CN109459431A - 一种蚝油中淀粉酶的检测方法 - Google Patents

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张娟
杨纯佳
綦艳
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    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
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Abstract

本发明公开了一种蚝油中淀粉酶的检测方法，包括以下步骤：(1)配置缓冲液：缓冲液为NaCl、KCl、NaHCO3、无水CaCl2和K2Cr2O7的混合溶液组成；(2)设置空白对照：空白对照由葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液组成；(3)制备待测样品：选取蚝油冷却后，加入葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液，混匀，制得至少三个平行样品；(4)培养：将空白对照和待测样品置于恒温培养设备中，进行培养；(5)结果判定：分别选取空白对照和待测样品，加入碘液摇匀，空白对照加入碘液显棕色，如待测样品显示黑色，则证明蚝油中没有淀粉酶存在；如待测样品呈现橙黄色，则含有淀粉酶。该方法能高效准确地鉴定蚝油生产工艺中是否出现淀粉酶。

Description

一种蚝油中淀粉酶的检测方法
技术领域
本发明属于淀粉酶检测技术领域，具体涉及一种蚝油中淀粉酶的检测方法。
背景技术
蚝油作为一种复合调味品，最初是作为华南、华东沿海地带人们的调味辅料，后来随着经济的发展，现已被广为食用。在蚝油的实际生产过程中发现，如果不慎掺入淀粉酶，会导致终产品被酶解变性，给企业带来巨大的损失。而在目前的蚝油生产工艺中，还没有高效准确的淀粉酶实时检测方法，为有效保证食品质量，急需一套蚝油生产工艺中淀粉酶的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蚝油中淀粉酶的检测方法，该方法能高效准确地鉴定蚝油生产工艺中是否掺入有淀粉酶。
本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的：一种蚝油中淀粉酶的检测方法，包括以下步骤：
(1)配置缓冲液：缓冲液为NaCl、KCl、NaHCO3、无水CaCl2和K2Cr2O7的混合溶液组成；
(2)设置空白对照：空白对照由葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液组成；
(3)制备待测样品：选取蚝油冷却后，加入葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液，混匀，制得至少三个平行样品；
(4)培养：将空白对照和待测样品置于恒温培养设备中，进行培养；
(5)结果判定：分别选取空白对照和待测样品，加入碘液摇匀，空白对照加入碘液显棕色，如待测样品显示黑色，则证明蚝油中没有淀粉酶存在；如待测样品呈现橙黄色，则含有淀粉酶。
在上述蚝油中淀粉酶的检测方法中：
优选的，步骤(1)中所述NaCl的浓度为0.8-1.2g/L，所述KCl的浓度为0.8-1.2g/L，所述NaHCO3的浓度为0.2-0.6g/L，所述无水CaCl2的浓度为0.1-0.5g/L，所述K2Cr2O7的浓度为0.05-0.08g/L。
更佳的，步骤(1)中所述NaCl的浓度为1.155g/L，所述KCl的浓度为1.078g/L，所述NaHCO3的浓度为0.257g/L，所述无水CaCl2的浓度为0.31g/L，所述K2Cr2O7的浓度为0.077g/L。
优选的，步骤(2)中所述葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：1-3g：18-22mL：0.08-0.12mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为1-3％。
更佳的，步骤(2)中所述葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：2g：20mL：0.1mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为3％。
优选的，步骤(3)中所述蚝油、葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：2-6g：1-3g：12-18mL：0.08-0.12mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为1-3％。
更佳的，步骤(3)中所述蚝油、葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：5g：2g：15mL：0.1mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为3％。
优选的，步骤(3)中制得三个平行样品。
优选的，步骤(4)中将空白对照和待测样品置于37±1℃恒温培养设备中，进行培养72±2h，每天摇动2-3次。
更佳的，步骤(4)中将空白对照和待测样品置于37℃恒温培养设备中，进行培养72h，每天摇动2次。
优选的，步骤(5)中分别选取同样体积的空白对照和待测样品，加入同样体积的碘液后摇匀。
优选的，步骤(5)中所述碘液为碘化钾和I2的混合溶液，其中KI的浓度为60-70g/L，I2的浓度为10-15g/L。
更佳的，其中KI的浓度为65g/L，I2的浓度为12.8g/L。
