CN109477831A - 靶标分析试剂盒和靶标分析方法 - Google Patents

靶标分析试剂盒和靶标分析方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供靶标分析试剂盒和靶标分析方法，其使得能够容易地分析靶标。靶标分析试剂盒包括：样品保持装置；和分析容器。样品保持装置包括：容纳第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是容纳第一试剂的溶液；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室；和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳第二试剂。第二室是要在其中检测在第一试剂或第二试剂中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第一结合物质或固定化第二结合物质不能通过并且结合体或标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁，所述固定化第一结合物质是通过将与靶标结合的第一结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述固定化第二结合物质是通过将与第一结合物质结合的第二结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述结合体由标记化第一结合物质和靶标组成并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与第一结合物质结合获得的，所述标记化第二结合物质是通过将标记物质与第二结合物质结合获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中。第一试剂和第二试剂的组合是以下组合(1)至(3)和(4)中的任一种：(1)第一试剂是固定化第二结合物质，并且第二试剂是标记化第一结合物质；(2)第一试剂是标记化第一结合物质，并且第二试剂是固定化第二结合物质；(3)第一试剂是固定化第一结合物质，并且第二试剂是标记化第二结合物质；以及(4)第一试剂是标记化第二结合物质，并且第二试剂是固定化第一结合物质。

Description

靶标分析试剂盒和靶标分析方法
技术领域
本发明涉及靶标分析试剂盒和靶标分析方法.
背景技术
通常，使用对靶标具有结合亲和性的结合物质来进行靶标分析，并且可以通过使结合物质与靶标形成结合体并且直接或间接地检测由此形成的结合体来分析靶标是否存在或靶标的量(专利文献1和2)。
然而，以上述方式使用结合物质进行的分析方法需要将与靶标结合的结合物质和未与靶标结合的结合物质分离的过程。因此，难以在单个分析工具(分析容器)中进行一系列过程和检测靶标。
引用清单
专利文献
[专利文献1]PCT国际申请公布号JP-T-2014-507670的日语译文
[专利文献2]PCT国际申请公布号JP-T-2007-518994的日语译文
发明概述
技术问题
考虑到前述内容，本发明的一个目的是提供用于容易地分析靶标的靶标分析试剂盒。
问题的解决方案
本发明提供了一种靶标分析试剂盒(在下文中也称为“分析试剂盒”)，其包括：样品保持装置；和分析容器。样品保持装置包括：容纳第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是容纳第一试剂的溶液；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室；和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳第二试剂。第二室是要在其中检测在第一试剂或第二试剂中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第一结合物质或固定化第二结合物质不能通过并且结合体或标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁，所述固定化第一结合物质是通过将与靶标结合的第一结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述固定化第二结合物质是通过将与第一结合物质结合的第二结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述结合体由标记化第一结合物质和靶标组成并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与第一结合物质结合获得的，所述标记化第二结合物质是通过将标记物质与第二结合物质结合获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中。第一试剂和第二试剂的组合是以下组合(1)至(3)和(4)中的任一种：
(1)第一试剂是固定化第二结合物质，并且第二试剂是标记化第一结合物质；
(2)第一试剂是标记化第一结合物质，并且第二试剂是固定化第二结合物质；
(3)第一试剂是固定化第一结合物质，并且第二试剂是标记化第二结合物质；以及
(4)第一试剂是标记化第二结合物质，并且第二试剂是固定化第一结合物质。
本发明还提供了一种使用根据本发明的靶标分析试剂盒的靶标分析方法(在下文中也称为“分析方法”)。该靶标分析方法包括以下步骤：通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，来将样品和第一试剂溶液引入到所述第一室；在第一室中，使样品与第一试剂和第二试剂接触以形成样品中的靶标与第一结合物质的结合体，以及使未与所述靶标结合的未结合的第一结合物质与第二结合物质结合；将未与固定化第一结合物质结合的未结合的标记化第二结合物质或未与固定化第二结合物质结合的未结合的标记化第一结合物质通过在第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和在第二室中检测在标记化第一结合物质或标记化第二结合物质中的标记物质。
发明的有益效果
根据本发明的靶标分析试剂盒，可以容易地分析样品中的靶标。
附图简述
[图1]图1是示出第一示例性实施方案的靶标分析试剂盒的一个实例的示意图。
[图2A至2C]图2A至2C示意性地示出了使用第一示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法的一个实例。
[图3]图3是示出第二示例性实施方案的靶标分析试剂盒的一个实例的示意图。
[图4A至4C]图4A至4C示意性地示出了使用第二示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法的一个实例。
[图5]图5是示出第三示例性实施方案的靶标分析试剂盒的一个实例的示意图。
[图6A至6C]图6A至6C示意性地示出了使用第三示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法的一个实例。
实施方案描述
本发明的分析试剂盒可以配置成使得，例如，液体转移部包括：连接试剂室和保持部的管；和在试剂室中将管密封的密封部，并且当通过从试剂室的外部施加的力使液体转移部在试剂室内部破裂，由此打开管时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
