CN109329319A - 中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液 - Google Patents

中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液 Download PDF

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Abstract

中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液，属于生物发酵技术领域。中药发酵驱蚊液的制备方法包括将驱蚊中药原药材与培养基进行发酵培养，发酵培养包括乳酸菌发酵及芽孢杆菌发酵，得到中药发酵驱蚊液。中药发酵驱蚊液原液根据不含稀释处理的上述制备方法制得。中药发酵驱蚊液稀释液根据含稀释处理的上述制备方法制得。通过生物发酵技术对驱蚊中药原药材进行发酵培养，原料简单易得、成分天然、绿色环保而且对人体无刺激；生物发酵技术的生产过程简单、便捷、反应条件温和且能充分提取并保留驱蚊中药原药材中的活性成分；发酵菌的代谢产物还能与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，使中药发酵驱蚊液的驱蚊驱虫、止痒消肿效果显著。

Description

中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液
技术领域
本发明涉及生物发酵技术领域，具体而言，涉及一种中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液。
背景技术
在实现本发明过程中，发明人发现：现有的驱蚊剂一般采用人工合成的化学成分制作而成，生产过程复杂、化学成分对人体容易造成一定的刺激，使用过程中还可能引发过敏等不良反应。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液，解决了驱蚊剂生产过程复杂、容易对人体造成刺激的技术问题。
本发明的实施例是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液的制备方法，包括：将驱蚊中药原药材与培养基进行发酵培养，发酵培养包括乳酸菌发酵及芽孢杆菌发酵，得到中药发酵驱蚊液。
在上述技术方案中，采用驱蚊中药原药材作为原料，驱蚊中药原药材中的活性成分具有驱蚊驱虫、止痒止肿的效果；和现有技术中采用化工合成原料相比，原料简单易得、成分天然、绿色环保而且对人体无刺激。采用生物发酵技术对驱蚊中药原药材进行发酵处理，操作简单且在常温、常压下就能进行，条件温和，避免化工合成中复杂的操作流程以及加热、加压等工艺条件的控制，使生产过程简单、便捷。生物发酵提取方法还能充分提取并保留驱蚊中药原药材中的活性成分，避免化工提取工艺对驱蚊中药原药材中的活性成分的提取不完全或造成破坏等；同时发酵培养中采用的乳酸菌、芽孢杆菌等作为益生菌，它们的发酵代谢产物还能够与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，补充并增强中药发酵驱蚊液的药效。
在一个具体的实施方案中，乳酸菌发酵之前还包括抗菌发酵；可选地，抗菌发酵采用第一发酵菌进行发酵，第一发酵菌包括类芽孢杆菌及嗜热链球菌；进一步可选地，类芽孢杆菌与嗜热链球菌的体积比为0.8～1.2:0.8～1.2。
可选地，培养基中的水与第一发酵菌的体积比为10000:1.5～2.5。
可选地，抗菌发酵的发酵温度为10～40℃、发酵时间为12～48h。
在一个具体的实施方案中，乳酸菌发酵采用第二发酵菌进行发酵，第二发酵菌包括发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、短双歧杆菌以及德氏乳杆菌保加利亚亚种；可选地，发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、短双歧杆菌以及德氏乳杆菌保加利亚亚种的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2。
可选地，培养基中的水与第二发酵菌的体积比为10000:8～12。
