CN104472228A - 一种菌根化银杏嫁接育苗方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种菌根化银杏嫁接育苗方法，涉及育苗育种技术领域，可以便于银杏嫁接菌根化苗木的繁育和推广。所述方法包括：制备富含VAM真菌的营养基质，用所述营养基质浇灌制作培养池，在所述培养池中种植VAM真菌寄主植物绿豆，将含VAM真菌共生体的接种物接种至绿豆苗的根部，收获绿豆后，其培养池中的混合物就是富含营养物质和VAM真菌的育苗基质；用所述育苗基质采用二桥嫁接方法培育菌根化银杏嫁接苗；进行苗期管理。本发明主要用于银杏嫁接菌根化苗木的繁育和推广。

Description

一种菌根化银杏嫁接育苗方法

技术领域

本发明涉及育苗育种技术领域，尤其涉及一种菌根化银杏嫁接育苗方法。

背景技术

银杏(Ginkgo biloba L.)，又名白果树、公孙树，是第四纪冰川运动后遗留下来的最古老的裸子植物，是世界上十分珍贵的树种之一，被当作植物界中的“活化石”。在自然条件下，银杏树生长慢，寿命长，从栽种到结银杏果要二十多年，犹如“公种而孙得食”故亦称“公孙树"。银杏树具有很高的药用、观赏和经济价值，人工繁育和栽植技术已十分普遍，而且，在长期的栽培过程中培育出了许多优良的栽培品种，这些栽培种大致分为三个类群：(1)佛手银杏类(长白果)，种子倒卵形，核狭长而尖，倒卵形，重3克左右，种仁味甘美。(2)梅核银杏类(圆白果)，种子圆形或稍呈心脏形，顶端微凹入，核卵形或广椭圆形，略扁，重2～2.5克，种仁有苦味，但较抗旱涝。(3)马铃银杏类(中间型)，形态及品质介于以上两类之间。种子顶端凸起有小尖，形似梅核类，核似佛手类。

银杏也是一种具有内生菌根的树种，其菌根具有典型的泡囊(Vesicles)和丛枝(Arbuscules)结构，简称V A菌根，是菌根类型中重要的一类。陈连庆，韩宁林(1999)曾对浙江省的银杏林共生真菌资源调查时发现能与银杏发生共生关系，形成V A菌根的真菌共有4属9种。泡囊-丛枝菌根真菌(Vesicalar-Arbuscular Mycorrhiza，简称VAM)，是内囊霉科(Endogonaceae)的部分真菌，能与植物根形成的共生体。与其它内生菌根共生体一样，泡囊-丛枝类真菌侵染银杏根系后，其菌丝能伸延到土壤中，从而扩大了植物的吸收面，提高对土壤营养物质的吸收，如P、N、S、Zn和水等物质，并能增强银杏对疾病的抵抗力和抗旱能力；反过来，银杏光合作用合成的糖类等营养物质可以输送给VAM真菌的内生菌丝，供其生长和繁殖。

虽然银杏菌根是一种普遍的自然现象，但由于存在诸多技术瓶颈，使得银杏菌根化技术还未在生产中得以广泛应用，特别是在嫁接苗繁育、栽培生产中。概括起来，在银杏嫁接菌根苗繁育方面还存在以下两方面的问题需要解决：(1)嫁接繁育方面。林木良种繁育最普遍和有效的方法是嫁接繁育，嫁接能有效保持母株的优良性状。如果用种子繁殖，其后代性状分异严重，无法保持母株优良特性，而且80％以上是雄株，雌株不足20％(陈章久1992年)。如果用扦插育苗，无论是硬枝扦插还是嫩枝扦插，其根系发育不良，不利于个体生长发育。虽然嫁接育苗能保持母株的优良性状，但在移栽之后，由于新栽植地土壤中缺乏能与银杏根系产生共生关系的内生真菌，或者土壤结构和菌根菌群落遭到破坏，菌根数量不足，苗木往往生长发育不良。(2)银杏VAM真菌培养方面。迄今为止，丛枝菌根真菌尚不能完全在离体条件下纯培养，只能依赖活体植物为寄主进行繁殖，适于活体繁殖或保存VAM真菌的宿主植物基本上都是根系发达的多年生或一年生草本植物(刘润进，李晓林，2000)，如：三叶草、苜蓿、烟草、苏丹草、百喜草、玉米、高梁、韭菜、葱等。到目前为止，活体宿主植物盆栽培养法被认为是最简单、最容易、也是最可靠的VAM真菌培养方法。