本发明的分析试剂盒可以配置成使得，例如，液体转移部包括：连接试剂室和保持部的管；和设置为将在试剂室和管之间的连接部阻塞的盖子，并且当通过从试剂室的外部施加的力使盖子移动，由此打开连接部时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
本发明的分析试剂盒可以配置成使得，例如，液体转移部是用于破坏试剂室的底面的破坏部，破坏部设置为在远离试剂室的底面的方向上与底面分开，并且当通过从试剂室的外部施加的力使破坏部与底面接触，由此破坏底面时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
在本发明的分析试剂盒中，例如，第一结合物质是适配体。
在本发明的分析试剂盒中，例如，第二结合物质是与适配体互补的核酸分子。
在本发明的分析试剂盒中，例如，标记物质可以是选自由酶、核酸、荧光物质、染料物质、发光物质、放射活性物质和电子供体组成的组中的至少一种物质。
在本发明的分析试剂盒中，例如，载体是珠子。
在本发明的分析试剂盒中，例如，第二室设置有至少一个通孔，可打开的闭合元件以覆盖通孔的状态设置在通孔上，并且通过从闭合元件释放通孔来实现从第一室到第二室的液体转移。
在本发明的分析试剂盒中，例如，闭合元件是可剥离的密封元件，密封元件以覆盖通孔的状态设置在第二室的外表面上，并且通过从通孔剥离密封元件来实现从第一室到第二室的液体转移。
在本发明的分析试剂盒中，例如，闭合元件是可移除的棒状元件，棒状元件以覆盖通孔的状态设置在第二室的外表面上，并且通过从通孔移除棒状元件来实现从第一室到第二室的液体转移。
在本发明的试剂盒中，例如，第一室在与第二室相反的一侧具有前分隔壁，所述前分隔壁在与样品保持装置的尖端接触时破裂。
在本发明的分析试剂盒中，例如，第一室与预处理室顺序地设置，其中预处理室在与第二室相反的一侧，预处理室配置成使得样品保持装置可以从预处理室的外部插入到预处理室的内部，并且预处理室容纳用于从样品中萃取组分的萃取剂，分隔壁设置在预处理室和第一室之间，并且分隔壁是在与插入到预处理室中的样品保持装置的尖端接触时破裂的分隔壁。
在本发明的分析试剂盒中，例如，预处理室在与预处理室和第一室之间的分隔壁相反的一侧包括用于预处理室的开口的覆盖物，并且覆盖物配置成使得样品保持装置可以从覆盖物的外部插入到预处理室的内部。
在本发明的分析方法中，例如，使用包括管和密封部的本发明的靶标分析试剂盒，并且当通过从试剂室的外部施加的力使液体转移部在试剂室内部破裂，由此打开管时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
在本发明的分析方法中，例如，使用包括管和盖子的本发明的靶标分析试剂盒，并且当通过从试剂室的外部施加的力使盖子移动，由此打开连接部时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
在本发明的分析方法中，例如，使用包括破坏部的本发明的靶标分析试剂盒，并且当通过从试剂室的外部施加的力使破坏部与底面接触，由此破坏底面时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
在本发明中，术语“朝上方向”意指，例如，与本发明分析容器底面的平面方向垂直的方向，其也是从第二室朝第一室延伸的方向，并且术语“朝下(底)方向”意指与朝上方向相反的方向。
[靶标分析试剂盒和靶标分析方法]
如上所述，本发明的靶标分析试剂盒是包括样品保持装置和分析容器的靶标分析试剂盒。样品保持装置包括：容纳第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是容纳第一试剂的溶液；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室；和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳第二试剂。第二室是要在其中检测在第一试剂或第二试剂中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第一结合物质或固定化第二结合物质不能通过并且结合体或标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁，所述固定化第一结合物质是通过将与靶标结合的第一结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述固定化第二结合物质是通过将与第一结合物质结合的第二结合物质固定在载体上获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述结合体由标记化第一结合物质和靶标组成并且包含在第一试剂或第二试剂中，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与第一结合物质结合获得的，所述标记化第二结合物质是通过将标记物质与第二结合物质结合获得的并且包含在第一试剂或第二试剂中。第一试剂和第二试剂的组合是以下组合(1)至(3)和(4)中的任一种：
(1)第一试剂是固定化第二结合物质，并且第二试剂是标记化第一结合物质；
(2)第一试剂是标记化第一结合物质，并且第二试剂是固定化第二结合物质；
(3)第一试剂是固定化第一结合物质，并且第二试剂是标记化第二结合物质；以及
(4)第一试剂是标记化第二结合物质，并且第二试剂是固定化第一结合物质。
如上所述，本发明的靶标分析方法是使用根据本发明的靶标分析试剂盒的靶标分析方法。该靶标分析方法包括以下步骤：通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，来将样品和第一试剂溶液引入到所述第一室；在第一室中，使样品与第一试剂和第二试剂接触以形成样品中的靶标与第一结合物质的结合体，以及使未与所述靶标结合的未结合的第一结合物质与第二结合物质结合；将未与固定化第一结合物质结合的未结合的标记化第二结合物质或未与固定化第二结合物质结合的未结合的标记化第一结合物质通过在第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和在第二室中检测在标记化第一结合物质或标记化第二结合物质中的标记物质。
如本发明中所使用的术语“分析”可以意指，例如，用于确定是否存在靶标的定性分析或用于确定靶标的量的定量分析。
在本发明中，例如，与所使用的靶标结合的第一结合物质不限于特定类型的结合物质，只要它们与靶标结合即可。具体地，例如，第一结合物质可以是适配体或抗体。
以下将参照附图和说明下实施例说明根据本发明的分析试剂盒和分析方法。然而，应注意，本发明不限于这些说明性实施例或不受这些说明性实施例限制。在附图中，为了便于举例说明，各部件的结构可以适当地以简化形式示出，并且各部件可以以与实际尺寸比等不同的尺寸比等示意性地示出。除非另外说明，各示例性实施方案可以彼此组合。
(第一示例性实施方案)