可选地，乳酸菌发酵完成时，发酵液中的乳酸菌的含量为2.0×106～9.0×108cfu/ml。
可选地，乳酸菌发酵的发酵温度为10～40℃、发酵时间为12～48h。
在一个具体的实施方案中，芽孢杆菌发酵采用第三发酵菌进行发酵，第三发酵菌包括球形赖氨酸芽孢杆菌、硫胺素芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌以及假单胞菌；可选地，球形赖氨酸芽孢杆菌、硫胺素芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌以及假单胞菌的体积比依次为0.8～1.2:4.5～5.5:0.8～1.2:1.5～2.5:1.5～2.5。
可选地，培养基中的水与第三发酵菌的体积比为10000:9～13。
可选地，芽孢杆菌发酵完成时，发酵液中的芽孢杆菌的含量为1.2×104～3.2×106cfu/ml。
可选地，芽孢杆菌发酵的发酵温度为10～40℃、发酵时间为12～48h。
在一个具体的实施方案中，芽孢杆菌发酵之后还包括在隔氧条件下进行酵母菌发酵；可选地，酵母菌发酵采用第四发酵菌进行，第四发酵菌包括椭圆酵母、棒状酵母以及絮凝酵母；进一步可选地，椭圆酵母、棒状酵母以及絮凝酵母的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2。
可选地，培养基中的水与第四发酵菌的体积比为10000:1.5～2.5。
可选地，酵母菌发酵完成时，发酵液中的酵母菌的含量为1.5×104cfu/ml～3.8×105cfu/ml。
可选地，酵母菌发酵的发酵温度为10～40℃、发酵时间为14～20d。
在一个具体的实施方案中，驱蚊中药原药材包括金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香；可选地，金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香的质量比依次为4.5～5.5:2～3:4.5～5.5:2～3:2～3:0.5～1.5:4.5～5.5:4.5～5.5:4.5～5.5:2～3。
可选地，驱蚊中药原药材与培养基中的水的质量比为28.5～38.5:1000，培养基包括糖蜜和水，糖蜜和培养基中的水的质量比为2～4:50。
在一个具体的实施方案中，发酵培养后还包括对中药发酵驱蚊液的原液进行过滤处理；可选地，过滤处理采用板框过滤机进行过滤，工作压力不高于0.45MPa。
在一个具体的实施方案中，发酵培养后还包括对中药发酵驱蚊液的原液进行稀释处理；可选地，中药发酵驱蚊液的原液与稀释处理用水的质量比为1:8～12；进一步可选地，稀释处理后还包括添加防腐剂，防腐剂的质量为稀释后的中药发酵驱蚊液的质量的0.1～0.5％。
第二方面，本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液原液，根据上述的不含稀释处理的实施方案中的制备方法制得。
在上述技术方案中，中药发酵驱蚊液原液中的活性成分为天然成分，无化学合成成分的刺激性，环保、对人体无刺激。中药发酵驱蚊液原液中含有乳酸菌、芽孢杆菌等益生菌，它们的发酵代谢产物与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，补充并增强中药发酵驱蚊液的药效，使中药发酵驱蚊液原液的驱蚊驱虫、止痒消肿效果显著。中药发酵驱蚊液原液由于未经稀释，酸性高，pH值介于3.5～4.0，抗菌活性成分含量较高，不易染菌，防腐效果好，便于长期存放。
第三方面，本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液稀释液，根据上述的含稀释处理的实施方案中的制备方法制得。
在上述技术方案中，中药发酵驱蚊液稀释液中的活性成分为天然成分，无化学合成成分的刺激性，环保、对人体无刺激。中药发酵驱蚊液稀释液中含有乳酸菌、芽孢杆菌等益生菌，它们的发酵代谢产物与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，补充并增强中药发酵驱蚊液的药效，使中药发酵驱蚊液原液的驱蚊驱虫、止痒消肿效果显著。中药发酵驱蚊液稀释液由于经稀释，有效成分能够更好的分散，活性成分的浓度适当降低而避免中药气味过重，气味清淡宜人，用户体验更佳。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明一个具体的实施方案中提供的发酵培养的工艺流程图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液进行具体说明。
