500个人的平均值表示。
感官评定标准:
气味感官评定包括酸味、甜味、蒸煮味、硫味、奶香味、腥味、刺激性味,臭味和果香味,滋味感官包括酸味、甜味、蒸煮味、硫味、奶香味、奶油味、腥味、刺激味、涩味和苦味,打分制为9分,0分代表没有,1-3分代表较弱,4-6分代表中等强度,7-9分代表强烈。
实施例1:本发明菌株的筛选
(1)获得合适的稀释梯度并培养
从四川阿坝自治州传统发酵曲拉样品中称取0.5mL,加入到装有4.5mL无菌水中,然后依次取0.5mL菌液稀释在4.5mL无菌水,使该样品浓度梯度稀释至10-4,取4个稀释度分别为10~104的菌悬液各50μL分别涂布于MRS固体培养基上,在温度37℃下培养46~48h。
(2)分离纯化
用平板划线法,挑选典型单菌落,重复这种培养挑选操作后得到优良性状的菌株,此操作共获得三株菌株,分别为菌株CGMCC No.14023、菌株15M9以及菌株5G2。
(3)革兰氏染色及过氧化氢酶实验
分别挑取上述菌株的单菌落,做革兰氏染色及过氧化氢酶实验,在光学显微镜下观察革兰氏染色结果并记录,将革兰氏阳性、过氧化氢阴性菌平板纯化四代,接种于MRS培养三代后,4000rpm离心5min,于30%甘油管内贮藏。
实施例2:本发明菌株的鉴定
(1)PCR扩增16S rDNA
吸取1mL甘油管内震荡混匀后的液体培养基,离心后弃去上清液,并用1mL无菌水吹打清洗2次后,离心弃去上清液,用作菌落PCR的模板。
a)PCR体系50μL,其中Mix为25μL,27F为1μL,1492R为1μL,ddH2O为23μL。
所用引物为序列如SEQ ID NO.2所示的27F:AGAGTTTGATCCTGGCCTCA和序列如SEQID NO.3所示的1492R:GGTTACCTTGTTACGACTT,扩增片段长度1500bp。
b)PCR条件:
Lid:105℃mBY-16s V:20μL
DNA双链在94℃,10min的条件下变性,94℃,30s后冷却50℃,30s,快速升温至72℃时80s,并循环29次,最后72℃下保持7min。
(2)琼脂凝胶电泳(80mL)
在三角瓶中加入0.8g琼脂糖和80mL 1×TAE,用微波加热,直至澄清后,待稍凉后添加EB染料8μL;加入电泳板冷却半小时,待其凝结成固体胶状;用移液枪将3~5μL的样品打入胶板的小孔内,并在每行末端加一个Marker;插上电极,调电压120V,运行半小时;取出胶板,在UV下曝光10s,保存电泳条带的图像;将得到清晰电泳条带的样品测序。
(3)16S rRNA序列分析鉴定
根据北京六合华大基因科技股份有限公司给出的测序报告,结合BLAST分析工具(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast)将所分离的菌株CGMCC No.14023、菌株15M9以及菌株5G2的16S rRNA序列与GenBank数据库中已知菌株的对应序列进行比较鉴定,经分析鉴定三株菌株均为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
其中,副干酪乳杆菌CGMCC No.14023形态特征呈杆状,白色,表面光滑湿润,边缘整齐,凸起的菌落。
实施例3:本发明菌株的应用
将-80℃保存的副干酪乳杆菌15M9、副干酪乳杆菌5G2以及副干酪乳杆菌CGMCCNo.14023分别接种于MRS液体培养基中,在37℃下培养24h,传代培养2~3次,取菌液80μL接种于顶空气相瓶内(含2mL 20%脂肪的稀奶油),置于20℃下培养24h进行发酵,其间,每隔6h取样,将发酵物样品进行2,3-丁二酮的含量、感官评定、pH以及可滴定酸度检测(2,3-丁二酮的含量检测结果如表1,pH检测结果如表2、图1,可滴定酸度检测结果如表3、图2,感官评定结果见图3)。
由表1可知,副干酪乳杆菌CGMCC No.14023在各个发酵时间段内生产的2,3-丁二酮产量都高于15M9和5G2;24h时,15M9的2,3-丁二酮产量为212.65μg/kg,5G2为47.21μg/kg,副干酪乳杆菌CGMCC No.14023为759.13μg/kg,高于Shepard检测的2,3-丁二酮(261μg/kg),且高于对照菌株15M9和5G2,故副干酪乳杆菌CGMCC No.14023产2,3-丁二酮的能力强。
由表2、图1可知,15M9在24内pH降低到5.45,5G2降到4.45,副干酪乳杆菌CGMCCNo.14023降到5.63,高于15M9和5G2,故副干酪乳杆菌CGMCC No.14023降低pH的能力弱,高产风味物质的同时对产品pH值影响较小。
由表3、图2可知,15M9在24时可滴定酸度达到0.46,5G2达到0.70,副干酪乳杆菌CGMCC No.14023达到0.37%(以乳酸计),低于15M9和5G2,故副干酪乳杆菌CGMCC No.14023产酸能力弱,高产风味物质的同时对产品可滴定酸度值影响较小。
由图3可知,副干酪乳杆菌CGMCC No.14023显著提高了酸奶油的奶香味。
表1不同发酵时间段2,3-丁二酮产量(μg/kg)
菌株 | 6h | 12h | 18h | 24h |
15M9 | 105.83±0.07<sup>b</sup> | 106.68±0.05<sup>b</sup> | 155.16±0.02<sup>b</sup> | 212.65±0.05<sup>a</sup> |
CGMCC No.14023 | 610.37±1.23<sup>c</sup> | 636.82±0.45<sup>c</sup> | 739.09±1.55<sup>c</sup> | 759.13±0.26<sup>b</sup> |
5G2 | 4.73±0.03<sup>a</sup> | 8.86±0.05<sup>a</sup> | 10.83±0.04<sup>a</sup> | 47.21±0.05<sup>c</sup> |