本发明具有如下优点：本发明中的方法能够高效准确地鉴定蚝油中是否掺入淀粉酶，检测方法切实可靠，可信度高，有效地保证了食品质量。
附图说明
图1是实施例1中含有淀粉酶的蚝油检测结果，其中1-1、1-2和1-3分别代表3个平行蚝油样品；
图2是实施例2中不含有淀粉酶的蚝油检测结果，其中2-1、2-2和2-3分别代表3个平行蚝油样品。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供的蚝油中淀粉酶的检测方法，具体包括如下步骤：
1、试剂的配制
(1)、缓冲母液的配制
母液A：分别称量4.50g NaCl、4.20g KCl、1.00g NaHCO3和1.208g无水CaCl2，溶于蒸馏水中，定容至200mL，用500mL三角瓶装好，120℃灭菌40min。
母液B：称取1.5g K2Cr2O7溶于蒸馏水中并定容至100mL，用250mL三角瓶装好，120℃灭菌40min。
(2)、碘液的配制
称取6.50g KI溶于40mL蒸馏水中，加入1.28gI2，定容至100mL，装入棕色瓶。
(3)、灭菌水的配制
量取239mL蒸馏水装入500mL三角瓶中，120℃灭菌40min。
(4)、3％淀粉溶液的配制
称取1.50g可溶性淀粉加入50mL蒸馏水中，煮沸3min，然后用已灭菌的密封塞封好备用。
2、蚝油中淀粉酶的检测
(1)、缓冲液的配成
用移液管量取13mL母液A和1.3mL母液B加入到239mL灭菌水中，其中，母液A在移液前须摇匀。
(2)、空白对照的设置
称取2.00g葡萄糖加入灭菌的三角瓶内，再移取20mL缓冲液和0.1mL 3％淀粉溶液，摇匀。
(3)、待测试样品的溶解
将刚生产的蚝油冷却至60-65℃，装入包装瓶中，自然冷却至常温；然后称取5g蚝油和2.00g葡萄糖加入灭菌的三角瓶内，再移取15mL缓冲液和0.1mL 3％淀粉液，摇匀；每个待测试样品做3个平行。
(4)、恒温培养
将空白对照和溶解后的待测试样品置于37℃恒温培养箱中，培养72h，每天至少摇动两次三角瓶，恒温培养需在洁净区完成。
(5)、结果判定
恒温培养后，分别移取1mL空白对照和1mL待测试样品于白瓷碟中，加入一滴碘液后摇匀；空白对照加入碘液后显棕色，待测试样品呈现橙黄色，则证明蚝油中有淀粉酶存在，如图1所示。
实施例2
1、试剂的配制同实施例1。
2、蚝油中淀粉酶的检测
步骤(1)—(2)、(4)同实施例1，步骤(3)中待测蚝油为另外一批次的蚝油。
步骤(5)中结果判定时，恒温培养后，分别移取1mL空白对照和1mL待测试样品于白瓷碟中，加入一滴碘液后摇匀；空白对照加入碘液后显棕色，待测样品呈现黑色，则证明蚝油中没有淀粉酶存在，如图2中所示。
以上实施例中各物质的用量范围在权利要求书的范围内均可，此处列举的是较佳用量的较佳实施案例，采用其它用量关系的各物质的用量此处不再一一列举。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是包括以下步骤：
(1)配置缓冲液：缓冲液为NaCl、KCl、NaHCO3、无水CaCl2和K2Cr2O7的混合溶液组成；
(2)设置空白对照：空白对照由葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液组成；
(3)制备待测样品：选取蚝油冷却后，加入葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液，混匀，制得至少三个平行样品；
(4)培养：将空白对照和待测样品置于恒温培养设备中，进行培养；
(5)结果判定：分别选取空白对照和待测样品，加入碘液摇匀，空白对照加入碘液显棕色，如待测样品显示黑色，则证明蚝油中没有淀粉酶存在；如待测样品呈现橙黄色，则含有淀粉酶。
2.根据权利要求1所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(1)中所述NaCl的浓度为0.8-1.2g/L，所述KCl的浓度为0.8-1.2g/L，所述NaHCO3的浓度为0.2-0.6g/L，所述无水CaCl2的浓度为0.1-0.5g/L，所述K2Cr2O7的浓度为0.05-0.08g/L。
3.根据权利要求1或2所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(2)中所述葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：1-3g：18-22mL：0.08-0.12mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为1-3％。
4.根据权利要求3所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(3)中所述蚝油、葡萄糖、缓冲液和淀粉溶液的用量关系为：2-6g：1-3g：12-18mL：0.08-0.12mL，其中淀粉溶液的质量百分含量为1-3％。
5.根据权利要求1所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(4)中将空白对照和待测样品置于37±1℃恒温培养设备中，进行培养72±2h，每天摇动2-3次。
6.根据权利要求1所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(5)中分别选取同样体积的空白对照和待测样品，加入同样体积的碘液后摇匀。
7.根据权利要求1或6所述的蚝油中淀粉酶的检测方法，其特征是：步骤(5)中所述碘液为碘化钾和I2的混合溶液，其中KI的浓度为60-70g/L，I2的浓度为10-15g/L。
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