CN1093562C - 培养生长的细胞组织的可反转的隔板插入件 - Google Patents

Abstract

在一隔板的两侧上培养细胞组织或者细胞的装置与方法，该装置包括一可靠其任一端竖立在培养池内的圆筒形支架。一框架可滑动地安装在支架内，并带有一隔板，细胞组织或者细胞生长在该隔板的两侧面上。一种细胞组织或者细胞试样被放置在隔板的上表面上，并且介质被放入位于支架外侧的池内。位于支架底部的通道使介质流至隔板，并培养试样以使其生长。当第一层细胞生长时，反转隔板，并将框架推入至支架的另一端，最好是借助于一装配塞规来达到此目的。将第二细胞试样放置在隔板的另一侧面，再放置在隔板的顶部，于是该第二细胞试样由首先来自顶部池内的并其次通过隔板的介质来培养。

Description

培养生长的细胞组织的可反转的隔板插入件

                             引言

本发明涉及在玻璃器皿内生长细胞或者细胞组织的装置与方法。尤其涉及浸没在细胞组织培养介质内和/或位于介质/气体界面上的、无菌的细胞或者细胞组织保存件的相对面上生长细胞组织、细胞或者细胞系。

实验研究需要在具有由多孔隔板分隔的不同细胞数目的细胞组织培养中研究细胞与细胞间的相互作用。细胞与细胞间的相互作用被认为在细胞生长的调节与演变中极为重要。在胚胎决定过程中，细胞与细胞间的接触对于多种的细胞种类是必需的。除胚胎的生长以外，许多其它细胞种类的生长与演变也被认为是依赖于细胞与细胞间的相互作用。例如，成肌细胞演变成肌小管被认为是取决于未演变细胞间的接触。淋巴细胞的生长和活化同样也取决于细胞与细胞间的接触。各种各样的细胞种类与细胞组织取决于这些细胞与细胞间的相互作用。

虽然不知道为什么细胞与细胞间的接触能引起细胞生长的变化，并且细胞演变研究者们正积极地检验若干假说，希望能够回答这个问题。已提出了一个假说认为：作为表面受体或者其它信号机理的结果，其它的细胞在一个细胞的细胞表面上的接触导致基因表现中的变化。已提出的另一种假说认为：一个细胞在其表面上可能产生一层胞外基质，并且该胞外基质实际上接触第二个细胞，这将引起在第二个细胞的基因表现中的接着发生的变化。另外，一些研究者假设：细胞与细胞间的相互作用不是这么多地依赖于细胞间的实际接触，而是依赖于与由细胞所产生并释放给外界环境的因子的接触。某些细胞产生能够立即在周围环境中作用的因子，而其它细胞产生长期生存并可被传送至机体中远距离位置上的因子。

近来，使用了各种研究细胞与细胞间相互作用的技术，其中没有一个是令人完全满意的，这是因为它们需要大量的带有污染危险的操作。在一种技术中，一多孔隔板飘浮在细胞组织培养介质的液槽内，并且在其一侧表面上生长出了第一细胞种类。然后，反转此隔板，于是在其另一侧表面上生长出了第二细胞种类。但是这种技术在多种应用场合中是不能被接受的，这是因为使位于隔板一侧表面上的细胞培养和介质与位于隔板另一侧表面上的细胞培养和介质完全隔离是极其重要的。

一种研究其中一组细胞所释放的因子引起另一组细胞变化的细胞与细胞间相互作用的常用技术涉及使用有条件的介质。有条件的介质是指先潜伏(incubated)在第一组细胞中一段足够长的时期，以使细胞具有进入介质的隐藏因子。第二组细胞平铺成低密度的单层，然后该稀少的平铺的单层细胞与有条件的介质潜伏在一起，以确定细胞上的因子的影响。此方法的一个问题是由于过量的操作与延长的潜伏期所带来的污染的危险。此方法的另一个问题是某些因子只在短时期内有效(一些仅仅只是几分钟的问题)，于是为了任何的结果需要与效应基因细胞立即接触。倘若不可能通过使用传统的有条件的介质技术来研究的话，短时间存活并且不稳定的因子是很困难的。

另一种过去使用的技术涉及在两个塑料或者金属环之间卡紧一隔板，并且将此单元浸没在介质内，以使其浸没的深度大于隔板的高度的技术。在其顶部表面上生长出了第一细胞种类，于是反转此单元，并且在隔板的相对表面上生长出了第二细胞种类。这种技术时常碰到的困难是因为生长出的第一细胞种类封闭了多孔隔板，当反转此单元以生长第二细胞种类时，将形成一气体阻塞以及在隔板下和卡紧环内部形成相应的气体气泡。(气体气泡将扼杀隔板上的细胞培养，或者防碍来自适当操作的传送研究。)为了避免这个问题，某些时候在卡紧件的侧壁上提供有一个孔和一孔塞，以便可打开该孔以使气体逸出，然后再用该孔塞封闭该孔，以保持两种细胞种类间的隔离。这种解决方法仍是不令人满意的，这是因为要拆下和重新装上孔塞，并且保持基本无菌的条件是很困难的，而且要确定是否已排出了所有的气体也是很困难的。