注:不同字母表示同一列间的差异性(P﹤0.05)
表2不同发酵时间段的pH变化(μg/kg)
菌株 | 0h | 6h | 12h | 18h | 24h |
15M9 | 6.45±0.03<sup>a</sup> | 6.20±0.03<sup>b</sup> | 6.02±0.05<sup>b</sup> | 5.76±0.05<sup>b</sup> | 5.45±0.03<sup>b</sup> |
CGMCC No.14023 | 6.45±0.02<sup>a</sup> | 6.25±0.03<sup>c</sup> | 6.15±0.04<sup>c</sup> | 5.96±0.03<sup>c</sup> | 5.63±0.03<sup>c</sup> |
5G2 | 6.45±0.03<sup>a</sup> | 6.12±0.03<sup>a</sup> | 5.86±0.05<sup>a</sup> | 4.90±0.04<sup>a</sup> | 4.45±0.04<sup>a</sup> |
注:不同字母表示同一列间的差异性(P﹤0.05)
表3不同发酵时间段的滴定酸度变化(μg/kg)
菌株 | 0h | 6h | 12h | 18h | 24h |
15M9 | 0.25±0.01<sup>a</sup> | 0.33±0.02<sup>ab</sup> | 0.38±0.03<sup>ab</sup> | 0.41±0.02<sup>b</sup> | 0.46±0.02<sup>b</sup> |
CGMCC No.14023 | 0.25±0.01<sup>a</sup> | 0.32±0.02<sup>a</sup> | 0.33±0.03<sup>a</sup> | 0.34±0.02<sup>a</sup> | 0.37±0.02<sup>a</sup> |
5G2 | 0.25±0.01<sup>a</sup> | 0.49±0.02<sup>c</sup> | 0.65±0.03<sup>c</sup> | 0.68±0.01<sup>c</sup> | 0.70±0.02<sup>c</sup> |
注:不同字母表示同一列间的差异性(P﹤0.05)
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
序列表
<110> 江南大学
<120> 一株副干酪乳杆菌及其应用
<160> 3
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1432
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
ctcgctccct aaaagggtta cgccaccggc ttcgggtgtt acaaactctc atggtgtgac 60
gggcggtgtg tacaaggccc gggaacgtat tcaccgcggc gtgctgatcc gcgattacta 120
gcgattccga cttcgtgtag gcgagttgca gcctacagtc cgaactgaga atggctttaa 180
gagattagct tgacctcgcg gtctcgcaac tcgttgtacc atccattgta gcacgtgtgt 240
agcccaggtc ataaggggca tgatgatttg acgtcatccc caccttcctc cggtttgtca 300
ccggcagtct tactagagtg cccaactaaa tgctggcaac tagtcataag ggttgcgctc 360
gttgcgggac ttaacccaac atctcacgac acgagctgac gacaaccatg caccacctgt 420
cattttgccc ccgaagggga aacctgatct ctcaggtgat caaaagatgt caagacctgg 480
taaggttctt cgcgttgctt cgaattaaac cacatgctcc accgcttgtg cgggcccccg 540
tcaattcctt tgagtttcaa ccttgcggtc gtactcccca ggcggaatgc ttaatgcgtt 600
agctgcggca ctgaagggcg gaaaccctcc aacacctagc attcatcgtt tacggcatgg 660
actaccaggg tatctaatcc tgttcgctac ccatgctttc gagcctcagc gtcagttaca 720
gaccagacag ccgccttcgc cactggtgtt cttccatata tctacgcatt tcaccgctac 780
acatggagtt ccactgtcct cttctgcact caagtttccc agtttccgat gcgcttcctc 840
ggttaagccg agggctttca catcagactt aaaaaaccgc ctgcgctcgc tttacgccca 900
ataaatccgg ataacgcttg ccacctacgt attaccgcgg ctgctggcac gtagttagcc 960
gtggctttct ggttggatac cgtcacgccg acaacagtta ctctgccgac cattcttctc 1020
caacaacaga gttttacgac ccgaaagcct tcttcactca cgcggcgttg ctccatcaga 1080
cttgcgtcca ttgtggaaga ttccctactg ctgcctcccg taggagtttg ggccgtgtct 1140
