CN109350687A - 一种增强免疫力的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及保健品领域,公开了一种增强免疫力的组合物及其制备方法和应用。本发明所述组合物由山药水提物5‑15份,茯苓水提物2‑7份,大枣水提物4‑6份,陈皮水提物1‑2份,百合水提物2‑5份及药学上可接受的辅料组成。经制备成中药配方颗粒后,具有显著增强免疫力的效果,且使用方便、安全无副作用,效果优于当前市售产品。
Description
技术领域
本发明涉及保健品领域,具体涉及一种增强免疫力的组合物及其制备方法和应用。
技术背景
中医认为人体所蕴藏着的对疾病的抵抗能力,正气,即为免疫功能。《内经》云:“正气存内,邪不可干”,“邪之所凑,其气必虚”。可见正气是维系人体正常生命活动、抗御外邪及防治疾病的基本物质。它的强盛与否关系着人体的生命活动及疾病的转归。从这个意义上说,中医学的正气包括了现代医学的人体免疫功能。因此,要增强人体的免疫功能,提高机体识别异己,必须扶助正气。
目前增强免疫力产品中较为有名的有:春芝堂牌三七葡萄籽胶囊(主要成分:三七提取物、葡萄籽提取物、姜黄提取物)、同仁堂牌葡萄籽提取物软胶囊(主要成分:葡萄籽提取物、粉末磷脂)等。但是这些产品在免疫力增强效果上仍然不是很令人满意,需要进一步提高。
发明人在先研究中,研发出一款平和源山药茯苓植物饮料,用于气虚体质的人群,主要由玉竹、山药、茯苓、扁豆、大枣、龙眼肉、橘皮、百合这八味中药构成,但是在临床应用中发明显,这八味中药组成的保健品对于免疫力的提升作用效果不十分显著,推测可能与配伍不当有关。因此,在此基础上,发明人对该产品进行了更加深入的研究。
发明内容
本发明目的在于提供一种增强免疫力的组合物及其制备方法和应用。
具体而言,本发明涉及一种免疫增强剂在制备用于增强机体免疫力的药物中的应用,该免疫增强剂由中药组分及药学上可接受的辅料组成,中药组分由山药、茯苓、大枣、陈皮、百合五味中药构成。
山药性甘、平,归脾、肺、肾经,具有滋养强壮,助消化,敛虚汗,止泻之功效,主治脾虚腹泻、肺虚咳嗽、糖尿病消渴、小便短频、遗精、妇女带下及消化不良的慢性肠炎。
茯苓味甘、淡,性平,归心、肺、脾、肾经,用于利水渗湿,健脾,宁心,常用于水肿尿少,痰饮眩悸,脾虚食少,便溏泄泻,心神不安,惊悸失眠。
大枣味甘,平,入脾、胃经。用于补脾和胃,益气生津,调营卫,解药毒。治胃虚食少,脾弱便溏,气血津液不足,营卫不和,心悸怔忡。妇人赃躁。
陈皮味苦、辛,性温。归肺、脾经。主治理气健脾,燥湿化痰。用于脘腹胀满,食少吐泻,咳嗽痰多。
百合甘,微苦,微寒归心、肺经。用于养阴润肺;清心安神。主阴虚久嗽;痰中带血;热病后期;余热未清,或情志不遂所致的虚烦惊悸、失眠多梦、精神恍惚;痈肿;湿疮。
发明人发现,将上述五味中药提取,并将水提物按照一定比例配置成新的组合物与药学上可接受的辅料,可以用于制备增强机体免疫力的保健品,并且比上述八味中药组成的组合物具有更加良好的效果。
具体而言,本发明涉及一种免疫增强剂在制备用于增强机体免疫力的药物中的应用,该免疫增强剂由中药组分及药学上可接受的辅料组成,所述中药组分由如下质量份数的中药提取物组成:山药水提物5-15份,茯苓水提物2-7份,大枣水提物4-6份,陈皮水提物1-2份,百合水提物2-5份。
更进一步的,本发明涉及一种免疫增强剂在制备用于增强机体免疫力的药物中的应用,该免疫增强剂由中药组分及药学上可接受的辅料组成,所述中药组分由如下质量份数的中药提取物组成:山药水提物7份,茯苓水提物5份,大枣水提物4份,陈皮水提物1份,百合水提物3份。
其中,优选的,陈皮水提取中,橙皮苷的含量不低于35%,大枣水提物中,多糖含量不低于45%。
本发明所述的药学上可接受的辅料优选为微晶纤维素、预胶化淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、交联羧甲基纤维素钠、甲基硅油、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄芪胶、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸钙。