本示例性实施方案涉及一种分析试剂盒，其配置成使得：第一试剂和第二试剂的组合是组合(1)；包括连接试剂室和保持部的管以及在试剂室中将管密封的密封部；并且当通过从试剂室的外部施加的力使液体转移部在试剂室内部破裂，由此打开管时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，并且本示例性实施方案还涉及一种使用此试剂盒的分析方法。在本示例性实施方案中，第一试剂和第二试剂的组合不限于此，并且例如可以是组合(2)、(3)或(4)，并且关于第一试剂和第二试剂的说明应解释为可彼此互换。
第一示例性实施方案的分析试剂盒包括：样品保持装置；和分析容器。样品保持装置包括：容纳作为第一试剂的第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是含有固定化第二结合物质的溶液，所述固定化第二结合物质是通过将与第一结合物质结合的第二结合物质固定在一个或多个载体上获得的，所述第一结合物质与靶标结合；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳作为第二试剂的标记化第一结合物质，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与第一结合物质结合获得的。第二室是要在其中检测在标记化第一结合物质中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第二结合物质不能通过并且标记化第一结合物质与靶标的结合体可以通过的多孔分隔壁。液体转移部包括：连接试剂室和保持部的管；和在试剂室中将管密封的密封部，并且当通过从试剂室的外部施加的力使在试剂室内部的液体转移部破裂，由此打开管时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
第一示例性实施方案的分析方法是使用第一示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法，其包括以下步骤：通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后通过用从试剂室的外部施加的力破坏在试剂室中的液体转移部，由此打开管，将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，来将样品和第一试剂溶液引入到第一室；在第一室中，使样品与第一试剂和第二试剂接触以形成样品中的靶标与标记化第一结合物质的结合体，以及使未与靶标结合的未结合的标记化第一结合物质与固定化第二结合物质结合；将未与固定化第二结合物质结合的未结合的标记化第一结合物质和结合体通过在第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和在第二室中检测在标记化第一结合物质中的标记物质。
根据本示例性实施方案，首先，在第一室中，例如，将样品中的靶标、作为第一试剂的固定化第二结合物质和作为第二试剂的标记化第一结合物质混合到一起。然后，在第一室中，作为第二试剂的标记化第一结合物质与样品中的靶标结合，并且未与靶标结合的标记化第一结合物质与作为第一试剂的固定化第二结合物质结合。在第一室和第二室之间的多孔分隔壁是固定化第二结合物质不能通过并且标记化第一结合物质与靶标的结合体可以通过的多孔分隔壁。因此，固定化第二结合物质不通过多孔分隔壁，由此保留在第一室中。也就是说，与固定化第二结合物质结合的标记化第一结合物质保留在第一室中而不移动到第二室。另一方面，将未与固定化第二结合物质结合的处于游离状态的标记化第一结合物质，即形成结合体的标记化第一结合物质通过多孔分隔壁引入到第二室。例如，本示例性实施方案的分析试剂盒可以含有已知量的标记化第一结合物质。因此，未与固定化第二结合物质结合的标记化第一结合物质的量间接地与样品中的靶标的量相关。因此，通过检测未与固定化第二结合物质结合并且被引入到第二室的未结合的标记化第一结合物质，可以间接地分析是否存在靶标或样品中的靶标的量。
以下将参照实施例说明根据第一示例性实施方案的第一靶标分析试剂盒和使用该第一靶标分析试剂盒的根据第一示例性实施方案的靶标分析方法，其中使用适配体作为第一结合物质。
在本示例性实施方案中，在标记化第一结合物质中的第一结合物质是适配体。适配体没有限制，只要它们可以与靶标结合即可。适配体可以是例如DNA适配体、RNA适配体或含有DNA和RNA的嵌合适配体。适配体可以由天然核酸或非天然核酸构成，或者可以含有天然核酸和非天然核酸。例如，适配体可以是改性适配体。例如，适配体可以是单链的。
在固定化第二结合物质中的第二结合物质没有限制，只要它们可以与适配体结合即可，例如，与适配体互补的核酸分子(在下文中也称为“互补核酸分子”或“互补链”)。例如，与适配体互补的核酸分子不限于与适配体100％互补的那些，并且可以具有足以与适配体或其部分序列杂交的互补性。互补性可以是，例如，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％，或100％。通过使用互补核酸分子作为第二结合物质，例如，可以容易地引起靶标、标记化第一结合物质和固定化第二结合物质之间的反应。因此，可以缩短反应时间，以及可以实现较高的灵敏度和较宽的动态范围。例如，优选的是互补核酸分子不与靶标结合。
在标记化第一结合物质中的标记物质的实例包括酶、核酸、荧光物质、染料物质、发光物质、放射活性物质和电子供体。例如，核酸可以是表现出催化功能的催化性核酸分子。酶可以是，例如，萤光素酶、过氧化物酶(如辣根过氧化物酶(HRP))或碱性磷酸酶。
例如，在固定化第二结合物质中的载体可以是珠子。珠子的材料没有特别限制，并且例如可以是聚合物如琼脂糖、琼脂糖凝胶或纤维素。例如，珠子可以是磁性珠。磁性珠可以是，例如，由磁性材料构成的珠子、含有磁性材料的珠子或涂覆有磁性材料的珠子。磁性材料可以是例如可磁化物质，并且其具体实例包括γ-Fe2O3和Fe3O4。珠子的形状没有特别限制，并且例如可以是球形如完全球形。珠子的平均直径没有特别限制，并且例如可以是1至10μm、10至100μm或100至1000μm。例如，载体可以使用树脂如Sepharose或Sephadex形成。当载体是珠子时，待固定在载体(珠子)上的互补链的量没有特别限制，并且可以是，例如，每mm2珠子表面积0.1fmol至100pmol、1fmol至10pmol或10fmol至1pmol。在固定化第一结合物质或固定化第二结合物质设置在第一室中的情况下，载体可以是第一室的内壁。当载体是第一室的内壁时，待固定在载体(内壁)上的第一结合物质或第二结合物质的量没有特别限制，并且可以是，例如，每mm2第二室内壁面积0.1fmol至100pmol、1fmol至10pmol或10fmol至1pmol。
第一试剂溶液是含有作为第一试剂的固定化第二结合物质的溶液。例如，固定化第一结合物质分散在溶剂中。溶剂可以是，例如，水性溶剂(如水)、缓冲溶液、生理盐水或其混合物。第一试剂溶液还可以含有用于从样品中萃取一种或多种组分的萃取剂。萃取剂没有特别限制，并且可以根据待进行分析的样品的类型、待分析组分的类型等适当地选择。
催化性核酸分子没有特别限制，并且可以是例如DNAzyme或RNAzyme。例如，在标记化第一结合物质中的催化性核酸分子优选地表现出催化功能，无论靶标是否已经与标记化第一结合物质结合。结合物质和催化性核酸分子之间的结合形式没有特别限制，并且可以例如是磷酸二酯键。例如，结合物质和催化性核酸分子可以直接地或经由连接体间接地结合。例如，连接体可以是由DNA和RNA中的至少一种构成的核酸分子。例如，催化性核酸分子优选为单链的。当标记物质是催化性核酸分子时，催化性核酸分子可以既作为标记物质又作为第一结合物质。也就是说，如果催化性核酸分子与第一结合物质互补，则催化性核酸分子可以用作标记化第一结合物质。
