CN109328072B - 细胞死亡诱导剂、细胞增殖抑制剂及用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物 - Google Patents

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Abstract

针对癌细胞诱导细胞死亡、抑制细胞增殖。含有抑制GST‑π及MRPL17的药物作为有效成分；或者含有抑制GST‑π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分。

Description

细胞死亡诱导剂、细胞增殖抑制剂及用于治疗起因于细胞增 殖异常的疾病的医药组合物
技术领域
本发明涉及针对癌细胞的细胞死亡诱导剂、细胞增殖抑制剂、用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物，还涉及对细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂加以筛选的方法。
背景技术
作为起因于细胞增殖异常的疾病，可举出癌作为典型的例子。癌是由于基因突变、表观遗传异常等而导致细胞不受控增殖的疾病。作为癌中的基因异常，已报道有多种(例如非专利文献1等)，认为其中大多与和细胞的增殖、分化、存活相关的信号转导存在某种关联。另外，由于相关基因异常，使得正常分子所构成的细胞内的信号转导出现异常，这导致特定信号级联的活化或失活，由此也有可能最终成为引起细胞异常增殖的因素之一。
早些年的癌治疗主要着眼于对细胞增殖本身的抑制，但相关治疗也会抑制生理上正常的细胞的增殖，因此其伴随有脱发、消化器官障碍、骨髓抑制等副作用。有鉴于此，已在进行为抑制相关副作用而以癌所特有的基因异常、信号转导异常作为靶标的分子靶向药物等基于新思路的癌治疗药物的开发。
人们认为癌是因各种各样的癌基因、癌抑制基因、DNA修复酶基因等的异常在同一细胞中积累而发生的。作为癌基因，已知有RAS基因、FOS基因、MYC基因及BCL-2基因等。在癌所特有的基因异常中，KRAS基因突变在约95％的胰腺癌中、约45％的大肠癌中被观察到，以及在其他多种癌中也以高频度被观察到。KRAS蛋白为偏向性地存在于细胞膜内侧的G蛋白。KRAS等RAS将C-RAF、B-RAF等RAF活化，RAF进而再将MEK活化，MEK再将MAPK活化，由此形成这样的级联。如果KRAS中发生了点突变，GTP酶(GTPase)活性降低，结合有GTP的活性形式将被维持，由此导致通向下游的信号转导恒定性地持续，结果就发生细胞增殖异常。如以KRAS基因为代表所显示的那样，癌基因导致细胞增殖发生异常，从而进展为细胞的癌化、以及进一步进展为作为疾病的癌。
另外，作为催化谷胱甘肽结合的酶之一的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)作为能使药剂等物质与谷胱甘肽(GSH)共轭、形成水溶性物质的酶而为人所知。GST基于氨基酸序列可被分类为α、μ、ω、π、θ及ζ这6种具有代表性的类型的同工酶。其中，尤其是GST-π(谷胱甘肽-S-转移酶pi，其也被称为GSTP1)的表达在各种癌细胞中增加，已有人指出了其可能是针对部分抗癌剂的耐药性的原因之一。事实上，已知将针对GST-π的反义DNA或GST-π抑制剂作用于过量表达GST-π、显示出耐药性的癌细胞系时，药物耐性会被抑制(非专利文献2～4)。此外，在最近的报道中，还报道称，将针对GST-π的siRNA作用于过量表达GST-π的雄性激素非依赖性前列腺癌细胞系时，其增殖会被抑制、并且细胞凋亡增加(非专利文献5)。
另外，已知GST-π与c-Jun N末端激酶(JNK)形成复合物，抑制JNK活性(非专利文献6)。此外，还已知GST-π参与和细胞应激应答相关的蛋白质的S-谷胱甘肽化(非专利文献7)。此外，还已知GST-π参与针对因活性氧(ROS)诱导的细胞死亡的保护作用(非专利文献8)。由此能够理解，作为GST的GST-π具有多种特征·功能。
已有报道称，当将针对GST-π的siRNA作用于具有KRAS突变的癌细胞系时，虽然Akt活化被抑制、自噬增加，但细胞凋亡的诱导为中等程度(非专利文献9)。专利文献1中公开：通过将抑制GST-π的药物和3-甲基腺嘌呤等自噬抑制剂作为活性成分而能够诱导癌细胞的细胞凋亡。此外，专利文献2中公开：同时抑制GST-π和Akt等的表达时，细胞增殖被抑制、细胞死亡被诱导发生，该文献中还公开：通过抑制GST-π表达诱导出的自噬会因对Akt等的表达同时加以抑制而被显著地抑制。
然而，癌细胞中GST-π的表达与细胞增殖或细胞死亡之间的关系、GST-π与信号转导相关的作用等尚未被充分阐明。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：WO2012/176282
专利文献2：WO2014/098210
非专利文献
非专利文献1：Futreal等人，Nat Rev Cancer.2004；4(3):177-83
非专利文献2：Takahashi和Niitsu,Gan To Kagaku Ryoho.1994；21(7):945-51
非专利文献3：Ban等人，Cancer Res.1996；56(15):3577-82
非专利文献4：Nakajima等人，J Pharmacol Exp Ther.2003；306(3):861-9
非专利文献5：Hokaiwado等人，Carcinogenesis.2008；29(6):1134-8
非专利文献6：Adler等人，EMBO J.1999,18,1321-1334
非专利文献7：Townsend等人，J.Biol.Chem.2009,284,436-445
非专利文献8：Yin等人，Cancer Res.2000 60,4053-4057
非专利文献9：Nishita等人，AACR 102nd Annual Meeting,Abstract No.1065
发明内容
发明所要解决的课题
因此，本发明的目的在于提供对于癌细胞具有细胞死亡诱导作用及/或细胞增殖抑制作用的药剂、提供用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物、提供对细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂加以筛选的方法。