本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液的制备方法，包括将驱蚊中药原药材与培养基进行发酵培养，发酵培养包括乳酸菌发酵及芽孢杆菌发酵，得到中药发酵驱蚊液。
采用驱蚊中药原药材作为原料，驱蚊中药原药材中的活性成分具有驱蚊驱虫、止痒止肿的效果。原料简单易得、成分天然、绿色环保而且对人体无刺激。
在一个具体的实施方案中，驱蚊中药原药材包括金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香。在其他实施方案中，驱蚊中药原药材也可以仅包含上述的部分组分，或者采用其他具有驱蚊效果的中药材。
在上述的技术方案中，金银花含有绿原酸、木犀草素苷等，具有清热解毒的作用。艾叶含有芳樟醇、樟脑、丁香酚、柠檬烯等，具有驱除蚊虫，皮肤消毒止痒作用。紫苏含有紫苏醛、柠檬烯、芳樟醇、薄荷醇、紫苏油等，具有驱除蚊虫、清热解毒的作用。藿香含有柠檬烯、α-蒎烯、芳樟醇等，具有驱除蚊虫、发汗解表的作用。薄荷含有薄荷脑、薄荷酮、柠檬烯、α-蒎烯、桉叶素，具有驱除蚊虫、辛凉性发汗、止痒、清凉、消炎、止痛的作用。陈皮含有柠檬醛，柠檬烯等，具有驱除蚊虫、发汗解表的作用。菖蒲含有丁香酚、菖蒲酮、百里香酚等，具有驱除蚊虫、止痒、消炎、止痛的作用。丁香主要含有丁香酚，具有强烈的驱除蚊虫的作用。柠檬桉叶含有香茅醛、香茅醇、牻牛儿醇、异胡薄荷醇、1，8-桉叶素、愈创醇等，具有驱除蚊虫、皮肤消肿散毒、镇痛的作用。八角茴香含有柠檬烯、α-蒎烯、芳樟醇，具有驱除蚊虫、缓解皮肤痉挛、减轻疼痛的作用。经发明人研究发现，上述组分单独或部分用于驱蚊中药原药材后驱蚊或止痒效果均不明显，而将上述组分配合用于驱蚊中药原药材后驱蚊驱虫、止痒消肿效果显著。
在一些实施方案中，金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香的质量比可选地依次为4.5～5.5:2～3:4.5～5.5:2～3:2～3:0.5～1.5:4.5～5.5:4.5～5.5:4.5～5.5:2～3，或4.7～5.4:2.2～2.9:4.7～5.4:2.2～2.9:2.2～2.9:0.7～1.4:4.7～5.4:4.7～5.4:4.7～5.4:2.2～2.9，或4.9～5.2:2.4～2.7:4.9～5.2:2.4～2.7:2.4～2.7:0.9～1.2:4.9～5.2:4.9～5.2:4.9～5.2:2.4～2.7，如5:2.5:5:2.5:2.5:1:5:5:5:2.5。
采用发酵培养的方法，添加培养基辅助发酵。在一些具体的实施方案中，培养基选用液体培养基，培养基与驱蚊中药原药材相互之间分散均匀，发酵菌与培养基以及驱蚊中药原药材接触充分，有助于发酵菌的快速繁殖并提高发酵菌对驱蚊中药原药材的发酵作用。
在一个具体的实施方案中，培养基包括糖蜜和水，糖蜜和培养基中的水的质量比为2～4:50，或2.2～3.8:50，或2.4～3.6:50，或2.6～3.4:50，或2.8～3.2:50，或3:50。
糖蜜(molasses)是制糖工业的副产品，一般是棕黑色黏稠液体，含有比白糖丰富的营养物质，糖蜜之中主要含大量的发酵糖，是很好的发酵原料。在其他实施方案中，也可以采用白糖、葡糖糖、麦芽糖等作为部分或全部的发酵糖。
可选地，驱蚊中药原药材与培养基中的水的质量比为28.5～38.5:1000，或29.5～37.5:1000，或30.5～36.5:1000，或31.5～35.5:1000，或32.5～34.5:1000，或33.5:1000。
采用发酵培养的方法对驱蚊中药原药材的活性成分进行提取，至少具有以下作用：
1、操作简单且在常温、常压下就能进行，避免化工合成中复杂的操作流程以及加热、加压等工艺条件的控制，使生产过程简单、便捷。