由于以上原因，银杏嫁接菌根化苗木繁育和推广受到了极大地限制，进而也影响到了银杏的商业化生产和应用。

发明内容

本发明的实施例提供一种菌根化银杏嫁接育苗方法，便于银杏嫁接菌根化苗木的繁育和推广。

为达到上述目的，本发明的实施例采用如下技术方案：

一种菌根化银杏嫁接育苗方法，主要包括如下步骤：

(1)制备富含VAM真菌的营养基质；

在苗木培育区附近修建沤置坑，坑深1.0-1.2m，体积6-10m3，用混凝土衬砌或聚乙烯塑料膜铺衬防渗；按重量比将沼气液3-6份、银杏落叶或豆秸粉碎物2-4份、猪粪或牛粪1-3份投入到沤置坑，并加入1-2份由硝酸钙、硝酸钾、碳酸氢铵、硫酸镁组成的混合营养液进行沤置，沤置时间不少于6个月，过夏；所得沤置液的pH值应控制在7.0-7.8之间；得营养基质；

(2)VAM真菌的增殖扩繁；

a、在银杏林下，顺栽植行修建宽1.0-1.2m，深0.3-0.4m的培养池，每隔2.5m修一个0.2m宽的操作步道；

b、培养基质的制作；

在培养池中填入林下表土；用步骤(1)所述营养基质浇灌，浇灌量为培养池体积的10％-20％，即每1米培养池约浇灌0.03-0.08立方沤置液，培养基质就制作完成；

c、种植VAM真菌寄主植物绿豆；

4月1日-4月4日播前，再给培养池浇足底水，土壤稍干后再浅翻，耙平；然后点播绿豆，行距15cm；株距5cm，播后覆盖地膜，出苗后将地膜去除，常规管理；

d、接种VAM真菌；

待绿豆长出2片以上真叶时，将含VAM真菌共生体的接种物接种至绿豆苗的根部；

培养50天后，再补浇一次营养基质，浇灌量为种植前的一半；

e、收获绿豆后，其培养池中的混合物就是富含营养物质和VAM真菌的育苗基质；

(3)培育菌根化银杏嫁接苗；

a、培育容器苗；

选用软塑料容器，先将步骤(2)中所述富含营养物质和VAM真菌菌丝的培养基质装入所述容器内，当营养真菌基质装至容器2/3处时，播种2粒银杏种子，要求带皮播入，将种子尖端朝下，中轴线尽量垂直于容器底平面，两粒种子胚根应相对而放，种子间隔2-3cm；播种之后再覆营养真菌基质至容器口；将播种好的容器整齐排列在预先整理好的苗床之上，摆放好之后，再用沙土填实容器间的空隙，然后覆盖草帘，淋水保持湿润，25-35天出苗；

b、二砧桥接；

第二年4月1日-4月10日，待苗根茎达到0.8-1.0cm，砧木苗顶侧芽刚刚萌动至展叶前就可以进行二砧桥接；

嫁接前10-15天，在良种树冠中上部剪取生长健壮、无病虫害的一年生枝条作为良种接穗；接穗保留2-3个饱满芽，长4-6cm，用石蜡封剪口，湿沙中保藏；

嫁接方法：将同一容器内的两个砧木距离地面10cm处剪断，在两砧相对的一面，距剪口3cm处，斜向上各切削一个斜面，使斜面接近或通过砧木苗髓心，两削面相对；选取与砧木苗茎粗细接近的接穗，在接穗芽基下3cm处相对一侧各切削一个斜面；然后将按穗夹在在两个砧术削面之中，对准形成层，先用细麻绳将2个砧木和接穗扎紧，再用塑料带将接口缠绕严，即可；

c、苗期管理

除常规管理(浇水、抹芽、除草等)外，在嫁接苗生长60天后，再用稀释了10倍的步骤(1)中所述营养基质浇灌1次，以促进苗木和菌丝生长。

作为优选方式，上述步骤(2)中所述接种物为菌根化的根段或带有VAM真菌的根际土，其中含有根内球囊霉(Glomus intraradices)，摩西球囊霉Glomusmosseae)，幼套球囊霉(Glomus etunicatum)和地表球囊霉(Glomus versiforme)中的一种或一种以上的混合菌体。

作为优选方式，上述步骤(3)中所述软塑料容器直径为8-10cm，高10-12cm。

由于采用菌根化和二砧桥接技术，培育的菌根化嫁接容器苗的优势主要体现在：(1)提高了嫁接成活率，嫁接成活率95％以上；(2)嫁接容器苗根系发达，根量比常规苗几乎多一倍；(3)容器苗生长健旺，当年生苗高生长可达80cm以上，比常规苗增加2-3倍；(4)菌根化有利于苗木适应新的土壤环境，移栽成活率能达到98％以上，而且生长迅速、健壮、抗病性强。