本发明的一个目的在于提供一种方法与设备，供使用者在无菌的条件下、在隔板的两侧表面上生长细胞，以便能够测定细胞与细胞间的相互作用。

                          发明的概述

本发明可简单地体现为一生产组件，该组件包括一管形支架，该管形支架在其每端上开口，并可靠其任一端竖立在培养池内。一其尺寸适于在管形支架内滑动的框架装有一诸如多孔的细胞或者细胞组织保存件之类的穿过其内径的培养保存件，和一环绕其外径的密封件。细胞或者细胞组织保存件包括一多孔隔板。密封件将框架与支架的内表面之间密封，以防止介质在框架圆环周围从保存件的一侧流至另一侧。框架被放置在支架内并靠近其一端，同时支架靠着那端竖立在池内。池内的介质浸没了支架的下方部分和细胞或者细胞组织保存件的顶和底表面，并且细胞在其顶表面生长。当一单层细胞生长出来时，反转支架，并将框架移至支架的相对端(此时支架靠其竖立的另一端)。这将使细胞在细胞或者细胞组织保存件的另一侧上生长。

在本发明的实施例中提供了一装配塞规。该装配塞规的尺寸适于将其位于支架内并与框架接合，以便该装配塞规可将具有细胞或者细胞组织保存件的框架定位至距离支架靠其竖立的一端一段想要的距离的位置上。还提供一止动件装置以便框架通过装配塞规只可移动至一准确的位置上。在一个实施例中，该止动件装置是所提供的呈圆柱形的装配塞规，该装配塞规在其大于管形支架的直径的一端上具有一凸缘，而在其另一端上具有其尺寸适于位于管形支架内的圆柱体。在另一个实施例中，支架在其朝着支架中心向内延伸的一端上具有凸块，框架停靠在凸块上。在这个实施例中，适合位于管形支架内的装配塞规能与框架接合，并移动框架直至其与凸块相接触。提供这种止动件装置是为了使框架移至位于支架另一端的适当位置上。

在本发明的另一个实施例中，在支架的每端上具有诸如缺口或者支架脚之类的阻碍物(interruption)，该结构能有效地使支架端高于含有介质的池表面。这将使介质流动并使其在细胞或者细胞组织保存件下交换。

本发明的另一个特点在于支撑着细胞或者细胞组织保存件的框架可滑出支架外，以便其可在诸如一灌注容器之类的装置中使用或者可作为永久性记录保存。

本发明还可用于层状细胞的培养以研究细胞与细胞间的相互作用。这可通过在第一细胞或者细胞组织保存件上培养细胞(或者在第一细胞或者细胞组织保存件的两侧上培养不同的细胞)，将具有分离的细胞或者细胞组织保存件的附加框架放入支架内，并在附加的细胞或者细胞组织保存件上生长单层的细胞来实现。

本发明的再一个实施例包括用于生长细胞组织或者细胞以便研究细胞与细胞间的相互作用的一组件。

通过下面对由附图所示实施例的详细描述可更好的理解和体会本发明。

                             附图简介

图1是本发明的一种培养装置的一个实施例的分解图；

图2是支架座和具有其所装载的构成图1所示装置部分的框架的细胞保存隔板的截面图；

图3是类似于图2的截面图，但表示了与装配零件一起使用的装配塞规，以便将细胞或者细胞组织保存件定位至支架内；

图4是装配支架和具有安置在培养池内的细胞或者细胞组织保存件的框架、以及提供了在细胞或者细胞组织保存件的上表面的细胞培养的截面图；

图5是类似于图4的截面图，并表示了在培养池内反转的支架；

图6是类似于图5的截面图，但表示了如何使用装配塞规将框架和细胞或者细胞组织保存件定位至所需的位置，用于在细胞或者细胞组织保存件的相对侧面上生长细胞。

图7是一截面图，表示了在细胞或者细胞组织保存件的相反侧面上生长第二种细胞；

图8a是框架和细胞保存件的第二个实施例的放大的截面图；

图8b是表示图8a所示实施例所希望的优越性的支架与支座的示意图；

图9是本发明的支架与装配塞规的另一个实施例的截面图；

图10是支架内具有多个框架的截面图；以及

图11是支架内具有位于另一个替换方向上的多个框架的截面图。

                             详细的描述

图1所示为本发明的细胞组织或者细胞培养装置。图1所示实施例的设备的三个主要零件包括管形支架10、具有呈多孔隔板形状的细胞保存件的框架12、以及装配塞规16。当使用该装置时，要将支架10和框架12装配在一起，同时使用装配塞规以使框架适当地定位在支架内，以便细胞或者细胞组织保存件位于培养池底部上方一段想要的距离上，为所叙述的非常低的位置上。