2、条件温和，避免加热等工艺条件对活性成分造成破坏，特别是对本发明所用发酵中药中的其关键作用的热敏感的芳香类挥发油(醇类、烯类、酚类、醛类、酮类等)蛋白质、维生素、氨基酸、微量元素等活性成分，有效保护并保留中药原料中的活性成分，能最大限度地保护并保留中药原料中活性成分，解决了中药原料在煎、煮、熬、炼、蒸、浸等传统加工工艺中活性成分易于破坏的难题。
3、中药原料以植物药为主，其有效成分多存在于细胞的胞浆中，而植物细胞的细胞壁是由纤维素、半纤维素等构成的，其结构致密，因而不易被提取。采用微生物发酵培养的方法，微生物在代谢过程中产生的纤维素酶、果胶酶等多种胞外酶进入培养基，从而引起中药材细胞破裂，其有效成分得以暴露出来，从而极大增加有效成分的提取率。由于不同种类的微生物具有不同的代谢方式，采用不同发酵菌进行不同发酵步骤，能充分地分解不同的中药原料。
4、发酵培养中采用的乳酸菌、芽孢杆菌等作为益生菌，它们的发酵代谢产物还能够与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，补充并增强中药发酵驱蚊液的药效。
5、煎、煮、熬、炼、蒸、浸等传统加工工艺提取中药原料有效成分后药渣常被废弃，不仅污染环境，也浪费了中药资源。利用微生物发酵中药原料，由于微生物在生长过程中能分泌一系列的酶，应用微生物发酵中药能将中药中的纤维素、木质素类等大分子物质降解，同时也可将中药转化为菌体蛋白和多糖等，可使中药充分释放有效成分、提高其有效成分的含量，因此，可以减少中药的使用量。环保节能。
在一个具体的实施方案中，请参阅图1，发酵培养包括：抗菌发酵、乳酸菌发酵、芽孢杆菌发酵以及隔氧条件下的酵母菌发酵。
可选地，抗菌发酵、乳酸菌发酵、芽孢杆菌发酵以及酵母菌发酵均在常压条件下进行，常压条件是指在常规发酵条件下不额外地进行加压操作或减压操作的条件。各个发酵培养阶段的发酵温度均为10～40℃，或15～35℃，或20～30℃，例如10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃。抗菌发酵、乳酸菌发酵以及芽孢杆菌发酵的发酵时间均为12～48h，或15～45h，或18～42h，或21～39h，或24～36h，或27～33h，例如12h、15h、18h、21h、24h、27h、30h、33h、36h、39h、42h、45h、48h。酵母菌发酵的发酵时间为14～20d，或15～19d，或16～18d，例如14d、15d、16d、17d、18d、19d、20d。
在一个具体的实施方案中，抗菌发酵采用第一发酵菌进行发酵，第一发酵菌包括类芽孢杆菌(Paenibacillus sp)及嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。
经发明人研究发现，在发酵初期中药原药材、培养基及培养罐均带有大量杂菌，在发酵过程中腐败菌极其容易繁衍生长，造成发酵液酸败变臭。加入类芽孢杆菌除了能够产生有机酸、过氧化氢和酯类物质之外，类芽孢杆菌在配合嗜热链球菌发酵的同时还能够产生抗菌物质细菌素和抗菌肽，有针对性抑制腐败菌的生长和繁殖，创造良好发酵环境，保证随后的乳酸菌的大量生长和发酵。
在一些实施方案中，类芽孢杆菌与嗜热链球菌的体积比为0.8～1.2:0.8～1.2，或0.85～1.15:0.85～1.15，或0.9～1.1:0.9～1.1，或0.95～1.05:0.95～1.05，例如0.8:1、1:0.8、0.9:1、1:0.9、1:1、1.1:1、1:1.1、1.2:1、1:1.2。
可选地，培养基中的水与第一发酵菌的体积比为10000:1.5～2.5，或10000:1.6～2.3，或10000:1.8～2.2，例如10000:1.5、10000:1.6、10000:1.7、10000:1.8、10000:1.9、10000:2、10000:2.1、10000:2.2、10000:2.3、10000:2.4、10000:2.5。
在一个具体的实施方案中，乳酸菌发酵采用第二发酵菌进行发酵，第二发酵菌包括发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)以及德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusbulgaricus)。
