CN109479906B

CN109479906B - 一种调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂制备及应用方法

Info

Publication number: CN109479906B
Application number: CN201811391639.1A
Authority: CN
Inventors: 吴强盛; 何家栋; 邹英宁; 刘春艳; 张德建; 张菲
Original assignee: Yangtze University
Current assignee: Yangtze University
Priority date: 2018-11-21
Filing date: 2018-11-21
Publication date: 2021-04-27
Anticipated expiration: 2038-11-21
Also published as: CN109479906A

Abstract

本发明涉及一种调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂制备及应用方法，属柑橘抗旱技术领域。该抗旱菌剂的制备方法及其应用操作单易，使用后效果显著，合理、高效的发挥干旱条件下摩西斗管囊霉菌剂对柑橘的抗旱作用；在提高了柑橘的耐旱性的同时，还改善了土壤微生物环境，不仅具有经济效益，还有生态效益；满足了人们使用的需要。

Description

一种调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂制备及应用方法

技术领域

本发明涉及一种调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂制备及应用方法，属柑橘抗旱技术领域。

背景技术

柑橘是世界最重要的果树之一，被列为世界四大水果之首。中国是柑橘的原产地和主产地，有着悠久的栽培历史。我国的柑橘多在丘陵山地地区栽培，生长环境恶劣，且抵抗干旱条件差，遭受干旱的影响更大，水分是获得高产优质产品的主要限制因子之一。因此有必要研发一种抗旱剂，以缓解干旱对柑橘的影响。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种通过改变脂肪酸组成和不饱和度来提高柑橘抗旱机制的抗旱菌剂制备及应用方法。

本发明的技术方案是：

一种调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂，其特征在于：所述的调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂的制备方法包括以下步骤：

1）、采集橘园土壤表面10cm以下的土壤，风干碾碎成粉末状后，经4mm口径的网晒过滤除杂，以将土壤中的石子筛除；然后通过灭菌装置在121℃和0.11 Mpa条件下灭菌1-1.5小时，制得灭菌土；

2）、在灭菌土中，以灭菌土和摩西斗管囊霉菌剂重量比7:3的比例，加入摩西斗管囊霉菌剂并混匀，得摩西斗管囊霉菌剂混合土壤，随后将摩西斗管囊霉菌剂混合土壤装入19.5×14×21cm的塑料盆；并保持摩西斗管囊霉菌剂混合土壤表面与塑料盆沿口有3—5cm的落差；

3）、将白三叶种子用清水清洗表面灰尘后，加入到浓度为95%的乙醇中浸泡5分钟，以去除白三叶种子上的部分细菌；然后取出种子再放入浓度为0.525%的次氯酸钠溶液中浸泡5分钟用以去除白三叶种子上剩余的细菌；随后用无菌水对白三叶种子冲洗3-5分钟，以去除其表面残留的乙醇和次氯酸钠；从而制得灭菌处理的白三叶种子；

4）、在塑料盆中以0.1-0.3g/cm²的密度在摩西斗管囊霉菌剂混合土壤的表面，均匀散入灭菌处理的白三叶种子，而后在其表面覆盖一层1mm厚度的灭菌土，并在塑料盆中浇透水；

5）、将步骤4）中的塑料盆放置在植物生长室中，并将植物生长室环境设置为白天16小时，夜晚8小时；白天温度为28℃，夜晚温度为18℃；湿度控制在60~70%之间，让白三叶种子进行萌发并生长；

6）、白三叶种子在植物生长室中正常生长3个月后，即，植株高度达到10-20cm后，紧贴土壤表面割除白三叶植株的地上部分，只留取地下根系，然后将塑料盆翻覆，整体倒出塑料盆中的土壤并摘出白三叶的根系；

7）、将摘出的白三叶根系剪切成0.5—1cm长度的短节，然后与塑料盆中倒出的土壤混合充分，得，抗旱菌剂成品。

所述的抗旱菌剂在大田中的具体应用方法如下：在柑橘植株正投影的紧挨树冠外沿部分挖掘一圈20-30cm宽的环槽，并使柑橘植株的根系显露出来；而后将抗旱菌剂均匀撒入环槽；抗旱菌剂铺设厚度为0.5—1cm，随后将挖出的土壤回填，并在土壤回填中均匀撒上白三叶种子，而后浇透水让其自然生长即可。