用于解决课题的手段
鉴于上述目的，本申请的发明人进行了努力研究，结果发现，在癌细胞中抑制GST-π的同时还抑制MRPL17时，与仅抑制其中任一者的情况相比，可更强效地诱导细胞死亡、更强效地抑制细胞增殖，从而完成了本发明。本发明包括以下内容。
(1)一种药剂，其为癌细胞的细胞死亡诱导剂，其含有抑制GST-π及MRPL17的药物作为有效成分；或者，其含有抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分。
(2)一种药剂，其为癌细胞的细胞增殖抑制剂，其含有抑制GST-π及MRPL17的药物作为有效成分；或者，其含有抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分。
(3)如(1)或(2)所述的药剂，其特征在于，所述药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质。
(4)如(1)或(2)所述的药剂，其特征在于，所述抑制MRPL17的药物为作用于所述MRPL17的化合物。
(5)如(1)所述的药剂，其特征在于，其诱导细胞凋亡。
(6)如(1)或(2)所述的药剂，其特征在于，所述癌细胞为高水平表达GST-π的癌细胞。
(7)用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物，所述医药组合物含有(1)至(6)中任一项所述的药剂。
(8)用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物，所述医药组合物含有抑制MRPL17的药物作为有效成分，所述医药组合物的特征在于，其与抑制GST-π的药物组合给予。
(9)用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物，所述医药组合物含有抑制GST-π的药物作为有效成分，所述医药组合物的特征在于，其与抑制MRPL17的药物组合给予。
(10)如(7)至(9)中任一项所述的医药组合物，其特征在于，所述疾病为癌。
(11)如(10)所述的医药组合物，其特征在于，所述癌为高水平表达GST-π的癌。
(12)癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的筛选方法，所述细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂是与抑制GST-π的药物一起使用的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂，所述方法包括：选出抑制MRPL17的药物。
(13)如(12)所述的筛选方法，所述方法包括：将受试物质与癌细胞接触的步骤；对所述细胞中MRPL17的表达量进行测定的步骤；以及，若所述表达量与不存在受试物质时进行测定的情况相比有所降低、则将所述受试物质选择为抑制MRPL17的药物的步骤。
(14)癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的筛选方法，所述细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂是与抑制MRPL17的药物一起使用的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂，所述方法包括：选出抑制GST-π的药物。
(15)如(14)所述的筛选方法，所述方法包括：将受试物质与癌细胞接触的步骤；对所述细胞中GST-π的表达量进行测定的步骤；以及，若所述表达量与不存在受试物质时进行测定的情况相比有所降低、则将所述受试物质选择为抑制GST-π的药物的步骤。
(16)细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的筛选方法，所述方法包括：选出抑制GST-π及MRPL17的药物。
(17)如(16)所述的筛选方法，所述方法包括：将受试物质与癌细胞接触的步骤；对所述细胞中GST-π的表达量及MRPL17的表达量进行测定的步骤；以及，若与不存在受试物质时进行测定的情况相比GST-π的表达量及MRPL17的表达量同时降低、则将所述受试物质选择为抑制GST-π及MRPL17的药物的步骤。
作为本申请优先权基础的日本专利申请2016-124252号的说明书及/或附图中记载的内容被包括进本说明书中。
发明的效果
通过本发明所涉及的细胞死亡诱导剂，能够非常强效地诱导癌细胞的细胞死亡。因此，本发明所涉及的细胞死亡诱导剂能够作为用于治疗起因于癌细胞增殖异常的疾病的医药组合物发挥非常高的药效。
另外，通过本发明所涉及的细胞增殖抑制剂，能够非常强效地抑制癌细胞的细胞增殖。因此，本发明所涉及的细胞增殖抑制剂能够作为用于治疗起因于癌细胞增殖异常的疾病的医药组合物发挥非常高的药效。
并且，通过本发明所涉及的筛选方法，能够选择出非常强效地诱导癌细胞的细胞死亡及/或抑制癌细胞的细胞增殖的药剂。
附图说明
图1是特征图，其显示了在使得抑制GST-π表达的siRNA及/或抑制MRPL17表达的siRNA发挥作用时、表达突变型KRAS的细胞的相对生存率的比较结果。
具体实施方式
本发明所涉及的细胞死亡诱导剂及细胞增殖抑制剂含有抑制GST-π及MRPL17的药物作为有效成分，或者，其含有抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分。本发明所涉及的细胞死亡诱导剂及细胞增殖抑制剂是对于癌细胞显示出细胞死亡诱导效果及细胞增殖抑制效果的物质。在此，癌细胞表示因基因(癌相关基因)而显示出增殖异常的细胞。
例如，在癌相关基因中，作为癌基因，可举出KRAS基因、FOS基因、MYC基因、BCL-2基因及SIS基因等。此外，在癌相关基因中，作为癌抑制基因，可举出RB基因、p53基因、BRCA1基因、NF1基因及p73基因等。但是，癌细胞这一概念并不被限定为与这些具体的癌相关基因有关的癌细胞，而是广义地适用于显示出细胞增殖异常的细胞。
