CN109496152B - 癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法 - Google Patents

癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109496152B
CN109496152B CN201880001391.5A CN201880001391A CN109496152B CN 109496152 B CN109496152 B CN 109496152B CN 201880001391 A CN201880001391 A CN 201880001391A CN 109496152 B CN109496152 B CN 109496152B
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
decoquinate
present
weight
amount
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201880001391.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109496152A (zh
Inventor
王洪星
梁双红
范银洲
黄晓仪
秦莉
陈小平
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhongke Lanhua (Guangzhou) Biomedical Technology Co.,Ltd.
Original Assignee
Guangzhou Lanliang Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Lanliang Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Guangzhou Lanliang Pharmaceutical Technology Co ltd
Publication of CN109496152A publication Critical patent/CN109496152A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109496152B publication Critical patent/CN109496152B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1682—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/2031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyethylene oxide, poloxamers
    • A61K9/204—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了包含抗疟药如癸氧喹酯或其它治疗药物的植入剂。植入剂是包含药物，一种或多种脂质，以及可选的聚合物载体的复合物形式。本发明提供了用于制备植入剂的方法，其中植入剂包含基于植入剂总重量的癸氧喹酯或另一治疗药物，一种或多种脂质，例如胆固醇，甘油单酯或甘油二酯，以及可选用的小百分比的生物相容性聚合物。植入剂可用于以恒定水平释放治疗药物并维持受试者体内药物在预防或治疗的水平，用于预防疟疾感染或治疗其他疾病或病症。