所述的抗旱菌剂在盆栽中的施用方法：

1）、将风干碾碎后的土壤经4mm-6mm目筛除杂，以去除土壤中的石粒、枯枝后，制得除杂土；

2）、在除杂土中，以除杂土与细沙体积比3:1的比例加入细沙，混合均匀后制得培养基质；

3）、取一株5叶龄的柑橘幼苗，并在盆栽容器中铺一层培养基质；然后再铺一层抗旱菌剂；培养基质的厚度和抗旱菌剂的厚度与柑橘幼苗整个根部高度的一半相等；然后人工将柑橘幼苗呈竖直状悬放在盆栽容器的中心，并使其下端根部与抗旱菌剂接触；随后依次铺设一层培养基质、一层抗旱菌剂和一层培养基质；铺设的培养基质的厚度与底层培养基质的厚度相等；铺设的抗旱菌剂厚度与先期铺设的抗旱菌剂厚度的比值为2:1；然后采用干浇透的浇水原则进行管理栽培即可制得盆栽植株。

所述的摩西斗管囊霉菌剂由中国丛枝菌根真菌种质资源库提供。

所述的白三叶种子直接由市场采购获得。

本发明的优点在于：

本发明提供的一种抗旱菌剂的制备方法及其应用操作单易，使用后效果显著，合理、高效的发挥干旱条件下摩西斗管囊霉菌剂对柑橘的抗旱作用；在提高了柑橘的耐旱性的同时，还改善了土壤微生物环境，不仅具有经济效益，还有生态效益，具体的效果包括：（1）有效促进柑橘植株营养生长、提高生物量；（2）提高叶片相对含水量和水势；（3）降低根系ABA、O₂ ^·−和MDA浓度；（4）提高叶片相对含水量，降低叶片水势；（5）提高柑橘根系脂肪酸的不饱和度；（6）增加柑橘根系脂肪酸去饱和酶基因的相对表达量。此外并且，本发明还具有工艺简单，原材料易得，生产成本低、高效环保和低能耗的优点。

附图说明

图1为本发明抗旱菌剂对柑橘实生苗叶片相对含水量的影响图；

图2为本发明抗旱菌剂对柑橘实生苗叶片水势的影响图；

图3为本发明抗旱菌剂的接种对柑橘实生苗根系脱落酸（ABA）浓度的影响图；

图4 为本发明抗旱菌剂的接种对柑橘实生苗根系超氧阴离子（O₂ ^·−）浓度的影响图；

图5为本发明抗旱菌剂的接种对柑橘实生苗根系丙二醛（MDA）浓度的影响图；

图6为本发明抗旱菌剂的接种对柑橘实生苗根系4种脂肪酸去饱和酶基因相对表达量的影响图；

图7 为接种本发明抗旱菌剂和水分处理后柑橘实生苗的生长状况图。

具体实施方式

该抗旱菌剂的制备方法如下：采集橘园土壤表面10cm以下的土壤，风干碾碎成粉末状后，经4mm口径的网晒过滤除杂，以将土壤中的石子筛除；然后通过灭菌装置在121℃和0.11 Mpa条件下灭菌1-1.5小时，制得灭菌土；

在经过灭菌的土壤中以重量比7:3的比例加入由中国丛枝菌根真菌种质资源库（BGC）提供摩西斗管囊霉菌剂，并混匀；随后将放入摩西斗管囊霉菌剂的土壤装入盆口内径×盆底内径×盆高=19.5×14×21cm的塑料盆；保持摩西斗管囊霉菌剂混合土壤表面与塑料盆沿口有3—5cm的落差。

将市场采购的白三叶种子用清水清洗表面灰尘后，加入到浓度为95%的乙醇中浸泡5分钟，以去除白三叶种子部分自带的细菌；然后取出种子再放入浓度为0.525%的次氯酸钠溶液中浸泡5分钟用以去除白三叶种子自带的细菌；随后用无菌水对白三叶种子冲洗3-5分钟，以去除其表面残留的乙醇和次氯酸钠；

取20-30g经灭菌处理的白三叶种子均匀散入装入摩西斗管囊霉菌剂土壤的塑料盆中，而后在其表面覆盖一层1mm厚度的灭菌土，并在塑料盆中浇透水。

将上述塑料盆放置在植物生长室（植物生长室由浙江托普仪器有限公司生产，其能够模拟自然界中的各种气象条件）中，并将植物生长室环境设置为白天16小时，夜晚8小时；白天温度为28℃，夜晚温度为18℃；湿度控制在60~70%之间对白三叶种子进行萌发并生长。