特别地，本发明所涉及的细胞死亡诱导剂及细胞增殖抑制剂优选适用于癌细胞中高水平表达GST-π的癌细胞。此处，高水平表达GST-π的癌细胞是指：显示出细胞增殖异常的细胞(所谓的癌细胞)中，GST-π的表达量比正常细胞显著更高的细胞。需要说明的是，GST-π的表达量可通过RT-PCR、微阵列等常规方法来测定。
很多情况下，作为高水平表达GST-π的癌细胞的一例，可举出表达突变型KRAS的癌细胞。即，本发明所涉及的细胞死亡诱导剂及细胞增殖抑制剂优选适用于表达突变型KRAS的癌细胞。
突变型KRAS是指：具有向野生型KRAS的氨基酸序列中导入缺失、取代、添加、插入等突变而成的氨基酸序列的蛋白质。需要说明的是，此处，突变型KRAS中的突变是所谓的功能获得性突变(gain of function)。即，在表达突变型KRAS的细胞中，起因于这些突变，导致例如GTP酶(GTPase)活性降低、结合有GTP的活性形式被维持，由此导致通向下游的信号转导恒定性地持续，结果，较之表达野生型KRAS的细胞而言细胞增殖出现异常。作为编码突变型KRAS的基因，可举出在野生型KRAS基因的第12位密码子、第13位密码子和第61位密码子中的至少一个位置具有突变的基因。特别地，作为突变型KRAS，第12和13位密码子的突变是优选的。具体而言，可举出KRAS基因的第12位密码子所编码的甘氨酸取代为丝氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、丙氨酸或精氨酸的突变，KRAS基因的第13位密码子所编码的甘氨酸变为天冬氨酸的突变。
在本说明书中使用时，GST-π是指由GSTP1基因编码的、对与谷胱甘肽的结合进行催化的酶。GST-π存在于包括人在内的多种动物中，其序列信息是已知的(例如人：NM_000852(NP_000843)、大鼠：NM_012577(NP_036709)、小鼠：NM_013541(NP_038569)等。编号表示NCBI数据库的登记编号，括号外为碱基序列编号，括号内为氨基酸序列编号)。作为一例，将数据库中登记的人GST-π基因的编码区域的碱基序列示为序列号1，将该人GST-π基因编码的人GST-π蛋白质的氨基酸序列示为序列号2。
MRPL17为线粒体核糖体蛋白质L17，其与线粒体中的蛋白质合成相关。线粒体的核糖体由28S小亚基和39S大亚基构成。MRPL17相当于39S大亚基。
MRPL17存在于包括人在内的多种动物中，其序列信息也是已知的(例如人：NM_022061.3(NP_071344.1)等。编号表示NCBI数据库的登记编号，括号外为碱基序列编号，括号内为氨基酸序列编号)。作为一例，将以NM_022061.3登记于数据库中的人MRPL17基因的碱基序列示为序列号3，将该人MRPL17基因编码的人MRPL17蛋白质的氨基酸序列示为序列号4。需要说明的是，本说明书中，MRPL17不被限定于由序列号4的氨基酸序列(其是由序列号3的碱基序列编码的)构成的蛋白质。
需要说明的是，如上文所述，虽然GST-π及MRPL17可通过具体的碱基序列和氨基酸序列来表征，但必须考虑到生物个体之间产生碱基序列、氨基酸序列突变的可能性(包括多态性)。
即，GST-π及MRPL17不被限定为序列与数据库中登记的氨基酸序列相同的蛋白质，其还包括具有相对于该序列而言有1个或者2个以上的氨基酸(典型地，1个或者数个，例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或者10个氨基酸)不同的序列、并且具有与GST-π及MRPL17同等功能的蛋白质。
另外，GST-π及MRPL17也包括：与上述具体碱基序列具有70％以上、80％以上、90％以上、95％以上或者97％以上的一致性的碱基序列所形成的、编码具有与GST-π及MRPL17同等功能的蛋白质的碱基序列。需要说明的是，GST-π及MRPL17的具体功能如前文所述。
需要说明的是，若无特别指明，本说明书中，“在本说明书中使用时”、“在本说明书中使用的”、“本说明书中”、“本说明书中记载的”等表述表示其后的记载适用于本说明书所记载的所有技术方案。另外，若无另行定义，则在本说明书中使用的所有技术用语及科学用语具有与本领域技术人员的通常理解相同的含义。在本说明书中用以参考的所有专利、公开文本及其他出版物均整体援引于本说明书中。
在本说明书中使用的“抑制GST-π的药物”包括但不限于：例如，抑制GST-π的产生及/或活性的药物、促进GST-π的分解及/或失活的药物等。作为抑制GST-π的产生的药物，包括但不限于：例如，针对编码GST-π的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体等。
另外，作为抑制GST-π的药物，可使用对于GST-π发挥作用的任何化合物。作为这样的化合物，可使用有机化合物(氨基酸、多肽或其衍生物、低分子化合物、糖、高分子化合物等)、无机化合物等。另外，这样的化合物可以是天然物质及非天然物质中的任一者。作为多肽的衍生物，可举出通过添加修饰基团得到的修饰多肽、通过改变氨基酸残基得到的变体多肽等。此外，这样的化合物可以是单一化合物，也可以是化合物文库、基因文库的表达产物、细胞提取物、细胞培养上清液、发酵微生物的产物、海洋生物提取物、植物提取物等。即，“抑制GST-π的药物”不被限定为RNAi分子等核酸，任何化合物都可被包括在内。
具体而言，作为抑制GST-π的活性的药物，包括但不限于：例如，结合GST-π的物质，例如谷胱甘肽、谷胱甘肽类似物(例如WO 95/08563、WO 96/40205、WO 99/54346、非专利文献4等中所记载的物质)、酮洛芬(非专利文献2)、吲哚美辛(Hall等人，Cancer Res.1989；49(22):6265-8)、利尿酸、Piloprost(Tew等人，Cancer Res.1988；48(13):3622-5)、抗GST-π抗体、GST-π的显性负性突变体等。这些药物或者已有市售，或者可基于已知技术采用合适的手段来制造。
作为抑制GST-π的产生或者活性的药物，从特异性高、副作用的可能性低的角度出发，针对编码GST-π的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体是优选的。