支架10由圆筒侧壁18构成，并可由任何具有足够的强度来作为液体挡板的材料制成。这种可接受的材料的例子包括热塑塑料(诸如苯乙烯、热塑聚碳酸酯、聚酯)和铝。当使用热塑塑料时，支架10可由常用的注模技术制成。支架的每端20和22各具有一支座，该支座包括由缺口26隔开的分隔的支座脚24。在如图所示的实施例中，虽然在图中只看到两个支座脚，但是每端具有三个支座脚24。如图4所示，支座脚将支架支撑在培养池W内，而缺口26则提供介质流动的通道，以便介质经过支架10的外部周围流到框架12和细胞或者细胞组织保存件14的下方空间和池W的底壁58的上方，为以下结合装置的使用将要详细叙述的那样。每端的支座脚24能够将支架在其任一端向下的情况下垂直地支撑在池内，并且在两个位置上，缺口都可使介质进入到框架12和细胞或者细胞组织保存件14的下方空间、以及池底壁的上方空间。

框架12也可由诸如苯乙烯之类的热塑塑料或者其它适于进行试验与实验的材料制成，该框架具有足够小的外径，以便其可以方便地滑入支架10内。框架12的外角落32可如图中所建议的那样倒角，以便于框架插入支架内。在框架12的外表面36上具有O形环座34，该O形环座装有一O形环38，该O形环在框架周围提供了密封，以防止培养介质在支架10中从框架的底部向上流至其上表面，并防止给细胞或者细胞组织保存件14设旁路。也可以采用其它的密封方式。框架的一边40带有一小平台42，细胞或者细胞组织保存件可以固定在该平台上。框架作为可在支架内轴向滑动的支座。在如图所示的实施例中，支架基本成圆筒形，而框架呈圆环形状。

框架在其中心具有一孔43，该孔自框架的第一边40延伸至框架的第二边45。该孔基本成圆筒形。在如图8a所示的另一个实施例中，框架12a的孔43a是倾斜的(beveled)，以至于框架的第一边40a上的孔的内径小于框架的第二边45a上的内径。倾斜的孔的好处将在后面描述。

由框架所装载的细胞或者细胞组织保存件14由任何能支撑细胞或者细胞组织的材料制成，基本上与池内的介质不直接接触，同时允许至少被选择的材料能让介质通过并与细胞接触。这种材料包括微孔隔板、水合凝胶(hydratedgel)、超滤隔板、或者诸如支撑在一个网(screen)上的凝胶之类的层组合物。细胞或者细胞组织保存件14可为微孔的、轨迹蚀刻的、或者浇注的隔板，并通过热封闭、溶解胶合、超声波焊接、夹紧连接、或者任何其它的方式与框架12相连，这些方式不会损害细胞或细胞组织保存件的性能或者在细胞或细胞组织保存件上的细胞的生长。细胞或者细胞组织保存件可选择地加工以形成各种各样的用于细胞附着的表面。不同的细胞种类优先地附着于不同的表面。于是，通过提供用于细胞附着的不同表面，在利用不同的表面以研究特殊的细胞种类的结合性能的情况下，可以操纵和研究细胞附着的过程。例如，一种特殊的细胞种类可结合至一种类型的整联蛋白，而不会结合至另一种类型的整联蛋白。于是，通过加工具有不同类型的整联蛋白的细胞保存件的表面，在所研究的特殊的细胞种类上表示出的整联蛋白受体本体可通过鉴别与细胞相互作用的整联蛋白的类型来确定。

加工的细胞保存件的表面可与一特殊种类的细胞相互作用，以便使细胞附着至表面，或者防止细胞附着。细胞保存件的表面可通过将其表面暴露至具有想要的细胞附着性能的合成物来进行加工。当在这里使用时，细胞附着性能术语(term)包括任何引起细胞附着至合成物或者防止细胞附着至该合成物的一合成物的特性。可以使用的合成物的例子包括细胞外基质蛋白质、整联蛋白、以及抗体，但不受此限制。细胞外基质蛋白质可以是天然的或是合成的。天然的细胞外基质蛋白质包括例如胶原蛋白、层粘连蛋白、以及纤联蛋白。合成细胞外基质蛋白质包括合成模拟和确定的肽。

