CN109453078A - 一种仿生基质水凝胶面膜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种仿生基质水凝胶面膜及其制备方法，其原料按质量比计由以下物质组成：复合胶原蛋白水凝胶、黄蓍树胶粉、聚山梨酯‑80、苦丁茶提取物、欧石楠提取物、肉苁蓉提取物、桑葚多糖和水。按本发明制备的仿生基质水凝胶面膜安全无毒，简单方便；本发明通过无细胞毒性含水量高，不需要任何额外交联剂的复合胶原蛋白水凝胶为基质，合理添加的苦丁茶提取物、欧石楠提取物中有大量黄酮物质，良好的抗氧化活性能消除自由基，抵抗衰老；肉苁蓉提取物、桑葚多糖不仅有一定的抗细胞衰老的作用，适合的配比也有美白功效。

Description

一种仿生基质水凝胶面膜及其制备方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种仿生基质水凝胶面膜及其制备方法。

背景技术

面膜通过阻隔肌肤与空气的接触、抑制皮脂分泌和汗水蒸发使肌肤温度上升，肌肤温度上升后，便会促进血液循环，使面膜内的有效成分渗入到表皮层或更深、更广的地方。血液循环加快会使皮肤红润、有光泽，而皮肤吸收更多水分、营养精华及各种有效成分后，可有效改善皮肤缺水和暗哑，减少细纹生成，延缓皮肤衰老，并在一定程度上起到祛斑和除痘的功效；使用面膜还可软化角质、扩张毛孔、促进汗腺分泌和清除表皮细胞代谢物，达到清洁与保养皮肤的效果。

胶原蛋白是生物高分子，动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占蛋白质总量的25％～30％，某些生物体甚至高达80％以上。因此胶原蛋白具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性，在食品、医药、组织工程、化妆品等领域获得广泛的应用。透明质酸具有500倍以上的携水能力，2％的纯透明质酸水溶液能牢固地保持98％水分，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子，透明质酸对皮肤具有特殊的保水作用。随着皮肤内透明质酸含量的减少，皮肤的保水功能便开始减弱，角质层老化，皮肤变得粗糙，继而出现皱纹，失去弹性，呈现出衰老的表象。

目前研发胶原蛋白水凝胶作为美容产品的很多报道，但是在凝胶制备过程中，还是不可避免的会使用到不同的交联剂如戊二醛、EDAC(碳二亚胺)作为交联剂形成凝胶，这些交联剂均有其使用的局限性。戊二醛的活性醛基基团会与机体的蛋白质等有机分子结合使后者失去生物学活性从而造成机体损伤，用于面膜产品时更可能会对相对疏松的眼组织造成损伤。尽管文献报道EDAC无毒性或毒性较小，但动物实验证实采用凝胶方式其毒性较强，原因是无法取出交联过程中的副产物及其残余的EDAC。在申请号为201310520057.X的“一种可水解逆转胶原蛋白的水凝胶及其制备方法”的专利中提到将醛基化和酰肼化衍生的糖胺聚糖和胶原蛋白反应，通过醛基衍生化产物和胶原蛋白肽链上的氨基NH2进行共价键合形成亚胺，进而通过加入糖胺聚糖酰肼化产物实现原位聚合包埋胶原蛋白分子；但最后要形成真正意义上的胶原蛋白水凝胶，还需要加入二乙烯基砜、酰肼类化合物或碳化二亚胺中的一种或多种交联剂，而且这种反应时间较长。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种不使用其他化学交联剂，无细胞毒性，且营养成分渗透性好的仿生基质水凝胶面膜的制备方法及其产品。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.一种仿生基质水凝胶面膜，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.1-0.14％、琥珀酰化胶原蛋白0.04-0.08％、醛基化硫酸软骨素0.01-0.02％、醛基化透明质酸0.002-0.01％、黄蓍树胶粉0.1-0.3％、聚山梨酯-80 1-3％、苦丁茶提取物0.4-0.6％、欧石楠提取物0.4-0.6％、肉苁蓉提取物0.4-0.6％、桑葚多糖0.1-0.3％，余量为水。

进一步，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.12％、琥珀酰化胶原蛋白0.05％、醛基化硫酸软骨素0.02％、醛基化透明质酸0.01％、黄蓍树胶粉0.1-0.3％、聚山梨酯-80 1-3％、苦丁茶提取物0.4-0.6％、欧石楠提取物0.4-0.6％、肉苁蓉提取物0.4-0.6％、桑葚多糖0.1-0.3％，余量为水。