GST-π的抑制可通过细胞中GST-π的表达、活性与不使GST-π抑制剂发挥作用的情况相比被抑制来确定。GST-π的表达可通过已知的任意方法(例如但不限于：利用抗GST-π抗体的免疫沉降法、EIA、ELISA、IRA、IRMA、Western印迹法、免疫组织化学法、免疫细胞化学法、流式细胞术，利用与编码GST-π的核酸或其独特片段或该核酸的转录产物(例如mRNA)或剪接产物特异性杂交的核酸的各种杂交法、Northern印迹法、Southern印迹法、各种PCR法等)来评价。
此外，关于GST-π的活性，GST-π的已知活性(例如但不限于与Raf-1(特别是磷酸化Raf-1)、EGFR(特别是磷酸化EGFR)等蛋白质的结合活性等)可通过已知的任意方法(例如免疫沉降法、Western印迹法、质量分析法、Pull-down法、表面等离子共振(SPR)法等)进行分析来评价。
在本说明书中使用的“抑制MRPL17的药物”包括但不限于：例如，抑制MRPL17的产生及/或活性的药物、促进MRPL17的分解及/或失活的药物等。作为抑制MRPL17的产生的药物，包括但不限于：例如，针对编码MRPL17的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体等。此外，作为抑制MRPL17的活性的药物、促进MRPL17的分解及/或失活的药物，可使用对MRPL17发挥作用的任何化合物。作为这样的化合物，可使用有机化合物(氨基酸、多肽或其衍生物、低分子化合物、糖、高分子化合物等)、无机化合物等。另外，这样的化合物可以是天然物质及非天然物质中的任一者。作为多肽的衍生物，可举出通过添加修饰基团而得到的修饰多肽、通过改变氨基酸残基而得到的变体多肽等。进一步地，这样的化合物可为单一化合物，也可为化合物文库、基因文库的表达产物、细胞提取物、细胞培养上清液、发酵微生物的产物、海洋生物提取物、植物提取物等。即，“抑制MRPL17的药物”不被限定为RNAi分子等核酸，任何化合物都可被包括在内。
更具体而言，作为抑制MRPL17的活性的药物，包括但不限于：例如，针对编码MRPL17的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸、及表达它们的载体、抗MRPL17抗体、MRPL17的显性负性突变体等。这些药物或者已有市售，或者可基于已知技术通过合适的方式来制造。
特别地，作为抑制MRPL17的产生或活性的药物，从特异性高、副作用的可能性低的角度出发，针对编码MRPL17的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体是优选的。
MRPL17的抑制可通过细胞中MRPL17的表达、活性与不使MRPL17抑制剂发挥作用的情况相比被抑制来确定。MRPL17的表达可通过已知的任意方法(例如但不限于：利用抗体的免疫沉降法、EIA、ELISA、IRA、IRMA、Western印迹法、免疫组织化学法、免疫细胞化学法、利用编码该蛋白质的核酸或其特有的片段或者所述核酸的转录产物(例如mRNA)或对拼接产物特异性杂交的核酸进行的各种杂交法、Northern印迹法、Southern印迹法、各种PCR法等)来评价。
另外，关于MRPL17的活性，MRPL17的已知活性(例如但不限于与构成线粒体的核糖体的28S小亚基之间的结合活性等)可通过已知的任意方法(例如免疫沉降法、Western印迹法、质量分析法、Pull-down法、表面等离子共振(SPR)法等)进行分析来评价。
此外，“抑制GST-π及MRPL17的药物”包括但不限于：例如，同时抑制GST-π的产生及/或活性以及MRPL17的产生及/或活性的药物、同时促进GST-π的分解及/或失活以及MRPL17的分解及/或失活的药物等。作为抑制GST-π和MRPL17的产生的药物，包括但不限于：例如，针对编码GST-π的DNA及编码MRPL17的DNA的RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体等。此外，作为抑制GST-π及MRPL17的活性的药物、促进GST-π及MRPL17的分解及/或失活的药物，可使用对GST-π及MRPL17发挥作用的任何化合物。作为这样的化合物，可使用有机化合物(氨基酸、多肽或其衍生物、低分子化合物、糖、高分子化合物等)、无机化合物等。另外，这样的化合物可以是天然物质及非天然物质中的任一者。作为多肽的衍生物，可举出通过附加修饰基团而得到的修饰多肽、通过改变氨基酸残基而得到的变体多肽等。此外，这样的化合物可为单一化合物，也可为化合物文库、基因文库的表达产物、细胞提取物、细胞培养上清液、发酵微生物的产物、海洋生物提取物、植物提取物等。即，“抑制GST-π及MRPL17的药物”不被限定为RNAi分子等核酸，任何化合物都可被包括在内。
在本说明书中使用的情况下，RNAi分子指引起RNA干扰的任意分子，其包括但不限于siRNA(小干扰RNA)、miRNA(微RNA)、shRNA(短发夹RNA)、ddRNA(DNA介导的RNA)、piRNA(Piwi相互作用RNA)、rasiRNA(重复相关siRNA)等双链RNA及其变体。这些RNAi分子或者已有市售，或者可基于已知的序列信息(即，序列号1至4所示碱基序列及/或氨基酸序列)来设计、制作。
此外，在本说明书中使用的情况下，反义核酸包括RNA、DNA、PNA或它们的复合物。
在本说明书中使用的情况下，DNA/RNA嵌合多核苷酸包括但不限于：例如，日本特开2003-219893中记载的抑制目标基因表达的由DNA和RNA构成的双链多核苷酸。
抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物可以包含在单一制剂中，也可以以分开的形式包含于2种以上的制剂中。在后者的情况下，各制剂可同时给予，也可以隔开时间间隔给予。隔开时间间隔而给予的情况下，包含抑制GST-π的药物的制剂可以在包含抑制MRPL17的药物的制剂之前给予，也可以在其之后给予。
此外，当MRPL17与GST-π同时被抑制时，将对癌细胞显示出协同致死性。由此，抑制MRPL17的药物成为增强因抑制GST-π的药物所引起的细胞死亡诱导及/或细胞增殖抑制的药剂或者组合物(以下也称为“细胞死亡诱导增强剂”、“细胞增殖抑制增强剂”、“细胞死亡诱导增强用组合物”或者“细胞增殖抑制增强用组合物”)的有效成分。换言之，通过给予有效量的抑制MRPL17的药物，能够增强通过给予抑制GST-π的药物实现的对细胞死亡的诱导及/或细胞增殖的抑制。