乳杆菌产生大量乳酸，营造发酵酸性环境，抑制大量有害杂菌生长。短双歧杆菌适合厌氧状态发酵，容易成活于发酵液底层并产生醋酸、丙酸、丁酸和乳酸等有机酸，能抑制有害细菌的生长，抵抗病原菌的感染，合成发酵需要的各种活性酶，有利于中药原料有效成分的析出和产生。经发明人研究发现，同时再添加瑞士乳杆菌及德氏乳杆菌保加利亚亚种进行配合，能够增加蛋白水解活性，有利于促进发酵分解、缩短发酵时间。
在一些实施方案中，发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、短双歧杆菌以及德氏乳杆菌保加利亚亚种的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，或0.85～1.15:0.85～1.15:0.85～1.15:0.85～1.15，或0.9～1.1:0.9～1.1:0.9～1.1:0.9～1.1，或0.95～1.05:0.95～1.05:0.95～1.05:0.95～1.05，例如1:1:1:1。
可选地，培养基中的水与第二发酵菌的体积比为10000:8～12，或10000:8.5～11.5，或10000:9～11，或10000:9.5～10.5，例如10000:8、10000:8.5、10000:9、10000:9.5、10000:10、10000:10.5、10000:11、10000:11.5、10000:12。
在一些实施方案中，乳酸菌发酵完成时，发酵液中的乳酸菌的含量为2.0×106～9.0×108cfu/ml。
在一个具体的实施方案中，芽孢杆菌发酵采用第三发酵菌进行发酵，第三发酵菌包括球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)、硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus aneurinilyticus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)以及假单胞菌(Pseudomonas sp)。
芽孢杆菌有机质分解力强，在增殖的同时，会释出高活性的纤维素酶、果胶酶，将难分解的中药材细胞壁的纤维素、半纤维素等大分子物质分解成可溶的小分子物质(如葡萄糖、果糖等)，促使胞壁破裂，有利于中药原料中有效成分的析出和产生。另外芽孢杆菌具有繁殖快速(4h增殖10万倍)、生命力强(无湿状态可耐低温-60℃、耐高温280℃，耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧、耐低氧)的生长特性，具有迅速占据空间优势，抑制发酵环境中有害菌、病原菌等有害微生物的的生长繁殖，保证发酵的成功性和安全性。
同时，由于乳酸菌发酵步骤中，乳酸菌的发酵产生大量的有机酸，使发酵液的pH值达到3.0左右，这种生存环境不利于大多数细菌的生长，而芽孢杆菌由于其繁殖快速的生长特性能在低酸环境中迅速繁殖生长。芽孢杆菌的代谢产物还能改变发酵液的酸性环境，促使pH值上升，有利于假单胞菌和随后加入的酵母菌的生长。
特别地，加入球形赖氨酸芽孢杆菌、硫胺素芽孢杆菌这两类芽孢杆菌，其能够把乳酸菌的发酵产生大量的有机酸、硫胺素作为主要碳源进行利用分解，有利于迅速降低发酵液酸度、调节发酵环境pH值，进一步地保障假单胞菌和酵母菌发酵良好的发酵环境。
假单胞菌的添加用于与芽孢杆菌配合，促进发酵过程中蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、脂酶等胞外酶的分泌，和单独采用芽孢杆菌相比，能够更加充分地分解中药原料的纤维素、破坏植物细胞壁，从而进一步促进中药原料中有效成分从胞内释放，使中药原料的有效组分、活性物质最大限度地得以提取和利用。
在一些实施方案中，球形赖氨酸芽孢杆菌、硫胺素芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌以及假单胞菌的体积比依次为0.8～1.2:4.5～5.5:0.8～1.2:1.5～2.5:1.5～2.5，或0.85～1.15:4.6～5.4:0.85～1.15:1.6～2.4:1.6～2.4，或0.9～1.1:4.7～5.3:0.9～1.1:1.7～2.3:1.7～2.3，或0.95～1.05:4.8～5.2:0.95～1.05:1.8～2.2:1.8～2.2，例如1:5:1:2:2。