进一步，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.12％、琥珀酰化胶原蛋白0.05％、醛基化硫酸软骨素0.02％、醛基化透明质酸0.01％、黄蓍树胶粉0.2％、聚山梨酯-80 2％、苦丁茶提取物0.5％、欧石楠提取物0.5％、肉苁蓉提取物0.5％、桑葚多糖0.2％，余量为水。

2.一种仿生基质水凝胶面膜的制备方法，通过以下步骤制得：

(1)将黄蓍树胶粉、聚山梨酯-80置于油相锅中，加热至80-85℃，搅拌溶解完全后得到物料A，降温至室温20-25℃备用；

(2)将胶原蛋白、琥珀酰化胶原蛋白、醛基化硫酸软骨素、醛基化透明质酸加入25-35℃的水中，搅拌至溶解完全，然后放入已预热的均质乳化锅中，搅拌，再将步骤(1)的物料A放入，均质3-5分钟；

(3)降温至20-25℃，加入苦丁茶提取物、欧石楠提取物、肉苁蓉提取物、桑葚多糖均质3-5分钟；

(4)加入三乙醇胺，调节pH至6.0-8.0，均质3-5分钟，冷却后得到仿生基质水凝胶面膜。

进一步，胶原蛋白琥珀酰化为酰化程度20～40％；

进一步，醛基化硫酸软骨素为醛基化程度40～80％；

进一步，醛基化透明质酸为醛基化程度40～80％；

进一步，胶原蛋白、琥珀酰化胶原蛋白、醛基化硫酸软骨素、醛基化透明质酸均为冻干粉。

进一步，所述琥珀酰化胶原蛋白制备方法为：室温下，pH6.5-7质量分数为1-5％的胶原蛋白水溶液中，分次加入按胶原蛋白：琥珀酰酐质量比为100:5～10计的琥珀酰酐，并调节稳定pH值在6.5-7；加完后继续反应1-3h终止，再次调节pH值至6.5-7；反应产物透析24～48小时即可。

进一步，所述醛基化硫酸软骨素制备方法为：将高碘酸钠水溶液缓慢的加入到透明质酸溶液中，所述透明质酸：高碘酸钠质量比为1～3：1，室温条件下反应2-5h，再加入乙二醇使未反应的高碘酸钠失活；反应产物透析24～48小时即可。

进一步，所述高碘酸钠水溶液摩尔浓度为0.25M；所述透明质酸水溶液的浓度为10mg/ml，高碘酸钠与乙二醇体积比为3～5:1。

进一步，所述醛基化硫酸软骨素制备方法为：按照高碘酸钠与硫酸软骨素反应的物质的量比为1：2在硫酸软骨素水溶液中加入高碘酸钠，避光反应2～6h后，加入乙二醇终止反应，高碘酸钠与乙二醇体积比为3～5:1，30～60min之后，再加的氯化钠，充分溶解后以体积比1：2～4加入无水乙醇，搅拌数分钟后得到絮状沉淀，将反应产物透析48～72小时即可。

本发明的有益效果在于：本发明通过对胶原蛋白自身的琥珀酰化半改性，合理的配比胶原蛋白，进一步少量结合醛基化的硫酸软骨素和透明质酸，可以简单快速的得到无细胞毒性，含水量高的复合胶原蛋白水凝胶，不需要任何额外的交联剂，可以安全的作为制备面膜基质原材料。再通过不影响水凝胶成型和其他性能基础上合理添加了苦丁茶提取物、欧石楠提取物有大量黄酮物质，有良好的抗氧化活性，消除自由基，抵抗衰老；肉苁蓉提取物、桑葚多糖不仅有一定的抗细胞衰老的作用，适合的配比也能美白。所有营养物质均能通过复合胶原蛋白水凝胶均匀的渗入肌肤中得到机体吸收，从而达到抗衰老、美白的作用。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为本发明的水凝胶凝固后浸泡于DMEM培养液形貌；

图2为本发明的在不同温度下凝固制得的水凝胶的差热曲线。

具体实施方式

下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

(1)酰化胶原蛋白：配置质量分数为5％的I型胶原蛋白水溶液，pH＝7，配置方法：称取计算所配置量的胶原盐酸溶液用蒸馏水进行稀释，调pH值至pH＝7，然后定容至5％。取一定量中性的5％I型胶原蛋白水溶液置于200ml烧杯，放置在恒温磁力搅拌器上，按胶原蛋白：琥珀酰酐质量比为100:10计算，称取琥珀酰酐，分次加入胶原蛋白水溶液，边搅拌边加入，反应过程中用2moL/L NaOH溶液调节pH值使其稳定在pH＝7；加完后继续反应3h终止，再次调节pH值至pH＝7。将琥珀酰化的胶原蛋白置于透析袋中4℃冰箱内进行透析，去除小分子其他杂质；边透析边搅拌，透析过程中每4-8小时换一次水。透析完成后离心收集样品，可以直接使用，也可以进行冷冻干燥保存备用。