另外，本发明利用于培养银杏VAM的基质与现有技术不同，不仅基质配方不同于现有技术，而且配制的方法也不同。本发明在基质配方中加入了沼气液和银杏枝叶，方法采用了过夏沤置技术。所述VAM真菌的增殖扩繁是在在银杏林下进行，并采用常见的绿豆作为真菌寄主植物，方法简单易行，且有利于直接在田间操作。

本发明在菌根化处理的同时，还采用二桥嫁接方法，有利于提高苗木成活率，也有利于苗木后期健壮发育。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例提供了一种菌根化银杏嫁接育苗方法，主要包括如下步骤：

(1)制备富含VAM真菌的营养基质：

本发明首先要采用简单易行的方法大量生产银杏容器苗所需的营养基质，该营养基质不仅含有银杏苗所需的营养物质，还必须富含可以与银杏根系共生的VAM真菌。

在苗木培育区附近修建沤置坑，坑深1.0-1.2m，体积6-10m3，用混凝土衬砌或聚乙烯塑料膜铺衬防渗；按重量比将沼气液3-6份、银杏落叶或豆秸粉碎物2-4份、猪粪或牛粪1-3份投入到沤置坑，并加入1-2份由硝酸钙、硝酸钾、碳酸氢铵、硫酸镁组成的混合营养液进行沤置，沤置时间不少于6个月，过夏；所得沤置液的pH值应控制在7.0-7.8之间；得营养基质；

(2)VAM真菌的增殖扩繁；

在银杏林下，顺栽植行修建宽1.0-1.2m，深0.3-0.4m的培养池，每隔2.5m修一个0.2m宽的操作步道；在培养池中填入林下表土；用步骤(1)所述营养基质浇灌，浇灌量为培养池体积的10％-20％，即每1米培养池约浇灌0.06-0.09立方沤置液，培养基质就制作完成；

4月1日-4月4日播前，再给培养池浇足底水，土壤稍干后再浅翻，耙平；然后点播绿豆，行距15cm；株距5cm，播后覆盖地膜，出苗后将地膜去除，常规管理；

待绿豆长出2片以上真叶时，将含VAM真菌共生体的接种物接种至绿豆苗的根部；

所述接种物为菌根化的根段或带有VAM真菌的根际土，其中含有根内球囊霉(Glomus intraradices)，摩西球囊霉Glomus mosseae)，幼套球囊霉(Glomusetunicatum)，地表球囊霉(Glomus versiforme)中的一种或一种以上的混合菌体。

培养50天后，再补浇一次营养基质，浇灌量为种植前的一半；最终的营养真菌基质；

收获绿豆后，其培养池中的混合物就是富含营养物质和VAM真菌的育苗基质；

(3)培育菌根化银杏嫁接苗；

a、培育容器苗；

选用软塑料容器，所述软塑料容器直径为8-10cm，高10-12cm；先将步骤(2)中所述富含营养物质和VAM真菌菌丝的育苗基质装入所述容器，当育苗基质装至容器2/3处时，播种2粒银杏种子，要求带皮播入，将种子尖端朝下，中轴线尽量垂直于容器底平面，两粒种子胚根应相对而放，种子间隔2-3cm；播种之后再覆育苗基质至袋口；将播种好的营养袋整齐排列在预先整理好的苗床之上，摆放好之后，再用沙土填实容器间的空隙，然后覆盖草帘，淋水保持湿润，25-35天出苗；

b、二砧桥接；

第二年4月1日-4月10日，苗根茎达到0.8-1.0cm，砧木苗顶侧芽刚刚萌动至展叶前就可以进行二砧桥接；

嫁接前10-15天，在良种树冠中上部剪取生长健壮、无病虫害的一年生枝条作为良种接穗；接穗保留2-3个饱满芽，长4-6cm，用石蜡封剪口，湿沙中保藏；

嫁接方法：将同一容器内的两各砧木距离地面10cm处剪断，在两砧相对的一面，距剪口3cm处，斜向上各切削一个斜面，使斜面接近或通过砧木苗髓心，两削面相对；选取与砧木苗茎粗细接近的接穗，在接穗芽基下3cm处相对一侧各切削一个斜面；然后将按穗夹在在两个砧术削面之中，对准形成层，先用细麻绳将2个砧木和接穗扎紧，再用塑料带将接口缠绕严，即可；

c、苗期管理

除常规管理(浇水、抹芽、除草等)外，在嫁接苗生长60天后，再用稀释了10倍的步骤(1)中所述营养基质浇灌1次，以促进苗木和菌丝生长。

应用上述方法进行嫁接育苗，可以发现嫁接容器苗根系发达，根量比常规苗几乎多一倍；容器苗生长健旺，当年生苗高生长可达80cm以上，比常规苗增加2-3倍；菌根化有利于苗木适应新的土壤环境，移栽成活率能达到98％以上，而且生长迅速、健壮、抗病性强。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。