将五味中药的提取物与一水乳糖、交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸镁、滑石粉混合,通过制软材、制颗粒、干燥、整粒,得到中药配方颗粒。
本发明所制备的组合物选用安全性高的物质为原料,且通过相关小鼠模型试验证明,所述组合物能增强小鼠迟发型变态反应、提高小鼠的抗体生成细胞数,提高小鼠单核-巨噬细胞碳廓清的能力,能提高小鼠血清半数溶血值、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力。
对小鼠体重增长无明显影响、能够增加脾脏/体重比值及胸腺/体重比值,显示出该配方颗粒无毒副作用。
以上试验结果表明本发明所述组合物能增强免疫力且安全无副作用。
具体实施方式
实施例1
中药组分提取物的制备,分别称取山药5kg,茯苓5kg,大枣5kg,陈皮5kg,百合5g,分别加入10倍量的双蒸水提取2小时,得到五种中药提取物。分别称取山药水提物70g,茯苓水提物50g,大枣水提物40g,陈皮水提物10g,百合水提物30g,加入一水乳糖500g、交联羧甲基纤维素钠200g、聚乙烯吡咯烷酮600g、硬脂酸镁20g、滑石粉20g,混合,通过制软材、制颗粒、干燥、整粒,得到中药配方颗粒。
陈皮提取物中橙皮苷含量测定:以十八烷基硅胶填充剂,以甲醇-醋酸-水(35:4:61)为流动相,检测波长为283nm,经检测陈皮提取物中橙皮苷含量为37.5%
采用苯酚-硫酸比色法测定大枣提取物中多糖的含量,经测定,多糖含量为48.3%。
实施例2
中药配方颗粒对小鼠免疫功能的影响
小鼠:KM种,清洁级,体重18~22g,雌雄各半,购于上海斯莱克实验动物有限责任公司(原中科院上海实验动物中心),合格号:SCXK(沪):2017-0005。
动物饲养环境:本院(江苏省中医药研究院)实验动物中心,SPF级,合格证号:SYXK(苏)2017-0026
供试品A:实施例1配方颗粒。供试品B:现有技术配方颗粒(药物组成:玉竹,山药,茯苓,扁豆,大枣,龙眼肉,橘皮,百合)。阳性药为黄芪注射液,每支10m1(相当于原药材20g),成都地奥九泓制药厂生产河南省宛西制药股份有限公司。
取小白鼠100只,体重18~22g,随机分为5组,每组20只,雌雄名半,分别为正常组和模型组(给药:蒸馏水20m1/kg),阳性药黄芪注射液(10m1/kg),A供试品组,B供试品组。将供试药品在超净工作台中配成相应浓度并紫外线消毒后,各组动物灌胃(ig)给药,给药量均为20m1/kg,每日ig一次,连续给药12天,第10天除正常对照组外,每组动物腹腔注射 CTX40mg/kg(0.1m1/10g),第11天各重复注射一次,末次给药后1h小白鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.5m1/只。再经2h后脱脊椎处死动物,酒精消毒腹部,腹腔注射生理盐水2m1,轻揉腹部,剪开皮肤,暴露腹膜,剪一小口用消毒吸管吸取腹腔细胞悬液0.2m1,涂敷于玻片上,然后将玻片平放于潮湿的培养皿内在37℃的孵育箱内孵育30分钟。再用生理盐水冲洗去未粘附的细胞,待自然晾干后,甲醇固定15分钟,姬氏染色,计数100个巨噬细胞,按下列公式计算吞噬百分率和吞噬指数。各给药组与模型对照组进行t-检验统计处理。
吞噬百分率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/观察100个巨噬细胞数*100%。
结果可见,小白鼠CTX造模后,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能明显降低(P<0.01),A供试品组及阳性药组均能增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.01)。结果表明,本发明配方颗粒能增强腹腔巨噬细胞吞噬功能,对免疫功能低下的小鼠具有增加免疫功能的作用(见表1,2)。B给药组治疗效果不显著。