(2)透明质酸醛基化：将1g的透明质酸溶解在100mL水溶液中，室温条件下搅拌1～3h，随后将10mL的浓度为0.25mol/L高碘酸钠水溶液缓慢的加入到透明质酸溶液中，室温条件下反应2-5h，再加入与高碘酸钠体积比为3～5:1的乙二醇使未反应的高碘酸钠失活。反应产物在截留分子量为8000～14000的透析袋用水或者PBS缓冲液体系中进行透析24～48小时，每4-8小时换一次液，获得醛基化透明质酸，可以直接使用，也可以进行冷冻干燥保存备用。

(3)硫酸软骨素醛基化：将5g的硫酸软骨素溶解在100ml水中，按照高碘酸钠与硫酸软骨素反应的物质的量比为1：2加入高碘酸钠，避光反应4h后，加入乙二醇终止反应，30min之后，加入100mg的氯化钠，充分溶解后以体积比1：2～4加入无水乙醇，搅拌数分钟后得到絮状沉淀，将反应产物在截留分子量为8000～14000的透析袋用水或者PBS缓冲液体系中进行透析48～72小时，每4-8小时换一次液，透析完成后得醛基化硫酸软骨素白色产物，可以直接使用，也可以进行冷冻干燥保存备用。

实施例2

对实施例1步骤(1)胶原蛋白琥珀酰化进行试验，考虑反应条件尽量简单条件下，反应温度固定在室温20-25℃，配制质量分数5％的I型胶原蛋白水溶液，分别研究pH值(5、7、9)、琥珀酸酐用量(按胶原蛋白质量百分比计算1％，5％，10％)、反应时间(1h、2h、3h)分别对胶原蛋白琥珀酰化改性胶原蛋白酰化程度的影响。酰化程度按照茚三酮法测试：配制质量分数1％胶原蛋白溶液,取lml放入试管中，然后向试管中加入lml的茚三酮显色剂。摇匀，盖塞，在沸水浴中加热16min，取出，在20℃的水浴中冷却，再向试管中加入5ml的KIO₃稀释液，摇匀，在30min内用10mm的比色皿在570nm波长处测其吸光度，其中以蒸馏水/茚三酮溶液作空白，吸光度表示游离氨基与茚三酮溶液的反应程度，吸光度越大表示改性蛋白的酰化程度越低，也可以根据公式计算：

酰化反应程度＝(未改性胶原蛋白的OD值-改性胶原蛋白的OD值)/未改性胶原蛋白的OD值×100％。

并加入胶原蛋白、醛基化的透明质酸和硫酸软骨素同时检测其成凝胶时间，分别配置成质量分数为2mg/ml的水溶液，按胶原蛋白：琥珀酰化胶原蛋白：醛基化硫酸软骨素：醛基化透明质酸体积比为6:2:1:0.5混合，于室温下观察其成凝胶时间，前10min每隔5分钟观察一次，后10min每隔1分钟观察一次，成胶之前，溶胶粘稠、可以流动；成凝胶后，明显水凝胶状态，将凝胶倒置2min，不会发生流动，其结果如表1所示。

表1不同条件胶原蛋白琥珀酰化程度及对成胶影响

实施例3

(1)胶原蛋白琥珀酰化：配置质量分数为5％的I型胶原蛋白水溶液，pH＝6.5，配置方法：称取计算所配置量的胶原盐酸溶液用蒸馏水进行稀释，调pH值至6.5，然后定容至5％。取一定量中性的5％I型胶原蛋白水溶液置于200ml烧杯，放置在恒温磁力搅拌器上，按胶原蛋白：琥珀酰酐质量比为100:5计算，称取琥珀酰酐，分次加入胶原蛋白水溶液，边搅拌边加入，反应过程中用2moL/L NaOH溶液调节pH值使其稳定在6.5；加完后继续反应3h终止，再次调节pH值至6.5。将琥珀酰化的胶原蛋白置于透析袋中4℃冰箱内进行透析，去除小分子其他杂质；边透析边搅拌，透析过程中每4-8小时换一次水。透析完成后离心收集样品进行低温冻干保存备用。