Description

癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法
技术领域
本发明涉及包含抗疟药(抗寄生虫药)癸氧喹酯(decoquinate)(也简称“DQ”)或其他治疗药物如其他抗寄生虫药的植入剂。在一些实施方案中，植入剂是基于植入剂重量比，以包含药物，一种或多种脂质在内的复合物的形式存在，还可以包含有小百分比的生物相容性聚合物载体。脂质中有胆固醇、甘油单酯和甘油二酯。该植入剂为有治疗作用的药物提供了储库，并且设计为以恒定水平释放药物使药物在个体体内维持在预防和治疗的水平。植入剂可用于预防疟疾感染或治疗其他寄生虫病或病症。
背景技术
疟疾是一种常见的传染病，影响乃至威胁到世界各地许多人的生活和生命。目前主要的工作是开发针对疟原虫(Plasmodium)的疫苗来预防该疾病，以便在出现任何症状之前就终止疟原虫感染。虽然接种疫苗预防由蚊子叮咬引起的疟疾是很理想的途径，但由于很难应对易于发生突变的疟原虫基因序列，疟疾疫苗研发的成功率非常有限。预防疟疾的一种可替代方法是在个体体内植入可储存生物活性药物的植入剂，使其提供至少在两个月内有期望水平的治疗效果。
某些疾病如糖尿病，高血压，精神分裂症、类风湿性疾病和前列腺癌等要求有得到控制的并且持续的释放治疗药物的方式以达到治疗功效。通常令人担忧的是患者需要频繁给药而依从性差。因此，在至少一个月或更长时间内，维持足够水平的治疗药物，而不需患者每天或更频繁地服药的给药方法，有助于提高患者的依从性并改善临床治疗效果。在用以递送药物的可植入制剂中使用生物相容性好可生物降解的载体材料，可以减少病人的不适感。特别是传统的植入剂的方法通常需要手术植入和移出植入剂从而引起这种不适感。
于是，本发明提供的植入剂用于递送达到疾病预防水平的癸氧喹酯或达到其他疾病治疗水平的药物。
聚合物被广泛用作用于治疗某些疾病的药物的控制释放的制剂材料。用于植入剂或控释制剂的聚合物通常是乳酸/羟基乙酸(L/G)比率为75/25或L/G比率为50/50的聚D,L-乳酸-共-乙交酯(PLGA)。这些聚合物是不溶于水的，当用作植入剂载体注入体内时，必须使用有机溶剂如N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)，苯甲酸乙酯(EB)，苯甲酸苄酯(BB)，苯甲醇(BA)，乙基氢氧化物(EtOH)和甘油三乙酸酯或其组合，其中最常用的无害溶剂是NMP。然而，我们的预实验研究发现，将含有50％L/G比例为75/25的PLGA的组合物用NMP溶剂混合后注射入动物体内时会引起一些烦躁反应和一些运动困难的症状。此外，用PLGA制备的这种植入剂的药物释放水平不足以预防疟原虫感染。包含50％PLGA和50％癸氧喹酯的植入剂的药物释放速率不能使传染病得到有效预防。在我们预做的动物实验研究中，包含有PLGA的植入剂释放癸氧喹酯的量仅能部分地抑制疟原虫的感染。通过调整植入剂中药物活性成分与PLGA的比例以期达到预防疟疾感染的各种努力也以失败告终。
本发明提供使用易于被动物或人类代谢或降解或排泄的天然可用材料制备的预防性和治疗性植入剂。因此，该植入剂不仅可以避免手术移出植入剂，也可以减少由于置放植入剂而引起的不适，以及相关的疼痛和痛苦。本发明公开的药物递送方法包括以天然材料如胆固醇，甘油单酯和甘油二酯作为主要组分的植入剂。这些天然材料与抗疟疾化合物如癸氧喹酯构成的植入剂在预防小鼠疟原虫感染方面优于使用聚合物例如聚乳酸(PLA)或聚乙醇酸(PGA)或共聚物(聚乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)或聚己内酯(PCL)制备的植入剂。此外，胆固醇和甘油单酯或甘油二酯是广泛可用的天然材料，并且已经广泛用作食品和药物添加剂。
本发明提供了易于在患者皮下或肌内放置的植入剂，该植入剂能够持续释放药物，长达至少2-6个月之久，这可以进一步帮助解决受试者每天或更频繁服药困难导致的依从性差的问题。
发明内容
本发明公开了包含抗疟药癸氧喹酯或治疗药物的植入剂。在优选的实施方案中，植入剂为含有药物，一种或多种脂质以及可选的聚合物载体的复合物。本发明提供了制备这些植入剂的方法，其中植入剂包含癸氧喹酯或治疗药物，胆固醇，甘油单酯或甘油二酯，以及可选的小百分比的生物相容性聚合物。这些复合物以恒定水平释放治疗药物并在受试者体内维持药物在预防或治疗的水平上，以预防疟疾感染或治疗疾病或病症。
在另一个实施方案中，本发明提供了的植入剂的制备方法，该植入剂包含生物活性剂，一种或多种脂质如胆固醇，或中链脂肪酸的甘油单酯或甘油二酯(Capmul MCM EP，Abitec，US),以及任选地聚合物，所述聚合物选自聚乳酸(PLA)或聚羟基乙酸(PGA)或聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)或聚己内酯(PCL)。植入剂的组分用混合机混合后通过热熔挤出机(HME)进行进一步混合并挤出。热熔挤出机的挤出物是固体性质，但是具有可锻造性，其产品可加工成为适合置放在动物或人体中的形状和尺寸。
在另一个实施方案中，将HME挤出的可植入产品研磨成粉末并悬浮于生理盐水中，通过皮下或肌内注射置于患者体内。注射后生理盐水被周围组织吸收，而固体组分则保留在原位，缓慢且恒定地释放预防药物或治疗药物。
在另一个实施方案中，也可以使用有机溶剂将植入剂的每种组分混合在一起，然后可以通过蒸发除去有机溶剂。然后可以将剩余的固体组分悬浮在生理盐水中以通过皮下或肌内注射置于患者体内。
在另一个实施方案中，植入剂可以被放置在患者体内而不产生不适感并保留在原位而不引起不良反应。本发明的植入剂以恒定的速率控制释放癸氧喹酯或所需的药物活性物质，并在患者体内维持足够水平的癸氧喹酯或所需的药物活性物质用于预防疟原虫感染，作用时间至少2个月，可持续长达6个月，或在患者体内维持治疗水平的药物用于治疗疾病或病症，作用时间至少2个月，可持续长达6个月。
附图说明
图1显示了癸氧喹酯的体外释放曲线。癸氧喹酯释放曲线的测定是通过将1克植入剂样品(分别地如实施例1-5中所述制备的F1，F2，F3，F4和F5)置于以80rpm振摇的40毫升磷酸盐缓冲液(PBS)中。图中所示的各时间点上癸氧喹酯的含量由高压液相层析(HPLC)方法分析测定。结果显示实施例1中描述的制剂F1的植入剂在第20天释放约20％的药物，在第50天释放约35％。图中同时也显示了样品F2，F3，F4和F5的药物释放曲线。
图2显示了动物研究中用于证明在肝脏阶段(即肝细胞感染)对疟原虫感染有预防作用的实验设计示意图。简而言之，在第0天，肌内注射给予小鼠癸氧喹酯剂量为200mg/kg的本发明组合物的液体形式，或者皮下注射给予小鼠癸氧喹酯剂量为200mg/kg的本发明的植入剂；然后在第6周时给小鼠接种伯氏疟原虫ANKA 868子孢子；接下来在子孢子分别接种24,48和72小时后利用体内活体成像系统(IVIS)拍摄图像；通过疟原虫感染后每周(在第7,8,9和10周)进行显微镜观察血液涂片来检测每只小鼠的血中疟原虫感染率。
图3显示了小鼠实验的定量计数结果的数据。通过皮下注射将植入剂置于C57小鼠中并保持原位5周。在第6周时，对小鼠静脉注射接种50,000个表达萤光素酶的伯氏疟原虫ANKA 868子孢子。结果显示实施例1中描述的制剂F1植入剂在小鼠体内放置5周后预防疟原虫感染效果最好。载体对照为不包含癸氧喹酯的制剂F1制备的植入剂。伯氨喹啉在实验中用作阳性对照。F7是实施例7制备的植入剂。
图4显示来自与图3中描述的相同实验的数据。结果显示的是在伯氏疟原虫ANKA子孢子接种6天后检测到的血中疟原虫感染率。放置有实施例1中所描述的制剂F1植入剂的五只小鼠中，有四只没有疟原虫感染，有一只具有低水平的疟原虫感染率，但是在疟原虫接种25天后消失(图5中显示)。
图5显示的是最长达60天后存活小鼠的疟原虫感染率的检测结果。除了植入F1植入剂的小鼠外，其他感染疟原虫的小鼠都在第30天前死亡。一只植入F1植入剂的小鼠在第10天的血液阶段开始出现寄生虫感染，并在第15天达到峰值水平，但是在接种25天后消失，表明癸氧喹酯在接种后第15-20天之间或植入剂植入70天后仍在持续释放出来。
图6显示了来自图5所述的动物研究中的存活率。体内置放有植入剂F1(在实施例1中描述)的5只小鼠在疟原虫子孢子接种后全部存活下来。而载体对照组，伯氨喹啉组和F7植入剂的组的所有小鼠在子孢子接种后30天内死亡。
图7显示的结果来自于与图2-6所中描述的实验分开的又一个实验。在这一实验中，小鼠被随机分成不同组，每组5只。图7中描述的配方按次序来自实施例9，3，1，4和11，其中制剂F9，F3和F1是将HME挤出物研磨成粉末后用生理盐水混悬搅拌2小时，然后以液体形式注射给药，植入剂F1同时也以固体形式注射给药；F4和F11也以固体形式注射给药。示意图的时间线与图2中所述的相同。在这些实验中，由于在F9，F3和F1组血薄片中没有看到寄生虫，因而这些组所有样品都制备成血厚片来检测寄生虫，而结果是以每100个白血细胞(WBC)的寄生虫数目表示。