可选地，培养基中的水与第三发酵菌的体积比为10000:9～13，或10000:9.5～12.5，或10000:10～12，或10000:10.5～11.5，例如10000:9、10000:9.5、10000:10、10000:10.5、10000:11、10000:11.5、10000:12、10000:12.5、10000:13。
在一些实施方案中，芽孢杆菌发酵完成时，发酵液中的芽孢杆菌的含量为1.2×104～3.2×106cfu/ml。
在一个具体的实施方案中，酵母菌发酵采用第四发酵菌进行，第四发酵菌包括椭圆酵母(Torula utilis)、棒状酵母(Saccharomyces manginii)以及絮凝酵母(Saccharomyces ellipsoideus)。
经发明人研究发现，由于乳酸菌发酵等阶段产生了大量的酸味物质，导致发酵后的液体酸味较浓。酵母菌具有兼性好氧的特点，发酵后期加入酵母，对发酵液中的蛋白质、糖类进行发酵转化，维持发酵液酸度环境，产生改变发酵液风味和气味的酯类醇类物质，保持发酵液的中药气味，使用户体验度更佳。采用上述几种酵母菌配合进行发酵，各酵母菌的代谢相互配合，发酵效果更好，发酵后得到的发酵液的香味更醇正。
在一些实施方案中，椭圆酵母、棒状酵母以及絮凝酵母的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，或0.85～1.15:0.85～1.15:0.85～1.15，或0.9～1.1:0.9～1.1:0.9～1.1，或0.95～1.05:0.95～1.05:0.95～1.05，例如1:1:1。
可选地，培养基中的水与第四发酵菌的体积比为10000:1.5～2.5，或10000:1.6～2.3，或10000:1.8～2.2，例如10000:1.5、10000:1.6、10000:1.7、10000:1.8、10000:1.9、10000:2、10000:2.1、10000:2.2、10000:2.3、10000:2.4、10000:2.5。
在一些实施方案中，酵母菌发酵完成时，发酵液中的酵母菌的含量为1.5×104cfu/ml～3.8×105cfu/ml。
在一些实施方案中，发酵培养后还包括对中药发酵驱蚊液的原液进行过滤处理。过滤操作将发酵装置中固体物质，例如将糖蜜中的杂质过滤掉，减少发酵液中的杂质，提高发酵液的质量。
可选地，过滤处理采用板框过滤机进行过滤，工作压力不高于0.45MPa。其同时还可以将发酵液中分子量大于1000的物质，主要有各种酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌经过发酵后的菌体残渣过滤掉，避免固体物质影响对中药发酵驱蚊液的使用，例如进行喷雾使用时堵塞喷雾设备。
在一些实施方案中，发酵培养后还包括对中药发酵驱蚊液的原液进行稀释处理。稀释处理可以在发酵培养完成后直接进行，或者在过滤处理完成之后进行。
经发明人研究发现，按照上述的实施方案的制备方法发酵得到的中药发酵驱蚊液，由于浓度较高，导致中药气味过重，影响用户体验。将发酵得到的中药发酵驱蚊液的原液进行稀释处理，使活性成分的浓度适当降低而避免中药气味过重，药香气味清淡宜人，用户体验更佳。
可选地，中药发酵驱蚊液的原液与稀释处理用水的质量比为1:8～12，或1:8.5～11.5，或1:9～11，或1:9.5～10.5，例如1:8、1:8.5、1:9、1:9.5、1:10、1:10.5、1:11、1:11.5、1:12。
在一些实施方案中，稀释处理后还包括添加防腐剂，防腐剂的质量为稀释后的中药发酵驱蚊液的质量的0.1～0.5％，或0.2～0.4％，例如0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％。中药发酵驱蚊液的原液由于经过稀释处理，抗菌物质、有机酸等的含量降低，在存放过程中容易染菌、腐败。添加防腐剂能够对稀释后的中药发酵驱蚊液起到防腐、防臭的作用，保证稀释后的中药发酵驱蚊液在夏天的高温环境下长期保存、正常使用。
本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液原液，根据上述的不含稀释处理的实施方案中的制备方法制得。
本发明实施例提供一种中药发酵驱蚊液稀释液，据上述的含稀释处理的实施方案中的制备方法制得。