样品没有特别限制，并且例如可以是食品来源样品。食品来源样品的实例包括食品，食品成分，食品添加剂，在食品加工厂、厨房等中的附着物，以及在洗涤食品加工厂、厨房等后获得的液体。样品的形式没有特别限制，并且样品例如可以是液体或固体。例如，当样品是固体时，样品可以是使用溶剂制备的混合溶液、提取物、溶解溶液等的形式。溶剂没有特别限制，并且可以是，例如，水、生理盐水或缓冲液。例如，样品可以含有或不含有靶标，或者样品是否含有靶标是未知的。
在本示例性实施方案中，如上所述，可以使用适配体作为第一结合物质，并且可以使用互补核酸分子作为第二结合物质。因此，本示例性实施方案的靶标分析试剂盒是热稳定的，并且例如可以更容易地储存。例如，还能够使用酶如萤光素酶、碱性磷酸酶或过氧化物酶作为标记物质，因此，例如，能够以高灵敏度分析靶标。
在第一室和第二室之间的多孔分隔壁是固定化第二结合物质不能通过并且结合体可以通过的多孔分隔壁。例如，多孔分隔壁的孔尺寸可以根据固定化第二结合物质和结合体的尺寸适当地设定。多孔分隔壁的孔尺寸是，例如，0.2至100μm、0.2至50μm或0.5至10μm。在第一试剂和第二试剂的组合是组合(3)或(4)，即固定化第一结合物质和标记化第二结合物质的组合的情况下，多孔分隔壁可以是固定化第一结合物质不能通过并且标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁。例如，多孔分隔壁的孔尺寸可以根据固定化第一结合物质和标记化第二结合物质的尺寸适当地设定。
当使用催化性核酸分子作为标记物质时，优选的是第一室还容纳和第二试剂一起的吸附载体，所述吸附载体吸附蛋白质和脂质中的至少一种。当第一室容纳吸附载体时，吸附载体吸附第一室中的蛋白质、脂质等。这例如防止可能影响催化性核酸分子的催化功能的蛋白质、脂质等被引入到第二室，因此，可以更准确地检测在第二室中的未结合的标记化第一结合物质。在本示例性实施方案中，作为与靶标结合的第一结合物质的适配体和作为与第一结合物质结合的第二结合物质的互补核酸分子都是核酸。因此，通过使用吸附载体将作为不同于核酸的组分的蛋白质、脂质等保持在第一室中，可以更准确地进行靶标分析。
吸附载体的材料没有特别限制，并且可以是，例如，二氧化硅、具有多孔结构的交联聚合物和活性炭。吸附载体的形状没有特别限制，并且例如，吸附载体可以是珠子。例如，优选地，吸附载体是二氧化硅珠。吸附载体的尺寸没有特别限制，并且例如，优选为使得吸附载体不能通过多孔分隔壁。例如，吸附载体可以具有与在固定化第二结合物质中的载体相同的尺寸。
当在标记化第一结合物质中的标记物质是催化性核酸分子或酶时，例如，优选的是第二室还容纳用于催化性核酸分子或酶的催化功能的底物。例如，作为底物，可以组合使用ATP和萤光素，或者可以使用鲁米诺(luminol)反应溶液。
将参照附图具体说明使用第一示例性实施方案的分析试剂盒的分析方法的实施例。然而，应注意，本发明不限于此说明性实施例。
图1示意性地示出了第一示例性实施方案的分析试剂盒。如图1所示，第一示例性实施方案的分析试剂盒1包括分析容器2和样品保持装置3。分析容器2具有第一室21和第二室22，其从开口侧以此次序顺序地设置，并且分析容器2具有设置在第一室21和第二室22之间的多孔分隔壁211。在第一室21中，设置通过将酶282加入适配体281中获得的标记的适配体28。另一方面，样品保持装置3具有试剂室32、保持部33和连接试剂室32和保持部33的液体转移部34。在试剂室32中，设置第一试剂溶液，其含有通过将适配体281的互补链291固定在珠子上获得的固定化的互补链29。液体转移部34包括管341和在试剂室32中将管341密封的密封部342。通过密封部342将管341在试剂室32侧的一端密封，并且管341的另一端连接到保持部33。样品保持装置3利用保持部33收集样品。例如，样品中的靶标31等附着到保持部33。
本示例性实施方案的分析容器2的形状没有特别限制，并且可以是任意形状。形成本示例性实施方案的分析容器2的材料没有特别限制，并且可以是任意材料。其具体实例包括塑料，如聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯和丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物合成树脂。在分析容器2中，第一室21和第二室22的尺寸没有特别限制，并且可以根据例如待分析样品的体积等适当地设置。
在第一室21和第二室22之间的多孔分隔壁211如上所述是多孔分隔壁。多孔分隔壁没有特别限制，并且例如可以是多孔膜等。多孔膜可以是，例如，纤维素膜、由纤维素衍生物如乙酸纤维素或硝酸纤维素形成的膜、过滤器如玻璃过滤器、滤纸等。多孔分隔壁的孔尺寸没有特别限制，并且可以根据将设置在分析容器2中的试剂等适当地设定。
在本示例性实施方案的样品保持装置3中，试剂室32的形状没有特别限制，并且可以是任意形状。形成试剂室32的材料没有特别限制，并且可以是例如能够通过从试剂室32的外部施加的力被变形的材料。其具体实例包括上述塑料。
保持部33的形状没有特别限制，并且保持部33可以具有用其能够容易地收集样品的结构，如棉签形式、勺状形状或环形的结构。形成保持部33的材料没有特别限制，并且可以是例如能够用液体浸渍并且具有液体渗透性的材料。材料的具体实例包括：纤维材料如棉和合成纤维；合成树脂如发泡聚氨酯；及其组合。具有液体渗透性的材料意指，例如，使已经通过管341移动到保持部33内部的第一试剂溶液移动到保持部33的外部的材料。
管341是中空管，并且当液体转移部34在试剂室32中破裂时，允许第一试剂溶液在管内部转移。尽管在本示例性实施方案中管341没有底部，但是对此没有限制，并且管341可以是在下端侧具有底部的有底管。在此情况下，例如，管341在其在保持部33侧的一端具有至少一个通孔。于是，在管341是具有通孔的有底管的情况下，当液体转移部34破裂时，第一试剂溶液在管内部移动，通过通孔从管流出，并且沿着管341的外壁移动。以此方式，第一试剂溶液转移到保持部33。形成管341的材料没有特别限制，并且其实例包括上述塑料。管341的尺寸没有特别限制。例如，管341可以具有使得当将试剂保持装置3设置在分析容器2中时，保持部33的下端与多孔分隔壁211接触或不与多孔分隔壁211接触的长度。优选地，管341的长度是后者。
尽管在本示例性实施方案中密封部342为棒形，但是密封部342的形状不限于此，只要其可以将管341密封即可，具体地，只要其可以在液体转移部34未破裂的状态下防止在试剂室32中的第一试剂溶液转移到保持部33即可。形成密封部342的材料没有特别限制，并且其实例包括上述塑料。密封部342的尺寸没有特别限制。尽管在本示例性实施方案中密封部342的尺寸基本上与管341的尺寸相同，但是本发明不限于此，并且密封部342的尺寸可以与管341的尺寸不同。例如，密封部342可以具有这样的形状：该形状使得与液体转移部34的其他部分相比，与管341一起的连接部可以通过从试剂室32的外部施加的力容易地破裂。
接下来，将参照图2说明使用图1所示的分析试剂盒1的分析方法。图2示意性地示出了使用分析试剂盒1的方法。