图8显示的是植入F3(实施例3中制备)的小鼠体内癸氧喹酯(DQ)的血液浓度(纳克/毫升)。该植入剂通过以DQ 200mg/kg体重的剂量以液体形式肌内注射到C57小鼠体内。总注射量为200μl，后大腿每侧100μl。在不同时间点(分别为第32天，第55天和第92天)通过心脏穿刺抽取血液样品，并按本文所述的药代动力学实验部分所述的方法进行处理。
具体实施方式
参照实施例中的案例以及相伴随的图解，现在来描述本发明的实施细节。该描述说明本发明的具体细节以提供对本发明全面透彻的理解。然而，很明显，对于本领域内技术娴熟人员而言，即使在没有这些部分或全部具体细节的情况下，也可实践本发明。另一方面，对于众所周知的特征和/或制备步骤并没有加以详细描述，以免不必要地含混不清本发明的关键组份。本发明的特征和优点将通过下面的附图以及随后的讨论来描述。
本发明部分地基于这样的发现，即在物理上呈软固体状的储库载体中掺入几乎不溶于水而有抗疟疾活性的小分子，在体内可生成具有近乎零级释放的小分子药物制剂。释放曲线显示最小的滞后时间和药物递送的突释(burst)。对于储库制剂来说，该释放曲线对于预防传染性疾病是理想的。这个结果出人意料，因为本领域内主流思想认为，只有在制备药物控释制剂时，使用公认的聚合物，例如由PLGA制成的可注射植入剂，才能实现低突释的，近乎零级的药物释放。
在一个实施方案中，本发明提供了一种植入剂，按植入剂全部重量算，其包含的癸氧喹酯或其他治疗药物的量是10-40％，按植入剂全部重量算，其包含胆固醇的量是40-90％，按植入剂全部重量算，其包含脂质的量是5-20％，按植入剂全部重量算，并且可含聚合物的量是5-30％；该脂质是指含中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯(Capmul MCM EP)；该聚合物选自聚乳酸(PLA)或聚羟基乙酸(PGA)或聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)或聚己内酯(PCL)。植入剂中使用的共聚物是PLGA 75:25，其组成基于用于聚合物的单体的摩尔比为75％乳酸和25％羟基乙酸。取决于药物分子和疾病类型，聚合物的添加是可选的，以期实现最佳的临床结果。包含癸氧喹酯，胆固醇和Capmul MCM EP的植入剂能够维持至少两个月，提供足够水平的癸氧喹酯来预防在接种疟原虫子孢子后的疟疾感染。相反，仅由癸氧喹酯和PLGA或PGA或PLA或PCL组成的植入剂在接种疟原虫子孢子两个月后不足以完全预防疟疾感染。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种植入剂的制造方法，所述植入剂包含癸氧喹酯或其他抗疟药或其他治疗药物，胆固醇，中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯(CapmulMCM EP)以及选自聚乳酸(PLA)或聚羟基乙酸(PGA)或聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)或聚己内酯(PCL)的聚合物。植入剂的组分先使用混合机器混合，然后通过热熔挤出机器进行热熔挤出(HME)。HME机器的输出材料本质上是软固体，即具有可变形状(可塑性形状)的半固体，其中产品可被制成适合于置放于(即植入)动物或人体内的形状以及一定的量。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种可植入或可注射的药物组合物，该组合物包含：包括胆固醇在内的药物活性颗粒；选自含中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯的脂质，以及混合物；抗寄生虫药物活性物质，其中所述颗粒具有1.5微米至50微米的平均直径，并且所述组合物为粘稠糊状物。
在另一个实施方案中，本发明提供一种组合物，其中抗寄生虫药选自氨丙啉，阿普西特，蒿甲醚，克拉珠利，氯吡啶醇，癸氧喹酯，地克珠利，二硝基甲酰胺，乙氧酰胺苯甲酯，常山酮内酯，拉沙里菌素，莫能菌素，那拉霉素，尼卡巴嗪，氨磺乐灵，帕托珠利，氯苯胍，洛克沙砷，沙利霉素，螺旋霉素，磺胺嘧啶，磺胺地托辛，托曲珠利，三氮卓(嗪硫索利)及其药学上可接受的盐和/或水合物，以及前述抗寄生虫药的混合物。
在另一个实施方案中，本发明提供一种组合物，其中所述抗寄生虫剂是癸氧喹酯或其药学上可接受的盐和/或水合物。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中所述抗寄生虫剂是以其游离碱存在的癸氧喹酯。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中脂质选自辛酸，癸酸的甘油酯以及二者混合油酯。优选酯是辛癸酸甘油酯。
在另一个实施例中，本发明提供了一种组合物，其中胆固醇以组合物重量的40％至90％的量存在于制剂中。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中胆固醇的熔点为148-150℃。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中酯的存在量为组合物重量的5％至20％。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中酯的平均分子量为218-246g/mol，熔点低于25℃。数均分子量优选为218.29g/mol。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中所述癸氧喹酯游离碱以所述组合物重量的10％至40％的量存在于所述制剂中。
在另一个实施方案中，本发明提供一种组合物，其中所述癸氧喹酯游离碱以所述组合物重量的20％至30％的量存在于所述制剂中。
在另一个实施方案中，本发明提供一种组合物，进一步包含选自聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL),聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)及其组合的聚合物。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中聚合物选自聚乳酸(PLA)，聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)及其组合，并且以组合物重量的5％-30％的量存在。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中聚合物选自聚乳酸(PLA)，聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)及其组合，并且以组合物重量的10％-20％的量存在。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中所述共聚物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)或PLGA 75:25，基于包含共聚物的单体的摩尔比，其组成为75％乳酸和25％羟基乙酸。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中所述共聚物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)或PLGA 75:25，并且以所述组合物重量的5％至30％的量存在。
在另一个实施方案中，本发明提供一种组合物，其中所述共聚物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)或PLGA 75:25，并且以所述组合物重量的10％至20％的量存在。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其中胆固醇以组合物重量的40％至90％的量存在，酯以组合物重量的5％至20％的量存在，所述癸氧喹酯游离碱以所述组合物重量的10％至40％的量存在，并且所述聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)或聚(乳酸-共-羟基乙酸)以组合物重量的5％至30％的量存在。