在此，协同致死性(称为synthetic lethality)表示下述现象：尽管单独基因缺损时不显示对细胞、个体的致死性或致死性低，但多个基因的缺损共同存在时将发挥出致死性或致死性显著提高。特别地，在本说明书中，协同致死性表示针对癌细胞的致死性。
本发明的药剂或者组合物中的有效成分的调配量可以是在给予药剂或者组合物时能够诱导出细胞凋亡等细胞死亡及/或抑制细胞增殖的量。此外，优选为不会产生超出由给予带来的利益的不良影响的量。所述量或者是已知的，或者可通过利用培养细胞等进行的体外试验、或在小鼠、大鼠、犬或猪等模型动物中进行的试验来适当地确定，这类试验方法是本领域技术人员所熟知的。对细胞凋亡的诱导可使用各种已知方法(例如，对DNA片段化、膜联蛋白V向细胞膜的结合、线粒体膜电位的变化、半胱天冬酶(caspase)活化等细胞凋亡特有的现象进行检测；TUNEL染色等)来评价。此外，对细胞增殖的抑制可通过各种已知方法(例如经时活细胞数计数、对肿瘤大小、体积或者重量的测定、DNA合成量测定、WST-1法、BrdU(溴脱氧尿苷)法、3H胸苷摄入法等)来评价。活性成分的配合量可根据药剂、组合物的给药形式而改变。例如在一次给予中使用若干个单位组合物的情况下，每一单位组合物中配合的有效成分的量可设定为一次给予所需有效成分量的若干分之一。对所述配合量的调整是本领域技术人员能够适当进行的。
此外，通过将抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分配合起来，可制造细胞死亡诱导剂、细胞增殖抑制剂、细胞死亡诱导组合物或者细胞增殖抑制组合物。
进一步地，可提供抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物的组合，所述组合用于诱导细胞死亡或者抑制细胞增殖。进一步地，可提供细胞死亡的诱导方法或者细胞增殖的抑制方法，所述方法包括给予有效量的抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物。
需要说明的是，上文所述的对细胞凋亡等细胞死亡的诱导或者对细胞增殖的抑制的方法均既可为体外方法，也可为体内方法。此外，关于所述方法中的药物，如上文所述的，药物的有效量可以是在所给予的细胞中诱导细胞死亡、或者抑制细胞增殖的量。另外，优选为不会产生超出由给予带来的利益的不良影响的量。所述量或者是已知的，或者可通过利用培养细胞等进行的体外试验等来适当地确定，这类试验方法是本领域技术人员所熟知的。对细胞死亡的诱导或者对细胞增殖的抑制可使用包括上文所述方法在内的各种已知方法评价。上文所述的有效量并不必须是在将药物给予至规定的癌细胞群时能导致该细胞群的所有细胞均死亡或者所有细胞增殖均被抑制的量。例如，上文所述的有效量可以是对所述细胞群中的细胞的1％以上、2％以上、3％以上、4％以上、5％以上、6％以上、8％以上、10％以上、12％以上、15％以上、20％以上、进一步地25％以上等导致凋亡或者增殖抑制的量。
本发明的细胞死亡诱导剂或者细胞增殖抑制剂能够对癌细胞中有效诱导细胞死亡或者抑制细胞增殖，因此作为针对起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物的成分是有效的。此外，通过将抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物作为有效成分配合起来，可制造针对起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物。此外，能够对起因于细胞增殖异常的疾病进行处理·治疗，其中包括将有效量的制得的医药组合物给予至对其有需要的对象。
所述医药组合物对于对起因于细胞增殖异常的疾病的处理、特别是对于因表达突变型KRAS而在细胞死亡或者细胞增殖方面出现异常的疾病的处理是有效的。
作为起因于表达突变型KRAS的细胞的疾病，包括但不限于例如良性或者恶性肿瘤(也称为癌、恶性新生物)、增生症、瘢痕瘤、库欣综合症、原发性醛固酮增多症、红斑症、真性红细胞增多症、白斑症、增生性瘢痕、扁平苔癣及黑子病等。
作为本发明中的癌，例如可举出：癌、高水平表达GST-π的癌、起因于表达突变型KRAS的细胞的癌(有时也简称为KRAS癌)等，KRAS癌在很多情况也被涵盖在高水平表达GST-π的癌中。作为所述癌，包括但不限于：例如，纤维肉瘤、恶性纤维性组织细胞瘤、脂肪肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、淋巴管肉瘤、滑膜肉瘤、软骨肉瘤、骨肉瘤等肉瘤；脑肿瘤、头颈癌、乳腺癌、肺癌、食道癌、胃癌、十二指肠癌、阑尾癌、大肠癌、直肠癌、肝癌、胰腺癌、胆囊癌、胆管癌、肛门癌、肾癌、尿道癌、膀胱癌、前列腺癌、阴茎癌、睾丸癌、子宫癌、卵巢癌、外阴癌、阴道癌、皮肤癌等癌瘤；以及还可举出白血病、恶性淋巴瘤等。需要说明的是，本发明中，“癌”包括上皮性恶性肿瘤及非上皮性恶性肿瘤。本发明中的癌可存在于身体的任意部位，例如脑、头颈部、胸部、四肢、肺、心脏、胸腺、食道、胃、小肠(十二指肠、空肠、回肠)、大肠(结肠、盲肠、阑尾、直肠)、肝脏、胰脏、胆囊、肛门、肾、尿道、膀胱、前列腺、阴茎、睾丸、子宫、卵巢、外阴、阴道、皮肤、横纹肌、平滑肌、滑膜、软骨、骨、甲状腺、肾上腺、腹膜、肠系膜、骨髓、血液、血管系统、淋巴结等淋巴系统、淋巴液等。
作为医药组合物，除了抑制GST-π的药物和抑制MRPL17的药物以外，还可联合使用其他有效成分。此处，联合使用包括例如其他有效成分作为分别的制剂而被给予的情况，和其他有效成分作为与至少一种其他药剂的合剂而被给予的情况等。在作为分别的制剂给予的情况下，含有其他有效成分的制剂可在给予其他制剂之前、给予其他制剂同时、或者给予其他制剂之后给予。