首先，如图2A所示，将在保持部33中保持样品的样品保持装置3插入到分析试剂盒中的分析容器2的第一室21中。接下来，通过按压样品保持装置3，使液体转移部34在试剂室32中破裂并且打开管341。然后，如图2B所示，允许通过管341的液体转移，并且在试剂室32中的第一试剂通过管341的开口和内部从保持部33移动到第一室21。然后，在第一室21中，将样品中的靶标31、固定化的互补链29和标记的适配体28混合到一起。作为混合的结果，标记的适配体28与靶标31形成结合体，并且未与靶标31结合的标记的适配体28与固定化的互补链29结合。用于将它们混合的处理条件没有特别限制，并且例如可以如下：处理温度为4℃至37℃，并且处理时间为10秒至30分钟。例如，用于将它们混合的处理在液体溶剂中进行，并且液体溶剂可以是例如水性溶剂如水、缓冲溶液、生理盐水或其混合物。
多孔分隔壁211是固定化的互补链29不通过并且标记的适配体28与靶标的结合体通过的多孔分隔壁。因此，在标记的适配体28中，仅未与固定化的互补链29结合的那些通过多孔分隔壁211而被引入到第二室22中。然后，在第二室22中，通过对未与固定化的互补链29结合的标记的适配体28进行酶282的催化功能的测量，可以间接地分析样品中的靶标。用于测量酶282的催化功能的方法可以根据酶282的类型适当地确定。
本示例性实施方案的分析容器2还可以包括以下示例性实施方案中的一个或多个。以下各示例性实施方案可以与下文描述的第二和第二示例性实施方案的分析容器组合。
在分析容器2中，第二室22可以设置有至少一个通孔。在此情况下，可打开的闭合元件以覆盖通孔的状态设置在通孔上，并且通过从闭合元件释放通孔来实现从第一室21到第二室22的液体转移。闭合元件可以是，例如，可剥离的密封元件、可移除的棒状元件等。当分析容器2包括例如通孔和闭合元件时，通孔的打开和闭合可以通过闭合元件控制，由此可以容易地控制从第一室21到第二室22的液体转移。
当分析容器2包括可剥离的密封元件作为闭合元件时，在分析容器2中，例如，密封元件以覆盖通孔的状态设置在第二室22的外表面上，并且通过从通孔剥离密封元件，实现从第一室21到第二室22的液体转移。密封元件可以例如以覆盖通孔的状态或以阻塞通孔的内部的状态设置。密封元件没有特别限制，并且例如可以由任意材料形成。例如，能够使用胶带、压敏胶带等。用于设置密封元件的方法没有特别限制，只要密封元件可以剥离即可，并且例如可以是粘附等。密封元件可以调整为使得，例如，在将其剥离后，其可以再次将通孔闭合。
当分析容器2包括可移除的棒状部作为闭合元件时，棒状元件以覆盖通孔的状态设置在第二室22的外表面上，并且通过从通孔移除棒状元件，实现从第一室21到第二室22的液体转移。棒状元件可以以覆盖通孔的状态设置在第二室22的外表面上，或者可以以阻塞通孔的状态设置。棒状元件没有特别限制，并且例如可以由任意材料形成。例如，棒状元件可以是棒状塑料等。例如，棒状元件的材料可以与分析容器2的材料相同，或者可以与分析容器2的材料不同。设置棒状材料的方法可以是使得棒状元件以可移除方式设置的任何已知方法，并且例如可以是热密封等。棒状元件可以调整为使得，例如，在将其移除后，其可以再次将通孔闭合。
例如，分析容器2还可以包括预处理室。在分析容器2中，第一室21可以与预处理室顺序地设置，其中所述预处理室在与第二室22相反的一侧。也就是说，在分析容器2中，预处理室、第一室21和第二室22可以以此次序设置。
预处理室配置成使得样品保持装置3可以从预处理室的外部插入到预处理室的内部。例如，预处理室容纳用于从样品中萃取一种或多种组分的萃取剂。萃取剂没有特别限制，并且可以根据待进行分析的样品的类型、待分析的一种或多种组分的类型等适当地选择。
例如，分析容器2具有在预处理室和第一室21之间的分隔壁，并且分隔壁的材料、性质等没有特别限制，只要分隔壁可以在与插入到预处理室中的样品保持装置3的尖端接触时破裂即可。例如，分隔壁可以由薄金属膜(如铝箔)、纸或合成纤维形成。
分析容器2可以配置成使得，例如，预处理室在与预处理室和第一室21之间的分隔壁相反的一侧具有用于预处理室的开口的覆盖物，并且样品保持装置3可以从覆盖物的外部插入到预处理室的内部。覆盖物优选为在与样品保持装置的尖端接触时破裂的分隔壁，并且例如可以与上述分隔壁相同。
此外，在分析容器2中，第一室还可以包括，例如，在与第二室相反的一侧的前分隔壁，所述前分隔壁在与样品保持装置的尖端接触时破裂。例如，关于预处理室的分隔壁的以上说明也适用于前分隔壁。
(第二示例性实施方案)
本示例性实施方案涉及一种分析试剂盒，其配置成使得：第一试剂和第二试剂的组合是组合(3)；包括连接试剂室和保持部的管以及设置为将在试剂室和管之间的连接部阻塞的盖子；并且当通过从试剂室的外部施加的力使盖子移动，由此打开连接部时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，并且本示例性实施方案还涉及一种使用此试剂盒的分析方法。在本示例性实施方案中，第一试剂和第二试剂的组合不限于此，并且例如可以是(1)、(2)或(4)的组合，并且关于第一试剂和第二试剂的说明应解释为可彼此互换。关于第一示例性实施方案的分析试剂盒和分析方法的以上说明也适用于第二示例性实施方案的分析试剂盒和分析方法。
第二示例性实施方案的分析试剂盒包括：样品保持装置；和分析容器。样品保持装置包括：容纳作为第一试剂的第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是含有固定化第一结合物质的溶液，所述固定化第一结合物质是通过将与靶标结合的第一结合物质固定在一个或多个载体上获得的；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳作为第二试剂的标记化第二结合物质，所述标记化第二结合物质是通过将标记物质与第二结合物质结合获得的，所述第二结合物质与第一结合物质结合。第二室是要在其中检测在标记化第二结合物质中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第一结合物质不能通过并且标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁。液体转移部包括：连接试剂室和保持部的管；和设置为将在试剂室和管之间的连接部阻塞的盖子，并且当通过从试剂室的外部施加的力使盖子移动，由此打开连接部时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
第二示例性实施方案的分析方法是使用第二示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法，其包括以下步骤：通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后通过用从试剂室的外部施加的力使盖子移动，由此打开连接部，将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，来将样品和第一试剂溶液引入到第一室；在第一室中，使样品与第一试剂和第二试剂接触以形成样品中的靶标与固定化第一结合物质的结合体，以及使未与靶标结合的未结合的固定化第一结合物质与标记化第二结合物质结合；将未与固定化第一结合物质结合的未结合的标记化第二结合物质通过在第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和在第二室中检测在标记化第二结合物质中的标记物质。