上述实施方案提供的中药发酵驱蚊液原液或中药发酵驱蚊液稀释液，可作为原料与其他物质进行调作为驱蚊剂使用或者直接作为驱蚊剂使用。该纯天然的中药发酵的驱蚊剂可用于家庭例如卧室、客厅，各种工作场所例如办公室、宾馆、酒店，以及户外活动场所。
采用造雾设备雾化，让雾化后的中药活性分子均匀地分散在空气中，迅速地在人体所处空间或者皮肤上形成一个驱蚊保护圈，同时这些中药活性分子喷涂在被蚊虫叮咬的皮肤上能起到止痒、清凉、消炎、止痛的作用，从而实现中药发酵驱蚊液驱蚊驱虫、止痒消肿的效果。该中药发酵驱蚊液无口入和吸入毒性，对眼及皮肤无任何刺激，为纯天然环保型产品，而且不存在二次污染等问题。
经研究表明，上述中药发酵驱蚊液稀释液作为驱蚊剂的驱蚊效果达到国家标准《GBT 13917.9-2009农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价第9部分：驱避剂》中“6评价B级：有效保护时间≥4h”的要求。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
一种中药发酵驱蚊液的制备方法，包括：
S1、向发酵装置中加入驱蚊中药原药材、培养基及第一发酵菌，在28℃的常压条件下培养48h。
其中，驱蚊中药原药材的质量为33.5kg，其包括质量比依次为5:2.5:5:2.5:2.5:1:5:5:5:2.5的金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香。培养基包括糖蜜60kg以及水1000kg。第一发酵菌包括类芽孢杆菌100ml以及嗜热链球菌100ml。
S2、向发酵装置中加入第二发酵菌，在30℃的常压条件下培养48h。
其中，第二发酵菌包括发酵乳杆菌250ml、瑞士乳杆菌250ml、短双歧杆菌250ml以及德氏乳杆菌保加利亚亚种250ml。
S3、向发酵装置中加入第三发酵菌，在30℃的常压条件下培养48h。
其中，第三发酵菌包括球形赖氨酸芽孢杆菌100ml、硫胺素芽孢杆菌500ml、枯草芽孢杆菌100ml、蜡样芽胞杆菌200ml以及假单胞菌200ml。
S4、向发酵装置中加入第四发酵菌，在30℃且隔氧的常压条件下培养19d。
其中，第四发酵菌包括椭圆酵母50ml、棒状酵母50ml以及絮凝酵母50ml。
S5、将S4中得到的中药发酵驱蚊液采用板框过滤机在工作压力不高于0.45MPa的条件下进行过滤处理，得到中药发酵驱蚊液原液。
S6、将S5中得到的中药发酵驱蚊液原液用水稀释，中药发酵驱蚊液原液与稀释处理用水的质量比为1:10，得到中药发酵驱蚊液稀释液。
实施例2
一种中药发酵驱蚊液的制备方法，其与实施例1的不同之处在于：未进行S1的发酵操作。
实施例3
一种中药发酵驱蚊液的制备方法，其与实施例1的不同之处在于：未进行S4的发酵操作。
实施例4
一种中药发酵驱蚊液的制备方法，其与实施例1的不同之处在于，未进行S6的稀释处理。
试验例
1、驱蚊效果实验
用户在7-8月份蚊虫猖獗的城市居住小区的大门处(四周有很多树木及灌木林)，从下午6点开始坐在大门口，在所处环境中喷洒实施例1的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液5～10次，并在裸露的手臂、腿部均匀喷洒实施例1的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液，直至晚上11点均无蚊虫叮咬，并且在此时段可看见蚊虫在身体周围飞舞，但并不叮咬身体裸露部位。说明本发明实施例提供的驱蚊剂的制备方法制得的驱蚊剂具备有效的驱蚊防咬效果。
2、止痒消肿效果实验
将实施例1的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液喷涂于3-10人(此前已被蚊虫叮咬，叮咬处红肿发痒)的蚊虫叮咬处，反馈信息均是1-3分钟内瘙痒感消失，红肿部位逐渐消肿，皮肤恢复正常状态。说明本发明实施例提供的驱蚊剂的制备方法制得的驱蚊剂具备有效的止痒消肿效果。
3、将实施例2的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液用作驱蚊效果实验，部分裸露部位会被叮咬。