在另一个实施方案中，本发明提供了组合物的制备方法，其中各组分在热熔挤出机(HME)机中混合并加工，温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至100rpm。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种制备方法，其中螺杆转速范围为40rpm至80rpm。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种制备方法，其中来自HME机器的组分的输出产物被机械地制作成适于用套管针进行皮下或肌内注射的形状、尺寸和量。
在另一个实施方案中，本发明为有需要的哺乳动物提供了用于预防或治疗疟疾的方法，包括给予哺乳动物治疗有效量的本发明组合物。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物用于生产为有需要的哺乳动物来制造预防或治疗疟疾的药品。
癸氧喹酯和其他抗寄生虫药
本发明的可植入或可注射的药物组合物包含抗寄生虫药例如癸氧喹酯或这类药物的混合物。
癸氧喹酯(DQ)是一种(羟基)喹啉类化合物，通过化学合成生产。其化学名为是4-羟基喹啉(乙基-6-癸氧基-7-乙氧基-4-羟基喹啉-3-羧酸酯)，CAS号为18507-89-6，分子量为418，分子式为C25H35NO5。癸氧喹酯的化学结构式如下。
Figure BDA0001805073910000101
从化学结构可以看出，癸氧喹酯具有仲胺官能团，其游离碱形式可以被利用或制剂化。或者，还可以使用癸氧喹酯的药学上可接受的盐，例如盐酸盐，溴酸盐以及硫酸盐和硫酸氢盐。而且，无水的和各种水合形式的癸氧喹酯及其盐也包括在本发明的范围内。
癸氧喹酯曾显示可以通过增强二氯二甲吡啶酚(3,5-二氯-2,6-二甲基-4-吡啶酚)的活性来抵抗哺乳动物的疟疾感染[U.S Pat.No.4,031,220和U.S.Pat.No.4,195,089]。
最近，癸氧喹酯本身已现身为哺乳动物体内外肝脏期阶段疟原虫感染的有效抑制剂，它的作用机理是通过选择性地和特异性地抑制寄生虫的线粒体bc1复合物，并且与它的类似物阿托伐琨(已经上市的抗疟药)几乎无交叉耐药性。将含有癸氧喹酯的玉米油乳液给予感染了约氏疟原虫的动物，发现癸氧喹酯50毫克/公斤的剂量能够预防性地阻止寄生虫血症的发生[Tae-gyu Nam等人(2011)A chemical genomic analysis of decoquinate,aPlasmodium falciparum Cytochrome b inhibitor,ACS Chemical Biology 6(11):1214–1222]。更近的研究发现，单剂量5毫克/公斤的癸氧喹酯大豆油混悬液即可使感染小鼠不出现血液阶段的伯氏疟原虫ANKA[Filipa.P.da Cruz.等人(2012)Drug screens targetedat Plasmodium liver stages have shown it to be a potent multistageantimalarial drug,Journal of Infectious Diseases 205(8):1278-86]。
多年来，癸氧喹酯已被作为抗球虫药使用，没有发现其有任何已知的副作用[U.S.Pat.No.3,485,845,1969]。以商品名
Figure BDA0001805073910000102
(Rhone-Poulenc)销售的农用/兽药产品是在玉米粉，大豆油，卵磷脂和二氧化硅的饲料添加剂中添加6％的癸氧喹酯，并有其专利保护[US Pat.No.34858451969和US Pat.No.3,544,6861970]。癸氧喹酯作用于生命周期的子孢子阶段。作用机制被认为是抑制寄生虫的线粒体呼吸链的电子传递和呼吸[FryM.等人(1984)Effects of decoquinate and clopidol on electron transport inmitochondria of Eimeria tenella(Apicomplexa:Coccidia),BiochemicalPharmacology 33(2):229-40]。如果在易感宿主动物中以有效量使用，癸氧喹酯也可改善隐孢子虫病如腹泻的症状[US Pat.No.5,200,418,1993]。
癸氧喹酯的纳米颗粒制剂通过增加制剂颗粒体表面积，而使生物利用度和抗疟疾功效都有提高，并且化合物的水溶性也增加[Hongxing Wang等人Formulation andParticle Size Reduction Improve Bioavailability of Poorly Water-SolubleCompounds with Antimalarial Activity,Malaria Research and Treatment，Volume2013Article ID 76923；Hongxing Wang等人Nanoparticle formulations ofdecoquinate increase antimalarial efficacy against liver stage Plasmodiuminfections in mice,Nanomedicine:Nanotechnology,Biology,and Medicine,10(2014)57–65]。虽然这些努力已显示可增强癸氧喹酯抗疟原虫活性，用以口服方式给药或静脉途径给药，但是将药物载入植入剂而使药物达到可控释放是一种不同的给药方式，它不要求颗粒达到纳米或微细级别。事实上，纳米颗粒在预防疟原虫感染方面的效果要差得多[Qigui Li,Lisa Xie,Diana Caridha,等人(2017)Long-Term Prophylaxis andPharmacokinetic Evaluation of Intramuscular Nano-and MicroparticleDecoquinate in Mice Infected with P.berghei ANKA Sporozoites,Malaria Researchand Treatment,第2017卷,文章ID 7508291,第10页]。
可用于本发明的其它抗寄生虫药包括：氨丙啉，阿普西特，蒿甲醚，克拉珠利，氯吡啶醇，癸氧喹酯，地克珠利，二硝基甲酰胺，乙氧酰胺苯甲酯，常山酮内酯，拉沙里菌素，莫能菌素，那拉霉素，尼卡巴嗪，氨磺乐灵，帕托珠利，氯苯胍，洛克沙砷，沙利霉素，螺旋霉素，磺胺嘧啶，磺胺地托辛，托曲珠利，三氮卓(嗪硫索利)及其药学上可接受的盐和/或水合物。此外，本文也考虑抗寄生虫药物的组合。
胆固醇
本发明的可植入剂或可注射药物组合物包含胆固醇。胆固醇是占所有动物细胞膜约30％的有机分子。它是所有动物细胞膜必要的基本结构组分，对维持膜结构的完整性和流动性必不可少。细胞膜可维持稳定，持久而不僵硬，允许动物细胞形状发生改变并可使动物能够运动。除了它对动物细胞结构的重要性之外，胆固醇还可以作为类固醇激素，胆汁酸和维生素D的生物合成的前体。由于胆固醇是一种生物物质并且被认为是安全的，它已经被应用于药物制剂，主要是用于含脂质的制剂如脂质体。虽然胆固醇水平异常如高血LDL，尤其是高LDL颗粒浓度和小颗粒LDL比HDL颗粒中胆固醇含量更易引起心肌梗塞(心脏病发作),中风以及外周血管疾病。还没有证据表明，药物制剂中使用的胆固醇的量与心血管疾病的风险增加相关，因为按比例来说，人体中胆固醇的库容量非常之大，并且胆固醇的代谢途径如此之复杂，以至于药物制剂中使用的胆固醇，除了控制植入剂药物释放之外，而起不了其它作用。
另一方面，由于胆固醇具有反式构象的四环结构，所以除了胆固醇的侧链以外都是刚性的，平面状的。在这种结构作用中，胆固醇还会降低质膜对中性溶质，氢离子和钠离子的渗透性。有可能这种胆固醇特性使其适合于在植入剂中的作用，并且有其价值，以控制抗疟药物的释放以及其他治疗药物的释放。
中链脂肪酸的甘油单酯或甘油二酯
本发明的可植入或可注射药物组合物包含中链脂肪酸的甘油单酯或甘油二酯，或这些甘油单酯或甘油二酯的组合。术语“中链脂肪酸”是指具有6-12个碳原子的脂肪酸。优选的中链脂肪酸具有8-10个碳原子。更优选地，用于本发明的中链脂肪酸的甘油单酯或甘油二酯是辛酸癸酸的甘油单酯和甘油二酯。一个例子是辛癸酸甘油酯。Capmul MCM EP由中链脂肪酸(主要是辛酸)的单甘油酯和甘油二酯组成。它是许多有机化合物的有用溶剂，包括类固醇。它也是用于水油系统的有用乳化剂。尽管未发现有相关报道将其用于控制释放治疗药物，但在本发明中其可以与胆固醇组合使用形成含有癸氧喹酯的植入剂，该植入剂在疟原虫预防中具有极好的效果。相比之下，仅含有胆固醇和癸氧喹酯的植入剂在HME处理时显示出很不一样的物理性质。Capmul MCM EP是一种油性物质，或许是作为植入剂的“胶水”,“粘附基质”或“增溶剂”。