根据本示例性实施方案，首先，在第一室中，例如，将样品中的靶标与作为第一试剂的固定化第一结合物质和作为第二试剂的标记化第二结合物质混合。然后，在第一室中，作为第一试剂的固定化第一结合物质与样品中的靶标结合，并且未与靶标结合的固定化第一结合物质与作为第二试剂的标记化第二结合物质结合。在第一室和第二室之间的多孔分隔壁是固定化第一结合物质不能通过并且标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁。因此，固定化第一结合物质不通过分隔壁，由此保留在第一室中。也就是说，与固定化第一结合物质结合的标记化第二结合物质保留在第一室中而不移动到第二室。另一方面，将未与固定化第一结合物质结合的处于游离状态的标记化第二结合物质通过多孔分隔壁引入到第二室。例如，本发明的靶标分析试剂盒可以容纳已知量的标记化第二结合物质。因此，未与固定化第一结合物质结合的标记化第二结合物质的量间接地与样品中的靶标的量相关。因此，通过检测被引入到第二室的未结合的标记化第二结合物质，可以间接地分析是否存在靶标或样品中的靶标的量。
以下将参照实施例说明根据第二示例性实施方案的分析试剂盒和使用该分析试剂盒的根据第二示例性实施方案的分析方法，其中使用适配体作为第一结合物质。除非另外说明，关于第一示例性实施方案的以上说明也适用于第二示例性实施方案。
将参照附图具体说明使用第二示例性实施方案的分析试剂盒的分析方法的实施例。然而，应注意，本发明不限于此说明性实施例。
图3示意性地示出了本示例性实施方案的分析试剂盒。如图3所示，第二示例性实施方案的分析试剂盒4包括分析容器5和样品保持装置6。分析容器5具有第一室21和第二室22，其从开口侧以此次序顺序地设置，并且分析容器5具有设置在第一室21和第二室22之间的多孔分隔壁211。在第一室21中，设置通过将酶392加入适配体381的互补链391中获得的标记的互补链39。另一方面，样品保持装置6具有试剂室32、保持部33和连接试剂室32和保持部33的液体转移部34。在试剂室32中，设置第一试剂溶液，其含有通过将适配体381固定在珠子382上获得的固定化适配体38。液体转移部34包括管341和设置为阻塞在试剂室32和管341之间的连接部的盖子343。通过盖子343将管341在试剂室32侧的一端闭合，并且管341的另一端连接到保持部33。样品保持装置6利用保持部33收集样品。例如，样品中的靶标31等附着到保持部33。
尽管在本示例性实施方案中盖子343为板状形状，但是盖子343的形状不限于此，只要其可以将管341闭合即可。更具体地，盖子343可以具有任意形状，只要其可以在液体转移部34未破裂的状态下防止在试剂室32中的第一试剂溶液转移到保持部33即可。尽管在本示例性实施方案中盖子343覆盖在管341在试剂室32侧的一端的开口，但是盖子343可以进一步阻塞管341的内部。形成盖子343的材料没有特别限制，并且其实例包括上述塑料。盖子343的尺寸没有特别限制。在本示例性实施方案中，除了垂直方向以外的盖子343的尺寸，即长度和宽度，基本上与试剂室32的底部的内部尺寸相同。然而，本发明不限于此，并且它们可与试剂室32的内部尺寸不同。本示例性实施方案的样品保持装置6可以包括，例如，固定元件，其用于固定盖子343以防止已经通过从试剂室32的外部施加的力移动的盖子343再次覆盖在试剂室32侧的一端的开口。
接下来，将参照图4A至4C说明使用图3所示的分析试剂盒4的分析方法。图4A至4C示意性地示出了使用分析试剂盒4的方法。
首先，如图4A所示，将在保持部33中保持样品的样品保持装置6插入到分析试剂盒的分析容器5的第一室21中。接下来，通过按压样品保持装置6，使盖子343在试剂室32内部移动，并且打开(释放)管341。然后，如图4B所示，允许在管341中的液体转移，并且在试剂室32中的第一试剂通过管341的开口和内部从保持部33移动到第一室21。然后，在第一室21中，将样品中的靶标31、固定化适配体38和标记的互补链39混合到一起。作为混合的结果，靶标31和固定化适配体38形成结合体，并且未与靶标31结合的固定化适配体38与标记的互补链39结合。用于将它们混合的处理条件没有特别限制，并且例如可以如下：处理温度为4℃至37℃，并且处理时间为10秒至30分钟。例如，用于将它们混合的处理在液体溶剂中进行，并且液体溶剂可以是例如水性溶剂如水、缓冲溶液、生理盐水或其混合物。
多孔分隔壁211是固定化适配体38不通过并且标记的互补链39通过的多孔分隔壁。因此，在标记的互补链39中，仅未与固定化适配体38结合的那些通过多孔分隔壁211而被引入到第二室22中。然后，在第二室22中，通过对未与固定化适配体38结合的标记的互补链39进行酶392的催化功能的测量，可以间接地分析样品中的靶标。用于测量酶392的催化功能的方法可以根据酶392的类型适当地确定。
(第三示例性实施方案)
本示例性实施方案涉及一种分析试剂盒，其配置成使得：第一试剂和第二试剂的组合是组合(1)；液体转移部是用于破坏试剂室的底面的破坏部，破坏部设置为在远离试剂室的底面的方向上与底面分开，并且当通过从试剂室的外部施加的力使破坏部与底面接触，由此破坏底面时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，并且本示例性实施方案还涉及一种使用此试剂盒的分析方法。在本示例性实施方案中，第一试剂和第二试剂的组合不限于此，并且例如可以是(2)、(3)或(4)的组合，并且关于第一试剂和第二试剂的说明应解释为可彼此互换。关于第一示例性实施方案的分析试剂盒和分析方法的以上说明也适用于第二示例性实施方案的分析试剂盒和分析方法。
第三示例性实施方案的分析试剂盒包括：样品保持装置；和分析容器。样品保持装置包括：容纳作为第一试剂的第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是含有固定化第二结合物质的溶液，所述固定化第二结合物质是通过将与第一结合物质结合的第二结合物质固定在一个或多个载体上获得的，所述第一结合物质与靶标结合；样品保持部；和液体转移部，所述液体转移部允许在试剂室中的第一试剂溶液到保持部的转移。分析容器包括：第一室和第二室。第一室和第二室以此次序顺序地设置。第一室容纳作为第二试剂的标记化第一结合物质，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与第一结合物质结合获得的。第二室是要在其中检测在标记化第一结合物质中含有的标记物质的检测部。多孔分隔壁设置在第一室和第二室之间。第一室配置成使得保持样品的样品保持装置可以从第一室的外部插入到第一室的内部。多孔分隔壁是固定化第二结合物质不能通过并且标记化第一结合物质与靶标的结合体可以通过的多孔分隔壁。液体转移部是用于破坏试剂室的底面的破坏部。破坏部设置为在远离试剂室的底面的方向上与底面分开。当通过从试剂室的外部施加的力使破坏部与底面接触，由此破坏底面时，在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部。