作为所述其他有效成分，可举出对于对象疾病的处理而言有效的成分。例如要处理的疾病为癌的情况下，可联合使用抗癌剂。作为抗癌剂的例子，例如可举出异环磷酰胺、盐酸尼莫司汀、环磷酰胺、达卡巴嗪、美法仑、雷莫司汀等烷基化剂；盐酸吉西他滨、依诺他滨、阿糖胞苷十八烷基磷酸钠、阿糖胞苷制剂、替加氟-尿嘧啶、替加氟-吉莫斯特-奥替拉西钾调配剂(例如TS-1)、去氧氟尿苷、羟基脲、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、巯基嘌呤等代谢拮抗剂；盐酸伊达比星、盐酸表柔比星、盐酸柔红霉素、柠檬酸柔红霉素、盐酸多柔比星、盐酸吡柔比星、盐酸博来霉素、硫酸培洛霉素、盐酸米托蒽醌、丝裂霉素C等抗肿瘤抗生素、依托泊苷、盐酸伊立替康、酒石酸长春瑞滨、多西他赛水合物、紫杉醇、硫酸长春新碱、硫酸长春地辛、硫酸长春碱等生物碱；阿那曲唑、柠檬酸他莫昔芬、柠檬酸托瑞米芬、比卡鲁胺、氟他胺、雌莫司汀磷酸盐等激素治疗剂；卡铂、顺铂(CDDP)、奈达铂等铂配位体；沙利度胺、新伐司他、贝伐珠单抗等血管生成抑制剂；L-天冬酰胺酶等。
本说明书中记载的本发明的各种药剂、组合物、处理方法等中的活性成分为核酸、例如为RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸等的情况下，上述这些可以作为裸核酸直接使用，也可以担载于各种载体上。作为载体，可使用例如质粒载体、噬菌体载体、噬粒(phagemid)载体、粘粒(cosmid)载体、病毒载体等已知的任意载体。优选地，载体至少还包含能够增强所担载的核酸的表达的启动子，在此情况下，优选地，该核酸与该启动子可操作地连接。“核酸与启动子可操作地连接”表示该核酸和启动子被配置为能够通过启动子的作用而使得该核酸所编码的蛋白质适宜地产生。载体能或不能在宿主细胞内复制均可，此外，基因转录在宿主细胞核外或核内进行也均可。后者的情况下，核酸可掺入进宿主细胞的基因组中。
另外，也可将有效成分担载于各种非病毒性脂质或者蛋白质担载体上。作为所述担载体，包括但不限于：例如，胆固醇、脂质体、抗体原体、环糊精纳米粒子、融合多肽、适体、生物降解性聚乳酸共聚物、聚合物等，其可提高并入至细胞内的效率(例如参见Pirollo和Chang，Cancer Res.2008；68(5):1247-50等)。特别地，阳离子性脂质体、聚合物(例如聚亚乙基亚胺等)是有用的。作为可用作所述担载体的聚合物的其他例子，例如可举出US 2008/0207553、US 2008/0312174等中记载的物质等。
本说明书中记载的本发明的各种医药组合物中，只要不妨碍活性成分的效果，则活性成分可以与其他任意成分组合。作为所述任意成分，例如可举出其他化学治疗剂、药理学上允许的担载体、赋形剂、稀释剂等。另外，根据给予途径、药物释放形式等，可用适当的材料(例如肠溶性包衣、时限崩解性材料)对上述组合物进行包覆，另外，可将上述组合物置于适当的药物释放系统中。
本说明书中记载的本发明的各种药剂及组合物(包括各种医药组合物)可采用包括经口及非经口两者在内的各种途径给予，例如但不限于通过经口、静脉内、肌内、皮下、局部、肿瘤内、直肠、动脉内、门静脉内、心室内、经粘膜、经皮、鼻内、腹腔内、肺内及子宫内等途径给予，也可将其制剂化制成适于各种给予途径的剂型。所述剂型及制剂方法可适当采用任意已知剂型和方法(例如参见《标准药剂学》，渡边喜照等人编，南江堂，2003年等)。
例如作为适于经口给予的剂型，包括但不限于：粉剂、粒剂、片剂、胶囊剂、液剂、混悬剂、乳剂、凝胶剂、糖浆剂等；此外，作为适于非经口给予的剂型，包括但不限于：溶液性注射剂、混悬性注射剂、乳浊性注射剂、即时配制型注射剂等注射剂。非经口给予用制剂可为水性或者非水性的等渗性无菌溶液或者混悬液的形态。
本说明书中记载的本发明的各种药剂或者组合物(包括各种医药组合物)，可经靶向化以靶向特定的组织、细胞。所述靶向可利用已知的任意方法达成。在希望递送至癌的情况下，可使用例如被动靶向(其中，使制剂成为适于表达EPR效果(提高的通透性和滞留效果)的、大小为直径50～200μm、特别是75～150μm等)；主动靶向(其中，使用CD19、HER2、转铁蛋白受体、叶酸受体、VIP受体、EGFR(Torchilin,AAPS J.2007；9(2):E128-47)、RAAG10(日本特表2005-532050)、PIPA(日本特表2006-506071)、KID3(日本特表2007-529197)等配体、含有RGD基序、NGR基序的肽、F3、LyP-1(Ruoslahti等人，J Cell Biol.2010；188(6):759-68)等作为靶向剂)等方法。另外，因为还已知类视黄醇(retinoid)或其衍生物作为对癌细胞的靶向剂是有用的(WO 2008/120815)，因此也可使用包含类视黄醇作为靶向剂的担载体。关于所述担载体，除了上述文献之外，WO 2009/036368、WO 2010/014117、WO 2012/170952等中也有记载。
本说明书中记载的本发明的各种药剂或者组合物(包括各种医药组合物)可以以任意形态供给，但从保存稳定性的观点出发，可以提供可即时配制的形态，例如可在医疗现场或其附近由医师及/或药剂师、护士或其他辅助医务人员等配制的形态。这样的形态在本发明的药剂或者组合物中包含脂质、蛋白质、核酸等难以稳定保存的成分时尤其有用。在此情况下，本发明的药剂或者组合物作为包含它们的必需构成要素中的至少一种的一个或者两个以上容器而提供，在使用前(例如使用前24小时以内、优选使用前3小时以内、更优选为即将使用之前)配制。配制时，可适当地使用在配制场所中通常可获取的试剂、溶剂、配制器具等。
因此，本发明也涉及组合物配制试剂盒以及以这样的试剂盒的形式提供的各种药剂或组合物的必要构成要素，所述组合物包含单独或组合地含有本发明的各种药剂或者组合物中可包含的活性成分的1个或者2个以上容器。本发明的试剂盒中，除上述物质之外，还可包含记载有本发明的各种药剂或者组合物的配制方法、给予方法等的指示，例如说明书、或CD、DVD等电子记录介质等。此外，本发明的试剂盒可包含用于完成本发明的各种药剂或者组合物的全部构成要素，但不必须包含全部构成要素。因此，本发明的试剂盒可不包含在医疗现场、实验设施等处通常可获取的试剂、溶剂(例如无菌水、生理盐水、葡萄糖溶液等)。
本说明书中记载的本发明的各种处理方法中的有效量例如为能够减轻疾病症状或者使得疾病进展延缓或停止的量，优选为能够抑制或者治愈疾病的量。并且，其优选为不产生超出给予所带来的利益的不良影响的量。所述量可根据使用培养细胞等进行的体外试验或在小鼠、大鼠、犬或者猪等模型动物中进行的试验来适当地确定，这类试验方法是本领域技术人员所熟知的。另外，在本发明的处理方法中使用的药物的用量或者是本领域技术人员已知的，或者可通过上述试验等适当地确定。