加工的表面在从含有混合细胞种类的细胞组织试样中分离一单细胞方面也是具有优越性的。通常，最好的是从其它的处于混合细胞组织试样中的细胞种类中分离出一种细胞种类。倘若想要的细胞种类与那些与它混合的那些细胞种类相比具有不同的结合性能，可以控制细胞保存件的表面，以便可选择地结合想要的细胞种类而不会与其它的细胞种类结合。

也可加工细胞保存件的表面来总的提高细胞的结合，以便任何的细胞种类可优先地结合至细胞或者细胞组织保存件，而不是结合至装置的其它部分。这可通过加工细胞或者细胞组织保存件以提供一亲水表面，即，通过化学或者等离子体(plasma)处理来完成。

细胞保存件也可被分为几个区域，每个区域由不同的复合物处理以便在细胞保存件上形成多种细胞附着表面，以至于每个区域吸引不同种类的细胞。

装配塞规16也可由诸如制成装置其它部分的材料-苯乙烯之类的热塑塑料模制而成。在一个实施例中，装配塞规包括一柱塞50和具有滚花的外表面53的把手或者凸缘52。把手或者凸缘的直径大于支架10的内径，并且如图所示，它还大于支架的外径。把手52的底部形成一肩部倒角54，通过支架插入柱塞50，肩部倒角与支架的端部连接，而使框架12及其细胞或者细胞组织保存件14定位在支架内。柱塞50的外径略小于支架10的内径，以便柱塞可插入支架内，并接合框架12将其在支架内轴向地推动至想要的位置。柱塞的内径最好大于平台42的直径，以便当将装配塞规插入支架10内以定位框架及其细胞或者细胞组织保存件时，柱塞的端头56不与附着在框架上的细胞或者细胞组织保存件14接触。如图3所示，我们可以清楚地看到这种相互关系。

在图9所示的另一个实施例中，设置一止动件60，在止动件中支架62在其一端具有朝着支架的中心向内延伸的诸凸块64，框架12放置在诸凸块上。在这个实施例中，装配塞规66具有适合于位于管形支架内的形状，以便其能与框架接合，使它运动，与支架62的另一端上的凸块64相接触。提供该止动件装置60是为了用装配塞规将框架仅仅移动至准确的位置上。

在图4-7中表示了用于在细胞或者细胞组织保存件的两侧上培养细胞或者细胞组织的装置的使用方式。在图4中，由支架10、框架12和细胞或者细胞组织保存件14组成的组件通过与池底壁58接触的支架的端部20上的支座脚24竖放在池W内。细胞或者细胞组织保存件14定位在框架的上侧面上(即位于上侧面40上)，框架放置在靠近支架的下端20。框架的精确位置可通过使用装配塞规16来确立。细胞或者细胞组织试样附着在细胞或者细胞组织保存件14的上表面上，并且培养介质被提供给位于支架外侧的池W。要小心的是，只能将介质提供在支架的外侧上，以便最大程度的减小细胞或者细胞组织保存件14的下方夹带气体的可能性。介质将流过在支座脚24之间的缺口26，支架站立在支座脚上，介质湿润细胞或者细胞组织保存件的下侧面。一旦细胞或者细胞组织保存件是湿的，附加的介质与细胞将附着在保存件的上表面上。细胞将由通过细胞或者细胞组织保存件14与其接触的介质以及细胞或者细胞组织保存件14的上方的介质进行培养。这些接近地模拟了在生物体中成长的正常细胞和细胞组织的条件。

如图8a所示，当孔在43a和43b处成锥面时，细胞组织和细胞的培养装置可放置在一夹带最少气体的培养介质的池内。倘若装置以一个角度下降进入培养介质内，这样孔43b的倾斜的孔壁与培养介质11的液面基本平行，于是气体可逸出并避免被夹带在细胞或者细胞组织保存件的下面。如图8b所示。

一旦细胞被培养起来了，具有框架和细胞或者细胞组织保存件的支架10在池W内反转(或者可被放置在一新的池内)，并且将框架移动至支架较低的一端上，如图5和图6所示。使用装配塞规16可以准确地确定框架12的位置。可以选择从肩部倒角54至端头56所测的柱塞50的长度，以达到想要的框架位置。在拆下装配塞规之后，可将第二种试样提供至细胞或者细胞组织保存件的新的上表面，并且可向池提供附加的介质。位于新的上表面上的试样最初从细胞或者细胞组织保存件来培养。这种由细胞或者细胞组织保存件分隔的两种细胞类型的分层(1ayering)模拟了在体内所见的条件。