白三叶种子在植物生长室中正常生长3个月后，即，植株高度达到10-20cm后，紧贴土壤表面割除白三叶植株的地上部分，只留取地下根系，然后将塑料盆翻覆，整体倒出塑料盆中的土壤并摘出白三叶的根系；而后将摘出的白三叶根系剪切成0.5—1cm长度的短节，然后与塑料盆中倒出的土壤混合充分，得，抗旱菌剂成品。

该抗旱菌剂在大田中的具体应用方法如下：

在柑橘植株正投影的紧靠树冠外沿部分挖掘一圈20-30cm宽的环槽，并使柑橘植株的根系显露出来；由于柑橘植株正投影的树冠外沿部分的柑橘植株新根最为密集，在该处挖掘环槽撒入抗旱菌剂时，能够使抗旱菌剂与柑橘植株的新根接触，使其达到更好的共生效果。

而后将抗旱菌剂均匀撒入环槽；抗旱菌剂铺设厚度为0.5—1cm，随后将挖出的土壤回填，并在土壤回填中均匀撒上白三叶种子，而后浇透水让其自然生长即可。

抗旱菌剂在盆栽中的施用方法如下：

将风干后的土壤经4mm-6mm目筛除杂；以去除土壤中的石粒、枯枝后，制得除杂土；

在除杂土中，以除杂土与细沙体积比3:1的比例加入细沙，混合均匀后制得培养基质。

取一株5叶龄的柑橘幼苗，并在盆栽容器中铺一层培养基质；然后再铺一层抗旱菌剂；培养基质的厚度和抗旱菌剂的厚度与柑橘幼苗整个根部高度的一半相等；然后人工将柑橘幼苗呈竖直状悬放在盆栽容器的中心，并使其下端根部与抗旱菌剂接触；随后依次铺设一层培养基质、一层抗旱菌剂和一层培养基质；铺设的培养基质的厚度与底层培养基质的厚度相等；铺设的抗旱菌剂厚度与先期铺设的抗旱菌剂厚度的比值为2:1；然后采用干浇透的浇水原则进行管理栽培即可制得盆栽植株。

盆栽容器中各层培养基质的高度一致；盆栽容器后期铺设的抗旱菌剂厚度与先期铺设的抗旱菌剂厚度的比值为2:1由于柑橘植株在盆栽容器生长过程中，其底部的新根与下层抗旱菌剂层接触；其老根与上层抗旱菌剂层接触；因此将下层抗旱菌剂层与上层抗旱菌剂层的质量比如此设置时，可使新根与质量大的抗旱菌剂层接触，老根与质量小的抗旱菌剂层接触，由于新根的共生能力强于老根的共生能力；因此如此设置时可使植株的根系与抗旱菌剂达到最佳的共生效果。

该抗旱菌剂是白三叶的根、土壤和摩西斗管囊霉菌剂的混合物；土壤中摩西斗管囊霉菌剂的摩西斗管囊霉菌体中孢子在适宜的土壤条件下萌发成菌丝；萌发的菌丝会附着并共生于萌发后白三叶根系中，在白三叶根系信号物质的诱导下，菌丝自身分支，然后与根系表皮或根毛接触,形成一个向外突起的类似附着胞结构；随后菌丝进入到根细胞，白三叶提供其菌丝生长发育需要的营养物质，进而促进的摩西斗管囊霉孢子萌发和繁殖更多的摩西斗管囊霉菌丝。

摩西斗管囊霉菌丝的存在能够扩大根系吸收水分的范围；且摩西斗管囊霉菌丝能够分泌一种球囊霉素，它能够增加土壤的团粒结构，使土壤更加透气保水。

此外摩西斗管囊霉菌丝与柑橘根系接触后，形成一个向外突起的类似附着胞结构；菌丝进入到柑橘根细胞的内部，可以调节柑橘脂肪酸去饱和酶基因的表达，从而增加柑橘根系中脂肪酸的不饱和度，增加抗旱性。