表1 气虚综合方对小白鼠吞噬细胞及指数的影响(X土s,n=20)
组别 | 剂量(g/Kg) | 吞噬百分率(%) | 吞噬指数(个/个) |
空白对照组 | / | 26.3±6.2** | 2.6±0.4** |
模型对照组 | / | 6.2±2.1 | 1.8±0.2 |
阳性药组 | 10mL | 16.8±4.2** | 2.4±0.3** |
A组 | 20 | 18.3±5.1** | 2.7±0.4** |
B组 | 20 | 7.2±2.7 | 1.6±0.2 |
注:与模型组比较,**P<0.01(下同)。
实施例3
取小鼠100只,体重18~22g,随机分为5组,每组20只,雌雄各半,分别为正常组和CTX模型组(蒸馏水20ml/kg),阳性药黄芪注射液(10ml/kg),A供试品,B供试品。将供试药品在超净工作台中配成相应浓度并紫外线消毒后,各组动物灌胃(ig)给药,给药量均为20ml/kg,每日ig一次,连续给药12天,于给药第5天各组动物腹腔注射 5%鸡红细胞悬液0.2ml/只进行免疫,再于给药后第10天除正常对照组外,每组动物腹腔注射 Cy40mg/kg(0.1m1/10g),第11天各重复注射一次,木次给药后1h 小鼠眼眶后静脉丛取血,离心,取10u1 血清用生理盐水稀释100倍,与5%鸡红细胞悬液0.5ml及10%补体0.5ml混合,37℃恒温水浴中保温30min后,冰水浴中终止反应,离心,取上清液于贝克曼DU640 型紫外分光光度计540nm处比色,测光密度(OD)值,另设不加血清的空白对照,取上清液作为比色时调0的基准。以OD值作为判定血清溶血素水平的指标。各给药组与模型对照组进行t一检验统计处理.
结果发现,小白鼠腹腔注射 Cy后,使鸡红细胞所致的血清溶血素水平明显降低(P<0.01),A供试品组能明显对抗Cy作用,能显著提高小鼠血清溶血素水平(P<0.01)。
表2气虚综合方对小鼠免疫功能的影响(X土s,n=10)
组别 | 剂量(g/Kg) | 抗体血清溶血值(OD值) |
空白对照组 | / | 0.64±0.43** |
模型对照组 | / | 0.12±0.09 |
阳性药组 | 10mL | 16.8±4.2** |
A组 | 20 | 18.3±5.1** |
B组 | 20 | 7.2±2.7 |
注:与模型组比较**P<0.01。
实验结果:A供试品组血清溶血素水平与模型组比较有明显升高,能明显对抗Cy的免疫抑制作用,同时能显著提高小白鼠腹腔巨噬细胞活力,效果较阳性药组更佳。而B供试品组不具备上述功效。
实施例3
供试品A对衰老模型小鼠耐力及血清SOD,MDA,GSH-Px和脑组织中脂褐素(LPF)的影响。
D-半乳糖衰老模型的制备:取小鼠100只,体重18~22g,随机分为5组,每组20只,分别为正常对照组,模型对照组,阳性药组、供试品A组、供试品B组。正常对照组皮下注射生理盐水,其余小鼠皮下注射D半乳糖125mg/(kg.d),连续30天,分笼饲养,正常饮食,建立衰老模型,衰老模型小鼠免疫力较弱。
给药途径和剂量:分组后第二天开始按组分别给药,供试品A、B给药量为20g/kg,阳性药剂量为10ml/kg,正常对照组和模型对照组给予等体积的消毒饮用水,灌胃给药,各组动物给药量均为10ml/kg,每日一次,连续给药30天。
主要观察及测定指标:
1、末次药后1小时将小鼠放入冰水中(零度)游泳,以小鼠头沉入水中10秒为体力耗竭,记录小鼠游泳时间。
末次给药后禁食不禁水14小时,将各组动物称重后,于眼眶后静脉丛取血备用;其后脱白处死,解剖取胸腺,脾胜称湿重,按下列公式计算前列腺脏器系
脏器系数(%)=脏器湿重(g)/小鼠体重(g) *100%
2、取全血(不抗凝),分离血清,按试剂盒方法测定 SOD,MDA,GSH-Px,
计算酶活力。
3、取脑组织以冰生理盐水洗去浮血,用滤纸吸干,加冰冷的PBS 缓冲液(组织与缓冲液的比例为1:10),用匀浆器制成组织匀浆,离心机离心10min(4℃,2000r/min)分离上清液低温保存,供测定LPF含量。