(2)醛基化透明质酸：将1g的透明质酸溶解在100mL水溶液中，室温条件下搅拌1～3h，随后将10mL的浓度为0.25mol/L高碘酸钠水溶液缓慢的加入到透明质酸溶液中，室温条件下反应2-5h，再加入与高碘酸钠体积比为3～5:1的乙二醇使未反应的高碘酸钠失活。反应产物在截留分子量为8000～14000的透析袋用水或者PBS缓冲液体系中进行透析24～48小时，每4-8小时换一次液，冷冻干燥后获得醛基化透明质酸。

(3)醛基化硫酸软骨素：将5g的硫酸软骨素溶解在100ml水中，按照高碘酸钠与硫酸软骨素反应的物质的量比为1：2加入高碘酸钠，避光反应4h后，加入乙二醇终止反应，30min之后，加入100mg的氯化钠，充分溶解后以体积比1：2～4加入无水乙醇，搅拌数分钟后得到絮状沉淀，将反应产物在截留分子量为8000～14000的透析袋用水或者PBS缓冲液体系中进行透析48～72小时，每4-8小时换一次液，透析完成后得醛基化硫酸软骨素白色产物，可以直接使用，也可以进行冷冻干燥保存备用。

分别取胶原蛋白及以上的酰化胶原蛋白产物，醛基化透明质酸产物和醛基化硫酸软骨素产物配置成质量浓度为2mg/ml的溶液，按照表2的体积配比加入各物质于15ml透明离心管中，考察不同配比下凝胶形成的时间。

表2各产物原料体积配比

实施例4体外细胞毒性实验

我国医用高分子材料的研究起步比较早发展较快，从上世纪五十年代中期就开展了人工血管的研制，各种生物医学材料的应用为医学、药学、生物学等学科的发展提供了丰富的物质基础。生物医学材料是一种具有特殊性能、特种功能，用于人工器官、外科修复、理疗康复、诊断、检查治疗疾患等医疗、保健领域，而对人体组织、血液不产生任何不良影响的材料。生物材料的生物相容性研究一直是生物医学材料研究中的一个重要内容，而体外细胞毒性实验是一种快速、简便、安全、重复性好又廉价的检测材料生物相容性方法。

取实施例3各组合的产物灭菌后按照0.1g/mL的浓度加入细胞培养液中，37℃下浸提24h。取对数生长期的L929成纤维细胞，调节细胞浓度为5.0×10⁴个/mL，接种于96孔细胞培养板(每孔100ul，每个样品一板设置12个平行孔，分别设置3板，在不同时间段观察统计)。细胞培养24h(RPMI1640培养液+10％胎牛血清，37℃，5％CO₂)后，将培养液换成水凝胶浸提液。设立正常对照组，空白对照组，每组12个平行孔。培养24、48、72小时时倒置显微镜下观察细胞生长情况，并用MTT法测定492nm处光吸收值(OD值)计算细胞相对增殖率(RGR)。计算公式为：

细胞增殖率(RGR)％＝(实验组OD平均值－空白对照组OD平均值)/(正常对照OD平均值－空白对照组OD平均值)×100％

细胞毒性分级：0级，RGR≥100％；1级，99％＞RGR≥75％；2级，74％＞RGR≥50％；3级，49％＞RGR≥25％；4级，24％＞RGR≥1％；5级，RGR等于0％。

结果发现在24小时和48小时时倒置显微镜下观察的L929细胞生长状态良好，72小时时各组细胞有收缩，但和正常对照一致。MTT法测定各水凝胶浸提液的细胞毒性结果见表3，结果显示实验组的吸光值和细胞增殖率比对照组略高，但无显著差异，说明水凝胶对细胞生长无明显抑制作用，细胞毒性为0级。

表3实施例3各组凝胶细胞毒性实验结果

实施例5

分别取胶原蛋白及实施例1的酰化胶原蛋白产物，醛基化透明质酸产物和醛基化硫酸软骨素产物配置成质量浓度为2mg/ml的溶液，按表2的配比组合4中的比例加入胶原蛋白6ml、酰化胶原蛋白产物2.5ml、醛基化硫酸软骨素产物1ml和醛基化透明质酸产物0.5ml于10cm的培养皿中，待凝固后，冷冻干燥；放置一个月后，再加水溶胀。测水凝胶重量w1；冻干后，再测其干重为w2，加水溶胀后，测其重量为W3；则溶胀率S＝(W3-W2)/W2*100％，含水量为(W1-W2)/w1×100％。该实验平行测试5次。