为了证明本申请中的抗旱菌剂的效果，本发明进行了如下试验：

试验材料

1、试验盆栽的制备：

经抗旱菌剂接种处理（+AMF）的试验盆栽制备过程如下：

1）、将风干后的土壤经4mm-6mm目筛除杂；

2）、将除杂后的土壤，在121℃和0.11 Mpa条件下灭菌1-1.5小时，制得灭菌土；

3）、在灭菌土中以体积比3:1的比例加入沙，混合均匀后制得培养基质；

4）、在盆栽容器（盆口内径×盆底内径×盆高=19.5×14×21cm）中铺一层5 cm厚的培养基质；然后再铺一层3.4cm厚抗旱菌剂；随后依次铺设一层5 cm厚培养基质、一层1.6cm厚抗旱菌剂和一层5 cm培养基质；

5）、将5叶龄的柑橘幼苗种植于步骤4）的栽培容器（盆口内径×盆底内径×盆高=19.5×14×21cm）内，制得经抗旱菌剂接种处理（+AMF）的试验盆栽。

不进行抗旱菌剂接种处理（-AMF）试验盆栽制备过程如下：

1）、将风干后的土壤经4mm-6mm目筛除杂；

4）、在栽培容器（盆口内径×盆底内径×盆高=19.5×14×21cm）内铺设20cm厚的培养基质；

5）、将5叶龄的柑橘幼苗种植于步骤4）的栽培容器内，制得不进行抗旱菌剂接种处理（-AMF）的试验盆栽。

2、抗旱试验过程：

试验在一个玻璃温室进行，环境条件为：光子通量密度为982μmol/m²/s，昼夜温度为28/18℃，空气相对湿度为80%。每周对试验盆栽进行调整。

干旱处理前，对植株定期浇灌使其水分维持在75%的田间最大持水量。3个月后开始进行水分处理，分别保持75%的田间最大持水量（正常水分，WW）和保持55%的田间最大持水量（干旱胁迫，DS）。水分处理8周后收获植株。

试验设计

试验采用双因素处理：因素一为土壤水分处理（DS和WW），因素二为抗旱菌剂接种处理（+AMF）和不进行抗旱菌剂接种处理（-AMF），共四个处理。每个处理重复6次，随机排列，共24盆。

试验结果

1、本发明对试验盆栽的柑橘实生苗根系侵染率、土壤菌丝长度、株高、茎粗、叶片数、地上部鲜重和地下部鲜重进行了测量（试验结果参见表1）

表1 抗旱菌剂对柑橘实生苗菌根发育水平和生长发育的影响

注：同一列数字后不同小写字母表示处理间差异显著（p<0.05）。下同。

结果显示，没接种抗旱菌剂的处理组中未发现根系菌根侵染率和土壤菌丝，接种抗旱菌剂后，正常水分处理的菌根侵染率和土壤菌丝长度均显著高于干旱条件下对应的结果。干旱胁迫显著降低了柑橘实生苗的生长指标（株高、茎粗、叶片数）和生物量（地上部鲜重和地下部鲜重）。而无论干旱与否，接种抗旱菌剂均显著提高了柑橘实生苗的各项生长指标和生物量。

2、本发明采用了吴强盛所著，中国农业出版社, 2017发行的《植物生理学实验指导》中的鲜重法对试验盆栽的柑橘实生苗叶片相对含水量进行了检测（检测结果参见图1）。

从图1可以看出不论是否接菌，干旱胁迫均显著降低了柑橘实生苗叶片相对含水量。正常水分条件下接种抗旱菌剂处理的相对含水量相对与不接种抗旱菌剂处理的相对含水量显著提高了6.79%；干旱胁迫条件下接种抗旱菌剂处理的相对含水量相对与不接种抗旱菌剂处理的相对含水量显著提高了5.52%。

3、本发明采用了吴强盛所著，中国农业出版社, 2017发行的《植物生理学实验指导》中的小液流法对试验盆栽的柑橘实生苗叶片水势进行了检测（检测结果参见图2）。

从图2可以看出不论是否接种抗旱菌剂，干旱胁迫均显著降低了柑橘实生苗叶片水势。正常水分条件下接菌处理的叶片水势相对与不接菌处理的叶片水势显著提高23.61%；干旱胁迫条件下接菌处理的叶片水势相对与不接菌处理的叶片水势显著提高了16.46%。

4、本发明采用了王学奎所著，高等教育出版社, 2006发行的《植物生理生化实验原理和技术》第2版中的酶联免疫吸附检测法，对试验盆栽的柑橘实生苗根系中ABA浓度进行了检测，（检测结果参见图3）；