第三示例性实施方案的分析方法是使用第三示例性实施方案的靶标分析试剂盒的分析方法，其包括以下步骤：通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后通过用从试剂室的外部施加的力使破坏部与底面接触，由此打开管，将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，而将样品和第一试剂溶液引入到第一室；在第一室中，使样品与第一试剂和第二试剂接触以形成样品中的靶标和标记化第一结合物质的结合体，以及使未与靶标结合的未结合的标记化第一结合物质与固定化第二结合物质结合；将未与固定化第二结合物质结合的未结合的标记化第一结合物质和结合体通过在第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和在第二室中检测在标记化第一结合物质中的标记物质。
根据本示例性实施方案，首先，在第一室中，例如，将样品中的靶标、作为第一试剂的固定化第二结合物质和作为第二试剂的标记化第一结合物质混合到一起。然后，在第一室中，作为第二试剂的标记化第一结合物质与样品中的靶标结合，并且未与靶标结合的标记化第一结合物质与作为第一试剂的固定化第二结合物质结合。在第一室和第二室之间的多孔分隔壁是固定化第二结合物质不能通过并且标记化第一结合物质与靶标的结合体可以通过的多孔分隔壁。因此，固定化第二结合物质不通过多孔分隔壁，由此保留在第一室中。也就是说，与固定化第二结合物质结合的标记化第一结合物质保留在第一室中而不移动到第二室。另一方面，将未与固定化第二结合物质结合的处于游离状态的标记化第一结合物质，即形成结合体的标记化第一结合物质通过多孔分隔壁引入到第二室。例如，本示例性实施方案的分析试剂盒可以含有已知量的标记化第一结合物质。因此，未与固定化第二结合物质结合的标记化第一结合物质的量间接地与样品中的靶标的量相关。因此，通过检测未与固定化第二结合物质结合并且被引入到第二室的未结合的标记化第一结合物质，可以间接地分析是否存在靶标或样品中的靶标的量。
以下将参照实施例说明根据第三示例性实施方案的分析试剂盒和使用该分析试剂盒的根据第三示例性实施方案的分析方法，其中使用适配体作为第一结合物质。除非另外说明，关于第一和第二示例性实施方案的以上说明也适用于第三示例性实施方案。
将参照附图具体说明使用第三示例性实施方案的分析试剂盒的分析方法的实施例。然而，应注意，本发明不限于此说明性实施例。
图5示意性地示出了本示例性实施方案的分析试剂盒。如图5所示，第三示例性实施方案的分析试剂盒7包括分析容器2和样品保持装置8。分析容器2具有第一室21和第二室22，其从开口侧以此次序顺序地设置，并且分析容器2具有在第一室21和第二室22之间的多孔分隔壁211。在第一室21中，设置通过将酶282加入适配体281中获得的标记的适配体28。另一方面，样品保持装置8具有试剂室32、保持部33和连接试剂室32和保持部33的液体转移部34。在试剂室32中，设置第一试剂溶液，其含有通过将适配体281的互补链291固定在珠子292上获得的固定化的互补链29。液体转移部34具有破坏部344和支持部345。支持部345具有有底管和棒，有底管设置在棒的上端，并且保持部33设置在棒的下端。试剂部32设置在有底管的上部中以与有底管的内表面接触。破坏部344以在远离试剂室32的底面的方向上与试剂室32的底面分开的状态设置在有底管的底面上。有底管的底面设置有第一试剂溶液可以通过的通孔346。样品保持装置8利用保持部33收集样品。例如，样品中的靶标31等附着到保持部33。支持部345是任选的部件，并且可以设置或可以不设置。
在本示例性实施方案中，试剂室32的底面可以由能够被破坏部344破坏的材料形成，并且该材料可以是例如可变形且可破裂的材料。
尽管在本示例性实施方案中破坏部344是具有朝上逐渐变细的形状的元件，但是破坏部344的形状不限于此，只要破坏部344可以破坏试剂室32的底面即可。形成破坏部344的材料没有特别限制，并且例如可以根据形成试剂室32的底面的材料适当地确定。破坏部344的尺寸没有特别限制。尽管在本示例性实施方案中仅设置了一个破坏部344，但是可以设置两个以上的破坏部344。
通孔346的尺寸和形状没有特别限制，并且例如，通孔346可以具有使含有固定化的互补链29的第一试剂溶液能够通过通孔346的尺寸和形状。
接下来，将参照图6A至6C说明使用图5所示的分析试剂盒7的分析方法。图6A至6C示意性地示出了使用分析试剂盒7的方法。
首先，如图6A所示，将在保持部33中保持样品的样品保持装置8插入到分析试剂盒中的分析容器2的第一室21中。接下来，通过从上方按压样品保持装置8，使试剂室32朝底面移动，并且使破坏部344与试剂室32的底面接触，由此破坏试剂室32的底面。然后，如图6B所示，允许从试剂室32到保持部33的液体转移，并且在试剂室32中的第一试剂通过由在试剂室32的底面上的破裂形成的开口和支持部345从保持部33移动到第一室21。然后，在第一室21中，将样品中的靶标31、固定化的互补链29和标记的适配体28混合到一起。然后，作为混合的结果，靶标31和标记的适配体28形成结合体，并且未与靶标31结合的标记的适配体28与固定化的互补链29结合。用于将它们混合的处理条件没有特别限制，并且例如可以如下：处理温度为4℃至37℃，并且处理时间为10秒至30分钟。例如，用于将它们混合的处理在液体溶剂中进行，并且液体溶剂可以是例如水性溶剂如水、缓冲溶液、生理盐水或其混合物。
多孔分隔壁211是固定化的互补链29不通过并且标记的适配体28与靶标的结合体通过的多孔分隔壁。因此，在标记的适配体28中，仅未与固定化的互补链29结合的那些通过多孔分隔壁211而被引入到第二室22。然后，在第二室22中，通过对未与固定化的互补链29结合的标记的适配体28进行酶282的催化功能的测量，可以间接地分析样品中的靶标。用于测量酶282的催化功能的方法可以根据酶282的类型适当地确定。
本申请基于2016年7月20日提交的日本专利申请号2016-142546，并要求其优先权，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
尽管已经参照示例性实施方案说明了本发明，但是本发明绝不限于此。可以在不背离本发明的范围的情况下，在本发明的配置和细节中进行对本领域技术人员来说可以变得明显的多种变化和改变。
工业实用性
根据本发明，可以容易地分析样品中的靶标。
附图标记列表
1，4，7： 靶标分析试剂盒
2，5： 分析容器
21： 第一室
22： 第二室
211： 多孔分隔壁
28： 标记的适配体
281，381： 适配体
282，392： 酶
29： 固定化的互补链
291，391： 互补链
292，382： 珠子
3，6，8： 样品保持装置
31： 靶标
32： 试剂室
33： 保持部
34： 液体转移部
341： 管
342： 密封部
343： 盖子
344： 破坏部
345： 支持部
346： 通孔
38： 固定化适配体
39： 标记的互补链

Claims (18)

1.一种靶标分析试剂盒，所述靶标分析试剂盒包括：
样品保持装置；和
分析容器，
所述样品保持装置包括：
容纳第一试剂溶液的试剂室，所述第一试剂溶液是容纳第一试剂的溶液；
样品保持部；和
液体转移部，所述液体转移部允许在所述试剂室中的所述第一试剂溶液到所述保持部的转移，
所述分析容器包括：
第一室；和
第二室，
其中所述第一室和所述第二室以此次序顺序地设置，