Figure BDA0001805073910000131
由中链甘油三酯组成。它可以用来增强浸润性和生物利用度。然而，在测试抗疟疾感染的动物实验中，制剂F10不如F1效果好(数据未显示)。
聚合物
在一些实施方案中，本发明的可植入或可注射的药物组合物可以进一步包含选自羧酸和内酯衍生的聚合物或共聚物。通常，这些聚合物材料是可生物降解的热塑性聚酯。这种聚合物的实例包括：聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL),聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)及其组合。
制备方法
在含有癸氧喹酯的植入剂的制备过程中，基于制剂中包含的组分的熔点和玻璃化转变温度，设定HME机器中的温度，通常低于100℃，优选为70℃至90℃。机器的螺杆转速通常设定在20-100rpm或优选地40-80rpm。癸氧喹酯的熔点为242℃至246℃。本发明中的温度设置允许包括活性成分和非活性成分的所有组分保持完整而不发生分解。温度设置还允许各成分均匀地混合并且彼此物理粘附(推测是通过油性物质单甘油酯和甘油二酯)。或许此加工过程也不一定是热熔过程。另外，或许其挤出过程，癸氧喹酯或其他药物也不一定与辅料以分子状态混合。
在另一个实施方案中，将HME挤出的可植入产品研磨成粉末状并悬浮于生理盐水中以皮下或肌内注射途径置入患者体内。生理盐水相在注射后被周围组织吸收，而固体组分则保留在原位，缓慢且恒定地释放预防药物或治疗药物。
在另一些实施方案中，也可以使用有机溶剂将植入剂的每种组分混合在一起，然后可以通过蒸发除去有机溶剂，并且可以将固体组分悬浮在生理盐水中以通过皮下或肌内注射置于患者体内。
治疗和预防的方法
本发明的可植入或可注射药物组合物可用于治疗或预防哺乳动物中的寄生虫病如疟疾。这些组合物可通过递送有效剂量的药物活性物质达到至少一个月来提供治疗作用，也可以通过递送有效剂量的药物活性物质达到至少两个月来提供预防作用。从科学文献中可知，癸氧喹酯对疟原虫的最小抑制浓度(MIC)为5.12ng/ml。参见Qigui Lie等人,Long-Term Prophylaxis and Pharmacokinetic Evaluation of Intramuscular Nano-and Microparticle Decoquinate in Mice Infected with P.berghei Sporozites,Malaria Research and Treatment,第2017卷,文章ID 7508291,第10页。本发明的组合物可以提供在该MIC以上的癸氧喹酯水平长达92天或更长时间。因此，本发明的组合物可以有效治疗或预防疾病长达约90天或三个月。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种在至少两个月的时期内维持受试者中的癸氧喹酯或抗疟药物的预防水平的方法，其包括可注射给受试者的植入剂，所述植入剂包含一种或多种单独的可生物降解的植入剂，植入剂包含了(1)相对于所述植入剂的重量，以10-40％的量存在的癸氧喹酯或抗疟药物；(2)相对于全部植入剂的重量，以40-90％的量存在的胆固醇，胆固醇是天然产物，也是本发明中用于控制释放抗疟药的生物相容性物质；(3)相对于全部植入剂的重量，以5-20％的量存在的脂质；脂质优选为中链脂肪酸的单甘油酯和二甘油酯(Capmul MCM EP)，例如辛酸，癸酸的甘油单酯和甘油二酯；和(4)可选的相对于总植入剂重量的5-30％的量存在的聚合物或共聚物；该聚合物包含聚乳酸(PLA)或聚羟基乙酸(PGA)或聚己内酯(PCL)；该共聚物包含共聚物的75％聚乳酸和25％聚羟基乙酸(PLGA 75:25)，其中如果单独的可生物降解的植入剂多于一个的话，在乳酸和乙醇酸的摩尔比方面彼此没有显著不同。因此，本发明的植入剂能在受试者中维持预防水平的癸氧喹酯或抗疟药达到至少两个月的时间，以防止疟原虫感染。
在另一个实施方案中，本发明提供了一种在至少一个月的时期内维持受试者中的癸氧喹酯或抗疟药物的治疗水平的方法，其包括可注射给受试者的植入剂，所述植入剂包含一种或多种单独的可生物降解的植入剂，植入剂包含了(1)相对于所述植入剂的重量，以10-40％的量存在的癸氧喹酯或抗疟药物；(2)相对于全部植入剂的重量，以30-70％的量存在的胆固醇，胆固醇是天然产物，也是本发明中用于控制释放抗疟药的生物相容性物质；(3)相对于全部植入剂的重量以5-20％的量存在的脂质；脂质优选为中链脂肪酸的单甘油酯和二甘油酯(Capmul MCM EP)，例如辛酸，癸酸的甘油单酯和甘油二酯；和(4)可选的相对于总植入剂的重量以5-30％的量存在的聚合物或共聚物；该聚合物包含聚乳酸(PLA)或聚羟基乙酸(PGA)或聚己内酯(PCL)；该共聚物包含共聚物的75％聚乳酸和25％聚羟基乙酸(PLGA 75:25)，其中如果单独的可生物降解的植入剂多于一个的话，在乳酸和羟基乙酸的摩尔比方面彼此并没有显著的不同。因此，本发明的植入剂能在受试者中维持治疗水平的癸氧喹酯或抗疟药达到至少一个月的时间，以治疗疾病或病症。
实例
以下实施例进一步描述和展示了本发明范围内的实施方案。这些实施例只是为了解说的目的，而不应解读为对本发明的限制，因为在不脱离本发明的精神和范围的情况下可有许多变异。
本文所述的制剂F1，F2，F3，F4和F5相应地由实施例1，2，3，4和5表示。下表1提供了实施例1，2，3，4和5的制剂的组合物。
表1
Figure BDA0001805073910000161
备注：Cho1＝胆固醇；MCM＝Capmu1 MCM8；DQ＝癸氧喹酯；
PLGA：L-乳酸-共-乙交脂，L/G比例为75/25；
实例1
称取52.5克胆固醇，7.5克MCM(Capmul MCM EP)(辛癸酸甘油酯(I型))和15.0克癸氧喹酯(金伯士药业有限公司，浙江)混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11HME，赛默飞世尔科技)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例2
称取45.0克胆固醇，7.5克MCM(Capmul MCM EP)(辛癸酸甘油酯(I型))和22.5克癸氧喹酯混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例3
称取37.5克胆固醇，7.5克MCM(Capmul MCM EP)(辛癸酸甘油酯(I型))和30.0克癸氧喹酯混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例4
称取22.5克胆固醇，7.5克MCM(Capmul MCM EP)(辛癸酸甘油酯(I型))，7.5克PLGA75/25和22.5克癸氧喹酯混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma11HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例5
称取37.5克胆固醇，3.75克MCM(Capmul MCM EP)(辛癸酸甘油酯(I型))，11.25克PLGA 75/25和22.5克癸氧喹酯混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例6
称取7.5克PCL(聚己内酯45000)，37.5克PEG(聚乙二醇)6000和30g癸氧喹酯，混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11 HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例7
称取575毫克PLGA75/25和575毫克癸氧喹酯。首先将PLGA溶解于N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中，然后加入癸氧喹酯至PLGA溶液中。在室温下以200rpm搅拌混合物2小时。混合物固化之后进行了活性癸氧喹酯组分的体外释放行为的测试。
实例8
称取1.2克PLGA50/50和1.2克癸氧喹酯。首先将PLGA溶解于N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中，然后加入癸氧喹酯至PLGA溶液中。在室温下以200rpm搅拌混合物2小时。混合物固化之后进行了活性癸氧喹酯组分的体外释放行为的测试。