冻干前平均质量10.578g，冻干后平均质量为0.674g，溶胀后平均质量为9.854g；则水凝胶溶胀率为(9.854-0.674)/0.674×100％＝1273％,含水量为(9.578-0.674)/9.578×100％＝93.63％。

分别取胶原蛋白及实施例1中的酰化胶原蛋白冻干粉，醛基化透明质酸冻干粉和醛基化硫酸软骨素冻干粉配置成质量分数为2mg/ml的溶液，按照表4的体积配比加入各物质，考察不同配比下凝胶的pH值和含水率，具体方法如下：pH值测定称取5mm×5mm试样一份，加入经煮沸并冷却的去离子水10份，于25℃条件下搅拌10min，取清液按GB/T 13531.1规定的方法测定(直接测法)。含水量测定同上。

表4各水凝胶pH值和含水率

实施例6

取实施例1中胶原蛋白1g，琥珀酰化胶原蛋白冻干粉0.7g、醛基化硫酸软骨素冻干粉0.2g、醛基化透明质酸冻干粉0.1g、黄蓍树胶粉2.5g、聚山梨酯-8020g、苦丁茶提取物5g、欧石楠提取物5g、肉苁蓉提取物5g、桑葚多糖2g，水1000ml。

仿生基质水凝胶面膜的制备方法，包括以下步骤：

(1)将黄蓍树胶粉、聚山梨酯-80置于油相锅中，加热至80-85℃，搅拌溶解完全后得到物料A，降温至室温20-25℃备用；

(2)将胶原蛋白、琥珀酰化胶原蛋白、醛基化硫酸软骨素、醛基化透明质酸加入25-35℃的水中，搅拌至溶解完全，然后放入已预热的均质乳化锅中，搅拌，再将步骤(1)的物料A放入，均质3-5分钟；

(3)降温至20-25℃，加入苦丁茶提取物、欧石楠提取物、肉苁蓉提取物、桑葚多糖均质3-5分钟；

(4)加入三乙醇胺，调节pH至6.0-8.0，均质3-5分钟，冷却后得到仿生基质水凝胶面膜。

其中，均质的转速均为2000rpm。

将步骤(4)未冷却的液体置于6孔板内等凝固成型后，水凝胶用DMEM培养液浸泡24小时无明显溶胀和变形，如图1所示水凝胶呈透明果冻状，因离子渗透而染色，说明具有很好的渗透性。

实施例7

取实施例1中胶原蛋白1.2g，琥珀酰化胶原蛋白冻干粉0.5g、醛基化硫酸软骨素冻干粉0.2g、醛基化透明质酸冻干粉0.1g、黄蓍树胶粉2g、聚山梨酯-8020g、苦丁茶提取物5g、欧石楠提取物5g、肉苁蓉提取物5g、桑葚多糖2g，水1000ml。

仿生基质水凝胶面膜的制备方法，同实施例6。

将步骤(4)未冷却的液体分别于20℃、25℃和30℃置于6孔板内等凝固成型，成型后的水凝胶经冷冻干燥后用HTC型微机差热天平进行热稳定性分析，在不同温度下凝固制得的水凝胶的差热曲线结果如图2所示，水凝胶在室温下比较稳定，不同的成胶温度对其热稳定性影响极小。

实施例8

产品效果评价

20名志愿者，均为女性，年龄在30岁-50岁之间，皮肤健康，无皮肤病无过敏史。使用实施例7制备所得的仿生基质水凝胶面膜，每日晚间使用，坚持一个月，观察和感受使用效果，以5分制评价各项指标，其中5分效果很好，4分有效果，3分无明显效果，2分效果差，1分效果很差。结果见表1：

表1使用一个月后的反馈表

由上表可知，本发明的仿生基质水凝胶面膜渗透性均值4.5分，渗透性好。保湿性均值4.7分，本发明面膜可以有效补充皮肤所需的胶原蛋白，能够改善皮肤缺水、松弛现象。平复细纹皱纹能力均值4分，可以达到平复皱纹效果。敷面膜后皮肤弹性指标均值3.9，使用本发明面膜可以使皮肤恢复弹性。同时由于减少化学交联剂的使用，面膜使用过程中无刺激，不过敏，可以长期安全使用。