从图3可以看出试验盆栽不论是否接种抗旱菌剂，干旱胁迫均显著提高了柑橘实生苗根系ABA浓度，其中接种抗旱菌剂条件下干旱胁迫相对于正常水份提高了18.59%，没接种抗旱菌剂条件干旱胁迫相对于正常水份下提高了30.27%。

正常水分条件下接种抗旱菌剂处理的根系ABA浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系ABA浓度显著降低了9.31%；干旱胁迫条件下接种抗旱菌剂处理的根系ABA浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系ABA浓度显著降低了17.44%。

5、本发明采用了吴强盛所著，中国农业出版社, 2017发行的《植物生理学实验指导》中的方法对试验盆栽的柑橘实生苗根系中O₂ ^·−浓度进行了检测（检测结果参见图4）；

从图4可以得出试验盆栽不论是否接种抗旱菌剂，干旱胁迫均显著提高了柑橘实生苗根系O₂ ^·−浓度，其中接种抗旱菌剂条件下提高了62.91%，没接种抗旱菌剂条件下提高了30.55%。正常水分条件下接种抗旱菌剂处理的根系O₂ ^·−浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系O₂ ^·−浓度显著提高39.87%；干旱胁迫条件下接种抗旱菌剂处理的根系O₂ ^·−浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系O₂ ^·−浓度显著提高了24.96%。

6、本发明采用了王学奎所著，高等教育出版社, 2006发行的《植物生理生化实验原理和技术》第2版中的方法对试验盆栽的柑橘实生苗根系中MDA浓度进行了检测，（检测结果参见图5）；

从图5可以得出试验盆栽不论是否接菌，干旱胁迫均显著提高了柑橘实生苗根系MDA浓度，其中接菌条件下提高了16.03%，没接菌条件下提高了23.69%。正常水分条件下接种抗旱菌剂处理的根系MDA浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系MDA浓度显著提高16.42%；干旱胁迫条件下接种抗旱菌剂处理的根系MDA浓度相对与不接种抗旱菌剂处理的根系MDA浓度显著提高了21.59%。

7、本发明对试验盆栽中根系中4种脂肪酸去饱和酶基因的相对表达量进行了检测（检测结果参见图6）；

从图6可以得出干旱胁迫显著提高了接种抗旱菌剂处理的柑橘实生苗根系中PtFAD2、PtFAD6、

和不接种抗旱菌剂处理的柑橘实生苗根系中PtFAD2、PtFAD6、

、

的相对表达量。抗旱菌剂的接种将正常水分条件下柑橘实生苗根系中PtFAD2、PtFAD6和

的相对表达量显著提高了65.03%、217.13%和315.56%，将干旱胁迫条件下柑橘实生苗根系中PtFAD2、PtFAD6和

的相对表达量显著提高了320.07%、59.54% 和 68.60%。

8、本发明对试验盆栽中柑橘实生苗整株的生长状况进行了检测（检测结果参见图7）；

从图7中可以看出，正常水分接种抗旱菌剂的柑橘实生苗长势最好，根系最发达。其次是干旱胁迫下接种抗旱菌剂的柑橘实生苗，然后是对照组，即正常水分条件下没接种抗旱菌剂的柑橘实生苗，长势最差的是干旱胁迫下不接种抗旱菌剂的柑橘实生苗。

9、本发明采用气质联用色谱仪对试验盆栽中柑橘实生苗根系中34种脂肪酸及其不饱和度的进行了（测定结果参见表2）：

表2抗旱菌剂对柑橘实生苗根系34种脂肪酸及其不饱和度的影响

注: NA表示未检测出脂肪酸。 UIFA (脂肪酸不饱和指数) = 1 × mol% (C14:1+ C16:1 + C17:1 + C18:1 + C24:1) + 2 × mol% (C18:2 + C22:2) + 3 × mol%(C18:3N + C20:3N6) + 5 × mol% (C20:5N3)。