cagtcccaat gtggccgatc aacctctcag ttcggctacg tatcatcgcc ttggtgagcc 1200
attacctcac caactagcta atacgccgcg ggtccatcca aaagcgatag cttacgccat 1260
ctttcagcca agaaccatgc ggttcttgga tctatgcggt attagcatct gtttccaaat 1320
gttatccccc acttaagggc aggttaccca cgtgttactc acccgtccgc cactcgttcc 1380
atgttgaatc tcggtgcaag caccgatcat caacgagaac tcgttcgact gc 1432
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
agagtttgat cctggcctca 20
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
ggttaccttg ttacgactt 19
Claims (21)
1.一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),其特征在于,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)已于2017年04月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.14023,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.如权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)在制备食品方面的应用。
3.一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述方法为使用权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
4.如权利要求3所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述方法为将稀奶油经均质、巴氏杀菌后冷却,得到稀奶油原料;在稀奶油原料中接种权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液作为发酵剂进行发酵,得到酸奶油。
5.如权利要求3所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液的接种量为稀奶油原料体积的0.5%~3%。
6.如权利要求4所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌液的接种量为稀奶油原料体积的0.5%~3%。
7.如权利要求3所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵的条件为温度20℃~30℃、时间16h~20h。
8.如权利要求4所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵的条件为温度20℃~30℃、时间16h~20h。
9.如权利要求5所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵的条件为温度20℃~30℃、时间16h~20h。
10.如权利要求6所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵的条件为温度20℃~30℃、时间16h~20h。
11.如权利要求3所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
12.如权利要求4所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
13.如权利要求5所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
14.如权利要求6所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
15.如权利要求7所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
16.如权利要求8所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
17.如权利要求9所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
18.如权利要求10所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述发酵终点为可滴定酸度0.7~0.9、pH 4.50~4.55。
19.如权利要求3-18任一所述的一种酸奶油的制备方法,其特征在于,所述方法还包含待酸奶油发生凝乳后,将酸奶油于3℃~5℃下放置24h~48h。
20.应用权利要求3-19任一所述的一种酸奶油的制备方法制备得到的酸奶油。
21.应用权利要求20所述的一种酸奶油制备得到的食品。
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PB01 | Publication | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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