实例9
称取42克胆固醇和18克癸氧喹酯，混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为80℃至140℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒植入皮下，或将其粉碎成粉末，然后悬浮在生理盐水中进行肌内注射。对热熔挤出产物中癸氧喹酯的体外释放行为进行了测试。水相中植入剂悬浮液的粒度测量在1.5微米和50微米之间。
实例10
称取0.375克胆固醇，0.5克癸氧喹酯和25毫升Captex 300(中链甘油三酯)。将各组分加在一起，在80℃下加热，搅拌混合。该制剂直接作为贮库通过皮下注射。
实例11
称取50.04克胆固醇，6.0克MCM(Capmul MCM EP)(甘油单辛酰基癸酸酯(I型))，混合均匀并等待HME机器中的实际温度达到设定温度(Pharma 11 HME)。将混合物料加入料斗中并送入HME机器中。挤出过程的温度范围为80℃至140℃，螺杆转速范围为20rpm至50rpm。将挤出材料制成具有精确长度的固体棒，通过皮下植入作为载体空白对照。
药物释放实验
药物释放测试如下：将称重的植入剂置于pH为7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中，并以100rpm的转速旋转。如图1所示的时间进行取样，并通过HPLC(Agilent)分析测定药物浓度，然后与测量的药物浓度的总量进行比较。结果显示，到第50天，制剂F1至F3(实施例1-3)显示25％至35％的药物释放。制剂F4和F5(实施例4和5)在50天内仅显示出约5％的药物释放。
动物实验
采用发明人实验室建立的动物模型对实施例1，7中制备的植入剂进行评价，使用载体和伯氨喹啉作为对照。动物研究严格按照动物实验条例(动物管理条例，中华人民共和国，1088年11月14日发布，2017年3月1日修订版)进行。将含有癸氧喹酯的待评价的植入剂以200mg药物每公斤小鼠体重的剂量通过皮下植入C57小鼠中，6周之后接种表达萤火虫萤光素酶的伯氏疟原虫ANKA子孢子(Pb 868子孢子)。子孢子是从感染伯氏疟原虫的雌性斯氏按蚊唾液腺中分离出来的，给小鼠静脉内注射大约50,000个子孢子。每个测试组随机选择五只小鼠。每个动物研究重复至少三次。
在接种伯氏疟原虫子孢子后10周的时间里观察植入剂对预防C57小鼠感染表达荧光素酶的伯氏疟原虫子孢子(Pb.868)的效果。使用体内成像系统(IVIS)的活体图像检测来监测肝脏阶段的子孢子发育情况。显微镜下观察吉姆萨染色血涂片的感染血细胞中寄生虫数目测定疟原虫感染率。制备血液薄膜并用3％吉姆萨染色20分钟；然后在油显微镜下计数每10,000个红细胞中感染的红血细胞的数量以获得红细胞感染率(血液薄膜的标准方法是每10,000个红细胞中感染的红细胞的数量或每1000个红细胞中感染的红细胞数量—本文中通常使用前者)。载玻片上看不到寄生虫的情况下，制备血液厚膜并用3％吉姆萨染色20分钟；然后计数每100白细胞(WBC)感染的红细胞数量并表示为每100WBC中疟原虫细胞的数量。植入剂植入小鼠后第90天计算生存率。实验设计的示意图如图2所示。
子孢子分离和接种
表达有萤光素酶的伯氏疟原虫ANKA子孢子是从广州中科蓝华生物科技有限公司的实验室饲养的雌性斯氏按蚊中获取的。喂食来自受感染的昆明小鼠(改良后的瑞士小鼠)的疟原虫后，蚊子在26℃被继续饲养17至22天。唾液腺是从感染疟疾的蚊子中提取出来的，这些蚊子分为腹部和头部/胸部区域。用研钵和研杵研磨头部和胸部，并悬浮在含有1％的C57小鼠血清的RPMI 1640培养基中。将总计50-80个带有腺体的头置于0.5ml管中的玻璃棉上面的Osaki管中，并用足够的分离液覆盖头部。将Osaki管置于湿冰上至剖析完毕所有的蚊子。从唾液腺中回收并且分离孢子体。在第0天，每只小鼠的尾静脉注射入0.1ml含有5万个子孢子的混悬液。
体内成像系统(IVIS)
利用IVIS Spectrum(Caliper，PerkinElmer)对感染了表达萤光素酶的伯氏疟原虫ANKA的小鼠进行生物发光的体内成像。在子孢子体接种24,48和72小时后分别进行小鼠的体内成像分析以确定肝脏和血液阶段的疟疾感染情况。小鼠腹膜内注射体积不超过150μl的剂量为150mg/kg的萤光素(Gold Biotechnology，圣路易斯，密苏里州)。荧光素给药三分钟后，通过吸入异氟烷将小鼠麻醉，然后将小鼠腹部朝上定位在37℃平台上的体内成像仪上。小鼠通过鼻锥继续吸入异氟烷。在24，48和72小时的时间点进行小鼠体内成像时使用相机曝光时间为1分钟和5分钟，光圈值为1和较大的分箱设置。使用
Figure BDA0001805073910000211
4.0软件的区域强度(ROI)设置测量发光信号强度来对从整个身体发射的生物发光光子数或区域强度(ROI)进行定量测定。测量解剖部位光子总通量的ROI评估被设置为从全身成像测量肝脏位置处的腹部区域。利用从580nm至660nm的滤波器拍摄的连续图像，用该软件进行三维生物发光成像断层扫描。
癸氧喹酯植入剂的毒性评价
根据HPLC定量分析结果，将每个制剂按癸氧喹酯(200mg/kg)的剂量通过皮下注射方式给予小鼠。观察植入剂对小鼠的直接毒性，并持续观察14天的慢性不良反应。在观察期结束时所有动物均幸存下来。一般的观察项目包括在笼子里的转圈，抑郁，头部倾斜，弯腰姿势，出血(查看笼子/尿液/头发)，脱水，腹泻，体重减轻，脱发(剃毛)，皮肤病变，跛行，厌食和呕吐。当仅含PLGA和癸氧喹酯的植入剂注射后，动物会表现出一些痛苦不适和移动困难。当植入剂含有胆固醇，Campul MCM EP和癸氧喹酯时，动物则没有显示出上述任何迹象。所有给予不同剂量的癸氧喹酯的动物中均未观察到以下迹象：运动失调，深呼吸，惊厥，腹泻，鼻衄，血尿，黄疸，跛行，消瘦，黑便，小瘤生成。
药代动力学实验
使用LC-10ADvp HPLC系统(岛津，日本)，MPS3C自动取样器(Gerstel Auto取样器，德国)和API3000三重四极杆串联质谱仪(AB-SCIEX公司，美国)进行色谱分析。癸氧喹酯标准品(目录号1165408，LOT F0G036)购自USPRockville，MD，USA。普萘洛尔(纯度≥95％，Sigma Chemical公司)被选作内标。所有化学品和溶剂均为分析纯。用Millipore(AK，USA)实验室超纯水系统(0.2μm过滤器)纯化实验用水。
将化合物以50μg/ml的浓度溶解于乙醇中，用乙醇稀释至一系列浓度，然后将20μl各浓度溶液和100μl空白血液加入到1.5ml管中并涡旋3分钟，然后加入400μl含有内标物的乙醇/乙腈溶液，涡旋5分钟。在室温静置8小时后，涡旋5分钟，最后以16000g速率4℃离心60分钟。最终浓度如下：0.5，1，2，5，10，20，50，100，200，500ng/ml。
采用蛋白质沉淀法制备血液样品。乙醇/乙腈(1:1)用作蛋白质沉淀试剂。向每个1.5ml EP管中加入20μl乙醇和100μl血液样品并涡旋3分钟，然后加入400μl含内标的蛋白质沉淀溶液并涡旋5分钟。其余的步骤与标准曲线制备相同。随后，取100μl上清液并置于96孔板中，并通过LC/MS/MS系统(API 3000质谱仪的Biosystems-Sciex模型)进行分析。
用于质量控制的样品处于三个不同的水平，分别代表低浓度，中浓度和高浓度的癸氧喹酯。色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C8(2.1*50mm，3.5μm)。流动相由含0.1％甲酸的甲醇溶液和含0.1％甲酸的水溶液以90:10(v/v)组成，流速为600μl/min。柱温度为30℃，喷射器温度为15℃。
参考文献的并入
每个专利文献的全部公开内容，包括更正证书，专利申请文件，科学文章，政府报告，网站和本文提及的其他参考文献，出于所有目的,均通过引用整体并入本文。在术语发生冲突的情况下，将由本说明书控制。
等同性
在不脱离本发明的精神或基本特征的情况下，本发明可以以其他特定形式实施。前述实施例在所有方面都应被认为是说明性的，而不是限制在此描述的本发明。在使用术语包含的本发明的各种实施方案中，还考虑实施方案由或基本上由所列举的步骤或组分组成。此外，只要本发明呈可操作状态，步骤的顺序或执行一些行动的顺序就是无关紧要的。此外，二个或二个以上的步骤或行动可以同时进行。
在说明书中，单数形式也包括复数形式，除非上下文另有明确规定。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。在冲突的情况下，将由本说明书控制。