将实施例3的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液用作喷雾喷洒至环境空气中或裸露皮肤上，用户反馈酸味太浓、难闻。
将实施例4的制备方法制得的中药发酵驱蚊液原液用作喷雾喷洒至环境空气中或裸露皮肤上，用户反馈中药味太浓、难闻。
综上所述，本发明实施例提供的中药发酵驱蚊液的制备方法、其原液及稀释液，通过生物发酵技术对驱蚊中药原药材进行发酵培养，原料简单易得、成分天然、绿色环保而且对人体无刺激；生物发酵技术的生产过程简单、便捷、反应条件温和且能充分提取并保留驱蚊中药原药材中的活性成分；发酵菌代谢产物还能与驱蚊中药原药材中的活性成分协同增效，使中药发酵驱蚊液的驱蚊驱虫、止痒消肿效果显著。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (10)

1.一种中药发酵驱蚊液的制备方法，其特征在于，包括：将驱蚊中药原药材与培养基进行发酵培养，发酵培养包括乳酸菌发酵及芽孢杆菌发酵，得到所述中药发酵驱蚊液。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，乳酸菌发酵之前还包括抗菌发酵；可选地，抗菌发酵采用第一发酵菌进行发酵，所述第一发酵菌包括类芽孢杆菌及嗜热链球菌；进一步可选地，所述类芽孢杆菌与所述嗜热链球菌的体积比为0.8～1.2:0.8～1.2。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，乳酸菌发酵采用第二发酵菌进行发酵，所述第二发酵菌包括发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、短双歧杆菌以及德氏乳杆菌保加利亚亚种；可选地，所述发酵乳杆菌、所述瑞士乳杆菌、所述短双歧杆菌以及所述德氏乳杆菌保加利亚亚种的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，芽孢杆菌发酵采用第三发酵菌进行发酵，所述第三发酵菌包括球形赖氨酸芽孢杆菌、硫胺素芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌以及假单胞菌；可选地，所述球形赖氨酸芽孢杆菌、所述硫胺素芽孢杆菌、所述枯草芽孢杆菌、所述蜡样芽胞杆菌以及所述假单胞菌的体积比依次为0.8～1.2:4.5～5.5:0.8～1.2:1.5～2.5:1.5～2.5。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，芽孢杆菌发酵之后还包括在隔氧条件下进行酵母菌发酵；可选地，酵母菌发酵采用第四发酵菌进行，所述第四发酵菌包括椭圆酵母、棒状酵母以及絮凝酵母；进一步可选地，所述椭圆酵母、所述棒状酵母以及所述絮凝酵母的体积比依次为0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述驱蚊中药原药材包括金银花、艾叶、紫苏、藿香、薄荷、陈皮、菖蒲、丁香、柠檬桉叶以及八角茴香；可选地，所述金银花、所述艾叶、所述紫苏、所述藿香、所述薄荷、所述陈皮、所述菖蒲、所述丁香、所述柠檬桉叶以及所述八角茴香的质量比依次为4.5～5.5:2～3:4.5～5.5:2～3:2～3:0.5～1.5:4.5～5.5:4.5～5.5:4.5～5.5:2～3。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，发酵培养后还包括对所述中药发酵驱蚊液的原液进行过滤处理；可选地，过滤处理采用板框过滤机进行过滤，工作压力不高于0.45MPa。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，发酵培养后还包括对所述中药发酵驱蚊液的原液进行稀释处理；可选地，所述中药发酵驱蚊液的原液与稀释处理用水的质量比为1:8～12；进一步可选地，稀释处理后还包括添加防腐剂，所述防腐剂的质量为稀释后的所述中药发酵驱蚊液的质量的0.1～0.5％。
9.权利要求1～7任一项所述的制备方法制得的中药发酵驱蚊液原液。
10.权利要求8所述的制备方法制得的中药发酵驱蚊液稀释液。
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