在本发明的一个实施例中，通过将细胞或者细胞组织保存件定位在框架的一侧上来最大程度的减小在保存件下夹带气体气泡的可能性。首先细胞应被附着在远离框架的孔的细胞或者细胞保存件的一侧上。当保存件位于框架的孔上方的位置、并且在细胞增加之前将介质从保存件的下方加入时，由于气体通过干燥的保存件逸出，因此可以最大程度的减少夹带的气体气泡。在第一组细胞在保存件上形成单层之后，可以反转装置以便朝着孔定位的细胞或者细胞组织保存件的表面朝上，并且能够将第二组细胞放置在该表面上。在反向中，框架和细胞或者细胞组织保存件的表面形成一无孔的平坦表面。当细胞保存件的平坦表面被装配塞规滑入至其与支架上的缺口等高的位置上时，由于气体可以通过缺口逸出，所以防止气体夹带在细胞保存件下方。

当在这里使用时，细胞术语包括任何类型的细胞，例如，所建立的细胞系、原始的培养细胞、以及分离的细胞组织。于是，参考用于培养或者保持细胞的装置或者部件表明一种与任何这些细胞或者细胞组织一起使用的装置。

通过使用本发明的细胞组织或者细胞培养装置和方法可以研究许多细胞与细胞间的相互作用。一种细胞与细胞间的相互作用是第一细胞与第二细胞间的接触。细胞与细胞间的相互作用可以是直接或间接的。一种直接的细胞与细胞间的相互作用为第一细胞的表面与第二细胞的表面直接接触。直接的细胞与细胞间的相互作用可包括细胞的迁移(transmigration)，即细胞的移动。一种间接的细胞与细胞间的相互作用为第一细胞与由第二细胞所产生和释放的因子相接触。细胞的表面包括细胞膜、任何表面受体或者其它蛋白质，以及由细胞所产生并在细胞的表面上形成层状的任何细胞外基质。

细胞或者细胞组织保存件的细孔具有可使细胞与细胞间发生相互作用的直径。细孔的直径取决于所要研究的特殊的相互作用，并且通过本技术领域中的任一位普通技术人员即可很容易地确定其直径。

一旦在隔板的相对两侧面上培养起不同种类的细胞，就可以研究细胞与细胞间的相互作用的影响。框架可从支架上拆下，并可按想要的方式来处理和储存。可以通过电子显微镜的观察能够研究细胞的机理。

本发明的装置和方法也可用来研究细胞的迁移。一单层的细胞可以平铺在隔板的一侧上，然后，第二种的细胞平铺在第一种细胞的顶上。于是，通过拆下细胞或者细胞组织保存件并确定细胞的位置来确定细胞的迁移。

本发明的细胞组织或者细胞培养方法与设备可使用上述的一单个框架12，或者可使用如图10和图11所示的多个框架67。可使用的框架67的最多数量为总高度等于或小于支架68的高度的数量，并取决于所使用的单个框架的高度。框架67可以定位在支架68内，这样一个框架的细胞或者细胞组织保存件可以相对其它框架的细胞或者细胞组织保存件处于不同的取向。如图10所示，第一框架69的细胞或者细胞组织保存件70与第二框架72的细胞或者细胞组织保存件可以相邻，或者另外如图11所示，第一框架69的细胞或者细胞组织保存件70与第二框架72的另一端73可以相邻，以便两个框架上的细胞或者细胞组织保存件70和71隔开相当于一个框架高度的距离。

在另一个实施例中提供了一组用于在培养池中培养细胞组织或者细胞的组件。该组件包括一管形支架，并至少包括适合位于支架之中并具有一其上具有大量细孔的细胞或者细胞组织保存件的第一框架。细胞或者细胞组织保存件的细孔具有可使细胞与细胞间发生相互作用的直径。细孔的直径取决于所要研究的具体的相互作用，并且通过本技术领域中的一位普通的技术人员即可很容易地确定其直径。

该组件也可选择地包括一电子显微镜缓冲检测(assay)系统。电子显微镜缓冲检测系统包括在一已培养出的细胞的细胞或者细胞组织保存件上工作所必需的缓冲剂，而具体的组成对于那些本技术领域的熟练人员而言是已知的。例如，试剂可包括磷酸缓冲盐(PBS)、在二甲胂酸盐缓冲剂中的仲甲醛/戊二醛、四氧化锇、以及一系列不同等级的乙醇。

鉴于上述，那些本技术领域中的熟练人员将意识到本发明的许多优点，并且同时将意识到在不脱离本发明的精神的情况下，可对本发明的所示实施例进行修改。因此，本发明的范围不受如图所示或者所述内容的限制，而是由附加的权项及其等效权项来确定其范围。

Claims (66)

1.一种放置在一培养池内的细胞培养装置，包括：

一具有一内表面的支架，所述内表面构成了一至少部分地通过所述支架延伸的腔，所述支架具有连通所述腔的第一和第二开口；

至少一个具有一适合位于所述腔内的外表面的框架，所述至少一个框架具有第一侧面和第二侧面，并且所述框架适于放置在所述支架的第一和第二开口之间；

连接在所述至少一个框架和所述支架内表面之间的密封件，所述密封件可以防止培养介质在所述框架和所述支架内表面之间流动；以及

一固定在用于保存细胞的所述框架的第一侧面上的细胞保存件。

2.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述至少一个框架适于在腔内、在靠近于所述支架的第一开口的第一位置与靠近于所述支架的第二开口的第二位置之间滑动。