在本说明书中记载的本发明的处理方法中给予的活性成分的具体用量，可在考虑与需要进行处理的对象相关的各种条件(例如症状的严重度、对象的一般健康状态、年龄、体重、对象的性别、饮食、给予时期及频率、联合给予的药物、对治疗的反应、剂型、及对治疗的依从性等)的基础上来确定。
作为给予途径，包括包含经口及非经口这两者在内的各种途径、例如经口、静脉内、肌内、皮下、局部、肿瘤内、直肠、动脉内、门静脉内、心室内、经粘膜、经皮、鼻内、腹腔内、肺内及子宫内等途径。
关于给予频率，其因所用药剂、组合物的性状及包括上述内容在内的对象条件而不同，其可为例如每日多次(即每日2、3、4次或者5次以上)、每日一次、每数日一次(即每2、3、4、5、6、7日一次等)、每周一次、每数周一次(即每2、3、4周一次等)。
在本说明书中使用的情况下，用语“对象”表示任意的生物个体，优选为动物，进一步优选为哺乳动物，进一步优选为人的个体。本发明中，对象可以是健康的，也可以是患有某种疾病的，但在希望对特定疾病加以处理的情况下，典型地，其表示患有所述疾病或具有所述疾病的罹患风险的对象。
另外，在本说明书中使用的情况下，用语“处理”包括以疾病的治愈、暂时缓解或者预防等为目的的、医学上允许的所有类型的预防性及/或治疗性介入。例如“处理”这一用语涵盖各种目的(包括疾病进展的延缓或停止、病变的缩减或消失、发病的预防或者复发的防止等)的医学上允许的介入。
此外，如前文所述，MRPL17是在与GST-π同时被抑制时会针对癌细胞显示出协同致死性的蛋白质。因此，可以以对MRPL17的抑制为指标，来对与抑制GST-π的药物同时使用的、癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂进行筛选。即，能够抑制MRPL17的物质可成为与抑制GST-π的药物同时使用的、癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的候选物质。
例如，将受试物质与作为癌细胞一例的表达突变型KRAS的细胞接触，对所述细胞中MRPL17的表达量(其与GST-π同时被抑制时将对表达突变型KRAS的细胞显示出协同致死性)加以测定。与不存在受试物质的情况下测定的表达量相比，与受试物质接触时的表达量降低时，则可将所述受试物质选择为上述抑制MRPL17的药物的候选物质。
另一方面，抑制GST-π的药物是在与抑制MRPL17的药剂同时被抑制时将对癌细胞显示出协同致死性的蛋白质。因此，可以以对GST-π的抑制为指标，对与抑制MRPL17的药剂同时使用的、癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂进行筛选。即，能够抑制GST-π的物质可成为与抑制MRPL17的药物同时使用的、癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的候选物质。
例如，将受试物质与作为癌细胞一例的表达突变型KRAS的细胞接触，对所述细胞中GST-π的表达量加以测定。与不存在受试物质的情况下测定的表达量相比，与受试物质接触时的表达量降低时，则可将所述受试物质选择为上述抑制GST-π的药物的候选物质。
同样，可将对于GST-π的抑制及对于MRPL17的抑制同时作为指标，来筛选癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂。即，能够抑制GST-π且能够抑制MRPL17的物质可成为癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的候选物质。
例如，使受试物质与作为癌细胞一例的表达突变型KRAS的细胞接触，对所述细胞中GST-π的表达量及MRPL17的表达量加以测定。与不存在受试物质的情况下测定的表达量相比，与受试物质接触时的各表达量均下降的情况下，则可将所述受试物质选择为上述抑制GST-π且抑制MRPL17的药物的候选物质。
此处，作为受试物质没有任何限定，其可为任何物质。作为受试物质，可以是单独的物质，也可为包含多种构成成分的混合物。作为受试物质，可以是像例如来自微生物或培养液的提取物那样包含未鉴定物质的构成，也可以是以规定组成比包含已知组合物的构成。此外，作为受试物质，可为蛋白质、核酸、脂质、多糖类、有机化合物及无机化合物中的任一者。
实施例
以下，通过实施例更详细地说明本发明，但本发明的技术范围不限于以下实施例。
[实验]通过siRNA进行的对GST-π及MRPL17的敲低
作为癌细胞的实例，将0.5×105个A549细胞(KRAS突变人肺癌细胞)接种于6cm培养皿中，使用添加有10％胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS)和1％的L-谷氨酰胺及1％的L-谷氨酰胺-青霉素链霉素(Sigma公司)的杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM，Sigma公司)培养18小时。关于培养条件，如无特别说明，则均以37℃、5％CO2进行。
本实验中，首先，针对已达到20～30％汇合的A549细胞，使用脂质体(Lipofectamine)RNAiMAX(Life Technologies公司)，按以下操作转染GST-πsiRNA及/或MRPL17siRNA。
按下文所述制得转染用脂质体/siRNA混合溶液。首先，制备将6μL脂质体RNAiMAX与244μL的OPTI-MEM(Sigma公司)混合而成的脂质体溶液。然后，通过以OPTI-MEM将规定量的50μM siRNA定容为250μL，制成siRNA溶液(例如，在制备终浓度为40nM的siRNA溶液的情况下，其为4.4μL的50μM siRNA与245.6μL的OPTI-MEM混合而成的)，将其与上述脂质体溶液混合，于室温静置15分钟。在此期间，从培养A549细胞的6cm培养皿吸走培养基，替换为5mL的Opti-MEM。向其中添加500μL的上述siRNA/脂质体混合溶液。需要说明的是，使用下述siRNA。还需说明，下述记载中，分别地，大写字母表示RNA，小写字母表示DNA。
GST-πsiRNA：
有义链：
Figure BDA0001906290440000211
(序列号5)
反义链：
Figure BDA0001906290440000212
(序列号6)
MRPL17siRNA：