Claims (23)

1.一种可注射的药物组合物，包括：含胆固醇的药物活性颗粒；选自中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯的酯及其混合物；和抗寄生虫药物活性物质，其中颗粒的平均粒径范围为1.5至50微米，组合物为粘性糊状物；
所述药物组合物为液体形式注射剂；
所述抗寄生虫药为游离碱形式的癸氧喹酯。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯的酯选自辛酸，癸酸的甘油单酯和甘油二酯及其组合。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述胆固醇在组合物中的存在量为组合物重量的40％-90％。
4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述胆固醇的熔点为148-150℃。
5.根据权利要求2所述的组合物，其中所述中链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯的酯的存在量为组合物重量的5％-20％。
6.根据权利要求2所述的组合物，其中所述酯的数均分子量为218-246g/mol，熔点低于25℃。
7.根据权利要求2所述的组合物，其中所述酯的数均分子量为218.29g/mol。
8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述癸氧喹酯游离碱在制剂中的存在量为组合物重量的10％-40％。
9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述癸氧喹酯游离碱在制剂中的存在量为组合物重量的20％-30％。
10.权利要求1的组合物的制备方法，其中所述组合物的组分在热熔挤出机(HME)机中混合并加工，温度范围为70℃至90℃，螺杆转速范围为20rpm至100rpm。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其中所述螺杆旋转速度范围为40rpm至80rpm。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其中来自所述热熔挤出机的组分的输出产物被机械地制作成适于通过套管注射进行皮下或肌内注射的形状、尺寸和量。
13.根据权利要求2所述的组合物，其还包含选自聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL),聚(乳酸-共-羟基乙酸)(PLGA)及其组合的聚合物。
14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述聚合物选自聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)及其组合，并且以组合物重量的5％至30％的量存在于组合物中。
15.根据权利要求13所述的组合物，其中所述聚合物选自聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)及其组合，并且以组合物重量的10％至20％的量存在于组合物中。
16.根据权利要求13所述的组合物，其中所述聚合物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)，基于形成聚合物的单体的摩尔比例，其组成为75％乳酸和25％乙醇酸。
17.根据权利要求13所述的组合物，其中所述聚合物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)，并且在所述组合物中的存在量为所述组合物重量的5％至30％。
18.根据权利要求13所述的组合物，其中所述聚合物选自聚(乳酸-共-羟基乙酸)，并且在所述组合物中的存在量为所述组合物重量的10％至20％。
19.根据权利要求13所述的组合物，其中胆固醇的存在量为组合物重量的40％-90％，酯的存在量为组合物重量的5％-20％，癸氧喹酯游离碱的存在量为组合物重量的10％至40％，聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),聚己内酯(PCL)或聚(乳酸-共-羟基乙酸)的存在量为组合物重量的5％至30％。
20.制备权利要求13所述的组合物的方法，其中将所述组合物的组分在热熔挤出机(HME)机器中混合并加工，温度范围为70℃-90℃，螺杆转速范围为每分钟20至100转(rpm)。
21.根据权利要求20所述的方法，其中螺杆转速范围为每分钟40至80转。
22.根据权利要求21所述的方法，其中来自所述热熔挤出机的所述组分的输出产物被机械地制作成具有适于用套管进行皮下或肌内注射的形状、尺寸和量。
23.根据权利要求1所述的组合物，其用于为有此需要的哺乳动物制备生产预防或治疗疟疾的药品。
CN201880001391.5A 2018-05-17 2018-05-17 癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法 Active CN109496152B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2018/087307 WO2019218305A1 (en) 2018-05-17 2018-05-17 Intramuscular depot of decoquinate compositions and method of prophylaxis and treatment thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109496152A CN109496152A (zh) 2019-03-19
CN109496152B true CN109496152B (zh) 2021-06-18