3.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述支架具有位于第一端上的第一支座和位于第二端上的第二支座，所述第一支座和第二支座都适于支撑所述细胞培养装置，以便所述细胞培养装置可以靠其第一端或者第二端竖立在所述培养池内。

4.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述第一和第二支座都具有至少一个用于连通所述腔的缺口。

5.如权利要求2所述的装置，其特征在于，所述支架具有位于第一端上的第一支座和位于第二端上的第二支座，所述第一支座和第二支座都适于支撑所述细胞培养装置，以便所述细胞培养装置可以靠其第一端或者第二端竖立在所述培养池内。

6.如权利要求1所述的装置，其特征在于，还包括一装配塞规，所述装配塞规具有一适于容纳在所述腔内、并接合所述框架以便所述框架可相对于所述支架的第一和第二开口滑动地定位的柱塞。

7.如权利要求6所述的装置，其特征在于，还包括一止动件，所述止动件放置在支架的所述腔内，并适于接合所述框架同时防止所述框架滑出所述止动件。

8.如权利要求6所述的装置，其特征在于，所述柱塞具有一内腔，所述内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

9.如权利要求2所述的装置，其特征在于，还包括一装配塞规，所述装配塞规具有一适于容纳在所述腔内、并接合所述框架以便所述框架可相对于所述支架的第一和第二开口滑动地定位的柱塞。

10.如权利要求3所述的装置，其特征在于，还包括一装配塞规，所述装配塞规具有一适于容纳在所述腔内、并接合所述框架以便所述框架可相对于所述支架的第一和第二开口滑动地定位的柱塞。

11.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述腔基本呈圆筒形，而所述框架呈圆环形。

12.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述框架、所述细胞保存件和所述密封件将所述腔分成两个液室，所述密封件和所述细胞保存件防止细胞从两个隔开的液室中的一个液室进入至另一个液室。

13.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述框架具有一内表面，所述内表面构成一从位于所述框架第一侧面上的第一开口延伸至位于所述框架的第二侧面上第二开口的孔，以便所述细胞保存件可至少部分地越过所述第一开口放置。

14.如权利要求13所述的装置，其特征在于，所述孔是倾斜的。

15.如权利要求14所述的装置，其特征在于，所述孔在所述框架第一侧面上的直径小于其在所述框架第二侧面上的直径。

16.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述框架具有一内表面，所述内表面构成一从位于所述框架第一侧面上的第一开口延伸至位于所述框架的第二侧面上第二开口的孔，在那里，所述细胞保存件可至少部分地越过所述第一开口放置。

17.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述细胞保存件是亲水性的。

18.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述框架的高度基本小于支架的高度。

19.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述至少一个框架包括第一和第二框架。

20.如权利要求19所述的装置，其特征在于，定向所述第二框架，以便所述第二框架的第一侧面靠近所述第一框架的第一侧面。

21.如权利要求19所述的装置，其特征在于，定向所述第二框架，以便所述第二框架的第一侧面靠近所述第一框架的第二侧面。

22.如权利要求19所述的装置，其特征在于，定向所述第二框架，以便所述第二框架的第二侧面靠近所述第一框架的第二侧面。

23.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述至少一个框架包括至少三个框架。

24.一种在细胞保存件的至少一侧面上培养细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(A)将所述细胞保存件固定至一支撑框架；

(B)将所述支撑框架放置在支架腔内的第一位置上；

(C)将所述支架放入被加入培养介质的池内，以便所述支架由其第一端支撑；

(D)将所述支架从所述池中拆下；

(E)将所述框架的位置调节至支架腔内的第二位置；以及

(F)将所述支架放入所述池内，以便所述支架由其第二端支撑。

25.如权利要求24所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

在将所述培养介质加入至池内之前，要先将所述支架放入所述池内；

将所述培养介质加入至池内；以及

使位于所述细胞保存件下方的腔内的气体通过所述细胞保存件逸出。

26.如权利要求25所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括将所述支撑框架放置在支架的腔内，所述支架具有至少一个连通所述腔的缺口，在那里，将所述培养介质加入至池内的步骤包括将所述培养介质加入到所述池和所述支架之间。

27.如权利要求24所述的方法，其特征在于，步骤(E)包括下列步骤：

使用一装配塞规来将所述框架的位置调节至支架腔内的第二位置。

28.如权利要求24所述的方法，其特征在于，步骤(E)包括下列步骤：

使用一具有一内腔的装配塞规来将所述框架的位置调节至支架腔内的第二位置，所述装配塞规内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