有义链：
Figure BDA0001906290440000213
(序列号7)
反义链：
Figure BDA0001906290440000214
(序列号8)
对照siRNA：
有义链：
Figure BDA0001906290440000215
(序列号9)
反义链：
Figure BDA0001906290440000216
(序列号10)
向含有A549细胞的培养皿中添加终浓度分别为1.25、2.5、5、10、20或40nM的GST-πsiRNA及MRPL17siRNA，终浓度为1.25、2.5、5、10、20或40nM的GST-πsiRNA或MRPL17siRNA(均以1.25、2.5、5、10、20或者40nM的终浓度添加对照siRNA)，以37℃、5％CO2的条件培养5小时。作为对照，使用以2.5、5、10、20、40或者80nM的终浓度添加对照siRNA的情况。5小时后，吸取培养皿的Opti-MEM，加入添加有10％胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS)、1％的L-谷氨酰胺及1％的L-谷氨酰胺-青霉素链霉素(Sigma公司)的杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM，Sigma公司)。3日后，吸取培养皿中的培养基，用PBS洗净细胞表面后，利用胰蛋白酶将附着于培养皿的细胞剥离，用DMEM制备细胞混悬液。将该细胞混悬液滴加至C-CHIP(Digital Bio公司)上，利用显微镜图像对总细胞数进行计数。
结果示于图1。如图1所示，在总siRNA浓度为40nM以下的条件下，在联合使用GST-πsiRNA和MRPL17siRNA的情况下，与各自单独使用的情况相比，更强地抑制了A549细胞的增殖。即，由图1所示结果可知，与抑制GST-π的药剂和抑制MRPL17的药剂各自单独对癌细胞发挥作用时的细胞增殖抑制效果相比，通过使抑制GST-π的药剂与抑制MRPL17的药剂共同作用于癌细胞能够非常强效地抑制细胞增殖。
本说明书中引用的所有出版物、专利及专利申请均作为参考原样并入本说明书中。
Figure IDA0001906290500000011
Figure IDA0001906290500000021
Figure IDA0001906290500000031
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Figure IDA0001906290500000061
Figure IDA0001906290500000071
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Figure IDA0001906290500000091
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Claims (10)

1.一种药剂，其为表达突变型KRAS的肺癌细胞的细胞死亡诱导剂，其含有抑制GST-π的产生的药物和抑制MRPL17的产生的药物作为有效成分，
所述抑制GST-π的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质，
所述抑制MRPL17的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质。
2.一种药剂，其为表达突变型KRAS的肺癌细胞的细胞增殖抑制剂，其含有抑制GST-π的产生的药物和抑制MRPL17的产生的药物作为有效成分，
所述抑制GST-π的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质，
所述抑制MRPL17的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质。
3.如权利要求1所述的药剂，其特征在于，其诱导细胞凋亡。
4.如权利要求1或2所述的药剂，其特征在于，所述肺癌细胞为高水平表达GST-π的肺癌细胞。
5.用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物，所述医药组合物含有权利要求1至4中任一项所述的药剂，所述疾病为起因于表达突变型KRAS的细胞的肺癌。
6.抑制GST-π的产生的药物与抑制MRPL17的产生的药物的组合在用于治疗起因于细胞增殖异常的疾病的医药组合物的制造中的用途，
所述抑制GST-π的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质，
所述抑制MRPL17的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质，
所述疾病为起因于表达突变型KRAS的细胞的肺癌。
7.如权利要求5所述的医药组合物，其特征在于，所述肺癌为高水平表达GST-π的肺癌。
8.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述肺癌为高水平表达GST-π的肺癌。
9.表达突变型KRAS的肺癌细胞的细胞死亡诱导剂及/或细胞增殖抑制剂的筛选方法，所述方法包括：选出抑制GST-π的产生的药物及抑制MRPL17的产生的药物的组合，
所述抑制GST-π的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质，
所述抑制MRPL17的产生的药物为选自由RNAi分子、核糖酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸以及表达它们中的至少1种的载体组成的组的物质。
10.如权利要求9所述的筛选方法，所述方法包括：
将受试物质的组合与表达突变型KRAS的肺癌细胞接触的步骤；
对所述细胞中GST-π的表达量及MRPL17的表达量进行测定的步骤；以及
若与不存在受试物质的组合时进行测定的情况相比GST-π的表达量及MRPL17的表达量同时降低、则将所述受试物质的组合选择为抑制GST-π的产生的药物及抑制MRPL17的产生的药物的组合的步骤。
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