本发明安全无毒，可以将各原料的水溶液直接制备成水凝胶面膜，也可以分别将各原料冷冻干燥制备成冻干状态，再在使用前分别加水后溶解后混合制备成水凝胶，可以直接在胶原蛋白的水溶液或冻干品中加入有利于美白，抗衰老等物质进一步制备成其他功能性的面膜。本发明更优选的是，先制备成面膜形式的水凝胶，再冷冻干燥成成品，使用时直接加水溶胀即可，不仅使用方便，还在不添加防腐剂的状态下方便保存。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (9)

1.一种仿生基质水凝胶面膜，其特征在于，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.1-0.14％、琥珀酰化胶原蛋白0.04-0.08％、醛基化硫酸软骨素0.01-0.02％、醛基化透明质酸0.002-0.01％、黄蓍树胶粉0.1-0.3％、聚山梨酯-80 1-3％、苦丁茶提取物0.4-0.6％、欧石楠提取物0.4-0.6％、肉苁蓉提取物0.4-0.6％、桑葚多糖0.1-0.3％，余量为水。

2.根据权利要求1所述的仿生基质水凝胶面膜，其特征在于，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.12％、琥珀酰化胶原蛋白0.05％、醛基化硫酸软骨素0.02％、醛基化透明质酸0.01％、黄蓍树胶粉0.1-0.3％、聚山梨酯-801-3％、苦丁茶提取物0.4-0.6％、欧石楠提取物0.4-0.6％、肉苁蓉提取物0.4-0.6％、桑葚多糖0.1-0.3％，余量为水。

3.根据权利要求1所述的仿生基质水凝胶面膜，其特征在于，按质量百分数计由下述组分组成：胶原蛋白0.12％、琥珀酰化胶原蛋白0.05％、醛基化硫酸软骨素0.02％、醛基化透明质酸0.01％、黄蓍树胶粉0.2％、聚山梨酯-80 2％、苦丁茶提取物0.5％、欧石楠提取物0.5％、肉苁蓉提取物0.5％、桑葚多糖0.2％，余量为水。

4.根据权利要求1-3任一项所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，通过以下步骤制得：

(1)将黄蓍树胶粉、聚山梨酯-80置于油相锅中，加热至80-85℃，搅拌溶解完全后得到物料A，降温至室温备用；

(2)将胶原蛋白、琥珀酰化胶原蛋白、醛基化硫酸软骨素、醛基化透明质酸分别加入25-35℃的水中，搅拌至溶解完全，然后放入已预热的均质乳化锅中，搅拌，再将步骤(1)的物料A放入，均质3-5分钟；

(3)降温至20-25℃，加入苦丁茶提取物、欧石楠提取物、肉苁蓉提取物、桑葚多糖均质3-5分钟；

(4)加入三乙醇胺，调节pH至6.0-8.0，均质3-5分钟，冷却后得到仿生基质水凝胶面膜。

5.根据权利要求4所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，所述琥珀酰化胶原蛋白为酰化程度20～40％；所述醛基化硫酸软骨素为醛基化程度40～80％；所述醛基化透明质酸为醛基化程度40～80％。

6.根据权利要求4所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，琥珀酰化胶原蛋白制备方法为：室温下，pH6.5-7质量分数为1-5％的胶原蛋白水溶液中，分次加入按胶原蛋白：琥珀酰酐质量比为100:5～10计的琥珀酰酐，并调节稳定pH值在6.5-7；加完后继续反应1-3h终止，再次调节pH值至6.5-7；反应产物透析24～48小时即可。

7.根据权利要求4所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，所述醛基化透明质酸的制备方法为：将高碘酸钠水溶液缓慢的加入到透明质酸溶液中，所述透明质酸：高碘酸钠质量比为1～3：1，室温条件下反应2-5h，再加入乙二醇使未反应的高碘酸钠失活；反应产物透析24～48小时即可。

8.根据权利要求7所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，所述高碘酸钠水溶液摩尔浓度为0.25mol/L；所述透明质酸水溶液的浓度为10mg/ml，高碘酸钠与乙二醇体积比为3～5:1。

9.根据权利要求4所述的仿生基质水凝胶面膜的制备方法，其特征在于，所述醛基化硫酸软骨素的制备方法为：按照高碘酸钠与硫酸软骨素反应的物质的量比为1：2在硫酸软骨素水溶液中加入高碘酸钠，避光反应2～6h后，加入乙二醇终止反应，高碘酸钠与乙二醇体积比为3～5:1，30～60min之后，再加氯化钠，充分溶解后以体积比1：2～4加入无水乙醇，搅拌数分钟后得到絮状沉淀，将反应产物透析48～72小时即可。