29.如权利要求24所述的方法，其特征在于，步骤(A)包括将所述细胞保存件固定至一框架内，所述框架具有一构成一倾斜的孔的斜壁，以便所述细胞保存件至少部分地越过所述倾斜的孔，并且步骤(C)包括下列步骤：

将所述培养介质加入至池内；以及

将所述支架以一角度放入所述培养介质内，以便所述框架的斜壁基本平行于所述培养介质的液面。

30.如权利要求24所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括将所述框架放置在支架的腔内的步骤，所述支架具有延伸进入所述腔内的止动件，并且步骤(E)包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述支撑框架，直到所述支撑框架接触到止动件。

31.一种在细胞保存件的至少一侧面上培养细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(A)将所述细胞保存件固定至一支撑框架；

(B)将所述支撑框架放置在一支架的腔内；

(C)在所述腔内滑动所述支撑框架，直到所述支撑框架被放置到所述腔内的所要的第一位置上；以及

(D)将所述支架放入能促进细胞生长的培养介质内。

32.如权利要求31所述的方法，其特征在于，步骤(D)包括下列步骤：

在将所述培养介质加入至池内之前，要先将所述支架放入所述池内，以便所述支架由第一端支撑；

将所述培养介质加入至池内；以及

使位于所述细胞保存件下方的腔内的气体通过所述细胞保存件逸出。

33.如权利要求32所述的方法，其特征在于，步骤(D)还包括下列步骤：

将所述支架从所述池内拆下；

将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的第二位置上；以及

将所述支架放入所述池内，以便所述支架由第二端支撑。

34.如权利要求33所述的方法，其特征在于，步骤(A)包括将所述支撑框架放置在支架的腔内，所述支架具有至少一个连通所述腔的缺口的步骤，并且所述方法还包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述框架，直到所述框架被放置到靠近至少一个缺口的所述支架的第二端上。

35.如权利要求31所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

使用一装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的第一位置上。

36.如权利要求31所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

使用一具有一内腔的装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的第一位置上，所述装配塞规内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

37.如权利要求31所述的方法，其特征在于，步骤(A)包括将所述细胞保存件固定至一框架，所述框架具有一构成一倾斜的孔的斜壁，以便所述细胞保存件至少部分地越过所述倾斜的孔，并且步骤(D)包括下列步骤：

将所述培养介质加入至池内；以及

将所述支架以一角度放入所述培养介质内，以便所述框架的斜壁基本平行于所述培养介质的液面。

38.如权利要求31所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括将所述框架放置在支架的腔内的步骤，所述支架具有延伸进所述腔内的止动件，并且步骤(C)包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述框架，直到所述框架接触到止动件。

39.一种在第一和第二细胞保存件上培养细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(A)将所述第一和第二细胞保存件分别由第一和第二支撑框架支撑；

(B)将所述第一和第二支撑框架放置在一支架的腔内；以及

(C)将所述支架放入可促进位于所述第一和第二细胞保存件上的细胞生长的培养介质内。

40.如权利要求39所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述第一和第二支撑框架，直到所述第一和第二支撑框架的每一个都被放置到相对于所述支架所要的位置上。

41.如权利要求40所述的方法，其特征在于，滑动所述第一和第二支撑框架的步骤包括下列步骤：

使用一装配塞规来将所述第一和第二支撑框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的位置上。

42.如权利要求40所述的方法，其特征在于，滑动所述第一和第二支撑框架的步骤包括下列步骤：

使用一具有一内腔的装配塞规来将所述第一和第二支撑框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的位置上，所述装配塞规内腔的直径大于所述第一细胞保存件的直径。

43.如权利要求39所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

在将所述培养介质加入至池内之前，要先将所述支架放入所述池内；

将所述培养介质加入至池内；以及

当所述培养介质流入所述腔内时，位于所述第一和第二细胞保存件下方的腔内的气体通过所述第一和第二细胞保存件逸出。

44.如权利要求39所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括下列步骤：

定位所述第一和第二框架，以便所述第一细胞保存件与所述第二细胞保存件相接触。

45.一种在细胞保存件的至少一侧面上培养细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(A)提供一具有一内表面的支撑框架，所述框架的内表面构成一从位于所述支撑框架的第一表面上的第一开口延伸至位于所述支撑框架的第二表面的第二开口上的孔，所述支撑框架构成所述孔至少具有一倾斜的侧壁，以便所述第一开口的直径小于所述第二开口的直径；

(B)将所述细胞保存件放置在所述支撑框架的第一表面上，以便所述细胞保存件至少部分地越过所述第一开口放置；以及

(C)在所述支撑框架的第二表面较其第一表面先进入所述培养介质、并且相对于所述培养介质的液面以一大于零的角度放置所述第二开口的情况下，将所述支撑框架插入至培养介质的一池内，以便气体不会滞留在所述孔内，从而所述培养介质促进位于所述细胞保存件上的细胞生长。