实验结果如下:
表3 对D-半乳糖衰老模型小鼠游泳时间的影响(X±s,n=20)
组别 | 剂量(g/Kg) | 游泳时间(min) |
空白对照组 | / | 16.2±3.4** |
模型对照组 | / | 11.0±2.7 |
阳性药组 | 10mL | 15.8±4.2** |
A组 | 20 | 16.3±3.9** |
B组 | 20 | 11.6±2.7 |
注:与模型组比较**P<0.01。
结果显示,供试品A及阳性药给药后均能提高衰老模型小鼠的耐力,延长模型小鼠的游泳时间(P<0.01),增强体质(免疫力)。
表4对D-半乳糖衰老模型小鼠胸腺、脾脏系数的影响(X±s,n=20)
组别 | 剂量(g/Kg) | 体重 | 胸腺系数 | 脾脏系数 |
空白对照组 | / | 30.2±3.4 | 0.19±0.02* | 0.54±0.11** |
模型对照组 | / | 28.5±2.7 | 0.11±0.01 | 0.32±0.09 |
阳性药组 | 10mL | 30.8±4.2 | 0.15±0.02** | 0.51±0.14** |
A组 | 20 | 29.6±3.9 | 0.16±0.03* | 0.52±0.14** |
B组 | 20 | 28.9±3.7 | 0.12±0.02 | 0.35±0.15 |
注:与模型组比较**P<0.01。
结果提示,供试品A及阳性药给药后能抑制衰老模型小鼠的免疫器官脾脏萎缩(P<0.01),有一定的抗衰老作用。对胸腺的萎缩也有一定的抑制作用(P<0.05)。结论:供试品A能够增加免疫力。
表5对衰老模型小鼠血清S0D、GSH- Px活力利MDA含量的影响(X±s,n=20)
注:与模型组比较**P<0.01。
结果显示:供试品A及阳性药给药后均能提高衰老模型小鼠的血清SOD,GSH-Px活力(P<0.01),降低其血清 MDA的含量(P<0.01),表明均有明显的抗氧化和延缓衰老的作用,从而增加小鼠的免疫力。
表6对衰老模利小鼠脑组织LPF含量的影响(X土s,n=20)
组别 | 剂量(g/Kg) | 脑组织蛋白(g/100g) | LPF(ug/g) |
空白对照组 | / | 59.2±0.2** | 0.23±0.02** |
模型对照组 | / | 54.2±0.5 | 0.32±0.03 |
阳性药组 | 10mL | 58.1±0.3** | 0.24±0.01** |
A组 | 20 | 58.7±0.7** | 0.22±0.02** |
B组 | 20 | 54.8±0.5 | 0.33±0.03 |
注:与模型组比较**P<0.01。
实验结果表明:供试品A及阳性药给药后均能明显降低衰老模型小鼠脑组织中LPF的含量(P<0.01),表明其对脑神经组织的衰老有一定的延缓作用,从而增强小鼠的免疫力。
Claims (5)
1.一种免疫增强剂在制备用于增强机体免疫力的药物中的应用,该免疫增强剂由中药组分及药学上可接受的辅料组成,所述中药组分由如下质量份数的中药提取物组成:山药水提物5-15份,茯苓水提物2-7份,大枣水提物4-6份,陈皮水提物1-2份,百合水提物2-5份。
2.如权利要求1所述的中药组分,其特征在于,由如下质量份数的中药提取物构成:山药水提物7份,茯苓水提物5份,大枣水提物4份,陈皮水提物1份,百合水提物3份。
3.如权利要求1或2所述的陈皮水提物,橙皮苷含量不低于35%。
4.如权利要求1或2所述的大枣水提物,多糖含量不低于45%。
5.如权利要求1或2所述的中药组分,用于预防衰老。
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Legal Events
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20190219 |
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