Family

ID=65713851

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880001391.5A Active CN109496152B (zh) 2018-05-17 2018-05-17 癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法

Country Status (3)

Country Link
US (1) US11246836B2 (zh)
CN (1) CN109496152B (zh)
WO (1) WO2019218305A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110585134B (zh) * 2019-10-18 2022-11-29 中科蓝华(广州)生物医药技术有限公司 一种癸氧喹酯脂质体及其制备方法和应用
WO2024082173A1 (en) 2022-10-19 2024-04-25 L'oreal Anhydrous composition for making up keratin materials

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001087290A1 (en) * 2000-05-17 2001-11-22 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Decoquinate, 4-hydroxyquinolones and napthoquinones for the prevention and treatment of equine protozoal myeloencephalitis caused by sarcocystis neurona hughesi and other apicomplexan protozoans
CN100579523C (zh) * 2008-08-25 2010-01-13 浙江大学 注射用二氢青蒿素乳剂、冻干乳剂及其制备方法
CN104906044A (zh) * 2015-05-22 2015-09-16 广州中科蓝华生物科技有限公司 一种癸氧喹酯纳米制剂及其制备方法与应用
CN107427504A (zh) * 2015-12-08 2017-12-01 广州中科蓝华生物科技有限公司 癸氧喹酯固体分散体、其制备方法和用途
CN107669637A (zh) * 2017-09-30 2018-02-09 山东大学 一种注射用蒿甲醚脂质体及其制备方法和应用
CN107811967A (zh) * 2016-09-09 2018-03-20 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 抗寄生虫药物原位固化缓释注射剂及其制备方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1168801A (en) 1966-05-13 1969-10-29 May & Baker Ltd Quinoline Derivatives
US3485845A (en) 1966-05-13 1969-12-23 May & Baker Ltd Methyl and ethyl 6- and 7-substituted 4-hydroxy-quinoline-3-carboxylates useful as coccidiostats
GB1509536A (en) 1974-08-20 1978-05-04 Wellcome Found Anti-malarial compositions
US4195089A (en) 1975-08-20 1980-03-25 Burroughs Wellcome Co. Synergistic composition for malaria
US5200418A (en) 1991-07-12 1993-04-06 The Ohio State University Cryptosporidiosis amelioration
JP5571380B2 (ja) * 2006-07-24 2014-08-13 ルミナス バイオサイエンシズ，インコーポレイテッド オストワルド熟成を減少させた水不溶性の医薬品物質の固体ナノ粒子処方物
EP2089010A1 (en) * 2006-10-24 2009-08-19 The John Hopkins University Rapid release mini-tablets provide analgesia in laboratory animals
US7846428B2 (en) * 2007-10-05 2010-12-07 Merial Limited Articular cartilage gene therapy with recombinant vector encoding BMP-7
US20130158132A1 (en) * 2011-12-19 2013-06-20 Aida Salatinjants Formulation Solution Adapted To Prolong Plasma Times Of Drugs In Mammals Including Humans
CN108210461A (zh) * 2016-12-16 2018-06-29 中国科学院上海药物研究所 一种Talazoparib药物组合物及其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001087290A1 (en) * 2000-05-17 2001-11-22 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Decoquinate, 4-hydroxyquinolones and napthoquinones for the prevention and treatment of equine protozoal myeloencephalitis caused by sarcocystis neurona hughesi and other apicomplexan protozoans
CN100579523C (zh) * 2008-08-25 2010-01-13 浙江大学 注射用二氢青蒿素乳剂、冻干乳剂及其制备方法
CN104906044A (zh) * 2015-05-22 2015-09-16 广州中科蓝华生物科技有限公司 一种癸氧喹酯纳米制剂及其制备方法与应用
CN107427504A (zh) * 2015-12-08 2017-12-01 广州中科蓝华生物科技有限公司 癸氧喹酯固体分散体、其制备方法和用途
CN107811967A (zh) * 2016-09-09 2018-03-20 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 抗寄生虫药物原位固化缓释注射剂及其制备方法
CN107669637A (zh) * 2017-09-30 2018-02-09 山东大学 一种注射用蒿甲醚脂质体及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Long-Term Prophylaxis and Pharmacokinetic Evaluation of Intramuscular Nano- and Microparticle Decoquinate in Mice Infected with P. berghei Sporozoites;Qigui Li等;《Malaria Research and Treatment》;20170413;第1-10页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109496152A (zh) 2019-03-19
WO2019218305A1 (en) 2019-11-21
US11246836B2 (en) 2022-02-15
US20210059946A1 (en) 2021-03-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9526787B2 (en) Sustained-release lipid pre-concentrate of pharmacologically active substance and pharmaceutical composition comprising the same
US20080102127A1 (en) Hybrid lipid-polymer nanoparticulate delivery composition
TW200302734A (en) Pharmaceutical compositions for hepatitis c viral protease inhibitors
US9999596B2 (en) Controlled release hydrogels
KR20190026799A (ko) 경구 위체류 제형 및 이의 용도
EP0311065A1 (de) Implantierbares, biologisch abbaubares Wirkstofffreigabesystem
CN110035743B (zh) 一种Talazoparib药物组合物及其应用
WO2018108164A1 (zh) 一种硼替佐米药物组合物及其应用
CN109496152B (zh) 癸氧喹酯组合物的肌肉内库存及其预防和治疗的方法
EP2910242A1 (en) Durable analgetic sebacoyl dinalbuphine ester-plga controlled release formulation
Park et al. Nanostructured mucoadhesive microparticles to enhance oral drug bioavailability
JP5425890B2 (ja) 難溶性薬物を含む均一なサイズの高分子ナノ粒子製造方法
Rassouli et al. Pharmacokinetics and bioavailability of three promising tilmicosin-loaded lipid nanoparticles in comparison with tilmicosin phosphate following oral administration in broiler chickens
US20040198646A1 (en) Menthol solutions of drugs
US20140112957A1 (en) Analegisic (Sebacoyl dinalbuphine ester) PLGA controlled release formulation form
EP4321152A1 (en) Sustained-release lipid pre-concentrate
US9919027B2 (en) Lipid nanoparticle of polymyxin
Rassouli et al. Lipid-based nanoparticles as novel drug delivery systems for antimicrobial agents
CN112121028B (zh) 一种辛伐他汀固体纳米粒制剂及其制备方法
US10835489B2 (en) Modified release formulations of mycophenolate mofetil
US20210401775A1 (en) A liquid injectable composition
TW200800268A (en) Medicinal composition showing improved drug absorbability
WO2024142045A1 (en) Controlled-release oral formulations of lipophilic drugs
JP2023518675A (ja) 薬剤を有する電界紡糸構造体、並びにその製造方法及び使用
CN113117092A (zh) 一种非水缓释递药系统

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20220330

Address after: 510555 room 393, No. 115, jiufo Jianshe Road, Zhongxin Guangzhou Knowledge City, Guangzhou, Guangdong

Patentee after: Zhongke Lanhua (Guangzhou) Biomedical Technology Co.,Ltd.

Address before: Room 397, 115 jiufo Jianshe Road, Zhongxin Guangzhou Knowledge City, Guangzhou, Guangdong 510000

Patentee before: BLUELIGHT PHARMATECH Co.,Ltd.

TR01 Transfer of patent right