46.如权利要求45所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

将所述支撑框架放置在支架的腔内，并将所述支架插入至培养介质的池内以便所述支架由第一端支撑。

47.如权利要求46所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述支撑框架，直到所述支撑框架被放置到相对于所述支架所要的位置上。

48.如权利要求47所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

使用一装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的位置上。

49.如权利要求47所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括下列步骤：

使用一具有一内腔的装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的位置上，所述装配塞规内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

50.如权利要求47所述的方法，其特征在于，步骤(C)包括将所述框架放置在支架的腔内，所述支架具有一延伸进入所述腔内的止动件，并且所述方法还包括下列步骤：

在所述腔内滑动所述框架，直到所述框架接触到所述止动件。

51.如权利要求47所述的方法，其特征在于，步骤(C)还包括下列步骤：

将所述支架从池内拆下；

将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的所要的第二位置上；以及

将所述支架放入池内，以便所述支架由第二端支撑。

52.一种在一培养池内培养细胞的组件，包括：

一具有一内表面的支架，所述内表面构成一至少部分地穿过所述支架延伸的腔，所述支架具有连通所述腔的第一和第二开口；

至少一个具有一适合位于所述腔内的外表面的框架，所述至少一个框架具有第一侧面和第二侧面，并且所述框架适于放置在第一和第二开口之间；

一固定至所述框架的第一侧面、用于保存细胞的细胞保存件；以及

一装配塞规，所述装配塞规具有一适于容纳在所述腔内、并接合所述框架以便所述框架可相对于所述支架的第一和第二开口滑动地定位的柱塞。

53.如权利要求52所述的组件，其特征在于，所述至少一个框架和所述支架的内表面通过一密封件相连，以防止培养介质在所述框架和所述支架内表面间流动。

54.如权利要求52所述的组件，其特征在于，所述支架具有位于第一端上的第一支座和位于第二端上的第二支座，所述第一支座和第二支座都适于支撑所述支架，以便所述支架可以靠其第一端或者第二端竖立在所述培养池内。

55.如权利要求52所述的组件，其特征在于，还包括一止动件，所述止动件放置在所述支架的腔内，并适于接合所述框架，同时防止所述框架滑出所述止动件。

56.如权利要求52所述的组件，其特征在于，所述柱塞具有一内腔，所述内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

57.如权利要求52所述的组件，其特征在于，所述框架具有一内表面，所述内表面构成一从位于所述框架第一侧面上的第一开口延伸至位于所述框架的第二侧面上第二开口的孔，以便所述细胞保存件可至少部分地越过所述第一开口放置。

58.如权利要求57所述的组件，其特征在于，所述孔是倾斜的。

59.如权利要求52所述的组件，其特征在于，所述细胞保存件具有细孔，所述细孔直径的大小以便于位于第一表面上的第一细胞试样可与位于第二表面上的第二细胞试样相互作用，并产生细胞与细胞间的相互作用。

60.如权利要求52所述的组件，其特征在于，还包括一电子显微镜缓冲检测系统。

61.一种在细胞保存件的至少一侧面上培养细胞的方法，所述方法包括下列步骤：

(A)将所述细胞保存件固定至一支撑框架；

(B)将所述支撑框架放置在一具有一开口的支架的腔内；

(C)将所述支架放入一无培养介质的池内；以及

(D)将所述培养介质加入至所述池内，以便所述培养介质可通过所述支架内的开口流入所述腔内，并接触到所述细胞保存件的表面。

62.如权利要求61所述的方法，其特征在于，步骤(B)包括将所述框架放置到所述支架的腔内，所述支架具有第一支座，所述第一支座具有至少一个构成所述开口的缺口，步骤(C)包括放入所述支架以便所述第一支座接合所述池，步骤(D)包括下列步骤：

将培养介质加入到位于所述池与所述支架之间的池内。

63.如权利要求62所述的方法，其特征在于，还包括下列步骤：

将细胞通过所述支架的腔加入至所述细胞保存件。

64.如权利要求62所述的方法，其特征在于，还包括下列步骤：

将所述框架滑动至第二所要的位置上。

65.如权利要求64所述的方法，其特征在于，将所述框架滑动至所述第二所要的位置上的步骤包括下列步骤：

使用一装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的第二所要的位置上。

66.如权利要求64所述的方法，其特征在于，将所述框架滑动至所述第二所要的位置上的步骤包括下列步骤：

使用一具有一内腔的装配塞规来将所述框架滑动至位于所述支架的腔内的第二所要的位置上，所述装配塞规内腔的直径大于所述细胞保存件的直径。

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