Claims (3)

1.一种菌根化银杏嫁接育苗方法，其特征在于，主要包括如下步骤：

(1)制备富含VAM真菌的营养基质；

在苗木培育区附近修建沤置坑，坑深1.0-1.2m，体积6-10m³，用混凝土衬砌或聚乙烯塑料膜铺衬防渗；按重量比将沼气液3-6份、银杏落叶或豆秸粉碎物2-4份、猪粪或牛粪1-3份投入到沤置坑，并加入1-2份由硝酸钙、硝酸钾、碳酸氢铵、硫酸镁组成的混合营养液进行沤置，沤置时间不少于6个月，过夏；所得沤置液的pH值控制在7.0-7.8之间；得营养基质；

(2)VAM真菌的增殖扩繁；

a、在银杏林下，顺栽植行修建宽1.0-1.2m，深0.3-0.4m的培养池，每隔2.5m修一个0.2m宽的操作步道；

b、培养基质的制作；

在培养池中填入林下表土；用步骤(1)所述营养基质浇灌，浇灌量为培养池体积的10％-20％，即每1米培养池约浇灌0.03-0.08立方沤置液，培养基质就制作完成；

c、种植VAM真菌寄主植物绿豆；

4月1日-4月4日播前，再给培养池浇足底水，土壤稍干后再浅翻，耙平；然后点播绿豆，行距15cm；株距5cm，播后覆盖地膜，出苗后将地膜去除，常规管理；

d、接种VAM真菌；

待绿豆长出2片以上真叶时，将含VAM真菌共生体的接种物接种至绿豆苗的根部；

培养50天后，再补浇一次营养基质，浇灌量为种植前的一半；

e、收获绿豆后，其培养池中的混合物就是富含营养物质和VAM真菌的育苗基质；

(3)培育菌根化银杏嫁接苗；

a、培育容器苗；

选用软塑料容器，先将步骤(2)中所述富含营养物质和VAM真菌的育苗基质装入所述容器，当所述育苗基质装至容器2/3处时，播种2粒银杏种子，要求带皮播入，将种子尖端朝下，中轴线尽量垂直于容器底平面，两粒种子胚根应相对而放，种子间隔2-3cm；播种之后再覆所述育苗基质至容器口；将播种好的容器整齐排列在预先整理好的苗床之上，摆放好之后，再用沙土填实容器间的空隙，然后覆盖草帘，淋水保持湿润，25-35天出苗；

b、二砧桥接；

第二年4月1日-4月10日，苗根茎达到0.8-1.0cm，砧木苗顶侧芽刚刚萌动至展叶前就可以进行二砧桥接；

嫁接前10-15天，在良种树冠中上部剪取生长健壮、无病虫害的一年生枝条作为良种接穗；接穗保留2-3个饱满芽，长4-6cm，用石蜡封剪口，湿沙中保藏；

嫁接方法：将同一容器内的两个砧木距离地面10cm处剪断，在两砧相对的一面，距剪口3cm处，斜向上各切削一个斜面，使斜面接近或通过砧木苗髓心，两削面相对；选取与砧木苗茎粗细接近的接穗，在接穗芽基下3cm处相对一侧各切削一个斜面；然后将按穗夹在在两个砧术削面之中，对准形成层，先用细麻绳将2个砧木和接穗扎紧，再用塑料带将接口缠绕严，即可；

c、苗期管理

除常规管理外，在嫁接苗生长60天后，再用稀释了10倍的步骤(1)中所述营养基质浇灌1次，以促进苗木和菌丝生长。

2.根据权利要求1所述的菌根化银杏嫁接育苗方法，其特征在于，步骤(2)中所述接种物为菌根化的根段或带有VAM真菌的根际土，所述接种物中含有根内球囊霉，摩西球囊霉，幼套球囊霉，地表球囊霉中的一种或一种以上的混合菌体。

3.根据权利要求1所述的菌根化银杏嫁接育苗方法，其特征在于，步骤(3)中所述软塑料容器直径为8-10cm，高10-12cm。