所述第一室容纳第二试剂，
所述第二室是要在其中检测在所述第一试剂或所述第二试剂中含有的标记物质的检测部，
多孔分隔壁设置在所述第一室和所述第二室之间，
所述第一室配置成使得保持样品的所述样品保持装置可以从所述第一室的外部插入到所述第一室的内部，
所述多孔分隔壁是固定化第一结合物质或固定化第二结合物质不能通过并且结合体或标记化第二结合物质可以通过的多孔分隔壁，所述固定化第一结合物质是通过将与靶标结合的第一结合物质固定在载体上获得的并且包含在所述第一试剂或所述第二试剂中，所述固定化第二结合物质是通过将与所述第一结合物质结合的第二结合物质固定在载体上获得的并且包含在所述第一试剂或所述第二试剂中，所述结合体由标记化第一结合物质和所述靶标组成并且包含在所述第一试剂或所述第二试剂中，所述标记化第一结合物质是通过将标记物质与所述第一结合物质结合获得的，所述标记化第二结合物质是通过将标记物质与所述第二结合物质结合获得的并且包含在所述第一试剂或所述第二试剂中，并且
所述第一试剂和所述第二试剂的组合是以下组合(1)至(3)和(4)中的任一种：
(1)所述第一试剂是所述固定化第二结合物质，并且所述第二试剂是所述标记化第一结合物质；
(2)所述第一试剂是所述标记化第一结合物质，并且所述第二试剂是所述固定化第二结合物质；
(3)所述第一试剂是所述固定化第一结合物质，并且所述第二试剂是所述标记化第二结合物质；以及
(4)所述第一试剂是所述标记化第二结合物质，并且所述第二试剂是所述固定化第一结合物质。
2.根据权利要求1所述的靶标分析试剂盒，其中
所述液体转移部包括：连接所述试剂室和所述保持部的管；和在所述试剂室中将所述管密封的密封部，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述液体转移部在所述试剂室内部破裂，由此打开所述管时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
3.根据权利要求1所述的靶标分析试剂盒，其中
所述液体转移部包括：连接所述试剂室和所述保持部的管；和设置为将在所述试剂室和所述管之间的连接部阻塞的盖子，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述盖子移动，由此打开所述连接部时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
4.根据权利要求1所述的靶标分析试剂盒，其中
所述液体转移部是用于破坏所述试剂室的底面的破坏部，
所述破坏部设置为在远离所述试剂室的底面的方向上与所述底面分开，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述破坏部与所述底面接触，由此破坏所述底面时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述第一结合物质是适配体。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述第二结合物质是与所述适配体互补的核酸分子。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述标记物质是选自由酶、核酸、荧光物质、染料物质、发光物质、放射活性物质和电子供体组成的组中的至少一种物质。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中所述载体是珠子。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述第二室设置有至少一个通孔，
可打开的闭合元件以覆盖所述通孔的状态设置在所述通孔上，并且
通过从所述闭合元件释放所述通孔来实现从所述第一室到所述第二室的液体转移。
10.根据权利要求9所述的靶标分析试剂盒，其中
所述闭合元件是可剥离的密封元件，
所述密封元件以覆盖所述通孔的状态设置在所述第二室的外表面上，并且
通过从所述通孔剥离所述密封元件来实现从所述第一室到所述第二室的液体转移。
11.根据权利要求9所述的靶标分析试剂盒，其中
所述闭合元件是可移除的棒状元件，
所述棒状元件以覆盖所述通孔的状态设置在所述第二室的外表面上，并且
通过从所述通孔移除所述棒状元件来实现从所述第一室到所述第二室的液体转移。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述第一室在与所述第二室相反的一侧具有前分隔壁，所述前分隔壁在与所述样品保持装置的尖端接触时破裂。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的靶标分析试剂盒，其中
所述第一室与预处理室顺序地设置，其中所述预处理室在与所述第二室相反的一侧，
所述预处理室配置成使得所述样品保持装置可以从所述预处理室的外部插入到所述预处理室的内部，并且所述预处理室容纳用于从所述样品中萃取组分的萃取剂，
分隔壁设置在所述预处理室和所述第一室之间，并且
所述分隔壁是在与插入到所述预处理室中的所述样品保持装置的尖端接触时破裂的分隔壁。
14.根据权利要求13所述的靶标分析试剂盒，其中
所述预处理室在与所述预处理室和所述第一室之间的所述分隔壁相反的一侧具有用于所述预处理室的开口的覆盖物，并且
所述覆盖物配置成使得所述样品保持装置可以从所述覆盖物的外部插入到所述预处理室的内部。
15.一种使用根据权利要求1至14中任一项所述的靶标分析试剂盒的靶标分析方法，所述靶标分析方法包括以下步骤：
通过将保持样品的样品保持装置插入到分析容器的第一室中，然后将在试剂室中的第一试剂溶液转移到保持部，来将所述样品和所述第一试剂溶液引入到所述第一室；
在所述第一室中，使所述样品与第一试剂和第二试剂接触以形成所述样品中的靶标与第一结合物质的结合体，以及使未与所述靶标结合的未结合的第一结合物质与第二结合物质结合；
将未与固定化第一结合物质结合的未结合的标记化第二结合物质或未与固定化第二结合物质结合的未结合的标记化第一结合物质通过在所述第一室和第二室之间的多孔分隔壁引入到第二室；和
在所述第二室中检测在标记化第一结合物质或标记化第二结合物质中的标记物质。
16.根据权利要求15所述的靶标分析方法，其中
使用根据权利要求2所述的靶标分析试剂盒，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述液体转移部在所述试剂室内部破裂，由此打开所述管时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
17.根据权利要求15所述的靶标分析方法，其中
使用根据权利要求3所述的靶标分析试剂盒，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述盖子移动，由此打开所述连接部时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
18.根据权利要求15所述的靶标分析方法，其中
使用根据权利要求4所述的靶标分析试剂盒，并且
当通过从所述试剂室的外部施加的力使所述破坏部与所述底面接触，由此破坏所述底面时，在所述试剂室中的所述第一试剂溶液转移到所述保持部。
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