从上述结果来看，无论正常水分处理还是干旱胁迫，接种抗旱菌剂的柑橘实生苗根系中脂肪酸的不饱和度显著高于没接种抗旱菌剂的柑橘实生苗，在正常水分条件下提高了18.79%，干旱胁迫下提高了10.04%。根系中主要的饱和脂肪酸是C16:0和C18:0，分别占总脂肪酸含量的38.91%~44.61%和27.79%~30.16%，主要的不饱和脂肪酸是C18:1、C18:2和C18:3N3，分别占总脂肪酸含量的2.99%~5.34%、9.86%~13.72%和3.86%~5.58%。不管是否接种抗旱菌剂，干旱胁迫均显著降低了C14:1、C16:1、C17:1、C18:1、C18:2和C18:3N3的含量。与没接种抗旱菌剂的处理相比，正常水分条件下接种抗旱菌剂显著增加了柑橘实生苗根系中C14:1、C16:1、C17:1、C18:1、C18:2、C18:3N3、C20:3N6和C22:2的含量，分别增加了2.69%、138.33%、14.53%、4.78%、 24.9%、12.96%、28.15% 和16.5%，而干旱胁迫条件下增加了C14:1、C17:1、C18:1、C18:2、C20:3N6、C20:5N3和C22:2的含量，分别增加了66.96%、15.65%、14.33%、12.57%、81.48%、372.87%和72.63%。

从以上9处试验结果可以看出，接种抗旱菌剂能够通过降低柑橘实生苗根系中ABA、O₂ ^·−和MDA等胁迫信号物质的浓度来降低干旱胁迫对植物的影响。同时抗旱菌剂还能通过调节根系中脂肪酸去饱和酶基因的表达来调节根系中各种脂肪酸含量的变化和增加脂肪酸的不饱和度，从而达到保护膜脂的完整性和流动性，降低干旱胁迫对植物本身造成的影响，最终使植物叶片的相对含水量和水势显著增加，从而达到增强柑橘抗旱性的目的。

Claims

1.一种调节柑橘脂肪酸不饱和度抗旱菌剂的应用方法，所述的调节柑橘脂肪酸不饱和度的抗旱菌剂的制备方法包括以下步骤：

7）、将摘出的白三叶根系剪切成0.5—1cm长度的短节，然后与塑料盆中倒出的土壤混合充分，得抗旱菌剂成品；

其特征在于：所述的抗旱菌剂在大田中的具体应用方法如下：在柑橘植株正投影的紧挨树冠外沿部分挖掘一圈20-30cm宽的环槽，并使柑橘植株的根系显露出来；而后将抗旱菌剂均匀撒入环槽；抗旱菌剂铺设厚度为0.5—1cm，随后将挖出的土壤回填，并在土壤回填中均匀撒上白三叶种子，而后浇透水让其自然生长即可；

该抗旱菌剂是白三叶的根、土壤和摩西斗管囊霉菌剂的混合物;土壤中摩西斗管囊霉菌剂的摩西斗管囊霉菌体中孢子在适宜的土壤条件下萌发成菌丝；萌发的菌丝会附着并共生于萌发后白三叶根系中，在白三叶根系信号物质的诱导下，菌丝自身分支，然后与根系表皮或根毛接触,形成一个向外突起的类似附着胞结构；随后菌丝进入到根细胞，白三叶提供其菌丝生长发育需要的营养物质，进而促进的摩西斗管囊霉孢子萌发和繁殖更多的摩西斗管囊霉菌丝；

摩西斗管囊霉菌丝的存在能够扩大根系吸收水分的范围；且摩西斗管囊霉菌丝能够分泌一种球囊霉素，它能够增加土壤的团粒结构，使土壤更加透气保水；

2.根据权利要求1所述的一种调节柑橘脂肪酸不饱和度抗旱菌剂的应用方法，其特征在于：所述的抗旱菌剂在盆栽中的施用方法：

3）、取一株5叶龄的柑橘幼苗，并在盆栽容器中铺一层培养基质后再铺一层抗旱菌剂；培养基质的厚度和抗旱菌剂的厚度与柑橘幼苗整个根部高度的一半相等；然后人工将柑橘幼苗呈竖直状悬放在盆栽容器的中心，并使其下端根部与抗旱菌剂接触；随后依次铺设一层培养基质、一层抗旱菌剂和一层培养基质；铺设的培养基质的厚度与底层培养基质的厚度相等；铺设的抗旱菌剂厚度与先期铺设的抗旱菌剂厚度的比值为2:1；然后采用干浇透的浇水原则进行管理栽培即可制得盆栽植株。

3.根据权利要求2所述的一种调节柑橘脂肪酸不饱和度抗旱菌剂的应用方法，其特征在于：所述的摩西斗管囊霉菌剂由中国丛枝菌根真菌种质资源库提供。